Made available in DSpace on 2016-08-29T15:34:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_6739_DISSERTAÇÃO Aline Dias Ribeiro.pdf: 1995821 bytes, checksum: 257ebf9537bf0f4881b2a7d2bf130050 (MD5) Previous issue date: 2013-08-09 / INTRODUÇÃO: Infecções de corrente sanguínea por fungos têm se destacado principalmente pelo crescente número de casos de candidemia (infecções por Candida spp neste sítio). Atualmente, este fungo figura como um dos sete patógenos mais comuns em infecções nosocomiais, apresentando taxas de mortalidade bruta entre 40 e 70% e atribuída, de 50%. Formação de biofilme é frequentemente associada a persistente infecção por Candida spp. e dificulta o tratamento devido à elevada resistencia que as células fúngicas adquirem a drogas antifungicas, nestas circunstâncias. OBJETIVOS: Determinar a incidência de candidemias no Hospital Universitário Cassiano Antônio de Moraes (HUCAM), entre 1º de março de 2011 a 30 de dezembro de 2012; determinar as taxas de prevalência das espécies de Candida spp.e testar a potencial atividade das drogas anfotericina B e voriconazol na inibição de formação de biofilme pelas espécies isoladas. MATERIAIS e MÉTODOS: Informações sobre o número total de admissões e de pacientes-dia, na UTI e UTIN do HUCAM foram fornecidos pelo setor de estatística e as 32 cepas de Candida spp., obtidos de sangue, urina e ponta de cateter foram isoladas no laboratório de Análises Clínicas deste hospital. Para as análises de inibição de formação de biofilme foram utilizados os testes estatísticos de Wilcoxon, de Sinais e de Mann-Whitney. RESULTADOS: O setor do HUCAM com maior incidência de candidemia foi a UTIN (8,6/10.000 pacientes-dia e 14,2/1.000 internações). Candida spp foi 5º microrganismo mais isolado das ICS, com predomínio de espécies não-albicans (81%), sendo C. parapsilosis a espécie mais frequente. Na UTIN, a frequência de candidemia por C. albicans foi de 67% e a única espécie não-albicans isolada foi Candida parapsilosis. Na avaliação da inibição de formação de biofilme foi constatado que as concentrações de anfotericina B estatisticamente significantes foram: 128 µg/mL para as epécies C. albicans, C parapsilosis e C tropicalis e 64 µg/mL para as espécies agrupadas em outros. Voriconazol foi capaz de inibir formação de biofilme apenas para isolados da espécie C. albicans e na maior concentração testada (16 µg/mL). CONCLUSÕES: A maior incidência de candidemia no HUCAM foi encontrada para recém-nascidos internados na UTIN. A distribuição das espécies de Candida variou de acordo com setores do hospital, mas sofreu pouca alteração em relação ao período estudado. No geral, anfotericina B foi mais eficaz que voriconazol na inibição de formação de biofilme por espécies de Candida.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-08-18Bitstream added on 2014-06-13T18:43:05Z : No. of bitstreams: 1 franzini_cm_dr_arafcf.pdf: 2677878 bytes, checksum: 26759573900040571415a3fa5cbf34b2 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O tratamento das infecções fúngicas sistêmicas impõe grandes dificuldades devido ao fato da terapia endovenosa requerer administração do fármaco solubilizado ou disperso em partículas de diminutas dimensões, além da necessidade de hospitalização. A anfotericina B (AmB) continua sendo um dos antibióticos mais efetivos para tais tratamentos, apesar de sua baixa solubilidade e graves efeitos colaterais. Considerando que microemulsões permitem contornar esses problemas e proporcionar administração oral do fármaco, essas formulações lipídicas contendo AmB estão sendo cada vez mais estudadas. Adicionalmente, a formação de complexos de inclusão com ciclodextrinas (CDs) também tem sido promissora no desenvolvimento de novas formas farmacêuticas. Neste trabalho os parâmetros de formação de microemulsões (MEs) contendo fosfatidilcolina de soja (FS), Tween-20 (Tw) e oleato de sódio (OS) como tensoativos e colesterol (CHO) como fase oleosa e a formação de complexos de inclusão com diferentes derivados de CD e sua incorporação nas MEs foi estudado. Um diagrama de fases pseudoternário foi elaborado objetivando caracterizar MEs. O comportamento reológico e a estruturação interna foram empregadas para avaliação e ainda caracterização por espalhamento dinâmico de luz. Foi avaliado o efeito da proporção de tensoativo e óleo na determinação do diâmetro da fase interna nos sistemas com ou sem AmB, além da avaliação da contribuição da fase oleosa e do tensoativo na incorporação do fármaco nas MEs. Um diagrama de solubilidade de AmB em CDs foi desenvolvido e suas constantes de estabilidade determinadas. O preparo de ME contendo CDs em sua fase aquosa, parâmetros de incorporação de AmB e estudos de liberação foram realizados seguidos de análise termogravimétrica, difração de raios x (DRX) e ressonância magnética nuclear (RMN)... / The fungal infections treatment imposes many difficulties mainly because the intravenous therapy requires administration of solubilized or dispersed drug in particles of smaller dimension beyond the need for hospitalization. Despite its low solubility and serious adverse effects the amphotericin B (AmB) remains one of the most effective antibiotics to the treatment. Microemulsions allow circumvent these problems and provide oral administration. Therefore these lipid formulations containing AmB have been increasingly studied. Additionally, the formation of inclusion complexes with cyclodextrins (CDs) has also been promising in developing new dosage forms. In this work the formation parameters of microemulsions (MEs) containing soybean phosphatidylcholine (FS), Tween-20 (Tw) and sodium oleate (SO) as surfactant and cholesterol (CHO) as oil phase and the formation of inclusion complexes with different CDs derivatives and their incorporation into MEs were studied. The pseudo ternary phase diagram was built in order to characterize MEs. The rheological behavior and internal structure were evaluated and characterized by dynamic light scattering. The effect of the proportion of surfactant and oil phase in the diameter of the internal phase in systems with or without AmB was evaluated. Therefore the contribution of the oil phase and surfactant in the drug loading eficience was studied. The Solubility diagram of AmB in CDs was developed and its stability constants determined. The preparation of ME containing CDs in its aqueous phase, the incorporation AmB parameters and the release studies were performed followed by thermal analysis, x-ray (XRD) diffraction and nuclear magnetic resonance (NMR). The results reveal the MEs formation in regions containing up to 30% surfactant and about 11% of the oil phase. Under polarized light, the interest systems showed a dark background and lamellar structure... (Complete abstract click electronic access below)

