A Artrite Reumatóide (AR) é uma doença autoimune associada a poliartropatia inflamatória que acomete principalmente as articulações periféricas. Cerca de 1% da população mundial é afetada, sendo duas a três vezes mais prevalente em mulheres. Apresenta uma patogênese complexa e multifatorial. A sinóvia das articulações afetadas é infiltrada por linfócitos T e B, macrófagos e granulócitos. A sinóvia reumatóide adquire características proliferativas, formando o pannus, e invade a cartilagem articular e o osso, levando à destruição da arquitetura normal da articulação e perda de função. Em vários modelos de doenças autoimunes, a ausência ou diminuição da expressão de proteínas reguladoras do complemento tem sido observada, associada com o agravamento dos sintomas clínicos, sendo que, muitos destes casos, a superativação do sistema complemento pode ser a causa da exacerbação da doença. O presente artigo tem por objetivo revisar os principais aspectos relacionados à regulação do sistema complemento na artrite reumatóide, a fim de propiciar uma melhor compreensão do potencial papel desse sistema na fisiopatologia da doença. / Rheumatoid arthritis (RA) is an autoimmune disease associated with polyarticular inflammatory synovitis that affects mainly the peripheral joints. About 1% of the world population is affected, and it is two to three times more prevalent in women. RA has a complex and multifactorial pathogenesis. The rheumatoid synovium acquires proliferative characteristics, forming the pannus, and invades cartilage and bone, leading to the destruction of normal architecture and loss of function. In several models of autoimmune diseases, the absence or decreased expression of complement regulatory proteins has been observed, associated with worsening of the clinical symptoms, and many of these cases the over-activation of the complement system is the cause of disease exacerbation. This article aims to review the main aspects related to regulation of the complement system in rheumatoid arthritis in order to provide a better understanding of the potential role of this system in the pathophysiology of the disease.

La Polyarthrite Rhumatoïde est caractérisée par une synovite à l’origine de lésions progressives ostéo-articulaires induites par les formes réactives de l’oxygène (ROS) produites par la NADPH oxydase des polynucléaires neutrophiles (PMN). La NADPH oxydase des phagocytes, est formée d’un centre catalytique membranaire, le cytochrome b558, sur lequel vient s’associer des protéines cytosoliques régulatrices (p67phox, p47phox, p40phox et Rac1/2). Nous avons étudié la spécificité de l’interaction entre la (6-phosphofructokinase 2) et de la 6PGDH (6-phosphogluconate déshydrogénase) et la NADPH oxydase des PMN. D’autre part, nous avons caractérisé les domaines de l’hétérocomplexe S100A8/A9 impliqués dans l’activation de la NADPH oxydase phagocytaire. Par ailleurs, une étude de la signature protéique dans le liquide synovial a été menée afin de rechercher l’empreinte de l’activation du PMN dans la PR.Après stimulation par le PMA, la 6PGDH et la PFK2 co-imunoprécipitent avec les facteurs cytosoliques p67phox, p47phox and p40phox. Les expériences de microscopie confocale suggèrent une co-localisation de ces deux enzymes du métabolisme du glucose avec la NADPH oxydase, dans des micro-domaines membranaires : les radeaux lipidiques. La 6PGDH est impliquée dans l’activation de la NADPH oxydase phagocytaire en élevant la concentration du NADPH cytosolique mais également en augmentant l’affinité de cette enzyme pour son substrat, le NADPH. PFK2 est l’enzyme majeure de la régulation de la glycolyse, voie est essentielle pour la production d’ATP du PMN. L’utilisation du complexe S100A8/A9 et de protéines chimères de fusion nous a permis de révéler que la partie C-terminale de S100A8 est impliquée dans la liaison avec le cytochrome b558 et l’activation de la NADPH oxydase phagocytaire. In vivo, le profil protéique du liquide articulaire de PR a révélé l’empreinte de l’activation du PMN dans cette pathologie avec une surexpression des protéines S100A8 et S100A9. Une production ectopique de S100A8/A9 par les