Orientador: Osmar Malaspina / Banca: Roberta Cornelio Ferreira Nocelli / Banca: Stephan Malfitano Carvalho / Resumo: A abelha Apis mellifera tem sua grande importância por ser um dos polinizadores economicamente mais valiosos para as culturas em todo o mundo, garantindo a polinização cruzada e aumentando a produtividade de frutos. Por outro lado, a agricultura cada vez mais desenvolve produtos químicos a fim de controlar plantas daninhas, fungos e insetos-praga para garantir a produtividade. Os inseticidas são utilizados em grande escala no interior do estado de São Paulo, nas culturas de citrus para o controle do huanglongbing (HLB) e na cana de açúcar para o controle de diversas pragas. As aplicações normalmente são feitas por aviões e como resultado uma mortandade expressiva é observada em apiários próximos das plantações. As abelhas melíferas podem entrar em contato com tal agente químico através de suas atividades de coleta de água, resinas vegetais, pólen e néctar. A intoxicação resultante desta exposição pode ser letal, o que é facilmente detectável, ou causar efeitos na fisiologia e no comportamento do inseto. Esses efeitos, que por sua vez são dificilmente detectáveis, podem ser paralisia, desorientação ou mudanças comportamentais; porém podem comprometer toda a estrutura social da colônia. Por esta razão os objetivos desse projeto foram estudar a capacidade de orientação de abelhas A. mellifera e os efeitos dos inseticidas tiametoxam e acetamiprido via aplicação tópica utilizando o modelo experimental do labirinto, que reproduz as atividades de forrageamento em campo. Observou-se que as doses subletais (DL50/100, DL50/10 e DL50) dos inseticidas tiametoxam e acetamiprido, aplicadas topicamente, causaram efeitos deletérios nos testes de labirinto. Para o tiametoxam, houve aumento nos tempos de vôo e coleta de alimento e pior performance para as três doses em relação ao grupo controle. Para o acetamiprido, houve aumento nos tempos de vôo e coleta de alimento, pior performance e menor quantidade de alimento... / Abstract: The Apis mellifera bees has its great importance as one of the most economically valuable pollinators for crops worldwide, ensuring cross-pollination and increasing fruit yield. On the other hand, increasingly more agricultural chemicals developed in order to control weeds, fungi and insect pests to ensure productivity. Insecticides are used on a large scale in the state of São Paulo, in citrus crops to control huanglongbing (HLB) and sugar cane for the control various pests. Applications are usually made by aircraft and as a result a significant mortality is observed in apiaries near the plantations. Honey bees can come into contact with such chemical agente through their collection of water activities, plant resins, pollen and néctar. The resulting poisoning of this exposure can be lethal, which is readily detectable or cause effects on the physiology and insect behavior. These effects, which in turn are hardly detectable, can be palsy, disorientation or behavioral changes; but can compromisse the entire social structure of the colony. For this reason the objectives of this project were to study the bee orientation capacity A. mellifera and the effects of thiamethoxam and acetamiprid insecticide via topical application using the experimental model of the maze, which reproduces the foraging activities in the field. It was observed that sublethal doses (LD50/100, LD50/10 and LD50) of thiamethoxam and acetamiprid insecticides, applied topically, have caused deleterious effects in the maze tests. For thiamethoxam, there was an increase in flight times and food collection and worse performance for the three doses in compared to control group. For acetamiprid, there was an increase in flight times and food collection, worse performance and lower amount of food collected for the three doses in compared to control group. The method of analysis of the flight behavior and food collection employee, can be directly related to the activity of bees ... / Mestre