Orientadora : Profª. Drª. Astrid Wiens Souza / Coorientador : Prof. Dr. Roberto Pontarolo / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 16/12/2016 / Inclui referências : f. [38-45;69-72;90-96;130-132] / Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatos / Resumo: A anfotericina B é um antifúngico de amplo espectro utilizado principalmente, no manejo de infecções fúngicas invasivas (IFI). Está disponível no mercado nas formulações convencional e lipídicas (lipossomal, dispersão coloidal e complexo lipídico). A formulação convencional apresenta valor de aquisição, atualmente, no Brasil, mil vezes inferior ao das formulações lipídicas, no entanto, também apresenta eventos adversos graves, dentre eles, a nefrotoxicidade, que pode levar o paciente a realização de diálise ou mesmo a óbito. Neste contexto, é importante utilizar ferramentas como as disponíveis na Avaliação de Tecnologias em Saúde, a fim de, estudar os riscos e benefícios destas tecnologias, considerando, tanto sua eficácia, segurança e tolerabilidade, quanto os custos envolvidos no tratamento e no manejo dos eventos adversos. Assim, os objetivos deste trabalho foram: avaliar e comparar evidências de eficácia, segurança e tolerabilidade das formulações de anfotericina B em pacientes com suspeita e/ou confirmação de IFI; realizar um levantamento das evidências de custo-efetividade, no uso de antifúngicos sistêmicos para o tratamento e/ou profilaxia em pacientes com suspeita ou confirmação de IFI; e, realizar uma análise de custo-efetividade das formulações de anfotericina B. Inicialmente foi realizada uma revisão sistemática (RS) de ensaios clínicos randomizados (ECR), nas bases de dados; Medline, Scielo, Scopus e Web of Science. Os estudos incluídos tiveram dados de eficácia (cura), segurança (eventos adversos e morte) e tolerabilidade (descontinuação) coletados, para posterior realização de análise estatística: meta-análise, pelo software Review Manager. Na sequência, foi realizada uma busca sistemática de estudos farmacoeconômicos em pacientes com IFI, utilizando as bases de dados: Medline, Scopus e Web of Science. Por fim, conduziu-se a realização do modelo de custo-efetividade, desenvolvido como árvore de decisão, utilizando o software TreeAge. Foram considerados, para a elaboração do modelo, os desfechos de cura, morte e nefrotoxicidade com posterior tratamento medicamentoso ou dialítico. Os parâmetros adotados na construção do modelo foram: perspectiva do Sistema Único de Saúde (SUS), custos diretos médicos, horizonte temporal de três e seis semanas, de acordo com o tempo máximo de utilização dos medicamentos prevista em bula. Na primeira RS foram encontrados 5682 ECR, dos quais, 25 contemplaram os critérios de inclusão (n = 2996). Os principais resultados evidenciam que as formulações de anfotericina B apresentam perfil de eficácia muito similar, no entanto, diferem estatisticamente no que concerne a segurança, sendo que, as formulações lipídicas apresentam menores taxas de eventos adversos, incluindo: nefrotoxicidade, febre, calafrios e vômito. Na RS acerca dos modelos farmacoeconômicos, pôde-se verificar que, não há na literatura nenhuma avaliação farmacoeconômica entre as formulações de anfotericina B entre si. Enfim, no modelo de custo-efetividade construído, a formulação convencional de anfotericina B se mostrou mais custo efetiva, seguido das formulações lipossomal e complexo lipídico, respectivamente. Por fim, sugere-se que, a qualidade de vida seja incorporada à presente análise farmacoeconômica, a fim de, avaliar mais profundamente as consequências dos eventos adversos, principalmente, nefrotoxicidade com tratamento dialítico, na vida dos pacientes. Palvras-chave: Anfotericina B. Nefrotoxicidade. Resivão-sistemática. Meta-análise. Custo-efetividade. / Abstract: Amphotericin B is a broad spectrum antifungal, used mainly, to treat invasive fungal infections (IFI). It's available in different formulations: conventional and lipid-based (liposomal, lipid complex and colloidal dispersion). Conventional formulation, in Brasil, costs one thousand more than the lipid-based ones, although, it also presents severe adverse events, like nephrotoxicity, an important adverse event which can lead patient to dialysis or even death. In this context, it's important to assess, though Healht Tecnology Assessment, the risks and benefits of these technologies, considering, as its efficacy, safety, tolerability, as the costs involved in the treatment and in the management of adverse events. Thus, the objectives of this study were: to value and to compare the evidences of efficacy, safety and tolerability of amphotericin B formulations, in patients with confirmed or suspect IFI; to conduct a survey of cost-effectiveness evidence on systemic antifungal used to treat or prevent IFI; and, to perform a cost-effectiveness analysis of amphotericin B formulations. First it was conducted the systematic review (SR) of randomized controlled trials (RCT), in the fallowing databases: Medline, Scielo, Scopus and Web of Science. Included studies had data on efficacy (cure), safety (adverse events) and tolerability (discontinuation) collected, for the statistical analysis conducted as meta-analysis in software Review Manager. In sequence it was done the systematic search of the pharmacoeconomic studies with patients with IFI, using the following