p>O primeira parte do trabalho descreve a preparação de um novo reagente de olefinação de HWE para o preparo de diazocetonas α, β-insaturadas com geometria Z e aplicação na síntese de núcleos piperidínicos funcionalizados. Através da otimização da reação de HWE empregando o benzaldeído como aldeído padrão foi possível maximizar a obtenção do isômero Z desejado (92%, Z:E 9:1). As reações-chave para a formação dos núcleos piperidínicos foram a de olefinação de HWE utilizando amino-aldeídos, obtendo-se bons rendimentos e boa seletividade, seguida de uma reação de inserção N-H catalisada por metais. A versatilidade da metodologia foi demostrada com a aplicação na síntese total de um produto natural: (±)-3,4,5-triidroxipiperidina e em estudos visando a síntese de outro produto natural, a (-)-1-deoxi-altronojirimicina. A química das diazocetonas α,β-insaturadas como intermediários avançados foi também empregada na síntese de um outro produto natural, a (±)-preussina. A rota empregada apresentou alta estereosseletividade na reação-chave (Rearranjo de Stevens) e posteriormente na redução da cetona formada com um redutor volumoso (L-selectride), obtendo um rendimento global de 40% em três etapas. Tentou-se também estender a metodologia para o preparo de diazocetonas α,β-insaturadas trissubstituídas, aplicando os reagentes de olefinação em reações com cetonas. No entanto, diversas tentativas foram feitas e não foi obtido as olefinas de interesse. / The first part of this work describes the preparation of a new HWE olefination reagent to prepare diazoketones α, β-unsaturated with Z geometry and its application in the synthesis of functionalized piperidine cores. After the optimization of the HWE reaction using benzaldehyde as a standard it was possible to prepare the desired Z isomer in 92% (Z:E 9:1). The key reaction for formation of the piperidine cores, N-H metal-catalyzed insertion performed to give a yield of up to 70%. The versatility of the methodology was demonstrated by an application to the synthesis of the natural product (±)-3,4,5-triidroxypiperidine and studies in the synthesis of (-)-1-deoxy-altronojirimicine. The chemistry of α, β-unsaturated diazoketones was also employed in the synthesis of another natural product, the alkaloid (±)-preussine. The employed route showed high stereoselectivity in the key-reaction (Stevens Rearrangement) as well as in the subsequent reduction of the formed ketone with a reducing agent (L-Selectride) giving an overall yield of 40%. We also tried to extend the methodology to prepare trisubstituted α, β-unsaturated diazoketones from the reaction with the olefination reagent and ketones. However, after several attempts no fruitful results were abtained.

Alcaloides indolizidínicos, quinolizidínicos e piperidínicos poliidroxilados representam classes de compostos amplamente investigados atualmente. Este fato se deve às pronunciadas atividades biológicas como inibidores de glicosidases expressadas por estes heterociclos, o que significa um grande atrativo para que muitos grupos de pesquisas desenvolvam metodologias sintéticas para a sua obtenção de forma efetiva e em poucas etapas. Neste trabalho de dissertação é apresentada uma rota sintética para a preparação de alcaloides indolizidínicos e quinolizidínicos diidroxilados a partir de diazocetonas α,β-insaturadas. A estratégia para a síntese destes alcaloides baseia-se na mesma metodologia, tendo como etapas chaves: uma reação de olefinação de Horner-Wadsworth-Emmons (HWE) a partir de aminoaldeídos, seguida de um Rearranjo de Wolff. Como material de partida para o esqueleto indolizidínico foi empregado o Cbz-S-prolinal. Este aminoaldeído foi empregado como fonte do centro estereogênico e de um dos anéis presentes na estrutura final. O acoplamento (reação de HWE) entre o Cbz-S-prolinal e um diazofosfonato recentemente descrito por nosso grupo de pesquisa forneceu um composto diazocarbonílico α,β-insaturado (67%), que em seguida, foi submetido a um rearranjo de Wolff fornecendo um éster β,γ-insaturado (96%). Este intermediário avançado foi funcionalizado através de uma reação de diidroxilação, a qual forneceu uma lactona (66%). A síntese foi completada através de uma reação de ciclização intramolecular (94%) seguida de uma reação de redução para fornecer a indolizidina diidroxilada em 71% de rendimento. Para o esqueleto quinolizidínico, foi empregado o aminoaldeído racêmico Cbz-(±)-pipecolinal como material de partida. A partir da reação de olefinação, foi obtida uma diazocetona α,β-insaturada (91%), que após Rearranjo de Wolff (95%), diidroxilação (75%), ciclização (54-74%) e reação de redução (87-90%), forneceu duas novas quinolizidinas diidroxiladas. Estes alcaloides indolizidínicos e quinolizidínicos poderão ser avaliados como inibidores de glicosidases. / Polyhydroxylated Indolizidine, quinolizidine and piperidine alkaloids represent classes of compounds widely investigated in the chemical community. This fact is due to their pronounced biological activities as glycosidase inhibitors. Considering that, many research groups have been developing new synthetic methodologies to obtain these alkaloids and analogs effectively and in few steps. This work presents a synthetic route for the preparation of dihydroxylated indolizidine and quinolizidine alkaloids from α,β-unsaturated diazoketones. The strategy for the synthesis of these compounds is based on the same methodology to construct the indolizidine and quinolizidine skeleton. The key steps involve a Horner-Wadsworth-Emmons (HWE) olefination reaction from aminoaldehydes, followed by a Wolff Rearrangement. As the starting material to construct the indolizidine skeleton, Cbz-S-prolinal was employed. This aminoaldehyde is also the source of the stereogenic center and one of the rings present in the final structure. The coupling reaction (HWE reaction) between Cbz-S-prolinal and a diazophosphonate (methodology recently described by our research group) has provided an α,β-unsaturated diazoketone in 67% yield. This compound was then subjected to a Wolff Rearrangement, providing a β,γ-unsaturated ester in 96% yield. This advanced intermediate was functionalized through a high selective dihydroxylation reaction, furnishing a hydroxylated lactone in 66% yield. The synthesis was then completed employing an intramolecular cyclization reaction (94% yield), followed by lactam reduction to provide the dihydroxylated indolizidine (1,6-dideoxyepicastanospermine) in 71% yield. For the construction of the quinolizidine skeleton, was employed racemic Cbz-pipecolinal as the starting material. From the olefination reaction, the corresponding α,β-unsaturated diazoketone was obtained in 91% yield. After a Wolff Rearrangement (95%), dihydroxylation reaction (75%), cyclization (54-74%) and lactam reduction (87-90%), two novel dihydroxylated quinolizidines could be synthesized. These indolizidine and quinolizidine alkaloids may be evaluated as new inhibitors of glycosidases.

