Orientador: André Mendes Jorge / Resumo: Os bubalinos se destacam entre as espécies de interesse zootécnico, dentre outros motivos, por constituir uma importante fonte de proteína de alto valor biológico. Para a criação desses animais, faz-se necessário o fornecimento de dietas baseadas nas suas exigências nutricionais. Entretanto, tais exigências ainda não foram definidas em condições tropicais para essa espécie, sendo necessário a determinação da composição química corporal e do peso a maturidade para a definição do requerimento nutricional desses animais. Sendo assim, objetivou-se com este estudo definir o peso na maturidade para bubalinos. Determinou se a composição química corporal (CQC), o peso de corpo vazio (PCVz) de 153 bubalinos machos não castrados Jafarabadi, Mediterrâneo e Murrah com peso e idade inicial médios de 314 ± 117 kg e 390±32 dias, provenientes de dois anos consecutivos e abatidos em diferentes estádios de maturidade fisiológica (420, 480 e 540 kg). Quanto ao peso a maturidade a variável grupo genético foi significativa no modelo. Sendo assim o peso a maturidade do grupo genético Jafarabadi, Mediterrâneo e Murrah foi de 505,93; 494,40 e 423,79 kg de PCVZ, respectivamente. / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-04-25Bitstream added on 2014-06-13T20:54:06Z : No. of bitstreams: 1 zetouni_l_me_jabo.pdf: 337751 bytes, checksum: b21af7c1ec9b43b60d9345d076668d73 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O gene responsável pela codificação do hormônio leptina tem sido associado à produção de leite, e diversos polimorfismos encontrados nesse gene foram associados a características produtivas em bovinos. O objetivo do presente estudo foi a identificação do polimorfismo LEP-1620 (A/G) no gene bubalino da leptina e suas possíveis associações com as produções de leite, gordura, proteína e porcentagens de gordura e proteína. Foram coletadas amostras de pelo da cauda de 200 búfalas, e após a extração do DNA as amostras foram genotipadas pela técnica PCR-RFLP. Três amostras foram sequenciadas e foi encontrado um SNP na posição 70 do íntron 2 do gene da leptina, caracterizado pela substituição de um A por um G. As médias das produções mensais de leite, gordura, proteína e as porcentagens de gordura e proteína foram avaliadas em um modelo misto. Os genótipos encontrados (AA, AG, GG) foram positivamente associados às características porcentagem de gordura e de proteína (p<0,05), sendo que os animais AA apresentaram médias superiores para as características. As curvas de lactação para as características produção de leite e porcentagens de gordura e proteína apresentaram trajetórias semelhantes para os três genótipos. Esses resultados indicam que o polimorfismo LEP-1620 (A/G) pode ser utilizado futuramente como marcador molecular para as características porcentagem de gordura e proteína do leite de búfalas / The gene responsible for encoding the hormone leptin has been associated with milk production, and several polymorphisms of this gene were associated with production traits in cattle. The aim of the present study was to identify the LEP-1620 (A/G) polymorphism in the buffalo leptin gene and its possible associations with milk, fat and protein yield, and fat and protein percentages. Samples of tail hair from 200 buffalo cows were collected, and after DNA extraction the samples were genotyped by PCR-RFLP. Three samples were sequenced and an SNP was found at position 70 of intron 2 in the leptin gene, characterized by the substitution of an A for a G. The means from monthly milk, fat and protein yield and falt and protein percentages were evaluated by a mixed model. The genotypes found (AA, AG, GG) were positively associated with fat and protein percentages (p<0,005), and the AA animals showed the highest means for this traits. The lactation curves for milk yield and fat and protein percentages showed similar trajectories for the three genotypes. These results indicate that the LEP-1620 (A/G) polymorphism can be used in the future as a molecular marker for fat and protein percentages traits of buffalo cow’s milk

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-11-12Bitstream added on 2014-06-13T20:03:24Z : No. of bitstreams: 1 stafuzza_nb_dr_jabo.pdf: 3950530 bytes, checksum: 7762a1b85de88115c5c16380df8c26e1 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O crescimento da população bubalina em território brasileiro está relacionado ao interesse dos produtores nesse animal, como uma alternativa para a produção de carne, leite e seus derivados. Diante deste panorama, torna-se necessário o aprimoramento de programas de melhoramento genético, visando a seleção de animais geneticamente superiores para a reprodução. Por essa razão, o conhecimento do genoma da espécie é de extrema valia para o setor, uma vez que gera informações necessárias à identificação e avaliação de genes associados com características de interesse econômico. Desse modo, o presente trabalho envolveu a