Os venenos de serpentes são ricos em proteínas, enzimas e peptídeos biologicamente ativos. Diversas enzimas tais como fosfolipases A2 (PLA2s), metaloproteases (MP), L-aminoácido oxidases (LAAOs) são responsáveis pelo quadro clínico do envenenamento ofídico. Atualmente, o isolamento e a caracterização funcional e estrutural destas enzimas têm auxiliado na compreensão do mecanismo de ação destas toxinas e nas formas alternativas de tratamento. Além disso, estas enzimas se tornaram valiosas ferramentas de aplicação biotecnológica, na busca de novos fármacos de interesse na clínica médica. O objetivo deste trabalho foi isolar e caracterizar bioquímica e funcionalmente a L-aminoácido oxidase do veneno de Bothrops atrox. O isolamento da LAAO de B. atrox (LAAOBatrox) envolveu três etapas cromatográficas: a exclusão molecular em Sephadex G-75, troca iônica em ES-502N utilizando CLAE e, por último, a cromatografia de afinidade com uso da Lentil-Lectina, conferindo um alto grau de pureza à proteína confirmado por SDS-PAGE. Após a caracterização bioquímica, a LAAOBatrox demonstrou ser uma glicoproteína com 12% de açúcar, massa molecular relativa de 67.000 e pI de 4,4 confirmando seu caráter ácido pela composição em aminoácidos, predominando Asx (Ácido aspártico ou asparagina) e Glx (Ácido glutâmico ou glutamina). LAAOBatrox apresentou especificidade de substrato para L-Met e L-Leu. Com o seqüenciamento dos peptídeos trípticos internos e em comparação com as LAAOs de outros venenos, a LAAOBatrox apresentou homologia de 100% com LAAOs isoladas de B. moojeni e B. jararacussu e apresentou sequenciamento N-terminal de ADDN-NPLEE-NIRRDD que é homólogo ao das LAAOs já descritas. A LAAOBatrox apresentou atividade edematogênica moderada quando comparada ao veneno bruto, atividade coagulante baixa sobre o plasma humano citratado, atividade de agregação plaquetária sendo que 25µg/mL foi capaz de agregar aproximadamente 100% de plaquetas, onde o efeito obtido pela proteína pode ser devido à liberação de H2O2, sendo que a catalase foi adicionada ao meio tratado com LAAOBatrox e o efeito de agregação plaquetária obtido foi próximo à 0%. LAAOBatrox apresentou efeito citotóxico sobre diferentes linhagens tumorais: B16F10 onde as células apresentaram 70% de morte por apoptose e PC12 que apresentaram uma viabilidade celular de 20% após o tratamento com a enzima. LAAOBatrox não apresentou efeito citotóxico significativo sobre células normais. Portanto, a LAAOBatrox consiste de uma enzima multifuncional que poderá servir como ferramenta para investigação dos processos celulares que estão envolvidos no envenenamento. / Snake venoms are rich in proteins, enzymes and biological active peptides. Many enzymes, like phospholipases A2, metalloproteinases, L-amino acid oxidases are responsible by clinical aspects of ophidian poisoning. Nowadays, isolation and the functional and structural characterizations of these enzymes have been useful to elucidate their mechanisms of action. Besides, these enzymes have great value for biotechnology on searching of new molecules for medicine development. The aim of this work was isolate Lamino acid oxidase from B. atrox venom (LAAOBatrox) and characterize biochemical and functionally LAAOBatrox. The isolation consisted of 3 chromatographic steps: molecular exclusion using a G-75 Sephadex column, ion exchange using ES-502N column in HPLC and affinity chromatography with Lentil-Lectin column. Afterward, LAAOBatrox was analyzed by SDS-PAGE to confirm an expected high purity level. Biochemical characterization showed LAAOBatrox is a glycoprotein of 12% sugar-containing with relative molecular weight of 67000, pI estimated in 4,4 pointing to acid character due to its amino acids composition, rich for Asx and Glx residues. LAAOBatrox displays high specificity to hydrophobic L-amino acids (best substrates: L-Met and L-Leu). The Nterminal amino acid sequence (ADDN-NPLEE-NIRRDD) and the internal peptide sequences showed close structural homology to other snake venom L-amino acid oxidades, presenting 100% homology to LAAO from B. moojeni and B. jararacussu. This enzyme induces moderate edema compared to crude venom, low coagulating activity in human plasma and 100% of in vitro platelet aggregation induction with 25 g/mL, but this can be due to H2O2 production by LAAOs once added catalase has inhibited aggregation induced by LAAOBatrox and the effect was close to 0%. LAAOBatrox presents citotoxicity effect for tumor cell lines: 70% of death by apoptosis in B16F10 and 20% cellular viability for PC12, after LAAOBatrox treatment. LAAOBatrox did not display citotoxicity effect in normal cells (peripheral blood mononuclear cells). Thus, LAAOBatrox is a multifunctional enzyme of huge potential for investigation of cellular processes involved on poisoning and also for developing new medicines.

