A Camellia sinensis, vem sendo amplamente estudada, em função das suas propriedades medicinais, devido aos polifenóis com funções antioxidantes, tendo seu uso propostos como terapêutica para algumas doenças metabólicas como o Diabetes mellitus. A ingestão diária de antioxidantes, principalmente com compostos fenólicos pode retardar o aparecimento destas doenças. O atual trabalho o avaliou possível efeito terapêutico do chá verde (Camellia Sinensis) em ratos diabéticos induzido pela estreptozotocina, parâmetros clínicos (peso, ingestão hídrica) e laboratoriais (glicemia de jejum, colesterol total, triglicérides, proteínas totais, albumina e uréia) esse efeito na glândula submandibular pelo método morfométrico. Cento e sessenta ratos machos com 2 meses de idade foram distribuídos inicialmente em controle (n = 80) e diabéticos (n = 80). Os animais do grupo controle água (CA) e diabético água (DA) consumiram água como dieta líquida e os animais dos grupos controle chá (CC) e diabético chá (DC) receberam apenas dieta líquida de chá verde. Os parâmetros bioquímicos e morfométricos foram avaliados nos períodos experimentais de 15, 30, 60 e 90 dias (n = 5), após a indução. Os resultados mostraram que: a) a ingestão hídrica dos animais dos grupos DA e DC foram em média 6 vezes maior em relação aos controles; b) aos 15 dias, todos os animais dos grupos CA, CC e DA apresentaram aumento nos índices glicêmicos final de, respectivamente, 45 mg/dL, 65 mg/dL e 88mg/dL em relação ao período inicial, enquanto que todos os animais do grupo DC tiveram seus índices glicêmicos reduzidos em média de 119 mg/dL; c) nos ratos diabéticos o perfil bioquímico das proteínas totais e albumina foram menores em relação aos controles e o da uréia maior, enquanto que, o colesterol total, triglicérides não apresentaram diferenças; d) os ácinos das glândulas submandibulares dos animais dos grupos DA e DC exibiram aumento da eosinofilia citoplasmática e ausência da bosofilia basal, indicativos de alteração no conteúdo protéico e na síntese protéica, além de núcleos picnóticos, indicativos de morte celular por apoptose. Morfometricamente, o volume individual das células acinosas aumentou, enquanto que, o número total de células diminuiu, mantendo o volume total dos ácinos constante durante todo período experimental; e) os ductos granulosos, no grupo CA apresentaram aumento de 125% no seu volume total entre 15 e 90 dias, decorrente do desenvolvimento desta estrutura, aumentando o número e o volume celular. Já, nos DA e DC, o número e o volume individual das células mantiveram-se constante durante todo período experimental. Com base nos resultados obtidos, podemos inferir que a glândula submandibular é um órgão afetado pelo diabetes e a terapêutica utilizada neste experimento (Camellia sinensis) não foi efetiva para o tratamento do diabetes crônica. / The Camellia sinensis, has been widely studied because of their medicinal properties due to the polyphenols with antioxidant functions, and proposed its use as treatment for various metabolic disorders such as diabetes mellitus. The daily intake of antioxidants, mainly phenolic compounds may prevent or delay onset of these diseases. In this study, the possible therapeutic action of green tea (Camellia Sinensis) in diabetic rat induced chemically by streptozotocin was evaluated by clinical (weight, water intake) and laboratory parameters (fasting glucose, total cholesterol, triglycerides, total protein, albumin and urea) and its effect in the submandibular glands by morphometric methods. One hundred and sixty male rats with 2 months of age were distributed initially in control (n = 80) and diabetic (n = 80). The animals of the water control (WC) and water diabetic (WD) groups received only regular drinking water and green tea control (GTC) and green tea diabetic (GTD) groups received green tea solution ad libitum. Morphometric and biochemical parameters were evaluated after 15, 30, 60 and 90 days (n = 5) after induction. The results showed that: a) the water intake of animals from group WD and GTD were six times higher on average than control groups; b) at 15 days, all animals of the WC, WD and GTC groups showed an increase of the glycemic index of, respectively, 45 mg/dL, 65 mg/dL and 88 mg/dL compared to the initial period, while that all animals in CTD group, showed a decrease of 119mg/dL; c) in the diabetic rats of WD and GTD groups the total protein and albumin levels were lower than control groups and urea level higher, whereas, the total cholesterol and triglyceride did not show significant differences, d) the acini of submandibular glands of animals in groups WD and GTD showed increase of the cytoplasmic eosinophilia and absence of the basal basophilia, which may be indicative of changes in protein content and/or structure, and pyknotic nuclei indicative of cell death. Morphometrically, the volume of acinar cells increased, whereas the cell number decreased, maintaining the total volume of acini constant throughout the experimental period, e)the granular convoluted tubules in development showed an increase of 125% between 15 and 90 days in the WC group, due to increase in the number and volume of its cells. In DA and DC groups, the number and volume of cells remained constant throughout the experimental period. Based on the results, we infer that the submandibular gland is an organ affected by diabetes and that the green tea (Camellia sinensis) therapy used in this experiment is not effective for the treatment of chronic diabetes.