construção de uma nova ferramenta genômica para búfalo, denominada biblioteca BAC, a qual permitirá um novo direcionamento nos estudos moleculares do genoma bubalino, destacando-se a definição da estrutura e organização de genes de interesse econômico, fornecendo informações em nível de seqüência de DNA para o entendimento dos mecanismos e regulação dos mesmos. Com a disponibilidade dessa ferramenta, as primeiras regiões a serem caracterizadas serão aquelas que contêm genes de interesse econômico, as quais se destacam as regiões com genes relacionados com produção e qualidade do leite, regiões com genes relacionados com resposta imune e adaptativa, e regiões com genes da família das lipocalinas, os quais estão envolvidos com características de produção e reprodução. Porém, para que esses genes possam ser caracterizados por meio da biblioteca BAC de búfalo, há a necessidade de gerar marcadores para identificar e isolar clones específicos para esses genes. Marcadores derivados do genoma bovino têm sido utilizados com sucesso em estudos de mapeamento do genoma bubalino, os quais podem ser uma fonte importante de marcadores. Porém, para famílias gênicas, há a necessidade da geração de marcadores específicos para búfalo... / The increase of the buffalo population in Brazil is the result of the great interest of the producers as an alternative source for the production of meat, milk and dairy products. Thus, it becomes necessary genetic improvement programs more effective, in order to select genetically superior animals for breeding. The knowledge of the buffalo genome is valuable in this regard, since it generates information to identify and evaluate genes associated with economically traits. In this project we constructed a new genomic tool for buffalo - a genomic BAC library - which can be used in molecular studies of buffalo genome especially those related with the definition of the molecular structure and organization of economically important genes. Once this genomic tool is available, the first target regions of the buffalo genome to be characterized are those containing genes related to milk production, adaptive and innate immune response, and regions lipocalin genes involved in reproduction and production traits. However, to characterize these regions using the BAC library is necessary to have molecular markers to be able to identify and isolate the specific clones. Markers derived from the bovine genome have been successfully used in buffalo genome mapping studies, showing to be an important source of markers. On the another hand, for those genes found in the genome as gene families, there is a need for buffalo specific markers. The evaluation of new markers will contribute to the characterization of those target regions of the buffalo genome, providing information about the genomic architecture of this specie when compared with other bovid

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_laura_maria_jorge_santos.pdf: 1428533 bytes, checksum: e3c51067725ef21be5a8179e067d8e11 (MD5) Previous issue date: 2012-02-10 / Toxoplasmosis is a common zoonosis worldwide caused by Toxoplasma gondii, and high infection prevalence in humans and animals. It is usually asymptomatic, however in immunocompromised individuals and in fetuses it may cause severe injury. Wild and domestic felids are the definitive hosts for the parasite, and they shed oocysts in their faeces. Carnivorism, fecal-oral and congenital is the main route of toxoplasmosis transmission. Further studies are needed to investigate the sanity of buffaloes in relation to T. gondii infection, because of the growing demand for buffalo meat and meat products. This work aims to know the prevalence of T. gondii infection in buffaloes and cattle that share the same area in southern Rio Grande do Sul state, and correlate data obtained, including age factor, to identify possible sources of infection. Blood samples were collected by means of jugular venipuncture in 169 buffaloes and 121 beef cattle of different ages, living in a farm in southern Brazil. T. gondii were performed by the indirect fluorescent-antibody (IFA) technique, according to Camargo (1964), using a WAMA Diagnostic® kit. Positive and negative control serum to T. gondii and conjugated Anti-bovine IgG (whole molecule) FITC produced in rabbits, Sigma/F7887 were used. The animals were considered positive from a dilution of 1:64. Significant levels of antibodies to T. gondii were detected in 27.2% of buffaloes and 17.4% of cattle. Statistical difference p≤ 0.05 The presence of cats may also indicate the likelihood of a contaminated environment. Age of animals was significantly associated with seropositivity for toxoplasmosis detected in older buffaloes, due to longer exposure. Buffaloes and cattle are strict herbivores, and high prevalence of T. gondii suggests contamination of the environment by oocysts, featuring horizontal transmission. / A toxoplasmose é uma zoonose causada pelo protozoário