Uma característica dos insetos sociais, entre elas as abelhas, é o controle da temperatura de seus ninhos. Abelhas sociais são denominadas como animais heterotérmicos, ou seja, são endotérmicas quando realizam atividades motoras (adultas) e ectotérmicas quando apresentam inatividade (cria e abelhas jovens). Essa característica está entrelaçada com o comportamento social. As abelhas melíferas (Apidae; Apini: Apis mellifera) são conhecidas por apresentarem uma temperatura ótima dentro de seus ninhos, regulando a temperatura independente da variação de temperatura ambiente (externa). Entretanto, as abelhas sem ferrão (Apidae; Meliponini) não mantém a temperatura dentro de seus ninhos rigorosamente como as abelhas melíferas. Apesar disso, essas abelhas conseguem manter uma temperatura mais ou menos estável para a emergência perfeita da prole. Porém, se ocorrer algum tipo de alteração de temperatura durante a fase do desenvolvimento ontogênico, esses indivíduos podem não desempenhar suas funções com eficiência, podendo trazer malefícios para a colônia. O objetivo do presente trabalho foi registrar essas temperaturas internas e compará-las com as temperaturas externas (ambiente), como também analisar a termorregulação passiva nas abelhas sem ferrão. Além disso, foi verificado também se estas abelhas podem apresentar uma alteração no comportamento adulto quando desenvolvidas em temperaturas consideradas inadequadas. Foram utilizadas colônias de Melipona scutellaris mantidas em caixas de madeira em uma sala. Para os registros das temperaturas foram utilizados 2 sensores para cada colônia, um na área de cria (dentro do invólucro) e outro na periferia do ninho (fora do invólucro). No momento dos registros internos das colônias, foram anotadas também as temperaturas externas, ou seja, as temperaturas da sala (onde estavam mantidas as colônias) e do ambiente externo. Para controle, foram feitos os registros de temperatura em uma caixa vazia (sem abelhas) com as mesmas dimensões das colônias. Para analisar a termorregulação das abelhas sem ferrão Melipona scutellaris foi utilizada uma estufa, onde foram incubados favos e cera (colônia) em diferentes temperaturas, a fim de verificar se a cera da colônia ou se a cria presente nos favos auxiliava na manutenção da temperatura do ninho. Os resultados obtidos demonstraram que a temperatura na área de cria é sempre maior que na periferia do ninho. Também foi verificado que a temperatura do ambiente influencia na variação da temperatura dentro do ninho. Para verificar a influência da temperatura no desenvolvimento das abelhas, foram realizados em estufa desenvolvimentos de crias em fase de pupa até a emergência dos indivíduos. Foi observado o tempo dos desenvolvimentos, taxas de mortalidade, medidas do corpo e asas como também a análise do comportamento adulto, a fim de avaliar o limiar gustativo. Os indivíduos emergidos das condições experimentais de temperatura (influência de temperatura por meio da estufa) demonstraram de acordo com as medidas do corpo e das asas, tamanhos menores que os indivíduos da colônia, porém não emergiram indivíduos deformados. Com relação ao comportamento adulto, avaliado pelo limiar de resposta gustativa, utilizando o Reflexo de Extensão da Probóscide, os placares gustativos foram semelhantes para os grupos de indivíduos emergidos na situação controle (colônia) e na situação experimental de 32ºC, sugerindo que a temperatura de 32ºC não causa nenhuma deficiência (neural e morfológica) à cria. Porém, os tratamentos de 28 e 30ºC não apresentaram bons desenvolvimentos, e assim, a taxa de mortalidade foi alta e o tempo de desenvolvimento foi longo. Este trabalho foi relevante para os estudos de influência de temperatura no desenvolvimento de imaturos e para a termorregulação colonial. / One of the characteristics of social insects, the bees among them, is the temperature control of their nests. Social bees are called heterothermic animals, e.g. they are endothermic when they carry out motor activities (adults) and ectothermic when they present inertness (hatch and young bees). This characteristic is correlated with their social behavior. Honeybees (Apidae; Apini: Apis mellifera) are known by presenting an optimum temperature inside their nests, correcting temperature independently of environmental temperature variation (external). Meanwhile, stingless bees (Apidae; Meliponini) do not keep temperature inside their nests as rigorously as honeybees. Nevertheless, these bees are able to maintain temperature balanced for a perfect emergency of their offspring. However, in case there is any temperature change during the ontogenic development phase, they may not perform their duties efficiently, bringing harm to their colony. The present study aims to record the internal temperatures and compare them to the environmental ones (external), along with the analysis of passive thermoregulation of the stingless bees. Besides, it was checked out if those bees can reveal an adult behavior alteration when raised under inadequate temperatures. It was placed Melipona scutellaris colonies in wooden boxes