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Caracteriza??o do metabolismo aer?bio e anaer?bio de Biomphalaria glabrata (Say, 1818) experimentalmente infectada por Echinostoma paraensei (Lie e Basch, 1967) / Metabolism characterization Aerobic and Anaerobic Biomphalaria glabrata Say, 1818 (Pulmonata, Planorbidae) Experimentally Infected With Different Doses of Miracidiais Echinostoma paraensei Lie and Basch, 1967

Alves, Victor Menezes Tunholi 14 October 2015 (has links)
Submitted by Celso Magalhaes (celsomagalhaes@ufrrj.br) on 2017-05-31T11:58:11Z No. of bitstreams: 1 2015 - Victor Menezes Tunholi Alves.pdf: 1068543 bytes, checksum: f36d6e4d78a70514a148e30e4249805b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-31T11:58:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015 - Victor Menezes Tunholi Alves.pdf: 1068543 bytes, checksum: f36d6e4d78a70514a148e30e4249805b (MD5) Previous issue date: 2015-10-14 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / Parasites belonging to the Echinostoma genus are characterized by having a complex biological cycle, with two intermediate hosts and a final habitat restricted to the intestinal lumen of the definitive hosts. These hosts include aquatic birds, mammals (including humans) and occasionally some reptile and fish species. Their first intermediate hosts are freshwater snails, into which the miracidia actively penetrate for development of the next three stages (sporocysts, rediae and cercariae). Freshwater crustaceans, amphibians, fish and snails act as the second intermediate hosts, enabling the formation of metacercariae, the infective larval stage to the definitive host. In this work, Biomphalaria glabrata specimens were experimentally infected with different doses (5 or 50) of E. paraensei miracidia. The snails were dissected one, two, three and four weeks after infection to collect the hemolymph, shells and tissues (gonad-digestive gland complex- GDG). In the hemolymph were quantified glucose concentrations and carboxylic acids (succinic, pyruvic, lactic and oxalic acids), as well as the activity of lactate dehydrogenase (LDH). The storage of tissues was measured glycogen content and oxygen consumption (O2). Changes were observed in glycemia of the snails, in both situations parasitism, with significant increase in glucose levels observed from the third week post infection when compared to the control group. Changes have also been described in relation to the activity of lactate dehydrogenase and are characterized by the increase of its activity in the later periods of infection. In parallel, there was a decrease in glycogen content in storage tissues, being such greater reduction in the digestive gland (larval development site) in comparison to the cephalopedal mass. In addition, the infection by both miracidiais doses resulted in increased levels of oxalic acid and lactic acid, as well as a decline in the content of pyruvic and succinic acids in B. glabrata. The prepatent infection by this equinostomatideo still significantly suppressed the phosphorylation state (state 3 respiration) and basal oxygen consumption (state 1 and 2) in B. glabrata, demonstrating that infection by E. paraensei decreases the capacity of the intermediate host in performing aerobic oxidative reactions. These results demonstrate the reduction in oxidative decarboxylation rate of the reactions that are part of the tricarboxylic acid cycle and acceleration of the process of anaerobic degradation of carbohydrates in the infected snails by lactic acid fermentation, it is essential to ensure the obtaining of energy and the success of the infection. Thus, the results observed in this study demonstrate that infection with five or 50 miracidia of E. paraensei caused significant metabolic changes in B. glabrata snails being exposed to the largest load miracidial showed the greatest damage, featuring a dose-dependent response / Parasitos pertencentes ao g?nero Echinostoma caracterizam por apresentar um ciclo