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Efeitos do metronidazol sobre a atividade enzimática da ALT (alanina aminotransferase) e AST (aspartato aminotransferase), em ratos

Souza, Patrícia Medeiros de January 1997 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba, 1997. / Submitted by Leandro Silva Borges (leandroborges@bce.unb.br) on 2013-05-10T20:46:33Z No. of bitstreams: 1 1997_PatriciaMedeirosSouza.pdf: 1534767 bytes, checksum: 365a8ec90fb84017f722bf205b63b6d5 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-10T20:46:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1997_PatriciaMedeirosSouza.pdf: 1534767 bytes, checksum: 365a8ec90fb84017f722bf205b63b6d5 (MD5) / Este trabalho teve por objetivo avaliar os efeitos do metronidazol sobre a função hepática, um medicamento comumente empregado no tratamento da tticommúase vaginal e outras parasitoses, alem de infecções anaeróbias bacterianas. Para tal, empregaram-se 72 ratos albinos Wistar, machos, tratados com metronidazol 7,5 mg/kg, 15 mglkg e 30 mg/kg ou com solução de NaCl 0,9% (controle), em duas aplicações diárias, por 4 dias, via ip. Após 48, 72 e 96 horas do inicio dos tratamentos, collieram-se amostras de sangue para a dosagem da atividade sérica das enzimas ALT(alanina aminotransferase) e AST(aspartato anúnotransferase). Os resultados apontaram que, comparado ao controle, o metronidazol (15 mg/kg e 30 mg/kg) provoca um aumento significante (p<0,05) na atividade enzimática da AL T, sendo este efeito já observado após 48 horas de tratamento. Já o aumento da atividade sérica da AST somente ocorreu nos animais tratados com o metronidazol 30 mg/kg, após 96 horas de tratamento, sendo este efeito reversivel após a retirada da droga. Concluiu-se que o metronidazol, quando empregado em doses maiores e mesmo por tempo restrito, em ratos, aumenta a atividade sérica das enzimas ALT e AST, efeito este reversivel após a retirada da droga. _____________________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The aim of this work was to study the effects of metronidazole, a compound employed in trichomoniases and anaerobic infections treatment, upon hepatíc function. For this purpose, 72 male rats Wistar (220 ± 20 g) were treated with metronidazole 7.5 mgfkg, 15 mg/kg and 30 mgfkg or saline (control), BID, for 4 days, intraperitoneal route. 48, 72 e 96 hours after the beginning o f the treatment, blood samples were collected to measure the ALT and AST senun activities. The results showed that metronidazole !5 mgfkg and 30 mgfkg promote a significant increase (p<0,05) of AL T values, observed 48 h after treatment The increase of AST activity only happened 96 h after treatment with metronidazole 30 mgfkg. The reference values of the both enzyme activities became returned to the basal leveis after the drug withdrawal. We conclude that the metronidazole does not promote pennanent alterations in hepatic function, when employed in short time periods, even in high dosage, in rats.
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Detecção de genes de enterotoxinas e adesinas de Escherichia coli isoladas de fezes de caninos atendidos no Hospital Veterinário da Universidade de Brasília

Marques, Anne Daianne Sousa da Silva 19 July 2013 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Saúde Animal, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-12-10T14:17:35Z No. of bitstreams: 1 2013_AnneDaianneSousaSilvaMarques.pdf: 863748 bytes, checksum: e0fd3a74a6b77dc7bd10df21bd03dbdc (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-12-10T14:41:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_AnneDaianneSousaSilvaMarques.pdf: 863748 bytes, checksum: e0fd3a74a6b77dc7bd10df21bd03dbdc (MD5) / Made available in DSpace on 2013-12-10T14:41:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_AnneDaianneSousaSilvaMarques.pdf: 863748 bytes, checksum: e0fd3a74a6b77dc7bd10df21bd03dbdc (MD5) / A bactéria Escherichia coli é um microorganismo pertencente à microbiota normal de animais e humanos. Os patotipos de E.coli podem estar presentes no trato gastrintestinal dos animais carreando genes diarreiogênicos (enterotoxinas e adesinas), sem que estes estejam manifestando sinais de diarréia. A proximidade entre humanos e animais pode ser determinante para a transmissão inter-espécie de cepas que contêm genes envolvidos nos mecanismos de patogenicidade do agente. O presente trabalho teve como objetivo detectar os genes STa (toxina termoestável), K99 (F45), Intimina (eae), Stx1(Toxina Shiga, bem como realizar o antibiograma de 48 isolados obtidos de coletas de suabe retal de 50 cães, atendidos no Hospital Veterinário da Universidade de Brasília. Nas amostras testadas nenhum isolado foi positivo para STa e K99. Foram encontrados 21 isolados positivos para Stx1(43,75%) e 14 isolados positivos (29,2%) para gene de Intimina. O perfil de sensibilidade aos antimicrobianos também foi analisado para os seguintes fármacos: Sulfazotrim, Azitromicina, Enrofloxacina, Ceftiofur, Amoxicilina+Clavulanato, Doxiciclina, Ampicilina, Cefalexina. Os antibióticos que apresentaram maiores percentuais de resistências foram: Ampicilina (25%) Doxiciclina (22,9%) e Cefalexina (20,8%). Já aqueles que demonstraram maiores percentuais de sensibilidade foram Sulfazotrim (87,5%), Azitromicina (85,41%) e Enrofloxacina (77%). ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The bacterium Escherichia coli is a microorganism inhabitant of the normal microbiota of animals and humans. Pathotypes of E.coli may be present in the gastrointestinal tract of animals hustling genes that cause diarrhea, (enterotoxins and adhesin)s, they are not manifesting signs of diarrhea. The proximity of humans and animals can be crucial to the inter-species transmission of strains that contain genes involved in the mechanisms of pathogenicity of the agent. The present study aimed to detect the genes STa (heat stable toxin), K99 (F45), Intimina (eae), Stx1(Shiga toxin 1) and perform susceptibility testing of 48 isolates from rectal swab samples from 50 dogs attended Veterinary Hospital at the University of Brasilia. In any isolated samples tested were positive for STa and K99. 21 positive isolates were found to Stx1(43.75%) and 14 positive isolates (29.2%) to intimin gene. The antimicrobial susceptibility profile was also analyzed for the following drugs: sulfazotrim, Azithromycin, Enrofloxacin, Ceftiofur, Amoxicilina + Clavulanate, Doxycycline, Ampicillin, Cephalexin. The antibiotics that showed higher percentages of resistance were: ampicillin (25%) Doxycycline (22.9%) and cephalexin (20.8%). Those who have already demonstrated higher sensitivity were sulfazotrim percentage (87.5%), Azithromycin (85.41%) and Enrofloxacin (77%).
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Caracterização de Candida spp. e susceptibilidade a agentes antifungicos em isolados orais de pacientes HIV +

Melo, Nadja Rodrigues de 24 July 2002 (has links)
Orientador : Jacks Jorge Junior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-01T16:21:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Melo_NadjaRodriguesde_D.pdf: 2154762 bytes, checksum: 630af7fce371ffa49f82b89764258413 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Uma das principais infecções oportunistas em pacientes imunocomprometidos é a candidose oral, presente em mais que 90% dos pacientes infectados pelo HIV. Um total de 204 amostras de leveduras provenientes de pacientes infectados pelo HIV (n=173) e controles (n=31) foram identificadas e avaliadas quanto à resistência a antifúngicos. Candida albicans correspondeu a 57,8% (n=100) das amostras identificadas e 42, 1% foram de outras espécies, sendo 13 C. krusei, 9 C. lusitaniae e 8 C. tropicalis. Também foram isoladas 2 amostras de C. intermedia e 1 de C. norvegensis. Sensibilidade para anfotericina B (AMPH), fluconazol (FLCZ), miconazol (MCZ) e itraconazol (ITCZ) foi determinada por microdiluição. Do total de amostras, 29 isolados de C. albicans e 14 de outras espécies apresentaram baixa susceptibilidade para FLCZ. Dois isolados de C. tropicalis, 5 de C. krosei e 1 de C. norvegensis foram resistentes ao FLCZ. Cinco isolados de C. tropicalis, 12 de C. krusei, 4 de C. glabrata, 2 de C. intermedia e 1 de C. norvegensis foram resistentes ao ITCZ. Este estudo demonstrou a aumento da diversidade de espécies de Candida na cavidade bucal de pacientes infectados pelo HIV, associado à emergência de espécies incomuns de Candida, assim como a sensibilidade a agentes antifúngicos destes isolados / Abstract: Oral candidosis is one of the main opportunistic fungal infections amongst immunocompromised individuais, and affects more than 90% of HIV-infected patients.Two hundred and fouryeasts isolatesfrom oral cavities of HIV-infectedand control patients were identified and tested for antifungal resistance. C. albicans corresponded to 57.8% of the isolates while 42.1% were identified as other species, from which 13 were subsequently identified as C. krusei, 9 as C. lusitaniae, and 8 as C. tropicalis. There were also 2 isolates of C. intermedia and 1 of C. norvegensis. Antifungal resistance of the isolatesto amphotericinB (AMPH),fluconazole (FLCZ), miconazole (MCZ) and itraconazole (ITCZ) was measured by microdilution. Out of 204 isolates, 29 of C. albicans and 14 of other species had low susceptibility to FLCZ. Two isolates of C. tropicalis, 5 of C. krusei, and 1 C. norvegensiswere resistant to FLCZ. Five isolates of C. tropicalis, 12 of C. krusei, 4 of C. glabrata, 2 of C. intermedia, and 1 of C. norvegensis were resistant to ITCZ. This study demonstrated increased diversity of Candida species in the oral cavity of HIV-infected patients, associated with the emergence uncommon species, as well as the sensibility of these isolates to antifungal agents / Doutorado / Doutor em Biologia e Patologia Buco-Dental
