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Determinação do GL50 em dois modelos de sepse experimental

Locks, Giovani de Figueiredo January 2012 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2012 / Made available in DSpace on 2013-06-26T00:12:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 315357.pdf: 1183526 bytes, checksum: 3438b89e5c0d9c1e499bd8b7a6b63ef7 (MD5) / INTRODUÇÃO Ainda não foi descrito um modelo experimental ideal de para estudo da sepse. O modelo mais utilizado consiste na ligadura e perfuração do ceco. Neste estudo foi avaliado um novo modelo. OBJETIVO: Este estudo tem o objetivo de estimar o calibre de agulha letal mediano (GL50) do novo modelo e compará-lo ao GL50 do modelo clássico. MATERIAL E MÉTODO Foram utilizados 22 ratos machos albinos da linhagem Wistar. Os animais foram distribuídos em dois grupos - Grupo I (GWi): os animais foram submetidos a sepse experimental por ligadura e punção do ceco; Grupo II (GdAc): os animais foram submetidos a sepse experimental por ligadura do cólon ascendente e punção do ceco. Para a estimativa do GL50 foi utilizado o método sequencial up-and-down. RESULTADOS O GL50 no Grupo I (Gwi) foi 19 Gauge (Intervalo de Confiança 17 a 22 Gauge). No Grupo II (GdAc) não foi possível o cálculo do GL 50, pois houve óbito em todos os animais. CONCLUSÕES O modelo que foi avaliado neste ensaio tem letalidade muito alta. Futuras pesquisas são necessárias para estabelecer o papel do modelo Obstrução e Perfuração Intestinal nos estudos sobre a fisiopatologia e tratamento da sepse e da obstrução intestinal.<br> / Abstract : INTRODUCTION An ideal model of experimental sepsis was not yet described. The most popular model is Cecal Ligation and Puncture. In this study, a new model was evaluated. OBJECTIVE The aim of this study was to estimate the lethal needle diameter in 50% of cases (GL50) of the new model and compare it to the GL50 of the classic one. MATERIAL AND METHODS Male albine Wistar rats were studied (n=22). Animals were allocated into two study groups # Group I (GWi): experimental sepsis was induced by cecal ligation and puncture; Group II (GdAc): experimental sepse was induced by ascending colon ligation and cecal puncture. Up-and-down method was used to determinate the GL50. RESULTS GL50 in Group I (GWi) was 19 Gauge (Confidence Interval 17 to 22 Gauge). In Group II (GdAc), determination of GL50 was not possible due to death of all animals in this group. CONCLUSIONS The new model tested in this trial has a too high lethality. Future research will define the role of the model "Intestinal Obstruction and Perforation" in research about physiology and treatment of sepsis and intestinal obstruction.
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Interações entre diferentes espécies de Candida na candidose experimental em modelos de invertebrados e vertebrados

Rossoni, Rodnei Dennis [UNESP] 16 December 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-08-13T14:51:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-12-16Bitstream added on 2014-08-13T17:59:37Z : No. of bitstreams: 1 000776405.pdf: 3048630 bytes, checksum: dd7162075858785d5b09e7766ce033f4 (MD5) / O objetivo deste estudo foi avaliar in vitro e in vivo as interações entre as diferentes espécies de Candida por meio da formação de biofilme em placas de 96 poços, indução de candidose experimental em modelo de Galleria mellonella e de camundongos imunossuprimidos. Foram estudadas as cepas padrão das seguintes espécies: C. albicans (ATCC 18804), C. krusei (ATCC 6258) e C. glabrata (ATCC 90030). A partir de cada espécie, foram formados biofilmes monotípicos e heterotípicos no fundo da placa de 96 poços por 48 h. A seguir, a quantidade de biofilme formado foi analisada pela determinação do número de unidades formadoras de colônias (UFC/mL). G. mellonella foi inoculada com suspensões homotípicas e heterotípicas de Candida (105 células/mL) e incubadas a 37°C. Durante 5 dias, o número de lagartas mortas foi avaliado diariamente para análise da curva de sobrevivência. Em outro experimento, após 0, 2, 4, 8, 12 e 24 h da infecção por Candida, a hemolinfa das lagartas foi extraída para contagem das células fúngicas (UFC/mL). Para a indução da candidose bucal em camundongos, os animais foram inoculados com suspensões microbianas homotípicas ou heterotípicas contendo 108 células/mL. Após 48 h da última inoculação, amostras do dorso da língua foram coletadas e semeadas em ágar cromogênico HiCrome para contagem de UFC/mL recuperadas da cavidade bucal. Em seguida, os animais foram eutanasiados e as línguas retiradas para análise macroscópica e microscópica. A