in a room. For measurement temperature recording, it was used 2 (two) sensors for each colony, one of them in the foal area that is inside the casing and another in the nest periphery that is outside the casing. Both internal temperatures of the colonies and external ones were recorded, i.e. room temperatures, where boxes were kept in external environment. For comparison control, an empty box without bees was recorded under similar colony dimensions. On analyzing the stingless thermoregulation Melipona scutellaris, it was used a greenhouse for honeycomb and wax incubation (colony) in different temperatures for the purpose of verifying whether the colony wax or the hatch, present in the honeycomb, helps in the nest temperature maintenance. The results show the brood area temperature is always higher than the nest periphery which presents lower temperatures. Likewise, it was seen that the environmental temperature influences the temperature variation inside the nest. Verifying temperature influence in the bees, it was carried out greenhouse developments (pupa) until the emergency of subjects. Development time, mortality rate, body and wing measurements as well as adult behavior were observed with the view to assessing taste threshold. Subjects emerged from experimental condition of temperature influenced by greenhouse showed, according to body and wing measurements, smaller size than the colony subjects, although there were no malformed subjects. Concerning adult behavior evaluated by taste threshold answer using Proboscis Extension Reflex, gustatory scores were similar to all groups emerged from the control situation (colony) and under the experimental condition of 32°C, suggesting that 32°C does not produce any neural and morphological damage in the hatch. But, 28º and 30°C treatments did not come up with good developments, therefore mortality rate was high and development period of time was long. This work was relevant to the temperature influence on immature development and colonial thermoregulation.

O estudo teve como objetivo contribuir com a caracterização do mel das abelhas sem ferrão, especificamente a caracterização botânica e físico-química de maneira a fornecer subsídios para programas e medidas de incremento da atividade meliponícola. Foram definidos como locais de estudo municípios do Paraná (Bandeirantes, Cornélio Procópio e Guaraqueçaba), Santa Catarina (Saltinho do Canivete/Mafra) e São Paulo (Icém). As amostras, composta por 250 mL de mel, foram obtidas diretamente com os meliponicultores de acordo com o pico de produção melífera de cada região no período compreendido entre abril a dezembro de 2011 e abril a dezembro de 2012. Os parâmetros físico-químicos analisados foram: hidroximetilfurfural, pH, acidez, condutividade elétrica, cinzas, umidade, cor, açúcares redutores, sacarose e atividade diastásica. Para determinação dos elementos-traços foi utilizada a técnica de Voltametria de Redissolução Anódica de Pulso Diferencial. A análise polínica foi realizada seguindo o método padrão de acetólise e em seguida submetidas as análises quantitativas (contagem consecutiva de até 1.000 grãos de pólen/amostra) e qualitativas. Quanto aos parâmetros açúcares redutores, sacarose, hidroximetilfurfural e cinzas as amostras de mel de meliponíneos atendem aos pré-requisitos da legislação vigente. Já os parâmetros umidade e atividade diastásica divergiram. Este fato aponta a necessidade de criação de uma legislação especifica para mel das abelhas nativas levando em consideração o elevado número de espécies e suas características diferenciadas. A determinação dos elementos-traços (Cd, Cu, Pb e Zn) indica que as amostras de mel de abelhas sem ferrão apresentam concentrações não prejudiciais a saúde humana. Com análise polínica verificou-se diversidade de espécies vegetais utilizadas por essas abelhas sendo, a família Fabaceae (Caesalpinioideae, Faboideae e Mimosoideae) a que apresentou maior riqueza de tipos polínicos, seguida de por Asteraceae, Myrtaceae e Solanaceae. / The study aimed to contribute to the characterization of honey from stingless bees, specifically botany and physico-chemical characterization in order to provide support for programs and measures to increase the meliponícola activity. Were defined as study sites municipalities of Paraná (Bandeirantes, Cornélio Procópio e Guaraqueçaba), Santa Catarina (Saltinho do Canivete/Mafra) and São Paulo (Icém). The samples, consisting of 250 mL of honey, were obtained directly from the beekeepers in accordance with the peak honey production in each