Perante a importância do Programa Nacional de Controle Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT) para as cadeias produtivas de carne e leite, para os consumidores de produtos de origem animal, para a imagem que o país projeta nos mercados mundiais e tendo em vista os altos custos inerentes aos procedimentos necessários para se atingir os objetivos do programa, faz-se necessária à realização de estudos que visem elucidar a situação epidemiológica da brucelose no plantel bovino nacional, incluindo-se o rebanho rondoniense, objetivando-se a escolha de condutas e estratégias adequadas e criação de um mecanismo racional de verificação da efetividade das ações implementadas em cada região produtora. Como conseqüência, foi composta uma parceria envolvendo o Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) e o Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Saúde Animal da FMVZ-USP para promover a condução de estudos soroepidemiológicos nos Estados. O Estado de Rondônia foi dividido em três regiões homogêneas (circuitos produtores de bovinos), as quais foram caracterizadas epidemiologicamente e onde foram realizados estudos de prevalência. Os resultados indicaram uma prevalência aparente de 34,57% [31,49; 37,65], sendo a prevalência aparente por circuito: circuito 1, 41,48% [35,95; 47,18], no circuito 2, 31,70% [26,52; 37,24] e no circuito 3, 31,61% [26,47; 37,11].A prevalência de fêmeas com idade igual ou superior a 24 meses soropositivas no Estado foi de 6,22% [4,88-7,56]. A prevalência de fêmeas com idade igual ou superior a 24 meses soropositivas por circuito foi: circuito 1 8,33% [5,90-10,76%], circuito 2, 5,95% [4,30-7,61%], circuito 3, 4,60% [2,54-6,65%]. A alta prevalência dos focos apresenta-se distribuída de maneira homogênea entre os circuitos. Os fatores de risco associados à condição de foco foram: histórico de aborto OR= 1,42 [1,04-1,95] e exploração de corte OR= 1,75 [1,30-2,38]. Faz-se importante ressaltar que o presente estudo é inédito para a Unidade Federativa e o conhecimento da situação inicial permitirá acompanhar o andamento do Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT) e julgar a necessidade de promover correções, evitando o desperdício de tempo e recursos. / Given the importance of the National Program for Control Eradication of Brucellosis and Tuberculosis (PNCEBT) for the production chains of meat and milk to consumers of products of animal origin, for the image that the country designs on world markets and in view of the high costs related to the procedures necessary to achieve the objectives of the program, it is necessary for studies designed to clarify the epidemiological situation of brucellosis in cattle national squad, including the herd Rondoniense, aiming to be the choice of pipelines and strategies creation of an appropriate and rational mechanism for verifying the effectiveness of actions implemented in each producing region. As a result, a partnership was formed involving the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply (MAPA) and the Department of Preventive Veterinary Medicine and Animal Health of FMVZ-USP.O State of Rondonia was divided into three homogeneous regions (circuit producers of cattle) which were characterized and where epidemiological studies have been performed prevalence. Os results indicated an apparent prevalence of 34,57% [31,49,- 37,65] and the prevalence of apparent circuit: circuit 1, 41,48% [35,95; -47,18] in circuit 2, 31,70% [26,52, -37,24] and the circuit 3, 31.61% [26.47, -37.11]. The prevalence of females aged more than 24 months seropositive in the state was 6,22% [4, 88-7, 56]. The prevalence of females aged more than 24 months was seropositive for circuit: circuit 1 8.33% [5,90-10,76%], circuit 2, 5,95% [4,30-7,61% ], circuit 3, 4,60% [2,54-6,65%]. The high prevalence of outbreaks appears to be distributed uniformly between the circuits. The risk factors associated with the condition of focus were: a history of abortion [OR = 1.42, (1,04-1,95)] and exploration of cutting [OR = 1.75, (1,30-2,38 ). It is important to note that this study is unprecedented for the Federal Unit and a knowledge of the initial situation will monitor the progress of the National Program for Control and Eradication of Brucellosis and Tuberculosis (PNCEBT) and judge the need to promote correction, avoiding the waste of time and resources.