Orientador: Gustavo Vitti Môro / Banca: Maria Elisa Ayres Guidetti Zagatto Paterniani / Banca: Sandra Helena Unêda Trevisoli / Banca: Ivana Marino Bárbaro Torneli / Banca: Everlon Cid Rigobelo / Resumo: O nitrogênio é um dos elementos mais exigidos pela cultura do milho, pois está diretamente ligado à capacidade de produção agrícola desta espécie. Grande parte dos solos brasileiros agricultáveis possuem deficiência de nitrogênio ou este nutriente não está disponível em quantidades suficientes para suprir a necessidade da cultura, sendo necessário realizar aplicações suplementares de nitrogênio para se alcançar elevadas produtividades. As cultivares atuais de milho são altamente dependentes de adubação nitrogenada, pois foram desenvolvidas para ambientes otimizados, não sendo adaptadas para as condições de cultivo sob baixo nitrogênio. O uso de bactérias diazotróficas, as quais possuem a capacidade de fixar nitrogênio e disponibilizá-lo para as plantas, bem como a associação das plantas com essas bactérias, pode se tornar uma alternativa sustentável e economicamente viável para a produção de milho em sistemas agrícolas sob baixa utilização de nitrogênio. Com base no exposto, os objetivos deste trabalho foram identificar e caracterizar genótipos de milho eficientes no uso do nitrogênio e Azospirillum brasilense em ambientes contrastantes quanto a disponibilidade de nitrogênio no solo e selecionar parentais superiores de milho para eficiência no uso de Azospirillum brasilense. Foram utilizados como material genético 48 genótipos de milho obtidos em esquema de dialelo parcial, utilizando-se oito linhagens parentais pertencentes ao grupo heterótico I, e seis linhagens parentais p... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The nitrogen is one of the elements most required by maize crop because it is directly related to the agricultural production capacity of this species. Most brazilian soils have nitrogen deficiency or it is not available in sufficient quantities to meet the need of the crop, and it is necessary to make supplemental nitrogen applications to reach high yields. The current maize cultivars are highly dependent on nitrogen fertilization since they were developed for optimized environments and were not adapted to the conditions under low nitrogen cultivation. The use of diazotrophic bacteria, which have the ability to fix nitrogen and make it available to plants, as well as the association of plants with these bacteria, can become an ecologically sustainable and economically viable alternative for the production of corn in agricultural systems under low or non-use of nitrogen. Thus, the objectives of this study were to identify and characterize efficient maize genotypes in the use of nitrogen and Azospirillum brasilense in contrasting environments regarding nitrogen availability in the soil and to select higher parental maize for efficiency in the use of Azospirillum brasilense. Were used as genetic material 48 diallelic genotypes were obtained in a partial diallel scheme, using eight lines belonging to the heterotic group I, and six lines belonging to the heterotic group II, all from the Department of Genetics of ESALQ / USP. The experiments were conducted in three crops in a rand... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-11-03T16:52:59Z No. of bitstreams: 1 2017_RaqueldeCastroPires.pdf: 2820771 bytes, checksum: 11cf27dee35647b3af642e064a9a1245 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-01-05T21:41:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_RaqueldeCastroPires.pdf: 2820771 bytes, checksum: 11cf27dee35647b3af642e064a9a1245 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-05T21:41:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_RaqueldeCastroPires.pdf: 2820771 bytes, checksum: 11cf27dee35647b3af642e064a9a1245 (MD5) Previous issue date: 2018-01-05 / Grande parte das espécies da família Leguminosae se associa simbioticamente com bactérias fixadoras de nitrogênio pertencentes às classes α- e β-proteobacteria, conhecidas como rizóbios. Nesse trabalho foi estudada a associação simbiótica em dois gêneros de leguminosas, Mimosa e Stryphnodendron: o primeiro é notório pelo amplo sobre sua capacidade conhecimento de nodulação, ao passo que, pouco se sabe sobre as interações simbióticas envolvendo Styphnodendron. Os objetivos deste estudo foram avaliar a influência dos diferentes tipos de solo na associação simbiótica entre espécies do gênero Mimosa e bactérias fixadoras de nitrogênio, e investigar a nodulação do gênero