synoviocytes de type fibroblastique a été mise en évidence.En conclusion, la 6PGDH, la PFK2 et l’hétérodimère S100A8/A9 sont de nouveaux partenaires d’activation de la NADPH oxydase des phagocytes. Dans la PR, l’activation des PMNs conduit à la sécrétion de S100A8/A9 qui semblent constituer à la fois des biomarqueurs pertinents, mais également des cibles thérapeutiques potentielles. / Rheumatoid Arthritis (RA) is caused by an inflammation of the synovial membrane leading to progressive joint destruction and deformation, related to the production NADPH oxidase related-reactive oxygen species (ROS) production. The phagocyte NADPH oxidase is a multi-protein complex formed by a catalytic core, i.e. the transmembrane cytochrome b558 and cytosolic regulators (p67phox, p47phox, p40phox and Rac1/2). We aimed at better analyzing the NADPH oxidase activation through the evaluation of the specificity of the interaction with 6PGDH or PFK2 and through the further analysis of the association with the S100A8/A9 heterocomplex. The RA-specific protein profiling was conducted in order to determine whether a PMN activation fingerprint could be revealed among RA specific proteins.Upon PMA stimulation, both 6PGDH and PFK2 co-imunoprecipitated with cytosolic factors p67phox, p47phox and p40phox. At the plasma membrane level, confocal microscopy experiments suggested a co-localization of either 6PGDH or PFK2 with the phagocyte NADPH oxidase in lipid rafts. 6PGDH enhanced the phagocyte NADPH oxidase activity by both improving the availability of cytosolic NADPH content and by increasing the affinity of the NADPH oxidase for its substrate. PFK2 also augmented the NADPH oxidase activity. PFK2 modulated the ATP concentration available for the phosphorylation of the phagocyte NADPH oxidase components and for the NDP Kinase related-Rac activation. The generation of truncated S100A8/S100A9 heterodimer chimera could reveal that the C-terminal region of S100A8 is involved in both the interaction and the activation of the phagocyte NADPH oxidase.In vivo, synovial fluid of RA patients was remarkably labelled with the PMN activation fingerprint. S100A8 and S100A9 proteins clearly distinguished RA synovial fluid from osteoarthritis and non RA-synovial fluids. An ectopic production of S100A8/S100A9 was shown in RA fibroblast like synoviocyte.In conclusion, 6PGDH, PFK2 and S100A8/A9 proteins are surrogate activating partners of the phagocyte NADPH oxidase. In RA, the activation of PMNs leads to the release of S100A8/A9 proteins which may constitute interesting biomarkers and promising therapeutic targets.

A artrite reumatóide (AR) é uma patologia crônica e sistêmica de etiologia desconhecida provavelmente multifatorial na qual há um predomínio de acometimento da sinóvia. Afeta de 0,5 a 1 % da população com predomínio nas mulheres. O diagnóstico precoce e o inicio da terapêutica adequada são fundamentais e podem modificar a evolução da doença reduzindo as graves seqüelas. O custo do exame de ressonância magnética (RM) é a maior limitação neste método de diagnóstico. O objetivo deste estudo foi avaliar a especificidade e a sensibilidade da ressonância magnética (RM) da mão e do punho de pacientes com AR precoce de acordo com os parâmetros do OMERACT (comitê internacional para avaliação de medidas em reumatologia para análise da ressonância magnética) correlacionando com a radiologia convencional. Foram avaliados 19 pacientes com AR (idade: 22-64 anos) e um grupo controle composto por 10 indivíduos sem história de patologias prévias com idade de 26-46 anos. Foram realizados exames de radiografia (RX) e RM da mão e do punho dominante. Treze articulações foram avaliadas pelo RX convencional (radio-ulnar distal, radiocarpal, intercarpal e metacarpofalângicas do primeiro ao quinto dedo e articulação interfalângicas proximais do primeiro ao quinto dedo). As lesões ósseas no RX foram classificadas de acordo com o método de Van Der Heiidje com graduações de 0 a 4 para redução do espaço articular e de 0 a 5 para erosão óssea. Foram realizados exames de RM num equipamento marca GE 1,5 T Signa Horizon LX (General Eletric medical systems) utilizando