region for the period April to December 2011 and from April to December 2012. The physicochemical parameters analyzed were: hydroxymethylfurfural, pH, acidity, electrical conductivity, ash, moisture, color, reducing sugars, sucrose and diastase activity. For determination of trace elements technique anodic stripping voltammetry differential pulse was used. Pollen analysis was performed following the standard acetolysis method, and then subjected to quantitative analysis (row count to 1.000 pollen grains/sample) and qualitative. As for the parameters reducing sugars, sucrose, hydroxymethylfurfural and ash samples of honey from stingless bees meet the prerequisites of the current legislation. Have the parameters humidity and diastase activity diverged. This fact points out the need to create specific regulations for honey from native bees taking into account the high number of species and their different characteristics. The determination of trace elements (Cd, Cu, Pb and Zn) indicates that samples of honey from stingless bees exhibit concentrations not harmful to human health. With pollen analysis it was found diversity of plant species used by these bees being the family Fabaceae (Caesalpinioideae, Faboideae and Mimosoideae) presented the highest richness of pollen types, followed by Asteraceae, Myrtaceae and Solanaceae.

Orientador: Ricardo de Lima Zollner / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T13:48:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Trevizan_Giovanna_M.pdf: 992041 bytes, checksum: 788bad7f2b885488c459d8cc22f66468 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: As reações alérgicas à ferroada de inseto resultam de resposta exacerbada do sistema imune, com produção de elevados níveis de anticorpos IgE alérgeno-específicos e padrão de citocinas Th2. A diferenciação de linfócitos Th2 e a secreção de citocinas por estas células são reguladas pelo fator de transcrição GATA-3. A ligação da IgE ao seu receptor de alta afinidade (Fc?RI) em mastócitos e basófilos, promove a liberação de mediadores inflamatórios. Muitos estudos demonstram a eficácia da imunoterapia específica na dessensibilização e no desenvolvimento de tolerância em indivíduos com quadros graves de hipersensibilidade à ferroada de insetos, sobretudo da classe Hymenoptera. A histamina é o principal mediador liberado durante a resposta alérgica; através da ativação de diferentes receptores (HR1, HR2, HR3 ou HR4) as células do sistema imune podem ser tanto inibidas como estimuladas. Via HR1, a histamina estimula principalmente linfócitos Th1, enquanto inibe linfócitos Th2 via HR2. O receptor 4 desempenha papel central na diferenciação de linfócitos Th2 e também é capaz de modular a produção de citocinas. A liberação de histamina é regulada por fatores de liberação de histamina (HRF), sendo que os HRF dependentes de IgE induzem a liberação de histamina na fase tardia das reações alérgicas. Considerando-se todas essas informações, o objetivo do presente trabalho foi avaliar os efeitos modulatórios da imunoterapia na expressão gênica dos receptores de histamina (HR1, HR2 e HR4), fatores de liberação de histamina (HRF) e cadeia ? do receptor de alta afinidade de IgE, além da expressão protéica do fator de transcrição GATA-3, em células linfomononucleares de pacientes alérgicos ao veneno de abelha. As células foram isoladas de pacientes submetidos à imunoterapia, em diferentes períodos do tratamento (Pré, 1, 3, 6, 12, 18 e 24 meses), após injeção subcutânea, e submetidas à cultura por 72 horas, com estimulo de veneno de abelha a 1 ng/ml. Indivíduos não alérgicos foram estudados como grupo controle. Com objetivo de avaliar a expressão gênica foram realizadas extração de RNA, seguida de síntese de cDNA e PCR, para avaliação da expressão protéica, utilizou-se a técnica de imunofluorescência. A expressão gênica de HR1 e HR4, assim como de HRF e da cadeia gama do Fc?RI foi significativamente reduzida ao final do período analisado. O receptor 2 de histamina não apresentou alterações bem definidas após 24 meses de imunoterapia. O fator de transcrição GATA-3 apresentou diminuição significativa na expressão a nível protéico. Nossos resultados demonstram que a imunoterapia específica ao veneno de abelha foi capaz de modular elementos envolvidos na resposta imune / Abstract: Allergic disease is an abnormal response from the immune system, with high levels of allergen specific IgE antibodies and Th2 pattern of cytokines. Development of Th2 cells and the production of cytokines are regulated by transcription factor GATA-3. Binding