Toxoplasma gondii, de ocorrência mundial, com alta prevalência da infecção em seres humanos e animais, geralmente na forma assintomática, entretanto, em indivíduos imunodeprimidos e fetos podem ocorrer lesões severas. Os Felídeos são os hospedeiros definitivos do parasito e eliminam oocistos em suas fezes. A principal via de transmissão da toxoplasmose é carnivorismo, fecal-oral e congênita. Devido à crescente procura pela carne de bubalinos e seus derivados e a já existente pecuária bovina no Rio Grande do Sul, são necessários estudos mais aprofundados para investigar a sanidade destas espécies com relação à infecção por T. gondii. Este trabalho teve como objetivos conhecer a prevalência da infecção por Toxoplasma gondii em bubalinos e bovinos que compartilham a mesma área no sul do Rio Grande do Sul e correlacionar os dados obtidos entre ambas as espécies, incluindo o fator idade, visando identificar possíveis fontes de infecção. Foram coletadas amostras de sangue por punção venosa da jugular em 169 búfalos e 121 bovinos de corte de diferentes idades que convivem em uma propriedade no sul do Brasil. Foram realizados exames sorológicos para T. gondii através da técnica da Reação de Imunofluorecência Indireta (RIFI) segundo Camargo (1964) utilizando o ―kit‖ WAMA Diagnóstica®. Utilizou-se soros controle positivo e negativo para T. gondii previamente conhecidos, assim como conjugado anti-IgG bovina (molécula inteira com FITC, produzido em coelhos, Sigma/F-7887). Os animais foram considerados positivos a partir da diluição 1:64. Níveis significativos de anticorpos para T. gondii foram detectados em 27,2% dos bubalinos e 17,4% dos bovinos. Foi considerada diferença estatística p ≤0,05. A presença dos felídeos pode indicar a possibilidade de um ambiente contaminado. A idade dos bubalinos foi significativamente associada à soropositividade detectada para toxoplasmose devido possivelmente ao maior tempo de exposição, o que não foi constatado nos bovinos. Bubalinos e bovinos são estritamente herbívoros e, a alta prevalência de T. gondii sugere contaminação do meio ambiente com, oocistos caracterizando a transmissão horizontal.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-03-13Bitstream added on 2014-06-13T20:33:37Z : No. of bitstreams: 1 bizari_dc_me_jabo.pdf: 336489 bytes, checksum: 0801c01531c7ce877e08321205d11d07 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / No presente estudo, cinco novos genes codificantes de proteínas foram selecionados para o mapeamento do cromossomo 6 bubalino (BBU6). Os novos genes (muc1, ppp1r7, psmd4, tshb e gtf2b) foram testados com a tecnologia de PCR resultando em produtos de PCR adequados ao mapeamento utilizando-se um painel de células somáticas híbridas irradiadas, denominado BBURH5000. Os resultados obtidos mostraram uma freqüência de retenção (FR) do produto de PCR de cada gene nas diferentes linhagens do painel com variação de 13,3% (gtf2b) a 26,6% (psmd4). A análise comparativa entre os mapas RH do BBU6 e a sequência do cromossomo 3 bovino permitiu indicar a localização dos novos genes no cromossomo 6 bubalino / In this study, five new protein coding genes were select for mapping buffalo chromosome 6. The new genes (muc1, ppp1r7, psmd4, tshb and gtf2b) were tested using PCR technology resulting in PCR products suitable for mapping using a radiation hybrid panel (BBURH5000). The retention frequency of the PCR products in each hybrid cell line of the panel showed the percentage from 13,3% (gtf2b) to 26,6% (psmd4). Comparative analysis between the buffalo chromosome 6 RH map and the sequence from bovine chromosome 3 allowed to assign the location of the new genes on buffalo chromosome 6

Orientador: Humberto Tonhati / Coorientador: Marcelo Cervini / Banca: Maria Elisabete Jorge Amaral / Banca: Joslaine Noely dos Santos Gonçalves Cyrillo / Resumo: O gene responsável pela codificação do hormônio leptina tem sido associado à produção de leite, e diversos polimorfismos encontrados nesse gene foram associados a características produtivas em bovinos. O objetivo do presente estudo foi a identificação do polimorfismo LEP-1620 (A/G) no gene bubalino da leptina e suas possíveis associações com as produções de leite, gordura, proteína e porcentagens de gordura e proteína. Foram coletadas amostras de pelo da cauda de 200 búfalas, e após a extração do DNA as amostras foram genotipadas pela técnica PCR-RFLP. Três amostras foram sequenciadas e foi encontrado um SNP na posição 70 do íntron 2 do gene da leptina, caracterizado pela substituição de um A por um G. As médias das produções mensais de leite, gordura, proteína e as porcentagens de gordura e proteína foram avaliadas em um modelo misto. Os genótipos encontrados (AA, AG, GG) foram positivamente associados às características porcentagem de gordura e de proteína (p<0,05), sendo que os animais AA apresentaram médias superiores para as características. As curvas de lactação para as características produção de leite e porcentagens