databases: Medline, Scopus and Web of Science. Finally, the cost-effectiveness analysis was conducted. It was used the analytic-tree decision model performed using TreeAge software. The outcomes used to construct the model were: cure, death and nephrotoxicity with medical treatment or treatment with dialysis. It was considered, to perform this analysis, the perspective of the Brasilian Public Healht System, only direct medical costs and a time-horizon of three and six weeks, according to the drug leaflet. The first SR found 5682 RCT, which 25 fit the inclusion criteria (n=2.996). Main results show that the amphotericin B formulations presents similar efficacy profile, although they differ, statistically in safety. The lipid-based formulations presets less adverse events, such as: nephrotoxicity, fever, chills and vomiting. The SR about the pharmacoeconomic models, could show that there isn't, in the literature, a pharmacoeconomic evaluation among amphotericin B themselves. Lastly, the cost-effectiveness model showed that the conventional amphotericin B formulations is more cost-effective, followed by the liposomal and lipid complex formulations, respectively. Finally, we suggest that quality of life should be incorporated in this pharmacoeconomic analysis, in order to, assess, more deeply, the consequences of adverse events, mainly, nephrotoxicity, with consequent dialysis, in patient's life. Key-words: Amphoptericin B. Nephrotoxicity. Systematic-review. Meta-analysis. Cost-effectiveness.

Novas formas terapêuticas e o progresso da medicina proporcionaram a emergência de infecções por Rhodotorula mucilaginosa em pacientes imunocomprometidos. Este estudo tem o objetivo de avaliar a suscetibilidade dos isolados de R. mucilaginosa aos antifúngicos convencionais, verificar a habilidade destes em modificar seu perfil de suscetibilidade após exposição a crescentes concentrações de anfotericina B (AMB) e comparar a atividade antifúngica de AMB ou voriconazol (VCR) em combinação com fármacos diversos frente aos dois grupos de R. mucilaginosa. Trinta e cinco isolados de R. mucilaginosa proveniente de pacientes foram estudados. Os isolados foram identificados baseado em métodos microbiológicos e moleculares. Definimos como grupo I os isolados fúngicos originais e grupo II como estes mesmos isolados após serem submetidos a crescentes concentrações de AMB. A exposição à AMB foi realizada segundo Fekete-Forgács et al., com algumas modificações. Os testes de susceptibilidade foram realizados de acordo com a técnica de microdiluição em caldo (CLSI M27-A3). AMB, caspofungina, fluconazol e VRC foram testadas isoladamente e ciprofloxacino, levofloxacino, anlodipino, ciclosporina A, fluoxetina, ibuprofeno, sinvastatina e varfarina foram testadas em combinação com AMB ou VRC, utilizando a técnica de microdiluição em caldo “checkerboard”. Os isolados do grupo I foram suscetíveis a baixas concentrações de AMB. A suscetibilidade ao VCR foi muito reduzida. Fluconazol e caspofungina não exibiram atividade frente a R. mucilaginosa. A exposição prolongada à AMB modificou a suscetibilidade dos isolados. Os testes de suscetibilidade com os isolados do grupo II mostraram elevadas Concentrações Inibitórias Mínimas (CIMs) para AMB e a inibição pelo VCR requisitou CIMs mais elevadas. No grupo I, a combinação de AMB + ibuprofeno mostrou o maior número de interações sinérgicas. No grupo II, a combinação com o maior número de interações sinérgicas foi AMB + sinvastatina. No grupo I, quando VCR foi combinado com levofloxacino, um potente sinergismo foi observado frente a isolados de R. mucilaginosa. No grupo II, combinação de VRC + ciclosporina A mostrou um potente sinergismo. Os tratamentos para infecção por R. mucilaginosa são restritos e a terapia combinada pode ser uma alternativa quando novos fármacos são combinados com aqueles já disponíveis no mercado. / New therapies and medical progress have led to emerging fungal infections by Rhodotorula mucilaginosa in immunocompromised patients. The objectives of this study were to evaluate the susceptibility profile of Rhodotorula mucilaginosa, verify the ability of this species to change its susceptibility profile after exposure to high concentrations of AMB, and compare the antifungal activity of AMB or voriconazole (VCR) plus combinations of non-antifungal medications against the two groups of R. mucilaginosa. Thirty-five strains of R. mucilaginosa isolated from patients were studied. The isolates were identified based on microbiological and molecular methods. We defined group I to be the original strains isolated from patients and group II as the same strains after in vitro exposure to AMB. AMB exposure was assayed according to Fekete-Forgács et al., with some modifications. Susceptibility tests were performed using the broth microdilution method (CLSI M27-A3). AMB, caspofungin, fluconazole (FLC), and VRC were tested alone and ciprofloxacin, levofloxacin, amlodipine, cyclosporine A, fluoxetine, ibuprofen, simvastatin, and warfarin were tested in combination with AMB or VRC, using the broth microdilution checkerboard technique. All group I isolates were susceptible to low concentrations of AMB. Susceptibility to VRC was quite poor. FLC and CAS exhibited no activity against R. mucilaginosa. Prolonged exposure to AMB changed the susceptibility of the isolates. The susceptibility tests with strains from group II showed high minimal inhibitory concentration (MICs) for AMB and the inhibition by VRC required more elevated MICs. In group I, the combination AMB + ibuprofen demonstrated the highest number of synergistic interactions. In group II, the most synergistic interactions was AMB + simvastatin. In group I, When VCR was combined with levofloxacin, a strong synergism was demonstrate against R. mucilaginosa isolates. In group II, VRC + cyclosporine A combination demonstrated a potent synergism. Treatments for R. mucilaginosa are restricted and a multidrug approach seems to be an alternative by administering novel chemical entity drugs with drugs currently on the market simultaneously.