of IgE to its high affinity receptor (Fc?RI) in mast cells and basophils induces inflammatory mediators' release. Many studies have shown the efficacy of specific immunotherapy. Histamine is an important mediator in allergy, through activation of distinct histamine receptors (HR1, HR2, HR3 or HR4) in the immune system; cells can be either stimulated or inhibited. Histamine can stimulate, by HR1 receptor, especially Th1 response, and inhibit particularly Th2 cells through HR2 activation. HR4 plays a central role in Th2 polarization and also modulates cytokine profile production. IgE-dependent histamine releasing factors (IgE-HRF) induce histamine release in late phase reaction. In regard of this information, the aim of this study was to evaluate the modulating effects of specific immunotherapy in gene expression of histamine receptors (HR1, HR2 and HR4), histamine releasing factor (HRF), in patients with allergy and the gama chain of Fc?RI, and also GATA-3 protein levels. Bee venom allergic subjects underwent specific bee venom immunotherapy (VIT) in different stages of treatment (Pre, 3, 6, 12, 18 and 24 months) were studied. Peripheral blood mononuclear cells were isolated after subcutaneous venom injection and submitted to culture for 24, 48 and 72 hours stimulated with 1ng/ml of bee venom. In parallel healthy subjects were studied as well. Total RNA extraction, followed by cDNA synthesis and PCR were used to evaluate gene expression; GATA-3 protein expression was analyzed by immunofluorescence assay. Data from all time of cell culture - 24, 48 and 72 hours - were grouped and analyzed. Gene expression from HR1 and HR4 and also HRF and ? chain of Fc?RI were significantly reduced at the end of 24 months of immunotherapy. Histamine receptor 2 didn't show well established alterations. For transcription factor GATA-3 significant decrease at protein level was observed. Together, our results indicate that bee venom specific immunotherapy was able to modulate some of the elements involved in the immune response / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Augochlorini (Halictinae) e um elemento comum na região Neotropical, e a historia natural das suas espécies e marcada pela plasticidade quando comparada a outras abelhas. A tribo e grupo-irmão de Halictini, e seus fosseis datam pelos menos do âmbar Dominicano (cerca de 20 milhões de anos). As relações entre os gêneros de Augochlorini foram reconstruídas de maneira insatisfatoria, sendo as hipóteses existentes em parte incongruentes, pouco robustas e baseadas apenas em dados morfológicos. Neste sentido, o presente estudo apresenta uma abordagem filogenética empregando dados moleculares. Para 76 terminais, foram obtidas sequências de DNA de quatro genes, 28S, Fator de Alongamento 1-alfa, Rodopsina Verde e wingless, somando 3043 pares de bases alinhadas. Análises de máxima parcimônia, máxima verossimilhança e inferência bayesiana foram conduzidas para os dados moleculares em conjunto, incluindo ou não regiões de alinhamento ambíguo (alças e íntrons). Os resultados, em consenso, apontam para a parafilia das duas subtribos de Augochlorini sensu Engel, com três grupos de gêneros, gr. Corynura, gr. Rhinocorynura e gr. Chlerogella formando uma politomia na base. Os demais gêneros formam um agrupamento que e dividido em três grandes clados, cujas relações não foram bem resolvidas. O primeiro e composto pelo grupo Megaloptidia e os gêneros Augochloropsis, Augochlorodes e Pseudaugochlora, o segundo pelo grupo Neocorynura mais Chlerogas, Paroxystoglossa e Temnosoma, e o terceiro pelo grupo Augochlora e Caenaugochlora, Megalopta e Thectochlora. As primeiras linhagens de Augochlorini se diversificaram entre 7060 milhões de anos atrás, sendo que desde 50 milhões de anos vem ocorrendo uma gradativa diversificação do grupo. A re-análise da morfologia externa do grupo não foi útil para entender melhor a evolução do grupo que em trabalhos anteriores, inclusive diminuindo o poder explicativo da hipótese gerada pela evidencia total. As hipóteses moleculares apresentaram novas evidencias que guiam futuros estudos para o grupo, para que se possa entender a evolução dentro de cada um dos seus clados. / Augochlorini (Halictinae) is a common element in the Neotropical region, and his natural history is known by their relatively plasticity when compared to other bees. Augochlorini is sister-group of Halictini, and its oldest fossils date from the Dominican amber (about 20 million years before present). The phylogenetic relationships among their genera were only superficially