Submitted by Cleide Dantas (cleidedantas@ufpa.br) on 2014-06-27T11:50:19Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Tese_AlteracoesHistopatologicasRins.pdf: 1977158 bytes, checksum: 9154288989bf9cc9bc2f3596d67b16a9 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2014-07-29T16:55:55Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Tese_AlteracoesHistopatologicasRins.pdf: 1977158 bytes, checksum: 9154288989bf9cc9bc2f3596d67b16a9 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-07-29T16:55:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Tese_AlteracoesHistopatologicasRins.pdf: 1977158 bytes, checksum: 9154288989bf9cc9bc2f3596d67b16a9 (MD5) Previous issue date: 2014 / O mercúrio representa um grande risco ambiental e ocupacional constituindo um problema para a saúde humana na região Amazônica. Muito embora estudos tenham demonstrado que o mercúrio compromete vários tecidos e órgãos, os rins constituem-se órgãos-alvo para a toxicidade do metal. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi investigar os efeitos de uma exposição crônica a baixas doses de metilmercúrio sobre o parênquima renal de macacos Cebusapella, machos, adultos, expostos durante 120 dias consecutivos com doses diárias via oral, de 1,5 μg na dieta. As concentrações de mercúrio total no sangue dos animais foram monitoradas a cada 30 dias usando espectrofotômetro de absorção atômica a vapor frio (Hg 201), comparando ao grupo controle. O método utilizado para análise histopatológica foi a inclusão em parafina com coloração pela Hematoxilina e Eosina, Tricrômico de CAB e PAS. As investigações imuno-histoquímicas compreenderam as reações para a detecção de actina para musculo liso (IA4), actina muscular (HHF35) e pancitoqueratina (AE1 e AE2). Os resultados obtidos demonstraram que o tratamento com mercúrio causou diferença significativa (P<0,001) entre os grupos exposto e controle. Quanto aos níveis de Hg total, foram observadas alterações histopatológicas com características de hidropsia nos Túbulos Proximais, um achado comum na exposição ao metilmercúrio em outras espécies, sem alterações significativas nas concentrações de creatinina e ureia. O teste de correlação de Person demonstrou uma forte relação negativa entre a concentração de mercúrio e a perda de massa corporal dos animais (P<0,0001). Outro achado importante foi a diminuição do número de células mesangiais, o que sugere que o metilmercúrio executou a sua nefrotoxicidade atingindo não somente o sistema tubular renal, como também as células do mesangio glomerular, fazendo-se necessário um maior aporte de estudos experimentais para esclarecer qual o nível de alerta da concentração de mercúrio é capaz de desencadear mecanismos de agressão e injúria renal em indivíduos expostos ao metilmercúrio. / Mercury has been a major environmental and occupational risk and it still remains a problem for human health in the Amazon region. Although studies have shown that mercury affects various tissues and organs, kidneys are the target organs to the metal toxicity. Thus, the aim of this study was to investigate the effects of chronic exposure to low doses of methylmercury on renal parenchyma of Cebusapella, adult males exposed during 120 consecutive days with daily oral doses of 1.5 μg in the diet. The concentrations of total mercury in the animals’ blood were monitored every 30 days using a cold vapor atomic spectrophotometer (201 Hg), compared to the control group. The method used for histopathological analysis was the immersion in paraffin for staining with hematoxylin and Eosin, Masson's CAB and PAS. The immunohistochemical investigations included reactions for detection of smooth muscle actin ( IA4 ), muscle actin ( HHF35 ) and cytokeratin (AE1 and AE2). The results showed that treatment with mercury caused significant differences (P < 0.001) between the exposed and control groups. As for total Hg levels, histopathologicalchanges just likehydrops in Proximal tubuleswere observed, a common finding in methylmercury exposure in other species, with no significant changes in creatinine and urea concentrations. The Person correlation test showed a strong negative relationship between mercury concentration and animal body weight loss (P < 0.0001). Another important finding was the decrease in mesangial cells number, which suggests that methylmercury executed its nephrotoxicity, affecting not only the renal tubular system, as well as the glomerular mesangium cells, making necessary a greater amount of experimental studies to clarify which mercury concentration alert level is capable of triggering aggression mechanisms and kidney injury in subjects exposed to methylmercury.