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-05-10T14:39:12Z No. of bitstreams: 1 andrealmeidasantosduch.pdf: 1562353 bytes, checksum: c681c7dd0bb3bc45cdb7bc06579fadb5 (MD5) / Rejected by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br), reason: Falta resumo em português on 2016-06-15T19:03:46Z (GMT) / Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-06-16T11:27:16Z No. of bitstreams: 1 andrealmeidasantosduch.pdf: 1562353 bytes, checksum: c681c7dd0bb3bc45cdb7bc06579fadb5 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-07-13T14:12:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 andrealmeidasantosduch.pdf: 1562353 bytes, checksum: c681c7dd0bb3bc45cdb7bc06579fadb5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T14:12:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 andrealmeidasantosduch.pdf: 1562353 bytes, checksum: c681c7dd0bb3bc45cdb7bc06579fadb5 (MD5) Previous issue date: 2015-05-29 / O objetivo desse trabalho foi estimar a prevalência de Brucella spp. em propriedades produtoras de Queijo Minas Artesanal da microrregião do Serro. Avaliou-se a presença do patógeno (presença de DNA) em queijos com períodos de maturação entre 4 e 8 dias, em temperatura ambiente, em queijarias cadastradas pelo Instituto Mineiro de Agropecuária (IMA), que possuem assim o aval do órgão para o comércio estadual. Os resultados das análises de Reação de Cadeia da Polimerase (PCR) mostraram que a prevalência da Brucella spp. em propriedades produtoras de Queijos Minas Artesanal do Serro foi de 30,9% (17/55). Os produtos de DNA amplificados por PCR, de amostras de queijos positivas na PCR foram sequenciados, para diferenciação entre bactérias de origem do campo ou vacinais. O sequenciamento demonstrou 100% de homologia com amostras do campo de Brucella spp. Todas as amostras de queijos foram provenientes de rebanhos testados e controlados por meio de exames sorológicos anuais para o monitoramento de Brucella spp., segundo determinação da legislação vigente, e apresentaram atestados de controles negativos de veterinários autônomos habilitados. A presença de DNA de Brucella spp. nos queijos sugere uma suposta deficiência no atual programa de controle do patógeno nesses rebanhos e que medidas de identificação e controle mais rigorosas deveriam ser adotadas como medida de segurança alimentar tanto em nível de rebanho, como na matéria prima e no produto acabado. / The main objective of the study is to estimate Brucella spp. prevalence in dairy herds involved in artisanal cheeses production in Serro’s micro-region, Minas Gerais state, named of “Queijo Minas Artesanal” (QMA). The pathogen's evidences (presence of DNA) in cheeses indexed by the “Instituto Mineiro de Agropecuária – IMA” with ripening periods at normal temperature between 4 and 8 days was evaluated. The results of the polymerase chain reaction (PCR) showed that the DNA of Brucella spp. prevalences in Serro's QMA was of 30.9% (17/55). The products of amplified DNA were sequenced for differentiating the bacteria’s source: if it came from the environment or from the vaccine. The DNA sequencing demonstrated 100% of homology with environment samples of Brucella ssp. All sample of cheeses were from cattletested and controlled through annual serological tests for the monitoring of brucelosis and presented negative control´s certificates delivered by autonomous veterinaries. The presence of DNA Brucella spp. in analyzed cheeses suggests a supposed deficiency of brazilian brucelosis control's program in monitoring this specific herds and that stronger measures of control should be adopted in the herds, ingredients and also in the final product as a food safety measure.

Made available in DSpace on 2016-05-02T13:55:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Adriana AgostiniBarbosa Dissertacao.pdf: 538302 bytes, checksum: c36d0c2df8e149074cc1842c43e8bb73 (MD5) Previous issue date: 2014-09-03 / Field strains of Brucella abortus, as well as the vaccines made of antigens from portions of S19 lipopolysaccharides (LPS), induce the same specific antibody, what makes very difficult to distinguish by means of serologic tests vaccinated animals and those infected. To avoid serologic interference with diagnosis it is used a vaccine that does not induce O-lipopolysaccharide (O-LPS) antibodies, that is, a rough strain that does not induce agglutinating antibodies. A Brucella abortus strain that does not induce agglutinating antibodies was isolated in the 80 s and, when used as a vaccine, offers protection without interfering with usual serologic methods, even in adult cows. Some works indicate that the rough strain is safe when inoculated in pregnant females, but only when reduced dose as used. The use of normal doses in pregnant cows is not recommended, what leads to potential failures of immunization programs. Literature information does not allow for stating if such vaccine at normal doses is safe when administrated to pregnant cows. The aim of this study was to evaluate the safety of a full dose vaccine made