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Investigação química de extratos de algas pardas do atlântico sul brasileiro

Philippus, Ana Cláudia January 2016 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:26:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 339589.pdf: 2720917 bytes, checksum: c7c298560a1ba7e810b503b1565204fd (MD5) Previous issue date: 2016 / Algas pardas da família Dictyotaceae são conhecidas por produzirem uma ampla variedade de metabólitos secundários bioativos. Muitos desses metabólitos já demonstraram potencial antifúngico, antibacteriano, antiviral, além de exercerem múltiplas funções nas algas. Estudos químicos da espécie Canistrocarpus cervicornis levaram ao isolamento de diterpenos dos tipos dolastano e secodolastano, enquanto de Dictyota mertensii foram isolados os guaianos prenilados. Organismos marinhos geralmente apresentam uma diversidade química considerável entre amostras coletadas em locais diferentes. Nesse trabalho foram investigadas as espécies C. cervicornis (C2) e D. mertensii (D5) coletadas na ?Pedra do Paraíso? (CE) e Ilha da Trindade (ES), respectivamente. C2 e D5 foram selecionados por apresentarem resultados promissores a partir de uma triagem das atividades antioxidante e antimicrobiana, realizadas por grupos parceiros. As algas previamente secas foram maceradas em diclorometano/metanol 2:1 e fracionadas através de sucessivas separações cromatográficas, geralmente utilizando sílica gel e solventes de polaridade crescente. O monitoramento de extratos e frações foi realizado por cromatografia em camada delgada. As substâncias isoladas foram analisadas por métodos espectroscópicos. De C. cervicornis foram isolados os diterpenos do tipo dolastano Cc2 (4a-acetóxi-9ß,14a-dihidroxidolasta-1(15),7-dieno) e Cc4 (4a-acetóxi-14a-hidroxidolasta-1(15),7,9-trieno), além de um hidrocarboneto, um ácido graxo e outros 12 compostos ainda não identificados. De D. mertensii foram isolados os diterpenos Dm2 (acetato de dictyol B, do tipo guaiano prenilado) e Dm3 (10-acetóxi-18-hidroxidolabela-2,7-dieno, do tipo dolabelano), os plasticidas Dm1 (ftalato de dipentila) e Dm5 (adipato de bis(2-(2-butoxietoxi) etila), além de outras seis substâncias ainda não identificadas. Dm3 é inédito para D. mertensii e é o primeiro diterpeno do tipo dolabelano isolado da espécie. Considerando os resultados obtidos para ambas as espécies e as variações químicas e biológicas observadas em função do local de coleta, a continuidade dos seus estudos contribui para o esclarecimento da distribuição de metabólitos secundários entre as espécies, bem como do potencial farmacológico e ecológico dos mesmos.<br> / Abstract : Brown algae of Dictyotaceae family are known to produce a wide variety of bioactive secondary metabolites. Many of these metabolites have shown antifungal, antibacterial and antiviral activities, and play multiples functions in algae. Previous investigations on Canistrocarpus cervicornis led to the isolation of dolastane and secodolastane diterpenes, while Dictyota mertensii samples afforded prenylated guaianes. Identical marine organisms present usually a considerable chemicals change among samples collected from different locations. This study investigated species C. cervicornis and D. mertensii collected in ?Pedra do Paraíso? (CE) and Trindade Island (ES), respectively. These extracts were selected after a screening of antioxidant and antimicrobial activities performed by partner groups, since they showed the most promising results. The dried algae were soaked in dichloromethane/methanol 2:1 (v/v) and fractionated by successive chromatographic separations with silica gel and solvents of increasing polarity. Extracts and fractions were monitorated by thin layer chromatography. Isolated compounds were identified by spectroscopic methods. Two diterpenes of dolastane types, Cc2 (4a-acetoxy-9ß, 14a-dihidroxydolasta-1 (15), 7-diene) and Cc4 (4a-acetoxy-14a-hidroxydolasta-1 (15) 7 9-triene), along with a hydrocarbon, a fatty acid and 12 yet unidentified compounds were isolated from C. cervicornis. From D. mertensii were isolated two diterpenes Dm2 (dictyol B acetate, a prenylated guaiane) and Dm3 (10-acetoxy-18-hidroxydolabela-2,7-diene, a dolabellane), besides the plasticizers Dm1 (dipentyl phthalate) and Dm5 (adipate bis (2- (2-butoxyethoxy) ethyl), and six other substances not yet identified. Dm3 is new reported from D. mertensii and it is the first dolabellane isolated in this species. Considering the results obtained for both species, besides chemical and biological changes observed due to the collection site, the continuity of their studies would help to clarify the distribution of secondary metabolites among species, as well as their pharmacological and ecological potential.