Submitted by Cleide Dantas (cleidedantas@ufpa.br) on 2014-05-08T16:01:48Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EfeitosManipulacaoNumero.pdf: 524147 bytes, checksum: c95c5f341b39f49ada4230b65e5b1bb0 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2014-09-03T13:34:24Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EfeitosManipulacaoNumero.pdf: 524147 bytes, checksum: c95c5f341b39f49ada4230b65e5b1bb0 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-03T13:34:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EfeitosManipulacaoNumero.pdf: 524147 bytes, checksum: c95c5f341b39f49ada4230b65e5b1bb0 (MD5) Previous issue date: 2010 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / INCT/ECCE - Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia sobre Comportamento, Cognição e Ensino / Em um treino discriminativo, há diversas variáveis que podem afetar a precisão da aquisição do repertório. Uma variável pouco analisada é o número de escolhas apresentado nas tentativas discretas de treino, buscando verificar em que situações o controle discriminativo pode ser mais facilmente estabelecido. Este trabalho tem como objetivo geral descrever os efeitos da manipulação do número de escolhas sobre o desempenho em tarefas de discriminação simples em macacos-prego (Cebus cf. apella). No Experimento I, os sujeitos foram submetidos a um treino discriminativo com três tipos diferentes de tentativas (2, 4 e 9 escolhas). Um teste de controle de estímulos avaliou se o repertório aprendido podia ser mantido quando os estímulos utilizados nos três tipos de tentativa eram apresentados na forma de duas escolhas. No Experimento II, buscou-se adicionalmente avaliar se as respostas corretas nos treinos prévios de discriminação ocorriam em função de escolha por seleção do S+, por rejeição do S-, ou por controle misto (seleção e rejeição). Esta avaliação foi realizada através do procedimento de máscara. Os resultados do Experimento I sugerem que a exposição a um número maior de escolhas é uma estratégia eficiente para estabelecer o responder discriminado, pois o desempenho permanece mesmo quando o número de escolhas é posteriormente reduzido para dois. Os resultados obtidos no Experimento II mostram dados diferentes para os dois sujeitos. M30 apresentou controle por rejeição e preferência pela máscara e M31 apresentou controle misto no responder. O presente estudo mostra um caminho para aprofundar a análise do controle de estímulos nos estudos específicos sobre a manipulação do número de escolhas e indica que essa variável pode ser um meio eficaz de reduzir a dificuldade de aquisição de discriminações em contexto aplicado. / There are several variables that can affect the precision of repertoire acquisition in discrimination training. The number of choices presented in the discrete trials is still one variable little explored in the context of verifying in which situations the discriminative control is more easily established. The general objective of the present work is to describe the effects of the manipulation of the number of choices on performance in simple discrimination tasks in capuchin monkeys (Cebus cf. apella). In Experiment I, the subjects were given a discriminative training with three types of trials (2, 4, and 9 choices). A stimulus control test assessed if the acquired repertoire could be maintained when the stimuli used in the three types of trials were then presented in the two-choice fashion. Additionally, in Experiment II, we evaluated if the correct responses in previous discrimination training occurred due to selection of the S+, rejection of the S-, or mixed control (selection and rejection). This evaluation was carried out through a mask procedure. The results in Experiment I suggest that the exposure to a larger number of choices is an efficient strategy to establish the discriminated responses since the performance was accurate even when the number of choices was reduced to two. The results obtained in Experiment II show different data for the two subjects. M30 showed control by rejection and preference for mask and M31 showed mixed control. The present research shows a path to a more complete analysis of stimulus control in studies on the manipulation of the number of choices and indicates that this variable may be an efficient way to reduce the difficulty in acquisition of discriminations in applied context.

Submitted by Hellen Luz (hellencrisluz@gmail.com) on 2017-09-19T18:15:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_. AvaliacaoPerfilResposta.pdf: 1216290 bytes, checksum: aa6914fe760a75138524f60de03a8baa (MD5) / Rejected by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br), reason: Aguardar as orientações on 2017-10-10T16:49:34Z (GMT) / Submitted by Hellen Luz (hellencrisluz@gmail.com) on 2017-10-17T17:49:25Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoPerfilResposta.pdf: 1216290 bytes, checksum: aa6914fe760a75138524f60de03a8baa (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-11-23T12:26:19Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoPerfilResposta.pdf: 1216290 bytes, checksum: aa6914fe760a75138524f60de03a8baa (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-23T12:26:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoPerfilResposta.pdf: 1216290 bytes, checksum: aa6914fe760a75138524f60de03a8baa (MD5) Previous issue date: 2011-04-19 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O Modificador da Resposta Imune Canova® (CA) é um medicamento homeopático indicado para pacientes com sistema imune deprimido, uma vez que este medicamento parece aumentar a imunidade inata e induzir uma resposta imune contra várias e severas condições patológicas, incluindo as neoplasias. Esse aumento da imunidade inata é devido a sua atuação na proliferação e na diferenciação de células hematopoéticas e na indução a diferenciação mononuclear em células da medula óssea. O composto químico N-Metil N-Nitrosuréia (MNU) é um poderoso agente carcinogênico alquilante capaz de ocasionar mutações pontuais, aberrações cromossômicas ou ainda metilação do DNA, que induzem o desequilíbrio no sistema de defesa da célula e, assim, interrompendo mecanismos relacionados a metabolismo