T1, T2 eco de spin e T1 eco de Spin com saturação de gordura após a infusão do contraste paramagnético gadopentato dimegumina. O protocolo foi realizado de acordo com as padronizações do OMERACT. Como resultados obtivemos que a RM foi mais sensível na pesquisa de erosão óssea (94,7%) que o RX (78,9%). Somente as articulações intercarpais e metacarpo-falângicas do segundo dedo demonstraram correlação estatística entre os 2 métodos (r=0,47 p=0,04 e r=0,63 p=0,004). Para erosão óssea os compartimentos radiocarpal (73,7%) e intercarpal (84,2%) foram os mais sensíveis e com maior acurácia. Além disso, a RM foi muito sensível no estudo da sinovite presente em 100% dos pacientes com AR comparados com 20% do grupo controle. Quando estudados nos sítios anatômicos o carpo foi o local mais sensível para a sinovite (100%). O edema intra-ósseo foi mais detectado no punho com uma alta especificidade (90%), porém com baixa acurácia (50%) um achado importante é que a analise simultânea do punho e da mão não aumentou a detecção de um maior número de pacientes com AR. Concluindo, a RM foi mais sensível que o RX no estudo da AR precoce. Este trabalho demonstrou que o estudo do punho apresentou uma ótima sensibilidade e especificidade no diagnóstico precoce da AR e somente o estudo deste compartimento parece ser adequado com redução do custo do exame para os pacientes, portanto na análise do AR precoce o punho parece apresentar melhor desempenho. / Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic and systemic disease of unknown etiology probably multifactorial with a predominant involvement of synovial tissue. The disease prevalence is 0.5-1% and affects more often women. Early diagnosis and therapy are essential to modify the course of the disease and reduce the degree of severe late sequelae. The cost of MRI of this region is a major limitation for the use of this sensitive exam. We therefore decided to evaluate if the wrist magnetic resonance with a simultaneous reading of wrist and hand compartments according to the OMERACT parameters would be sensitive and accurate to diagnose early RA. We have evaluated 19 patients with RA (ages: 22-64 years) and 10 age-matched controls. X-ray and MRI evaluated the dominant wrist all subjects. Thirteen joints were evaluated by conventional radiography: radio-ulnar distal (DRU), radiocarpal joint (RC), intercarpal (IC), metacarpo-phalageal (first to fifth finger) and phalangophalangeal (first to fifth finger). The bone lesion in the radiograph was scored by the method of Van Der Heidje for joint damage and for joint narrowing space. Wrist MRI imaging was performed with 1,5 T GE Signa Horizon LX 8,2 (General Eletric medical systems) with multiplanar T1, T2 (spin echo and fast spin echo) and T1 fat sat after intravenous injection of gadopentetate dimeglumine, according to the definitions of OMERACT. The MRI was more sensitive to detect erosion (94.7%) than the conventional X-ray (78.9%), and only intercarpal and metacarpofalangic joints of the second finger showed statistic correlation in the two methods (r=0.47 p=0.04 e r= 0.63 p=0.004). Of interest, among the anatomic compartments evaluated the radiocarpal (73.7%) and intercarpal joints (84.2%) were the most sensitive and accurate to detect erosion. Moreover, the MRI was also very sensitive to detect synovitis, present in 100% of the AR compared 20% in the control group, p<0,001. With regards to the anatomic site, synovitis was uniformly observed in all carpal joints (100%). Edema was also more frequently detected in the wrist joints with a high specificity (90%) but low accuracy (50%). Importantly, the simultaneous reading of wrist and hands did not identify additional cases. MRI imaging was more sensitive than conventional radiography in detecting early lesion in RA Our data support the notion that wrist MRI has an excellent sensitivity and specificity to diagnose early RA, and therefore only this assessment seems to be adequate, with a reduced cost for the patients. Additionally, we have demonstrated that the reading may be restrict to the wrist compartment, overcoming the technical limitations of the hand anatomical site.

