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Avaliação da função erétil após a reconstituição do nervo cavernoso com o uso de células tronco de medula-óssea: estudo experimental em ratos / Cavernous nerve reconstitution with the use of bone marrow stem cells and erectile function evaluation: an animal experimental study

Kaufmann, Oskar Grau 07 November 2008 (has links)
Introdução: Atualmente a prostatectomia radical retropúbica tem sido responsável por grande parte dos casos de disfunção erétil de causa neurogênica. O desenvolvimento de técnicas como a cirurgia com preservação do feixe vásculo-nervoso, eletro-estimulação intra-operatória o uso de enxertos autólogos para se reestabelecer a comunicação dos nervos cavernosos têm minimizado o grau de lesão neuronal. Entretanto, faz-se necessária a criação de novos métodos de restauração do nervo cavernoso. Neste estudo, investigaremos o uso e a aplicação de células tronco adultas de medula óssea de ratos e sua capacidade para regeneração do nervo cavernosos lesado e para restauração da função erétil em ratos. Objetivo: Avaliar a influência de células tronco adultas da medula óssea de ratos na regeneração do nervo cavernosos lesado, tomando-se como parâmetro o retorno da função erétil nos animais submetidos ao teste de ereção induzido pela apomorfina. Material e Método: Quarenta e oito ratos Wistar-EPM machos, com idades entre 9 e 10 semanas, pesando aproximadamente 250 gramas foram usados e randomicamente subdivididos em quatro grupos de estudo contendo 12 animais cada. Os grupos experimentais foram divididos em: Grupo I: exposição cirúrgica bilateral nervo cavernoso sem lesão do mesmo.Grupo II: lesão cirúrgica bilateral do nervo cavernoso de aproximadamente 3 mm, sem reconstrução. Grupo III: lesão cirúrgica bilateral dos nervos cavernosos de aproximadamente 3 mm, e reconstrução bilateral com sondas guias de silicone contendo solução salina em seu interior. Grupo IV: lesão cirúrgica bilateral dos nervos cavernosos de aproximadamente 3 mm, e reconstrução bilateral com sondas guias de silicone semeadas com células-tronco adultas em seu interior. Quatro semanas após a cirurgia, os animais foram injetados com apomorfina para indução da ereção. Resultados: No grupo I observou-se resposta erétil completa em todos os animais (100% - 12 em 12). Por outro lado nenhum dos animais do grupo II apresentou ereções após a admnistração de apomorfina. Cinco dos doze animais do grupo III (41,7%) apresentaram ereções enquanto que nove dos 12 animais do grupo IV (75%) evidenciaram ereções após o estímulo. Quando foram comparadas as frequências de restauro de ereção nos quatro grupos, demonstrou-se que grupo IV teve um comportamento semelhante ao grupo I (p = 0,217), ao passo que os animais do grupo III apresentaram frequência de ereções inferiores aos do grupo I (p = 0,005). Por outro lado, a comparação dos resultados entre os grupo III e IV versus o grupo II, demostrou que a frequência de ereções foi estatisticamente superior nos dois primeiros grupos (p = 0,037 e p < 0,001, respectivamente). Finalmente, o grupo IV apresentou tendência a maior número de ereções quando comparado ao grupo III (75% versus 41,7%) mas essa diferença não foi estatisticamente significante (p = 0,098). Conclusão: O presente estudo demonstra que células tronco adultas da medula óssea, semeadas em sondas guias de silicone, favorecem a regeneração dos nervos cavernosos e promovem o reestabelecimento da função erétil em um modelo animal. / Objective: To assess the influence of adult stem cells from bone marrow of rats in the regeneration of cavernous nerve, taking as a parameter the return of erectile function in animals subjected to the test of erection induced by apomorphine. Methods: Forty-eight WISTAR-EPM male rats, aged between 9 and 10 weeks, weighing approximately 250 grams were used and randomly divided into four groups of study containing 12 animals each. The experimental groups were divided into: Group I: surgical exposure of bilateral cavernous nerves without injury. Grupo II: surgical bilateral lesion of cavernous nerve with approximately 3 mm, without reconstruction. Group III: surgical bilateral lesion of cavernous nerves of approximately 3 mm, and bilateral reconstruction with silicone tube containing saline solution inside. Group IV: surgical bilateral lesion of cavernous nerves of approximately 3 mm, and bilateral reconstruction with silicone tube containing adult stem-cells inside. Four weeks after surgery, the animals were injected with apomorphine for induction of erection. Results: In Group I there was complete erectile response in all animals (100% - 12 in 12). On the other hand none of the animals in Group II presented erection after the use of apomorphine. Five of the twelve animals of group III (41.7%) had erections while nine of the 12 animals of Group IV (75%) showed them after the stimulus. When we compared the frequency of restoration of erection in the four groups, it was shown that group IV had similar performance to the group I (p = 0,217), while the animals in Group III had a frequency of erections inferiors to the Group I (P = 0,005). Moreover, comparison of results between the group III and IV versus the group II, showed that the frequency of erections was statistically higher in the first two groups (p = 0,037 p < 0,001, respectively). Finally, the group IV presented trend the largest number of erections when compared to Group III (75% versus 41.7%) but this difference was not statistically significant (p = 0,098). Conclusion : This study shows that adult stem cells from bone marrow, sown in probes silicone guides, promote the regeneration of cavernous nerves and restore erectile function in an animal model.