Stryphnodendron em simbiose com rizóbios. No capítulo I, foi realizado um experimento com seis espécies de Mimosa em solos oriundos de três diferentes locais com características contrastantes. Nos dois solos mais ácidos e menos férteis as plantas de Mimosa se associaram com bactérias do gênero Paraburkholderia, enquanto que no solo mais fértil e com pH tendendo para neutro se associaram com Rhizobium. Fatores edáficos como pH e fertilidade, parecem favorecer a predominância de determinados tipos de rizóbio, enquanto que as espécies de plantas estudadas parecem ter baixa especificidade no estabelecimento da associação simbiótica. No capítulo II, foram selecionadas dez espécies representativas das três principais linhagens do gênero Stryphnodendron, a fim de revelar quais espécies são capazes de nodular e quais seriam os rizóbios associados. Sementes dessas espécies foram plantadas em seu solo de origem para avaliação da nodulação e os isolados obtidos foram identificados por meio da sequência do gene 16S rRNA. Das dez espécies avaliadas, oito mostraram-se capazes de nodular e distintas bactérias pertencentes aos gêneros Bradyrhizobium, Rhizobium e Paraburkholderia foram encontradas em associação simbiótica com as espécies de Stryphnodendron, revelando novas relações planta-bactéria e ampliando o conhecimento sobre a nodulação em espécies de leguminosas tropicais. / Most species of the family Leguminosae are able to form a symbiotic association with nitrogen fixing bacteria belonging to the α- and β-proteobacteria classes, which are known as rhizobia. In this work the symbiotic associations in two legume genera, Mimosa and Stryphnodendron were investigated: the first one is notorious for the knowledge accumulated about its nodulation capacity, whereas little is known about the symbiotic interactions related toStyphnodendron. The goals of this study were to investigate the influence of different types of soil on the symbiotic association of Mimosa and rhizobia, and the nodulation of the genus Stryphnodendron with nitrogen-fixing bacteria. In chapter I, a greenhouse experiment was carried out with trap plants using seeds of six species of Mimosa and soils from three different locations with contrasting characteristics. In the two most acidic and less fertile soils, Mimosa plants were associated with bacteria of the genus Paraburkholderia, whereas in the more fertile soil with pH tending towards neutral plants were associated with Rhizobium. Edaphic factors such as pH and fertility influenced the presence of certain rhizobia types, while the species of plants studied appear to have low specificity in the establishment of its symbiotic relationships. In chapter II, ten species, representative of the three main lineages of the genus Stryphnodendron,were selected, in order to reveal which species are capable to nodulate and identify the associated rhizobia. Seeds of these species were planted in their origin soil for nodulation evaluation and the isolates obtained were identified by sequencing the 16S rRNA gene. Of ten species evaluated, eight were able to nodulate and distinct bacterias belonging to the genera Bradyrhizobium, Rhizobium e Paraburkholderia were found in symbiotic association with species of Stryphnodendron, revealing new plant-bacteria interactions and expanding the knowledge about nodulation in tropical legume species.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Microbiana, 2015. / Submitted by Cristiane Mendes (mcristianem@gmail.com) on 2015-07-02T16:21:18Z No. of bitstreams: 1 2015_ClementeBatistaSoaresNeto.pdf: 1949706 bytes, checksum: e806a939393067e1f694a06679036bbf (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2015-08-18T13:38:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_ClementeBatistaSoaresNeto.pdf: 1949706 bytes, checksum: e806a939393067e1f694a06679036bbf (MD5) / Made available in DSpace on 2015-08-18T13:38:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_ClementeBatistaSoaresNeto.pdf: 1949706 bytes, checksum: e806a939393067e1f694a06679036bbf (MD5) / Solos ultramáficos são caracterizados por apresentaram baixa disponibilidade de nutrientes e altos teores de metais pesados, incluindo o níquel. As leguminosas, como Mimosa spp., estão entre os vegetais que ocorrem naturalmente em áreas com esse tipo de solo. Para fixarem nitrogênio essas plantas se associam simbioticamente com bactérias diazotróficas, incluindo as beta-proteobactérias. O objetivo desse estudo foi avaliar a ocorrência, caracterizar e identificar bactérias diazotróficas noduladoras