biol?gico complexo, com dois hospedeiros intermedi?rios e s?tio final de infec??o restrito ao l?men intestinal de seus hospedeiros definitivos. Estes hospedeiros s?o representados principalmente por aves aqu?ticas e semi-aqu?ticas, mam?feros, incluindo o homem, e ocasionalmente algumas esp?cies de r?pteis e peixes. Possuem como primeiros hospedeiros intermedi?rios moluscos l?mnicos, onde os mirac?dios penetram ativamente e desenvolvem at? os est?gios de esporocistos, r?dias e cerc?rias. Por sua vez, crust?ceos, anf?bios, peixes e moluscos l?mnicos atuam como segundos hospedeiros intermedi?rios onde ocorre a forma??o de metacerc?rias, est?gios infectantes ao hospedeiro definitivo. Neste estudo, Biomphalaria glabrata foi experimentalmente infectada com diferentes doses miracidiais (5 ou 50) de E. paraensei. Os moluscos foram dissecados ap?s uma, duas, tr?s e quatro semanas de infec??o para a coleta da hemolinfa e tecidos (complexo g?nada-gl?ndula digestiva- GGD e massa cefalopediosa). Na hemolinfa foram quantificadas as concentra??es de glicose e de ?cidos carbox?licos (succ?nico, pir?vico, l?tico e ox?lico), bem como a atividade da lactato desidrogenase (LDH). Nos tecidos de estocagem foram mensurados os conte?dos de glicog?nio e consumo de oxig?nio (O2). Altera??es foram observadas na glicemia dos moluscos, em ambas as situa??es de parasitismo, com significativo aumento dos n?veis de glicose verificado a partir da terceira semana de infec??o quando comparado ao grupo controle. Mudan?as foram tamb?m descritas em rela??o ? atividade da lactato desidrogenase, sendo caracterizadas pelo aumento de sua atividade nos per?odos mais tardios da infec??o. Em paralelo, verificou-se um decr?scimo nos conte?dos de glicog?nio em tecidos de armazenamento, sendo tal redu??o maior na gl?ndula digestiva (s?tio de desenvolvimento larval), em compara??o ? massa cefalopediosa. A infec??o por ambas as doses miracidiais ainda resultou em um aumento dos n?veis de ?cidos ox?lico e l?tico, bem como em um decl?nio nos conte?dos de ?cidos pir?vico e succ?nico em B. glabrata. Significativa supress?o no estado fosforilativo (estado 3 respirat?rio) e no consumo basal de oxig?nio (estado 1 e 2) em B. glabrata infectada por E. paraensei foi demonstrada, indicando que a infec??o por este equinostomat?deo diminui a capacidade do hospedeiro intermedi?rio em realizar rea??es oxidativas aer?bias. Varia??es relevantes relacionadas ao estado mitocondrial desacoplado (estado 3u) de B. glabrata infectada por tal tremat?deo foram tamb?m descritas. Tais resultados demonstram redu??o na taxa de descarboxila??o oxidativa das rea??es que integram o ciclo do ?cido tricarbox?lico e acelera??o do processo de degrada??o anaer?bia de carboidratos nos moluscos infectados, atrav?s da fermenta??o l?tica, essencial para garantir a obten??o de energia e o sucesso da infec??o. Assim, os resultados observados neste estudo demonstram que a infec??o com cinco ou 50 mirac?dios de E. paraensei provocou consider?veis altera??es metab?licas em B. glabrata, sendo que os moluscos expostos a maior carga miracidial apresentaram os maiores danos, caracterizando uma resposta dosedependente.
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Potential use of the digenean parasite, Plagiorchis elegans, as a biological control agent of Biomphalaria glabrata (Pulmonata:Planorbidae) and Schistosoma mansoni (Digenea:Schistosomatidae)

Daoust, Simon, 1983- January 2008 (has links)
No description available.
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Electron microscopic, serological, and cellular studies of intramolluscan larval trematode antagonism

Page, Michael Richard. Huizinga, Harry W. January 1977 (has links)
Thesis (Ph. D.)--Illinois State University, 1977. / Title from title page screen, viewed Jan. 4, 2005. Dissertation Committee: Harry W. Huizinga, H. Hetzel, M. Nadakavukaren, A. Richardson, E. Willis. Includes bibliographical references (leaves 181-195) and abstract. Also available in print.