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Trajetórias escolares na educação de jovens e adultos: Singularidades em contextos plurais

Ferrari, Greicimara Vogt January 2014 (has links)
Submitted by William Justo Figueiro (williamjf) on 2015-07-01T23:52:57Z No. of bitstreams: 1 11.pdf: 1167854 bytes, checksum: 6eb3fe46ea03a255eb38cf7a7fe597d6 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-01T23:52:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 11.pdf: 1167854 bytes, checksum: 6eb3fe46ea03a255eb38cf7a7fe597d6 (MD5) Previous issue date: 2014 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A Educação de Pessoas Jovens e Adultas constitui o foco central deste estudo, que tem como objetivo identificar possíveis relações entre (des)continuidades nas trajetórias escolares de estudantes do Programa Nacional de Integração da Educação Profissional com a Educação Básica na Modalidade de Educação de Jovens e Adultos (PROEJA) e implicações de contexto. O estudo apresenta um mapeamento das Políticas e Programas de Educação de Jovens e Adultos (EJA) a nível nacional e estadual (1988 e 2012); incluindo rupturas nas respectivas Políticas. Identifica principais motivos da (des)continuidade nos estudos de um grupo de estudantes do PROEJA do Instituto Federal de Educação Ciência e Tecnologia do Rio Grande do Sul (IFRS), Câmpus Bento Gonçalves. A História oral foi concebida como aporte metodológico, caracterizando-se através de entrevistas com seis sujeitos, que se disponibilizaram a participar da pesquisa. Entre os teóricos que subsidiaram a análise, destacam-se referenciais de Lahire, Arroyo e Freire. Os dados analisados permitem afirmar que tanto as rupturas quanto as retomadas na escolarização ocorrem especialmente a partir de combinações de fatores, e que estes, mesmo sendo visualizados de forma singular nas biografias, acabam entrelaçando-se em alguns momentos devido a fatores comuns, denominados neste estudo como contextos plurais. É possível citar as questões de sustento financeiro e, por decorrência, as exigências de trabalho como um dos motivos para abandono e/ou retomada de estudos, visualizado em diferentes entrevistas desta pesquisa. / The Young and Adult People Education is the core of this study. It has the objective to identify possible relations between (dis)continuity of the school pathway of the Federal Program for the Integration of Professional Education and the Basic Education in the Youth and Adult Education (PROEJA) and consequential implications. The study presents a map of Youth and Adult Education (EJA) programs and policies at the federal and state levels (1988 and 2012); including the related ruptures. It identifies the main reasons of (dis)continuity by studying a group of students of PROEJA of the Federal Institute of Education, Science and Technology of Rio Grande do Sul (IFRS), Câmpus Bento Gonçalves. The oral history was conceived as a methodological basis by interviewing six people, who accepted to participate in the research. Among the theorists who supported the analysis we featured Lahire, Arroyo and Freire. The analyzed data permit affirming both the ruptures and the return to school specially occur from combined facts that are connected, in some moments, by common events, even they are visualized in a singular way in the biographies. These facts are nominated plural contexts in this study. It was noticed in the different interviews in this research that financial questions and, consequently, job demand are quoted as one of the reasons to leave and/or return to school.
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Caracterização da expressão de DZIP1 e PUM2 em células-tronco mesenquimais humanas durante o processo de diferenciação celular

Shigunov, Patrícia January 2009 (has links)
Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2013-11-19T13:29:29Z No. of bitstreams: 1 patricia_shigunov_ioc_bcm_mest_2009.pdf: 4983647 bytes, checksum: 1ca2b97e14d57fb20e3fd6931bdb6187 (MD5) / Approved for entry into archive by Gentil Jeorgina(jeorgina@icict.fiocruz.br) on 2013-11-26T11:00:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 patricia_shigunov_ioc_bcm_mest_2009.pdf: 4983647 bytes, checksum: 1ca2b97e14d57fb20e3fd6931bdb6187 (MD5) / Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2014-09-26T10:49:49Z No. of bitstreams: 1 patricia_shigunov_ioc_bcm_mest_2009.pdf: 4983647 bytes, checksum: 1ca2b97e14d57fb20e3fd6931bdb6187 (MD5) / Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2016-03-10T13:27:33Z No. of bitstreams: 1 patricia_shigunov_ioc_bcm_mest_2009.pdf: 4983647 bytes, checksum: 1ca2b97e14d57fb20e3fd6931bdb6187 (MD5) / Approved for entry into archive by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2016-07-18T13:01:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 patricia_shigunov_ioc_bcm_mest_2009.pdf: 4983647 bytes, checksum: 1ca2b97e14d57fb20e3fd6931bdb6187 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-18T13:01:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 patricia_shigunov_ioc_bcm_mest_2009.pdf: 4983647 bytes, checksum: 1ca2b97e14d57fb20e3fd6931bdb6187 (MD5) Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / As células-tronco (CTs) têm potencial de se diferenciar em vários tipos celulares servindo como um sistema de reparação de tecidos. Quando uma CT se divide mantém o mesmo potencial da célula que a originou em um mecanismo chamado de autorrenovação. O entendimento desse mecanismo ajudará a compreender a senescência e a perda do potencial de diferenciação das CTs. Em nível de regulação pós-transcricional, as proteínas DZIP1 e PUM2 estão envolvidas na autorrenovação de CT embrionárias e germinativas de diversos organismos, incluindo humanos. Contudo, o trabalho visou o estudo do envolvimento de PUM2 e DZIP1 nos mecanismos de autorrenovação e diferenciação em CTs mesenquimais humanas (CTMs). Por RT-PCR, foi observada a expressão dos transcritos de dzip1 e pum2 em CTMs derivadas de medula óssea (MO), sangue de cordão umbilical e placentário (SCU) e tecido adiposo (TA). A expressão dos transcritos também foram analisada durante a adipogênese das CTMs por qRT-PCR. Os resultados demonstram que o perfil de expressão dos dois transcritos sofre redução durante o processo, enquanto o transcrito de fabp4 (marcador adipogênico) aumenta. Por citometria de fluxo foi verificada a porcentagem de CTMs de TA que expressam DZIP1 (mais de 90% da população) e PUM2 (cerca de 50% da população). A expressão das proteínas PUM2 e DZIP1 foi confirmada por western blot em extratos totais de CTMs. Durante a diferenciação celular, a expressão da proteína DZIP1 se