A bactéria Listeria monocytogenes é reconhecida como um importante patógeno humano estando amplamente distribuída no ambiente e é responsável pela contaminação de alimentos crus e processados. O mecanismo de patogenicidade é determinado pela presença de genes no cromossomo da bactéria e entre eles estão os genes iap e hly que são essenciais para o mecanismo de invasão e atividade hemolítica do microorganismo, respectivamente. O obejtivo do presente estudo foi confirmar as cepas de L. monocytogenes usando a ténica de PCR para o gene hly e análise da variação nucleotídica do domínio central do gene iap, que é caracterizado pela presença de seqüências repetidas dos aminoácidos treonina e asparagina. Vinte e seis cepas de L. mnocytogenes, previamente isoladas de produtos lácteos e identificdas por métodos clássicos, se mostraram positivas para a PCR espécie-específico e então submetidas à determinação da seqüência nucleotídica. Os resultados mostraram variações na seqüência nucleotídica contendo substituições, inserções, deleções e um número de seqüências similares entre as cepas isoladas e a cepa controle EGD-e. Vinte e três cepas exibiram a mesma deleção que compreende 24 pares de bases dentro da seqüência de repetição e alterações similares na proteína traduzida. Apenas três cepas mostraram tamanhos diferentes de deleções e diferentes alterações na proteína. De acordo com estes resultados, a maioria das cepas apresentou uma característica molecular comum, diferentes da cepa padrão e este perfil predominante pode ser considerado como a característica das L. monocytogenes isoladas de produtos lácteos no Sul do Brasil. / The bacterium Listeria monocytogenes is recognized as an important human pathogen being omnipresent in the environment and is responsible for contamination in raw and processed foods. The mechanism of pathogenicity is established by presence of some genes on chromosome of bacteria between them, iap and hly genes that are essential to the invasion mechanism and hemolytic activity of microorganism, respectively. The aim of present study was confirm the strain L. monocytogenes using PCR to hly gene and analysis the nucleotide variability of central domain of iap gene characterized by the presence of similar sequences of threonine and asparagine amino acids. Twenty-six strains previously isolated from dairy products and classified by classic methods to L. monocytogenes were positive to specie-specific PCR and than submitted to nucleotide sequence determination. The results showed a sequence variation containing nucleotide substitutions, insertions, deletions and a number of repeated sequences among the isolates and control strain EGD-e. Twenty-three strains exhibited the same gap that includes a deletion of 24 base pairs inside of the repeated sequence and similar alterations in the translated protein. Just three strains showed different sizes of gaps and different protein alterations. According to these results, the majority strains displayed a common molecular characteristic different from the strain pattern and this predominant profile can be considerate as characteristic to L. monocytogenes isolated from dairy products in South Brazil.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-11-10T16:47:50Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 418192 bytes, checksum: f2442c658d7ac9d73211a536f7f873ff (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-10T16:47:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 418192 bytes, checksum: f2442c658d7ac9d73211a536f7f873ff (MD5) Previous issue date: 2005-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A anemia por deficiência de ferro atinge aproximadamente 36 % da população mundial, sendo crianças e gestantes os grupos mais vulneráveis. O leite bovino, alimento geralmente presente na alimentação de crianças, apresenta baixo teor e baixa biodisponibilidade de ferro. O trabalho objetivou estudar o enriquecimento de leite em pó destinado principalmente às entidades (creches e escolas) e aos programas institucionais de suplementação alimentar, para alimentação de crianças. O leite em pó foi enriquecido com duas fontes diferentes de ferro: sulfato ferroso e ferro aminoácido quelato. As fontes de ferro foram adicionadas antes e após a secagem do leite. Ao leite tipo pasteurizado foi adicionado 1,5 mg de ferro por 100 mL de leite, seguido de concentração até redução de 50 % do volume e secagem em spray-dryer. Ao leite em pó foram adicionados 12 mg de ferro por 100 g de leite em pó, de forma que após reconstituição, 100 mL do produto pronto para consumo forneça 1,5 mg de ferro, equivalente a 15 % das recomendações diárias para crianças. Foram estudadas as características físico-químicas, a estabilidade oxidativa e a biodisponibilidade das fontes de ferro. A estabilidade oxidativa foi avaliada pelo índice de ácido tiobarbitúrico (TBA). A biodisponibilidade do ferro foi avaliada pelo método in vitro baseado na solubilidade do ferro em pH 7,5 após digestão com pepsina. Quanto à forma de enriquecimento, não houve diferença entre as características estudadas. Ambos os processos tecnológicos mostraram-se simples e de fácil execução em laboratório. Não houve diferença entre as duas fontes de ferro nas características físico-químicas de acidez, umidade, teores de lipídios, proteínas, lactose, cinzas e sedimentos. A estabilidade oxidativa do leite enriquecido foi maior quando se utilizou ferro aminoácido quelato e ambas as fontes diferiram do controle. O ferro aminoácido quelato apresentou maior biodisponibilidade in vitro (31,81 %) que o sulfato ferroso (17,41 %). A biodisponibilidade in vivo, deduzida, foi de 15,45 % para o ferro aminoácido quelato e de 8,66 % para o sulfato ferroso. O ferro aminoácido quelato mostrou ter melhor estabilidade oxidativa e melhor biodisponibilidade comparado com o sulfato ferroso, sendo uma boa fonte para o enriquecimento do leite em pó. / Anemia, due to lack of iron, reaches approximately 36 % of world population; the most vulnerable are children and expectant mothers. Bovine milk, food often used for feeding children, has low rate and bioavailability of iron. The objective of this work is to study the enrichment of powdered milk, principally intended for institutions (kindergartens and schools) and nutritive supplement programs for feeding children. Powdered milk was enriched with two different sources of iron: ferrous sulfate and aminoacid chelate iron. Iron sources were added before and after milk drying. 1.5 mg of iron per 100 ml of milk were added to pasteurized milk type C, following a concentration of milk to get a reduction of 50 % from its volume, and drying in spray- dyer. 12 mg of iron were added per 100 g of powdered milk in order to obtain, after milk reconstitution, 1.5 mg of iron per 100 ml of final product that is ready to use, equal to 15 % of the recommended daily intake for children. Physical and chemical characteristics were studied, as well as oxidative stability and bioavailability of sources of iron. Oxidative stability was assessed by the thiobarbituric acid (TBA) rate. Iron bioavailability was assessed by using an in vitro method, based on iron solubility at pH 7,5, after digestion with pepsine. Regarding the way of enrichment, differences were not found. Both technological processes were simple and easy to perform in the laboratory. Differences between the two sources of iron were not found, in terms of physical and chemical characteristics of acidity, humidity, and lipids, proteins, lactose, ash and sediment rates. Oxidative stability of powdered milk was greater when aminoacid chelate iron was used and both sources differed from the control. Aminoacid chelate iron showed greater bioavailability in vitro (31,81 %) than ferrous sulfate (17,41 %). The bioavailability deduced in vivo, was 15.45 % for aminoacid chelate iron and 8.66 % for ferrous sulfate. Aminoacid chelate iron revealed better oxidative stability and better bioavailability compared to ferrous sulfate, being a good source to enrich powdered milk.