em simbiose com plantas do gênero Mimosa no maciço ultramáfico de Barro Alto-Goiás. Para tal, foram coletadas amostras de nódulos de Mimosa sommians e Mimosa clausenii, dos quais foi feito o isolamento das bactérias presentes nos nódulos em meio YMA. Foram obtidos setenta e oito isolados, caracterizados por meio de análises morfológicas, moleculares e bioquímicas. O sequenciamento do gene 16S RNAr mostrou que 54 isolados eram pertencentes ao gênero Burkholderia e seis a Pseudomonas. Não foi possível obter as sequências completas desse gene para 18 isolados. Somente nove isolados, incluindo as seis Pseudomonas, foram capazes de solubilizar fosfato em meio com fosfato de cálcio. Não houve solubilização em meio com fosfato de alumínio por nenhum dos isolados Os isolados não apresentaram tolerância ao Ni. Trinta e oito isolados foram capazes de produzir sideróforos e todos produziram o fitormônio AIA, variando de 8,7 a 54,1 μg/mL. Entre as enzimas avaliadas, todos os isolados produziram celulases, lípases e pectinases, enquanto nenhum isolado produziu urease, lipase e xilanase. Os testes de nodulação em meio Jensen com M. pudica e vasos com substrato (areia e carvão) com Phaseolus vulgaris mostraram a capacidade de nodulacão por Burkholderia. Porém, apesar de nodularem o feijoeiro, os isolados não foram eficientes em fixar o nitrogênio atmosférico em simbiose com essa planta. Os isolados de Pseudomonas spp. não apresentaram capacidade para formação de nódulos nas condições testadas. Entretanto, os genes nodC e nifH, avaliados por meio de PCR, se mostraram presentes nos isolados W14 e W24 pertencentes ao gênero Pseudomonas. Esses resultados apontam a ocorrência de betaproteobactérias pertencentes ao gênero Burkholderia em solos ulltramáficos associados à Mimosa spp. Apesar de também terem sido isoladas de nódulos, para bactérias do gênero Pseudomonas, ainda permanece a necessidade de outros estudos sobre sua capacidade simbiótica. Os isolados apresentaram potencial para diversas características de importância agrícola e poderão ser prospectados para sua utilização em programas de recuperação de áreas degradadas. / Ultramafic soils are characterized by low nutrient availability and high levels of heavy metals, including nickel. Legume plants, such as Mimosa spp., are among plants that occur naturally in areas with this type of soil. To fix nitrogen symbiotically these plants are associated with diazotrophic bacteria, including beta-proteobacteria. The aim of this study was to evaluate the occurrence, characterize and identify bacteria in symbiosis with nodulating nitrogen fixing plants from the genus Mimosa from the ultramafic massif of Barro Alto - Goiás. Samples were collected from nodules of Mimosa sommians and Mimosa clausenii from which the isolation of bacteria on YMA medium was made. Seventy-eight isolates were obtained and characterized by means of morphological, molecular and biochemical analyses. The sequencing of the gene 16S rRNA showed that 54 isolates belonged to the genus Burkholderia and six to Pseudomonas. It was not possible to get the complete sequences of the 16S rRNA gene for the 18 remaining isolates. Only nine isolates, including six Pseudomonas, were able to solubilize phosphate in medium containing calcium phosphate. There was no dissolution in medium with aluminum phosphate. The isolates showed no tolerance to Ni. Thirty-eight strains were able to produce siderophores and all produced the phytohormone IAA, ranging from 8.7 to 54.1 μg / mL. Among the evaluated enzymes, all isolates produced cellulases, lipases and pectinases, while none were able to produce urease, lipase and xylanase. Nodulation tests in Jensen medium with M. pudica and potts with substrate (sand and coal) with Phaseolus vulgaris showed nodulation capacity by Burkholderia. But despite the capacity to nodulate common bean they were not efficient to fix atmospheric nitrogen in symbiosis with the plant. Isolates of Pseudomonas spp. showed no ability for nodule formation in the tested conditions. However, nodC and nifH genes, assessed by PCR, were present in the isolates W14 and W24. These results indicate the presence of beta-proteobacteria of the genus Burkholderia in ultramafic soils associated with Mimosa spp. Although bacteria from the genus Pseudomonas have also been isolated from nodules, further studies of their symbiotic ability remains needed. The isolates showed potential for several traits of agricultural importance and may be prospected to be used in restoration of degraded areas.