de gordura e proteína apresentaram trajetórias semelhantes para os três genótipos. Esses resultados indicam que o polimorfismo LEP-1620 (A/G) pode ser utilizado futuramente como marcador molecular para as características porcentagem de gordura e proteína do leite de búfalas / Abstract: The gene responsible for encoding the hormone leptin has been associated with milk production, and several polymorphisms of this gene were associated with production traits in cattle. The aim of the present study was to identify the LEP-1620 (A/G) polymorphism in the buffalo leptin gene and its possible associations with milk, fat and protein yield, and fat and protein percentages. Samples of tail hair from 200 buffalo cows were collected, and after DNA extraction the samples were genotyped by PCR-RFLP. Three samples were sequenced and an SNP was found at position 70 of intron 2 in the leptin gene, characterized by the substitution of an A for a G. The means from monthly milk, fat and protein yield and falt and protein percentages were evaluated by a mixed model. The genotypes found (AA, AG, GG) were positively associated with fat and protein percentages (p<0,005), and the AA animals showed the highest means for this traits. The lactation curves for milk yield and fat and protein percentages showed similar trajectories for the three genotypes. These results indicate that the LEP-1620 (A/G) polymorphism can be used in the future as a molecular marker for fat and protein percentages traits of buffalo cow's milk / Mestre

Submitted by Aline Aparecida Silva Stella null (alineasstella@hotmail.com) on 2017-06-20T12:30:27Z No. of bitstreams: 1 DEFESA Aline Stella.pdf: 1152999 bytes, checksum: c574962c67c5ff1a6f1d0fe076226c04 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-06-21T13:44:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 stella_aas_me_jabo.pdf: 1152999 bytes, checksum: c574962c67c5ff1a6f1d0fe076226c04 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-21T13:44:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 stella_aas_me_jabo.pdf: 1152999 bytes, checksum: c574962c67c5ff1a6f1d0fe076226c04 (MD5) Previous issue date: 2017-05-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A mastite é a principal doença que acomete os rebanhos leiteiros e promove grandes perdas na produção devido a alterações na composição do leite e prejuízos na saúde do animal, aumentando assim os custos de produção. Caracteriza-se pela resposta inflamatória da glândula mamária a agentes infecciosos, alterando sua fisiologia e metabolismo. Estudo de expressão gênica vem sendo empregado em vários organismos com a finalidade de identificar genes relacionados com características economicamente importantes como resistência a doenças. Com o objetivo de compreender melhor os mecanismos de resposta imune envolvidos no fenótipo de resistência/susceptibilidade à mastite, foi realizada a quantificação da expressão relativa dos genes do Fator Estimulador de Colônias de Granulócitos 3 (CSF3) e Lactoperoxidase (LPO), em leite de búfalas mestiças saudáveis e com mastite, por meio da técnica de PCR quantitativa em tempo real (qRT-PCR). Para isso, foi realizada a extração de RNA total, com Trizol, de células somáticas do leite de doze animais diagnosticados com mastite e de doze animais livres da infecção. Foram realizadas análises de qualidade e quantificação do RNA total e das contaminações por DNA genômico para garantir a integridade das amostras. A quantificação da expressão gênica foi realizada por meio do método do Delta Delta Ct. Os genes GAPH, HPRT1, EEF1A1 e RPLP0, foram selecionados na literatura, e testados como genes de referência. As análises referentes às quantificações foram realizadas com os valores de Ct obtidos para cada gene. O gene CSF3 foi significativamente mais expresso em animais com mastite em comparação com animais sem mastite (P<0,001) e 5,14 vezes mais expresso na amostra alvo do que na amostra de referência. O CSF3 é uma citocina naturalmente produzidas e secretadas por uma grande variedade de células pertencentes ou não ao sistema imune. Desempenham importante papel na defesa do hospedeiro, já que regulam parte da atividade das células que participam da imunidade inata e específica, o que demonstra importância no seu uso no diagnóstico e prognóstico das mastites. O gene LPO expressa uma proteína sintetizada na glândula mamária por íons tiocianato (SCN-), originados por metabolismo hepático e peróxido de hidrogênio (H2O2), derivado da atividade dos leucócitos e outras células, para gerar produtos reativos com intensa atividade antimicrobiana. Esse foi 2,41 vezes mais expresso em animais com mastite em relação a animais sem mastite (p-valor = 0,097), não havendo diferença significativa, porém a mastite é uma doença multifatorial e afetada por muitos genes, sendo necessário mais estudos com animais em diferentes fases de infecção e incluindo outros genes para compreender o mecanismo de resposta imune relacionado a mastite.