Orientador: Liliana Scorzoni / Banca: Luciane Dias de Oliveira / Banca: Haroldo Cesar de Oliveira / Resumo: Cryptococcus neoformans são leveduras que acometem principalmente indivíduos imunocomprometidos, podendo causar a meningoencefalite dependendo do estado imunológico do hospedeiro. Os tratamentos convencionais têm enfrentado grandes desafios. Dessa forma, o objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos antifúngicos dos fármacos cloridrato de verapamil (CV), cloridrato de fluoxetina (CF) e cloridrato de paroxetina (CP) isolados e combinados com anfotericina B (AmB) contra C. neoformans. Foram determinados os valores de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM) de acordo com a técnica de microdiluição em caldo proposta pelo Comitê Europeu de Teste de Susceptibilidade Antimicrobiana (EUCAST). Posteriormente, foi avaliada a atividade sinérgica dos fármacos combinados com AmB (EUCAST). Os efeitos das CIMs e das concentrações sinérgicas selecionadas foram avaliados em biofilmes, quantificando a biomassa por cristal violeta e sua viabilidade por contagem de colônias (UFC/mL). Além disso, foram analisados os efeitos dos mesmos na cápsula induzida desta levedura. Os ensaios in vivo foram realizados em Galleria mellonella avaliando a toxicidade dos compostos e a eficácia por análise de curva de sobrevivência e também o efeito em concentração de hemócitos. Os fármacos CV, CF e CP apresentaram valores de CIM de 113, 9,6 e 41µg/mL, respectivamente, e quando combinados com AmB resultaram em vinte concentrações sinérgicas, e uma concentração de cada combinação... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Cryptococcus neoformans are yeasts that mainly affect immunocompromised individuals, and may cause meningoencephalitis depending on the immunological state of the host. Conventional treatments have faced major challenges. Verapamil hydrochloride (CV), fluoxetine hydrochloride (CF) and paroxetine hydrochloride (CP) were isolated and combined with amphotericin B (AmB) against C. neoformans. Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and minimum Fungicidal Concentration (CFM) values were determined according to the broth microdilution technique proposed by the European Committee for Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST). Subsequently, the synergistic activity of drugs combined with AmB (EUCAST) was evaluated. The effects of MICs and selected synergistic concentrations were evaluated in biofilms, quantifying the biomass by violet crystal and its viability by colony-forming unit analysis (CFU / mL). In addition, the effects of the same in the induced capsule of this yeast were evaluated. In vivo assays were performed in Galleria mellonella evaluating the toxicity of the compounds and the efficacy by analysis of survival curve and also the effect on hemocyte concentration. The CV, CF and CP drugs had MIC values of 113, 9.6 and 41 μg / mL, respectively, and when combined with AmB resulted in twenty synergistic concentrations, and a concentration of each combination was chosen for the following trials. CV reduced biofilm biomass to 38%, while CF and CP reduced biomass to 22-30% w... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-06-13T19:59:23Z No. of bitstreams: 1 AndreLeandroSilva_TESE.pdf: 10340347 bytes, checksum: 7772f16f42cbf49c9b19bfcc055d96c2 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-06-19T11:52:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 AndreLeandroSilva_TESE.pdf: 10340347 bytes, checksum: 7772f16f42cbf49c9b19bfcc055d96c2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-19T11:52:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AndreLeandroSilva_TESE.pdf: 10340347 bytes, checksum: 7772f16f42cbf49c9b19bfcc055d96c2 (MD5) Previous issue date: 2017-04-20 / A anfotericina B (AmB) ? um f?rmaco de caracter?sticas f?sico-qu?micas bastante peculiares: de car?ter anfif?lico e anfot?rico. Essas caracter?sticas tornam dif?cil sua veicula??o em sistemas terap?uticos. Atualmente, a AmB ? veiculada por via intravenosa nas formas de micelas, lipossomas e complexos lip?dicos. A literatura demonstra que existe uma ?ntima rela??o entre a forma como a AmB est? complexada ao sistema carreador e sua resposta biol?gica. Entretanto, h? uma defici?ncia nos dados de caracteriza??o fisico-qu?mica dos produtos dispon?veis contendo AmB. Portanto, o objetivo deste trabalho foi realizar a caracteriza??o f?sico-qu?mica de sistemas carreadores de AmB visando uma predi??o de sua resposta biol?gica. Os sistemas micelares de AmB foram os primeiros produtos dispon?veis ? pr?tica cl?nica, de forma que sua patente expirou h? alguns anos. Neste trabalho, o sistema original e dois de seus similares foram caracterizados e o aumento da estabilidade destes sistemas ap?s aquecimento, pela forma??o dos super-agregados de AmB foi estudado. O sistema liposomal AmBisome? tamb?m foi caracterizado e, pela primeira vez, foi estudada a possibilidade de super-agrega??o, a exemplo dos sistemas micelares, a partir de lipossomas. A incorpora??o de AmB em sistemas nano e