celular. Este composto tem sido amplamente utilizado na indução de tumores de fins experimentais. Objetivo do presente trabalho é avaliar o padrão de resposta celular hematopoiética em primatas da espécie Cebus apella expostos ao carcinógeno N-Metil-N-Nitrosuréia (MNU) e submetidos ao tratamento com o Modificador da Resposta Imune Canova®, através da análise de parâmetros hematológicos, bioquímicos, imunes e do ciclo celular. Foram utilizados 13 (treze) animais adultos, da espécie Cebus apella divididos em cinco grupos principais: o controle (negativo e positivo) e o experimental (composto por três subgrupos). O primeiro grupo experimental recebeu o MNU durante trinta e cinco dias, o segundo recebeu o tratamento com o Canova durante três dias, e o terceiro recebeu o MNU durante 35 dias e ao final desse período recebeu tratamento com o Canova durante três dias. A avaliação da reposta celular imune foi através de imunufenotipagem (CD4, CD8, CD3, T, B, NK) e do hemograma completo, a função hepática e renal através análise bioquímica (ALT, AST, GGT, ureia e creatinina) e a avaliação da cinética do ciclo celular por citometria de fluxo. Na análise dos parâmetros hematológicos os valores de hematócrito, hemácias e hemoglobina dos grupos controle positivo apresentaram-se significativamente menores, quando comparados aos grupos controle negativo, demonstrando um quadro de anemia, já o aumento de células da linhagem branca nesses grupos provavelmente é devido à resposta inflamatória do animal frente ao provável processo neoplásico. O aumento dos leucócitos também foi observado nos grupos experimentais tratados com o CA, fato este explicado pela ação do medicamento, que atua como um modificador da resposta imune. Apesar de já ter sido relatado que CA pode atuar aumentando o número de neutrófilos, no presente estudo não observamos esta ação do medicamento, provavelmente pelo curto período de tempo do tratamento. Os monócitos apresentaram-se diminuído no grupo tratado com o MNU e aumentado nos grupos que receberam CA provavelmente pelo medicamento atuar na ativação de macrófagos via estimulação da de monócitos. Na análise bioquímica, a uréia e a creatinina apresentaram-se alteradas nos grupos que receberam o MNU de forma aguda, estas alterações, bem como as encontradas na análise de enzimas hepáticas, podem ser associadas com os sintomas típicos da intoxicação por drogas carcinogênicas. Na análise da cinética do ciclo celular os animais tratados com CA, houve um aumento significativo de células nas fases G0-G1 bem como a porcentagem de células em estágio de proliferação celular (fases G2-M). Concluímos que CA minimizou a toxicidade do MNU em certos parâmetros hematológicos e bioquímicos, podemos observar a sua habilidade parcialmente modificadora da resposta imune, por aumentar a contagem de leucócitos, porém sem alterar o padrão de marcadores imunológicos. Desta forma CA então é capaz de restaurar alguns componentes do sistema hematopoiético, e pode atuar como adjuvante em tratamentos de quimioterapia. / The Immune response modifier Canova® (CA) is a homeopathic drug indicated for patients with a depressed immune system, once this medicine appears to increase the innate immunity and induce an immune response against multiple and severe pathological conditions, including Neoplasms. This increase of innate immunity is due to its involvement in the proliferation and differentiation of hematopoietic cells and mononuclear differentiation induction in bone marrow cells. The chemical compound N-Methyl-N-Nitrosourea (MNU) is a alkylating agent powerful carcinogenic able to cause mutations, chromosomal aberrations and DNA methylation, that induce the imbalance in the defense system of the cell and thus stop mechanisms related to cellular metabolism. This compound has been widely used in the induction of experimental tumors. The goal of this work is to assess the pattern of hematopoietic cell response in Cebus apella primate species exposed to carcinogenic N-Methyl-N-Nitrosourea (MNU) and subjected to the treatment with the Immune response modifier Canova®, through the analysis of biochemical, haematological, immune and cell cycle. We had used 13 (thirteen) adult animals of the species Cebus apella divided into five main groups: the control (negative and positive) and experimental (composed of three subgroups). The first experimental group received the MNU during thirty-five days, the second received treatment with Canova during three days, and the third received the MNU during 35 days and the end of this period received treatment with Canova during three days. Evaluation of cellular immune response was through immunophenotyping (CD3, CD4, CD8, T, B, NK) and complete blood count, liver and kidney function through biochemical analysis (ALT, AST, GGT, urea and creatinine) and kinetic evaluation of cell cycle by flow cytometry. Analysis of haematological values of hemoglobin, hematocrit and red blood cells of positive control groups performed significantly lower when compared to the negative control groups, demonstrating an anemia, while the increased white lineage cells in these groups is probably due to the animal's inflammatory response to neoplastic process. The increase of leukocytes has also been observed in experimental groups treated with the CA, a fact explained by the action of this drug, which acts as a modifier of immune response. Although it has been reported that CA can act by increasing the number of neutrophils, in this study we did not observe this action of the medicinal product, probably by the short time of treatment. Monocytes were decreased in the group treated with MNU and risen in groups that received CA probably by drug act in the activation of macrophages via stimulation of monocytes. In biochemical analysis, urea and creatinine were changed in the groups that received the MNU acutely, these changes, as well as those found in the analysis of liver enzymes, can be associated with typical symptoms of poisoning by carcinogenic drugs. Analysis of cell cycle kinetics of animals treated with CA, there had been a significant increase in cell G0-G1 as well as the percentage of cells in cellular proliferation stage (stageG2-M). We found that CA had minimized the toxicity of the MNU in certain haematological and biochemical, we had observed their partially skill to modify immune response, as improve white blood cell count, but without changing the pattern of immunological markers. Then CA is able to restore some hematopoietic system components and can act as an adjuvant in chemotherapy treatments.