Made available in DSpace on 2016-12-06T17:07:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aline Rosso Lehnhard.pdf: 1755476 bytes, checksum: 29d4842da4f17bf761e8e98b4622352a (MD5) Previous issue date: 2014-07-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A artrite reumatoide (AR) é uma doença articular inflamatória, autoimune, que causa danos articulares proeminentes, o que interfere diretamente no desenvolvimento da força muscular e consequentemente na capacidade funcional. Dessa forma o objetivo foi avaliar a influência do nível de atividade da doença, tempo de diagnóstico, força de preensão manual isométrica máxima, força muscular por segmentos corporais, sobre a força apendicular global em indivíduos com AR e sua relação com a capacidade funcional dos mesmos. Participaram do estudo 14 indivíduos diagnosticados com AR (GAR) pareados por idade (±2 anos) e sexo com um grupo controle (GC) saudável. Foi realizada a avaliação e comparação entre GAR e GC das características sociodemográficas (idade, estado civil, etnia, grau de escolaridade, profissão e tempo de profissão), antropométricas (massa, estatura, estado nutricional, perímetro de cintura, perímetro de quadril, relação cintura/quadril), clínicas (tabagismo, etilismo, patologias associadas, tempo de diagnóstico e tratamento, histórico familiar de doenças reumáticas, medicamentos em uso, queixa principal, Proteína C reativa, Número de articulações dolorosas e edemaciadas) da força muscular por segmentos corporais (flexão e extensão de ombro, cotovelo, punho, quadril, joelho e tornozelo), força muscular apendicular global e da força de preensão manual (FPM), avaliação do nível de atividade da doença e da capacidade funcional. A análise dos dados foi feita inicialmente por meio de estatística descritiva e comparação entre o GAR e GC utilizando os testes t de Student independente (para os dados paramétricos) ou U de Mann-Whitney (para os dados não-paramétricos). A relação dos parâmetros força máxima por segmentos corporais, força de preensão manual isométrica máxima, nível de atividade da doença e tempo de diagnóstico de indivíduos com AR sobre a força muscular apendicular global foi verificada por meio de regressão linear múltipla. A relação entre as variáveis força apendicular global, força de MMSS apendicular, força de MMII apendicular, FPM apendicular e tempo de diagnóstico com a capacidade funcional foi verificada por meio do teste de correlação de Spearman, e do nível de atividade da doença com a capacidade funcional pelo teste de Kendall s Tau b. Para todas as análises foi adotado o nível de significância de 5%. Verificou-se que existem diferenças significativas entre o GAR e GC no grau de escolaridade, na força máxima de MMSS esquerdo, direito e apendicular, na força máxima de MMII esquerdo, direito e apendicular, na FPM direita, esquerda e apendicular, força muscular apendicular global, na capacidade funcional global e nos seus domínios. A regressão linear múltipla demonstrou que a força apendicular global apresenta relação linear com a Força de MMII apendicular e a força de MMSS apendicular, apresentando o modelo = 0,003+0,528x1+0,478x2, onde x1 é a força muscular de MMSS apendicular e x2 é a força muscular de MMII apendicular (p=0,000; R2=1,000). Foram encontradas correlações entre o HAQ total e a força MMSS apendicular (&#61554;=-0,472; p&#8804;0,04), com o nível de atividade da doença (&#61556;= 0,509; p&#8804;0,03), o domínio do HAQ levantar-se com a força MMSS apendicular (&#61554;=-0,542; p&#8804;0,03), o domínio atividades gerais com a força MMSS apendicular (&#61554;=-0,482; p&#8804;0,04). Também entre o pegar objetos e a força MMSS apendicular (&#61554;=-0,479; p&#8804;0,04), e nível de atividade da doença (&#61556;=0,435; p&#8804;0,05). O vestir-se e arrumar-se mostrou relação com nível de atividade da doença (&#61556;=0,509; p&#8804;0,03), assim como o domínio atividades gerais (&#61556;=0,535; p&#8804;0,02) e o comer (&#61556;=0,569; p&#8804;0,01) apresentaram relação com o nível de atividade da doença. A força muscular reduzida em pessoas que tem AR pode estar relacionada ao fato dos edemas e dores articulares que impedem a realização do movimento adequado, o que interfere diretamente na geração de força. Somado a isso, a inflamação gera rigidez articular que agrava ainda mais o desempenho articular. Essas perdas de força afetam diretamente na redução de padrões funcionais por incapacidade física de realizar tarefas, o que reduz a qualidade de vida do artrítico. A força muscular do GAR foi significativamente menor do que do grupo de pessoas que não tinham essa característica, o que ressalta o caráter incapacitante da doença, já que a mesma obteve relações com a capacidade funcional. Sendo assim, os achados deste estudo precisam ser replicados em amostras maiores, para que se confirmem os resultados preliminares. Com isso, o atendimento ao paciente com AR terá bases mais amplas a respeito da força muscular e capacidade funcional, o que auxiliará em uma intervenção clínica mais adequada a cada caso específico, tratando os segmentos corporais com perdas específicas.