of a rough strain (1.0-3.4 × 1010 colony forming units - CFU) (Brucelina Rebeccin Vallée Brazil) in pregnant cows at different stages of pregnancy. The study was conducted in the state of Minas Gerais, Brazil. The experiment used 96 female bovines of mixed breed (Bos taurus x Bos indicus), nulliparous and multiparous, at three different pregnancy stages (initial stage: TI, middle stage: TC, and final stage: TF), randomly assigned to two groups (treated and control T or C), composed of 6 treatments with 16 animals. After vaccine administration, the animals were kept together on brachiaria grass pastures with mineral supplementation. The following variables werw compared using X2 test of the following variables: Percentage of calves born, percentage of live calves 60 days after delivery and number of seropositive cows and calves during such period. A 5% chance was deemed as significant. No differences were seen between treatments in each period or when periods were analyzed all together for the percentage of calves born alive and healthy (87.5; 87.5; 93.8; 93.8. 81.3 and 100%) or for the calves alive 60 days after delivery (75.0; 87.5; 87.5; 87.5. 81.3 and 93.8%) - p>0.05 for TI-C, TM-C, TF-C, TI-T, TM-T and TF-T, respectively). No animal was found to be seropositive in the usual detection tests (fast seroagglutination) at 60 days of age. It was concluded that the administration of vaccine Brucelina Rebeccin at any pregnancy stage is safe for bovine females, since it does not lead to fetal losses nor interferes with calves feasibility after birth. Additionally, the use of such product in the vaccination of pregnant cows does not lead to the formation of antibodies that can be detected by the usual diagnostic tests for brucellosis in calves and cows / Cepas de Brucella abortus de campo, assim como as vacinas feitas com antígenos de partes de células lisas S19 (LPS), induzem um mesmo anticorpo específico, que a torna difícil de distinguir animais vacinados e animais infectados. Para evitar a interferência sorológica no diagnóstico se usa uma vacina que não induz anticorpos contra o polissacárido O (O-LPS), isto é, uma cepa rugosa não indutora de anticorpos aglutinantes. A cepa de Brucella abortus não indutora de anticorpos aglutinantes foi isolada na década de 1980 e a vacinação com essa, confere proteção sem interferir nos métodos sorológicos usuais, mesmo em vacas adultas. Alguns trabalhos indicam que a cepa rugosa é segura quando inoculado em fêmeas gestantes, porém apenas na dose reduzida. A utilização em doses normais para vacas gestantes não é recomendada. Esta situação pode levar à possíveis falhas de imunização, por não ser possível vacinar esta categoria animal de relevante importância na disseminação da doença. As informações da literatura não permitem afirmar se esta vacina, em doses normais é segura para fêmeas bovinas gestantes. O objetivo deste estudo foi determinar a segurança da vacinação com a dose completa de uma vacina produzida com cepa rugosa (1,0-3,4 × 1010 unidades formadoras de colônias - UFC), Brucelina Rebeccin Vallée Brasil, em fêmeas gestantes nos diferentes estágios de gestação. O estudo foi desenvolvido no Estado de Minas Gerais, Brasil. Foram utilizadas 96 fêmeas bovinas mestiças (Bos taurus x Bos indicus) soronegativas ao teste do antígeno acidificado tamponado (AAT), em três períodos gestacionais (terço inicial: TI, médio: TM e final: TF), divididas aleatoriamente em dois grupos, tratado e controle (T ou C), constituindo 6 tratamentos com 16 animais. Após a aplicação da vacina foram mantidas juntas, em pastagem de capim brachiaria com suplementação mineral. Comparou-se os grupos utilizando o teste de X2 as seguintes variáveis: gestações à termo; bezerros vivos aos 60 dias pós-parto e a ocorrência de bezerros soropositivos neste período. Considerou-se como significância 5% de probabilidade. Não foram observadas diferenças entre tratamentos em cada um dos períodos, nem quando os períodos foram analisados em conjunto para gestações à termo (87,5; 87,5; 93,8; 93,8, 81,3 e 100%) nem para bezerros vivos aos 60 dias (75,0; 87,5; 87,5; 87,5, 81,3 e 93,8%) - p>0,05, para TI-C, TM-C, TF-C, TI-T, TM-T e TF-T, respectivamente). Não foi encontrado nenhum animal soropositivo aos testes usuais de detecção (soroaglutinação rápida) aos 60 dias de idade. Conclui-se que a aplicação da vacina Brucelina Rebeccin® em qualquer fase da gestação é segura para fêmeas bovinas, pois não provoca perdas da gestação ou interfere na viabilidade dos bezerros após o nascimento. Adicionalmente, a vacinação das fêmeas gestantes com o produto não leva à formação de anticorpos que possam ser detectados nos testes usuais de diagnóstico para brucelose.