O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito da suplementação de níveis crescentes de colina e de aminoácidos sulfurados totais (AST) digestíveis em uma dieta de milho e proteína isolada de soja, sobre o desempenho produtivo, bem como a ocorrência de deformidades e desvios nas patas e fígado gorduroso de frangos de corte. Foram alojados 525 frangos de corte, machos Cobb 500, de um dia de idade, em 75 gaiolas experimentais. As aves foram distribuídas em um delineamento inteiramente casualizado com 15 tratamentos, 5 repetições e 7 aves por unidade experimental. Foi utilizada uma dieta basal semipurificada com 74% de milho (736 ppm de colina) e esta foi suplementada utilizando um arranjo fatorial 3 x 5 com 3 níveis de AST digestíveis em relação à lisina digestível (70, 75 e 80%) e 5 níveis de suplementação de colina (0, 700, 1.400, 2.100 e 2.800 ppm). Foi utilizado um programa alimentar de 2 fases: pré-inicial (1 a 7 d) e inicial (8 a 21 d). Ganho de peso (GP), consumo de ração e conversão alimentar (CA) foram avaliados aos 7, 14 e 21 d. Aos 21 d, as aves foram avaliadas para perose, valgus, varus e tibia rotada na articulação tibio matatarsal, os fígados foram avaliados macroscopicamente (coloração, tamanho e consistência) e quanto ao seu teor de extrato etéreo. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey. Regressões lineares e quadráticas foram estimadas para as variáveis de desempenho produtivo e a resposta máximada de suplementação de colina foi estimada. Não houve interação entre AST digestíveis e colina, também não houve diferença entre os níveis de AST digestíveis (P>0,05). O GP dos frangos alimentados com níveis crescentes de colina aumentou quadraticamente (P<0,05) de 1 a 7 d, 8 a 14 d, 1 a 14 d, 15 a 21 d e 1 a 21 d e a CA diminuiu quadraticamente (P<0,05) 1 a 14 d e 1 a 21 d. No período de 1 a 7 d, 8 a 14 d e 15 a 21d foram estimadas exigências de 2.700, 2.907 e 3.105 ppm para GP. De 1 a 14 d e 1 a 21 d, as exigências foram de 2.875 ppm e 2.925 ppm para GP, e 2.938 ppm e 2.849 ppm para CA. Os tratamentos que não receberam suplementação de colina apresentaram maior ocorrência de varus e tibia rotada (P<0,05), quando comparados aos outros níveis de colina, não houve diferença entre os níveis de colina para valgus. Os níveis de colina em que houve o melhor GP e CA para frangos foram determinados como 2.925 ppm e 2.849 ppm para as fases iniciais. Considerando-se uma ração de milho e farelo de soja (1.500 ppm de colina), 1.425 e 1.349 ppm de suplementação de colina são apropriados para melhorar a performance de frangos de corte de 1 a 21 d. Esses valores são superiores às recomendações prévias para as fases iniciais (500 ppm). / The objective of this study was to evaluate growth performance, the occurrence of leg deformity and deviations and fatty liver of broilers fed a corn and soy protein isolate diet supplemented with increasing levels of choline and digestible total sulfur amino acid (TSAA). A total of 525 one-day-old Cobb 500 chicks were distributed in a completely randomized design in 75 battery cages, 15 treatments, and 7 birds per cage. A 74% corn semi-purified basal diet (736 ppm of choline) was supplemented using a 3 x 5 factorial arrangement with 3 levels of digestible TSAA ratio to digestible lysine (70, 75 and 80%) and 5 levels of choline supplementation (0; 700; 1,400; 2,100, and 2,800 ppm). A 2-phases feeding program was used: pre-initial (1 to 7 d) and initial (8 to 21 d). Body weight gain (BWG), feed intake and feed conversion ratio (FCR) were evaluated at 7, 14 and 21 d. At 21 d all birds were evaluated for perosis, valgus, varus and rotated tibia in tibiometatarsal joint, livers were evaluated macroscopically (color, size, and consistency) and for fat content. Data were submitted to analysis of variance and means were compared by the Tukey test. Performance data were fitted to linear and quadratic polynomial regressions and the maximum response of choline supplementation was estimated. No interactions between digestible TSAA and choline were observed, also no differences among digestible TSAA levels (P>0.05). The BWG of broilers fed diets with increasing levels of choline increased quadratically (P<0.05) from 1 to 7 d, 8 to 14 d, 1 to 14 d, 15 to 21 d, and 1 to 21 d, also FCR decreased quadratically (P<0.05) from 1 to 14 d and 1 to 21 d. From 1 to 7 d, 8 to 14 d, and 15 to 21d quadratic regression estimated requirements as 2,700, 2,907, and 3,105 ppm for BWG. From 1 to 14 d and 1 to 21 d, quadratic regression estimates were 2,875 ppm and 2,925 ppm for BWG, and 2,938 ppm and 2,849 ppm for FCR. Treatments with no supplementation of choline had higher occurrence of varus and rotated tibia (P<0.05) compared to the other levels of choline. There was no difference for valgus deviation. Choline level that provided better BWG and FCR responses were determined as 2,925 and 2,849 ppm for starter phases, respectively. Considering a corn-soybean meal common diet (1,500 ppm of choline), 1,425 and 1,349 ppm of choline inclusions are appropriate to improve BWG and FCR response for broilers from 1 to 21 d, which are above previous recommendation for starter phases (500 ppm of choline).