manteve constante enquanto PUM2 sofreu redução após induzida da diferenciação. A discrepância entre os níveis de mRNA e da proteína DZIP1 sugere regulação pós-transcricional. As imunofluorescências de DZIP1 e PUM2 nas CTMs indicaram que essas proteínas são nucleares em células de culturas recém sub-cultivadas e a localização dessas são translocadas para o citoplasma ao longo do tempo da cultura. As células diferenciadas expressam as duas proteínas no citoplasma e/ou núcleo. Análise dos transcritos de dzip1 e pum2 também foi verificada em culturas com proliferação celular intensa e reduzida. Dzip1 não apresentou mudanças significativas de expressão nas duas situações. No entanto, a expressão de pum2 aumentou nas CTMs com proliferação intensa, sugerindo uma possível participação nesse processo. Ensaios futuros serão realizados para confirmar a participação de PUM2 na proliferação celular. Além disso, a interferência de dzip1 e pum2 por RNA será providenciada para análise funcional desses genes. / Stem Cells (SCs) have the potential of differentiating into several cellular types, serving as a repair system for the organism. The ability of stem cells to replicate themselves by dividing into the same non-specialized cell type over long periods is a mechanism knows as self-renewal. The understanding of this mechanism will also help to understand the senescence and hence, the loss of SCs differentiation potential. PUMILIO2 and DZIP1 RNA binding proteins regulate the translation of specific mRNAs during self-renewal and differentiation of germ-line and embryonic stem cells of diverse organisms, including humans. In this work, we aimed to study the relevance of PUM2 and DZIP1 in self-renewal and differentiation of human mesenchymal stem cells (hMSCs). We have found that dzip1 and pum2 transcripts are expressed in hMSCs derived from bone marrow (BM), adipose tissue (AT) and umbilical cord blood (UC) by using RT-PCR analysis. We have found that more than 90% of the MSCs population express DZIP1 and about 50% express PUM2 by flow cytometry. The expression pattern of pum2 and dzip1 transcripts was followed during differentiation of adipose derived MSCs into adipocytes. Quantitative PCR analysis showed that mRNA levels of both genes drop during differentiation, showing an opposite pattern to the fabp4 adipocyte marker. The presence of the PUM2 and DZIP1 proteins was confirmed by western blot of total protein extracts of AT derived hMSCs. During cell differentiation, the expression of the protein DZIP1 was constant while PUM2 decreased. The discrepancy between the levels of the dzip1 mRNA and protein suggests a regulated transcriptional and post-transcriptional expression of these genes. DZIP1 and PUM2 in immunofluorescence assays in hMSCs indicated that they are nuclear in freshly plated cells and translocate to the cytoplasm over time. The differentiated cells present the two proteins in the cytoplasm and nucleus. The expression pattern of the dzip1 and pum2 transcripts was also followed in cultures of MSCs derived from AT undergoing intense and reduced cell proliferation. Dzip1 showed no significant changes of expression in both situations. However, the expression of pum2 is higher in hMSCs with intensive proliferation than with reduced proliferation suggesting a possible participation in this process. To pave the way to a better understanding of DZIP1 and PUM2 function in hMSCs, RNA interference experiment are in progress.
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Hemoderivados como suplemento no meio de cultivo para células-tronco dentárias humanas / Blood derivatives used to supply the culture medium of human dental stem cells

Pisciolaro, Ricardo Luiz [UNIFESP] 27 July 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-07-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Introducao: Um dos objetivos da Medicina e superar os danos causados ao organismo por doencas, senilidade e traumas, restabelecendo um equilibrio normo-funcional. Nas perdas teciduais, inumeros autores afirmam que o substituto gideal h e o proprio tecido saudavel, de mesma origem ou o tecido produzido por Engenharia Tecidual (ET). Porem, ainda sao necessarias muitas pesquisas para a utilizacao in vivo. Objetivo: Avaliar tres suplementos hemoderivados, empregados em meios de cultivo, quanto a proliferacao celular e o dano celular de celulas-tronco de origem dentaria. Metodos: Foram realizados cinco experimentos a partir de dentes terceiros molares em desenvolvimento. Apos a digestao enzimatica, as celulas-tronco adultas foram cultivadas em quatro diferentes meios de cultivo. Meio I, isento de suplemento hemoderivado; meio II, suplementado com FBS (heterologo); meio III, suplementado com soro humano homologo; meio IV, suplementado com soro humano autologo. Essas culturas foram analisadas comparativamente quanto a proliferacao celular, submetidas a testes com marcadores Von Kossa e Alizarina Vermelha durante quatro semanas (avaliadas semanalmente) e a cada duas semanas quanto as unidades formadoras de colonias (UFCs). No 28o dia as quatro culturas foram submetidas ao teste do gcometa h, analisando-se possivel dano no DNA celular. Os resultados foram submetidos a analise estatistica de Variancia de Friedman, estabelecendo-se significancia para (p) . a 5%. Resultados: O meio de cultivo IV atingiu uma proliferacao celular superior ao Meio I, demonstrando um resultado significante (p*=0,0074). O meio de cultivo II, mostrou proliferacao superior ao meio I e desenvolvimento semelhante ao meio III, porem nenhum demonstrou significancia em relacao ao meio IV. Os resultados do teste do cometa evidenciaram um menor dano celular nas culturas do meio IV em relacao ao meio II e meio III. As UFCs foram numerosas nos meios IV e III respectivamente, havendo maior indice de mineralizacao no meio IV do que nos meios II e III. Conclusao: O meio de cultivo suplementado com hemoderivado autologo favoreceu significativamente a proliferacao celular. O hemoderivado humano mostrou-se viavel como suplemento nas culturas de celulas-tronco dentarias humanas. / Introduction: One among many aims of medicine is to overcome injuries inflicted to the organism by diseases, aging and trauma, re-establishing the usual functions. About tissues losses, several authors claim that the ideal replacement is the healthy tissue itself, originated from the same source or developed by Tissue Engineering (TE). However, much research is needed before in vivo application. Objective: To evaluate three different kinds of sera supplies used in stem cell culture media, as to cellular proliferation and cellular injuries on dental stem cell. Methods: Five experiments were made utilizing incompletely developed third molar teeth. After enzymatic digestion, the adult stem cells were cultivated in four different kinds of culture media. Medium I, serum free (SF); medium II, supplied with FBS (heterologous serum- HeS); medium III, supplied with homologous human serum (homologous serum- HoS) and medium IV, supplied with autologous human serum (autologous serum . AuHS).These cultures were analyzed comparatively as to cellular proliferation; they were submitted Von Kossa (VK) and Alizarin Red (AR) markers tests for four weeks (checked weekly), and each two weeks checked for Colonies Forming Unities (CFUs). On the 28th day, all four cultures were submitted to comet assay, and were inspected for possible cellular DNA injuries. The results underwent a non-parametric statistical Friedman fs variance test, with significance (p) . 