Orientadora: Lucia Maria Carareto Alves / Banca: Tiago Santana Balbuena / Banca: Mariana Carina Frigieri / Resumo: Os micro-organismos representam uma importante fonte de produtos naturais bioativos diversos. Esses organismos produzem enzimas que exercem papel importante em processos industriais com alto valor econômico agregado ou ambientalmente desejado. Apresentam uma série de vantagens em seu uso e produção. No presente trabalho foram utilizados consórcios degradadores de resíduos da biomassa lignocelulolítica, visando o isolamento e identificação de micro-organismos de interesse biotecnológico. De acordo com os resultados obtidos é possível verificar que apesar dos consórcios produzirem celulase, nenhum isolado produziu esse tipo de enzima. Foram isoladas bactérias produtoras de amilase, protease, lipase e solubilizam fosfato. Utilizando o sequenciamento do 16s rRNA foi identificado isolados pertencentes aos gêneros Burkholderia, Pandoraea, Pseudomonas, Bacillus, Asticcacaulis. / Abstract: Microorganisms represent an important source of many bioactive natural products. These organisms produce enzymes that are important in industrial processes with high value aggregate economic or environmentally desired. The use of enzymes of microbial origin has been widely explored due to a series of industrial and environmental advantagens.In this present work, a degrading consortium of lignocellulose biomass residues was used aiming the isolation and identification of the bacteria that produce enzymes with biotechnological interest. According to the observed results it can be said that although the consortia produces cellulose, isolated bacteria do not then produced no such enzyme. Bacteria isolated produced amylase, protease, lipase and phosphatase. With the sequencing of the 16S rRNA it was possible to determine that the isolates belong to the genus Burkholderia, Pandoraea, Pseudomonas, Bacillus, Asticcacaulis. / Mestre

Orientador: Orivaldo Arf / Banca: Salatier Buzetti / Banca: Domingos Fornasieri Filho / Resumo: No Brasil e no mundo, a cultura do milho é uma das mais importantes, por ser a base da alimentação animal e utilizado também na alimentação humana. Técnicas sustentáveis de manejo na cultura do milho são necessárias, visando aumento de produtividade, minimizando custos e impactos ambientais. O objetivo deste trabalho foi avaliar diferentes coberturas vegetais (milheto, crotalária, guandu, milheto + crotalária, milheto + guandu e pousio), doses de N (0, 40, 80 e 120 kg ha -1 ) com e sem a inoculação de sementes com Azospirillum brasilense na cultura do milho, cultivado em sistema plantio direto no crescimento e produtividade na região do Cerrado. Foi utilizado delineamento experimental em blocos casualizados em esquema fatorial 6x4x2, constituindo 48 tratamentos, com 4 repetições. O estudo foi realizado na Fazenda Experimental pertencente à Faculdade de Engenharia - UNESP - Campus de Ilha Solteira, localizada no município de Selvíria - MS. O solo do local é do tipo LATOSSOLO VERMELHO Distrófico típico argiloso. A precipitação média anual é de 1.330 mm, a temperatura média anual é de 25 oC e a umidade relativa do ar entre 70 e 80%. Durante a condução do experimento, foram realizadas as seguintes avaliações: massa seca, teores e quantidades acumuladas de N, P e K nas plantas de cobertura; no milho: população inicial e final de plantas, produção de massa seca da parte aérea das plantas, teor de N foliar, índice de clorofila foliar, teores e valores acumulados de N, P e K na planta, altura de plantas e de inserção de espiga, diâmetro de colmo, comprimento de espiga, diâmetro de espiga, massa de mil grãos e produtividade de grãos. As coberturas vegetais, exceto o guandu no primeiro ano e pousio no segundo, produziram quantidade adequada de resíduo para manter o sistema plantio direto na região de Cerrado de baixa altitude. O consórcio milheto + crotalária possibilita quantidades acumuladas de N e K.. / Abstract: In Brazil and in the world, maize crop is one of the most important because it is the basis of animal feed and also used in human feed. Sustainable techniques of management in maize crop are needed, aiming at increasing yield, reducing costs and environmental impacts. The objective of this study was to evaluate different cover crops (millet, sunn hemp, pigeonpea, millet + sunn hemp, millet + pigeonpea and fallow), N rates (0, 40, 80 and 120 kg ha -1 ) with and without inoculation of seeds with Azospirillum brasilense in maize crop, cultivated in no- tillage system on growth and yield in the Cerrado region. The experimental design was