A bactéria Listeria monocytogenes é reconhecida como um importante patógeno humano estando amplamente distribuída no ambiente e é responsável pela contaminação de alimentos crus e processados. O mecanismo de patogenicidade é determinado pela presença de genes no cromossomo da bactéria e entre eles estão os genes iap e hly que são essenciais para o mecanismo de invasão e atividade hemolítica do microorganismo, respectivamente. O obejtivo do presente estudo foi confirmar as cepas de L. monocytogenes usando a ténica de PCR para o gene hly e análise da variação nucleotídica do domínio central do gene iap, que é caracterizado pela presença de seqüências repetidas dos aminoácidos treonina e asparagina. Vinte e seis cepas de L. mnocytogenes, previamente isoladas de produtos lácteos e identificdas por métodos clássicos, se mostraram positivas para a PCR espécie-específico e então submetidas à determinação da seqüência nucleotídica. Os resultados mostraram variações na seqüência nucleotídica contendo substituições, inserções, deleções e um número de seqüências similares entre as cepas isoladas e a cepa controle EGD-e. Vinte e três cepas exibiram a mesma deleção que compreende 24 pares de bases dentro da seqüência de repetição e alterações similares na proteína traduzida. Apenas três cepas mostraram tamanhos diferentes de deleções e diferentes alterações na proteína. De acordo com estes resultados, a maioria das cepas apresentou uma característica molecular comum, diferentes da cepa padrão e este perfil predominante pode ser considerado como a característica das L. monocytogenes isoladas de produtos lácteos no Sul do Brasil. / The bacterium Listeria monocytogenes is recognized as an important human pathogen being omnipresent in the environment and is responsible for contamination in raw and processed foods. The mechanism of pathogenicity is established by presence of some genes on chromosome of bacteria between them, iap and hly genes that are essential to the invasion mechanism and hemolytic activity of microorganism, respectively. The aim of present study was confirm the strain L. monocytogenes using PCR to hly gene and analysis the nucleotide variability of central domain of iap gene characterized by the presence of similar sequences of threonine and asparagine amino acids. Twenty-six strains previously isolated from dairy products and classified by classic methods to L. monocytogenes were positive to specie-specific PCR and than submitted to nucleotide sequence determination. The results showed a sequence variation containing nucleotide substitutions, insertions, deletions and a number of repeated sequences among the isolates and control strain EGD-e. Twenty-three strains exhibited the same gap that includes a deletion of 24 base pairs inside of the repeated sequence and similar alterations in the translated protein. Just three strains showed different sizes of gaps and different protein alterations. According to these results, the majority strains displayed a common molecular characteristic different from the strain pattern and this predominant profile can be considerate as characteristic to L. monocytogenes isolated from dairy products in South Brazil.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Under practical breeding conditions, the pigs receive a sequence of diets during the growth and termination phase. The number of diets varies according to the nutritional and industrial aspects, where the most usual is to adopt programs containing between 3 and 5 diets. The length of time each diet is provided is based on the number of days it is assumed that the pigs will achieve a particular gain in body weight. However, there is variability in performance among individuals in a population and thus the use of a single diet program may not be the most appropriate both technically and economically. Thus, the objective of the study was to determine, through the simulation, the impact of diets programs and the variability among animals in lysine intake. The hypothesis of the study is that knowledge of variability allows the elaboration of diets that improve the utilization of resources. The study was performed simulating a population of castrated male pigs from 60 to 160 days of age. A population was generated by simulation from the Gompertz function in order to obtain different growth curves. A sample of the population represented by the light, medium and heavy pigs was taken. From the knowledge of the growth curve of the three categories was calculated the voluntary consumption and the metabolizable energy intake. Estimates for the calculation of lysine requirements were based on the factorial method. Three diets programs were established, the first containing three diets, the second four and third program with five diets. The lysine concentrations in the diets were based on the requirements of the heavy categorized pig and then applied to the light and medium animals. The comparison between the programs was performed considering the amount of lysine ingested and lysine excretion. In the simulation the amount of lysine ingested above the requirements was higher in the light animal followed by the medium and heavy and that the program containing 3 diets generated higher amounts of lysine than expected for the 3 categories of pigs. The lightweight swine ingested 1.1 pounds of lysine above what was needed to meet maintenance and production requirements. This value was 41 and 233% higher than those recorded with the medium and heavy pigs, respectively. The 3-diet program resulted in an intake of 0.81 kg of lysine above that required during the simulation period. Program 4, in turn, caused a consumption of 0.71 kg of lysine above the requirement, while program 5 the lysine ingested above the demand was 0.68 kg. The increase in the number of diets reduced the excess of ingested lysine, and this reduction will be greater the lower the population variability for the lysine requirement. / Em condições práticas