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-03-23T15:49:46Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_AvaliacaoUsoNanoparticulas.pdf: 1640772 bytes, checksum: a5aed1934809db6b93411a3f1d5c38eb (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-03-27T13:02:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_AvaliacaoUsoNanoparticulas.pdf: 1640772 bytes, checksum: a5aed1934809db6b93411a3f1d5c38eb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-27T13:02:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_AvaliacaoUsoNanoparticulas.pdf: 1640772 bytes, checksum: a5aed1934809db6b93411a3f1d5c38eb (MD5) Previous issue date: 2014-12-19 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Sistema de nanopartículas à base de lipídios têm sido usados como veículos experimentais para agentes quimioterápicos no tratamento do câncer. Recentemente essas preparações de nanopartículas foram testadas também em modelos animais de doenças inflamatórias cardiovasculares crônicas, doenças reumáticas entre outras. Acredita-se que esses sistemas suspostamente atenuem os graves efeitos tóxicos de agentes quimioterápicos antineoplásicos. Este estudo teve como objetivo investigar os efeitos da associação do paclitaxel a um sistema de nanopartículas à base de lipídios no tratamento crônico em primatas não-humanos, da espécie Cebus apella, por meio de extensas documentações e métodos detalhados da análise toxicológica através de bioquímica sérica, parâmetros hematológicos e histopatológicos. As nanopartículas a base de lipídios (LDE) eram constituída por ésteres de colesterol esterificado e colesterol, lectina e treolin, com adição de paclitaxel. Foram estudados dezoito Cebus apella; sendo que três animais foram tratados apenas com solução salina, administrada por via intravenosa, a cada três semanas, durante seis ciclos de tratamento; seis animais foram tratados com o paclitaxel associado a LDE no mesmo regime de administração, com três animais recebendo a dose mais baixa do fármaco (175 mg/m²) e três com a dose mais elevada (250mg/m2); seis animais foram tratados com o paclitaxel na forma comercial, sendo que três receberam as doses mais baixas (175 mg/m²) e outros três com doses mais elevadas (250mg/m2). Três semanas após o último ciclo de tratamento foram submetidos a eutanásia por dosagem letal de anestésico, e os fragmentos de tecidos foram recolhidos para a análise histopatológica. Em três animais não-tratados, a cinética plasmática da LDE foi determinada após a injeção intravenosa do colesterol radioativo (3H), seguido de coleta de sangue ao longo de 24 horas. O projeto foi aprovado pelo comitê de ética em pesquisa com animais de experimentação da UFPA (CEPAE/BIO008-11). No grupo LDE-paclitaxel, nenhuma toxicidade clínica foi observada, o peso, assim como o consumo de alimentos foram semelhantes aos animais pertencentes ao grupo controle. O tratamento foi interrompido após o segundo ciclo em quatro animais de grupo que recebeu o paclitaxel na forma comercial, devido a elevada toxicidade clínica, entretanto dois animais completaram os 6 ciclos de tratamento. Esses dois animais apresentaram perda de peso, náuseas e vômitos, diarréia, lesão inflamatória descamativa, perda de 70% do pelo corpóreo e diminuição da atividade física. A dose de paclitaxel 175 mg/m2 é usado em quimioterapia contra o câncer com uma toxicidade considerável, enquanto que a dose a 250 mg/m2 é intolerável e mostra toxicidade considerável nos pacientes. O uso de LDE como transportador de fármaco, em ambos as doses neutralizou consideravelmente a toxicidade do fármaco em primatas não humanos da espécie Cebus apella, intimamente relacionadas a sujeitos humanos. Isso foi observado não só devido as manifestações clínicas, bioquímicas e hematológicas, mas também pela análise histopatológica do estômago, intestino delgado e grosso, esôfago, pâncreas, traqueia e da vesícula biliar. Os resultados suportam a hipótese de que os sistemas de nanopartículas à base de lipídios utilizado como transportadores de droga pode oferecer ferramentas valiosas na diminuição da toxicidade e aumentar a segurança dos agentes quimioterápicos, assim como, amplia a sua utilização em outras doenças crônicas que não o câncer. / Lipid-based nanoparticle systems have been used as vehicles for chemotherapeutic agents in experimental cancer treatments. More recently, those preparations have also been assayed in animal models of cardiovascular, rheumatic and other chronic inflammatory diseases. In general those systems reportedly attenuate the severe toxicities of chemotherapeutic agents. This study was aimed to investigate the effects of associating paclitaxel to a lipid-based nanoparticle system upon the organism of a non-human primate, Cebus apella, by extensively documenting the toxicity by serum biochemistry, hematological and detailed histopathological methods. The lipid nanoparticles (LDE) were constituted of cholesterol esters and esterified cholesterol, lecithin and triolin, with addition of paclitaxel. Eighteen Cebus apella were studied; three animals were treated with LDE only, without paclitaxel, as ministered intravenously every three weeks, during six treatment cycles; six animals were treated with paclitaxel associated to LDE at the same administration scheme, three with the lower (175mg/m2) and three with higher (250mg/m2) paclitaxel doses; six animals were treated with commercial paclitaxel, three with the lower and three with the higher doses levels. Three weeks after the treatment cycle the animals were euthanized by lethal anesthetic dose, and tissues fragments were collected for histopathological analysis. In three non-treated animals, the plasma kinetics of LDE’s labeled with radioactive cholesterol was determined after intravenous injection and blood sampling over 24 hours. The ethics committee in research