análise dos dados de UFC/mL dos biofilmes in vitro, de Candida na hemolinfa de G. mellonella e da recuperação dos camundongos foi feita por Análise de Variância, Teste de Tukey ou t de Student. A análise da curva de sobrevivência foi realizada utilizando o teste Log-rank (Mantel-Cox). Para avaliação dos escores obtidos na análise macroscópica e histológica foram aplicados os testes de Krusk-Wallis ou Mann-Whitney ... / The aim of this study was to evaluate in vitro and in vivo interactions between different Candida species through the formation of biofilms in 96-well plates, induction of experimental candidiasis in Galleria mellonella model and immunosuppressed mice. We studied the standard strains of the following species: C. albicans (ATCC 18804), C. krusei (ATCC 6258) and C. glabrata (ATCC 90030). Monotypic biofilms of each species and heterotypic biofilms were performed on the bottom of 96-well plate for 48 h. Then, the amount of biofilm was analyzed by determining the number of colony forming units (CFU/mL). The larvae of G. mellonella were inoculated with homotypic and heterotypic suspensions of Candida (105 cells/mL) and incubated at 37°C. For 5 days, the number of dead larvae was assessed daily for survival curve analysis. In another experiment, after 0, 2, 4, 8, 12 and 24 h of infection with Candida, hemolymph of worms was extracted for counting the fungal cells (CFU/mL). For induction of oral candidiasis in mice, the animals were inoculated with homotypic or heterotypic microbial suspensions containing 108 cells/mL. After 48 h of the last inoculation, samples of the tongue were collected and seed in HiCrome chromogenic agar for counting of CFU/mL recovered from the oral cavity. Then, the animals were euthanized and their tongues removed for macroscopic and microscopic analysis. The analysis of Candida biofilms in vitro CFU/mL, the hemolymph of G. mellonella and recovery of mice were made by ANOVA, Tukey test or Student’s t test. The analysis of the survival curve was performed using GraphPad Prism using the Log-rank test (Mantel - Cox). Kruskal-Wallis or Mann-Whitney were applied for evaluation scores of macroscopic and histological analysis (p≤0,05). The results of biofilms in vitro have demonstrated a lower number of CFU/mL of C. albicans biofilms in heterotypic biofilm compared ...
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Interações entre diferentes espécies de Candida na candidose experimental em modelos de invertebrados e vertebrados /

Rossoni, Rodnei Dennis. January 2013 (has links)
Orientador: Juliana Campos Junqueira / Banca: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Ewerton Garcia de Oliveira Mima / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar in vitro e in vivo as interações entre as diferentes espécies de Candida por meio da formação de biofilme em placas de 96 poços, indução de candidose experimental em modelo de Galleria mellonella e de camundongos imunossuprimidos. Foram estudadas as cepas padrão das seguintes espécies: C. albicans (ATCC 18804), C. krusei (ATCC 6258) e C. glabrata (ATCC 90030). A partir de cada espécie, foram formados biofilmes monotípicos e heterotípicos no fundo da placa de 96 poços por 48 h. A seguir, a quantidade de biofilme formado foi analisada pela determinação do número de unidades formadoras de colônias (UFC/mL). G. mellonella foi inoculada com suspensões homotípicas e heterotípicas de Candida (105 células/mL) e incubadas a 37°C. Durante 5 dias, o número de lagartas mortas foi avaliado diariamente para análise da curva de sobrevivência. Em outro experimento, após 0, 2, 4, 8, 12 e 24 h da infecção por Candida, a hemolinfa das lagartas foi extraída para contagem das células fúngicas (UFC/mL). Para a indução da candidose bucal em camundongos, os animais foram inoculados com suspensões microbianas homotípicas ou heterotípicas contendo 108 células/mL. Após 48 h da última inoculação, amostras do dorso da língua foram coletadas e semeadas em ágar cromogênico HiCrome para contagem de UFC/mL recuperadas da cavidade bucal. Em seguida, os animais foram eutanasiados e as línguas retiradas para análise macroscópica e microscópica. A análise dos dados de UFC/mL dos biofilmes in vitro, de Candida na hemolinfa de G. mellonella e da recuperação dos camundongos foi feita por Análise de Variância, Teste de Tukey ou t de Student. A análise da curva de sobrevivência foi realizada utilizando o teste Log-rank (Mantel-Cox). Para avaliação dos escores obtidos na análise macroscópica e histológica foram aplicados os testes de Krusk-Wallis ou Mann-Whitney ... / Abstract: The aim of this study was to evaluate in vitro and in vivo