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Efeitos tóxicos dos extratos aquosos e hidralcoólicos de Indigofera Suffruticosa sobre Biomphalaria glabrata, cercarias de Schistosoma mansoni e larvas de Artemia salina

Souza Figueiredo, Eliane 31 January 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T15:48:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3121_1.pdf: 1673777 bytes, checksum: e31f5b23b553805da8e2f0c57e1a59e5 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Indigofera suffruticosa Mill é um arbusto da família Fabaceae conhecido popularmente como anil. É uma planta distribuída em regiões tropicais e subtropicais, sendo utilizada na medicina popular contra diversos problemas de saúde. Este trabalho avalia a atividade tóxica de extrato aquoso e hidroalcoólico das folhas da I. suffruticosa sobre caramujos adultos e na fase embrionária de B. glabrata expostos as concentrações de 0,125, 250, 500, 750 e 1000 ppm por 96 horas. Outros aspectos observados foram à atividade cercaricida dos extratos após 120 minutos (min) de exposição nas mesmas concentrações acima citadas e a análise da atividade artemicida dos extratos após 24 horas de exposição, nas mesmas concentrações acima citadas. Após o término do período de exposição observou-se que o extrato aquoso na concentração de 500 ppm provocou redução na taxa de fecundidade e fertilidade dos caramujos adultos para 53,9% e 49,6 %, respectivamente, e o extrato hidroalcoólico, para 44,7% e 40,4%, respectivamente. O estudo da embriotoxicidade mostrou que na concentração de 250 ppm do extrato aquoso apresentou 26,0% de inviabilidade enquanto que o hidroalcoólico apresentou 53,0%. A atividade cercaricida do extrato aquoso apresentou forte toxicidade na concentração de 250 ppm e após 120 mim de exposição, enquanto o extrato hidroalcoólico apresentou forte toxicidade na concentração de 125 ppm e após 120 mim. Em relação à atividade artemicida o extrato aquoso na concentração de 250 ppm provocou a morte de 36,3% das larvas, enquanto o hidroalcoólico, 64,0%. O estudo mostrou que os extratos aquosos e hidroalcoólicos das folhas da I . suffruticosa reduz as taxas de fecundidade e fertilidade, além de possuir propriedades embriotóxicas e cercaricida, indicando uma possível utilização desse material biodegradável ou uma fração dela derivada em programas de controle da Esquistossomose mansônica
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Caracterização dos hemócitos de Biomphalaria glabrata e Biomphalaria straminea sadios e infectados por Schistosoma mansoni

CAVALCANTI, Marília Gabriela dos Santos 31 January 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T18:29:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5629_1.pdf: 20032687 bytes, checksum: d731e88ee3e7c7f4ba8501e372528ee0 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O ciclo do Schistosoma mansoni depende da existência de hospedeiros intermediários que no Brasil são caramujos do gênero Biomphalaria. Em muitas espécies de invertebrados sabe-se que os hemócitos e fatores humorais da hemolinfa são responsáveis pela defesa imunológica contra patógenos, que efetivamente podem impedir ou limitar uma espécie de funcionar como vetor competente. Sabendo-se que o B. glabrata demonstra maior suscetibilidade ao S. mansoni em relação ao B. straminea, o presente estudo teve como objetivo elucidar as bases celulares do sistema de defesa dos caramujos das espécies B. glabrata e B. straminea. Para a avaliação morfológica dos hemócitos nas condições sadios e infectados pelos miracídios de S. mansoni, foi utilizada a microscopia óptica, de interferência diferencial e microscopia eletrônica de transmissão. Na caracterização dos hemócitos através de lectinas (UEA-1, DBA, LCA, BS-I e WGA) conjugadas a FITC, foi utilizado o microscópio confocal a laser. Foi realizado também a avaliação cinética diferencial das células nas condições sadios e infectados pelos miracídios de S. mansoni, utilizando hemocitômetro nos tempos de 2h, 15 e 30d. Neste trabalho foi identificado cinco tipos celulares na hemolinfa das duas espécies: células blásticas, granulócitos e hialinócitos do tipo I, II e III. As células blásticas se mostram esféricas com núcleo grande localizado centralmente, em B. straminea infectados estas células não apresentaram muitas modificações morfológicas, porém em B. glabrata este tipo celular passou a apresentar alterações no formato da célula. Os granulócitos apresentaram-se com vários grânulos eletrodensos. Em B. glabrata infectados estas células não se mostraram com alterações morfológicas, porém, em B. straminea foi possível identificar liberação de grânulos. O hialinócito do tipo I foi o tipo celular mais encontrado na hemolinfa de ambas as espécies, tais células são polimórficas e apresentam muitas projeções citoplasmáticas. Estas células em caramujos infectados apresentaram-se com maior adesão celular e maior quantidade de grânulos de glicogênio. Nos hialinócitos do tipo I em B. straminea, não identificamos adesão celular, e assim como