Sabendo do impacto que nutrição e ambiente podem ter sobre a reprodução é de fundamental importância para aplicação nas biotecnologias da reprodução analisar o ciclo reprodutivo de novilhas bovinas (taurinas e zebuínas) e bubalinas, temporalmente, sob as mesmas condições nutricionais e de manejo. Assim, este estudo teve como objetivo analisar temporalmente a dinâmica folicular de novilhas Holandesas, Gir e Búfalas, mantidas sob as mesmas condições de manejo. As fêmeas foram alocadas no Departamento de Reprodução Animal (CBRA/FMVZ/USP), Campus Pirassununga. No Experimento 1 as fêmeas foram pré-sincronizadas com duas doses de prostaglandina F2&alpha; (PGF; Dcloprostenol, 150 &micro;g IM, Prolise&reg;), com 14 dias de intervalo. O dia da primeira ovulação, após segunda dose de PGF, foi considerado como o dia 0 do ciclo. A partir do D0 foram realizadas avaliações diárias da dinâmica folicular (folículos > 3 mm) por ultrassonografia (Aloka SSD500, 7,5MHz), até à detecção da ovulação subsequente. O Experimento 2 foi realizado após a segunda ovulação, avaliando-se a dinâmica folicular a cada 12h para detectar o momento do desvio da primeira onda folicular. As variáveis resposta foram analisadas pelo PROC GLIMMIX do SAS. Não foi encontrada diferença entre os intervalos inter-ovulatórios (22,3±0,65; 22,1±0,95; 23,8±0,63 dias; Holandesas, Gir e Búfalas, respectivamente). No entanto, em relação às características a seguir, foram encontradas diferenças significativas (P<0,05) em pelo menos um dos grupos genéticos, Holandesas, Gir e Búfalas, respectivamente, para o número de ondas foliculares em um ciclo estral (2,6±0,17a, 3,4±0,24b, 2,8±0,11a ondas), número de folículos recrutados após primeira onda (26,1±1,7a, 66,2±15,9b, 22,7±1,91a folículos), e segunda ovulação (30,2±3,08a, 74,2±18,8b, 27,1±2,8a folículos), diâmetro do FD da primeira onda (15,8±0,66a, 12,3±0,32b, 12,1±0,03b mm), diâmetro do FD da segunda onda (11,8±0,73a, 9,4±0,52b, 10,6±0,31ab mm), diâmetro do folículo ovulatório (15±0,33a, 13,7±0,74ab, 13,5±0,46b mm), diâmetro máximo do CL (26,8±0,54a, 22,3±0,98b, 19,5±0,32c mm), concentração máxima de P4 no ciclo (7,7±0,33a, 8,0±0,85a, 5,3±0,28b ng/ml) e duração da dominância do FD da primeira onda (8,0±0,49a, 5,2±1,07b, 8,1±0,44a dias). Ainda com relação aos esteroides, a análise de testosterona plasmática nos 13 primeiros dias do ciclo foi semelhante entre as bovinas e menor para as bubalinas. Insulina e IGF plasmático também foram mensuradas. Novilhas taurinas e bubalinas (4,1±0,67 mUI/ml, 6,0±0,52 mUI/ml, respectivamente) apresentaram menores concentrações de insulina do que as zebuínas (9,0±2,15 mUI/ml), sendo que estas concentrações foram maiores durante a fase luteínica do que na fase folicular. Em relação ao desvio folicular no Experimento 2, não foram encontradas diferenças entre as raças para o momento do desvio (1,8±0,15; 2,1±0,21; 1,8±0,18 dias), entretanto, novilhas Holandesas apresentaram neste momento maior diâmetro de FD e FS (FD: 7,9±0,33; FS: 7,0±0,27 mm; P<0,05) quando comparadas às Gir (FD: 7,0±0,32; FS: 6,2±0,28mm) e às Búfalas (FD: 6,8±0,19; FS: 6,3±0,29mm). Não foram encontradas diferenças para concentrações de IGF-I total no fluído folicular e no plasma das taurinas e das zebuínas, porém as concentrações nas bubalinas foram superiores a das bovinas. Com esses resultados, conclui-se que novilhas de grupos genéticos diferentes (Bos taurus, Bos indicus e Bubalus bubalis) apresentam características de crescimento folicular e luteínico específicos para a raça, quando avaliadas temporalmente e nas mesmas condições de manejo ambiental e nutricional. / Considering the impact that nutrition and environment have over reproduction, it is essential for the reproductive biotechnologies to analyze the reproductive cycle of bovine (taurine and zebu) and bubaline heifers at the same time and under the same nutritional management. Therefore, the objective of this work was to study the follicular dynamic of Holstein (n=15), Gir (n=11) and Buffalo (n=15) heifers kept under the same conditions. All heifers were housed at the Department of Animal Reproduciton, (CBRA/FMVZ/USP), Pirassununga Campus. Animals were pre-synchronized with two doses of prostaglandin F2&alpha; (PGF; Dcloprostenol, 150&micro;g, IM), fourteen days apart (D0 = day of first ovulation). From D0, it was performed daily ultrasound scan of the ovaries to track follicular dynamics (follicles &#8805; 3mm) until