O presente trabalho descreve 3 abordagens divergentes para obtenção do esqueleto bicíclico presente nos alcaloides indolizidínicos. A primeira abordagem consiste no desenvolvimento de um novo método de preparação de diazocetonas α,β-insaturadas a partir da reação de Horner-Wadsworth-Emmons (HWE) entre diazofosfonato e aldeídos. As dizocetonas α,β-insaturadas obtidas foram utilizadas como bloco de construção do esqueleto cabocíclico indolizidínico, onde o intermediário chave foi obtido através do rearranjo de Wolff. A segunda estratégia consiste no desenvolvimento do acoplamento redutivo entre derivados α-aminocarbonílicos e acrilato de metila mediado por SmI2, onde em apenas duas etapas foram obtidos os intermediários avançados da síntese da (-)-pumiliotoxina 251D e da (+/-)-epiquinamida. A terceira estratégia utiliza como etapa chave a reação de Wittig/HWE intramolecular para preparação do intermediário bicíclico contendo o sistema α,β-insaturado que pode ser utilizado na síntese divergente dessas substâncias. / Herein were described three diverted oriented approaches for the construction of the bicyclic scaffold of indolizidines alkaloids, that figures between one of the most important classes of natural products. In the first approach, a new method to prepare α,β - unsaturated diazoketones was described using the Horner-Wadsworth-Emmons (HWE) reaction between diazophosphonate and aldehydes. The unsaturated diazoketones were used as powerful plataforms to construct the indolizidine carbocyclic scaffold, enploying the Wolff rearrangement as the key step. The second approach was the development of a reductive coupling between α-aminocarbonyl derivatives and methyl acrylate, mediate by SmI2, from this approach, the well-known advanced intermediate for the synthesis of (-)-pumiliotoxin 251D e of the (+/-)-epiquinamide was obtained in only two steps. The third approach uses the intermolecular Wittig/HWE reaction as the key step in the construction of a bicyclic intermediate containing an α,β -unsaturated moiety that could be used for a diverted oriented approach in the indolizidine alkaloids synthesis.

Neste trabalho foram estudadas duas abordagens para a obtenção de novos metabólitos secundários a partir de fungos. Na primeira, o ácido hidroxâmico suberoilanilida (SAHA) e cinco análogos foram sintetizados. Sua atividade como modificadores epigenéticos foi avaliada em oito linhagens fúngicas do ambiente marinho. Os fungos Penicillium sp. e Acremonium sp. apresentaram modificações no seu perfil metabolómico quando foram crescidos em pequena escala em presença do derivado 4F-SAHA, enquanto Microphaeropsis sp. apresentou modificação em presença do 3AM-SAHA. O fungo P. decaturense foi crescido em maior escala e os compostos de interesse foram isolados. Na segunda abordagem, uma nova estratégia de extração utilizando mistura de resinas XAD 2-4-7 permitiu a extração e posterior isolamento de seis novos alcaloides peptídicos (72-77) e dois peptídeos (78-79) a partir da fração aquosa do meio de cultivo do fungo antártico Penicillium solitum IS1-A. Utilizando a mesma metodologia, o metabolismo secundário do fungo antártico Thelebolus globosus E2 foi estudado. A partir de seu extrato metanólico do meio liquido PDB foram isoladas a ciclopenina (86) e o ciclopenol (87) e foram detectados os alcaloides viridicatina (88) e viridicatol (89). O fungo Thelebolus globosus mostrou-se produtor de estatinas, sendo isoladas como composto majoritário a mevastatina (90). / In this work two approaches to obtain new secondary metabolites from fungi were studied. Suberoylanilide hydroxamic acid (SAHA) and five analogues were synthesized and assessed as epigenetic modifiers in eight marine-derived fungi. The fungus Penicillium sp. and Acremonium sp. presented changes in their metabolomic profile when they were grown on a small scale in presence of 4F-SAHA derivative and Microphaeropsis sp. presented a modification in the presence of the 3 AM-SAHA. In the second approach a new extraction strategy using XAD 2-4-7 resin mixture allowed the extraction and subsequent isolation of six new peptide alkaloids (72-77) and two peptides (78-79) from the aqueous fraction of the culture medium of the Antarctic fungus Penicillium solitum IS1-A. Using the same methodology, the secondary metabolism of the Antarctic fungus Thelebolus globosus E2 was studied. From the methanolic extract of the PDB liquid medium cyclopenine (86) and cyclopenol (87) were isolated and the viridicatine (88) and viridicatol (89) alkaloids were detected. The fungus Thelebolus globosus was shown to be a producer of statins, mainly of mevastatin (90).