B. glabrata, passaram a apresentar mais projeções citoplasmáticas após infecção. Os hialinócitos do tipo II e III são células ovais e geralmente apresentam coloração homogênea. Estes tipos celulares apresentaram poucas alterações morfológicas após a infecção nas duas espécies estudadas. Em relação à marcação com lectinas foi evidenciado um aumento na marcação após a infecção em quase todos os hemócitos de B. glabrata e B. straminea. Na avaliação da dinâmica hemocitária em B. glabrata foram identificadas variações significantes em três dos cinco tipos celulares: células blásticas, granulócito e hialinócito I. Os mesmos resultados foram encontrados em B. straminea. Neste trabalho foi realizada a caracterização e padronização dos hemócitos de B. glabrata e B. straminea, sadios e infectados com miracídios de S. mansoni. Desta forma, o presente estudo possibilitou um melhor entendimento sobre o papel dessas células no processo de defesa contra o S. mansoni e sugere uma relação da resposta imune celular na suscetibilidade ou não ao Trematóide
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Detecção de Micronúcleo em Hemócitos de Biomphalaria glabrata exposto a Radiação Gama de 60Co

SILVA, Luanna Ribeiro Santos 31 January 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T23:13:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2675_1.pdf: 5125867 bytes, checksum: 3af3a0a0031b7c44221c8e7af794b638 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As radiações ionizantes podem induzir mutações gênicas, aberrações cromossômicas e morte celular. Recentemente, começou a haver grande empenho no desenvolvimento de técnicas que auxiliem na compreensão desses possíveis danos biológicos surgidos após exposições dos organismos a certas doses de radiação ionizante. Dentre estas técnicas, o teste do micronúcleo tem se mostrado um ótimo biomarcador de efeitos de genotoxicidade do dano ao DNA. Esta técnica também pode ser utilizada para detecção de genotoxicidade ambiental, na biomonitoração. O molusco Biomphalaria glabrata, devido às suas características biológicas e ambientais, tem se apresentado como um ótimo modelo experimental, possibilitando a avaliação de efeitos produzidos por agentes físicos e químicos. Diante disso, o presente trabalho visou detectar os efeitos genotóxicos da radiação gama de 60Co em hemócitos de Biomphalaria glabrata, por meio do teste do micronúcleo, bem como estabelecer este ensaio como um novo biomarcador ambiental. Os moluscos foram divididos em grupos e submetidos a dose de 0 (controle), 25, 35, 45 e 55 Gy de radiação gama. Após 48 horas da irradiação, a hemolinfa dos moluscos foi coletada e analisada em microscópios óptico e de fluorescência. As lâminas foram coradas com Giemsa e hoechst 33258, posteriormente foram analisadas quanto ao número de hemócitos, alterações nucleares e frequência de micronúcleos. A análise estatística foi realizada por meio do Teste do c2, ANOVA e teste de Tukey, com p<0,05. Os resultados obtidos demonstram que moluscos adultos de B. glabrata se mostraram sensíveis aos efeitos da radiação gama de 60Co. Na dose 35 Gy apresentaram um número menor de hemócitos, enquanto que os expostos a 55 Gy uma maior quantidade de hemócitos. Os hemócitos dos moluscos irradiados apresentaram alterações morfológicas e aterações celulares nas doses de 35, 45 e 55 Gy, sendo a dose de 55 Gy a mais radiotóxica. A freqüência de micronúcleos não foi dose-dependente, porém apresentou diferença significativa entre o grupo controle e os grupos irradiados. Pode-se concluir que a análise morfológica e a frequência de micronúcleo de hemócitos de Biomphalaria glabrata são parâmetro
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Avaliação do efeito radiomodificador de substâncias liquênicas

SANTOS, Felipe Tiago José dos 31 January 2013 (has links)
Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-03-03T13:27:59Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Felipe Tiago José dos Santos.pdf: 1035954 bytes, checksum: ae34d41fab1104d003ae261da82c351f (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-03T13:27:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Felipe Tiago José dos Santos.pdf: 1035954 bytes, checksum: ae34d41fab1104d003ae261da82c351f (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013 / Os efeitos danosos da radiação podem ser minimizados por substâncias radioprotetoras, ou podem ser potencializados por substâncias radiossensibilizadoras sendo estas substâncias denominadas radiomodificadores. O estudo de substâncias com estes potenciais pode conduzir a entre outras possibilidades, oferecer melhor proteção a trabalhadores ocupacionalmente ou acidentalmente expostos às radiações ionizantes, bem como na utilização terapêutica (quimiorradioterapia) em pacientes. Os liquens e seus metabólitos secundários têm apresentado atividade que estão relacionadas com a capacidade radiomodificadora. Portanto, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a ação radiomodificadora do ácido barbático, ácido úsnico e atranorina