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Susceptibilidad microbiana: un test rápido para el análisis de resistencia bacteriana en cepas aisladas de mastitis clínica

Acevedo González, Claudia Mariom January 2006 (has links)
Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Los antimicrobianos son la principal herramienta en el tratamiento de enfermedades causadas por bacterias en humanos y animales. El excesivo y mal uso de estos compuestos ha causado la aparición de resistencia bacteriana y uno de los problemas de interés público es el posible traspaso de estas resistencias de los animales al hombre. Es así que a nivel mundial, los Programas de Armonización y Globalización Internacional han hecho énfasis en el uso racional de los antimicrobianos en animales de producción, a través de programas de monitoreo de resistencia bacteriana. El método de determinación bacteriana más utilizado y aceptado mundialmente es el método de dilución en placa, que da valores de MIC (Concentración Mínima Inhibitoria) para un determinado antimicrobiano. Otro método que está siendo utilizado estos años en medicina humana, por su rapidez y sencillez es el de las Tiras Reactivas de MIC (E-test). En este trabajo se evaluó la utilización de este método como base para un plan de monitoreo de resistencia bacteriana en Medicina Veterinaria. Siendo las mastitis una de las principales causas de uso de antimicrobianos en el ganado bovino, se evaluó la susceptibilidad a 178 cepas aisladas de mastitis clínica de bovinos de leche por métodos de dilución en placa y E-test. Se encontró concordancia de resistencia. No se obtuvieron diferencias significativas entre los valores de MIC obtenidos por ambos métodos con cefoperazona, ampicilina, amoxicilina, bencilpenicilina y enrofloxacino, excepto con gentamicina. Estos resultados indicarían que E-test podría ser utilizado como método de screening por ser simple y rápido, pero faltan estudios con algunos antimicrobianos utilizados en Medicina Veterinaria. Por otro lado, una de las resistencias mas conocidas es a los compuestos -lactámicos. Es así, que en este trabajo también se estudió la presencia de vi enzimas -lactamasas en cepas de E. coli y estafilococos. Además, se estudió la presencia de -lactamasas de espectro expandido (BLEE) y la resistencia a meticilina, en ambos tipos de cepas respectivamente, ya que son causas de fallas terapéuticas comunes en humanos y posibles mecanismos de resistencia a las bacterias de mastitis bovina evaluadas. Se encontró la presencia de -lactamasas en el 100% de las cepas de E. coli y no se detectaron BLEE. En las cepas de estafilococos se detectó un 34% de presencia de -lactamasas: 1/26 en Staphylococcus aureus, 6/26 en Staphylococcus coagulasa negativos y 4/10 en Staphylococcus spp., fueron resistentes a meticilina. Estos resultados sugerirían que la presencia de -lactamasas y mecanismos de resistencia más complejos, como lo son a meticilina, podrían dar cuenta de las resistencias observadas a diferentes antimicrobianos del tipo -lactámicos en aislados de mastitis bovina.
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Validación del "fast" como método de "screening" microbiológico para la pesquisa de residuos de antimicrobianos en productos de origen animal

Aguilar Escudero, Daniela Alejandra January 2006 (has links)
Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El uso de antimicrobianos en animales de producción trae consigo el riesgo de presencia de residuos que superen los límites máximos permitidos de estos medicamentos en alimentos de origen animal. Esto ha llevado a desarrollar programas de control para lo cual es necesario contar con métodos de detección de estas sustancias, entre los cuales están los métodos de “screening”. El objetivo del presente estudio fue validar la prueba de “screening” microbiológico “Fast Antimicrobial Screen Test” (“FAST”) para la detección de 16 antibióticos frecuentemente usados en la producción animal en Chile. Para esto, se siguieron las pautas recomendadas por la Unión Europea (U.E) publicadas en el Diario Oficial de las Comunidades Europeas (2002). La implementación de la técnica, se basó en las recomendaciones del fabricante (Medtox®). En esta experiencia se determinó que la zona inhibitoria alrededor del sensidisco control N5 estuvo, en la mayoría de los casos, dentro de un rango de 25 a 30 mm, valor un poco más elevado que aquel descrito para la técnica (20 a 26 mm). Por otro lado, si bien en este estudio se observó que pueden obtenerse resultados tan pronto como a las seis horas de iniciada la incubación, para la validación del método la lectura de las placas se fijó a las 24 horas, tiempo al cual se visualizaron inequívocamente los halos de inhibición. La especificidad del método se determinó analizando los solventes y diluyentes utilizados en el estudio y tejido renal libre de antimicrobianos, observándose que ninguno de ellos produjo interferencia con los resultados. Para medir la capacidad de detección del método se fijó el límite de determinación para los 16 antibióticos como drogas puras con los siguientes resultados: amoxicilina (25 μg/kg o ppb), ampicilina (25 μg/kg), ceftiofur (3000 μg/kg), cloxacilina (25 μg/kg), enrofloxacino (100 μg/kg), eritromicina (100 μg/kg), estreptomicina (500 μg/kg), florfenicol (300 μg/kg), flumequina (1000 μg/kg), gentamicina (375 μg/kg), neomicina (2500 μg/kg), oxitetraciclina (300 μg/kg), penicilina (25 μg/kg) y tilosina 2 (200 μg/kg). Para ácido oxolínico y lincomicina no pudo ser determinado. Además, se obtuvo el límite de determinación para enrofloxacino y oxitetraciclina presentes en matrices renales de aves tratadas con dosis terapéuticas, obteniéndose valores de 1467 y 247μg/kg, respectivamente. El análisis de robustez indicó que el método no es lo suficientemente robusto frente a los 4 factores seleccionados, los cuales fueron operador, pH del medio, concentración de esporas y temperatura de incubación. En conclusión, a pesar de la baja robustez del método, éste resultó tener una especificidad y sensibilidad adecuadas siendo capaz de detectar, en conformidad a los niveles de exigencia, un amplio espectro de antimicrobianos como drogas puras. Sin embargo, si se desea emplear este método en Chile, es importante que se continúen los estudios basados en la matriz renal, para definir con mayor precisión la sensibilidad de la técnica.