A estrutura básica dos alcaloides indolizidínicos é formada por anéis bicíclicos de cinco e seis membros contendo um átomo de nitrogênio compartilhado na posição 4. Esse sistema de anéis possui grande destaque dentre os alcaloides, pois está presente em um grande número de compostos e apresenta um interessante perfil biológico. A ipalbidina, por exemplo, é um alcaloide indolizidínico com propriedades analgésicas e antioxidantes. Este composto possui estrutura química relativamente simples, entretanto, poucas são as rotas que apresentam sínteses curtas e divergentes, sendo apenas quatro delas enantiosseletivas. Assim, este trabalho de dissertação visa o estudo de uma nova estratégia sintética que permite a preparação da (+)-ipalbidina, bem como de outros alcaloides que possuem o sistema 4-azabiciclo[4.3.0]-non-3-eno com um substituinte fenólico na posição 3. Uma rota promitente para a síntese desses alcaloides (objetivo deste trabalho) é a obtenção do esqueleto indolizidínico a partir da reação de ciclização de uma α-clorocetona funcionalizada derivada do (S)-prolinal protegido (Boc e Cbz). As etapas chaves dessa estratégia são: uma reação de olefinação (Wittig), a preparação de α-clorocetonas, adição do grupo aril a α-clorocetona e a conversão destas no esqueleto indolizidínico por uma reação de ciclização. A α-clorocetona pode ser preparada com rendimentos globais de 56% (Cbz) e 81% (Boc) a partir do (S)-prolinal protegido em apenas 3 etapas: reação de olefinação, seguida de uma reação de redução da olefina obtida e a preparação da α-cloroacetona a partir do éster. A adição do grupo aril a α-clorocetona foi obtida tanto para o grupo Boc (40%) quanto para o grupo Cbz (42%). O α-cloroálcool protegido com Boc foi convertido no esqueleto indolizidínico por meio de uma reação \"one-pot\" de desproteção seguida de ciclização (80%). O produto de ciclização, por sua vez, foi convertido ao análogo inédito da (+)-ipalbidina, a (S)-desoxiipalbidina (30%). Essa estratégia levou a síntese da (S)-desoxiipalbidina em 6 etapas e com rendimento global de 8%. Cabe ressaltar que este tipo de abordagem utilizando α-clorocetonas nunca foi empregado na síntese de alcaloides indolizidínicos, sendo que esta estratégia também poderá ser aplicada a síntese total da (+)-ipalbidina e de outros alcaloides indolizidínicos tais como as fenantroindolizidinas. / The basic structure of indolizidine alkaloids is formed by a five and sixmembered bicyclic ring containing one nitrogen atom shared at the 4 position. This ring system has great prominence among the alkaloids, it is present in a large number of compounds and possess interesting biological profiles. Ipalbidine, for example, is an indolizidine alkaloid with analgesic and anti-oxidant properties. Although this compound has a relatively simple chemical structure, only four enantioselective synthesis are described for this compound. Thus, this dissertation aims to study a new synthetic strategy that allows the preparation of (+)-ipalbidine, as well as other alkaloids having the system 4- azabicyclo[4.3.0]non-3-ene with a phenolic substituent in position 3. A possible interesting route for the synthesis of these alkaloids is to obtain the indolizidine skeleton from a cyclization reaction using a functionalized α-chloroketone (derivative of protected (S)-prolinal (Boc and Cbz)). The key steps of this strategy are: an olefination reaction (Wittig), the preparation of α-chloroketones, addition of aryl group to the α-chloroketones and converting them into the indolizidine skeleton by a cyclization reaction. The α-chloroketones were prepared with overall yields varying from 56 % (Cbz) to 81% (Boc) starting from protected (S)-prolinal in just three steps: olefination reaction , followed by a reduction reaction of the obtained olefin and preparation of the α-chloroketone from an ester . The addition step of the aryl group to α-chloroketone was obtained for both Boc (40%) and Cbz (42%) groups. The Boc-protected α-chloroalcohol was converted to indolizidine skeleton through an \"one-pot\" deprotection reaction, followed by a cyclization reaction (80 %). The cyclization product, in turn, was converted to the novel (+)-ipalbidine analog, (S)-desoxyipalbidine (30 %). This strategy led to the synthesis of (S)-desoxyipalbidine in 6 steps and overall yield of 8 %. It is noteworthy that this type of approach using α-chloroketones was never employed in the synthesis of indolizidine alkaloids, and that strategy can be applied also to the total synthesis of (+)-ipalbidine and other indolizidine alkaloids such as phenanthroindolizidine.