extraídos dos liquens Cladonia salzmanni Nyl, Cladonia substellata, e Cladonia kalbii. A extração e purificação das substâncias liquenicas foi realizada no Laboratório de Produtos Naturais, Departamento de Bioquímica, UFPE. Foi realizado teste de toxicidade aguda com embriões de Biomphalaria glabrata no estágio de blástula afim de, determinar a toxicidade das substâncias liquênicas não irradiadas e irradiadas, bem como determinar a CL50 das substâncias liquênicas não irradiadas. A cromatografia em camada delgada foi realizada para avaliar estabilidade das substâncias liquênicas submetidas à radiação gama, na dose de 4 Gy. Para avaliar a atividade antioxidante foi realizado o ensaio utilizando o radical DPPH. Posteriormente foi estimada a capacidade radiomodificadora das substâncias por meio da analise da toxicidade aguda, utilizando embriões de B. glabrata divididos nos seguintes grupos: Grupo controle, mantidos com água filtrada; Grupo controleirradiado: primeiramente irradiados e depois mantidos com água; Grupo substância liquênica (1) onde os embriões foram primeiramente expostos as substâncias liquênicas em seguida submetidos a irradiação; e Grupo substância liquênica (2) onde os embriões foram submetidos a irradiação e posteriormente expostos as substâncias liquênica. Como resultado, foi obtido a CL50 do ácido barbático de 242,7 μg/mL; do ácido úsnico igual a 1,3 μg/mL; a atranorina não apresentou toxicidade para o modelo experimental utilizado. As substâncias liquênicas irradiadas não apresentaram alteração na quantidade de embriões inviáveis quando comparado com as substâncias não irradiadas. As substâncias analisadas por meio do ensaio com o radical DPPH, não apresentaram atividade antioxidante. A avaliação da capacidade radiomodificadora das substâncias liquênicas demonstrou que a irradiação aumentou a quantidade de embriões inviáveis quando comparado com o grupo controle. Adicionalmente, foi observado que os embriões expostos ao ácido barbático (100,0 μg/mL) e ao ácido úsnico (0,6 μg/mL) antes da irradiação apresentaram uma quantidade de embriões inviáveis, maior do que o grupo controle irradiado. Os resultados sugerem que o ácido barbático e o ácido úsnico tornaram as células mais sensíveis aos efeitos danosos da radiação, ou seja, apresentaram ação radiossensibilizante.
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Functional analysis of lipopolysaccharide binding proteins/Bactericidal permeability increasing proteins in immune responses of the freshwater snail, Biomphalaria glabrata / Caractérisation fonctionnelle des LBP/BPls (Lipopolysaccharide binding proteins/Bactericidal permeability increasing proteins) dans la réponse immunitaire de Biomphalaria glabrata

Baron, Olga 28 June 2012 (has links)
Les LBP/BPIs sont des protéines importantes de la réponse antimicrobienne des mammifères, encore mal caractérisées chez les invertébrés. L'objectif de ce projet était d'élucider le rôle des LBP/BPIs dans la réponse immunitaire du gastéropode B. glabrata. Nous avons montré que l'une des LBP/BPI (BgLBP/BPI1) était une protéine majeure de la glande albumène et des masses d'oeufs et possédait les activités attendues des BPIs telle que la capacité de perméabilisation des bactéries.De plus, nous avons découvert une nouvelle activité biocide (anti-oomycète) inconnue jusqu'alors chez les LBP/BPI, et démontré que BgLBP/BPI1 influence à la fois la production d'oeufs et leur protection contre les infections à oomycètes. Nous avons ensuite examiné la diversité et l'évolution des BgLBP/BPIs et montré qu'au moins 5 LBP/BPIs, regroupées en 3 clades phylogénétiques, étaient exprimées chez B. glabrata. Une étude de l'expression de représentants de ces 3 clades a montré qu'ils étaient exprimés dans différents tissus, appuyant l'hypothèse de l'acquisition de spécificités fonctionnelles par les membres de cette famille multigénique. / LBP/BPIs are important immune factors of the mammalian antimicrobial response,poorly characterized in invertebrates. The aim of this work was to elucidate the role of LBP/BPIs in the immune response of the fresh-water snail B. glabrata. Firstly, we showed that one member, BgLBP/BPI1, was highly abundant in the albumen gland and the egg masses. Importantly, in addition to the expected activities of BPIs, such as the induction of bacterial permeability, we discovered a novel biocidal (antioomycete) activity that was unsuspected so far. We demonstrated that BgLBP/BPI1 is a major fitness-related protein, acting on both egg production and offspring protection against oomycete infections. Then, we investigated the sequence diversity and evolution of this LBP/BPI protein family and showed that at least 5 LBP/BPIs were expressed in B. glabrata, belonging to three distinct phylogenetic clades. Expression studies of representatives of the three clades showed that they are expressed in different tissues, differently regulated, and therefore supported the hypothesis of the acquisition of functional specificities by the members of this multigenic family.