reconstructed, the competing hypothesis are not entirely congruent nor robust and were based only on morphological data. With this background, this study aims to present a molecular phylogeny to Augochlorini. It was obtained, for 76 terminals, DNA sequences of four genes, 28S, Elongation Factor 1-alpha, Green Rodopsin and Wingless, giving a 3043 base pair alignment. Maximum parsimony, maximum likelihood and Bayesian inference analyses were carried out for the molecular data, including or excluding regions of ambiguous alignment (loops and introns). The results, based on consensus trees, suggest the paraphyly of both Augochlorini subtribes (sensu Engel), with three groups of genera, gr. Corynura, gr. Rhinocorynura e gr. Chlerogella forming a basal polytomy with a clade containing the remaining genera. This clade has three subgroups, whose phylogenetic relationships were not well stabilized. The first group consists of gr. Megaloptidia and Augochloropsis, Augochlorodes, and Pseudaugochlora, the second group of gr. Neocorynura plus Chlerogas, Paroxystoglossa, and Temnosoma, and the third group consists of gr. Augochlora and Caenaugochlora, Megalopta, and Thectochlora. The first Augochlorini lineages diversified by 70 to 60 million years ago, and since 50 mya there has been a gradual diversification of the group. The reanalysis of augochlorines external morphology was not helpful for understanding the evolution of the group, and also reduced the explanatory power of the total evidence hypothesis. The molecular hypothesis brought new evidences to guide future studies for the group, and positively favored the conception about the evolution of Augochlorini main clades.

A comunidade de insetos visitantes de flores de clones do eucalipto urograndis (Eucalyptus grandis x E. urophylla) foi estudada em um plantio localizado na Fazenda Areão, em Piracicaba, SP (22° 41 41 S e 47° 38 5 3 W ) por meio de levantamentos semanais com rede entomológica, durante os florescimentos de 2007 e de 2008 com a finalidade de caracterizar seu potencial apícola com a determinação de sua apifauna associada, e das características de néctar produzidos por suas flores. A comunidade antófila nos dois anos do levantamento foi representada por 29.492 indivíduos pertencentes a 6 ordens, 21 famílias, 43 gêneros e 52 espécies. A apidofauna foi representada por 24.882 indivíduos pertencentes a 11 gêneros e 10 espécies. A abelha africanizada Apis mellifera, o visitante mais efetivo em todo o levantamento (80,96%), seguida do sirfídeo Ornidia obesa (5,29%) e do mantispídeo Zeugomantispa virescens (4,26%). Os índices de diversidade (H) e equitabilidade (E); foram distintos nos dois levantamentos indicando distribuição de espécies mais uniforme na coleta de 2007 em relação à de 2008. Dentre as demais espécies predominantes, destacaram-se as abelhas Trigona spinipes (irapuá), Tetragonisca angustula (jataí), e Nannotrigona testaceicornis (iraí). As concentrações médias encontradas por clones foram inferiores ao relatado na literatura, sendo os valores máximos variando entre 13 e 14%. As diferenças encontradas entre alguns clones possivelmente foram influenciadas pela altura de algumas plantas. / The community of insect flower visitors of eucalyptus urograndis clones (Eucalyptus grandis x E. urophylla) was studied in an plantation located at Areão farm, in Piracicaba, São Paulo state, Brazil (22° 41 41 S e 47° 38 53 W ). Weekly collections were conducted using hand net during the bloom periods of 2007 and 2008 in order to characterize the potential for beekeeping by determining the associated apifauna and the nectar characteristics produced by the flowers.The anthophilous community in the two-year survey was represented by 29,492 individuals belonging to 6 orders, 21 families, 43 genera and 52 species. The apidofauna was represented by 24,882 individuals belonging to 11 genera and 10 species. The Africanized honey bee Apis mellifera. This species was the most effective visitor throughout the survey (80.96%) followed by the syrphid Ornidia obesa (5.29%) and the mantispid Zeugomantispa virescens (4.26%). The diversity (H\') and equitability (E) indices were different between the two surveys showing that species distribution was more uniform in the collecting of 2007 when compared to the 2008. Among the other dominant species, the bees Trigona spinipes (Irapuá bee), Tetragonisca angustula (jataí bee), and Nannotrigona testaceicornis (Iraí bee) were the main ones. The differences found between some clones were possibly influenced by the height of some plants.