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Caracterización genética de la morera de papel (Broussonetia papyrifera (L.) Vent.: Moraceae) mediante marcadores de retrotransposones IRAP y REMAP

Silva Poblete, Gerardo Elías January 2016 (has links)
Memoria para optar al Título Profesional de Bioquímico / La colonización del Pacífico se gestó en dos grandes procesos de migración: el primero alrededor de 50.000 a 30.000 años antes del presente, y el segundo hace 5.000 a 1.000 años antes del presente. Este último gran movimiento fue complejo y se ha estudiado integrando evidencias arqueológicas, lingüísticas y genéticas con el propósito de dilucidar incógnitas como las diferentes rutas migratorias propuestas sobre el poblamiento de Oceanía. Entre los modelos de estudios genéticos se han analizado muestras humanas, pero éstas presentan diversas complejidades que limitan el alcance de los estudios con este modelo. Por este motivo, surgen los estudios de especies asociadas a los colonizadores polinésicos, de los cuales se han analizado especies animales y vegetales. Entre estos últimos se encuentra la morera de papel (Broussonetia papyrifera), una planta nativa de Asia e introducida a la región de Oceanía Remota. Debido a su uso como fuente de fibra vegetal para textiles y la importancia cultural que representa, resulta interesante abordar su estudio para aportar a la comprensión de las rutas migratorias en Oceanía Remota. La principal herramienta de los estudios genéticos son los marcadores moleculares, que corresponden a regiones de ADN que presentan cierto grado de variabilidad detectable. En B. papyrifera se han analizado regiones de ADN ribosomal y de ADN de cloroplastos, encontrando ausencia de diversidad en muestras de Oceanía Remota. Una alternativa para este tipo de análisis podría ser el uso de marcadores basados en retrotransposones, los cuales han sido descritos como ubicuos en plantas y como fuente de gran diversidad genética. Entre los marcadores basados en retrotransposones se encuentran los Inter-Retrotransposon Amplified Polymorphisms (IRAP) y Retrotransposon-Microsatellite Amplified Polymorphisms (REMAP), los cuales amplifican regiones entre secuencias de Repeticiones Terminales Largas (LTR), o entre LTR y secuencias microsatélites, respectivamente. Estos marcadores han sido ampliamente empleados en estudios de diversidad genética debido a su facilidad de uso. En base a los antecedentes presentados, se plantea la siguiente hipótesis: “El estudio de B. papyrifera por medio de marcadores moleculares basados en retrotransposones IRAP y REMAP permite detectar diversidad genética presente en muestras obtenidas de Oceanía Remota que no han sido diferenciadas mediante otros marcadores moleculares”. Con el objetivo de caracterizar la diversidad genética de muestras de B. papyrifera provenientes de Oceanía Remota usando marcadores IRAP y REMAP, se seleccionaron partidores a partir de la literatura para el análisis de muestras de B. papyrifera del hábitat nativo y de la región introducida. En primer lugar, se corroboró que las secuencias amplificadas mediante estos marcadores corresponden a retroelementos, caracterizando cinco secuencias amplificadas con un marcador IRAP. Estas secuencias corresponden a dos posibles tipos de elementos TRIM (Terminal-repeat Retrotransposon In Miniature), los cuales son derivados cortos de retrotransposones que conservan algunas regiones características de retroelementos, pero carecen de marcos de lectura abiertos funcionales. En una etapa siguiente se estandarizaron los protocolos IRAP y REMAP para obtener patrones de amplificación óptimos. Además, se ajustaron las condiciones de electroforesis y de captura de imagen. Inicialmente, se probaron 45 combinaciones de partidores IRAP y 36 combinaciones de partidores REMAP con un grupo de cuatro muestras de prueba de Oceanía Remota. A partir de los resultados obtenidos, se seleccionaron cuatro combinaciones REMAP para analizar 55 muestras representativas del banco genómico de B. papyrifera de distintas localidades del Pacífico. Estos análisis mostraron una baja diversidad genética, apoyando la noción de una dispersión clonal de la morera de papel en las distintas islas del Pacífico. Esta información complementa los resultados obtenidos con otros marcadores utilizados en esta y otras especies, y favorecen modelos migratorios como el “tren rápido” o el de la “Triple I”. Esta memoria de título constituye el primer estudio de retrotransposones en B. papyrifera y abre la posibilidad a nuevos trabajos que profundicen el análisis de la dispersión y la diversificación clonal de la morera de papel en Oceanía Remota, considerando que los retroelementos han sido descritos como fuente importante de diversidad en otras especies vegetales / The human colonization of the