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Toxidade e atividade moluscicida do extrato etéreo, da atranorina e do ácido praesorediósico de Parmotrema praesorediosum (Nyl.) Hale

CARVALHO, Alexsandra Nascimento de 23 February 2015 (has links)
Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-05-09T12:39:15Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) 2015 CARVALHO BC2.pdf: 1647689 bytes, checksum: 2fd318c1edae701b8c0b19a7e19ebd35 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-09T12:39:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) 2015 CARVALHO BC2.pdf: 1647689 bytes, checksum: 2fd318c1edae701b8c0b19a7e19ebd35 (MD5) Previous issue date: 2015-02-23 / CNPq / A esquistossomose é uma doença endêmica distribuída em regiões tropicais e subtropicais, que pode ser controlada através do molusco Biomphalaria glabrata. O objetivo desde trabalho foi avaliar as atividades embriotóxicas, moluscicida e artemicida do extrato etéreo, da atranorina e do ácido praesorediósico, ambos purificados de Parmotrema praesorediosum. A partir do extrato obtido de P. praesorediosum com éter dietílico foram realizados isolamento e purificação do ácido praesorediósico e da atranorina. O extrato etéreo e as substâncias purificadas foram analisadas através de CCD, CLAE, RMN-H1 e RMN-C13. Para a realização dos bioensaios, todas as substâncias analisadas foram dissolvidas em DMSO (0,25%) e expostas por 24 h a 25˚C e foram utilizados grupos controle negativos (água e DMSO a 0,25%) e positivos (niclosamida 20 μg/mL e carbonato cúprico 50 μg/mL). Para os ensaios de embriotoxicidade com B. glabrata utilizou-se as seguintes concentrações para o extrato etéreo 1000, 500, 300, 250, 150, 100, 50 e 25 μg/mL, a atranorina 1000, 500 e 250 μg/mL e o ácido praesorediósico 500, 250 e 125 μg/mL. Após a exposição, os embriões foram observados por 8 dias consecutivos e classificados como inviáveis (embriões mortos e malformados) e viáveis (embriões eclodidos). Os experimentos foram realizados em triplicata com 100 embriões por grupo. Para os testes moluscicidas foram selecionados 150 animais, que foram colocados em recipientes individuais com água filtrada para verificar a maturidade sexual e, em seguida foram separados 120 animais sexualmente maduros. Os moluscos (n=5) foram separados e submetidos ao extrato etéreo 200, 150, 100, 50 e 25 μg/mL e a atranorina purificada 500, 250 e 125 μg/mL, e os testes foram realizados em triplicata para cada concentração e avaliados durante 8 dias. Para o ensaio de toxidade ambiental com A. salina utilizou-se o extrato etéreo 1000, 500, 250, 100, 50 e 25 μg/mL, a atranorina purificada 1000, 500, 250, 125 e 62,5 μg/mL e o ácido praesorediósico purificado 200, 125, 62,5 μg/mL incubados em água do mar. Os testes foram realizados em quadruplicata com 5mL da solução com dez larvas por tubo de ensaio. Os grupos foram analisados quanto à frequência de letalidade e sobrevivência. Os testes estatísticos utilizados foram o ANOVA e o pós-teste Newman- keuls com p < 0,05. A embriotoxicidade do extrato etéreo e do ácido praesorediósico purificado foram comprovados, pois as substâncias apresentaram valores de CL50 de 363,07 μg/mL e 213,79 μg/mL, respectivamente. A CL50 estimada para os moluscos tratados com o extrato etéreo foi de 102,32 μg/mL demonstrando ser bastante eficiente no combate ao hospedeiro intermediário. A atranorina purificada não apresentou toxicidade sobre embriões e moluscos. Os ensaios demonstraram que o extrato etéreo, a