de criação, os suínos recebem uma sequência de dietas durante a fase de crescimento e terminação. O número de dietas varia de acordo aos aspectos nutricionais e industriais, onde o mais usual é adotar programas contendo entre 3 e 5 dietas. O período de tempo que cada dieta é fornecida se baseia no número de dias que é assumido que os suínos vão conseguir um determinado ganho de peso corporal. No entanto existe variabilidade no desempenho entre os indivíduos em uma população e, assim o uso de um único programa de dietas pode não ser o mais adequado tanto técnica e economicamente. Dessa forma, o objetivo do estudo foi determinar, através da simulação, o impacto de programas de dietas e a variabilidade entre os animais na ingestão de lisina. A hipótese do estudo é de que o conhecimento da variabilidade permite elaborar planos de dietas que melhorem a utilização dos recursos. O estudo foi realizado simulando uma população de suínos machos castrados dos 60 aos 160 dias de idade. Foi gerada por meio de simulação uma população a partir da função de Gompertz de forma a obter diferentes curvas de crescimento. Foi retirada uma amostra da população representada pelos suínos leve, médio e pesado. A partir do conhecimento da curva de crescimento das três categorias foi calculado o consumo voluntário e a ingestão de energia metabolizável. As estimativas para o cálculo das exigências de lisina foram baseadas pelo método fatorial. Três programas de dietas foram estabelecidos, o primeiro contendo três dietas, o segundo quatro e terceiro programa com cinco dietas. As concentrações de lisina nas dietas foram baseadas nas exigências do suíno categorizado pesado e então aplicado aos animais leve e médio. A comparação entre os programas foi realizada considerando a quantidade de lisina ingerida e excreção de lisina. Na simulação a quantidade de lisina ingerida acima das exigências foi maior no animal leve seguido pelo médio e pesado e que o programa contendo 3 dietas gerou maiores quantidades de lisina acima do esperado para as 3 categorias de suínos. O suíno leve ingeriu 1,1 quilos de lisina acima do necessário para atender as exigências de manutenção e produção. Esse valor foi 41 e 233% superior aos constados com os suínos médio e pesado, respectivamente O programa de 3 dietas resultou em uma ingestão de 0,81 kg de lisina acima do necessário durante o período de simulação. O programa 4, por sua vez, provocou um consumo de 0,71 kg de lisina acima da exigência, enquanto o programa 5 a lisina ingerida acima da demanda foi de 0,68 kg. O aumento do número de dietas reduziu o excesso de lisina ingerida, e esta redução será maior quanto menor for a variabilidade da população para a exigência de lisina.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:54:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 196531 bytes, checksum: 00793dab89b8d4ee45d366f52e0d0f94 (MD5) Previous issue date: 2008-02-27 / The current study was aimed at evaluating the effect of digestible lysine levels in diet for Nile tilapia fingerlings (Oreochromis niloticus), of the thailand lineage based on the ideal protein concept in a 32 days trial. 432 Nile tilapia fingerlings with an average initial weight of 0.98 ± 0.03 g were allotted in a completely randomized design, with six treatments, six replications per treatment and twelve fish per experimental unit. The treatments had consisted of six isoenergetic (3.000 Kcal of DE/Kg of food) and isoproteic (39.14% of CP) diets with different levels of digestible lysine (1.50%, 1.66%, 1.82%, 1.98%, 2.14% and 2.30%). Feed intake, digestible lysine intake, weight gain, specific growth rate, survival rate, feed conversion, daily protein deposition rate, daily fat deposition rate, chemistry body composition (humidity, protein and fat content) and nitrogen retention efficiency were evaluated. The survival rate, body fat and humidity content, and body fat deposition on the fish was not affected by the level of digestible lysine of the diets. The increasing levels of lysine improved linearly the parameters of digestible lysine intake, feed conversion, body protein content and body protein deposition. However, the LRP (Linear Response Plateau) was the model which best fit the parameters of feed consumption, weight gain, specific growth rate and nitrogen retention efficiency, estimating at 2.06%, 2.17%, 2.14% and 2.12% the level of digestible lysine to maximize each of the parameters cited, respectively. It was concluded that the total and digestible lysine requirement for Nile tilapia fingerlings was 2,32% (0,773% / Mcal of DE) and 2,17% (0,723% / Mcal of DE), respectively, that correspond to a daily intake of 7,21 mg of total lysine and 6,67 mg of digestible lysine to meet the main parameters of performance (feed consumption, weight gain and specific growth rate) and carcass characteristics (nitrogen retention efficiency), when the ideal protein concept in the formulation of experimental diets was used. / Objetivando-se avaliar o efeito de níveis de lisina digestível em rações para alevinos de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus), linhagem tailandesa, com base no conceito de proteína ideal, realizou-se um experimento com duração de 32 dias. Foram utilizados 432 alevinos com peso inicial de 0,98 ± 0,03g, distribuídos em delineamento inteiramente casualizado composto por seis tratamentos, seis repetições e doze peixes por unidade experimental. Os tratamentos constaram de seis rações isoenergéticas (3000 Kcal de ED/Kg de ração) e isoprotéicas (39,14% de PB) com diferentes níveis de lisina digestível (1,50; 1,66; 1,82; 1,98; 2,14 e 2,30%). Os parâmetros avaliados foram: consumo de ração, consumo de lisina digestível, ganho de peso, taxa de crescimento específico, taxa de sobrevivência, conversão alimentar, taxas de deposição diária de proteína e gordura corporais, composição química corporal (teores de umidade, proteína e gordura corporais) e eficiência de retenção de nitrogênio. Não houve efeito