with experimental animals UFPA (BIO008-11) approved the project. In the LDE-paclitaxel group, no clinical toxicity appeared, and the weight food consumption curve were similar to controls. Treatment was interrupted after the second cycle in four animals of commercial paclitaxel group for very high clinical toxicity but the remaining two complete the 6-cycle-treatment. Those two animals presented weight loss, nausea and vomiting, diarrhea, escame decamation, 70% fur loss and loss of physical activity. The 175mg/m2 paclitaxel dose is used in cancer chemoterapie with considerable toxicity, while the 250 mg/m2 dose shows intorable toxicity to the patients. The use of LDE as carrier in both those levels was almost complete neutralized the toxicity of the drug in this species more closed related to human subjects. This was observed not only by clinical, biochemical and hematological profiles but also by the histopathological analysis of stomach, small and large intestine, esophagus, pancreas, trachea and gallbladder. The current results support the assumption that lipid-based nanoparticles systems used was drug carriers can offer valuable tools decrease the toxicity and increase the safety of the chemotherapeutic agents, while extending the use to chronic diseases other than cancer.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-05-15T11:45:34Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_CriopreservacaoSemenMacaco.PDF: 1133952 bytes, checksum: fac97a88b90276c4785ddf98ac2b835c (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-05-17T12:51:30Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_CriopreservacaoSemenMacaco.PDF: 1133952 bytes, checksum: fac97a88b90276c4785ddf98ac2b835c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-17T12:51:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_CriopreservacaoSemenMacaco.PDF: 1133952 bytes, checksum: fac97a88b90276c4785ddf98ac2b835c (MD5) Previous issue date: 2015-02-24 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O objetivo principal do presente estudo foi estabelecer um protocolo eficiente de criopreservação seminal em Sapajus apella para a manutenção da viabilidade espermática. Para isso, foi comparado o desempenho dos diluidores TES-TRIS, ACIN e ACP-118® para escolher do melhor diluidor durante a dissolução do coágulo seminal e resfriamento, para posteriormente ser estabelecido a melhor concentração de glicerol (3; 5 e 7%) a ser adicionado no diluidor, bem como avaliar a suplementação do antioxidante catalase (10 µg e 50 µg) no meio de congelação seminal, no intuito de melhorar os parâmetros espermáticos. Foram utilizados seis machos adultos de S. apella oriundos do Centro Nacional de Primatas. As coletas do sêmen foram realizadas por eletroejaculação com probe retal, após a contenção química dos animais com Cloridrato de Ketamina e Cloridrato de Xilazina. Na primeira fase do projeto, o sêmen obtido foi diluído em TES-TRIS, ACIN e ACP®-118, mantido em banho-maria a 37 °C. Após dissolução do coágulo, o sêmen foi resfriado em geladeira a 4°C por 90 minutos, e avaliadas após 28h quanto a motilidade, o vigor, e o percentual de integridade de membrana antes e após o resfriamento. ACP®-118 foi o melhor diluidor para preservar a motilidade dos espermatozoides e integridade de membrana plasmática após 28 horas de incubação. A partir desse resultado, foi realizada a criopreservação avaliando diferentes concentrações de glicerol (3, 5 e 7%). Os espermatozoides criopreservados a 3% de glicerol apresentaram melhores resultados. Na segunda fase do projeto, foi realizada a criopreservação do sêmen de S. apella em diluidor ACP®-118 suplementado ou não com antioxidante catalase (10µg/mL e 50µg/mL). Todos os tratamentos foram eficazes na manutenção de parâmetros espermáticos, sendo possível a recuperação da motilidade pós-descongelamento. O tratamento catalase 50 foi o melhor de manutenção do vigor durante após resfriamento, e na integridade de membrana plasmática após a descongelação espermática. Em conclusão, ACP-118® pode ser usado de forma eficiente como diluidor para a criopreservação de sêmen S. apella adicionado de 3% de glicerol, além de que a adição do antioxidante catalase mostrou efeito benéfico durante esse processo. / The main objective of the present study was to establish an efficient semen cryopreservation protocol in Sapajus apella for maintaining sperm viability. For this, we compared the performance of TES-TRIS, CWS and ACP-118® extenders during the seminal coagulum dissolution and cooling. Then, in order to improve the sperm parameters, we also determined the glycerol concentration (3; 5 and 7%) as well as to evaluate the effect of catalase antioxidant (10 µg and 50 µg). Therefore, six adult males of S. apella from the National Primate Center were used. Semen was collected by electro-ejaculation with rectal probe after chemical restraint of animals with ketamine and xylazine hydrochloride. In the first phase of the project, the semen obtained was diluted in TES- TRIS, CWS and ACP®-118 extenders, kept in a water bath at 37 °C. After coagulum dissolution, the semen was cooled in the refrigerator at 4 °C for 90 minutes and evaluated after 28h for motility, vigor and plasma membrane integrity percentage before and after the cooling. ACP®-118 was the best extender to preserve the motility sperm and plasma membrane integrity after 28 hours of incubation. Based on these results, cryopreservation was performed by evaluation of different concentrations of glycerol (3, 5, and 7%). The cryopreserved sperm to 3% glycerol had better results. In the second project phase was performed S. apella semen cryopreservation in ACP®-118 extender supplemented or not with catalase antioxidant (10 µg/mL and 50 µg /mL). All treatments were effective in maintaining sperm parameters and was possible to recovery the post-thaw motility. The catalase 50 treatment was the best for maintenance of the vigor after cooling and plasma membrane integrity in post-thaw sperm. So, we concluded that ACP-118® extender can be efficiently used for S. apella semen cryopreservation added 3% glycerol, moreover, the addition of the catalase antioxidant showed beneficial effect during this process.