atranorina e o ácido praesorediósico, ambos purificados, apresentaram baixa toxicidade ao microcrustáceo, indicando que estas substâncias oferecem baixo risco ao meio ambiente. A toxicidade do extrato etéreo e do ácido praesorediósico purificado do líquen P. praesorediosum nas diferentes concentrações testadas causou significativa letalidade sobre embriões e moluscos de B. glabrata, demonstrando ser bastante promissor visto que pode ser considerado como potente agente moluscicida. / Schistosomiasis is endemic distributed in tropical and subtropical regions, which can be controlled by the snails Biomphalaria glabrata. The purpose since work was to evaluate the embryotoxic activities, molluscicide and artemicida ether extract, the atranorin and praesorediosic acid, both of purified Parmotrema praesorediosum. From the extract obtained from P. praesorediosum with diethyl ether was carried out isolation and purification of praesorediosic acid and atranorin. The ether extract and the purified compounds were analyzed by CCD, HPLC, RMN-H1 and RMN-C13. To achieve the bioassays, all analyzed substances were dissolved in DMSO (0.25%) and exposed for 24 hours at 25˚C and used negative control (water and DMSO 0,25%) and positive (niclosamide 20 μg/mL cupric carbonate and 50 μg/mL). For embryotoxicity tests with B. glabrata was used for the following concentrations ether extract 1000, 500, 300, 250, 150, 100, 50 and 25 μg/mL, the atranorin 1000, 500 and 250 μg/mL and acid praesorediosic 500, 250 and 125 μg/mL. After exposure, the embryos were observed for 8 consecutive days and are classified as non-viable (dead embryos and malformed) and viable (hatched embryos). The experiments were performed in triplicate with 100 embryos per group. To test molluscicides 150 animals were selected, which were placed in individual containers with filtered water to check sexual maturity, and then were separated 120 sexually mature animals. The snails (n= 5) were separated and subjected to ether extract 200, 150, 100, 50 and 25 μg/mL and atranorin purified 500, 250 and 125 μg/mL, and tests were performed in triplicate for each concentration and evaluated for 8 days. For environmental toxicity test with A. salina used the ether extract 1000, 500, 250, 100, 50 and 25 μg/mL, the purified atranorin 1000, 500, 250, 125 and 62.5 μg/mL and purified acid praesorediosic 200, 125, 62.5 μg/mL incubated in sea water. The tests were performed in quadruplicate with 5mL of the solution with ten larvae per test tube. The groups were analyzed for frequency and lethality survival. Statistical analyzes were performed using ANOVA and the Newman-Keuls post-test with p<0.05. Embryotoxicity ether extract and the purified acid praesorediosic been proven, as the substances showed CL50 values of 363.07 μg/mL to 213.79 μg/mL, respectively. The CL50 estimated for snails treated with ether extract was 102.32 μg/mL demonstrating to be quite efficient in combating intermediate host. The atranorin purified showed no toxicity to embryos and snails. The tests showed that the ether extract, the atranorin and praesorediosic acid, both purified, showed low toxicity microcrustacean, indicating that these substances offer low risk to the environment. The toxicity of ether extract and the purified acid praesorediosic lichen P. praesorediosum in different concentrations tested caused significant mortality of embryos and snails B. glabrata, proving to be very promising as it can be considered as potent molluscicidal agent.