do nível de lisina digestível das rações sobre a taxa de sobrevivência, umidade e porcentagem de gordura corporal e deposição de gordura corporal dos peixes. O aumento dos níveis de lisina digestível melhorou linearmente os parâmetros de consumo de lisina digestível, conversão alimentar, porcentagem de proteína corporal e deposição de proteína corporal. Entretanto, o LRP (Linear Response Plateau) foi o modelo de melhor ajuste para os parâmetros de consumo de ração, ganho de peso, taxa de crescimento específico e eficiência de retenção de nitrogênio, estimando em 2,06%, 2,17%, 2,14% e 2,12% o nível de lisina digestível para maximizar cada um dos parâmetros citados, respectivamente. Conclui-se que a exigência de lisina total e digestível em rações para alevinos de tilápia do Nilo é, respectivamente de 2,32% (0,773% / Mcal de ED) e 2,17% (0,723% / Mcal de ED), correspondente ao consumo diário de 7,21 mg de lisina total e 6,67 mg de lisina digestível, para atender aos principais parâmetros de desempenho (consumo de ração, ganho de peso e taxa de crescimento específico) e características de carcaça (eficiência de retenção de nitrogênio), utilizando-se o conceito de proteína ideal na formulação das rações experimentais.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:55:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 282426 bytes, checksum: 0bba7e07bd008cc488018a1726192fac (MD5) Previous issue date: 2006-07-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Two experiments were conducted to determine the requirement of digestible lysine for light-weight laying hens, during a period of 24 to 40 and from 42 to 58 weeks of age. 216 Hy-Line W36 light-weight laying hens were used. The test was arranged in blocks completely randomized with six treatments, six blocks and six hens per experimental unit, in each experiment. The treatments consisted of a basal diet, with 14.54% of crude protein, deficient in digestible lysine (0,545%), supplemented with six levels of L-lysine HCl (78%) 0.00; 0.059; 0.118; 0.177; 0.237 and 0,295%. Considering the digestibility of the lysine in 97,6%, the amount of L-lysine. HCl added in each diet supplied 0.00; 0.045; 0.090; 0.135; 0.180 and 0.225 of digestible lysine respectively, resulting in diets with 0.545; 0.590; 0.635; 0.680; 0.725 and 0.770% of digestible lysine. The following parameters were evaluated: feed intake (g/hen/day), egg production (%), medium egg weight (g), egg mass yield (g/hen/day), egg quality (Haugh Units, albumen and yolk Indices), egg components (% of peel, albumen and yolk indices) and final weight gain (g). The first experiment (24 to 40 weeks of age) had a lineal effect of the lysine levels for the variables diet consumption, lysine consumption, eggs production, medium egg weight, egg mass yield, feed conversion (kg feed/egg dozen), albumen index and final weight gain of the chickens. The feed conversion/egg mass yield presented a quadratic model different than the other variables that shows a non-significant effect. The requirement of digestible lysine was estimated in the minimum of 0.770% in the diet that correspond an intake of 759 mg of lysine digestible/hen/day or 14mg of lysine digestible/g of egg. In the second experiment (42 to 58 weeks of age) there was lineal effect of the lysine levels on the variables diet consumption, lysine consumption, feed conversion (kg feed/egg dozen), unit Haugh and albumen index. For production of eggs, mass of eggs and the feed conversion /egg mass yield was observed a quadratic model and for the other variables there was a nonsignificant effect. The digestible lysine requirement estimated by the quadratic model was 0.759% in the diet that correspond an intake of 788 mg of lysine digestible/hen/day or 15mg of lysine digestible/g of egg for light-weight laying hens. / Dois experimentos foram conduzidos no setor de Avicultura do Departamento de Zootecnia, da Universidade Federal de Viçosa, objetivando-se determinar a exigência de lisina digestível para poedeiras leves nos períodos de 24 a 40 e de 42 a 58 semanas de idade. Foram utilizadas 216 poedeiras Hy-Line W36 em um delineamento em blocos casualizados com seis tratamentos, seis blocos e seis aves por unidade experimental, em cada experimento. Os tratamentos consistiram em uma ração basal, com 14,54% de proteína bruta, deficiente em lisina digestível (0,545%), suplementada com seis níveis de L-lisina HCl (78%): 0,00; 0,059; 0,118; 0,177; 0,237 e 0,295%. Considerando a digestibilidade da lisina de 97,6%, a quantidade de L-lisina HCL adicionada em cada ração forneceu 0,00; 0,045; 0,090; 0,135; 0,180 e 0,225% de lisina digestível respectivamente, resultando em rações com 0,545; 0,590; 0,635; 0,680; 0,725 e 0,770% de lisina digestível. Foi avaliado o consumo de ração (g/ave/dia), a produção de ovos (%), o peso médio dos ovos (g), a massa de ovos (g/ave/dia), a qualidade interna do ovo (unidade Haugh, índice de albúmen e de gema), os componentes dos ovos (% de casca, albúmen e gema) e peso corporal das aves. No primeiro experimento (24 a 40 semanas de idade) houve efeito linear dos níveis de lisina para o consumo de ração, o consumo de lisina, a produção de ovos, o peso médio dos ovos, a massa de ovos, a conversão alimentar/dúzia de ovos, o índice de albúmen e o peso final das aves, a conversão alimentar/massa de ovos apresentou uma resposta quadrática e para as demais variáveis não foi verificado efeito significativo. A exigência de lisina digestível foi estimada em no mínimo 0,770% na ração correspondendo a um consumo de 759 mg de lisina digestível/ave/dia ou 14mg de lisina digestível/g de ovo. No segundo experimento (42 a 58 semanas de idade) houve efeito linear dos níveis de lisina sobre o consumo de ração, o consumo de lisina, a conversão alimentar/dúzia de ovos, a unidade Haugh, o índice de albúmen. Para a produção de ovos, a massa de ovos e a conversão alimentar/massa de ovos observou-se resposta quadrática e para as demais variáveis não houve efeito significativo. A exigência de lisina digestível estimada pelo modelo quadrático foi de 0,759% na ração correspondendo a um consumo de 788 mg de lisina digestível/ave/dia ou 15mg de lisina digestível/g de ovo.