microemulsionados foi apresentada e as caracter?sticas f?sico-qu?micas destes sistemas foram estudados, com demonstra??o de suas aplica??es no tratamento ocular de infec??es f?ngicas e tamb?m para o tratamento de leishmaniose visceral. As principais t?cnicas de caracteriza??o aplicadas foram espectroscopia UV-Vis, dicro?smo circular e espalhamento din?mico de luz. A t?cnica de calorimetria de titula??o isot?rmica (ITC) foi utilizada numa tentativa de medir a energia de forma??o dos superagregados. Adicionalmente, um derivado sol?vel de AmB foi desenvolvido e caracterizado por espectroscopia de massa at?mica, infra-vermelho, UV-Vis e dicro?smo circular, bem como incorporado em sistema microemulsionado como estrat?gia de veicula??o deste derivado sol?vel. Os resultados revelam que os sistemas contendo AmB apresentam diferentes formas de agrega??o molecular dependendo do carreador, da forma de incorpora??o do f?rmaco e do diluente empregado para redispersar o sistema. Segundo a literatura, o estado de agrega??o est? intimamente ligado ? efic?cia e ? toxicidade da mol?cula. Nos sistemas nanoemulsionados a AmB apresenta-se na forma agregada e multi-agregada. Na microemuls?o, est? incorporada na forma monom?rica. Os sistemas micelares aquecidos d?o lugar ? forma??o de super-agregados de AmB enquanto os sistemas lipossomais s?o incapazes de se modificar em super-agregados. O derivado sol?vel de AmB apresentou caracter?sticas que diferem da AmB original. Contudo, quando incorporado na microemuls?o, o estado de agrega??o ? similar ao da mol?cula original tanto nas an?lises de UV-Vis quanto de dicro?smo circular. Pode-se concluir que a forma de agrega??o de AmB varia n?o somente de acordo com o tipo de carreador, mas tamb?m com sua concentra??o no meio e com o tipo de incorpora??o, ainda que num mesmo tipo de carreador. Finalmente, o derivado sol?vel abre a possibilidade de veicula??o do f?rmaco em carreadores de car?ter aquoso para o tratamento de diversas enfermidades e por v?rias vias de administra??o. / The amphotericin B (AmB) is a drug of peculiar physicochemical features: being amphiphilic and amphoteric. These characteristics turn difficult the drug load into therapeutic systems. AmB is currently available in the market as micelles, liposomes and lipid complex for injection. The literature show that there is an intimate correlation between the AmB bound to the carrier and its biological response. However, there is a deficiency concerning the physicochemical characterization of the available AmB-containing products. Therefore, the aim of this work was to characterize AmB-containing carriers seeking a prediction to its biological response. The AmB-containing micellar system was the first product available for clinical use. The patent of this product has already expired some years ago. In this work we have characterized the original system and two other similar micellar products. In addition, we studied the stability increase of heated systems, by the formation of AmB ?super-aggregates?. AmBisome?, an AmB-containing liposomal system, was also characterized and, for the first time, tested for the possibility of super-aggregates formation. The AmB incorporation into nano and microemulsion systems was presented and the physicochemical characteristics evaluated, focusing mainly on applications for the treatment of fungal ocular diseases and also for visceral leishmaniasis. The main techniques used for characterization were electronic spectroscopy, circular dichroism and dynamic light scattering. The isothermal titration calorimetry (ITC) was used as an attempt to measuring the super-aggregates energy formation. Besides, an AmB soluble derivative was developed and characterized by atomic mass spectroscopy, infra-red, UV-Vis and circular dichroism. Then, this AmB-derivative was loaded into a microemulsion as a vehiculation strategy. The overall results show that the AmB-containing systems presented different molecular aggregation states that depends on the carrier, the way the drug is incorporated and also on the diluent. According to the literature, the aggregation state is associated with both, drug efficiency and toxicity. In nanoemulsion systems, the drug is found aggregated and multi-aggregated. In microemulsions, AmB is loaded as monomers. The heated micellar systems form AmB super-aggregates while the liposomal system is unable to form such molecular structure. Moreover, the AmB soluble derivative presented distinct features when compared to the original molecule. However, once incorporated into the microemulsion, the aggregation state is similar to that of the original AmB molecule, as supported by UV-Vis and circular dichroism results. It can be concluded that the AmB aggregation state varies according to the kind of carrier, the drug concentration and also the way of drug incorporation, even into one same carrier. Finally, the soluble derivative opens the possibility for drug carrying into aqueous vehicles for the treatment of many diseases by different administration routes. / 2018-04-27