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AlteraÃÃes celulares e variaÃÃes comportamentais de caramujos do gÃnero Biomphalaria hospedeiros intermediÃrios do Schistosoma mansoni / Cellular alterations and behaviour variations of snails of the Biomphalaria intermediate hosts of the Schistosoma mansoni

JoÃo Rodrigues Coelho 01 March 2004 (has links)
FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / A esquistossomose à uma doenÃa que no Brasil ainda à um sÃrio problema de saÃde pÃblica. AlteraÃÃes ambientais, comportamentais e imunolÃgicas ocorridas nos seus hospedeiros intermediÃrios podem predizer o sucesso ou nÃo de uma infecÃÃo. As alteraÃÃes ocorridas durante o desenvolvimento de uma infecÃÃo envolvem fatores internos e externos ao molusco. Dentre os internos as alteraÃÃes celulares (hemÃcitos) e humorais (soro) tÃm sido bastante estudadas. Em relaÃÃo aos externos a temperatura foi um dos fatores por nÃs escolhido para se avaliar a sua importÃncia na relaÃÃo molusco-parasito, principalmente porque a quase totalidade dos trabalhos abordando este assunto data da dÃcada de 50. Este trabalho teve como objetivo estudar a resistÃncia ou susceptibilidade de moluscos do gÃnero Biomphalaria frente à infecÃÃo pelo S. mansoni diante de fatores endÃgenos e exÃgenos. HemÃcitos de B. glabrata foram obtidos conforme tÃcnica preconizada e avaliados quanto a sua capacidade fagocitÃria, utilizando a tÃcnica de reduÃÃo do MTT, um sal de formazan, sendo seus valores quantificados por absorbÃncia a 570 nm. Caramujos B. glabrata foram tambÃm infectados nas temperaturas de 15oC, 20oC e 30oC e analisados quanto à eliminaÃÃo de cercarias aos 30 e 60 dias pÃs-infecÃÃo (DPI). Em outro experimento, um grupo de B. tenagophila (CF)- susceptÃvel, recebeu soro de B. tenagophila (Taim) - resistente, sendo posteriormente infectados pelo S. mansoni e observados quanto à alteraÃÃo do nÃvel de resistÃncia. Nossos resultados mostram que o comportamento dos hemÃcitos quanto a sua atividade fagocitÃria apresentou diferenÃa significativa entre os grupos B. glabrata nÃo infectado no seu estado basal comparado com o grupo nÃo infectado e resfriado, como tambÃm os mesmos grupos quando ativados pelo zymozan. Um outro dado obtido mostra que a diminuiÃÃo da temperatura influencia no desenvolvimento da infecÃÃo com diferenÃas significativas (p<0,05) entre 15oC e 30oC. Observamos tambÃm que a transferÃncia de soro conferiu um aumento no nÃmero de caramujos resistentes originalmente susceptÃveis em torno de 50% em comparaÃÃo ao grupo nÃo imunizado (p<0.05). A extrapolaÃÃo destes dados pode levar a um melhor entendimento da esquistossomose sobre o ponto de vista epidemiolÃgico. Os resultados obtidos nos permitem concluir que a atividade fagocitÃria dos hemÃcitos de B. glabrata à influenciada pela temperatura, e que esta influi diretamente na capacidade de infecÃÃo de B. glabrata pelo S. mansoni. Observamos tambÃm que a transferÃncia de soro de B. tenagophila resistente para B. tenagophila susceptÃvel, aumentou a resistÃncia desta Ãltima ao Schistosoma mansoni. / Schistosomiasis is one illnesses that in Brazil still is a serious problem of public health. Ambient, mannering and immunological alterations occured in its intermediate hosts can predict the success or not of one infection. The alterations that occured during the development of an infection involve internal and external factors on the molusc. Among the interns the cellular alterations (hemocytes) and humoral (serum) have been sufficiently studied. In relation to external the temperature was one of the factors chosen for us to evaluate its importance in the relation snail-parasite, mainly because almost the totality of the works approaching this subject dates of the fifty decade. This work had as objective study the resistance and susceptibility of snails of the genus Biomphalaria ahead of the S. Mansoni infection in front of endogenous and exogens factors. Hemocytes of B. glabrata had been gotten according to praised technique and evaluated about its fagocitary capacity, using the technique of reduction of the MTT, being its values quantified for absorbancy 570mm. B. glabrata snailswere also infected in the temperatures of 15oC, 20oC and 30oC and analyzed about the elimination of cercaries to the 30 and 60 days after-infection (DPI). In another experiment, a group of B. tenagophila (CF) - susceptible, received serum from B. tenagophila (Taim) - resistant, being later infected by the S. mansoni and observed about the alteration of the resistance level. Our results show that the behavior of the hemocytes about its fagocitary activity presented significant values between B. glabrata groups not infected in its compared basal state with the not infected and cooled group, as also the same groups when activated by zimozan. Another gotten data shows that the reduction of the temperature influences in the infection development with significant differences (p<0,05) between 15oC and 30oC. We also observe that the serum transference conferred an increase in the number of resistant snails originally susceptible around 50% in comparison to the group not immunized (p<0.05). The extrapolation of these data can take to one better understanding of schistosomiasis on the epidemiologist point of view. The results gotten allow us to conclude that the fagocitary activity of the hemocytes of B. glabrata is influenced by the temperature, as also that the transference of serum of B. tenagophila resistant for B. tenagophila susceptible, increased the resistance of this last one. Finally, we can also affirm that the temperature influences directly in the capacity of infection of B. glabrata by the S. mansoni.

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