As doenças periodontais (DPs) são alterações inflamatórias crônicas que acometem os tecidos de sustentação do órgão dental. A presença do diabetes é refletida em maior severidade e prevalência das DPs tanto em humanos quanto em modelos experimentais. Contudo, os mecanismos biológicos envolvidos no aumento da prevalência e da severidade permanecem pouco conhecidos. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar o número de células marcadas por imunohistoquímica para TNF-&#x3B1;, RANKL, OPG, IL-10 e para o fator de transcrição RUNX-2, na doença periodontal experimental decorrente da indução do diabetes em ratos. Além disso, avaliamos os possíveis efeitos do tratamento com chá verde sobre o periodonto dos animais. Inicialmente, os ratos (n=80) foram submetidos à indução do diabetes por administração intraperitoneal de estreptozotocina (50mg/kg) e, juntamente com o grupo controle (n=40), foram subdivididos em animais tratados com chá verde ou com água, acompanhados durante o período de 15, 30, 60 ou 90 dias. Após o sacrifício dentro do tempo determinado para cada grupo, as hemimaxilas coletadas passaram pelos procedimentos de imunohistoquímica. Os resultados revelaram que a presença do diabetes causou perda óssea alveolar, compatível com o desenvolvimento da doença periodontal e resultou em alterações significativas no número de células imunomarcadas para diferentes mediadores do processo inflamatório. Entretanto, o chá verde apresentou efeitos benéficos para o periodonto, alterando a marcação das citocinas envolvidas. Nos animais diabéticos, independente do tratamento, foi observado aumento estatisticamente significativo (p<0,05 ANOVA) no número de células imunomarcadas para TNF-&#x3B1; e RANKL. Inversamente, houve menor marcação para OPG (60 e 90 dias), RUNX-2 (30, 60 e 90 dias) e para IL-10 (30, 60 e 90 dias) nos animais que ingeriram água. Porém, os diabéticos tratados com chá não demonstraram diferenças significativas em relação ao seu respectivo controle. Assim, quando comparados os grupos diabéticos tratados com água e chá, os animais que receberam o chá demonstraram significativamente (p<0,05 ANOVA) menor quantidade de células munomarcadas para TNF-&#x3B1; e RANKL em relação aqueles diabéticos tratados com água, enquanto que a marcação para OPG, RUNX-2 e IL-10 foi maior. Portanto, a desregulação na expressão de citocinas e do fator de transcrição osteoblástico parece ser um dos mecanismos biológicos envolvidos no aumento da prevalência e da severidade das doenças periodontais decorrentes do diabetes. Entretanto, o chá verde modulou a inflamação no periodonto dos animais diabéticos, apresentando-se, possivelmente, como uma alternativa terapêutica e coadjuvante ao tratamento das doenças periodontais correlacionadas ao diabetes. / Periodontal diseases (PD) are chronic inflammatory diseases leading the destruction of connective tissue and alveolar bone supporting the teeth. The establishment of diabetes increases PD prevalence and severity in humans and experimental model. However, biological mechanisms regarding to increase of prevalence and severity remains poorly known. The aim of this study was to evaluate the number of immuno-staining cells to TNF-&#x3B1;, RANKL, OPG, IL-10 and transcription factor RUNX-2 in experimental periodontal disease in diabetic rats. Furthermore, the possible green tea efects were evaluated in periodontiumof the rats. Diabetes was induced in Wistar rats (n=120) by intraperitoneal administration of 50 mg/kg ofstreptozotocin and together with control animals (n=80), the rats were subdivided in water or green tea treated group, that were analyzed at 15, 30, 60 and 90 days after diabetes induction. The animals were sacrificed and the hemimaxillae were removed and submitted to immunohistochemistry procedures. Our data demonstrated that diabetes induction and progression resulted in significant bone loss and alterations in number of immuno-staining cells to different mediators of inflammatory process. However, the green tea showed positive effects in periodontium through inflammation modulation. In diabetic rats, regardless of treatment, we observed an increased number of immuno-staining cells to TNF-&#x3B1;, IL-1b and RANKL (p<0,05 ANOVA). On the other hand, in water treated diabetic rats, there were a decreased number of immuno-staining cells to OPG (60 e 90 days), RUNX-2 (30, 60 e 90 days) and IL-10 (30, 60 e 90 days). However, the green tea treated rats did not showed statistical differences between control and experimental groups in those staining. When we compared both diabetic groups, green tea and water treated, the animals that drank the green tea showed decreased number of immuno-staining cells to TNF-&#x3B1; and RANKL(p<0,05 ANOVA) whereas the number of immuno-staining cells to OPG, RUNX-2 e IL-10 were increased. Taken together, desregulation of inflammatory cytokines and osteoblastic transcripition factor seem to be one of biological mechanisms involved in the increase of periodontal disease prevalence and severity associated with diabetes. However the green tea was able to modulate inflammation in diabetic rats periodontium and it seems to be a possible terapeutic agent to periodontal disease treatment associated with diabetes.