Perante a importância do Programa Nacional de Controle Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT) para as cadeias produtivas de carne e leite, para os consumidores de produtos de origem animal, para a imagem que o país projeta nos mercados mundiais e tendo em vista os altos custos inerentes aos procedimentos necessários para se atingir os objetivos do programa, faz-se necessária à realização de estudos que visem elucidar a situação epidemiológica da brucelose no plantel bovino nacional, incluindo-se o rebanho rondoniense, objetivando-se a escolha de condutas e estratégias adequadas e criação de um mecanismo racional de verificação da efetividade das ações implementadas em cada região produtora. Como conseqüência, foi composta uma parceria envolvendo o Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) e o Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Saúde Animal da FMVZ-USP para promover a condução de estudos soroepidemiológicos nos Estados. O Estado de Rondônia foi dividido em três regiões homogêneas (circuitos produtores de bovinos), as quais foram caracterizadas epidemiologicamente e onde foram realizados estudos de prevalência. Os resultados indicaram uma prevalência aparente de 34,57% [31,49; 37,65], sendo a prevalência aparente por circuito: circuito 1, 41,48% [35,95; 47,18], no circuito 2, 31,70% [26,52; 37,24] e no circuito 3, 31,61% [26,47; 37,11].A prevalência de fêmeas com idade igual ou superior a 24 meses soropositivas no Estado foi de 6,22% [4,88-7,56]. A prevalência de fêmeas com idade igual ou superior a 24 meses soropositivas por circuito foi: circuito 1 8,33% [5,90-10,76%], circuito 2, 5,95% [4,30-7,61%], circuito 3, 4,60% [2,54-6,65%]. A alta prevalência dos focos apresenta-se distribuída de maneira homogênea entre os circuitos. Os fatores de risco associados à condição de foco foram: histórico de aborto OR= 1,42 [1,04-1,95] e exploração de corte OR= 1,75 [1,30-2,38]. Faz-se importante ressaltar que o presente estudo é inédito para a Unidade Federativa e o conhecimento da situação inicial permitirá acompanhar o andamento do Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT) e julgar a necessidade de promover correções, evitando o desperdício de tempo e recursos. / Given the importance of the National Program for Control Eradication of Brucellosis and Tuberculosis (PNCEBT) for the production chains of meat and milk to consumers of products of animal origin, for the image that the country designs on world markets and in view of the high costs related to the procedures necessary to achieve the objectives of the program, it is necessary for studies designed to clarify the epidemiological situation of brucellosis in cattle national squad, including the herd Rondoniense, aiming to be the choice of pipelines and strategies creation of an appropriate and rational mechanism for verifying the effectiveness of actions implemented in each producing region. As a result, a partnership was formed involving the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply (MAPA) and the Department of Preventive Veterinary Medicine and Animal Health of FMVZ-USP.O State of Rondonia was divided into three homogeneous regions (circuit producers of cattle) which were characterized and where epidemiological studies have been performed prevalence. Os results indicated an apparent prevalence of 34,57% [31,49,- 37,65] and the prevalence of apparent circuit: circuit 1, 41,48% [35,95; -47,18] in circuit 2, 31,70% [26,52, -37,24] and the circuit 3, 31.61% [26.47, -37.11]. The prevalence of females aged more than 24 months seropositive in the state was 6,22% [4, 88-7, 56]. The prevalence of females aged more than 24 months was seropositive for circuit: circuit 1 8.33% [5,90-10,76%], circuit 2, 5,95% [4,30-7,61% ], circuit 3, 4,60% [2,54-6,65%]. The high prevalence of outbreaks appears to be distributed uniformly between the circuits. The risk factors associated with the condition of focus were: a history of abortion [OR = 1.42, (1,04-1,95)] and exploration of cutting [OR = 1.75, (1,30-2,38 ). It is important to note that this study is unprecedented for the Federal Unit and a knowledge of the initial situation will monitor the progress of the National Program for Control and Eradication of Brucellosis and Tuberculosis (PNCEBT) and judge the need to promote correction, avoiding the waste of time and resources.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-05-15T11:31:56Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_RespostaImuneHumoral.PDF: 1103336 bytes, checksum: f20142b1495f0855c37bd778d9a9dda5 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-05-16T17:13:52Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_RespostaImuneHumoral.PDF: 1103336 bytes, checksum: f20142b1495f0855c37bd778d9a9dda5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-16T17:13:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_RespostaImuneHumoral.PDF: 1103336 bytes, checksum: f20142b1495f0855c37bd778d9a9dda5 (MD5) Previous issue date: 2013-08-31 / A brucelose está distribuída em todo território nacional, com maior prevalência para a espécie Brucella abortus que apesar de ser endêmica, apresenta-se de forma heterogênea entre as diferentes regiões do Brasil. O presente estudo tem por objetivo avaliar a resposta imune humoral de bezerras bubalinas criadas na Mesorregião do Médio Amazonas, vacinadas com a cepa B19 de B. abortus na idade preconizada pelo Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT). Foram selecionadas e acompanhadas 36 fêmeas (grupo teste) e 6 machos (grupo controle) com idades entre 3-8 meses. No dia 0 foi coletado sangue de todos os animais, em seguida todas as fêmeas receberam vacina comercial com amostra B19 em dose padrão conforme orienta o PNCEBT, com posteriores coletas de sangue realizadas aos 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 330, 360 e 390 dias. Os soros sanguíneos foram avaliados pelo soro