Submitted by Natalie Mendes (nataliermendes@gmail.com) on 2015-07-25T15:23:13Z No. of bitstreams: 1 Disserta??o Melina PPGRGV.pdf: 1355642 bytes, checksum: 38055ea3e94c1f1eaec922c55c2d09bf (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-25T15:23:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Disserta??o Melina PPGRGV.pdf: 1355642 bytes, checksum: 38055ea3e94c1f1eaec922c55c2d09bf (MD5) Previous issue date: 2014-03-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / The species Psychotria ipecacuanha (Brot.) Stokes, popularly known as ipeca or poaia, has attracted interest from the pharmaceutical industry for many decades due to the presence of cephalin and emetine alkaloids in their roots that have expectorant properties , emetic and amebicides. The extinction risk and difficulty of conventional crop production, front of the large market demand, encourage studies of cultivation methods that enable the economic exploitation and, consequently , the creation of new productive chains in rainforest areas . This study was performed at the Environmental Preservation Area Pratigi - APA Pratigi - located on the territory of Southern Bahia and aimed to quantify the growth and production of emetine in ipeca plants under agroforestry crop type cabruca , evaluating the effect of different lighting conditions , age and nutrient sources. Quantification of emetine was made by high performance liquid chromatography (HPLC) and the experimental results were subjected to analysis of variance , comparing treatment means by the Tukey test and Skot Knot . The experimental results showed that the lighting conditions affect plant growth of ipeca , being higher in environments with shading above 90 % . Ipecc had an average yield of 207 kg ha - 1 of fresh root and 80 kg ha - 1 dry at 16 months of growing root ; and 240 kg ha - 1 of fresh root and 93 kg ha - 1 at 28 months. It was possible to obtain levels of emetine , the conditions of agroforestry cultivation cabruca kind in Southern Bahia territory , equivalent to the levels obtained from plants collected extractive in other regions of the country . Age affects the content of emetine in agroforestry cultivation conditions, with higher concentrations in younger plants, after 16 months of cultivation. Considering the sources of fertilizer, with and without liming, gave higher plant height and higher No leaves / plant in treatments without liming , however, yielded better results for No / plant roots in limed areas . For the accumulation of root dry weight, the commercial part of the plant , treatments with nitrogen, with and without liming , promoted the highest averages. The levels of emetine were higher in treatments without lime and subjected to potassium fertilization. / A esp?cie Psychotria ipecacuanha (Brot.) Stokes, conhecida popularmente como ipeca ou poaia, tem despertado interesse da ind?stria farmac?utica a muitas d?cadas, devido ? presen?a dos alcaloides emetina e cefalina em suas ra?zes, que possuem propriedades expectorantes, em?ticas e amebicidas. O risco de extin??o e a dificuldade do cultivo convencional da esp?cie, frente ? grande demanda de mercado, fomentam estudos de m?todos de cultivo que possibilitem a explora??o econ?mica e, consequentemente, a cria??o de novas cadeias produtivas em ?reas de floresta tropical. O presente trabalho foi realizado na ?rea de Preserva??o Ambiental do Pratigi - APA do Pratigi ? localizada no territ?rio do Baixo Sul da Bahia e teve como objetivos quantificar o crescimento e a produ??o de emetina em plantas de ipeca sob cultivo agroflorestal tipo cabruca, avaliando o efeito de diferentes condi??es de luminosidade, idade e fontes de aduba??o. A quantifica??o da emetina foi feita por meio de cromatografia l?quida de alta efici?ncia (CLAE) e os resultados experimentais foram submetidos ? an?lise de vari?ncia, comparando-se as m?dias dos tratamentos por meio dos testes Tukey e Skot Knot. Os resultados experimentais demonstraram que as condi??es de luminosidade afetaram o crescimento das plantas de ipeca, sendo maior em ambientes com sombreamento acima de 90%. A ipeca apresentou rendimento m?dio de 207 kg Ha-1 de raiz fresca e 80 kg Ha-1 de raiz seca aos 16 meses de cultivo; e de 240 kg Ha-1 de raiz fresca e 93 kg Ha-1 aos 28 meses. Foi poss?vel obter teores de emetina, nas condi??es de cultivo agroflorestal tipo cabruca no territ?rio Baixo Sul da Bahia, equivalente aos teores obtidos de plantas coletadas extrativistamente nas demais regi?es do pa?s. A idade afeta o teor de emetina nas condi??es de cultivo agroflorestal, com maiores teores em plantas mais jovens, aos 16 meses de cultivo. Considerando as fontes de aduba??o, com e sem calagem, obteve-se maior altura de plantas e maior n? folhas/planta nos tratamentos que n?o receberam calagem, entretanto, obteve-se melhores resultados para n? ra?zes/planta nas ?reas com calagem. Para o ac?mulo de massa seca de raiz, parte comercial da planta, os tratamentos com nitrog?nio, com e sem calagem, promoveram as maiores m?dias. Os teores de emetina foram maiores nos tratamentos sem calagem e submetidas ? aduba??o com pot?ssio.