Made available in DSpace on 2016-12-06T17:07:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 raquel.pdf: 914060 bytes, checksum: a82d971c1700ac78e8cc69f342332599 (MD5) Previous issue date: 2008-03-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Physical activity is thought to be beneficial to arthritis, delaying disability and/or improving joint function. The aim of the present study was to evaluate the effects of exercise on nociception, edema and cell migration in two groups of rats with CFA-induced arthritis, as well as verify whether the possible endogenous liberation of corticoids while exercising can have an influence on the nociception and edema. Arthritis was induced in female Wistar rats (200 - 250 g, n=50) by subcutaneously injecting complete Freund's adjuvant (CFA; Mycobacterium butyricum, 0.5 mg/mL; 50 &#956;L) into the base of the tail and, after 21 days, into the right knee joint (TF) or right ankle joint (TT). Incapacitation was measured daily by the paw elevation time (TEP; s) in 1-min periods of observation on a revolving cylinder (3 r.p.m.). The variation of inflammatory edema of the knee and ankle joints was evaluated by the variation of the articular diameter (DA, cm) and by the paw volume variation (EA, mL), respectively. Both, incapacitation and edema were measured during 10 consecutive days. Two protocols of exercise were evaluated: (a) in the 1-minute exercise group, the animals performed 1 minute of daily exercise on the cylinder, this exercise being the incapacitation test itself; (b) for the progressive exercise group the duration of daily exercise increased by 1 minute per day (the additional exercise was always done just after the daily incapacitation test); (c) in the control groups (TF and TT), incapacitation was evaluated only on the 1st, 5th and 10th days after intra-articular CFA injection. After completion of the trials the animals were euthanized and the articular inflammatory exudates was sampled for total (CT; cells/mm3) and differential leukocyte counts (mononuclear - MON, and polymorphonuclear - PMN, cells/mm3). The progressive exercise protocol inhibited incapacitation and edema for both the knee and ankle joints. However, cell migration was inhibited only in the knee joint. The daily 1-min exercise reduced edema in both knee and ankle joints, while cell migration was inhibited only in the ankle joint. The effect on incapacitation was not significant in this protocol. Aminoglutetimide (50 mg/kg; oral) 1 hour before exercise did not modify the antinociceptive and antiedematogenic effect of exercise in this model. By comparison, progressive exercise seemed to be more effective in reducing the inflammatory parameters than 1-min exercise. Although other exercise protocols need to be evaluated, this study suggests that regular physical activity can consistently contribute to improving joint function, as well as present an anti-inflammatory effect. / O exercício físico apresenta potenciais benefícios na artrite, retardando a incapacidade funcional e melhorando a função das articulações. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a influência da atividade física sobre a nocicepção, edema e migração celular em ratas com artrite induzida por adjuvante completo de Freund (CFA), como também verificar se a possível liberação endógena de corticóides durante o exercício podem influenciar na nocicepção e no edema. Ratos Wistar fêmeas (200 250 g; n=50) receberam injeção intradérmica de CFA (Mycobacterium butiricum; 0,5 mg/mL; 50 &#956;L) na base da cauda e, após 21 dias, os animais receberam injeção de CFA na articulação tíbio-femural (TF) ou tíbio-társica (TT). A incapacitação articular foi avaliada pelo tempo de elevação da pata (TEP, s) durante marcha forçada de 1 minuto sobre um cilindro em rotação (3 r.p.m.). A variação do edema inflamatório da articulação TF e TT foi avaliada pelo aumento do diâmetro articular (DA, cm) e pelo aumento do volume de pata (EA, mL), respectivamente. Ambos, incapacitação e edema foram avaliados durante 10 dias consecutivos. Dois protocolos de exercício foram avaliados: (a) exercício diário de 1 min, onde os animais realizaram 1 minuto de exercício no cilindro, sendo este o próprio teste de incapacitação; (b) exercício progressivo, onde os animais realizaram o exercício com aumento de 1 minuto por dia (realizado sempre após o teste de incapacitação); (c) Grupo controle (TF e TT), sem exercício, cuja incapacitação foi mensurada apenas no 1°, 5° e 10° dias após a injeção intraarticular de CFA. Finalizado os 10 dias de avaliação, os animais foram eutanasiados para a realização da contagem total (CT; células/mm3) e diferencial (mononucleares - MON e polimorfonucleares - PMN; células/mm3) de leucócitos do tecido inflamado. O exercício progressivo inibiu a incapacitação e o edema em ambas as articulações. Entretanto, houve redução da migração total de leucócitos apenas na articulação TF. O exercício de 1 min inibiu o edema para as duas articulações e reduziu a migração total de leucócitos da articulação TT. Porém, o efeito do exercício de 1 minuto na incapacitação não foi significativo. A administração de aminoglutetimida (50 mg/kg; oral) 1 hora antes do exercício mostrou não ter efeito sobre a redução da nocicepção e edema ocasionados pelo exercício. O exercício progressivo parece ser mais efetivo em reduzir os parâmetros inflamatórios em comparação ao exercício de 1 min. Este estudo demonstra que a atividade física regular pode contribuir consistentemente para melhorar a funcionalidade articular e também apresentar um efeito anti-inflamatório.