Pacific occurred in two major stages: the first migration took place about 50,000 to 30.000 years before present, and the second stage occurred more recently, about 5.000 to 1.000 years before present. This latter large movement was complex and has been widely studied gathering archeological, linguistic and genetic evidence in order to elucidate questions such as the different routes proposed for the settlement of Oceania. Human samples have been analyzed using genetic tools, but these present several complexities that limit their scope. Therefore studies centered on human-associated species (known as commensal species) arise. Animal and plant species have been studied, and among the latter, paper mulberry (Broussonetia papyrifera), a plant native from Asia and introduced in the Remote Oceania Region has been used a commensal model species. Due to its use as a fiber source to make textiles and the cultural importance of paper mulberry, it is interesting to address the study of this species to contribute to the understanding of migratory routes in Remote Oceania. Molecular markers are the main tools to analyze DNA regions that present genetic diversity. In B. papyrifera, ribosomal and chloroplast DNA regions have been analyzed, finding no genetic diversity in samples from Remote Oceania. An alternative to approach this kind of analysis could be the use of retrotransposon-based markers, which have been reported as ubiquitous and a major source of genetic diversity in plants. Retrotransposon-based markers are Inter-Retrotransposon Amplified Polymorphisms (IRAP) and Retrotransposon-Microsatellite Amplified Polymorphisms (REMAP), among others. IRAP and REMAP amplify regions between Long Terminal Repeats (LTR), or between LTR and microsatellites, respectively. These markers are easy to apply and have been widely used for genetic diversity studies in different plant species. Based on this background, the following hypothesis is proposed: “The study of B. papyrifera by retrotransposon-based markers IRAP and REMAP allow to detect genetic diversity in samples from Remote Oceania not previously differentiated with others molecular markers”. In order to characterize the genetic diversity of B. papyrifera samples from Remote Oceania by IRAP and REMAP, primers were selected from the literature to analyze samples of B. papyrifera from native and introduced areas. First, we checked that the amplified sequences with these primers were obtained from retroelements. Five sequences amplified with an IRAP marker were characterized and shown to correspond to two types of TRIM (Terminal-repeat Retrotransposon In Miniature) elements, which are short retrotransposon derivatives that have some conserved regions characteristic of retroelements, but lack functional open reading frames. Then, protocols for IRAP and REMAP amplification were standardized in order to obtain optimal amplification patterns. In addition, electrophoresis and image capture conditions were defined. From 45 IRAP and 36 REMAP primer combinations, 4 REMAP combinations showed distinct amplification patterns in a reduced group of B. papyrifera samples from Remote Oceania. The results obtained from the analysis of 55 samples of B. papyrifera using four selected REMAP markers showed little diversity, supporting the notion of a clonal dispersal of paper mulberry among Pacific islands. These results complement data obtained with others markers in paper mulberry and other species, and are consistent with the previously proposed models of human colonization of the Pacific as the “fast train” or the “Triple-I” models. The present work is the first retrotransposon study in B. papyrifera and opens the possibility to further work to analyze the clonal dispersal and diversification of paper mulberry in Remote Oceania, considering that retroelements have been described as an important source of molecular diversity in plant species / Fondecyt
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Evaluación de la actividad citotóxica y antimicrobiana de glicoalcaloides esteroidales de las hojas de Solanum albidum Dunal y Solanum oblongifolium Dunal

Olórtegui Quiroz, Jhonny Smit, Brañez Espinoza, Mary Carmen January 2009 (has links)