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-07-26T12:29:26Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO DE PATOLOGIA LIBÂNIA L. RIBEIRO.pdf: 3636176 bytes, checksum: c91dc469ad8c94f010a143b161defe01 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-26T12:29:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO DE PATOLOGIA LIBÂNIA L. RIBEIRO.pdf: 3636176 bytes, checksum: c91dc469ad8c94f010a143b161defe01 (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / A obesidade é uma das doenças mais estudadas no mundo, tendo em vista seu crescente aumento e envolvimento em várias comorbidades. Nesse contexto, o presente trabalho visa avaliar a substância epigalocatequina-3-galato (EGCG), a catequina mais ativa da planta Camellia sinensis, no emagrecimento de ratos após indução de obesidade com dieta ocidentalizada, assim como comparar seu efeito com o da sibutramina. O estudo foi realizado através de método experimental comparativo controlado, desenvolvido no biotério de Nutrição da Universidade Federal de Pernambuco, no período de fevereiro de 2015 a janeiro de 2016. Para tal, foram utilizados 32 ratos Wistar machos, procedentes de cria habitual e manipulada, para compor quatro grupos de oito ratos, a saber: grupo controle salina (CSAL) grupo controle, proveniente de cria habitual, que fez uso da dieta Presence® e foi tratado com NaCl 0,9%; grupo ocidentalizado salina (OSAL), obeso, cria reduzida, alimentado com dieta ocidentalizada e tratado com NaCl 0,9%; grupo ocidentalizado sibutramina (OSIB), obeso, cria reduzida, alimentado com dieta ocidentalizada e tratado com sibutramina 7,5 mg/Kg e o grupo ocidentalizado epigalocatequina-3-galato (OEGCG), obeso, cria reduzida, alimentado com dieta ocidentalizada e tratado com EGCG 50mg/Kg/dia. Ao atingir o fenótipo obeso e findar oito dias de tratamento, foram observados dados murinométricos, consumo alimentar, exames hematológicos e histológicos de fígado, rins e coração. Os resultados obtidos mostraram que os grupos OSIB e OEGCG apresentaram importante queda no consumo alimentar e peso corporal. O trabalho mostrou que a EGCG não apresentou toxicidade para os animais e foi capaz de reduzir significativamente o peso dos ratos obesos com intensidade comparável à da sibutramina, além de prevenir ou promover regressão de esteatose hepática e esteato hepatite. / Obesity is one of the most studied diseases in the world, given its increasing involvement in various comorbidities. In this context, this study aims to evaluate the epigallocatechin-3-gallate (EGCG), Camellia sinensis’s most active catechin, in weight loss of rats after an obesity induction with occidentalized diet, as well as to compare its effect with sibutramine’s. The study was made through a controlled comparative experimental method, developed at the nutrition vivarium of the Federal University of Pernambuco, between February 2015 and January 2016. For that matter, 32 male Wistar mice were used, coming from a manipulated and standard spawn, to compose four groups of eight mice, namely: saline control group (CSAL), coming from a standard spawn, which made use of Presence® diet and was treated with NaCl 0.9%; saline occidentalized group (OSAL), obese, fed with westernized diet and treated with NaCl 0.9%; sibutramine occidentalized group (OSIB), reduced spawn, fed with occidentalized diet and treated with sibutramine 7.5 mg/Kg; and epigallocatechin-3-gallate occidentalized group (OEGCG), reduced spawn, fed with occidentalized diet and treated with EGCG 50 mg/Kg/day. Upon reaching the obese phenotype and completing eight days of treatment, murinometric data, food consumption, hematological and histological tests of liver, kidney and heart were observed. The results reported that groups OSIB and OEGCG demonstrated significant decrease in food consumption and weight. A biochemical and histological evaluation of the animals showed no toxicity of the drugs, after the treatment period. The study found that EGCG showed no toxicity in animals and that it was able to significantly reduce the weight of obese mice with intensity comparable to sibutramine’s, as well as to prevent or promote regression of hepatic steatosis and steatohepatitis.