aglutinação das provas de triagem: Antígeno Acidificado Tamponado - AAT e pela prova confirmatória: 2 Mercaptoetanol - 2ME. Os resultados obtidos para todas as amostras coletas no dia 0 apresentaram resultado negativo na reação. Aos 30 e 60 dias todas as fêmeas apresentaram 100% de reação na prova AAT e titulação de 1:200, iniciando o declínio da titulação aos 90 dias nas duas provas. Aos 210 dias as fêmeas ainda reagentes apresentaram resultados similares nas duas provas, tendo apenas um animal se mantido reativo nas duas provas até 360 dias e, somente aos 390 dias 100% das fêmeas obtiveram reação negativa nas duas provas, durante todo o experimento os machos foram não reativos. Assim, pela avaliação dos resultados, a vacinação mostrou-se eficaz para a imunização, sendo uma ferramenta importante na profilaxia da brucelose na espécie estudada, bem como as provas aplicadas para o diagnostico dessa enfermidade em búfalos a nível regional. / Brucellosis is spread throughout the country, with the highest prevalence for the strain Brucella abortus that despite being endemic presents unevenly among different regions of Brazil. This study aims to evaluate the humoral and immune response of buffalo calves raised in the Middle Amazon Mesoregion, Pará state, vaccinated with B19 strain of B. abortus according the age recommended by the National Program for the Control and Eradication of Brucellosis and Tuberculosis (PNCEBT). Thirty-six female (test group) and six males (control group) aged 3-8 months were selected and monitored. On day 0 of the experiment, blood was collected from all animals, then all females received commercial vaccine with standard-dose sample B19 as recommended by PNCEBT with subsequent blood samples were taken at 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 330, 360 and 390 days, respectively. The blood serums were evaluated for evidence of agglutination screening through Buffered Acidified Antigen - AAT and the confirmatory test through 2 Mercaptoethanol - 2ME. The results for all samples collected on day 0 were negative in the reaction, however at 30 and 60 days all females were 100% positive through test reaction AAT and titration 1:200, starting the decline through the titration at 90 days in both events. Females at 210 days still present reagents with similar results in both tests, however only one animal remained reactive in both tests up to 360 days. After 390 days of the begin of the experiment 100% of the females had a negative reaction in both events and throughout the experiment males were negative. Thus, by the evaluation of results, vaccination was effective for immunization, as well as an important tool in the prophylaxis of brucellosis in the species studied, as well as the tests applied to the diagnosis of this disease in buffaloes species at regional level.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Marilia Cristina Sola.pdf: 489950 bytes, checksum: 4d267a18376c43b47c56d28c43d655a5 (MD5) Previous issue date: 2011-02-28 / Brucellosis is a chronic infectious disease caused by bacterium of the genus Brucella, which affects humans and different species of animals. Despite the implementation of programs aimed at the disease controlling and eradicating, brucelosis is endemic in many countries, especially in developing ones, resulting in significant economic losses and serious implications for animal and public health, due to its zoonotic character. The disease can be transmitted by direct or indirect contact with infected animals, fetal membranes, and also transmitted to humans by contaminated animal products, especially milk and dairy products that have not undergone thermal processing, by raw meat and the handling of carcasses and visceras at the slaughterhouse. The National Programme for Control and Eradication of Brucellosis (PNCEBT), established in the country in 2001, determines the diagnosis of animals in order to establish both the distribution and characterization of the agent. In this context and seeking for a rapid, safe and precise diagnosis of this disease in cattle, we aimed to detect Brucella spp by real time PCR in suspect lesions detected during routine inspection in slaughterhouses under Federal Inspection in the state of Goias, Brazil. Such lesions were related to cervical bursitis, testicular, lung and liver lesions and also in mandibular, retropharyngeal, esophageal, intercostal, apical, mediastinal, tracheobronchial, inguinal, ischiatic, popliteal and mesenteric lymphnodes. In the sampling procedure, cellulose cards were used for storage of biological material (card FTA ® Elute) by impregnating the material in the fibrous matrix of the card. Laboratory analyses were performed on 47 samples from animal tissue and fluids, collected from carcasses and visceras at 40 bovines suspected of brucellosis. Samples were processed at the Laboratório de Biologia Molecular from the Centro de Pesquisa em Alimentos, Escola de Veterinária e Zootecnia from Universidade Federal de Goiás (LBM / CPA / EVZ / UFG). Brucella spp was detected in 42.5% of the bovines with suspect lesions and in 38.3% of samples. It was verified that the use of real-time PCR associated with the FTA® Elute method is an important diagnostic tool in the process of trial and disposition of carcasses and visceras of slaughtered animals and it gives flexibility and efficiency for the diagnosis of diseases, helping the Federal Inspection Service in fulfilling its mission of providing safe food to consumers / A brucelose é uma enfermidade infectocontagiosa de caráter crônico, causada por bactérias do gênero Brucella, que acomete o homem e diferentes espécies animais. Apesar da implementação de programas que visam o controle e a erradicação da enfermidade, apresenta-se endêmica em muitos países, principalmente aqueles em desenvolvimento, resultando em prejuízos econômicos significativos aos sistemas de produção e sérias implicações em saúde animal