complete randomized blocks in a factorial scheme 6x4x2, constituting 48 treatments, with 4 replications. The study was conducted at the Experimental Farm belonging to the Faculty of Engineering - UNESP (Ilha Solteira), located in Selviria - MS. The soil of the place is a Typical Dystrophic Red Latosol clayey texture. The average annual rainfall is 1.330 mm, the average annual temperature is 25°C and the relative humidity between 70 and 80%. During the experiment, the following evaluations were performed: dry matter, content and accumulated values of N, P and K in cover crops; in maize: initial and final population of plants, production of dry matter of the shoots, leaf nitrogen content, leaf chlorophyll index, content and accumulated values of N, P and K in the whole plant, plant height and of ear insertion, stem diameter, ear length, ear diameter, thousand grain weight and grain yield. The cover crops except the pigeonpea in 2012/13 and fallow in 2013/14 produced adequate amount of residue to keep the no-tillage system in the Cerrado region. The consortium of millet + sunn hemp provided the greater accumulated amount of N and K for both years of cultivation. The great yield of maize grains under pigeonpea residue was due to increase in ear diameter and thousand-grain weight. Thus, the great maize yield ... / Mestre

Orientador: Idomeo Bonetti Filho / Co-orientador: / Banca: Juliane Maria Guerreiro Tanomaru / Banca: Yara Teresinha Corrêa Silva Sousa / Banca: Gisele Faria / Banca: Flaviana Bombarda de Andrade / Resumo: Cimentos endodônticos associados à amoxicilina têm sido pesquisados como uma alternativa para obturação do canal radicular. Os objetivos do presente estudo foram: Avaliar a citocompatibilidade do AH Plus e do Sealapex associados com amoxicilina em quantidade de 10% do peso total dos cimentos (Capítulo 1) e avaliar o escoamento e o tempo de presa dos cimentos AH Plus e Sealapex associados à amoxicilina em diferentes concentrações e a atividade antibiofilme dos cimentos associados a uma maior concentração de amoxicilina que não altera as propriedades físicas de ambos os cimentos (Capítulo 2). No Capítulo 1 a citocompatibilidade dos materiais foi avaliada utilizando fibroblastos L929 expostos por 24 horas a diferentes diluições dos extratos dos cimentos puros e associados à amoxicilina. Os ensaios de brometo de 3-(4,5-dimetil-2-tiazolil )-2,5-difenil-2Htetrazólio (MTT) e vermelho neutro foram utilizados para avaliação da viabilidade celular e a fluorescência para actina e α-tubulina foram utilizadas para análise do citoesqueleto. Os dados foram analisados empregando a análise de variância a dois critérios e pós teste de Bonferroni, com nível de significância de 5%. Os resultados mostraram que a incorporação de amoxicilina na concentração de 10% do peso total dos cimentos não diminuiu a viabilidade dos fibroblastos e não causou alterações estruturais nos componentes do citoesqueleto estudados. Conclui-se que à amoxicilina poderia ser um agente antimicrobiano promissor para ser incorporada aos cimentos endodônticos. No Capítulo 2 o escoamento a o tempo de presa dos cimentos puros ou associados à amoxicilina em concentrações de 0,25 a 10% foram estudadas de acordo com a especificação no6876 da Organização Internacional de Padronização (ISO 2012). A avaliação antibiofilme dos cimentos puros e associados à amoxicilina 1% foi realizada por teste de contato...(Resumo completo clicar acesso eletrônico) / Abstract: Sealers associatedwith amoxicillinhave been developed as an alternative to root canal filling. The objectives of this study were to evaluate the cytocompatibility of AH Plus and Sealapex associated with amoxicillin in concentration of 10% of the total weight of sealer (Chapter 1) and evaluate the flow and the setting time of AH Plus sealer and Sealapex associated with amoxicillin at different concentrations and the activity of sealers antibiofilm associated with higher concentrations of amoxicillin which does not alter the physical properties of both sealers (Chapter 2). In Chapter 1 cytocompatibility of the materials was assessed using the L929 fibroblasts exposed for 24 hours with different dilutions of the extracts of pure sealer and associated with amoxicillin. The testing of 3- (4,5-dimethyl-2-thiazolyl) -2,5-diphenyl-2H-tetrazolium (MTT), and neutral red were used for evaluation of cell viability and fluorescence actin and α-tubulin were used for analysis of the cytoskeleton. Data were analyzed using analysis of variance and two criteria Bonferroni post test at 5% significance level. The results showed that incorporation