5%. Results: Culture medium IV reached a cellular proliferation rate higher than medium I, showing a significant result (p*=0,0074). Culture medium II presented a superior proliferation result than medium I, and similar to medium III, although neither of them presented significant result when compared to medium IV. The comet assay fs results showed minor cellular DNA injury in the medium IV cultures, when compared to medium II and III cultures. The CFUs were numerous in the media IV and III cultures, respectively, and there was higher mineralization rate in the medium IV than in the media II and III. Conclusion: The culture medium supplied with AuHS significantly improved cellular proliferation. Human sera proved to be a viable supply to human dental stem cell culture. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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A educação ambiental crítica e o saber de experiência feito na educação de pessoas jovens e adultas : um diálogo para a transformação

Franco, Flávia Fina 24 March 2016 (has links)
Submitted by Luciana Sebin (lusebin@ufscar.br) on 2016-09-26T19:19:59Z No. of bitstreams: 1 DissFFF.pdf: 2290863 bytes, checksum: c88afb05024e5d2a741741f437fc4ebb (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-27T19:59:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissFFF.pdf: 2290863 bytes, checksum: c88afb05024e5d2a741741f437fc4ebb (MD5) / Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-09-27T19:59:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissFFF.pdf: 2290863 bytes, checksum: c88afb05024e5d2a741741f437fc4ebb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-27T19:59:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissFFF.pdf: 2290863 bytes, checksum: c88afb05024e5d2a741741f437fc4ebb (MD5) Previous issue date: 2016-03-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / In this research we seek to investigate a classroom education of young and adult people, in order to know potentialities and obstacles of the articulation proposal between environmental education and this school modality, having as a reference two key concepts: criticity and knowledge of living experience. Studies suggest that the inclusion of socio-environmental theme in education of young and adult people can contribute as much to overcome the compensatory and reductionist view that has marked this modality and for encourage questions and reflections of these people about their roles in the interpersonal relationships, with the world and in the world, to recognize and assume their potential to act in reality. We adopted as reference a critical, dialogic, liberating environmental education, driving of reflections by questioning socio-environmental issues. We opted for education of young and adult people for being a school modality, as well as their subject, has been historically marginalized, marked by unjust and oppressive relations and because we also believe in the potential of these individuals recognizing their experience and their knowledge, knowledge accumulated during their lives, which Freire called knowledge of living experience. So the questions that guide this research are: the knowledge of living experience that has been considered and developed also in the modality of education for young and adult people can contribute to the practice of environmental education? The criticity which has been developed in the field of environmental education can contribute to the practice of education for young and adult people in the school context? For the construction of this study, we conducted an empirical work. The empirical investigation was conducted in a public school in São Paulo State, in which were involved students of education of young and adult people and teachers of this modality with experience in the field of environmental education. Paulo Freire (2005), with the dialogue theory, and Jürgen Habermas (2012a; 2012b), with the theory of communicative action, were authors who guided us to the choice of the critical communicative methodology, which is based on the construction of knowledge through the establishment of inter-subjective dialogue between subjects and from that construction make it possible act in reality, transformed it. Using this methodology, the dialogue breaks with the interpretative and epistemological gaps usually considered and developed among the people of the investigated context and academic people. We use the communicative observation and interview as data collection instruments. In partnership with the students, the data of the observation were analyzed considering the exclusionary and transformative dimensions, its own methodology, in relation to approach between environmental education and education of young and adult people. The informations obtained through interviews were discussed together with teachers, on the dual categorization of social reality in system and world of life, based on Habermas. With the data already analyzed, we found in the context investigated elements like educational practices and attitudes teachers consistent with the reality of students that enhance the inclusion of environmental issues in a critical perspective on the education of young and adult people. On the other hand, were also identified elements such practices and teaching attitudes associated with a model of youth and adult compensatory people education, which hinders said insert, which is necessary for an education committed a social transformation that leads to relationships socially fairer and more environmentally sustainable relations. Finally, we verified the adequacy of a critical environmental education of young and adult people as a potent space of learning