In a honeybee colony, the loss of a queen is considered to be a serious occurrence and, if a new queen is not produced, ultimately doomed. However, in colonies of Apis mellifera capensis (Cape honeybees), numerous pathways are available for a colony which unexpectedly losses a queen. At the onset of this experiment, four colonies of A. m. capensis were dequeened. Following this photographs of all brood frames in each colony were taken and the contents of the cells analysed. Cells were chosen at random but once selected were repeatedly analysed for the duration of the experiment. The contents of a total of 44 888 individual cells were analysed. Any queen cells constructed during the sampling period were removed, maintaining a queenless state. In each colony, as predicted, the removal of the queen evoked a variety of responses in an attempt to rectify the sudden loss. However, ultimately three of the four colonies absconded, leaving little by way of stores. Three of the four colonies initially attempted to rear a new queen while one colony was immediately invaded by a presumed foreign queen and hence any attempt at queen cell construction ceased. An increased number of queen cells in the swarm position were recorded in all colonies. The invasion of a colony by a foreign queen was considered to be a new pathway available for queenless colonies of A.m capensis. Worker policing and suspected brood cannibalism was prevalent in all sampled colonies yet in addition, the transfer of eggs and larvae from cell to cell was also observed which may have increased the suspected cases of policing and cannibalism. It was unclear whether an egg or larva had been consumed or simply moved to another cell on the brood frame. All colonies contained eggs from laying workers to varying degrees, based on the length of each individual sampling period which varied between colonies due to differences in absconding dates. A steady breakdown in the effectiveness of the division of labour amongst the worker bees was observed in each of the colonies highlighting the vital role of a queen. This breakdown was clearly seen in the reduction in general housekeeping within a colony. An increase in stores indicated a possible increase in the number of forager bees, thereby reducing the number of worker bees available for other duties. Pathways available to broodright colonies and strategies used following sudden queen loss are discussed.

Durante muito tempo as ilhas vêm sendo fundamentais para pesquisa em ecologia e biologia evolutiva. Esses estudos tornaram possível a elaboração de importantes teorias nesses campos e que puderam ser extrapoladas para diversos outros ambientes. O aumento dos desmatamentos e da fragmentação de habitats tem levado ao isolamento dos organismos em \"ilhas\" dentro do continente. A perda de diversidade em fragmentos é uma situação preocupante. Populações restritas a ilhas ou fragmentos possuem maior probabilidade de extinção. As abelhas possuem um papel fundamental nos ecossistemas e por isso a extinção de uma população terá impacto nos outros níveis tróficos. Em virtude disso, o objetivo desse trabalho foi testar a hipótese de que populações das abelhas Tetragonisca angustula e Bombus morio de ilhas com mais de 100 ha localizados nos estados de Santa Catarina (SC), Paraná (PR), São Paulo (SP) e Rio de Janeiro (RJ), e populações continentais em áreas próximas a remanescentes de Mata Atlântica nos estados de Minas Gerais (MG), PR, RJ, SC e SP possuem baixa diversidade genética e, por isso, estariam mais propensas à extinção. Nossos resultados mostraram que a espécie T. angustula apresenta alta filopatria de rainhas e baixa diversidade genética mitocondrial. Por outro lado, os microssatélites mostraram menor estruturação e alta/moderada diversidade genética, indicando que os machos são o sexo dispersor. Para a espécie B. morio, a diversidade genética observada para ambos os marcadores foi alta, com exceção de duas populações. As fêmeas também apresentaram maior estruturação populacional, enquanto que para os machos essa estruturação praticamente não existiu. Portanto, as populações das espécies T. angustula e B. morio não apresentam inclinação à extinção. A sobrevivência em ambientes urbanos e a grande capacidade de migração dos machos parecem ser fatores fundamentais para isso. Além disso, essas características parecem ser as responsáveis pelo não isolamento genético entre muitas das populações geograficamente isoladas / Islands