the occurrence of the second ovulation. After the second ovulation, the follicular dynamic was performed twice daily to detect the time of deviation of the first follicular wave. The response variables were analyzed by PROC GLIMMIX, SAS. No difference was found among the inter-ovulatory interval (22.3±0.65; 22.1±0.95; 23.8±0.63 days) for Holstein, Gir and Buffalo, respectively. Differences were present (P<0.05) in at least one of the genetic groups, Holstein, Gir and Buffalo, respectively, for number of follicular waves (2.6±0,17a, 3.4±0,24b, 2.8±0,11a waves), number of follicles recruited after first (26.1±1.7a, 66.2±15.9b, 22.7±1.91a follicles), and second ovulation (30.2±3.08a, 74.2±18.8b, 27.1±2.8a follicles), diameter of first wave DF (15.8±0.66a, 12.3±0.32b, 12.1±0.03b mm), diameter of second wave DF (11.8±0.73a, 9.4±0.52b, 10.6±0.31ab mm), diameter of ovulatory follicle (15±0.33a, 13.7±0.74ab, 13.5±0.46b mm), maximum diameter of CL (26.8±0,54a, 22.3±0.98b, 19.5±0.32c mm), maximum concentration of P4 during ovulatory cycle (7.7±0.33a, 8.0±0.85a, 5.3±0.28b ng/ml) and length (8.0±0.49a, 5.2±1.07b, 8.1±0.44a days) of first wave dominant follicle dominance. No differences were found among the breeds for the moment of deviation (1.8±0.15; 2.1±0.21; 1.8±0.18 days). However, Holstein heifers presented larger DF and SF diameter (FD: 7.9±0.33; FS: 7.0±0.27mm; P<0.05) at deviation when compared with Gir (DF: 7.0±0.32; SF: 6.2±0.28mm) and Buffalo (DF: 6.8±0.19; SF: 6.3±0.29mm). Analyzing other steroids, concentration of blood testosterone during the first 13 days of the cycle was similar for the bovine heifers and lower for the bubaline heifers. Blood insulin and IGF-I were also measured. Holstein and bubaline heifers shown smaller concentrations of insulin (4.1±0.67 mUI/ml, 6.0±0.52 mUI/ml, respectively) than Gir heifers (9.0±2.15 mUI/ml), and also, when grouping the data collected from luteal phase and follicular phase, the result shows that during the period of high P4, insulin concentrations are lower than during the period of high E2. No differences were found among bovine breeds for the IGF-I concentration in follicular fluid, but they were lower than the concentrations presented in the bubaline follicular fluid. The results herein presented show that heifers from different genetic groups (Bos taurus, Bos indicus and Bubalus bubalis), maintained at the same nutritional and environmental status, have different folliculogenesis and luteal growth, which are specific to its breed.

Avaliou-se neste estudo o efeito do tratamento com somatotrofina recombinante bovina (bST) na população folicular, na taxa de recuperação e qualidade dos oócitos e na produção in vitro de embriões bubalinos. A hipótese foi de que o bST aumenta o número de folículos recrutados e a qualidade oocitária, melhorando a eficiência da técnica de aspiração folicular em fêmeas bubalinas. Foram utilizadas 10 novilhas bubalinas, sendo que o grupo bST (n=5) recebeu 500mg de bST em intervalos regulares, enquanto o grupo Controle (n=5) não recebeu tratamento adicional. Ambos os grupos foram submetidos a 10 sessões de aspiração duas vezes por semana. Foram quantificados o número total de folículos e o tamanho destes a cada sessão. Os oócitos recuperados foram quantificados e classificados de acordo com a sua qualidade (A, B, C, D, E), sendo os A+B+C considerados de boa qualidade. Os embriões produzidos foram vitrificados, e uma parte destes, transferidos em tempo fixo. Foram colhidas amostras de sangue para mensuração de IGF-I plasmático durante o estudo. O bST aumentou o número de folículos observados (12,2 vs. 8,7; p&lt;0,05) e o número de oócitos recuperados (5,2 vs. 4,1; p=0,07), no entanto não afetou a qualidade destes, bem como a sua capacidade de desenvolvimento (p&gt;0,05). Observou-se efeito significativo (p&lt;0,05) de sessão de aspiração no número de folículos observados, de folículos aspirados e de oócitos recuperados. As concentrações plasmáticas de IGF-I não apresentaram efeito de tratamento (p&gt;0,05), no entanto sofreram efeitos de sessão e também da interação entres sessão e tratamento (p&lt;0,05). Obteve-se taxa de concepção de 10,53 % (2/19) após a inovulação dos embriões, gerando o nascimento de dois bezerros normais. Os resultados são sugestivos de que o tratamento com bST aumenta o número de folículos recrutados por onda de crescimento folicular, demonstrando seu potencial em aumentar