Objetivo: Comparar los perfiles de seguridad de la Anfotericina B complejo lipídico y Anfotericina B convencional. Metodología: Se analizaron todas las historias clínicas de pacientes del Hospital Nacional “Edgardo Rebagliati Martins”que recibieron anfotericina B, tanto en terapia confirmada de infecciones fúngicas como en terapia empírica en sospecha de infección fúngica o como medicamento antileishmaniásico durante el periodo comprendido desde el 01 de Agosto del 2011 hasta el 31 de Julio del año 2012. 76 pacientes cumplieron con criterios de inclusión y exclusión. Se evaluó las dosis administradas, las pruebas de laboratorio de cada paciente antes, durante y después del tratamiento, junto con las observaciones registradas por el médico tratante y las notas de enfermería. Resultados: No se encontraron diferencias estadísticas significativas en la efectividad clínica de anfotericina B deoxicolato (48,5%) –AmB– y anfotericina B complejo lipídico (60%) –ABCL– (p-valor 0.421); tampoco se encontraron diferencias en la eficacia clínica (50,0% para AmB vs 66,7% para ABCL, p-valor 0.348). De las reacciones intrínsecas al medicamento, se encontró diferencias estadísticas significativas a nivel de perfil renal en el incremento de creatinina sérica tanto en presencia (79,7% para AmB vs 50% para ABCL, OR 0.25 IC 95% [0.087 – 0.74], p-valor 0.009) como en probabilidad de incremento mayor igual al 20% (p-valor 0.03); sin embargo, no se encontraron diferencias significativas en la presencia de lesión renal aguda (40,6% para AmB y 30% para ABCL, p-valor 0.393). 9,6% de pacientes que utilizaron AmB presentó falla renal (Lesión renal estadío 3/ RIFLE-F). No se encontraron diferencias significativas a nivel de perfil hematológico y hepático. Según los criterios CIOMS modificados, la presencia de hepatotoxicidad fue de 21,7% para AmB y 37,5% para ABCL (p-valor 0.60). Respecto a las reacciones debidas a infusión, se encontraron diferencias significativas en la presencia de náuseas (25,0% para AmB vs 56,5% para ABCL, p-valor 0.006), fiebre (28,1% para AmB vs 52,2% para ABCL, p-valor 0.037), y escalofríos (3,1% para AmB vs 30,4% para ABCL, p-valor 0.001), sin embargo no se encontraron diferencias significativas en la presencia de vómitos, malestar general, hipertensión y flebitis. Conclusiones: Anfotericina B complejo lipídico muestra una eficacia y efectividad comparable al de anfotericina B deoxicolato. Se encontraron diferencias estadísticas significativas en el incremento de creatinina a favor de anfotericina B complejo lipídico. Palabras clave: Anfotericina B deoxicolato, Anfotericina B complejo lipídico, lesión renal aguda, hepatotoxicidad, reacciones adversas. / Objective: To compare the safety profiles of amphotericin B lipid complex and conventional amphotericin B. Methods: It was analyzed the medical records of all patients of "Edgardo Rebagliati Martins" National Hospital who received amphotericin B, both confirmed fungal infections and empirical therapy of suspected fungal infection or as antileishmanial drug during the period from 1 August 2011 until 31 July 2012. 76 patients met inclusion and exclusion criteria. It was evaluated the administered dose, laboratory tests of each patient before, during and after treatment with those recorded observations by the attending physician and nursing notes. Results: No statistically significant differences were found in the clinical effectiveness of amphotericin B deoxycholate (48.5%) - AmB - and amphotericin B lipid complex (60 %) - ABCL -(p - value 0.421), no differences were found in the clinical efficacy (50.0 % vs 66.7 % for AmB for ABCL, p- value 0.348). Of intrinsic drug reactions, statistically significant differences at the level of renal profile was found in the serum creatinine increase both in the presence (79.7% vs 50 % for AmB for ABCL, OR 0.25 95% CI [0.087 to 0.74] , p- value 0.009) and more likely to increase at least 20% (p- value 0.03 ), but no significant differences were found in the presence of acute renal injury (40.6 % for AmB and 30% for ABCL, p- value 0.393). 9.6% of patients using AmB had renal failure (kidney injury stage 3 / RIFLE -F). No significant differences at the level of haematological and liver function were found. According to CIOMS modified criteria, the presence of hepatotoxicity was 21.7% and 37.5% for AmB for ABCL (p- value 0.60). Concerning infusion reactions, there was significant differences in the presence of nausea (25.0% vs 56.5 % for AmB for ABCL, p- value 0.006), fever (28.1% were found for AmB vs 52.2 % for ABCL, p- value 0.037), and chills (3.1% for AmB vs. 30.4 % ABCL, p- value 0.001), however no significant differences were found in the presence of vomiting, malaise, hypertension and phlebitis. Conclusions: Amphotericin B lipid complex shows efficacy and effectiveness comparable to that of amphotericin B deoxycholate. Statistically significant differences in the increase of creatinine in favor of amphotericin B lipid complex were found. Keywords: Amphotericin B deoxycholate, amphotericin B lipid complex, acute renal injury, hepatotoxicity, adverse reactions.