and transformations, a space for them to exercise their critical faculties towards their emancipation and thus recognize as historical subjects participants of social-environmental changes. / Nesta pesquisa buscamos investigar uma sala de aula da educação de pessoas jovens e adultas, objetivando conhecer possibilidades da proposta de articulação entre a educação ambiental e essa modalidade de ensino, tendo como referência dois conceitos chaves: criticidade e saber de experiência feito. Estudos sugerem que a inserção da temática socioambiental na educação de pessoas jovens e adultas pode contribuir tanto para a superação da visão compensatória e reducionista que tem marcado essa modalidade quanto para fomentar questionamentos e reflexões dessas pessoas sobre seus papéis nas relações interpessoais, com o mundo e no mundo, para que reconheçam e assumam seus potenciais de intervir na realidade. Adotamos como referência uma educação ambiental crítica, dialógica, libertadora e impulsionadora de reflexões por meio da problematização de questões socioambientais. Optamos pela educação de pessoas jovens e adultas por ser uma modalidade escolar que, assim como seus sujeitos, tem sido historicamente marginalizada e marcada por relações injustas e opressoras e por acreditamos nas potencialidades desses sujeitos, reconhecendo suas experiências e seus saberes acumulados ao longo de suas vidas, que Freire chamou de saberes de experiência feitos. Assim, as questões que guiam essa pesquisa são: o saber de experiência feito que tem sido considerado e desenvolvido também na modalidade da educação de pessoas jovens e adultas pode contribuir para a prática de educação ambiental? A criticidade que tem sido desenvolvida no campo da educação ambiental pode contribuir para a prática da educação de pessoas jovens e adultas no contexto escolar? Para a construção deste trabalho desenvolvemos uma investigação empírica, que foi realizada em uma escola municipal do interior paulista, em que foram envolvidas/os estudantes da educação de pessoas jovens e adultas e educadoras/es dessa modalidade e com experiência no campo da educação ambiental. Paulo Freire (2005), com a teoria da dialogicidade, e Jürgen Habermas (2012a; 2012b), com a teoria da ação comunicativa, foram autores que nos guiaram para a escolha da metodologia comunicativo-crítica, que tem como fundamento a construção de conhecimento a partir do estabelecimento de diálogos intersubjetivos entre os sujeitos e, a partir dessa construção possibilitar que atuem na realidade, transformado-a. Com essa metodologia, o diálogo rompe com os desníveis interpretativo e epistemológico normalmente considerados e praticados entre as pessoas do contexto investigado e as pessoas acadêmicas. Utilizamos a observação comunicativa e a entrevista como instrumentos de coleta de dados. Em parceria com as/os estudantes e seu professor, os dados das observações foram analisados considerando as dimensões obstaculizadora e transformadora, próprias da metodologia, em relação à aproximação entre educação ambiental e educação de pessoas jovens e adultas. Já as informações obtidas por meio das entrevistas foram discutidas em conjunto com uma professora e um professor, diante da categorização dual da realidade social em sistema e mundo da vida, com base em Habermas. Com os dados analisados, encontramos no contexto investigado elementos como práticas educativas e posturas docentes coerentes com a realidade das/os estudantes, que potencializam a inserção da temática ambiental sob uma perspectiva crítica na educação de pessoas jovens e adultas. Por outro lado, foram também identificados elementos como práticas e posturas docentes associadas a um modelo de educação de pessoas jovens e adultas compensatório, o que dificulta a referida inserção, que se faz necessária para uma educação comprometida com uma transformação social que conduza a relações socialmente mais justas e ambientalmente mais sustentáveis. Por fim, verificamos a adequação de uma educação ambiental crítica de pessoas jovens e adultas como um espaço potente de aprendizagens e transformações, um espaço para que possam exercitar a capacidade crítica em direção à sua emancipação e assim se reconhecerem como sujeitos históricos participantes das mudanças socioambientais.
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Expressão da resistência à múltiplas drogas em células-tronco mesenquimais do cordão umbilical humano / Multidrug Resistance Expression in Mesenchymal Stem Cells from Human Umbilical Cord

Ana Carolina Bazan de Carvalho 27 September 2013 (has links)
INTRODUÇÃO: As células-tronco mesenquimais (CTM) são células adultas multipotentes capazes de se diferenciarem em várias linhagens celulares. Estudos com CTM derivadas do cordão umbilical humano (CUh), mais especificamente da Geleia de Wharton (GW), tem demonstrado um grande potencial para a terapia de reposição celular e regeneração tecidual. O papel dos genes de resistência a múltiplas (MDR) drogas, tais como ABCB1 e LRP é bem conhecido nos processos de regulação, fisiologia e defesa. Entretanto, nenhum estudo demonstrou ainda a presença desses genes nas CTM da GW do CUh. Assim, o objetivo do presente estudo foi analisar a expressão de Pg-p e LRP em CTM derivadas da GW. MATERIAIS E MÉTODOS: CTMs da GW isoladas de CUh (n = 20) foram caracterizadas quanto ao seu estado indiferenciado por: citometria de fluxo; expressão de genes Oct-4 e Nanog por RT-PCR e capacidade de diferenciação adipogênica e osteogênica in vitro. Foi analisado ainda a expressão dos genes ABCB1 e LRP por RT-PCR em tempo real de células indiferenciadas. A resistência a doxorrubicina (DOX) foi determinada através do ensaio de MTT nessas mesmas amostras. RESULTADOS: As CTM da GW do CUh apresentaram positividade para marcadores de superfície presentes nas CTM, tais como, CD29, CD44, CD90 e CD105. Os genes de indiferenciação celular Oct-4 e Nanog foram expressos em todas as amostras, que também foram capazes de se diferenciar em adipócitos e osteócitos, comprovando assim que essas células são CTM. Com relação à Pg-p, o gene ABCB1 não amplificou em 18 amostras sendo que somente 2 apresentaram baixa expressão gênica. O gene LRP amplificou de forma intensa em todas as amostras analisadas. CONCLUSÃO: Concluímos que as CTM derivadas da GW do CUh apresentam um elevado nível de expressão de LRP, sugerindo que este gene pode estar envolvido no processo de regulação das células-tronco mesenquimais, bem como na fisiologia e defesa celular / INTRODUCTION: Mesenchymal stem cells (MSCs) are multipotent adult cells that can differentiate into various cell lineages. Studies