Tea is made from the young leaves of Camellia sinensis, an evergreen, outbreeding tree species. The replacing of seedling with clonal plantations and the use of small numbers of parental plants in breeding programs could cause a decrease in the genetic diversity. The Tea Research Foundation of Central Africa (TRFCA), in Malawi, started tea breeding in 1956. This program has provided new cultivars with increased quality and yield over the first 40 years. However, recently the progress seems to have reached a plateau, suggesting that the maximum potential of the original genetic base has been reached. This study aimed at the evaluation of the genetic diversity within TRFCA cultivars, Malawian seedling accessions and cultivars currently used in China using morphological and microsatellite markers. In the morphological trait analysis, 186 seedling accessions and six TRFCA cultivars were accessed using six morphological traits. The morphological data were scored using two scoring methods, the range scoring method and the mean scoring method. Although the mean scoring method could not discriminate between all the accessions, it is in better agreement with the classification of an expert tea breeder. The six TRFCA cultivars were well distributed among the seedling accessions from Malawi. However, the results of the morphological study were not conclusive since the sample size of the TRFCA cultivars was too small. Microsatellite analysis of 41 TRFCA cultivars, 233 seedling accessions and 22 China origin cultivars revealed only moderate levels of inbreeding. The genetic relationship shows the TRFCA cultivars and the China origin cultivars in their own clusters. The FST values indicated significant differences between the TRFCA and China origin cultivars with all other groups. The allelic richness and the heterozygosity of the TRFCA cultivars are on the low end of the ranges of the groups studied. The TRFCA cultivars may benefit from the introduction of genetically distant tea plants into the breeding program since the level of heterozygosity within this group is relatively low. A second aim of this study is the identification of Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) markers that associate with traits of interest. Primers (17) were selected from previously trait associate plant studies. This selection did not increase the association rate of the primers. The traits that were investigated include Heliopeltis resistance, drought and cold tolerance. One of the tested primers RAPD8, associates with 6 of 8 drought tolerant cultivars. Another RAPD primer previously identified by Mishra and Sen-Mandi (2004) associated with only 4 of 8 drought tolerant cultivars in this study. Neither of the two primers associated with the 8 drought susceptible cultivars. Together these two primers could discriminate all 8 drought tolerant cultivars from the 8 susceptible cultivars and could possibly be used to identify drought tolerant plants. This study contributes to the knowledge of the genetic diversity of tea which may contribute to the management of genetic diversity within tea. In addition a possible trait associated RAPD marker for drought was identified that could be used in the selection for drought tolerant cultivars. AFRIKAANS : Tee word van die jong blare van die Camellia sinensis plant gemaak. Camellia Sinensis is ‘n immergroen boom spesie. Tans word die meeste van die saailing plantasies met klone plantasies vervang wat ‘n negatiewe uitwerking op die genetiese diversiteit van tee het. Tee ontwikkelingsprogramme beïnvloed ook die diversiteit negatief omdat ‘n klein hoeveelheid ouer plante gebruik word. Die Tee Navorsings van Sentrale Afrika (TRFCA) is in Malawi geleë en spesialiseer vanaf 1956 in tee kultivar ontwikkeling. Die kwaliteit en die opbrengs van die vrygestelde kultivars het oor die eerste 40 jaar van die program verbeter. Die vordering in hierdie program is besig om ‘n plato te bereik. ‘n Moontlike verduideliking hiervoor kan wees dat die maksimum kapasitieit van die bestaande genetiese basis bereik is. Die eerste doelwit van hierdie studie is om die genetiese diversitiet van die TRFCA kultivars, geselekteerde saailinge van Malawi en kulticars wat tans in China gekweek word te evalueer deur morfologiese en mikrosateliet merkers te gebruik. In die morfologiese evaluasie is 186 geselekteerde saailinge en ses TRFCA kultivars met behulp van ses morfologiese karaktereineskappe geëvalueer. Die data is geëvalueer deur die gebruik van twee puntestelsels, ’n reeks puntestelsels en ‘n gemiddelde puntestelsel. Alhoewel die gemiddelde puntestelsel nie tussen al die plante kon onderskei nie, het dit ‘n beter groepering ten opsigte van sub-spesies (He was 0.6900) gegee. Die ses TRFCA kultivars is tussen die saailinge van Malawi versprei. Weens die klein hoeveelheid TRFCA kultivars is die gevolgtrekings