of amoxicillin at a concentration of 10% by weight of the sealer did not decrease the viability of fibroblasts and did not cause structural changes in the cytoskeletal components studied. It is concluded that amoxicillin could be a promising antimicrobial agent to be incorporated in sealers. In chapter 2 the flow and setting time of the sealer pure or associated with amoxicillin from 0.25 to 10% concentrations were evaluated according to no 6876 specification of the International Organization for Standardization (ISO 2012). The antibiofilm evaluation of pure sealer and 1% associated with amoxicillin was performed by direct contact test with Enterococcus faecalis biofilm previously induced in bovine dentin for 14 days. Fresh sealer were in contact with the biofilm... (Complete abstract electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-10Bitstream added on 2014-06-13T20:16:33Z : No. of bitstreams: 1 000737304.pdf: 599788 bytes, checksum: 3c0e4ba9cbd16debc1aaf8235e004268 (MD5) / Os micro-organismos representam uma importante fonte de produtos naturais bioativos diversos. Esses organismos produzem enzimas que exercem papel importante em processos industriais com alto valor econômico agregado ou ambientalmente desejado. Apresentam uma série de vantagens em seu uso e produção. No presente trabalho foram utilizados consórcios degradadores de resíduos da biomassa lignocelulolítica, visando o isolamento e identificação de micro-organismos de interesse biotecnológico. De acordo com os resultados obtidos é possível verificar que apesar dos consórcios produzirem celulase, nenhum isolado produziu esse tipo de enzima. Foram isoladas bactérias produtoras de amilase, protease, lipase e solubilizam fosfato. Utilizando o sequenciamento do 16s rRNA foi identificado isolados pertencentes aos gêneros Burkholderia, Pandoraea, Pseudomonas, Bacillus, Asticcacaulis. / Microorganisms represent an important source of many bioactive natural products. These organisms produce enzymes that are important in industrial processes with high value aggregate economic or environmentally desired. The use of enzymes of microbial origin has been widely explored due to a series of industrial and environmental advantagens.In this present work, a degrading consortium of lignocellulose biomass residues was used aiming the isolation and identification of the bacteria that produce enzymes with biotechnological interest. According to the observed results it can be said that although the consortia produces cellulose, isolated bacteria do not then produced no such enzyme. Bacteria isolated produced amylase, protease, lipase and phosphatase. With the sequencing of the 16S rRNA it was possible to determine that the isolates belong to the genus Burkholderia, Pandoraea, Pseudomonas, Bacillus, Asticcacaulis.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-22Bitstream added on 2014-06-13T19:55:56Z : No. of bitstreams: 1 meneghine_ak_me_jabo.pdf: 500432 bytes, checksum: 2720a46642e38f1bfc0ff5d7be11a770 (MD5) / A aquicultura é uma atividade que está em contínuo crescimento, desta forma os ecossistemas aquáticos utilizados para tal atividade acabam sofrendo alterações nas condições da água e na comunidade microbiana do local. No presente trabalho, compararam-se as comunidades bacterianas presentes em águas de dois viveiros de piscicultura, um utilizado como reservatório de água (V1) e o outro com condições de elevada carga de nutrientes (V4), os quais estão inseridos em um sistema sequencial com fluxo contínuo de água (seis viveiros). A escolha dos viveiros V1 e V4, foi baseada em estudos anteriores no qual foi evidenciado um alto grau de eutrofização neste local. As coletas de água foram realizadas em dois períodos distintos um na seca (Julho e Agosto/2012) e outro na chuva (Janeiro e Fevereiro/2012). A comunidade bacteriana foi avaliada através do sequenciamento do gene 16S rRNA. A população bacteriana variou significativamente entre os dois viveiros e segundo a estação anual, seca ou chuva. No viveiro 1 observou-se uma grande proporção de Proteobacterias, em ambos os períodos, entretanto houve mudanças nas classes deste grupo, a maioria β-Proteobacterias (chuvas) e uma proporção equivalente de β e α-Proteobacterias (seca). No viveiro 4, foi observada uma alta frequência de Cyanobacterias principalmente na estação de seca, aproximadamente 80% da população bacteriana do local, enquanto no período de chuvas este grupo foi menor. A comparação da população bacteriana dos dois viveiros estudados em épocas distintas mostrou que as bactérias nestes locais variam de acordo com o período