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-07-02. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:48:37Z : No. of bitstreams: 1 000831393_20170905.pdf: 73854 bytes, checksum: d43f8d7fbe553ee257734bb0bf25377d (MD5) Bitstreams deleted on 2017-09-06T14:01:42Z: 000831393_20170905.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-09-06T14:02:28Z : No. of bitstreams: 1 000831393.pdf: 762384 bytes, checksum: c4e3a4693803c605b4ab7eef86fdf271 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste trabalho foi determinar as dimensões oculares dos macacos-prego por meio de ultrassonografia modo-A e ceratometria, e determinar o poder dióptrico da lente intraocular empregando-se fórmulas de terceira e quarta geração. Foram utilizados 18 animais (36 olhos) da espécie Cebus apella. O cálculo da lente intraocular foi realizado utilizando-se o software Holladay IOL Consultant® e EyeCalculator 6.0®. As fórmulas empregadas para o cálculo foram Holladay 2, Haigis e Hoffer Q que possibilitaram prever lentes com poder dióptrico médio de 29,43 D; 31,25D e 46,71D, respectivamente. Não foi observado diferença estatística entre os valores dióptricos das lentes calculadas pelas fórmulas Holladay 2 e Haigis; no entanto, com a aplicação da fórmula Hoffer Q observou-se diferença estatística, determinando lentes mais potentes. Considerando os parâmetros biométricos oculares avaliados, e o poder dióptrico calculado por uma mesma fórmula não há diferenças significativas entre machos e fêmeas, e lateralidade dos olhos para um mesmo animal / The aim of this study was to determine the ocular dimensions of capuchin monkeys using ultrasound A and keratometry, determining the refractive power of the IOL formulas employing third and fourth generation. Were used 18 animals (36 eyes) of the species Cebus apella. The calculation of intraocular lens was performed using the Holladay IOL Consultant ® and EyeCalculator ® 6.0 software. Holladay 2, Hoffer Q, and Haigis formulas were employed to do the calculus and determin lenses with an average refractive power of 29.43 D; 31.25 D and 46.71 D, respectively. No statistical difference was observed between the lens dioptric values calculated by formulas Holladay 2 and Haigis; however, we could see statistical difference between groups when the the formula Hoffer Q was applied, resulting in more powerful lenses. The reviews of ocular biometric parameters and the lens power calculated by the same formula showed neither significant differences between males and females, or between the right and left eyes of each animal

Orientador: José Joaquim Titton Ranzani / Banca: Cláudia Valéria Seullner Brandão / Banca: Antônio Carlos Rodrigues / Resumo: O objetivo deste trabalho foi determinar as dimensões oculares dos macacos-prego por meio de ultrassonografia modo-A e ceratometria, e determinar o poder dióptrico da lente intraocular empregando-se fórmulas de terceira e quarta geração. Foram utilizados 18 animais (36 olhos) da espécie Cebus apella. O cálculo da lente intraocular foi realizado utilizando-se o software Holladay IOL Consultant® e EyeCalculator 6.0®. As fórmulas empregadas para o cálculo foram Holladay 2, Haigis e Hoffer Q que possibilitaram prever lentes com poder dióptrico médio de 29,43 D; 31,25D e 46,71D, respectivamente. Não foi observado diferença estatística entre os valores dióptricos das lentes calculadas pelas fórmulas Holladay 2 e Haigis; no entanto, com a aplicação da fórmula Hoffer Q observou-se diferença estatística, determinando lentes mais potentes. Considerando os parâmetros biométricos oculares avaliados, e o poder dióptrico calculado por uma mesma fórmula não há diferenças significativas entre machos e fêmeas, e lateralidade dos olhos para um mesmo animal / Abstract: The aim of this study was to determine the ocular dimensions of capuchin monkeys using ultrasound A and keratometry, determining the refractive power of the IOL formulas employing third and fourth generation. Were used 18 animals (36 eyes) of the species Cebus apella. The calculation of intraocular lens was performed using the Holladay IOL Consultant ® and EyeCalculator ® 6.0 software. Holladay 2, Hoffer Q, and Haigis formulas were employed to do the calculus and determin lenses with an average refractive power of 29.43 D; 31.25 D and 46.71 D, respectively. No statistical difference was observed between the lens dioptric values calculated by formulas Holladay 2 and Haigis; however, we could see statistical difference between groups when the the formula Hoffer Q was applied, resulting in more powerful lenses. The reviews of ocular biometric parameters and the lens power calculated by the same formula showed neither significant differences between males and females, or between the right and left eyes of each animal / Mestre

O núcleo hipotalâmico supraquiasmático (SCh), apresenta caracterização neuroquímica com duas subpopulações principais de células, a produtora de polipeptídeo intestinal vasoativo (VIP) e argenina vasopressina (AVP). As fibras IR AVP e VIP oriundas do SCh apresentam características morfológicas específicas que possibilitam o rastreamento a longas distâncias dentro do hipotálamo. No presente estudo buscamos mapear os terminais IR VIP e AVP nas áreas hipotalâmicas do primata Cebus apella utilizando a imuno-histoquímica, e fazer a identificação das áreas hipotalâmicas recipientes do SCh, utilizando o mapeamento da distribuição das fibras IR associado à análise morfológica destas duas substâncias neuroativas. As fibras IR VIP e AVP com características do SCh foram identificadas em porções anteriores como hipotálamo anterior, área pré-óptica, área hipotalâmica lateral, SPZV, até porções mais caudais, porção retroquiasmática, área tuberal. Os resultados indicam um padrão similar de distribuição de fibras IR VIP e AVP nas áreas do hipotálamo e também em áreas descritas como recipientes das projeções do SCh, quando comparado com outras espécies como roedores descritos na literatura. / The suprachiasmatic nucleus (SCN) of the hypothalamus, contains a variety of different neurons that tend to form two major subpopulations within the nucleus, the vasoactive intestinal peptide (VIP) and vasopressin (VP). The immunoreactive (IR) fibers derived from the VIP and VP IR cells of the SCN present morphological characteristics that allow their specific tracking in long distances within the hypothalamus. In the present investigation we aimed map VIP and VP IR terminals in hypothalamic areas of the primate Cebus apella using immunohistochemistry, and to do identification of hypothalamic recipient areas from SCN using the mapping distribution of fibers IR associated with morphological analysis of these two neuroactive substances. VIP and VP IR fibers with characteristics from SCN were identified in the rostral anterior hypothalamic area and medial preoptic area, laterally to the lateral hypothalamic area, and more caudally in SPZV and retrochiasmatic tuberal area. The results indicate that there is a similarity in the pattern of distribution of VIP and VP fibers in the hypothalamic areas and also in areas recipients from SCN projections when compared with nocturnal rodent species described in the literature.