A espécie endêmica G. elliptica R. E. Fries não apresentava estudos fitoquímicos e biológicos detalhados na literatura. Assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar a composição química e as propriedades biológicas dos óleos essenciais, extratos brutos, alcaloides totais, tortas, frações das tortas, amostras isoladas dessa espécie. O material vegetal foi coletado em Paranapiacaba (Santo André, SP, Brasil). O óleo essencial extraído das folhas por destilação à vapor apresentou um rendimento de 0,2%. A análise histológica das folhas encontrou óleo em células oleíferas localizadas no parênquima esponjoso. A composição do óleo (CG-EM) indicou espatulenol e óxido de cariofileno como compostos majoritários. Os alcaloides totais foram obtidos dos extratos brutos das folhas e dos galhos e analisados por CG-EM, identificando quatro aporfinas (nornuciferina, estefarina, corituberina e asimilobina) e duas protoberberinas (discretamina e caseadina). Os alcaloides totais foram fracionados em coluna cromatográfica ou por Extração em Fase Sólida e purificados por cromatografia em camada preparativa, originando duas amostras (Amostra 9 e 10). Na Amostra 9, foram identificados dois alcaloides aporfinicos nornuciferina e asimilobina (CG-EM e RMN-1H). Na Amostra 10, foram identificados (LC-EM/EM) cinco alcaloides aporfínicos (desidronantenina, glaunidina, liriodenina, N-óxido de oliverina e telikovina) e um alcaloide protoberberínico (caseadina). Caseadina, glaunidina, N-óxido de oliverina e telikovina não foram previamente identificados em Guatteria. Os resíduos dos extratos brutos livres de alcaloides foram fracionados pelo método de partição com solventes de polaridade crescente. Os extratos brutos e as frações acetato de etila e butanólicas de folhas e galhos apresentaram flavonoides (NP-PEG). Nos ensaios biológicos, a melhor atividade antioxidante (sequestro do radical DPPH) foi encontrada para a fração clorofórmica dos galhos (EC50=24,25±1,14 &#181;g/mL) e a torta dos galhos (EC50=26,23±4,20 &#181;g/mL). No ensaio antimicrobiano pelo método turbidimétrico a atividade mais importante foi obtida contra Staphylococcus aureus (ATCC 6538) para os alcaloides totais dos galhos (CIM/CBM=0,12±0,01/0,26 mg/mL) e das folhas (CIM/CBM=0,21±0,01/0,28 mg/mL), e fração hexânica das folhas (CIM/CBM=0,24±0,02/>1 mg/mL). Uma alta atividade antitumoral foi observada frente a células humanas de mama (MCF-7) para Amostra 10 (IC50=2,28±0,18 &#181;g/mL), fração de acetato de etila das folhas (IC50=4,47±0,40 &#181;g/mL), óleo essencial (IC50=7,01±0,23 &#181;g/mL) e os alcaloides totais das folhas (IC50=9,32±0,36 &#181;g/mL). Para as células de próstata (PC-3), foi encontrada atividade para a Amostra 10 (IC50=1,37±0,36 &#181;g/mL) e o óleo essencial (IC50=5,32±0,35 &#181;g/mL). A futura aplicação dos extratos e frações de G. elliptica como um agente antitumoral parece ser segura, pois mantiveram uma viabilidade celular maior do que 90% no ensaio de citotoxicidade com culturas de fibroblasto murino (BALB/c 3T3, ATCC CCL-163) nas concentrações onde a atividade antitumoral foi promissora (<30 &#181;g/mL) contra MCF-7 e/ou PC-3. / The endemic species G. elliptica R. E. Fries had not yet been thouroughly investigated phytochemically and biologically. Therefore, the objective of this work was to evaluated the chemical and biological properties of the G. elliptica essential oils, crude extracts, alcaloid-free extracts, total alcaloids, fractions and isolated samples. The plant material was collected in Paranapiacaba (Santo Andre, SP, Brazil). The leaves essential oil, was obtained by hydrodestillation with a yield of 0.2%. In the leaves, the oil was found in secretory cells, located in the spongy parenchyma. The oil analysis (GC-MS) identified spathulenol and caryophyllene oxide as major compounds. The total alkaloids were extracted from the leaves and branches crude extracts and analysed by GC-MS, identifying four aporphines (nornuciferine, stepharine, corytuberine, assimilobine) and two protoberberines (discretamine and caseadine). Total alkaloids were fractionated by column chromatography or solid phase extraction and purified by preparative thin layer chromatography affording two samples (Sample 9 and 10). In Sample 9, two aporphin alkaloids were found and identified (GC-MS and 1H-NMR) as nornurciferine and assimilobine. In Sample 10, were identified (LC-MS/MS) five aporphin alkaloids (dehydronantenine, glaunidine, liriodenine, N-oliverine oxide and telikovine) and one protoberberine alkaloid (caseadine). Caseadine, glaunidine, oliverine N-oxide and telkovine were not previously reported for Guatteria. The alkaloids-free extracts were fractionated using the increasing polarity solvents. Concerning the biological activities, the highest antioxidant activity (DPPH scavenging) was reported for the branches chloroform fraction (EC50=24.25±1.14 &#181;g/mL) and (EC50=26.23±4.20 &#181;g/mL) alkaloid-free extract. In the turbimetric antimicrobial assay against, the most important activity was found against Staphylococcus aureus (ATCC 6538) for the total alkaloids from branches (MIC/MBC=0.12±0.01/0.26 mg/mL) and leaves (MIC/MBC=0.21±0.01/0.28 mg/mL) and for the leaves hexane fraction (MIC/MBC=0.24±0.02/>1 mg/mL). The highest antitumor activity against human breast cancer cell line (MCF-7) was observed for Sample 10 (IC50=2.28±0.18 &#181;g/mL), leaves ethyl acetate fraction (IC50=4.47±0.40 &#181;g/mL), essential oil (IC50=7.01±0.23 &#181;g/mL) and leaves total alkaloids (IC50=9.32±0.36 &#181;g/mL). For the prostate cancer cell line (PC-3), the most active samples were Sample 10 (IC50=1.37±0.36 &#181;g/mL) and the essential oil (IC50=5.32±0.35 &#181;g/mL). The future application of G. elliptica extracts and fractions as an antitumor agent appears to be safe, because cell viability remained higher than 90% in the cytotoxicity assay with murine fibroblast cultures (BALB/c 3T3, ATCC CCL-163), in the concentration range where the best antitumor activity (<30 &#181;g/mL) against MCF-7 and PC-3 was found.