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:55:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 727024 bytes, checksum: 396ced735c0f2e5098b0ebd65d357daf (MD5) Previous issue date: 2013-05-14 / The present work aimed to evaluate the addition of L-glutamine and glutamic acid more relationships digestible valine and lysine in pre-starter diets (aged from 21 to 35 and from 35 to 49 days) in animals and economic viability. Three hundred and eighty four piglets were used, including commercial hybrids (PIC ), castrated males and 21-day-old females, with an inital average weight of 5.43± 0.99 kg. They were distributed in blocks according to their weight. The experimental development in a completely randomized design. Four treatments were used: each repeated 8 times and 12 animals were used per repetition. The treatments were: T1-Basal Ration (RB), T2- RB + L-glutamine and glutamic acid (LGln +AC.Glu), T3 - RB + L-valine (L-val) and T4 - RB + L-glutamine and glutamic acid and L-valine (LGln + AC.Glu e L-val) in pre-initial 1 rations (aged from 21 to 35 days) and pre-initial 2 (aged from 35 to 49 days). L valine and L glutamine plus glutaminic acid were included according to their nutritional profile. Meal complex rations were used. All of them were isoproteinic, isoenergetic, isolisínicas, isophosporic and reached the figures proposed by the Brazilian charts (2011), except for valine in treatments 1 and 2. Zootechnical performance, energy use efficiency, protein use efficiency and economic rate of return in the periods from 21 to 35 days, from 45 to 49 days and from 21 to 45 days old was evaluated. The inclusion of L valine and L glutamine + glutaminic acid did not influence on weight gain, ration consumption, feed conversion or final weight in the periods from 21 to 35, 35 to 49 days nor in the complete period (P<0.05). Likewise, difference in treatments, energy and protein use efficiency was not observed in none of the evaluated periods (P<0.05). However, in absolute values, in the period from 21 to 35 days, the inclusion of L glutamine + glutaminic acid made an improvement of 6.25% in the feed conversion, while improvement of the addition of L valine was of 8.25% and the combination of L glutamine, glutaminc acid and L valine decreased 6.99% compared to the basal treatment. The profitability rate, indicator of the best economic rate in relation to the cost of used ration in the period from 21 to 35 days, was superior in the treatment with L valine crystal, while in the periods from 35 to 49 and 21 to 49 days the basal ration was the one which presented the highest rate.Supplementation of L-glutamine + L-glutamic acid and / or L-Valine not promote improvement in performance indexes in pigs fed complex diets. The ratio of 62% digestible valine: lysine in complex in complex diets the period 21 to 35 days and 63% in the period 35 to 49 days assured adequate performance of piglets. / Com o presente trabalho objetivou-se avaliar a adição de L-glutamina + ácido glutâmico e as relações de valina digestível e lisina digestível em dietas pré-iniciais (de 21 a 35 dias e de 35 a 49 dias de idade) complexas sobre o desempenho de leitões e a viabilidade econômica. Foram utilizados 384 leitões, híbridos comerciais (PIC), machos castrados e fêmeas, desmamados aos 21 dias de idade, com peso inicial de 5,43± 0,99kg, distribuídos em blocos, em delineamento experimental inteiramente ao acaso, sendo quatro tratamentos: T1- Ração Basal (RB), T2- RB + L-glutamina e ácido glutâmico (LGln+AC.Glu), T3 RB + L-Valina (L-VAL) e T4 RB + L-glutamina e ácido glutâmico e L-valina (LGln+AC.Glu e L-VAL), com oito repetições e 12 animais por unidade experimental. As rações experimentais nas fases pré-inicial 1 (21 a 35 dias de idade) e pré-inicial 2 (35 a 49 dias de idade) foram complexas, fornecidas na forma farelada, sendo isoprotéicas, isoenergéticas, isolisínicas, isofosfóricas, formuladas para atender as recomendações de Rostagno et al. (2011) com exceção da valina nos tratamentos 1 e 2. Foram avaliados o ganho de peso, o consumo de ração, a conversão alimentar, a eficiência de utilização de energia, a eficiência de utilização de proteína e o índice de retorno econômico no período de 21 a 35 dias, de 35 a 49 dias e de 21 a 49 dias de idade. A inclusão de L-glutamina + ácido glutâmico e L-valina isoladamente ou em conjunto não influenciou (P>0,05) o ganho de peso, o consumo de ração, a conversão alimentar e o peso final dos leitões nos períodos avaliados (P<0,05). Não foram observados efeitos da inclusão de e L-glutamina + ácido glutâmico e L-valina isoladamente ou em conjunto sobre a eficiência da utilização de energia e da proteína nos períodos avaliados (P<0,05). Em valores absolutos, no período de 21 a 35 dias, a adição de L-glutamina + ácido glutâmico e L-valina isoladamente proporcionaram melhorias na conversão alimentar de 6,25% e 8,25%, respectivamente quando comparadas ao uso da dieta basal. A combinação L-glutamina + ácido glutâmico e Lvi valina promoveram, em valores absolutos a redução de 6,99% na conversão alimentar quando comparada ao uso da dieta basal. No período de 21 a 35 dias de idade o índice de rentabilidade, indicador do melhor retorno econômico sobre o custo de ração utilizado, foi superior para o tratamento com adição de L-valina industrial, entretanto nos períodos de 35 a 49 dias e de 21 a 49 dias a ração basal foi a que apresentou o maior índice de rentabilidade. A suplementação de L-glutamina +L-ácido glutâmico e/ou LValina não promoveu melhoria nos índices zootécnicos em leitões alimentados com dietas complexas. A relação de 62% de valina digestível: lisina digestível em dietas complexas no período 21 a 35 dias e de 63 % no período 35 a 49 dias garantiu o desempenho adequado dos leitões.