interactions between different Candida species through the formation of biofilms in 96-well plates, induction of experimental candidiasis in Galleria mellonella model and immunosuppressed mice. We studied the standard strains of the following species: C. albicans (ATCC 18804), C. krusei (ATCC 6258) and C. glabrata (ATCC 90030). Monotypic biofilms of each species and heterotypic biofilms were performed on the bottom of 96-well plate for 48 h. Then, the amount of biofilm was analyzed by determining the number of colony forming units (CFU/mL). The larvae of G. mellonella were inoculated with homotypic and heterotypic suspensions of Candida (105 cells/mL) and incubated at 37°C. For 5 days, the number of dead larvae was assessed daily for survival curve analysis. In another experiment, after 0, 2, 4, 8, 12 and 24 h of infection with Candida, hemolymph of worms was extracted for counting the fungal cells (CFU/mL). For induction of oral candidiasis in mice, the animals were inoculated with homotypic or heterotypic microbial suspensions containing 108 cells/mL. After 48 h of the last inoculation, samples of the tongue were collected and seed in HiCrome chromogenic agar for counting of CFU/mL recovered from the oral cavity. Then, the animals were euthanized and their tongues removed for macroscopic and microscopic analysis. The analysis of Candida biofilms in vitro CFU/mL, the hemolymph of G. mellonella and recovery of mice were made by ANOVA, Tukey test or Student's t test. The analysis of the survival curve was performed using GraphPad Prism using the Log-rank test (Mantel - Cox). Kruskal-Wallis or Mann-Whitney were applied for evaluation scores of macroscopic and histological analysis (p≤0,05). The results of biofilms in vitro have demonstrated a lower number of CFU/mL of C. albicans biofilms in heterotypic biofilm compared ... / Mestre
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Estudos da estrutura comportamental de camundongos nos testes de nado forçado e da suspensão pela cauda

Costa, Ana Paula Ramos January 2012 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia / Made available in DSpace on 2013-03-04T18:18:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 308267.pdf: 872467 bytes, checksum: d1ba765b3e0e1ae15905dfff25dfbca0 (MD5) / A depressão é considerada uma doença potencialmente ameaçadora à vida, com um índice de suicídio chegando a 15% entre os deprimidos. Os fármacos antidepressivos proporcionam uma completa remissão para apenas cerca de 50% dos indivíduos, além de causarem vários efeitos colaterais. Portanto, modelos animais de atividade antidepressiva mostram-se ferramentas valiosas para auxiliar a pesquisa sobre a neurobiologia da doença e para avaliar novos fármacos antidepressivos. O teste do Nado Forçado (TNF) e o teste da Suspensão pela Cauda (TSC) são os testes mais usados para este tipo de avaliação devido sua fácil utilização principalmente. Entretanto, estes testes ainda são pouco sensíveis e específicos. Assim, buscamos verificar, no presente trabalho, se uma avaliação mais ampla e detalhada do catálogo comportamental apresentado pelos animais poderia superar essas limitações. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a estrutura temporal e fatorial do comportamento de camundongos Swiss submetidos ao TNF (n=30) e ao TSC (n=30), aplicando um catálogo composto por comportamentos ativos e passivos. Uma amostra completa contendo latência, duração e frequência de cada comportamento durante o período total do teste, foram agrupadas em blocos de 6 minutos totais, blocos dos 4 últimos minutos e bloco minuto-a- minuto. A análise temporal dos comportamentos mostrou que os animais apresentam mais comportamentos ativos nos 2 minutos iniciais de ambos os testes e, a partir deste momento, os comportamentos passivos é que são mais evidenciados. A análise fatorial dos comportamentos apresentados no teste do nado forçado revelou a existência de 3 componentes principais (83% da variância), enquanto que para o TSC revelou a existência de 4 fatores (93% da variância). A confiabilidade da análise fatorial foi testada pela distribuição aleatória de grupos de 10 animais para o tratamento com NaCl 0,9% (grupo controle), medicamentos antidepressivos (imipramina, desipramina e fluoxetina, 30mg/kg,i.p.) ou com estimulante motor (cafeína , 30mg/kg, i.p) 30 minutos antes de serem submetidos ao TNF ou ao TSC. Tanto os antidepressivos, quanto a cafeína, apresentaram os efeitos esperados, pois em ambos os testes: reduziram o tempo total de imobilidade. Entretanto, a cafeína e os antidepressivos modulam de maneiras diferentes os comportamentos ativos apresentados