e pública, visto seu caráter zoonótico. A doença pode ser transmitida pelo contato direto ou indireto com animais infectados e anexos fetais e, ainda, veiculada ao homem pela ingestão de produtos de origem animal contaminados, principalmente leite e seus derivados que não passaram por processamento térmico. Pode ser veiculada também por meio de carnes cruas e pela própria manipulação de carcaças e vísceras durante o abate sanitário. O Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT) instituído no país em 2001 determina como uma das medidas sanitárias, o diagnóstico dos animais, a fim de estabelecer a ocorrência, distribuição e caracterização do agente. Neste contexto, visando um diagnóstico rápido, seguro e preciso desta enfermidade em bovinos, objetivou-se detectar o DNA de Brucella spp por meio da técnica de PCR em Tempo Real em lesões sugestivas identificadas durante a inspeção sanitária de rotina em matadouros-frigoríficos sob Inspeção Federal no estado de Goiás. Tais lesões abrangeram a bursite cervical, lesões testiculares, pulmonares, hepáticas e de linfonodos mandibular, retrofaríngeo, esofageano, intercostal, apical, mediastínico, traqueobrônquico, inguinal, isquiático, poplíteo e mesentérico. Para tanto, no procedimento de colheita de amostras, foram utilizados cartões de celulose destinados ao armazenamento de material biológico (cartão FTA® Elute), por impregnação do material na matriz fibrosa do cartão. As análises laboratoriais foram efetuadas em 47 amostras provenientes de fluidos e tecido animal, colhidas em carcaças e vísceras de 40 bovinos com suspeita de brucelose e desenvolvidas no Laboratório de Biologia Molecular do Centro de Pesquisa em Alimentos da Escola de Veterinária e Zootecnia da Universidade Federal de Goiás (LBM/CPA/EVZ/UFG). Detectou-se o DNA de Brucella spp em 42,5% dos bovinos que apresentaram lesões sugestivas e em 38,3% das amostras totais. Verificou-se que o emprego da técnica de PCR em Tempo Real associada ao método FTA® Elute, é uma ferramenta de diagnóstico importante no processo de julgamento e destino de carcaças e vísceras dos animais de abate, tendo em vista que confere agilidade e eficiência no diagnóstico das enfermidades, auxiliando o Serviço de Inspeção Federal no cumprimento de sua missão, ou seja, de colocar à disposição do consumidor, alimentos seguros.

Foram comparados procedimentos laboratoriais diretos e indiretos aplicados ao diagnóstico da brucelose canina causada por Brucella canis. Foram examinados 196 cães, os quais foram classificados em infectados, suspeitos e não infectados, de acordo com resultados obtidos no cultivo microbiológico em amostras de sangue, sêmen e swab vaginal, no exame clínico e de acordo com dados epidemiológicos. Os resultados obtidos nos exames laboratoriais foram correlacionados com os resultados dos exames clínicos. As técnicas laboratoriais empregadas foram soroaglutinação rápida (SAR), soroaglutinação rápida com emprego do 2-mercaptoetanol (SAR-2ME), imunodifusão em gel de ágar (IDGA), cultivo microbiológico e PCR em amostras de sangue, sêmen e swab vaginal. Foram observados 41,83% de positivos pela SAR, 14,28% pela SAR-2ME, 28,14% pela IDGA, 32,14% pela hemocultura, 19,6% pelo cultivo microbiológico de sêmen, 4,82% pelo cultivo microbiológico de swab vaginal, 33,16% pela PCR em sangue, 33,33% pela PCR em sêmen e 26,89% pela PCR em swab vaginal. Os valores de sensibilidade das provas de SAR, SAR-2ME, IDGA, PCR em sangue e PCR em swab vaginal foram respectivamente de 81,25%; 42,18%; 75%; 89,06% e 54%. A especificidade dos métodos de SAR, SAR-2ME, IDGA, PCR em sangue e PCR em swab vaginal foram respectivamente de 81,25%; 100%; 100%; 97,21% e 97,14%. Nos cães machos, as proporções de resultados positivos diagnosticados pelo cultivo microbiológico de sêmen foram semelhantes às observadas pelos demais métodos de diagnóstico utilizados. As proporções de resultados positivos obtidos pelas técnicas de SAR, SAR-2ME, IDGA, hemocultura, PCR em sangue e cultivo de swab vaginal foram maiores dentre os animais que apresentaram sinais clínicos sugestivos de brucelose. Não houve associação entre a presença de sinais clínicos de brucelose e resultados positivos pelo cultivo microbiológico de sêmen e PCR em amostras de sêmen e swab vaginal. / Nine laboratory tests used for Brucella canis infection diagnosis in 196 dogs were evaluated: rapid slide agglutination test (RSAT), 2-mercaptoetanol rapid slide agglutination test (2ME-RSAT), agar gel immunediffusion test (AGID), microbiological culture of blood, semen and vaginal swab and PCR in blood, semen and vaginal swab samples. The results of the laboratorial tests used were compared to the results of clinical examination. A total of 41,83% of positives were detected by rapid slide agglutination test, 14,28% by 2-mercaptoetanol rapid slide agglutination test, 28,14% by agar gel immunediffusion test, 32,14% by blood culture, 19,6% by culture of semen, 4,82% by vaginal swab culture, 33,16% by PCR in blood samples, 33,33% by PCR in semen and 26,89% by PCR in vaginal swab samples. The sensitivity of RSAT, 2ME-RSAT, IDGA, PCR in blood and vaginal swab samples was respectively 81,25%; 42,18%; 75%; 89,06% and 54%. The specificity of RSAT, 2ME-RSAT, IDGA, PCR in blood and vaginal swab samples was respectively: 81,25%; 100%; 100%; 97,21% e 97,14%. In male dogs, the proportion of positive results detected by microbiological culture of semen was similar to the proportion of positive results detected by RSAT, AGID and blood culture, but the proportion was lower than that detected by PCR in semen. A higher proportion of positives were detected by RSAT, 2ME-RSAT, AGID, blood culture, PCR in blood samples and culture of vaginal swab, in animals presenting clinical signs of brucellosis. No association was observed between the presence of clinical signs of brucellosis and positive results by culture of sêmen and PCR in semen and vaginal swab samples.