van die morphologiese evaluasie nie betekenisvol nie. Mikrosateliet evaluasie is gedoen met 41 TRFCA kultivars, 233 geselekteerde saailinge en 22 Chinese kultivars. Gemiddelde vlakke van inteling is opgemerk. In die illustrasie van die genetiese verhouding tussen die plante is die TRFCA kultivars gegroepeer, so ook die Chinese kultivars. Die FST waardes toon betekenisvolle statisitiese verskille tussen TRFCA en die Chinese oorsprong kultivars en al die ander groepe. Die alleliese rykheid van die TRFCA kultivars was aan die onderpunt van die reeks. Hierdie resultate dui daarop dat die TRFCA ontwikkellingsprogram moontlik voordeel kan trek uit die byvoeging van ouer pante wat geneties divers is in die program. Dit mag ‘n positiewe uitwerking hê as gevolg van die ondergemiddelde vlak van die “heterozygosity” in die TRFCA kultivars. ‘n Tweede doelwit van die studie was die identifisering van moontlike “Random Amplified Polymorphic DNA” (RAPD) merkers wat met belangrike kenmerke geassosieer kan word. RAPD merkers (17) wat geïdentifiseer is in vorige kenmerkassosiasiestudies in ander gewassse is geselekteer. Die seleksie van hierdie merkers het nie die assosiasie persentasie verhoog nie. Die kenmerkke wat ondersoek is, was Heliopeltis weerstand, droogte toleransie en koue toleransie. Een van die merkers, RAPD8 assosieer met 6 van die 8 droogte toleransie kultivars. Die RAPD merker wat deur Mishra and Sen-Mandi (2004) geïdentifiseer is, assosieer met 4 van die 8 droogte toleransie kultivars. Beide die merkers assosieer met geen van die droogte sensitiewe kultivars nie. Gesamentlik kon die twee RAPD merkers al 8 van die droogte toleransie kultivars van die sensitiewe kultivars onderskei. Hierdie studie dra by tot die kennis van die genetiese diversitiet van tee wat kan lei to die beter bestuur wan die tee ontwikkelingsprogram. Veder is ‘n moontlike merker vir droogte toleransie geïdentifiseer wat gebruik kan word in die seleksie van moontlike droogte bestande kultivars. / Dissertation (MSc)--University of Pretoria, 2009. / Biochemistry / unrestricted

Orientador: Luciane Dias de Oliveira. / Banca: Luana Marotta Reis de Vasconcellos / Banca: Fernanda Malagutti Tome / Banca: Naira Correia Cusma Pelógia / Banca: Simey Thury Vieira Fisch / Resumo: A baixa citotoxicidade e ação anti-inflamatória são características interessantes para enxaguatórios bucais, dentifrícios e medicamentos de uso odontológico. Sendo assim, é necessário avaliar estas propriedades nos extratos glicólicos vegetais que podem ser ingredientes das formulações desses produtos. O presente estudo avaliou as seguintes atividades biológicas para cada um dos extratos glicólicos de Cynara cardunculus var. scolymus (L.) Fiori (alcachofra), Myracrodruon urundeuva Allemão (aroeira-do-sertão) e Camellia sinensis (L.) Kuntze (chá verde) em culturas de macrófagos de camundongo (RAW 264.7) pelo tempo de exposição de 5 min e 24 h: a) atividade citotóxica pelo método do MTT em 11 diluições seriadas, sendo que a concentração inicial dos extratos foi de 200mg/mL. b) atividade anti-inflamatória, após estímulo com lipopolissacarídeo (LPS) de Escherichia coli pelo método ELISA quantificou IL-1β, TNF-α e IL-10. Os resultados foram analisados estatisticamente por ANOVA e teste de Tukey, com p ≤ 5%. A citotoxicidade dos extratos foi dose e tempo dependentes. No tempo de exposição de 5 min, o extrato de alcachofra apresentou citotoxicidade na concentração de 200 mg/mL. No tempo de exposição de 24 h, o chá verde apresentou citotoxicidade nas concentrações ≥ 50 mg/mL, aroeirado-sertão estimulou a proliferação de macrófagos na concentração de 0,39 mg/mL a 12,5 mg/mL e a alcachofra apresentou citotoxicidade nas concentrações ≥ 12,5 mg/mL. O extrato de chá verde apresentou potencial anti-inflamatório na concentração de 12,5 mg/mL e foi dose dependente, promovendo diminuição da produção de citocinas pró- inflamatória, como IL-1β e TNF-α. A aroeira-do-sertão apresentou ação imunopotenciadora na concentração de 12,5 mg/mL no tempo de exposição de 24 h. Com relação a alcachofra há necessidade de novos estudos para identificar sua ação imunomoduladora / Abstract: The low cytotoxicity and anti-inflammatory action are interesting features for mouthwashes, toothpastes and dental medication. Therefore, it is necessary to evaluate these properties in plant glycolic extracts which can be ingredients of the formulation of these products. This study evaluated the following biological activities for each of the glycolic extracts of Cynara cardunculus var. scolymus (L.) Fiori (artichoke), Myracrodruon urundeuva Allemão (pepper tree) and Camellia sinensis (L.) Kuntze (green tea) in mouse macrophage cultures (RAW 264.7) by the exposure time of 5 min and 24 h. a) cytotoxicity by MTT method in 11 serial dilutions, the initial concentration of the extracts was 200 mg/mL. b) Anti-inflammatory