hidrológico e estão intimamente ligadas com a concentração de nutrientes do local. Estas diferenças são importantes na participação dos ciclos biogeoquímicos, principalmente envolvendo os ciclos do nitrogênio e fósforo e a sanidade do sistema aquático. / The aquaculture is an activity that is continuous growing, in this way aquatic ecosystems used for such activity end up suffer changes in water conditions and microbial community local. In this study, we compared the bacterial communities present in waters of two fish farm ponds, a used as water reservoir (V1) and the other with conditions of high nutrient load (V4), which are inserted in a sequential system with continous water flow (six ponds). The choice of nurseries V1 and V4 was based on previous studies in which evidenced a high degree of eutrophication in this location. The water sampling were conducted in two distinct periods one in dry season (July and August/2012) and another in the rain (January and February/2012). The bacterial community was assessed by sequencing the 16S rRNA. The bacterial population varied significantly between the two ponds and according to season annual, dry or rain. In the pond 1 there was a large proportion of proteobacteria, in both periods, however there were changes in the classes of this group, most β-Proteobacteria (rain) and an equivalent proportion of β and α-proteobacteria (dry). In pond 4, we observed a high frequency of cyanobacteria mainly during the dry season, approximately 80% of the bacterial population of the place, while in the rainy season this group was lower. A comparison of the bacterial population of the two ponds studied at different times showed that the bacteria at these sites varies according to the period hydrological and are closely linked with nutrient concentration local. These differences are important in the participation in biogeochemical cycles, especially involving the cycles of nitrogen and phosphorus and health of the aquatic system.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-05-27Bitstream added on 2014-06-13T20:35:50Z : No. of bitstreams: 1 lopes_ar_me_rcla.pdf: 332770 bytes, checksum: e334997359c17b4bd92d43aaad7eeb65 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O ácido lático é produzido preferencialmente durante o metabolismo fermentativo de carboidratos por bactérias láticas (BAL). Esse processo metabólico anaeróbio gera 2 moles de ácido lático partindo-se de 1 mol de glicose. Procurando-se obtenção de ácido em meios de cultivo de baixo custo, foram avaliados 3 meios de cultivo: CSN a base de caldo de canade- açúcar, MRS modificado (2% de glicose) e o meio Padrão (4% sacarose). Para cada meio utilizou-se 4 Erlenmeyer’s de 250 mL sendo 1 deles o controle e os demais contendo as bactérias. Empregou-se após seleção prévia Lactobacillus delbrueckii 103.10.2 e linhagem selvagem não identificada na condição estática (30 ± 2°C) e agitada (150 rpm, temperatura de 30 ± 2°C) por 72 h. Os meios foram enriquecidos com extrato de tomate em diferentes concentrações (0; 0,5 ; 2 e 4%). O ácido lático produzido foi quantificado enzimaticamente pelo Accutrend Lactate® e a acidez total por titulometria. Acompanhou-se o consumo da glicose pelo método do ADNS. Verificou-se que 34,35gL-1 de ácido lático foram obtidos em 72 h de fermentação agitada pela linhagem selvagem não identificada, no meio CSN 12 brix acrescido de 4% de extrato de tomate, sendo consumidos 16,1 gL-1 de glicose. A linhagem Lactobacillus delbrueckii 103.10.2 produziu 27,90gL-1 de ácido lático em meio Padrão, contendo 0,5% de extrato de tomate, durante as 72h de cultivo. / The lactic acid is produced preferably during fermentative metabolism of carbohydrate for lactic acid bacteria (BAL). In this anaerobic metabolic process, two lactic acid molecules are produced from each molecule of glucose. In this study Lactobacillus delbrueckii 103.10.2 and unidentified wild strain was assayed in three different culture media: modified MRS medium (2% glucose), CSN (sugar-cane juice supplemented with nutrients) and a standard medium (4% sucrose) with agitation or under stationary conditions, enriched with tomato extract (0; 0,5 ; 2 and 4%). The lactic acid produced was measured with the Accutrend Lactate® as well as titration method (verification of acidity); and glucose concentration was determined by ADNS method. The best strain for lactic acid production was unidentified wild strain, presenting 34,35 gL-1 of lactic acid in the CSN 12 brix medium enriched with 4% of tomato extract; 16,1 gL-1 of glucose was consumed, at 30 ± 2°C for 72h, under agitation at 150 rpm.