Submitted by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2012-12-12T14:17:30Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AvaliacaoPerfilMetilacao.pdf: 1830589 bytes, checksum: f88cbaf31829d2cb8cb979c72b380439 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2012-12-20T12:59:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AvaliacaoPerfilMetilacao.pdf: 1830589 bytes, checksum: f88cbaf31829d2cb8cb979c72b380439 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-12-20T12:59:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AvaliacaoPerfilMetilacao.pdf: 1830589 bytes, checksum: f88cbaf31829d2cb8cb979c72b380439 (MD5) Previous issue date: 2012 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O câncer gástrico continua sendo uma importante causa de morte dentre os tipos de câncer no Brasil e no mundo. A origem do câncer de estomago provém, assim como nos demais, de acúmulo de alterações genéticas. Portanto, se faz necessário saber quais alterações genéticas são importantes para desencadear a patogênese do câncer gástrico. O MNU, conhecido carcinógeno, quando ingerido de forma oral em doses determinadas desencadeia o desenvolvimento de adenocarcinoma gástrico do tipo intestinal, com aparecimento de estágios pré definidos característico deste tipo tumoral. Com base nestes conhecimentos, realizamos um experimento com 6 macacos da espécie Cebus apella induzidos à desenvolver câncer gástrico do tipo intestinal. Os animais ingeriam 16mg/kg de peso diariamente da droga, com desenvolvimento de lesões pré-neoplásicas em todos. Infelizmente, devido à toxicidade da droga, somente um animal sobreviveu ao tratamento e desenvolveu desenvolveu uma massa tumoral propriamente dita. Foram feitas avaliações periódicas dos animais, em dias pré-determinados (ao início, no 120º, 150º, 300º, 940º) com coletas de fragmentos da mucosa gástrica. Foram coletadas 20 amostras de tecido, distribuídas entre mucosa normal, gastrite, displasia, metaplasia e tumoral. Destas amostras extraímos DNA para as análises do gene CDH1. Não há na literatura sequencia deste gene para a espécie utilizada no estudo. Com este objetivo, utilizamos iniciadores construídos a partir de sequencias de CDH1 de Callithrix jacchus (espécie filogeneticamente) e seqüenciamos cerca de 342pb da região promotora de CDH1 de C. apella. As análises mostraram uma similaridade de 98% desta região com a dos humanos, com presença de vários sítios de ligação de fatores de transcrição (sp1, Ap2, NF-x, AREB6, Puf e CTF) além da presença do CAAT Box. Esta região ainda possui 30 sitios CpGs, o que indica que ela pode estar sofrendo regulação epigenética. Para se verificar como se encontrava o padrão de metilação desta região realizamos uma análise de MSP com iniciadores específicos e constatamos que houve predominância de alelos não metilados de CDH1 para todas as amostras pré neoplásicas e a amostra de adenocarcinoma encontra-se metilada. O que pode ser constatado com um ensaio de Imunohistoquímica, onde somente a amostra tumoral não expressava a proteína caderina. Desta maneira nossas análises sugerem que a metilação do gene CDH1 desempenha papel importante na tumorigênese gástrica em C. apella, e é um evento tardio, uma vez que não é observado nos outro tipos teciduais não tumorais E, partindo-se da similaridade entre as seqüências, podemos sugerir que o mesmo evento pode está ocorrendo em humanos. Esta metilação do promotor do CDH1 leva a um silenciamento deste gene o que desencadeia o estabelecimento de adenocarcinomas gástricos, fato apoiado pela literatura onde vários trabalhos apontaram que a hipermetilação do promotor da caderina está associada ao desenvolvimento do câncer gástrico. / The gastric cancer remains a major cause of death among cancers in the world. In Brazil, are expected around 500 000 new cases in 2012/2013. The origin of stomach cancer, as in others, arises from the accumulation of genetic alterations. Therefore, it is necessary to know which genetic changes are important in triggering the pathogenesis of gastric cancer. We know that the intestinal type develops through well defined stages. The MNU - a known carcinogen - when ingested in oral form at dosages determined triggers development of this histological type of gastric cancer. Based on this knowledge, we conducted an experiment with six specime of Cebus paella, induced to develop intestinal type gastric cancer. The animals consumed 16mg/kg of body weight daily drugs. All pre-neoplasic lesions developed. Due to drug toxicity, only one survived the entire treatment and developed a tumor. Periodic evaluations were made of animals in pre-determined days (the beginning, days 120, 150, 300, 940) during which samples were made of the gastric mucosa. We collected 20 samples of tissue, distributed among normal mucosa, gastritis, dysplasia, metaplasia, and tumor. DNA extracted from these samples for further analyzes of the CDH1 gene. There is no sequence of this gene in the literature for the species under study. So the first step was to get this sequence. Using the initiators constructed from sequences of CDH1 Callithrix jacchus (species phylogenetically closer to C. apella) we get a sequence of 342pb. There is a similarity of 98% with humans, the presence of binding sites for transcription factors like (sp1, Ap2, NF-x, AREB6, Puf and CTF) and the presence of CAAT Box. The sequence has 30 CpG sites could suffer epigenetic regulation. We also performed MSP analysis with specific primers and found that the region analyzed, there was predominance of the unmethylated CDH1 alleles for all samples pre-neoplastic and adenocarcinoma sample is methylated. When we compared these data with immunohistochemistry revealed that only tumor sample did not express the protein cadherin. Our analyzes suggest that methylation of the CDH1 gene plays an important role in gastric tumorigenesis in C. apella. And, from the similarity between sequences, we suggest that the same occurs in humans. This cadherin promoter methylation leads to inactivation of the gene and establishment of gastric adenocarcinomas. The cadherin promoter hypermethylation has been reported in several articles associated with the development of gastric cancer.