El presente estudio tuvo como objetivo aislar, identificar glicoalcaloides esteroidales de las hojas de Solanum albidum Dunal y Solanum oblongifolium Dunal y evaluar su actividad citotóxica y antimicrobiana; las especies mencionadas fueron colectadas en el departamento de Cajamarca, provincia de San Ignacio. Los glicoalcaloides fueron identificados por el método cromatográfico y espectrofotometría infrarroja; y la cuantificación por titulación potenciométrica automática por punto de inflexión. Para evaluar la actividad citotóxica se empleó el método de desarrollo embrionario en huevos fértiles de erizo de mar (Tetrapigus níger) donde los glicoalcaloides de Solanum albidum Dunal y Solanum oblongifolium Dunal presentaron actividad citotóxica, La evaluación de la actividad antimicrobiana se llevó a cabo mediante el método de recuento en placa con las siguientes cepas Escherichia coli ATCC® 8739, Pseudomonas aeruginosa ATCC® 9027, Salmonella enterica ATCC® 14028, Staphylococcus aureus ATCC® 6538, Aspergillus brasiliensis ATCC® 16404, Candida albicans ATCC® 10231, donde se demostró dicha actividad. / -- The purpose of the present study was to isolate, identify, and assess the content of steroidal glycoalkaloids (SGAs) from leafs of Solanum albidum Dunal and Solanum oblongifolium Dunal belonging to province San Ignacio, Cajamarca. Also, it was determined their citotoxicity and antimicrobial activity. The steroidal glycoalkaloids were identified by means of chromatography and infrared spectrophotometric analyses. The content of steroidal glycoalcaloids was quantified by automatic potentiometric titulation using the inflection point. The citotoxic activity of SGAs was observed in sea urchin embryos Tetrapygus niger. The antimicrobial and antifungal activities were evaluated by using the plate counting method, including the following type strains respectively: Escherichia coli (ATCC 8739), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 9027), Salmonella enterica (ATCC 14028), Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Aspergillus brasiliensis (ATCC 16404), and Candida albicans (ATCC 10231), which showed that activity
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Análisis comparativo de seguridad entre anfotericina B convencional y anfotericina B complejo lipídico en pacientes del Hospital Nacional Edgardo Rebagliati Martins en el período 2011-2012

Espinoza Cobeñas, Carlos Augusto January 2014 (has links)
Objetivo: Comparar los perfiles de seguridad de la Anfotericina B complejo lipídico y Anfotericina B convencional. Metodología: Se analizaron todas las historias clínicas de pacientes del Hospital Nacional “Edgardo Rebagliati Martins”que recibieron anfotericina B, tanto en terapia confirmada de infecciones fúngicas como en terapia empírica en sospecha de infección fúngica o como medicamento antileishmaniásico durante el periodo comprendido desde el 01 de Agosto del 2011 hasta el 31 de Julio del año 2012. 76 pacientes cumplieron con criterios de inclusión y exclusión. Se evaluó las dosis administradas, las pruebas de laboratorio de cada paciente antes, durante y después del tratamiento, junto con las observaciones registradas por el médico tratante y las notas de enfermería. Resultados: No se encontraron diferencias estadísticas significativas en la efectividad clínica de anfotericina B deoxicolato (48,5%) –AmB– y anfotericina B complejo lipídico (60%) –ABCL– (p-valor 0.421); tampoco se encontraron diferencias en la eficacia clínica (50,0% para AmB vs 66,7% para ABCL, p-valor 0.348). De las reacciones intrínsecas al medicamento, se encontró diferencias estadísticas significativas a nivel de perfil renal en el incremento de creatinina sérica tanto en presencia (79,7% para AmB vs 50% para ABCL, OR 0.25 IC 95% [0.087 – 0.74], p-valor 0.009) como en probabilidad de incremento mayor igual al 20% (p-valor 0.03); sin embargo, no se encontraron diferencias significativas en la presencia de lesión renal aguda (40,6% para AmB y 30% para ABCL, p-valor 0.393). 9,6% de pacientes que utilizaron AmB presentó falla renal (Lesión renal estadío 3/ RIFLE-F). No se encontraron diferencias significativas a nivel de perfil hematológico y hepático. Según los criterios CIOMS modificados, la presencia de hepatotoxicidad fue de 21,7% para AmB y 37,5% para ABCL (p-valor 0.60). Respecto a las reacciones debidas a infusión, se encontraron diferencias significativas en la presencia de náuseas (25,0% para AmB vs 56,5% para ABCL, p-valor 0.006), fiebre (28,1% para AmB vs 52,2% para ABCL, p-valor 0.037), y escalofríos (3,1% para AmB vs 30,4% para ABCL, p-valor 0.001), sin embargo no se encontraron diferencias significativas en la presencia de vómitos, malestar general, hipertensión y flebitis. Conclusiones: Anfotericina B complejo lipídico muestra una eficacia y efectividad comparable al de anfotericina B deoxicolato. Se encontraron diferencias estadísticas significativas en el incremento de creatinina a favor de anfotericina B complejo lipídico. Palabras clave: Anfotericina B deoxicolato, Anfotericina B complejo lipídico, lesión renal aguda, hepatotoxicidad, reacciones adversas. / Objective: To compare the safety profiles of amphotericin B lipid complex and conventional amphotericin B. Methods: It was analyzed the medical records of all patients of "Edgardo Rebagliati Martins" National Hospital who received amphotericin B, both confirmed fungal infections and empirical therapy of suspected fungal infection or as antileishmanial drug during the period from 1 August 2011 until 31 July 2012. 