pelos animais, o que permitiu a discriminação entre essas duas classes de fármacos. Além disso, as alterações metodológicas na aquisição e análise dos dados também permitiu a separação dos mecanismos de ação dos distintos antidepressivos no TNF e no TSC. / Depression is currently considered a life-threatening disease, with a suicide rate reaching 15% among depressed patients. Antidepressant drugs provide complete remission to only about 50% of patients and cause several side effects. Therefore, animal models of antidepressant activity appear to be valuable tools to further understanding the neurobiology of disease and to evaluate new antidepressant drugs. The forced swimming test (FST) and the tail suspension test (TST) have been the most widely used tests for this type of evaluation mainly because of their ease of use. However, these tests still lack sensitivity and specificity. We here studied if the evaluation of a wider than the current catalog of behaviors could overcome these limitations. Thus, the objective of this study was to evaluate temporal and factorial structure of the behavior of Swiss mice submitted to FST (n=30) or TST (n=30) applying a catalog comprising active and passive behaviors. A complete sampling was performed over the period of either test generating frequencies and durations, which were summarized in 1 block of 6 minutes, 1 block of the last 4 minutes or 6 blocks of 1 minute (min-by-min). The temporal analysis of behaviors in the FST and TST showed that active behaviors were more prevalent in the first 2 minutes of the tests when the passive postures started to increase. The factorial analysis of behaviors in the FST provided a model with 3 components (86% of the variance) whereas in the TST were obtained 4 components (93% of the variance). The reliability of factorial analysis was tested by the random assignment of groups of 10 mice for treatment with NaCl 0.9% (control group), antidepressant drugs (imipramine, desipramine and fluoxetine, 30mg/kg, IP) or with motor stimulant (caffeine, 30mg/kg, IP) prior FST or TST. Antidepressants and caffeine showed the expected effects on mice in FST and OFT, i.e., a reduced immobility time. However, caffeine and antidepressants affected different pools of active behaviors which allowed the discrimination between the two classes of drugs in FST or TST. Moreover, the methodological changes in the data acquisition and data analysis allowed the separation of antidepressant compounds with distinct mechanisms of action in FST or TST.
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Avaliação das vocalizações ultrassônicas em diferentes modelos de mania

Wendler, Etiéli Mara January 2016 (has links)
Orientador : Prof. Dr. Roberto Andreatini / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa: Curitiba, 24/11/2016 / Inclui referências : f. 52-70 / Área de concentração / Resumo: O Transtorno de Humor Bipolar (THB) é uma desordem psiquiátrica que leva a sérios problemas de saúde para o paciente. Ele é caracterizado por oscilações cíclicas de humor manifestada por diversos sintomas (recorrências de mania, depressão e estados mistos), dificultando o desenvolvimento de um modelo animal adequado. Existem poucos modelos animais para o estudo da mania, sendo a indução do aumento da atividade locomotora pelo uso de substâncias estimulantes do sistema nervoso central (ex. anfetamina (AMP), um dos mais utilizados. Outros modelos já descrito na literatura para indução de mania são através de administrações sistêmicas de lisdexanfetamina (LDX) e quetamina; injeções de ouabaína agudamente via intracerebroventricular (ICV) e pelo modelo não farmacológico de privação de sono, todos esses modelos induzem hiperatividade que é revertida por drogas antimaníacas. Porém, avaliar somente a atividade locomotora nesses modelos já descritos teria suas limitações. As vocalizações ultrassônicas (USV) são emitidas por ratos em situações recompensadoras (ex. acasalamento, abuso de drogas), na frequência de 50-kHz e também em situações aversivas (ex. medo, dor), na frequência de 22-kHz. Foi demonstrado na literatura que animais tratados com AMP, além do aumento da atividade locomotora, esses animais aumentaram também a emissão de USV de 50 kHz e os tratamentos com lítio e tamoxifeno foram capazes de inibir essa vocalização. Sendo assim, nesse trabalho avaliamos as USV em outros modelos animais de mania. No presente estudo, no modelo de mania induzido por LDX, observamos um aumento significativo das USV de 50-kHz, que foram revertidas por tratamento com lítio. Os animais tratados com quetamina não apresentaram aumento significativo nas USV comparado