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2014-02-07T18:17:41Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AtivacaoPartenogeneticaOocitos.pdf: 699110 bytes, checksum: 0f6384ec24312072a53b2c2bb8417147 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2014-02-27T12:58:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertacao_AtivacaoPartenogeneticaOocitos.pdf: 699110 bytes, checksum: 0f6384ec24312072a53b2c2bb8417147 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-27T12:58:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacao_AtivacaoPartenogeneticaOocitos.pdf: 699110 bytes, checksum: 0f6384ec24312072a53b2c2bb8417147 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Previous issue date: 2011 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O objetivo deste trabalho foi avaliar a maturação oocitária in vitro (MIV) na espécie C. apella, relacionando com a expansão das células do cumulus e promovendo a produção in vitro de embriões (PIVE), por meio da ativação partenogenética e fecundação in vitro (FIV). Os oócitos puncionados dos folículos antrais medindo 2-9 mm de diâmetro foram classificados em desnudos (OD), com poucas células do cumulus (PCC) e complexo cumulus-oophorus intacto (CCO intacto). A expansão das células do cumulus foi analisada nos tempos de 0, 36 e 40 h de MIV e classificada em cinco categorias de expansão. A competência meiótica nos oócitos foi verificada pela extrusão do 1º corpúsculo polar (CP) após 40 h de MIV. Os oócitos foram divididos em 3 grupos para PIVE: grupo controle (FIV), ativação partenogenética utilizando 5 μM de ionomicina em associação com 2 mM de 6-DMAP ou em associação com 50 μM de roscovitina. Para a FIV, os espermatozóides obtidos do coágulo seminal, foram diluídos em água de coco em pó (ACP-118®) e submetidos ao resfriamento para serem levados posteriormente ao cultivo in vitro com os oócitos. O aumento no tempo da MIV e a presença de várias células do cumulus associadas aos oócitos proporcionaram maior expansão das células do cumulus, pois somente os CCO intactos alcançaram a expansão total em 40 h de MIV (p < 0,005). A presença das células do cumulus nos oócitos (PCC e CCO intactos) maturados in vitro por 40 h promoveu a competência meiótica (metáfase II) significamente mais elevada que os OD (p < 0,005). Após 6 h de resfriamento em ACP-118® e separação pelo método do swin-up, os espermatozóides utilizados na FIV possuíam 80% de motilidade e vigor 4. O tratamento com ionomicina/roscovitina promoveu a extrusão do 2º CP e formação pronuclear e com ionomicina/6-DMAP formou pronúcleos, sem extrusão do 2º CP. O protocolo utilizando a ionomicina/6-DMAP e da FIV originou as primeiras divisões embrionárias, observada pela taxa de clivagem. Os resultados encontrados sugerem que em C. apella a presença e a expansão total das células do cumulus estão relacionadas com a competência oocitária. A utilização dos oócitos maturados in vitro e dos espermatozóides diluídos e resfriados em ACP-118® promoveu a PIVE por diferentes métodos nesta espécie. / The objective of this study was to evaluate in vitro maturation (IVM) of oocytes in C. apella, reporting with cumulus expansion and promoting in vitro embryo development, by means of the parthenogenetic activation and in vitro fertilization (IVF). Oocytes were recovered by antral follicles aspiration measuring 2-9 mm of diameter and had been classified in denuded oocyte (DO), poor cumulus cells (PCC) and intact cumulus-oophorus complex (intact COC). At the 0, 36 and 40 h of IVM culture, the degree of cumulus expansion was assessed and classified into five categories. Development competence oocytes were verified which includes abstriction of the first polar body after 40 h IVM. Oocytes were divided in three groups: control group (IVF); parthenogenetic activation using 5 μM of ionomycin in association with 2 mM of 6-DMAP; or with 50 μM of roscovitine. Seminal coagulum was liquefied in coconut water solution (ACP-118®) and submitted to the cooling to be taken later IVF culture. The increase in the time of the IVM and the presence of some cumulus cells associates with oocytes had provided greater cumulus expansion, therefore the intact CCO had only reached the total expansion in 40 h after IVM (p < 0.005). The presence of the cumulus cells in the in vitro matured oocytes (intact COC and PCC) for 40 h promoted meiotic competence more than DO (p < 0.005). After 6 h of cooling in ACP-118® and separation for SWIN-UP method, the spermatozoa used in the IVF obtained 80% motility and vigor 4. Exposure of oocytes to ionomycin/roscovitine induced the resumption of meiosis with extruded the second polar body and formed pronuclei. In contrast, oocytes activated with ionomycin/6-DMAP induced pronuclear formation without extrude a second polar body. IVF and ionomycin/6-DMAP treatments produced embryos that reached the cleavage stage. Our results suggest that the presence and the full cumulus expansion are correlate with the acquisition of meiotic and development competence in C. apella. Oocytes matured in vitro and the spermatozoa diluted and cooled in ACP-118® produced embryos in this specie.