76 patients met inclusion and exclusion criteria. It was evaluated the administered dose, laboratory tests of each patient before, during and after treatment with those recorded observations by the attending physician and nursing notes. Results: No statistically significant differences were found in the clinical effectiveness of amphotericin B deoxycholate (48.5%) - AmB - and amphotericin B lipid complex (60 %) - ABCL -(p - value 0.421), no differences were found in the clinical efficacy (50.0 % vs 66.7 % for AmB for ABCL, p- value 0.348). Of intrinsic drug reactions, statistically significant differences at the level of renal profile was found in the serum creatinine increase both in the presence (79.7% vs 50 % for AmB for ABCL, OR 0.25 95% CI [0.087 to 0.74] , p- value 0.009) and more likely to increase at least 20% (p- value 0.03 ), but no significant differences were found in the presence of acute renal injury (40.6 % for AmB and 30% for ABCL, p- value 0.393). 9.6% of patients using AmB had renal failure (kidney injury stage 3 / RIFLE -F). No significant differences at the level of haematological and liver function were found. According to CIOMS modified criteria, the presence of hepatotoxicity was 21.7% and 37.5% for AmB for ABCL (p- value 0.60). Concerning infusion reactions, there was significant differences in the presence of nausea (25.0% vs 56.5 % for AmB for ABCL, p- value 0.006), fever (28.1% were found for AmB vs 52.2 % for ABCL, p- value 0.037), and chills (3.1% for AmB vs. 30.4 % ABCL, p- value 0.001), however no significant differences were found in the presence of vomiting, malaise, hypertension and phlebitis. Conclusions: Amphotericin B lipid complex shows efficacy and effectiveness comparable to that of amphotericin B deoxycholate. Statistically significant differences in the increase of creatinine in favor of amphotericin B lipid complex were found. Keywords: Amphotericin B deoxycholate, amphotericin B lipid complex, acute renal injury, hepatotoxicity, adverse reactions.
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Frecuencia del operón mer en plásmidos conjugativos presentes en Escherichia coli aislados de ambientes marinos de Lima y su relación con la resistencia a antimicrobianos clínicos

Sulca López, Marcos Alejandro January 2008 (has links)
Investiga la resistencia bacteriana al ión mercurio (Hg2+) en 55 cepas de Escherichia coli aisladas de diferentes ambientes marinos de la costa limeña: Bahía de Pucusana, Bahía de Miraflores y Bahía del Callao (Lima-Perú). Se determinan los diferentes serogrupos de las cepas, utilizando sueros polivalentes EPEC, EIEC y EHEC; la resistencia al mercurio es evaluada realizando pruebas de MIC a cloruro de mercurio: 30, 50, 80, 100, 200, 300 y 400 µM/mL disuelto en caldo LB. Se evalúa las cepas mercurio-resistentes frente a antibióticos clínicos por la técnica de difusión en placa usando los siguientes antibióticos en discos: Cloramfenicol (C), 30 µg; Norfloxacina (Nor),10 µg; Amikacina (Ak), 30 µg; Kanamicina (K), 30 µg; Ampicilina (A), 10 µg; Sulfaperazone (Sfp), 30 µg; Tetraciclina (Te), 30 µg; Aztreonam (Az), 30 µg; Ceftazidima (Caz), 30 µg; Gentamicina (Ge), 10 µg; Amoxicilina (Amx), 25 µg; Sulfametoxazol-trimetoprim (Sxt), 25 µg; Ácido Nalidíxico (W), 30 µg; Ciprofloxacina (Cip), 5 µg. El origen de la resistencia al mercurio mediada por plásmidos se comprueba mediante la técnica de curación con SDS (10 % p/v); se realiza la técnica de conjugación de plásmidos tomando la cepa receptora E. coli DH5α. Para la visualización de los plásmidos conjugativos se realiza la técnica de extracción de plásmidos con el método de Lisis Alcalina con SDS en las cepas receptoras mercurio-resistentes. Así mismo se evalúa la presencia del gen merA, que se encuentra en el operón mer, por el método del PCR tomando como DNA molde los plásmidos aislados. Del total de las cepas de E. coli (n=55) estudiadas, el 29,1 % (n=16) resultan ser positivas para los serogrupos EPEC, de éstas: 31,25 % EPEC poliA, 50 % EPEC poliB, 18,75 % EPEC poliC. El 74,54 % (n=41) son resistentes al mercurio en distintas concentraciones, de éstas el 34,15 % son resistentes a antibióticos; se observa la resistencia al mercurio mediada por plásmidos en el 80,5 %. De las cepas mercurio resistentes, el 14,63 % (n=6) muestran ser portadores de plásmidos conjugativos, observándose la presencia de estos en las cepas receptoras mercurio resistentes. Se observa la presencia truncada o aberrante del gen merA en los plásmidos aislados, confirmando la frecuencia del operón mer en el 14,63 % de las cepas mercurio resistentes. / Tesis

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