Made available in DSpace on 2015-09-25T12:22:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Gabriela Muniz Felix Araujo.pdf: 3052812 bytes, checksum: d979f650ad09f6bbf8062f77a7aa642a (MD5) Previous issue date: 2013-05-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Leishmaniasis is one of the most neglected diseases in the world. Its most severe clinical form, called visceral, if left untreated, can be fatal. Conventional therapy is based on the use of pentavalent antimonials and includes amphotericin B (AmB) as a second choice drug. The micellar formulation of AmB, although effective, is associated acute and chronic toxicity. Commercially available lipid formulations emerged to overcome such drawbacks, but the high cost involved limits widespread use of these preparations. Nanosized drug delivery systems, such as nanoemulsions (NE), have proven ability to solubilize hydrophobic compounds, to improve absorption and bioavailability, to increase efficacy and to reduce toxicity of the encapsulated drug. NE become even more attractive because they are inexpensive and easily produced. The aim of this work was to develop NE to incorporate AmB. NE were made by sonication method, through a mixture of surfactants, Kolliphor HS 15 and Brij ® 52, with the oil isopropyl myristate. AmB was added directly to the samples under magnetic stirring, using acidic and basic solutions to solubilize the drug and for adjustment of final pH. All NE showed neutral pH, values of conductivity were consistent with oil in water systems, and isotropic behavior. NE presented spherical structures with negative zeta potential value, monomodal size distribution and average diameter of the droplets with drug ranged from 33 to 132nm. Thermal analysis showed that AmB was not able to modify the behavior of the system, possibly to be dispersed in the internal phase. With respect to preliminary stability tests, centrifugation caused precipitation of the drug, heat stress led to turbidity of samples and at the end of the freeze-thaw cycle all samples maintained their transparency. AmB-NE showed similar statistically antileishmanial activity to AmB micellar formulation, which enables those systems to further tests, to assess their toxicity and also prove its effectiveness on amastigotes, in order to offer them as an alternative for the treatment of visceral leishmaniasis. / A leishmaniose é uma das doenças mais negligenciadas do mundo. Sua forma clínica mais grave, denominada visceral, se não tratada, pode ser fatal. A terapia convencional baseia-se na utilização de antimoniais pentavalentes e inclui a anfotericina B (AmB) como fármaco de segunda escolha. A formulação micelar de AmB, embora efetiva está associada a relatos de toxicidade aguda e crônica. Formulações lipídicas surgiram para contornar tais inconvenientes, porém o alto custo envolvido limita o amplo uso dessas preparações. Sistemas de liberação de fármacos nanoestruturados, como as nanoemulsões (NE), possuem comprovada habilidade em solubilizar compostos hidrofóbicos, melhorar absorção e biodisponibilidade, incrementar a eficácia e reduzir a toxicidade dos fármacos encapsulados. O objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento de NE para incorporação de AmB. As NE foram formuladas pelo método de sonicação, através do emprego da mistura dos tensoativos Kolliphor ® HS 15 e Brij ® 52 com o óleo miristato de isopropila. Adicionou-se a AmB diretamente nas amostras, sob agitação magnética, com o emprego de soluções básicas e ácidas para solubilização do fármaco e ajuste do pH final. Todas as NE tiveram pH neutro e condutividade condizente com sistemas óleo em água, além de comportamento isotrópico. As NE apresentaram estruturas de formato esférico, com potencial zeta negativo e distribuição de tamanho monomodal. O diâmetro médio das gotículas com o fármaco variou de 33 a 132nm. A análise térmica revelou que a AmB não foi capaz de alterar o comportamento térmico do sistema, possivelmente por estar dispersa na fase interna. Com relação aos testes de estabilidade preliminar, a centrifugação provocou a precipitação do fármaco. O estresse térmico levou à turvação das amostras. Ao final do ciclo gelo-degelo todas as amostras mantiveram sua transparência. A AmBNE mostrou eficácia leishmanicida estatisticamente igual a da formulação de AmB micelar, o que a habilita para futuros ensaios para avaliar sua toxicidade e comprovar sua eficácia também sobre formas amastigotas, com a finalidade de torná-la uma alternativa para o tratamento da leishmaniose visceral.