ao seus controles. Quando o modelo de mania foi induzido por ouabaína ICV, observamos um estado misto na emissão das USV. Esses animais apresentaram um aumentos nas USV de 50-kHz e também na emissão das USV de 22-kHz. No modelo de mania induzido por privação de sono, os animais privados de sono por 24 horas (P24) quanto por 72 horas apresentaram um aumento na emissão das USV de 50-kHz. Esse aumento das vocalizações dos animais P24 foi revertida após o tratamento com lítio. Os resultados reportados sugerem que as USV podem ser uma variável de valor comportamental a ser adicionada em modelos animais de mania em ratos, refinando e aprofundando esses modelos e aumentando seus valor translacional. / Abstract: The Bipolar Disease (BD) is a psychiatry disorder that leads to several health problems and have great impact in the patient's life. The BD is characterized by cyclic humor oscillations manifested by several symptoms (manic recurrences, depression and mixed states), making difficult to develop a suitable animal model. There are few animal models to study mania, and the increase of locomotor activity induction by stimulants of the central nervous system, like amphetamine (AMP), is one of the most used. Other mania models already described on literatures are induced by systemic administration of lisdexamfetamine (LDX) and ketamine; injections of ouabain via intracerebroventricular (ICV) and the non pharmacological mania model induced by sleep deprivation, all these models induce hyperactivity and it is reverted by anti-manic drugs. However, to evaluate only the locomotor activity on these models would have some limitations. The ultrasonic vocalization (USV) are emitted by rats in rewarded situation (i.e. mating, drug abuse), on 50-kHz frequency, as well on aversive situation (i.e fear, pain), on 22-kHz frequency. Have been shown in literature that animals treated by AMP, besides the hyperactivity, increased the total number of USV of 50- kHz and treatments by lithium and tamoxifen were able to inhibit the USV. Therefore, in this work we evaluated the USV in other mania animal models. In the present study, on LDX induced model we observed a significant increase on 50-kHz USV, where was reverted by lithium treatment. Animals treated by ketamine did not showed signifcant increse on the number of USV compared to control group. When induced by ouabain ICV, we observed a mixed state on USV emission. These animals showed an increase on 50-kHz USV and also on 22-kHz USV. On mania model induced by sleep deprivation, the animals deprived for 24 hours (P24) and for 72 hours presented and increase on 50-kHz USV. The increase of the USV induced by P24 were reverted by lithium treatment. The results reported suggest that USV can be a valuable behavioral variable to be added in mania animal models in rats, refining and increasing the translational value.
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Regulação do IRS-2 e da AKT em modelos animais de resistencia a insulina

Alvarez Rojas, Fernanda 06 November 2001 (has links)
Orientador: Mario Jose Abdalla Saad / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-31T16:50:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AlvarezRojas_Fernanda_D.pdf: 22268401 bytes, checksum: d0953689cba4e881f294d8a2e1efd71e (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A insulina, ao se ligar à subunidade a de seu receptor heterotetramérico, dá inicio a uma série de ações imediatas e tardias, metabólicas e promotoras de crescimento. Tais eventos ocorrem através da estimulação da subunidade ~transmembrana do receptor, que se autofosforila e ativa a fosforilação de substratos endógenos intracelulares. Estas proteínas quando fosforiladas podem se unir a proteínas com porção SH2, como a PI 3- quinase. Uma etapa distal a estas associações é a fosforilação em serina da Akt. Utilizandose técnicas de "immunoblotting" com anticorpos anti-IRS-2, antifosfotirosina, anti-PI 3- quinase e anti-Akt é possível analisar o grau de fosforilação do IRS-2 e Akt, e a associação do IRS-2 com a proteína PI 3-quinase. Neste estudo investigamos o grau de fosforilação em tirosina do IRS-2 e sua associação a PI 3-quinase e o grau de fosforilação em serina/treonina da Akt em tecido hepático e muscular de quatro modelos de resistência à insulina: o tratamento agudo com adrenalina, o tratamento crônico com dexamentasona, o jejum prolongado e ratos com diabetes induzido por STZ. Em experimentos com ratos nonnais para a avaliação do efeito tempo após a infusão de insulina no grau de fosforilação do IRS-2, verificou-se que o pico de fosforilação do IRS-2 foi de 30 segundos para o tecido hepático e de 90 segundos para o tecido muscular, após infusão de insulinana veia porta. No figado de ratos tratados agudamente com adrenalina observamos uma diminuição significativano grau de fosforilação do IRS-2 para 63 ± 11 %, p< 0.05, quando comparamos com os ratos controle. Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Insulin induced a wide variety of growth and metabolic responses in many cell types. These actions are initiated by insulin binding to its receptor, and involves a series of alternative and complementary p athways created by the multiple substrates of the insulin receptor (IRSs). In this study we investigated IRS-2 tyrosine phosphorylation, its association with PI 3-kinase and the phosphorylation of Akt, a serine/threonine kinase situated downstream to PI 3-kinase, in liver and muscle of 4 animal models of insulin resistance: the effect of acute epinephrine treatment (normoinsulinemia), the effect of chronic treatment with dexamethasone (hyperinsulinemia), 72 hours fasting and diabetes (STZ) (hipoinsulinemia). We used immunoprecipitation and immunoblotting techniques with specificantibodies: anti-IRS-2, anti-phsophotyrosine, anti-PI 3-kinase and anti-Akt. There was a downregulation in insulin-induced IRS-2 tyrosine phosphorylation and association with PI 3-kinase in liver and muscle of epinephrine and dexamethasone treated rats. Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica
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Modelos não convencionais para estudo de interação fungo- hospedeiro e ação antifúngica

Scorzoni, Liliana [UNESP] 19 October 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-10-19Bitstream added on 2014-06-13T19:40:41Z : No. of bitstreams: 1 scorzoni_l_dr_arafcf.pdf: 3179979 bytes, checksum: 1e778fd453c60b43b64a943d7b3e82a0 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A incidência de infecções fúngicas oportunistas tem aumentado nas últimas décadas devido à crescente proporção de pacientes imunocomprometidos em nossa sociedade. Candida krusei é descrita como um dos agentes de infecções fúngicas em pacientes susceptíveis. Embora sua prevalência seja baixa entre as infecções fúngicas (2-7%), a resistência intrínseca ao fluconazol torna esta levedura importante no contexto relacionado à epidemiologia e na procura de novas alternativas terapêuticas. Modelos de organismos não mamíferos são alternativas viáveis para estudar a virulência de fungos e eficácia de drogas. Neste trabalho utilizou-se Galleria mellonella e Caenorhabditis elegans como modelos para estudar a virulência e avaliar a eficácia antifúngica de anfotericina B e fluconazol durante a infecção por C. krusei, bem como cultura de macrófagos e testes de agrotransformação. No modelo de G. mellonella foi realizada a caracterização completa da interação de C. krusei por meio da determinação do índice de fagocitose, quantificação da densidade hemocitária, melanização, estudos de filamentação, carga fúngica e histopatologia. Além disso, foi realizado estudo de eficácia antifúngica entre G. mellonella e C. elegans mostrando resultados compatíveis entre os dois modelos. Além disso, utilizou-se cultura de macrófagos RAW 267.7 para verificar o efeito das duas drogas sobre a fagocitose e produção de citocinas quando as células foram infectadas com C. krusei. Não houve alterações quanto à fagocitose nesse modelo, entretanto a produção de TNF-α mostrou-se excessivamente aumentada com o tratamento com anfotericina sugerindo que além do efeito direto da droga existem também mecanismos de imunomodulação envolvidos nessa... / The incidence of opportunistic fungal infections has increased in the last decades due to the increasing proportion of immunocompromised patients. Candida krusei is described as one of the agents of fungal infections in susceptible patients. Although its prevalence is low among fungal infections (2-7%), the intrinsic resistance to fluconazole makes this yeast important in this context related to epidemiology and new therapies. Models of non-mammalian are viable alternatives to study virulence of fungi and drug efficacy. In this work we used Galleria mellonella and Caenorhabditis elegans as models for studying virulence and evaluate the efficacy of antifungal agent’s amphotericin B, fluconazole and caspofungin during infection by C. krusei, and C. albicans, as well as, macrophages and agrotransformation studies. The model of G. mellonella was done full characterization of the interaction with C. krusei by determining the phagocytosis index, measuring the density haemocytic, melanization, filamentation studies, fungal burden and