Made available in DSpace on 2015-04-11T13:38:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jeffeson A Morais.pdf: 2060043 bytes, checksum: b9d3c15f32e3cf6df972ecfe5a083b5d (MD5) Previous issue date: 2012-06-27 / Geissospermum argenteum Woodson (Apocynaceae), known as acariquara-branca is popularly used to treat malaria, gastrointestinal disorders and as curare. Considering that there are no published data reporting the pharmacological activities of this species, the aim of this work was to study the cardiovascular effects of Amazonian G. argenteum in rodents. The bark was extracted with ethanol in Soxhlet apparatus generating the hydroalcoholic extract (EHA). The EHA was partitioned with chloroform in different pH, yielding the chloroform fraction (FCHCl3); further partition yielded the total alkaloids fraction (TAF). FCHCl3 purification in silica gel column chromatography (CC) yielded thirteen fractions. FAT standardization in HPLC showed nine major peaks with retention times from 3.5 to 23.5 min. FAT oral administration did not indicate a central nervous system action, however, curare-like effect was observed after i.p. and i.v. injections. This action was confirmed in vitro. FAT (10, 30 and 100 μg/mL) blocked rat diaphragm contractions induced by phrenic nerve electrical stimulation. The neuromuscular blockade was proportional to the concentrations and was reverted by washing, but not by neostigmine (10-5M). On the same concentrations, contractions induced by direct electrical stimulation were potentiated in rat diaphragm. In anesthetized rats under mechanical respiration, FAT intravenous injection (0.3; 1.0 and 3.0 mg/kg) produced fast and reversible hypotension, not blocked by atropine (1.0 mg/kg). In anesthetized animals treated with the nicotinic ganglion blocker hexamethonium, hypertension induced by FAT was not changed by previous prazosin (1.0 mg/kg) injection, indicating that FAT hypertensive effect is not caused by an increase in noradrenaline (Nor) release by ganglion stimulation. FAT did not alter Nor or acetylcholine (ACh) effects on the blood pressure, indicating that there was not an apparent interaction among the alkaloids and α1, M2 or M3 receptors. On another protocol, FAT inhibited the hypertension induced by the ganglion stimulant DMPP; this effect could due to ganglion blockade and decreased Nor release at sympathetic nerve terminals which could also explain bradycardia and hypotension induced by FAT. In rat isolated atria, FAT (10, 30 and 100 μg/mL), caused negative chronotropism and positive inotropism. In rat papillary muscle, the effective refractory period was not altered, indicating that FAT did not interfere with the cardiac action potential. In rat isolated aorta, FAT (1.0; 3.0 and 10 μg/mL) produced endothelium- independent vasodilatation and shifted Nor cumulative concentration-response curve to the right, without inhibiting the agonist maximal response. This effect indicated α1-adrenergic receptors competitive blockade. Blockade of L-type calcium channel by FAT was not confirmed in cultured cardiac and uterus cells using the FURA-4 method to measure calcium influx. In rat vas deferens (DDR), FAT (10, 30 and 100 μg/mL) shifted Nor and ACh cumulative concentration-response curves to the right and potentiated the maximal effects. The results indicated many different activities of the total alkaloid fraction of G. argenteum: competitive α1-adrenergic receptors blockade and a non-competitive muscular nicotinic receptor blockade; positive inotropism and diaphragm twitch potentiation unrelated to potassium channel blockade during the muscle fiber repolarization, no inhibition of the muscle Ca+2-ATPase activity; potentiation of the rat vas deferens maximal responses to agonists is probably caused by intracellular second-messengers (IP3, DAG, PKC) activation, although no direct data confirm this possibility. / Geissospermum argenteum Woodson (Apocynaceae), conhecida como acariquara-branca, é utilizada popularmente para tratar malária, desordens gastrintestinais e como curare. Considerando o reduzido número de publicações científicas relatando a atividade farmacológica da espécie, o objetivo desse trabalho foi estudar os efeitos cardiovasculares de G. argenteum da Amazônia em roedores. O pó das cascas do caule foi extraído em Soxhlet obtendo-se o extrato hidroalcoólico (EHA). O EHA foi particionado com clorofórmio em diferentes pH, dando origem à fração clorofórmica (FCHCl3), e esta, à fração contendo os alcaloides totais (FAT). A purificação da FCHCl3 por cromatografia em coluna (CC), gerou 13 frações semipurificadas. A padronização da FAT em CLAE a 260 nm mostrou 9 picos principais com tempos de retenção que variaram de 3,5 a 23,5 min. A administração oral da FAT (10 a 100 mg/kg) não indicou ação central, no entanto, foram observados efeitos indicativos de ação curarizante quando administrados por via i.p. e e.v. Essa ação foi confirmada in vitro. A FAT (10 a 100 μg/mL) bloqueou as contrações do diafragma de rato induzidas por estímulo elétrico do nervo frênico. O bloqueio neuromuscular foi proporcional às concentrações e revertido após lavagem, mas não pela neostigmina (10-5 M). Nas mesmas concentrações, as contrações induzidas por estimulação direta das fibras do diafragma foram potenciadas. Em ratos anestesiados e sob respiração artificial, a injeção endovenosa da FAT (0,3 a 3,0 mg/kg) produziu hipotensão rápida e reversível, não bloqueada pela atropina (1,0 mg/kg). Em animais anestesiados e tratados com hexametônio, a hipertensão produzida pela FAT (2,0 mg/kg) não foi alterada pelo prazosin (1,0 mg/kg), indicando que o efeito hipertensor da FAT não é pelo aumento na liberação de noradrenalina (Nor) por estimulação ganglionar. A FAT (1,0 mg/kg) também não alterou os efeitos pressóricos produzidos pela Nor ou acetilcolina (ACh), indicando que não houve interação aparente dos alcaloides com receptores α1 dos vasos e, muscarínicos do coração (M2) e vasos (M3). Em outro protocolo, a FAT inibiu a hipertensão produzida pela maior dose do DMPP, que pode ter sido por redução na liberação da Nor por um bloqueio nicotínico ganglionar da FAT. Esse efeito também poderia explicar a bradicardia produzida simultaneamente ao efeito hipotensor da FAT. Em átrios isolados de rato, a FAT (10 a 100 μg/mL) produziu cronotropismo negativo e inotropismo positivo. Em músculo papilar de rato, o período refratário efetivo não foi alterado, indicando que a FAT não interfere com o potencial de ação cardíaco. Na aorta isolada de rato, a FAT (1,0 a 10 μg/mL) produziu vasodilatação independente do endotélio vascular e deslocamento da curva-cumulativa de Nor para a direita, sem diminuição do efeito máximo, indicando bloqueio competitivo dos receptores α1-adrenérgicos ou bloqueio do influxo de cálcio por canais do tipo L. No entanto, a FAT não inibiu o influxo de cálcio em culturas celulares com o método do Fura-4. Em ducto deferente de rato (DDR), a FAT (10 a 100 μg/mL) deslocou a curva-cumulativa de Nor para a direita e potenciou o efeito contrátil máximo produzido pela Nor e ACh. Os resultados obtidos mostraram muitos efeitos diferentes produzidos pela FAT da G. argenteum: bloqueio competitivo de receptores α1-adrenérgicos não-competitivo de receptores nicotínicos musculares; aumento do inotropismo e potenciação da contração do diafragma, não explicados por um bloqueio de canais de potássio durante a repolarização celular, nem por inibição da atividade da Ca+2-ATPase muscular. A potenciação do efeito máximo dos agonistas no DDR parece ser por ativação de segundos mensageiros intracelulares (talvez IP3, DAG ou PKC), mas não existem dados comprobatórios dessa ação.