activity after stimulation with lipopolysaccharide (LPS) of Escherichia coli was performed by immunoenzymatic test (ELISA) using specific antibodies to quantify IL-1β, TNF-α and IL-10. The results were subordinated to statistical analyses (ANOVA and Turkey test), with p ≤ 0,05. The cytotoxicity of the extracts was dependent on dose and time. At 5 min exposure time, artichoke extract showed cytotoxicity at a concentration of 200 mg/mL. At 24 h exposure time, green tea showed cytotoxicity at the concentrations ≥ 50 mg/mL, pepper tree stimulated the proliferation of macrophages in the concentrations of 0,39mg/mL to 12.5 mg/mL and artichoke showed cytotoxicity at the concentrations ≥ 12.5 mg/mL. Green tea extract showed anti- inflammatory potential at a concentration of 12.5 mg/mL and was dependent on dose, promoting a decrease production of pro-inflammatory cytokines as IL-1β and TNF-α. Pepper tree presented immunopotentiating action at a concentration of 12.5 mg/mL at 24 h of exposure time. Regarding artichoke, there is a need for further studies to identify their immunomodulatory action / Doutor

Thesis (M.Sc)--University of Limpopo, 2010. / Black tea (Camellia sinensis) and black tea combined with bush tea (Athrixia phylicoides) were analyzed for their polyphenol content, antioxidant activity and tannin content. Solvent extraction methods were used for extracting polyphenols, antioxidant activity and tannin content. Total phenols were determined using the Folin-Ciocalteu method, antioxidant activity using Trolox Equivalent Antioxidant Capacity (TEAC) assay and tannin content using vanillin-HCl method. Polyphenol content, antioxidant activity and tannin content were calculated using regression equation Y=MX+C, where C=intercept, Y= Absorbance of the sample and M= Gradient. Results of black tea in this study showed that total polyphenols, antioxidant activity and tannin content decreased with decrease in temperature and time and this was attributed to the release of polysaccharides at 90°C. At 90°C for 3 minutes 7.68mg/100g of total polyphenol, 3.85μmol/g of antioxidants and 2.81mg/100g of tannin were obtained and this amount decreased to 5.50mg/100mg for total polyphenols, 1.31μmol/g for antioxidant activity and 0.72mg/100mg for tannin content at 30°C for 10 minutes. Combining the two tea types (50:50) resulted in a significant (p<0.005) decrease in total polyphenols, antioxidant and tannin content. Results of this study showed that at high temperature of 90°C for 3 minutes 2.64mg/100g for total polyphenol, 2.48μmol/g for antioxidants and 1.8mg/100g for tannin were obtained and these amounts decreased to 1.39mg/100mg for total polyphenols, 0.35μmol/g for antioxidant activity and 0.64mg/100mg for tannin content at 30°C for 10 minutes. Thus high brewing temperature causes increase in total polyphenols, antioxidant activity and tannin content of the combined teas. This study showed that black tea and combined black tea and bush tea solutions had large TEAC radical scavenging activity which can be related to total polyphenols and catechins. The antioxidant activity of the tea solution increased with increase in extraction temperature and duration of soaking. It is recommended that 3-min soaking temperature of 90 °C of black tea and combined bush tea and black tea can be used due to the highest total polyphenols and antioxidant activity obtained.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-06-12Bitstream added on 2014-06-13T20:24:25Z : No. of bitstreams: 1 majewski_m_dr_sjc.pdf: 368417 bytes, checksum: abb039d29f6c3474a49eaf77b2977d69 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro a atividade antifúngica e a citotoxicidade do ácido peracético e extrato vegetal de Camellia sinensis a (chá verde) e também avaliar o efeito antifúngico da anfotericina B e fluconazol em 22 cepas de Candida spp. isoladas da cavidade bucal de pacientes HIV positivos. Para determinação da concentração fungicida mínima e concentração inibitória mínima (CFM e CIM) em células planctônicas, foram realizadas diluições seriadas do extrato e do ácido peracético em placas de 96 poços em caldo RPMI tamponado, em suspensões padronizadas de cada cepa de Candida (106 células/mL). Após determinação da concentração do extrato e do ácido peracético no CIM e CFM, foi preparado o biofilme de cada cepa em placas de 24 poços utilizando-se corpos-de-prova de resina acrílica (n=10), as quais foi adicionado 0,1 mL da suspensão de Candida e 2mL caldo BHI sacarosado. As placas foram incubadas e mantidas a 37° por 5 dias. Após a incubação, os corpos-de-prova foram lavados em solução fisiológica e colocados em imersão por 5 minutos no ácido peracético ou no extrato vegetal. Os corpos-de-prova foram sonicados e realizadas diluições seriadas, 0,1 ml de cada diluição foi semeada em placas de ágar Sabouraud em duplicata e incubadas