a eficiência da técnica de aspiração folicular na espécie bubalina / The aim of this experiment was evaluated the effect of recombinant bovine somatotropin (bST) on follicular population, oocyte recovery rates and quality, and on in vitro buffaloes embryo production. The hypothesis was that bST improves the number of follicles per follicular growth wave and oocyte quality, enhancing the results in buffalos females submitted to ovum pick-up programs. A total of ten heifers were assigned in two experimental groups (bST Group that received 500mg of bST in regular intervals and Control Group that did not received any additional treatment). Both groups were submitted to 10 OPU sessions twice weekly (every 3 or 4 days). The number of follicles and its diameters were recoded in all OPU. The oocytes harvest were counted and classified in five categories (A, B, C, D, E). The A+B+C categories were considered as good quality oocyte. The embryos produced were vitrified and some of these embryos were transferred of fixed time. Blood samples for IGF-I were obtained every once weekly. The bST improved the follicular population (12.2 vs. 8.7; p&lt;0.05) and the number of oocytes per session (5.2 vs. 4.1; p=0.07), however the treatment did not affect the oocyte quality and its in vitro development capacity (p&gt;0.05). A significant effect (p&lt;0.05) of OPU session was observed in follicular population, number of aspirated follicles and number of oocyte recovered. The plasma IGF-I was not affected (p&gt;0.05) by treatment, however presented a significant effect of OPU session and also of the treatment by OPU session interaction (p&lt;0.05). The conception rate was 10.5% (2/19) and two healthy and normal calves were born from transferred embryo. These results indicate the viability of bST treatment to improve the follicular recruitment and its potential application in buffaloes donors submitted to OPU programs

Sabendo do impacto que nutrição e ambiente podem ter sobre a reprodução é de fundamental importância para aplicação nas biotecnologias da reprodução analisar o ciclo reprodutivo de novilhas bovinas (taurinas e zebuínas) e bubalinas, temporalmente, sob as mesmas condições nutricionais e de manejo. Assim, este estudo teve como objetivo analisar temporalmente a dinâmica folicular de novilhas Holandesas, Gir e Búfalas, mantidas sob as mesmas condições de manejo. As fêmeas foram alocadas no Departamento de Reprodução Animal (CBRA/FMVZ/USP), Campus Pirassununga. No Experimento 1 as fêmeas foram pré-sincronizadas com duas doses de prostaglandina F2&alpha; (PGF; Dcloprostenol, 150 &micro;g IM, Prolise&reg;), com 14 dias de intervalo. O dia da primeira ovulação, após segunda dose de PGF, foi considerado como o dia 0 do ciclo. A partir do D0 foram realizadas avaliações diárias da dinâmica folicular (folículos > 3 mm) por ultrassonografia (Aloka SSD500, 7,5MHz), até à detecção da ovulação subsequente. O Experimento 2 foi realizado após a segunda ovulação, avaliando-se a dinâmica folicular a cada 12h para detectar o momento do desvio da primeira onda folicular. As variáveis resposta foram analisadas pelo PROC GLIMMIX do SAS. Não foi encontrada diferença entre os intervalos inter-ovulatórios (22,3±0,65; 22,1±0,95; 23,8±0,63 dias; Holandesas, Gir e Búfalas, respectivamente). No entanto, em relação às características a seguir, foram encontradas diferenças significativas (P<0,05) em pelo menos um dos grupos genéticos, Holandesas, Gir e Búfalas, respectivamente, para o número de ondas foliculares em um ciclo estral (2,6±0,17a, 3,4±0,24b, 2,8±0,11a ondas), número de folículos recrutados após primeira onda (26,1±1,7a, 66,2±15,9b, 22,7±1,91a folículos), e segunda ovulação (30,2±3,08a, 74,2±18,8b, 27,1±2,8a folículos), diâmetro do FD da primeira onda (15,8±0,66a, 12,3±0,32b, 12,1±0,03b mm), diâmetro do FD da segunda onda (11,8±0,73a, 9,4±0,52b, 10,6±0,31ab mm), diâmetro do folículo ovulatório (15±0,33a, 13,7±0,74ab, 13,5±0,46b mm), diâmetro máximo do CL (26,8±0,54a, 22,3±0,98b, 19,5±0,32c mm), concentração máxima de P4 no ciclo (7,7±0,33a, 8,0±0,85a, 5,3±0,28b ng/ml) e duração da dominância do FD da primeira onda (8,0±0,49a, 5,2±1,07b, 8,1±0,44a dias). Ainda com relação aos esteroides, a análise de testosterona plasmática nos 13 primeiros dias do ciclo foi semelhante entre as bovinas e menor para as bubalinas. Insulina e IGF plasmático também foram mensuradas. Novilhas taurinas e bubalinas (4,1±0,67 