Made available in DSpace on 2015-04-17T15:02:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1361043 bytes, checksum: 4455c38a98b7073e2147348a625e880c (MD5) Previous issue date: 2013-03-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Anxiety is characterized by a state of tension, apprehension and discomfort that arise from internal or external danger imminent and may be a response to stress or environmental stimuli, and can measured by psychological and physiological changes of the individual. The L-theanine (gamma-L-glutamic acid ethylamide) or theanine is an amino acid found in Camellia sinensis, commonly known as "green tea". This amino acid has been used to reduce mental and physical stress, improving memory function and for treating anxiety. Because the anxiety disorders are among the most common disorders seen in both the general population and in the services of primary health care, it is relevant to the investigation of non-pharmacological methods for their treatment. The aim of this study was to investigate the psychophysiological effects of L-theanine on a model of anxiety in healthy humans. The study was an experimental, kind of randomized controlled clinical trial. Thirtie was composed of healthy students, male or female, which were inserted into one of three groups (control, L-theanine 1 or L-theanine 2). The participants of the experimental groups received 200 mg of L-theanine by a capsule as a single dose. The human anxiety was induced by Simulated Public Speaking Test - SPST and was assessed by physiological parameters (blood pressure, heart rate, ending temperature and electrical conductance of the skin) and psychological parameters (anxiety Inventory, trait - STAI-T and state - STAI-E). Statistical tests were considering parametric data the ANOVA (one way) and ANOVA for repeated measures data and considering the nonparametric Kruskal-Wallis and Friedman. Results were considered significant when showed a significance level of 95% (p < 0,05). There was a reduction in the levels of systolic blood pressure and heart rate in group L-Theanine 2 (p <0,05) and the electrical conductance of the skin in group L-theanine 1. There was also a reduction in the score of the STAI-E in both experimental groups since the score remained within the range of anxiety low throughout the test (<40 points). These results suggest that L-theanine has an anxiolytic effect on the physiological and psychological parameters that change in anxiety. Thus, this amino acid may be a non-pharmacological strategy in the treatment thereof. / A ansiedade caracteriza-se por um estado de tensão, apreensão e desconforto, que se originam de um perigo interno ou externo iminente, podendo ser resposta a estresse ou a estímulo ambiental e pode ser mensurada através de medidas psicológicas e fisiológicas do individuo. A L-teanina (ácido gama-etilamida L-glutâmico) ou teanina é um aminoácido encontrado na Camellia sinensis, popularmente conhecida como chá verde . Este aminoácido vem sendo utilizado para reduzir o estresse mental e físico, melhorar a função da memória e no tratamento da ansiedade. Visto que os transtornos da ansiedade estão entre os transtornos mais comumente observados tanto na população geral quanto nos serviços de atenção primária à saúde, é relevante a averiguação de métodos não farmacológicos para o seu tratamento. O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos psicofisiológicos da L-teanina sobre um modelo de ansiedade em humanos saudáveis. O estudo teve caráter experimental, do tipo ensaio clínico randomizado e controlado. Foi composto por trinta estudantes saudáveis, do gênero masculino ou feminino, os quais foram inseridos em um dos três grupos experimentais (controle, L-teanina 1 ou L-teanina 2). Os participantes dos grupos experimentais receberam 200 mg de L-teanina na forma de cápsula e em dose única. A ansiedade humana experimental foi induzida pelo Teste de Simulação de Falar em Público (TSFP) e foi avaliada por meio de parâmetros fisiológicos (pressão arterial, frequência cardíaca, temperatura de extremidade e condutância elétrica da pele) e de parâmetros psicológicos (inventário de ansiedade traço IDATE-T e estado IDATE-E). Os testes estatísticos utilizados considerando os dados paramétricos foram o ANOVA (one way) e ANOVA para medidas repetidas e considerando os dados não paramétricos o teste de Kruskal-Wallis e de Friedman. Os resultados foram considerados significativos quando apresentaram um nível de significância de 95% (p < 0,05). Observou-se uma redução nos níveis da pressão arterial sistólica e frequência cardíaca no grupo L-teanina 2 (p < 0,05) e da condutância elétrica da pele no grupo L-teanina 1. Ocorreu também uma redução no escore do IDATE-E nos dois grupos experimentais, uma vez que a pontuação manteve-se dentro da faixa de ansiedade baixa durante todo o teste (< 40 pontos). Estes resultados sugerem que a L-teanina teve um efeito ansiolítico sobre os parâmetros fisiológicos e psicológico que se alteram na ansiedade. Sendo assim, este aminoácido pode ser uma estratégia não farmacológica no tratamento da mesma.