with MSC derived from human umbilical cord (hUC), more specifically from Wharton jelly (WJ), have shown great potential for cellular replacement therapy and tissue regeneration. The role of multidrug resistance genes, such as ABCB1 and LRP is well known in the regulation, physiology and cellular defense. However, the presence of these genes in the MSC of the WJ from hUC was not demonstrated yet. The aim of this study was to analyze the expression of Pg-p and LRP in MSCs derived from WJ. MATERIALS AND METHODS: The MSC from WJ were isolated from hUC (n = 20) and were characterized by: flow cytometry; Oct-4 and Nanog gene expression by RT-PCR and adipogenic and osteogenic in vitro differentiation capability of these cells. It was also analyzed gene expression of ABCB1 and LRP by real time RT-PCR of undifferentiated cells. Doxorubicin (DOX) resistance was determined by MTT assay in all the samples. RESULTS: MSC WJ from hUC was positive for MSC surface markers, such as CD29, CD44, CD90 and CD105. The undifferentiated cell genes Oct-4 and Nanog were expressed in all samples, which were also capable to differentiate into adipocytes and osteocytes, proving that these cells are MSC. Concerning to Pgp, the ABCB1 gene, 18 samples didn\'t show any amplification product (no expression) while 2 showed little gene expression. The LRP gene amplified intensely in all samples. CONCLUSION: We conclude that MSC derived from the WJ hUC have a high level of LRP expression, suggesting that this gene may be involved in the regulation of mesenchymal stem cells as well as in physiology and cellular defense
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Tempo coleta/processamento e qualidade da amostra de sangue de cordão umbilical / Time collecting/processing and umbilical cord blood sample quality

Ferraz, Ubirajara Costa 13 August 2018 (has links)
Orientador: Ricardo Barini / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-13T01:59:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferraz_UbirajaraCosta_M.pdf: 1594344 bytes, checksum: e8aa86e55cf5506e54d472671ae37ff1 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Objetivo: Avaliar a associação do intervalo de tempo entre coleta e processamento do sangue de cordão umbilical e a qualidade da amostra. Sujeitos e métodos: As amostras de sangue de cordão umbilical, colhidas no terceiro período do parto, foram acondicionadas em caixas homologadas para transporte de material biológico, com monitoração da temperatura, e enviadas ao Banco de Sangue de Cordão Umbilical, onde foram submetidas à contagem do número de células nucleadas, do número de células viáveis, do número de células CD 34+ e pesquisa de contaminação, nos intervalos de tempo de até 24, até 48 e até 72 horas. Os dados foram analisados pelo teste de variância para medidas repetidas MANOVA e comparados através do teste qui-quadrado de McNemar, considerando-se o nível de significância de 5%. Resultados: As médias e as medianas do número de células nucleadas, número de células viáveis e número de células CD34+ tiveram quedas significativas (P <0,0001) com o aumento do intervalo de tempo coleta/processamento, sendo entre 24 e 48 horas menor do que a comparação entre 24 e 72 horas. Constatada correlação linear entre as médias de células viáveis e células CD34+ nos três momentos da análise. A pesquisa de contaminação foi negativa em todas as amostras. Conclusões: O aumento do intervalo de tempo coleta/processamento influenciou negativamente na contagem de células nucleadas, células viáveis e CD34+ e não esteve associado à contaminação das amostras. Foi constatada correlação linear entre a queda do número de células viáveis e de células CD34+ / Abstract: Objective: To evaluate the association between the time interval from umbilical cord blood sampling until analysis and the quality of the sample. Materials and methods: Umbilical cord blood samples collected during the third stage of labor were placed in temperature-controlled boxes for the transport of biological material and sent to an umbilical cord blood bank, where the number of nucleated cells, the number of viable cells and the number of CD34+ cells were counted, and samples were additionally tested for contamination, at the following time intervals: up to 24 hours, up to 48 hours and up to 72 hours following sampling. The data were analyzed using the multivariate analysis of variance (MANOVA) and compared using McNemar's chi-square test. Significance was defined at p<0.05. Results: Means and medians of the number of nucleated cells, number of viable cells and number of CD34+ cells decreased significantly (p<0.0001) as a function of the increased time between sampling and analysis, the difference between 24 and 48 hours being less than the difference between 24 and 72 hours. A linear correlation was found between the mean number of viable cells and CD34+ cells at the three moments of analysis. Contamination testing was negative in all samples. Conclusions: The increase in the interval of time from sampling until analysis negatively affected the number of nucleated cells, viable cells and CD34+ cells but was not associated with specimen contamination. A linear correlation was found between the decrease in the number of viable cells and CD34+ cells / Mestrado / Tocoginecologia / Mestre em Tocoginecologia
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“Habeas corpus”: desafios, perspectivas e outras faces da educação e da prática docente no sistema prisional / “habeas corpus”: desafíos, perspectivas y otros lados de la educación y de la práctica docente en el sistema penitenciario

Bózio, Jéssyca Finantes do Carmo 20 February 2017 (has links)