histopathology. In addition, we conducted a study of antifungal efficacy between G. mellonella and C. elegans showing compatible results between the two models. Furthermore, we used macrophage culture RAW 267.7 to determine the effect of drugs amphotericin B and fluconazole on phagocytosis and production of cytokines when the cells were infected with C. krusei and C. albicans. There was no change on the phagocytosis in this model, however, the production of TNF-α was shown to be excessively increased with treatment with amphotericin suggesting that in addition to the direct effect of the drug, immunomodulation mechanisms are also involved in this response. The construction of transformants... (Complete abstract click electronic access below)
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Papel dos receptores da adenosina em um modelo animal do transtorno de déficit de atenção e hiperatividade

Pandolfo, Pablo 25 October 2012 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T10:11:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 285124.pdf: 7424773 bytes, checksum: 902b0f708c20e18eef5f3da249e41e4a (MD5) / O transtorno de déficit de atenção e hiperatividade (TDAH) é uma das doenças psiquiátricas mais prevalentes na infância, afetando aproximadamente 5% das crianças em idade escolar. O TDAH está caracterizado pelos sintomas de desatenção, hiperatividade e impulsividade, os quais parecem resultar de desequilíbrios dopaminérgicos nos circuitos do estriado (EST) e córtex pré-frontal (CPF). Além disso, a associação entre o TDAH e o abuso de drogas na adolescência e idade adulta está bem estabelecida. Notavelmente, a maconha (Cannabis sativa) é a droga ilícita mais usada em indivíduos com TDAH. O metilfenidato (MFD) é um psicoestimulante utilizado como tratamento de escolha no TDAH, podendo causar conseqüências duradouras no desenvolvimento neurobiológico e aumentar o risco para o abuso de drogas. Os ratos espontaneamente hipertensos (SHR) são considerados como um modelo genético adequado para o estudo do TDAH, uma vez que esta linhagem apresenta características comportamentais e neuroquímicas observadas no transtorno. Visto que as interações entre dopamina e adenosina no sistema nervoso central (SNC) têm sido amplamente estudadas, o objetivo do presente estudo foi investigar se a cafeína (antagonista não seletivo dos receptores de adenosina) previne as modificações comportamentais e neuroquímicas exibidas pelos ratos SHR. Primeiro, ratos SHR e Wistar-Kyoto (WKY) foram tratados com cafeína durante a adolescência e testados na idade adulta nos testes attentional set-shifting, campo aberto e labirinto em "Y" antes de serem sacrificados para as análises neuroquímicas de captação de dopamina em terminais nervosos, níveis do transportador de dopamina (DAT) e de receptores D1, D2, A2A, e CB1 no EST e CPF. Além disso, outros alvos também foram investigados em ambas as áreas cerebrais: tirosina hidroxilase (TH), sinaptofisina, (SNAP-25), transportador vesicular de glutamato (VGlut), transportador vesicular de GABA (VGAT) e a co-localização dos receptores A2A com DAT, VGlut ou VGAT. Segundo, investigar o papel de antagonistas adenosinérgicos, incluindo a cafeína, sobre os efeitos impulsivos e motivacionais do agonista canabinóide WIN55,212-2 (WIN) em SHR. Os ratos SHR exibiram hiperatividade e baixo desempenho no attentional set-shifting e no labirinto em "Y" comparados aos WKY; o tratamento com cafeína melhorou os prejuízos de atenção e de memória em SHR. Os ratos SHR apresentaram níveis elevados de DAT e de captação de dopamina em terminais do EST e do CPF; o tratamento crônico com cafeína eliminou as diferenças entre linhagens para os níveis de DAT e para a captação de dopamina. Uma maior densidade dos receptores A2A, CB1, D1 e D2 foi observada em terminais do CPF de SHR. Além disso, a co-localização de A2A-DAT no EST de SHR estava significantemente menor do que em WKY. O WIN prejudicou a tolerância ao atraso da recompensa e produziu preferência condicionada ao lugar (PCL) em ratos SHR, esses efeitos foram prevenidos pelo pré-tratamento com cafeína. Os efeitos comportamentais do WIN mediados pelos receptores CB não estavam relacionados com pressão arterial. Esses achados indicam o potencial terapêutico da cafeína em tratar os prejuízos de atenção e de memória típicos do TDAH e na relação deste transtorno com abuso de drogas. Os resultados do presente estudo encorajam estudos adicionais para investigar o valor terapêutico da cafeína em pacientes com TDAH, tanto do ponto de vista cognitivo quanto da modulação do controle executivo sobre os comportamentos relacionados ao abuso de drogas.