Made available in DSpace on 2016-12-06T17:07:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Amabile.pdf: 1657607 bytes, checksum: 80e4e884bc9071dca3c66d17e5270ab0 (MD5) Previous issue date: 2011-03-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Objectives: the aim of this study was to evaluate the effects of aquatic exercise program on disease activity, functional hability and quality of life in patients with activity rheumatoid arthritis (RA). Methods: Twenty-six patients were divided in order of referral to an exercise group (EG-n=7) and a control group (CG-n=9). The EG participated of aquatic exercise program 3 times a week for 13 weeks, with sessions of 50 minutes. The CG continued with their previous activity without interference of the researchers. The disease activity was measured by Disease Activity Score 28(DAS28). Two tests was chosen for measure functional hability: Timed Up and Go(TUG) test and Functinal Reach test (FRT). The quality of life were measured by Medical Outcomes Study 36-Item Short-Form Health Survey (SF-36). Results: Significant differences between the groups EG and CG were found for the number of tender joints. Significant improvements within-group was found in the disease activity (number of swollen joints and tender joints decreased, PCR decreased and global disease activity measure improved), functional hability (FRT) and quality of life (pain perception decreased) for the EG; in the CG significant improvements was found only the PCR. Conclusion: There is initial evidence that patients with active RA can do water exercises. Because it was effective in reducing disease activity and improving functional capacity, although no major changes in quality of life. However, the population studied was small and further studies are requested in a larger population and for longer time. / Objetivo: Investigar o efeito de um programa de exercícios aquáticos de 13 semanas sobre a atividade da doença, capacidade funcional e qualidade de vida, em pacientes com artrite reumatóide (AR) ativa. Método: 16 pacientes foram divididos, por ordem de encaminhamento, em grupo exercício (GE - n=7) e grupo controle (GC - n=9). O GE participou de um programa de exercício aquático, realizado 3 vezes por semana, com sessões de 50 minutos de duração. O GC continuou suas atividades habituais sem interferência dos pesquisadores. A atividade da doença foi medida pelo Disease Activity Score 28 (DAS28). Dois testes foram escolhidos para avaliar a capacidade funcional: Teste Timed Up and GO (TUG) e Teste de Alcance Funcional (TAF). A qualidade de vida foi avaliada através do Medical Outcomes Study 36-Item Short-Form Health Survey (SF-36). Resultados: Foi encontrada diferença significativa entre os grupos GE e GC no número de articulações doloridas (DAS28). Nas medidas intragrupo, foram encontradas melhoras significativas nos indivíduos do GE na atividade da doença (redução do número de articulações edemaciadas e doloridas, redução da PCR e melhora da percepção da atividade global da AR), na capacidade funcional (TAF) e na qualidade de vida (diminuição da percepção de dor). No GC houve melhora significativa somente nos valores de PCR. Conclusão: Há evidências inicias de que exercício aquático pode ser realizado por pacientes com AR ativa, pois foi efetivo na diminuição da atividade da doença e na melhora da capacidade funcional, embora sem grandes alterações na qualidade de vida dos sujeitos. Porém, ressalta-se que a amostra do estudo foi pequena e são necessários estudos futuros com maior número de pacientes e maior tempo de intervenção.