Submitted by Rosangela Silva (rosangela.silva3@unioeste.br) on 2018-03-01T15:05:23Z No. of bitstreams: 2 Jéssyca Finantes do Carmo Bozio.pdf: 1823914 bytes, checksum: 97b4ef614448f6c2f99a78515c1fd7ed (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-01T15:05:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Jéssyca Finantes do Carmo Bozio.pdf: 1823914 bytes, checksum: 97b4ef614448f6c2f99a78515c1fd7ed (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Esta pesquisa investiga algunos procesos de educación en las prisiones y del trabajo docente en el sistema penitenciario, tomando como parámetro los estudios llevados a cabo en la Penitenciaría Industrial de Cascavel - PIC/PR. Objetivamos, en este sentido, investigar si el maestro del contexto penitenciario tiene consciencia de las idiosincrasias de los condenados y se preocupa con una acción pedagógica que trascienda el nivel del contenido prescrito para lograr, por medio de conexiones con la vida intra y extra muros, niveles significativos de autonomía, reflexión y criticidad, con base en lo que podríamos llamar, en el sentido Deleuziano, de Experimentación. Esta investigación, caracterizada como cualitativa con enfoque interpretativista, utilizó como estrategia metodológica para la recopilación de los datos el estudio de caso, la investigación documental y etnográfica, que resultaron en la observación de 48h/clases registradas en Diario de campo, cuestionarios, entrevistas y planes de enseñanza, que utilizamos para contrastar las propuestas oficiales con las prácticas efectivas en el aula clase. Los datos recogidos entre los meses de noviembre de 2015 y de abril de 2016 se organizaron en torno de dos ejes de análisis: el perfil del cuerpo docente y las prácticas pedagógicas. El análisis de los datos basados en referenciales teóricos de autores como Basarab Nicolescu; Edgar Morin; Félix Guattari; Gilles Deleuze; Michel Foucault; Paulo Freire y Silvio Gallo nos permitió confirmar, entre otras cosas, que la mayoría de los maestros no tienen formación específica en educación de personas jóvenes y adultas (EPJA) y que ellos no reciben formación continua centrada en el desempeño de funciones específicas en el espacio de la prisión, lo que creemos que justifica, en partes, el hecho de que la práctica/metodología utilizada en sus clases todavía estar centrada en un aspecto tradicional y arborescente, que en raros momentos reflejó el papel protagonista del estudiante en la producción de nuevos conocimientos. / Esta pesquisa investiga alguns processos da educação prisional e do trabalho docente no sistema carcerário, tomando como parâmetro os estudos realizados nas salas de aula da Penitenciária Industrial de Cascavel – PIC/PR. Objetivamos, neste sentido, investigar se o professor do contexto prisional tem consciência das idiossincrasias do sentenciado-estudante e preocupa-se com uma ação pedagógica que transcenda o nível do conteúdo prescrito para atingir, por meio de conexões com a vida intra e extramuros, níveis significativos de autonomia, reflexão e criticidade, com base no que poderíamos denominar, no sentido Deleuziano, de Experimentação. Esta pesquisa, de natureza qualitativa com abordagem interpretativista, utilizou como estratégia metodológica para a coleta de dados o estudo de caso, a pesquisa documental e etnográfica, que resultaram na observação de 48h/aulas registradas em Diário de Bordo, questionários, entrevistas e planos de ensino, que serviram para contrastar as propostas oficias com as práticas efetivas em sala de aula. Os dados coletados entre os meses de novembro de 2015 e abril de 2016 foram organizados em dois focos de análise: o perfil do corpo docente e as práticas pedagógicas. A análise dos dados foi fundamentada nos referenciais teóricos de autores como, Basarab Nicolescu; Edgar Morin; Félix Guattari; Gilles Deleuze; Michel Foucault; Paulo Freire e Sílvio Gallo e nos permitiu confirmar, entre outras coisas, que a maioria dos professores não possui formação específica em Educação de Jovens e Adultos/EJA e que eles não recebem formação continuada voltada para as especificidades de atuação no espaço prisional, o que acreditamos justificar, em partes, o fato de a prática/metodologia empregada em suas aulas ainda ser calcada numa vertente tradicional e arborescente, que em raros momentos refletiu uma atuação protagonista do estudante na produção de novos conhecimentos.
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Avaliação da função erétil após a reconstituição do nervo cavernoso com o uso de células tronco de medula-óssea: estudo experimental em ratos / Cavernous nerve reconstitution with the use of bone marrow stem cells and erectile function evaluation: an animal experimental study

Oskar Grau Kaufmann 07 November 2008 (has links)
Introdução: Atualmente a prostatectomia radical retropúbica tem sido responsável por grande parte dos casos de disfunção erétil de causa neurogênica. O desenvolvimento de técnicas como a cirurgia com preservação do feixe vásculo-nervoso, eletro-estimulação intra-operatória o uso de enxertos autólogos para se reestabelecer a comunicação dos nervos cavernosos têm minimizado o grau de lesão neuronal. Entretanto, faz-se necessária a criação de novos métodos de restauração do nervo cavernoso. Neste estudo, investigaremos o uso e a aplicação de células tronco adultas de medula óssea de ratos e sua capacidade para regeneração do nervo cavernosos lesado e para restauração da função erétil em ratos. Objetivo: Avaliar a influência de células tronco adultas da medula óssea de ratos na regeneração do nervo cavernosos lesado, tomando-se como parâmetro o retorno da função erétil nos animais submetidos ao teste de ereção induzido pela apomorfina. Material e Método: Quarenta e oito ratos Wistar-EPM machos, com idades entre 9 e 10 semanas, pesando aproximadamente 250 gramas foram usados e randomicamente subdivididos em quatro grupos de estudo contendo 12 animais cada. Os grupos experimentais foram divididos em: Grupo I: exposição cirúrgica bilateral nervo cavernoso sem lesão do mesmo.Grupo II: lesão cirúrgica bilateral do nervo cavernoso de aproximadamente 3 mm, sem reconstrução. Grupo III: lesão cirúrgica bilateral dos nervos cavernosos de aproximadamente 3 mm, e reconstrução bilateral com sondas guias de silicone contendo solução salina em seu interior. Grupo IV: lesão cirúrgica bilateral dos nervos cavernosos de aproximadamente 3 mm, e reconstrução bilateral com sondas guias de silicone semeadas com células-tronco adultas em seu interior. Quatro semanas após a cirurgia, os animais foram injetados com apomorfina para indução da ereção. Resultados: No grupo I observou-se resposta erétil completa em todos os animais (100% - 12 em 12). Por outro lado nenhum dos animais do grupo II apresentou ereções após a admnistração de apomorfina. Cinco dos doze animais do grupo III (41,7%) apresentaram ereções enquanto que nove dos 12 animais do grupo IV (75%) evidenciaram ereções após o estímulo. Quando foram comparadas as frequências de restauro de ereção nos quatro grupos, demonstrou-se que grupo IV teve um comportamento semelhante ao grupo I (p = 0,217), ao passo que os animais do grupo III apresentaram frequência de ereções inferiores aos do grupo I (p = 0,005). Por outro lado, a comparação dos resultados entre os grupo III e IV versus o grupo II, demostrou que a frequência de ereções foi estatisticamente superior nos dois primeiros grupos (p = 0,037 e p < 0,001, respectivamente). Finalmente, o grupo IV apresentou tendência a maior número de ereções quando comparado ao grupo III (75% versus 