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Efeitos do transplante autólogo de células-tronco mononucleares da medula óssea na miocardiopatia induzida pela doxorrubicina em ratos wistar / Rossana Baggio Simeoni ; orientador, Waldemiro Gremski ; co-orientador, Nelson Itiro Miyague

Simeoni, Rossana Baggio January 2006 (has links)
Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2006 / Inclui bibliografia / INTRODUÇÃO: As células-tronco derivadas da medula óssea (CTM) apresentam grande potencial terapêutico para regeneração tecidual. Pouco se tem estudado sobre o transplante celular com relação à cardiomiopatia não isquêmica dilatada. O antinéoplásico clorid
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Resposta imunoinflamatória na periodontite experimental induzida em ratos submetidos à quimioterapia : estudo histomorfométrico e imunoistoquímico /

Gusman, David Jonathan Rodrigues. January 2017 (has links)
Orientador: Juliano Milanezi de Almeida / Coorientador: Valdir Gouveia Garcia / Banca: Valmir Campos Macarini / Banca: Maria José Nagata / Resumo: O presente estudo tem por objetivo avaliar o efeito dos quimioterápicos 5-Fluorouracil (5-FU) e da Cisplatina (CIS) sob os tecidos periodontais saudáveis e durante os estágios inicias da periodontite experimental (PE) induzida em ratos. No presente estudo, foram utilizados 156 ratos machos, distribuídos aleatoriamente em 6 grupos: SPE-SS (n= 26): sem indução da PE e que receberam administração de solução salina (grupo Sham); SPE-CIS (n= 21) - sem indução da PE e que receberam administração de CIS; SPE-5FU (n= 27) - sem indução da PE e que receberam administração de 5-FU; PE-SS (n= 27): indução da PE e que receberam administração de solução salina; PE-CIS (n= 28) - indução da PE e que receberam administração de CIS; PE-5FU (n= 27) - indução da PE e que receberam administração de 5-FU. Os animais receberam 2 injeções para administração dos quimioterápicos com intervalo de 48 horas entre elas (períodos: baseline e 02 dias), aplicando-se as doses de 5 mg/kg e 2,5mg/kg (CIS) e 60 mg/kg e 40 mg/kg (5-FU). Logo após a primeira injeção, foi realizado a indução da PE adaptado-se um fio de algodão número 24 ao redor do primeiro molar inferior esquerdo. Nos períodos de 03, 05 e 07 dias após indução da PE, os animais foram eutanasiados pela administração de dose letal de thiopental (150mg/kg). Para análise hematológica de leucócitos totais (LT), foram obtidas amostras sanguíneas no baseline e no último período de eutanásia e para fosfatase alcalina (FA) no baseline e em todos os períodos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of the present study was to evaluate the effect of the chemotherapics 5-Fluorouracil (5-FU) and Cisplatin (CIS) on healthy periodontal tissues and during the early stages of induced experimental periodontitis (EP) in rats. 156 male rats were randomly set in 6 groups: NP-SS (n = 26): without EP induction and received saline solution (Sham group); NP-CIS (n = 21) - without EP induction and received CIS; NP-5FU (n = 27) - without EP induction and received 5-FU; EP-SS (n = 27): induction of EP and received saline solution; EP-CIS (n = 28) - induction of EP and received CIS; EP-5FU (n = 27) - induction of PE and received 5-FU. The animals received 2 injections of chemotherapics with 48-hour interval between them, with doses of 5 mg/kg and 2.5 mg/kg (CIS) and 60 mg/kg and 40 mg/kg (5-FU). After the first injection, the induction of EP was performed by the placement of a number 24 cotton thread around the lower left first molar. At 03, 05 and 07 days after EP induction the animals were euthanized by administration of thiopental (150mg/kg). For hematological analysis of total leukocytes (TL), blood samples were obtained at baseline and in the last euthanasia period, and for Alkaline Phosphatase (AP), at baseline and in all experimental periods. The collected mandibles were fixed in buffered 4% formaldehyde, demineralized in EDTA and embedded in paraffin for preparation of serial histological sections of 4 μm thickness in mesiodistal direction for Hematoxylin and Eosin stainin... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

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