Resumo: Actinobactérias ou actinomicetos são bactérias Gram-positivas com elevado conteúdo de G+C (guanina + citosina) e com alta capacidade de produzir diversos metabólitos secundários. Estas bactérias são comumente isoladas do solo e são muito estudadas pelo grande potencial em produzirem antibióticos. A ocorrência destes micro-organismos nas areias das praias na costa brasileira é raramente descrita na literatura. As comunidades de micro-organismos que estão presentes em regiões entre-marés de ambientes marinhos realizam processos essenciais que contribuem para o funcionamento das zonas costeiras, como por exemplo, a ciclagem do carbono, a transferência de metal e remoção de poluentes orgânicos para níveis tróficos superiores. Portanto, estes micro-organismos podem servir como bioindicadores do ecossistema. As condições da região entre-marés são extremas, devido aos ciclos de maré, resultando em gradientes de umidade, temperatura, a ação das ondas, a radiação UV, nutrientes e salinidade. Tais ondições favorecem o desenvolvimento e a disseminação de determinados micro-organismos com processos fisiológicos e metabólitos particulares. Deste modo, o presente trabalho teve como objetivo realizar a bioprospecção destes micro-organismos, previamente isolados na região entre-marés da Ilha do Mel, PR, principalmente para produção dedrogas antimicrobianas. Amostras de sedimentos superficiais foram coletadas em quinze estações da região entre-marés da Ilha do Mel (situada na entrada do Complexo Estuarino de Paranaguá, Paraná). As coletas foram realizadas nos dias 01 e 02 de fevereiro de 2007. Sub-amostras de sedimentos foram misturadas com água destilada e alíquotas do sobrenadante inoculadas em meio de cultura Czapeck Dox preparado com água destilada e água salina. As actinobactérias foram isoladas e identificadas por macromorfologia e coloração de Gram e por meio da técnica de microcultivo. Foram obtidas 116 actinobactérias e agrupadas em 10 morfotipos, pertencentes aos gêneros Nocardia e streptomyces. Para avaliação da atividade antibacteriana foram realizados ensaios biológicos qualitativos, em triplicata, pelo método dos poços. A ação das actinobactérias foi evidenciada através da produção de halos de inibição ao redor da colônia que sintetiza o metabólito. As cepas padrão utilizadas para os testes de atividade antimicrobiana foram: Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Escherichia coli (ATCC 25922), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) e Candida albicans (ATCC 10231). Os resultados evidenciaram que dos 116 isolados, 79 apresentaram atividade contra pelo menos uma cepa patogênica testada. Aproximadamente 72% das amostras testadas apresentaram atividade contra duas ou mais cepas patogênicas padrão. Sendo que 87% dos isolados testados inibiram C. albicans, 77% S. aureus, 18% P. aeruginosa e 4% E. coli. Na sequência, os isolados que apresentaram potencial antimicrobiano tiveram seus metabólitos caracterizados quimicamente e foi confirmada a identificação ao nível de gênero, por meio da amplificação com oligonucleotídeos específicos do DNA ribossomal 16S. Estes resultados evidenciam a importância do estudo do potencial biotecnológico das actinobactérias isoladas das regiões entre-marés.