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA11MA073.pdf: 3247783 bytes, checksum: 9d9513e50310db5c49782c22e75cc129 (MD5) Previous issue date: 2011-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Infectious arthritis in broiler and breeders represents an economic and health problem resulting in severe losses due to retarded growth and down grading at slaughterhouse . The most commom agents associated with cases of infectious arthritis in avian are Mycoplasma synoviae (MS) and Orthoreovirus avian (ARV). The objective of this study was to evaluate the occurence of MS and ARV in infectious arthritis through molecular techniques, such as PCR (Polymerase Chain Reaction) and RT-PCR (Reverse Transcription - Polymerase Chain Reaction). In addition, we carried out histopathological studies of joints with arthritis and development of a multiplex PCR. For the study 150 samples were collected from lesions of broilers and 180 samples of breeders. MS were detected in 82.6% and ARV 20% of the simple analysis in breeders. The analysis of samples from broilers showed positivity to MS (58.9%) and ARV (33.9%). The histopathology analysis of joints demonstrated the presence of infiltrate of heterophils in the synovial capsule and the digital flexor tendon. The inflammatory process has also been found in samples from joints that were negative by PCR for both agents.The developed multiplex, with satisfactory results, amplifying genes from MS and ARV simultaneamente. In conclusions that molecular techniques, PCR and PCR-M, were effective for detecting MS and ARV in lesions of arthritis from breeders and broiler / A artrite infecciosa em frangos e matrizes de corte representa um problema sanitário e econômico de grande impacto, provocando elevadas perdas de produtividade e nos processos de produção e industrialização. O impacto econômico relacionado às perdas por problemas no aparelho locomotor normalmente são subestimados, pois geralmente são consideradas apenas as perdas no abatedouro, não contabilizando os descartes que ocorrem durante o período de alojamento.Os principais agentes etiológicos associados aos casos de artrites infecciosas em aves são o Mycoplasma synoviae (MS) e o Orthoreovirus aviario (ARV). O presente trabalho teve por objetivo detectar a presença de MS e ARV através de técnicas moleculares, PCR (Polymerase Chain Reaction) e RT-PCR (Reverse Transcription - Polymerase Chain Reaction), respectivamente, em casos de artrites em frangos e matrizes de corte. Além disso, realizou-se estudos histopatológicos das articulações com artrites e desenvolvimento de um multiplex PCR. Para o estudo foram coletadas 150 amostras de lesões artritícas de matrizes de corte e 180 amostras de frango de corte, durante o período de 2009 e 2010. Do total das 150 amostras de matriz de corte submetidas a PCR , sendo que 82,6% (124/150) foram positivas para MS e 20%(30/150) foram positivas para ARV. Em 83,3% (25/30) foi possível detectar a presença de ARV e MS na mesma articulação . A análise das amostras de frango de corte demonstrou positividade para o MS em 58,9% (106/180) das amostras e 33,9% (61/180) foram positivas para o ARV. A análise histopatológica das lesões demonstrou a presença de processo inflamatório crônico na cápsula sinovial e no tendão flexor digital. O processo inflamatório foi encontrado também nas amostras de articulações que foram negativas na PCR para ambos os agentes. A multiplex desenvolvida, apresentou resultados satisfatórios, amplificando genes do MS e ARV simultaneamente. Conclui-se que as técnicas moleculares, PCR, RT-PCR e M-PCR, mostraram-se eficientes para detecção de MS e ARV em lesões de artrite de matrizes e frango de corte, podendo ser incorporadas na rotina de diagnóstico para os respectivos agentes a partir de material articular

The aim of this work was to investigate the contribution of matrix metalloproteinases (MMPs) to recurrent corneal melting. Twenty three melted corneas from seven patients were separated into three groups: a) patients with primary Sjögren's syndrome, b) those with rheumatoid arthritis and c) those with other corneal melting underlying pathologies. Eleven cadaverous corneas served as controls. The presence of MMP-1, -2, -3, -7, -8, -9, and -13 was detected using indirect enzyme immunohistochemistry. The active forms of MMP-2 and -9 and MMP- 3 and -7 were examined by gelatin and casein zymography, respectively. The concentrations of active MMP-1 and -3 were measured using activity assays. Increased immunostaining intensity for MMP-1, -2, -3, -7, -8 and -9 was shown in the corneal epithelium and the stroma of almost all melted corneas from all three groups compared to the negative or slightly positive staining of the controls. In the endothelium, immunostaining for MMP-2 and MMP-9 was increased in most specimens of groups II and III and group I, respectively. A markedly higher level of active MMP-2 was detected in six, and active MMP-9 in all, pathologic specimens compared to the controls. In contrast to the completely negative controls, the proenzymes of MMP-3 and -7 were detected in almost all melted...