mUI/ml, 6,0±0,52 mUI/ml, respectivamente) apresentaram menores concentrações de insulina do que as zebuínas (9,0±2,15 mUI/ml), sendo que estas concentrações foram maiores durante a fase luteínica do que na fase folicular. Em relação ao desvio folicular no Experimento 2, não foram encontradas diferenças entre as raças para o momento do desvio (1,8±0,15; 2,1±0,21; 1,8±0,18 dias), entretanto, novilhas Holandesas apresentaram neste momento maior diâmetro de FD e FS (FD: 7,9±0,33; FS: 7,0±0,27 mm; P<0,05) quando comparadas às Gir (FD: 7,0±0,32; FS: 6,2±0,28mm) e às Búfalas (FD: 6,8±0,19; FS: 6,3±0,29mm). Não foram encontradas diferenças para concentrações de IGF-I total no fluído folicular e no plasma das taurinas e das zebuínas, porém as concentrações nas bubalinas foram superiores a das bovinas. Com esses resultados, conclui-se que novilhas de grupos genéticos diferentes (Bos taurus, Bos indicus e Bubalus bubalis) apresentam características de crescimento folicular e luteínico específicos para a raça, quando avaliadas temporalmente e nas mesmas condições de manejo ambiental e nutricional. / Considering the impact that nutrition and environment have over reproduction, it is essential for the reproductive biotechnologies to analyze the reproductive cycle of bovine (taurine and zebu) and bubaline heifers at the same time and under the same nutritional management. Therefore, the objective of this work was to study the follicular dynamic of Holstein (n=15), Gir (n=11) and Buffalo (n=15) heifers kept under the same conditions. All heifers were housed at the Department of Animal Reproduciton, (CBRA/FMVZ/USP), Pirassununga Campus. Animals were pre-synchronized with two doses of prostaglandin F2&alpha; (PGF; Dcloprostenol, 150&micro;g, IM), fourteen days apart (D0 = day of first ovulation). From D0, it was performed daily ultrasound scan of the ovaries to track follicular dynamics (follicles &#8805; 3mm) until the occurrence of the second ovulation. After the second ovulation, the follicular dynamic was performed twice daily to detect the time of deviation of the first follicular wave. The response variables were analyzed by PROC GLIMMIX, SAS. No difference was found among the inter-ovulatory interval (22.3±0.65; 22.1±0.95; 23.8±0.63 days) for Holstein, Gir and Buffalo, respectively. Differences were present (P<0.05) in at least one of the genetic groups, Holstein, Gir and Buffalo, respectively, for number of follicular waves (2.6±0,17a, 3.4±0,24b, 2.8±0,11a waves), number of follicles recruited after first (26.1±1.7a, 66.2±15.9b, 22.7±1.91a follicles), and second ovulation (30.2±3.08a, 74.2±18.8b, 27.1±2.8a follicles), diameter of first wave DF (15.8±0.66a, 12.3±0.32b, 12.1±0.03b mm), diameter of second wave DF (11.8±0.73a, 9.4±0.52b, 10.6±0.31ab mm), diameter of ovulatory follicle (15±0.33a, 13.7±0.74ab, 13.5±0.46b mm), maximum diameter of CL (26.8±0,54a, 22.3±0.98b, 19.5±0.32c mm), maximum concentration of P4 during ovulatory cycle (7.7±0.33a, 8.0±0.85a, 5.3±0.28b ng/ml) and length (8.0±0.49a, 5.2±1.07b, 8.1±0.44a days) of first wave dominant follicle dominance. No differences were found among the breeds for the moment of deviation (1.8±0.15; 2.1±0.21; 1.8±0.18 days). However, Holstein heifers presented larger DF and SF diameter (FD: 7.9±0.33; FS: 7.0±0.27mm; P<0.05) at deviation when compared with Gir (DF: 7.0±0.32; SF: 6.2±0.28mm) and Buffalo (DF: 6.8±0.19; SF: 6.3±0.29mm). Analyzing other steroids, concentration of blood testosterone during the first 13 days of the cycle was similar for the bovine heifers and lower for the bubaline heifers. Blood insulin and IGF-I were also measured. Holstein and bubaline heifers shown smaller concentrations of insulin (4.1±0.67 mUI/ml, 6.0±0.52 mUI/ml, respectively) than Gir heifers (9.0±2.15 mUI/ml), and also, when grouping the data collected from luteal phase and follicular phase, the result shows that during the period of high P4, insulin concentrations are lower than during the period of high E2. No differences were found among bovine breeds for the IGF-I concentration in follicular fluid, but they were lower than the concentrations presented in the bubaline follicular fluid. The results herein presented show that heifers from different genetic groups (Bos taurus, Bos indicus and Bubalus bubalis), maintained at the same nutritional and environmental status, have different folliculogenesis and luteal growth, which are specific to its breed.