have been key research fields on the ecology and evolutionary biology for a long time. The study of their biota has made possible the development of important theories that could be extrapolated to other environments. The increase in deforestation and habitat fragmentation has led to isolation of the organisms in \"islands\" within the continent. Loss of diversity in fragments is a concern, because nowadays many species only exist in fragments. Populations restricted to islands or fragments have higher probability of extinction. Bees have a key role in ecosystems and the extinction of their populations will impact other trophic levels. The aim of this study was to test the hypothesis that populations of two bee species, Tetragonisca angustula and Bombus morio, in islands with more than 100 ha located in the states of Santa Catarina (SC), Paraná (PR), São Paulo (SP) and Rio de Janeiro (RJ), and mainland populations in areas near the Atlantic Forest remnants in the states of Minas Gerais (MG), PR, RJ, SC and SP have low genetic diversity and therefore would be more prone to extinction. Our results to T. angustula showed low mitochondrial genetic diversity which can be associated to queen philopatry behavior. Moreover, microsatellites showed lower structure and moderate/high genetic diversity, indicating a greater dispersion by males. The genetic diversity observed for B. morio for both markers was high, excepting two populations. Females also had higher population structure than detected for males. Therefore, most of T. angustula and B. morio populations are not prone to extinction, mainly because of their capability to survive in urban environments and high male migration. Therefore, these characteristics seem to be responsible for allowing many of the geographically isolated populations do not present genetic isolation

Marking methods represent often an essential part of many studies which target on insect biology. These marking techniques sometimes represent the only possible way to obtain new and important informations. In the first part of the thesis I deal with individual insect labeling, which was used for marking of solitary bees and their nests as a tool of obtaining informations about nesting bee dynamics in aggregation. Our study show that nest owner replacements are very common in all four species. However, a large percentage of the nests were abandoned by the female owners before owner change. Only a part of all the nests were trully usurped on the nesting site. The true usurpations thus represent rather minor part of observed nest owner replacement situations. The bees surprisingly often abandon their nests and found the new ones. The frequent contacts of the females on a nesting site occur as a result of common nest owner replacements. High tolerance of bees to each other together with tolerance of usurpations and low level of aggression may thus represent one of the possible ways towards communality and other types of social behaviour. In the second part of the thesis I focus on the possibilities of food marking in bees. Effectivity of sugar and pollen utilization are not yet fully understood in...

1 Abstract This diploma thesis deals with legal issues related to beekeeping and bee protection. The beekeeping legislation in Czech Republic is not regulated in just one comprehensive legal act but consists of many partial provisions that can be found in a large number of various acts and decrees. The fragmentation of the beekeeping legislation is its biggest shortcoming and causes, that beekeepers are unable to get proper knowledge of the issue. It is necessary to ensure that all beekeepers are informed as best as possible of their rights and obligations, so that the legislation is followed in practice. Reader of this thesis is being presented with a detailed legal analysis of the most important provisions concerning beekeeping which is also here and there accompanied with ideas de lege ferenda. This diploma thesis is divided into five parts, which are further subdivided into chapters and also into subchapters and lower levels if needed. The first part is divided into two chapters and discusses the history of beekeeping and the beginnings of the development of its legal regulation in the world and in the territory of the Czech state. The second part of this diploma thesis is subdivided into three chapters and deals with the considerations about the possible future extension of the legal regulation which...