La incidencia de infecciones fúngicas ha aumentado en los últimos años debido al incremento de situaciones clínicas que comportan alteraciones en los mecanismos de defensa del organismo tales como neoplasias, pacientes portadores de un trasplante y tratados con fármacos inmunosupresores o síndrome de la inmunodeficiencia adquirida (SIDA), entre otros. La anfotericina B (AnB), comercializada en 1956, continúa siendo el fármaco de elección para el tratamiento de las micosis sistémicas, aunque su utilización no está exenta de toxicidad. Las nuevas formulaciones lipídicas de AnB comercializadas a partir de 1995, han supuesto en la práctica clínica una mejora en la optimización de la terapia ya que su administración ha demostrado estar asociada a una menor incidencia de reacciones adversas. Antes de la comercilaización de éstas, ha sido frecuente la utilización de AnB vehiculada en un excipiente de características lipófilas como es el Intralipid 20%, preparada como formulación magistral en el momento de la infusión endovenosa por no disponer de estudios de estabilidad. La aspergilosis pulmonar invasiva es una infección fúngica que puede aparecer como complicación en la clínica de pacientes inmunodeprimidos cuya profilaxis con la formulación de AnB en solución acuosa para inhalación, ha demostrado una buena eficacia clínica exenta de los efectos adversos y toxicidad asociados a la administración endovenosa. En esta memoria se presentan los resultados de tres trabajos en formato de publicaciones en los cuales se estandariza y valida un método para la determinación de AnB en muestras biológicas (suero, secreciones respiratorias) y muestras lipídicas con aplicación a estudios farmacocinéticos y de estabilidad química de AnB cuando ésta se administra en diferentes formas farmacéuticas. / The incidence of fungal infection has increased in recent years due to the increment of clinical situations wich alter the defence mechanisms of the body such as neoplasia, transplantation patients treated with immunosupressive drugs or acquired immunodeficiency (AIDS), among others. Amphotericin B (AmB), licenced in 1956, continues to be the drug of choice for the treatment of systemic mycosis, although its use is not exempt from toxicity. The new AmB lipid formulations licenced from 1995 onwards, have represented in clinical practice an improvement in therapy since its administration has been associated with a declining incidence of adverse reactions. Prior to AmB commercialization, it was normal to inclued AmN in an excipient of lipofilas-like-characteristics such as Intralipid 20%, prepared as a magistral formulation at the moment of intravenous infusion, for lack of stability studies. Invasive pulmonary aspergillosis is a fungal infection which may appear as a complication in immunodepressed patients whose prophylaxis with AmN formulation in aqueous solution for inhalation, has shown good clinical efficacy free from adverse effects and toxicity associated with intravenous administration. In this thesis the results of three studies are presented, in whcih a standardized and validated method for the determination of AmB in biologic samples (serum, respiratory secretions) and liquid samples with application to pharmacokinetic studies and chemical stability of AmB when administered using pharmaceutical procedures.

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-18Bitstream added on 2014-08-13T18:00:59Z : No. of bitstreams: 1 000749624.pdf: 2632882 bytes, checksum: 43be97a043c775a4750a80e19923e319 (MD5) / A Leishmaniose Visceral Americana (LVA) é uma doença de letalidade significativa e em disseminação no território brasileiro. É causada pela Leishmania infantum chagasi, parasita transmitido por artrópodes (Lutzomyia longipalpis) e tem como reservatórios cães e animais silvestres. Embora endêmica em zonas rurais das Regiões Nordeste, Norte e Centro-Oeste do País há várias décadas, a LVA tem emergido como doença urbana (muitas vezes epidêmica), em áreas anteriormente não afetadas. Nestas últimas, está o Estado de São Paulo, onde os primeiros casos autóctones foram detectados em 1999. As opções terapêuticas para LVA são escassas, e associadas a frequentes recidivas e eventos adversos. Há grande tradição em seu tratamento com antimoniais pentavalentes (mais especificamente o antimoniato de N-metil glucamina). Mais recentemente, as formulações de anfotericina B (deoxicolato e lipossomal), tem sido indicadas para quadros mais severos. No entanto, faltam ensaios clínicos que embasem essa superioridade no tratamento de LVA, e muitas das indicações são feitas por analogia com pesquisa realizada na Índia, África ou Europa. O estudo foi planejado para preencher esse hiato na pesquisa clínica relativa à LVA. Tratou-se de ensaio clínico aberto, multicêntrico, envolvendo instituições nos Estados do Pará, Maranhão e São Paulo. Foram incluídos pacientes com diagnóstico parasitológico de LVA que manifestaram aceite em participar por meio de Termo de Consentimento Livre e Esclarecido (TCLE) aplicado aos próprios sujeitos ou aos seus representantes legais. Foram excluídos pacientes co-infectados pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV), portadores de neoplasia, usuários de imunossupressores, gestantes e aqueles para os quais os guias terapêuticos do Ministério da Saúde (MS), ou das Secretarias Estaduais da Saúde recomendavam o uso da anfotericina B – definição que abrangia aqueles sujeitos com ... / American Visceral Leishmaniasis (AVL) is a disease that causes significant mortality. Since the past two decades it is disseminating widely in Brazil. Its etiologic agent is Leishmania infantum chagasi, a vector-borne parasite. Traditionally, AVL was regarded as an endemic disease in Northern and Northeastern States, but it has emerged in urban areas and in Southeastern States. In São Paulo State, autochtonous cases occur since 1999. Therapeutic options for AVL are scarce, and all leishmanicidal drugs are associated with failures, relapses and serious adverse events. Meglumine antominiate has been the first-line therapy in Brazil for many decades. Lately, amphotericin B deoxycholate or in liposomal formulation have been recommended for more severe cases. However, those data are extrapolated from studies conducted in India, Africa and Europe. The study was designed to fulfill this gap. It was a multicenter, randomized, open-label study that compare the efficacy and safety of three therapeutic options: meglumine antimoniate, amphotericin B deoxycholate and liposomal amphotericin B. Patients with parasitological confirmation of AVL were included. Those that were coinfected with HIV or who had immune-supressing conditions or pregnancy were excluded. We also excluded those for whom governmental guidelines recommended the use of amphotericin B. Patients were followed with physical examination and laboratory tests on days 0, 3 , 14, 30, 90 and 180. We included 59 subjects, 33 of whom completed follow-up (11 in each arm). Clinical response was similar for all groups. However, those receiving amphotericin were more likely to have early recovery of hemoglobin dosage and white cell counts, as well as serum albumin. There was a discrete tendency of better response with liposomal amphotericin. Nephrotoxicity was striking among those receiving amphotericin deoxycholate (42%), an incidence significantly higher than that observed with the other ...