41,7%) mas essa diferença não foi estatisticamente significante (p = 0,098). Conclusão: O presente estudo demonstra que células tronco adultas da medula óssea, semeadas em sondas guias de silicone, favorecem a regeneração dos nervos cavernosos e promovem o reestabelecimento da função erétil em um modelo animal. / Objective: To assess the influence of adult stem cells from bone marrow of rats in the regeneration of cavernous nerve, taking as a parameter the return of erectile function in animals subjected to the test of erection induced by apomorphine. Methods: Forty-eight WISTAR-EPM male rats, aged between 9 and 10 weeks, weighing approximately 250 grams were used and randomly divided into four groups of study containing 12 animals each. The experimental groups were divided into: Group I: surgical exposure of bilateral cavernous nerves without injury. Grupo II: surgical bilateral lesion of cavernous nerve with approximately 3 mm, without reconstruction. Group III: surgical bilateral lesion of cavernous nerves of approximately 3 mm, and bilateral reconstruction with silicone tube containing saline solution inside. Group IV: surgical bilateral lesion of cavernous nerves of approximately 3 mm, and bilateral reconstruction with silicone tube containing adult stem-cells inside. Four weeks after surgery, the animals were injected with apomorphine for induction of erection. Results: In Group I there was complete erectile response in all animals (100% - 12 in 12). On the other hand none of the animals in Group II presented erection after the use of apomorphine. Five of the twelve animals of group III (41.7%) had erections while nine of the 12 animals of Group IV (75%) showed them after the stimulus. When we compared the frequency of restoration of erection in the four groups, it was shown that group IV had similar performance to the group I (p = 0,217), while the animals in Group III had a frequency of erections inferiors to the Group I (P = 0,005). Moreover, comparison of results between the group III and IV versus the group II, showed that the frequency of erections was statistically higher in the first two groups (p = 0,037 p < 0,001, respectively). Finally, the group IV presented trend the largest number of erections when compared to Group III (75% versus 41.7%) but this difference was not statistically significant (p = 0,098). Conclusion : This study shows that adult stem cells from bone marrow, sown in probes silicone guides, promote the regeneration of cavernous nerves and restore erectile function in an animal model.
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Análise in vitro da expressão de proteínas da matriz extracelular (MEC) e de metaloproteinases da matriz (MMPs) em células-tronco adultas de polpa dentária humana / Analysis of ECM proteins and MMPs expression in human dental pulp stem cells

Sueli Patricia Harumi Miyagi 16 April 2008 (has links)
Células-tronco adultas podem ser isoladas de vários tecidos, dentre eles a polpa dentária humana, tecido originado na papila dentária do dente em desenvolvimento. Estas linhagens multipotentes podem ser estudadas sob vários aspectos, como na elucidação da histogênese de tumores. O objetivo deste estudo foi inferir a histogênese do mixoma odontogênico, neoplasia odontogênica benigna, analisando a expressão de proteínas da matriz extracelular (MEC) e de metaloproteinases da matriz (MMPs) em células-tronco adultas de polpa dentária humana. Três linhagens diferentes de células-tronco originadas de polpas dentárias humanas IDPSCs (DL-1, DL-2 e DL4) foram utilizadas. As proteínas analisadas foram as mesmas expressas na neoplasia: vimentina, colágeno tipo I, fibronectina, tenascina, ácido hialurônico e MMPs (MMP-1, MMP-2 e MMP-9). Imunofluorescência e ensaios enzimáticos foram utilizados para analisar a presença de proteínas nas células cultivadas e no meio de cultura condicionado por estas células, respectivamente. Todas as linhagens celulares expressaram a vimentina e nenhuma expressou o ácido hialurônico. A linhagem celular DL-1 expressou todas as outras proteínas da matriz extracelular estudadas, enquanto que na linhagem DL-2 apenas não foi observada a expressão do colágeno tipo I. Fibronectina e tenascina não foram observados na linhagem DL-4. Todas as linhagens expressaram todas as MMPs, sendo que a produção de MMP-2 nas três linhagens foi significantemente maior que a de todas outras MMPs. Baseado nas condições deste estudo, é possível concluir que a expressão de proteínas da MEC e de MMPs em células-tronco de polpa dentária humana apresentaram perfil similar àquela apresentada no mixoma odontogênico, exceto pela ausência de marcação do ácido hialurônico em todas as linhagens. A ausência de secreção de ácido hialurônico pelas IDPSCs poderia indicar que o mixoma odontogênico deriva de uma célula mais diferenciada que as células-tronco. / Adult stem cells can be isolated from different tissues including the human dental pulp, a structure originated from the dental papillae. These cell lineages are of importance in a series of studies, as the analysis of tumors histogenesis. The aim of this study was to infer the histogenesis of odontogenic myxoma, a benign odontogenic neoplasia by analyzing the ECM and MMPs molecules expressed in human dental pulp stem cells. Three different lineages of immature dental pulp stem cells (IDPSCs) (DL-1, DL-2 and DL-4) were used. The proteins searched were those expressed by the tumoral cells: vimentin, type I collagen, fibronectin, tenascin and hialuronic acid (HA) and the matrix metalloproteinases (MMP-1, MMP-2 and MMP-9). Immunofluorecence and enzymatic assays were used for analyzing the presence of the proteins in the cells and in the culture media conditioned by the cells, respectively. All the lineages expressed vimentin; however none expressed HA. DL-1 lineage expressed all the other ECM proteins, and the expression of type I collagen was not observed in the DL-2 lineage. Fibronectin and tenascin were not observed in the DL-4 lineage. All the lineages expressed all the MMPs. The release of MMP-2 from all cell lineages was significantly higher than those of all other MMPs. Based on the conditions of this study its possible to conclude that the overall expression of MEC proteins and MMPs in the lineages of human dental pulp stem cells were similar to those found in the odontogenic myxoma, except for the absence of hyaluronic acid. The absence of HA secretion by the IDPSCs could indicate that the odontogenic myxoma tumoural cells derive from a cell more differentiated than the stem cells.

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