O Programa Nacional de Controle e Erradicação de Brucelose e Tuberculose (PNCEBT) proposto pelo MAPA (Ministério da Agricultura Pecuária e Abastecimento) adotou como medida central à vacinação com a B19 de todas as fêmeas das espécies bovina e bubalina, entre três e oito meses de idade. Embora a B19 seja capaz de conferir 65 a 70 % de proteção contra a maioria dos níveis de exposição de fêmeas bovinas, se utilizada na dose correta e na idade recomendada, o período de excreção e seu efeito sobre animais comunicantes e suscetíveis, incluindo o homem ainda são pouco conhecidos e por se tratar de uma vacina viva e virulenta deve-se atentar para o papel zoonótico no manejo dos animais excretores. O presente estudo avaliou a excreção da estirpe B19 pelo leite e urina, de 14 fêmeas bovinas de diferentes faixas etárias, que foram imunizadas dos três aos oito meses de idade, provenientes de um rebanho de exploração leiteira, empregando-se o diagnóstico bacteriológico e PCR, correlacionando-os com as fases hormonais de um ciclo reprodutivo completo. Todas as amostras positivas na PCR para Brucella spp. foram confirmadas como sendo da estirpe vacinal B19, sendo sua excreção predominantemente no momento do cio aos 150 dias de gestação e no pós-parto imediato (30 dias), ou seja, independentemente da fase hormonal. A persistência e excreção de B19 foi observada em fêmeas bovinas de até nove anos de idade. / The National Program of Brucellosis and Tuberculosis Control and Eradication (PNCEBT) designed by MAPA (Ministério da Agricultura Pecuária e Abastecimento) adapted as the central of vaccination by law with B19 the of all females of bovine and bubaline species, between three and eight months of age. However the B19 should be capable of verifying 65 - 70% of protection against a large number of levels of exposition of bovines if utilized in the correct dose and age recommended the period of excretion and your effect about communicant animals and bound to included men but are still not well known and for the subject of biovaccines of a high infectious should be watchful for the role of zoonotic in the handling of animals that?s eliminate these vaccines. This studies evaluated the excretion of B19 strain in milk and urine of 14 bovine females the different ages that was immunized at three and eight months of age originated from heads of milky exploration, based on the bacteriologic tests and polymerize chain reaction (PCR) diagnoses correlated with hormonal fases of complete reproductive cycle. All of positive samples in PCR for Brucella spp. was confirmed for B19 strain being its excretion predominantly at moment of cio about 150 pregnant days and the pos parturition (30 days) or else independently the hormonal fase. The persistence and excretion of B19 was observed in bovine females until nine years old.