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-10-09T15:01:20Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Aline Pereira Moraes - 2013.pdf: 2375025 bytes, checksum: edebdd82c526094db969a19e855e1017 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-10-09T15:30:41Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Aline Pereira Moraes - 2013.pdf: 2375025 bytes, checksum: edebdd82c526094db969a19e855e1017 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-09T15:30:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Aline Pereira Moraes - 2013.pdf: 2375025 bytes, checksum: edebdd82c526094db969a19e855e1017 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-05-03 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The use of natural products and their synthetic derivatives has been a relevant strategy in the development of novel medicines. Phytochemical studies and synthesis of natural-product-based libraries are primordial in the search for therapeutic agents. Previous phytochemical studies of genus Psychotria (Rubiaceae) have resulted in the identification of polypyrrolidine indole and monoterpenoid indole alkaloids, which present a broad range of biological activities, such as antifungal and inhibition of monoamine oxidases (MAOs) A e B, that are related to neurodegenerative diseases. This study aims to evaluate the phytochemical composition of the aerial parts of Psychotria sp. collected in Brazilian Cerrado. Fractionation of the crude extract by column chromatography on silica gel and Sephadex led to isolation of three known indole alkaloids: bahienoside A, desoxycordifoline and desoxycordifolinic acid. Additionally, thiohydantoins and thioureas were synthesized from amino acids and R- (+)-limonene, in order to assess the cooperative effect of indole nucleus combined with terpene, thiourea and thiohydantoin units. Preliminary tests showed that desoxycordifoline, hydantoin (20) and thiohydantoin necrostatin-1 (14) inhibit the enzyme MAO-A higher than 80% at concentrations of 175 mM, 100 mM, 386 mM, respectively. Also, the polar extracts of the leaves of Psychotria sp. showed antioxidant activity with IC50 < 50 mg.mL-1 measured by DPPH free radical scavenging assay. / O uso de produtos naturais e seus derivados sintéticos tem sido uma relevante estratégia no desenvolvimento de novos medicamentos. Estudos fitoquímicos e derivatização de produtos naturais são fundamentais na busca por protótipos de fármacos. Estudos fitoquímicos anteriores do gênero Psychotria (Rubiaceae) resultaram na identificação de alcaloides indólicos monoterpênicos e pirroloindólicos. Essas classes de compostos são associadas a um amplo espectro de atividades biológicas, tais como antifúngica e de inibição de enzimas monoaminoxidases A e B (MAOs) relacionadas a doenças neurodegenerativas. Assim, esse trabalho teve como objetivo realizar o estudo fitoquímico das partes aéreas de Psychotria sp., presente no cerrado goiano. O fracionamento do extrato bruto por cromatografia em coluna em sílica gel e Sephadex resultou no isolamento de três alcaloides indólicos conhecidos: bahienosida A, desoxicordifolina e ácido desoxicordifolínico. Neste trabalho, tiohidantoínas e tioureias derivadas do R-(+)-limoneno e de aminoácidos, tais como o triptofano, foram sintetizadas, com o intuito de avaliar o efeito cooperativo do núcleo indólico combinado com as unidades terpênica, tioureia e tiohidantoína na ação antifúngica e de inibição das enzimas MAOs. Testes preliminares mostraram que desoxicordifolina, hidantoína (20) e tiohidantoína necrostatina-1 (14) inibem a enzima MAO-A acima de 80% nas concentrações de 175 μM, 100 μM, 386 μM, respectivamente. Ainda, os extratos polares das folhas de Psychotria sp mostraram atividade antioxidante com CI50 < 50 mg.mL-1 pelo método de captura dos radicais DPPH.

Submitted by Celso Magalhaes (celsomagalhaes@ufrrj.br) on 2017-09-08T13:08:22Z No. of bitstreams: 1 2016 - Renata Duarte Fernandes.pdf: 6635666 bytes, checksum: ab405bd813ed887b89c988abc6b8f7ea (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-08T13:08:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016 - Renata Duarte Fernandes.pdf: 6635666 bytes, checksum: ab405bd813ed887b89c988abc6b8f7ea (MD5) Previous issue date: 2016-12-13 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / This work describes the isolation and structural determination of special metabolites isolated from leaf and stem of J. wasshauseniana (Acanthaceae), popularly known as a coati tail, which was collected in the Paracambi, RJ; Leaves and stem of T. acutifolia (Malpighiaceae), popularly known as cip?-ro?o, were collected in the Barra do Pira?-RJ and leaf and bark of L. lactescens (Malpighiaceae), popularly known as lain of lold, was collected on the campus of the Federal Rural University of Rio de Janeiro Campus Serop?dica RJ. Some chemical and biological activities of extracts of the last species were evaluated. Chromatographic fractionation of leaf and stem extracts from the Justicia wasshauseniana (Acanthaceae), from the leaf and stem of Tetrapterys acutifolia (Malpighiaceae), and from the leaves and bark of Lophanthera lactescens (Malpighiaceae) besides analysis of fractions by chromatographic and spectroscopic techniques led to the isolation and identification of constituents of different classes of special metabolites. including new alkaloids from J. wasshauseniana. From the leaves and stem of J. wasshauseniana were identified a triglyceride with the unsaturated acyl moiety, an unsaturated carboxylic acid, a mixture of steroids (?