Introduction: The inflammation plays the essential role in the bone loss in juvenile idiopathic arthritis (JIA). Proinflammatory cytokines and also glucocorticoids (GCs) may activate bone resorption by osteoclasts. Simultaneously, bone formation can be attenuated, especially by inhibitors of proteins, which control the osteoblast differentiation. The aim was to verify the hypothesis that in patients with highly active JIA, reduction of bone formation via Wingless (Wnt) proteins inhibitors - Dickkopf 1 (Dkk-1) and sclerostin could be found. Except the densitometry measurements of bone and lean mass, we assessed markers of disease activity, bone metabolism and remodeling in young adult patients with JIA before and during 2 years of anti TNFα (tumour necrosis factor α) treatment, which decreases disease activity. Results: In patients with JIA before antiTNFα treatment, bone mineral density (BMD, g/cmš) was significantly reduced compared to controls. Values of BMD and body composition in JIA significantly depended on disease duration and GCs treatment. Serum concentration of sclerostin was significantly elevated in JIA compared to values in healthy controls. Values of the other monitored markers did not differ between JIA and controls. In patients with JIA, Dkk-1 correlated positively with C-reactive...

La Bruton tyrosine kinase ou Btk est une protéine dont le rôle dans la maturation des lymphocytes B est connu depuis plusieurs années. Par contre, son rôle dans le contrôle de l’immunité innée est moins établi. Nous avons montré que, en réponse à la voie des Toll like Receptors ou TLRs, Btk régule la stabilité de l’ARN messager du TNF-α par l’intermédiairede la protéine TTP ou Tristétraproline. Par ailleurs, nous avons montré que l’expression d’un microARN, le miR-346, régulait négativement la protéine Btk et donc la synthèse de TNF-α. L’amplification de l’expression de ce miR-346 par transfection permet d’avoir un effet anti-TNF-α et anti-Btk interessant notamment dans le modèle cellulaire de la polyarthrite rhumatoïde. Enfin, nous avons montré que, en réponse au TLRs, la modulation de l’expression du TNF-α en fonction de l’état de méthylation de l’ADN et d’acétylation des histones dépendait directement de l’expression du couple miR-346 et Btk. Btk est donc une protéine charnière dans le contrôle de l’inflammation par les mécanismes épigénétiques que sont les miARNs, la méthylation de l’ADN et l’acétylation des histones. Sur le plan thérapeutique, l’inhibition de cette protéine par ces différents mécanismes de régulation semble donc être très interessante, à la fois dans les maladies inflammatoires et néoplasiques. / Bruton tyrosine kinase, or Btk, is a protein whose role in the maturation of B cells has been known for several years. However, its role in the control of innate immunity is less established. We have shown that, in response to Toll like Receptors pathway or TLRs, Btk regulates the stability of the mRNA of TNF-α via the TTP or Tristetraprolin protein. Furthermore, we showed that the expression of microRNA, the miR-346, negatively regulated the Btk protein and thus the synthesis of TNF-α. Upregulation of miR-346 by transfection act as an anti-TNF-α and anti-Btk drugs, especially in the cellular model of rheumatoid arthritis.Finally, we showed that, in response to TLRs, the modulation of the expression of TNF-α according to the state of DNA methylation and histone acetylation depended directly on crosstalk beetween miR-346 and Btk. Btk is a key protein in the control of inflammation by epigenetic mechanisms such as miRNAs, DNA methylation and histone acetylation. As therapeutic interest, inhibition of Btk by those different regulatory mechanisms seems to be very interesting, both in inflammatory and neoplastic diseases.