A técnica de PCR, utilizando-se \"primers\" desenhados a partir do gene que codifica uma proteína imunogênica de 31 KDa de Brucella abortus, foi empregada na detecção de Brucella spp. em 300 amostras de produtos lácteos clandestinos apreendidas em municípios dos Estados de São Paulo (SP) e de Minas Gerais (MG). Foram analisadas 49 amostras de queijo minas frescal e 18 de queijo meia-cura provenientes de MG, e 92 amostras de queijo minas frescal, 33 amostras de queijo meia-cura e 108 amostras de leite cru provenientes de SP. O isolamento bacteriano foi tomado como referência, porém não se isolou Brucella spp. de nenhuma das amostras cujos cultivos mostraram-se contaminados com outros gêneros bacterianos. Pela PCR foi observado que 37 amostras de queijo foram positivas: 29/141 (20,56 %) das amostras de queijo minas frescal e 8/51 (15,68%) das amostras de queijo meia-cura. Todas as amostras positivas na PCR para Brucella spp. foram confirmadas como sendo da espécie Brucella abortus pela técnica de PCR utilizando-se \"primers\" espécie-específicos. Foi instituída a reação de hemi-nested PCR para a diferenciação da cepa em B19 ou campo tomando-se como base a deleção genética de 702 pb existente na cepa vacinal B19. A padronização da técnica permitiu que todas as cepas de Brucella spp. fossem diferenciadas, revelando que 30 (81,08%) amostras eram B19 e 7 (18,92%) eram cepas de Brucella abortus de campo. A concordância estimada entre as técnicas de PCR e do cultivo microbiológico através do indicador Kappa foi considerada baixa (K = 0) devido ao não isolamento do microrganismo. / A PCR assay using primers designed based on the gene that encodes a 31 KDa immunogenic protein from Brucella abortus was used in the detection of Brucella spp. in 300 samples of illegal dairy products obtained in cities of the states of São Paulo (SP) and Minas Gerais (MG), Brazil. A total of 49 samples of minas frescal cheese and 18 samples of meia-cura cheese from MG were analyzed, besides 92 samples of minas frescal cheese, 33 samples of meia-cura cheese and 108 samples of raw milk from SP. Although bacterial isolation was used as reference, Brucella spp. was not isolated from any samples in which culture was contaminated by other genera of bacteria. PCR showed that 37 samples were positive for Brucella spp.: 29/141 (20,56 %) of the minas frescal cheese samples and 8/51 (15,68%) of the meia-cura cheese samples. All positive samples for Brucella spp. were confirmed as Brucella abortus by PCR using species-specific primers. Hemi-nested PCR was used for the differentiation between B19 and field strains, based on the genetic deletion of 702 pb in the vaccinal strain. Standardization of the technique enabled the differentiation of all Brucella spp. strains, showing that 30 of them (81,08%) were B19 and 7 (18,92%) of them were Brucella abortus field strains. Estimated agreement between PCR and microbiological culture as determined by Kappa indicator was considered to be poor (K = 0) due to the absence of isolation of the microorganism.

Realizou-se um estudo para caracterizar a situação epidemiológica da brucelose bovina no Estado do Rio de Janeiro. O Estado foi dividido em três circuitos produtores. Em cada circuito foram amostradas aleatoriamente cerca de 300 propriedades e, dentro dessas, foi escolhido, de forma aleatória, um número préestabelecido de animais, dos quais foi obtida uma amostra de sangue. No total foram amostrados 8239 animais, provenientes de 945 propriedades. Em cada propriedade amostrada foi aplicado um questionário epidemiológico para verificar o tipo de exploração e as práticas zootécnicas e sanitárias que poderiam estar associadas ao risco de infecção pela doença. O protocolo de testes utilizado foi o da triagem com o teste do antígeno acidificado tamponado e reteste dos positivos com o teste do 2- mercaptoetanol. O rebanho foi considerado positivo se pelo menos um animal foi reagente às duas provas sorológicas. Para o Estado, as prevalências de focos e de animais infectados foram, respectivamente, de 15,4% [12,9-17,9%] e de 4,1% [2,8-5,3%]. Para os circuitos, as prevalências de focos e de animais infectados foram, respectivamente: circuito 1, 13,8% [10,2-18,2%] e 3,0% [1,9-4,1%]; circuito 2, 15,7% [11,9-20,2%] e 2,3% [1,4-3,2%]; circuito 3, 19,6% [15,4-24,4%] e 9,3% [4,5-14,1%]. Os fatores de risco (odds ratio, OR) associados à condição de foco foram: ter mais que 30 fêmeas com idade de 24 meses ou acima (OR=2,33 [1,51-3,07]), compra de reprodutores (OR= 1,95 [1,13-2,45]) e prática de aluguel de pasto (OR= 1,74 [1,03-2,74]). / A study to characterize the epidemiological status of bovine brucellosis in the State of Rio de Janeiro was carried out. The State was divided in three regions. Three hundred herds were randomly sampled in each region and a pre-established number of animals were sampled in each herd. A total of 8,239 serum samples from 945 herds were collected. In each herd, it was applied an epidemiological questionnaire focused on herd traits as well as husbandry and sanitary practices that could be associated with the risk of infection. The serum samples were screened for antibodies against Brucella spp. by the Rose-Bengal Test (RBT), and all positive sera were re-tested by the 2-mercaptoethanol test (2-ME). The herd was considered positive if at least one animal was positive on both RBT and 2-ME tests. The prevalences of infected herds and animals in the State were, respectively: 15.4% [12.9-17.9%] and 4.1% [2.8-5.3%]. The prevalences of infected herds and animals in the regions were, respectively: region 1, 13.8% [10.2-18.2%] and 3.0% [1.9-4.1%]; region 2, 15.7% [11.9-20.2%] and 2.3% [1.4-3.2%]; and region 3, 19.6% [15.4-24.4%] and 9.3% [4.5-14.1%]. The risk factors (odds ratio, OR) associated with the presence of the infection were: herd size larger than 30 cows (OR=2.33 [1.51-3.07]), purchase of animals for breeding (OR= 1.95 [1.13-2.45), and pasture rental practice (R= 1.74 [1.03-2.74]).