-Sitosterol, estigmasterol and campesterol) and glycosyl steroids (3-O-?-D-glucopyranosylsitosterol and 3-O-?-D-glucopyranosylstgmasterol), a disaccharide (?-D-glucopyranosyl-O-?-D-fructofuranoside (Sucrose) and the alkaloids acid (N-fenil-o-metileno-O-5)-3-hidroxi-5-carboxy??-lactam, and N(fenil-o-metileno-O-5)-3-hidroxi-5-(carboxilato de 2,3-dihidroxipropionila)-?-lactama), described for the first time in the literature. From the leaves and stem of T. acutifolia were identified a mixture of sitosterol, stigmasterol, 5,6-dihydro-sitosterol. and 5,6-dihydro-20-21,22-23,24-28,25-26-campesterol, ascorbic acid, in addition to sucrose and an ecdysteroid, 2S,3R,5R,9R,10R,13R,14S,17S,20S-2,3,14,20,24,25-hexahidroxicolest-7-en-6-ona (Pinatasterone). The extracts from the leaves and barks of L. lactescens, besides the mixture of sitosterol, stigmasterol and campesterol, was isolated the nortriterpene known as coreolidene. Besides to confirm the structure correction proposed in the literature of this nortriterpene, the absolute stereochemistry was defined as methyl 4R,5R,6R,7S,8S,9S,10S,13R,14S,15S,16R,17S,18R,21S,22S-friedelan-1,2-en-3-carboxy-24- 5- [1-acetoxy-ethylidene] -6,7,15,16-tetracetoxy-18-hydroxy-21,22-oxy-29-methylene-30-carboxylate. The structures were defined through analysis of IR, 1D and 2D NMR, mass spectra and circular dichroism besides some methyl and acetyl derivatives. The methanolic extracts from the stem and leaves of J. wasshausseniana and the methanolic extracts and fractions of the stem and leaves of T. acutilfolia were tested against the free radicals of DPPH. The extract from the stem of J. wasshausseniana was more active than leaf extract. The fraction of hexane from the leaves of T. acutilfolia did not present a good antioxidant activity, a greater activity was observed for the ethyl acetate fraction of stem and leaves of this plant. The pharmacological tests of the antinociceptive and anti-inflammatory potentials of the L. lactescens bark methanolic extract and the methanolic extract of leaves of J. wassahueniana were carried out, in which they showed positive results in the tested activities. / Este trabalho descreve o isolamento e determina??o estrutural de metab?litos especiais isolados de folhas e caule de J. wasshauseniana (Acanthaceae), vulgarmente conhecida como rabo de quati, que foi coletada no Munic?pio de Paracambi, RJ; folhas e caule de T. acutifolia, conhecida vulgarmente como cip?-ru?o, coletado no munic?pio de Barra do Pira?-RJ e L. lactescens (Malpighiaceae), conhecida vulgarmente como Chuva-de-Ouro, coletado no campus da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro Campus Serop?dica RJ. Realizaram-se testes de atividade biol?gica de extratos das duas ?ltimas esp?cies. O fracionamento cromatogr?fico dos extratos de folhas e caule de Justicia wasshauseniana (Acanthaceae), de folhas e caule de Tetrapterys acutif?lia (Malpighiaceae), de folhas e cascas de Lophanthera lactescens (Malpighiaceae) e an?lise das fra??es atrav?s de t?cnicas cromatogr?ficas e espectrosc?picas conduziu ao isolamento e identifica??o de constituintes de diferentes classes de metab?litos especiais. Das folhas e caule de J. wasshauseniana foram identificados um triglicer?deo com a unidade acila insaturada, um ?cido carbox?lico insaturado, uma mistura dos ester?ides (?-sitostesterol, estigmasterol e campesterol) e a mistura de esteroides glicosilados, 3-O-?-D-glicopiranosilsitosterol e o 3-O-?-D-glicopiranosilestigmasterol, um dissacar?deo, ?-D-glicopiranosil-?-D-frutofuranos?deo (sacarose) e os alcal?ides ?cido-(N-fenil-o-metileno-O-5)-3hidroxi-5-carboxi??-lactama e N(fenil-o-metileno-O-5)-3-hidroxi-5-(carboxilato de 2,3-dihidroxipropionila)-?-lactama) que est?o sendo descritos pela primeira vez na literatura. Dos extratos de folhas e caule de T. acutifolia foram isolados uma mistura dos esteroides, sitostesterol, estigmasterol, 5,6-diidro-sitosterol e 5,6-diidro-20-21,22-23,24-28,25-26-octaidro-campesterol, o ?cido asc?rbico, al?m da sacarose e o ecdisteroide 2S,3R,5R,9R,10R,13R,14S,17S,20S-2,3,14,20,24,25-hexahidroxicolest-7-en-6-ona (Pinatasterona), desta enona que foi convertido em 2,3,24,25-tetraacetato atrav?s de tratamento com anidrido ac?tico e piridina. Dos extratos de folhas e cascas de L. lactescens, al?m da mistura de esteroides sitoesterol, estigmasterol e campesterol, foi isolado o nor-triterpeno conhecido como correolideo que, al?m da confirma??o da corre??o da estrutura registrada na literatura foi proposta a estereoqu?mica absoluta, sendo, entretanto definida como 4R,5R,6R,7S,8S,9S,10S,13R,14S,15S,16R,17S,18R,21S,22S-friedelan-1,2-en-3-carboxi-24-O-metileno-5-[1-acetoxi-etilideno]-6,7,15,16-tetracetoxi-18-hidroxi-21,22-oxi-29-metileno-30-carboxilato de metila. As estruturas foram definidas atrav?s de an?lise de espectros de IV, RMN 1D e 2D, massas e dicro?smo circular e, em alguns casos da prepara??o de derivados. Os extratos metan?licos de caule e de folhas de J. wasshausseniana e os extratos metan?licos e fra??es do caule e folhas de T. acutilfolia foram testados contra os radicais livres de DPPH. O extrato do caule de J. wasshausseniana apresentou melhor atividade do que o extrato de folhas. A fra??o de hexano de folhas de T. acutilfolia n?o apresentou uma boa atividade antioxidante, observando-se uma maior atividade para a fra??o de acetato de etila de caule e folhas. Realizaram-se os testes farmacol?gicos do potencial antinociceptivo e anti-inflamat?rio do extrato metan?lico de cascas de L. lactescens e extrato metan?lico de folhas de J. wassahueniana, no qual apresentaram resultados positivos nas atividades testadas