em estufa bacteriológica (37ºC/48 h). Posteriormente foi realizada a contagem das unidades formadoras de colônia (UFC/mL). Os dados foram avaliados estatisticamente utilizando-se teste de Mann Whitney (p<0,05) para o biofilme, observação visual para CIM e CFM, Tukey e Anova para citotoxicidade. Foi avaliada a citotoxicidade do ácido peracético e extrato de chá verde em macrófagos de camundongos (RAW 264.7), para verificar a viabilidade celular... / The objective of this study was to evaluate the in vitro antifungal activity and cytotoxicity of peracetic acid and plant extract from the Camellia sinensis (green tea) and also to evaluate the antifungal effect of amphotericin B and fluconazole in 22 strains of Candida spp. isolated from the oral cavity of HIV positive patients. To determine the minimum fungicidal concentration and minimum inhibitory concentration (CFM and CIM) in planktonic cells, were performed serial dilutions of the extract and peracetic acid in 96-well plates in RPMI broth buffered in standardized suspensions of each strain of Candida (106 cells / mL). After determining the concentration of the extract and peracetic acid in CIM and CFM, the biofilm was prepared for each strain in 24-well plates using body-of-proof acrylic resin (n = 10), which was added 0, 1 mL of the suspension of Candida sucrose and 2 ml BHI broth. The plates were incubated at 37 ° and maintained for 5 days. After incubation, the bodies of the test piece was washed in saline and placed for 5 minutes immersion in peracetic acid or the plant extract. The bodies of the test piece were sonicated and serial dilutions performed, 0.1 ml of each dilution was seeded on Sabouraud agar plates in duplicate and incubated in a bacteriological incubator (37 º C/48 h). Was subsequently performed the counting of colony forming units (CFU / mL). The data were statistically analyzed using Mann Whitney test (p <0.05) for the biofilm, visual observation for CIM and CFM, ANOVA and Tukey for cytotoxicity. We evaluated the cytotoxicity of peracetic acid and green tea extract in mouse macrophages (RAW 264.7) to verify the cell viability of these substances. The results showed that there was feasibility of peracetic acid and green tea extract in the cells analyzed. The antifungal agents have... (Complete abstract click electronic access below)

PINTO, N. B. Avaliação da atividade neuroprotetora do extrato padronizado de Camellia sinensis e de seus princípios bioativos: envolvimento de ações anti-inflamatórias e antioxidantes. 2015. 296 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2015-11-05T14:03:38Z No. of bitstreams: 1 2015_tese_nbpinto.pdf: 9261753 bytes, checksum: 4bd9df04382dd73463d692c4c5fbd540 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2015-11-05T14:03:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_tese_nbpinto.pdf: 9261753 bytes, checksum: 4bd9df04382dd73463d692c4c5fbd540 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-05T14:03:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_tese_nbpinto.pdf: 9261753 bytes, checksum: 4bd9df04382dd73463d692c4c5fbd540 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Parkinson's disease (PD) is a neurodegenerative disorder characterized by destruction of nigrostriatal dopaminergic neurons. Current treatment is only symptomatic and, to date, there are no drugs capable of inhibiting neuronal degeneration. So great is the demand for neuroprotective agents to prevent or slow the progression of this disease. The Camellia sinensis is a species of the family Theaceae, popularly known as green tea (CV). Several studies have shown the beneficial effects of this plant and its bioactive principles against neurodegenerative diseases. The objective of this study was to evaluate the neuroprotective effect of standardized extract of green tea and its catechins, epicatechin (EC) and epigallocatechin 3-gallate (EGCG), the PD model induced by 6-OHDA in rats, as well as studying the CV effect in models of inflammation and nociception. The animals (male Wistar rats, 180-250 g) were treated orally with HP (25 or 50 mg / kg), catechins (EC and EGCG at a dose of 10 mg / kg), the combination of CV (25mg / kg) + L-DOPA (25 mg / kg) with L-DOPA alone (at doses of 25 or 50 mg / kg) for 14 consecutive days; the treatments were started 1 hour before the unilateral striatal lesion by 6-OHDA (24 mg / 2μL). In behavioral tests, the results showed a significant increase in the number of rotations induced by apomorphine, decreased locomotor activity in the open field test, increased immobility time in the test in forced swimming, increased platform against time in the test water maze and increased the number of falls in the route of the test rod in the injured animals with 6-OHDA, compared to false-operated animals. These changes were partly or fully reversed after treatment with CV, CV + L-DOPA, EC, EGCG and L-DOPA alone. The 6-OHDA triggered neuronal death, as shown by reduced levels of dopamine and metabolites (DOPAC and HVA) in the striatum lesioned right compared to non-lesioned striatum left (contralateral). This depletion was significantly attenuated in injured and treated with CV, L-DOPA, EC, EGCG and association CV 25 25 + L-DOPA; these same drugs decreased levels of TBARS (indicator of lipid peroxidation) and nitrite / nitrate (oxidative stress indicator) in the striatum of rats with striatal injury by 6-OHDA. In vitro experiments have shown that CV (0.1-100 ug / uL) showed a strong antioxidant effect, by reducing the production of oxidizing substances in human neutrophils stimulated by PMA. In Nissl staining, it was observed that the injured animals and treated with CV, and CV EGCG + L-DOPA there was preservation of hippocampal neurons. Treatment with CV and CV + L-DOPA increased immunoreactivity for TH and decreased immunostaining for COX-2 in the striatum as well as the CV and EGCG attenuated the markup for iNOS in the hippocampus of treated animals compared to the control group. It was observed that the CV potentiate the effect of L-DOPA, showing a possible synergistic effect between these drugs. In another stage of the study, we evaluated the anti-inflammatory / nociceptive CV. Thus, the paw edema model induced by carrageenin and dextran, there was a decrease in volume of paw edema of rats after treatment with VC, compared to the control group (treated only with distilled water). The CV produced antinociceptive effect in the formalin test and the writhing induced by acetic acid, but also in the hot plate test and Hargreaves, possibly through the activation of opioid receptors and reducing the inflammatory process. In these tests nociception and inflammation, the CV potentiate the effects of morphine, indomethacin and dexamethasone. Therefore, our results demonstrated the neuroprotective effects of the CV and its bioactive principles, EC and EGCG, probably due to its anti-inflammatory and antioxidant properties, making future therapeutic options for the prevention or treatment of neurodegenerative diseases such as disease Parkinson. / A doença de Parkinson (DP) é uma desordem neurodegenerativa caracterizada pela destruição dos neurônios nigroestriatais dopaminérgicos. O tratamento atual é apenas sintomático e, até o presente momento, não existem drogas capazes de inibir a degeneração neuronal. Assim é grande a procura por agentes neuroprotetores que possam impedir ou retardar a progressão desta doença. A Camellia sinensis é uma espécie da família Theaceae, popularmente conhecida como chá-verde (CV). Vários estudos têm demonstrado os efeitos benéficos desta planta e de seus princípios bioativos contra doenças neurodegenerativas. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito neuroprotetor do extrato padronizado do chá-verde e de suas catequinas, epicatequina (EC) e epigalocatequina 3-galato (EGCG), no modelo de DP induzida por 6-OHDA em ratos, bem como estudar o efeito do CV em modelos de inflamação e nocicepção. Os animais (ratos Wistar machos, 180-250 g) foram tratados por via oral com CV (25 ou 50 mg/kg), catequinas (EC ou EGCG, na dose de 10 mg/kg), a associação de CV (25 mg/kg) + L-DOPA (25 mg/kg) e com L-DOPA sozinha (nas doses de 25 ou 50 mg/kg) durante 14 dias consecutivos; os tratamentos foram iniciados 1h antes da lesão estriatal unilateral por 6-OHDA (24 µg/2µL). Nos testes comportamentais, os resultados mostraram que houve um aumento significativo do número de rotações induzidas por apomorfina, diminuição da atividade locomotora no teste do campo aberto, aumento do tempo de imobilidade no teste no nado forçado, aumento do tempo de encontro da plataforma no teste do labirinto aquático e aumento do número de quedas no teste do rota rod nos animais lesionados com 6-OHDA, em comparação com os animais falso-operados. Essas modificações foram, em parte ou totalmente, revertidas após os tratamentos com CV, CV + L-DOPA, EC, EGCG e L-DOPA sozinha. A 6-OHDA provocou morte neuronal, evidenciada pela redução dos níveis de dopamina e metabolitos (DOPAC e HVA) no estriado direito lesionado quando comparado com o estriado esquerdo não-lesionado (contralateral). Essa depleção foi significativamente atenuada nos animais lesionados e tratados com CV, L-DOPA, EC, EGCG e associação CV 25 + L-DOPA 25; estas mesmas drogas diminuíram os níveis de TBARS (indicador de peroxidação lipídica) e nitrito/nitrato (indicador de estresse oxidativo) no estriado de ratos submetidos a lesão estriatal por 6-OHDA. Experimentos in vitro demonstraram que o CV (0,1-100 µg/µl) apresentou um forte efeito antioxidante, ao reduzir a produção de substâncias oxidantes em neutrófilos humanos estimulados por PMA. Na coloração de Nissl, observou-se que nos animais lesionados e tratados com CV, EGCG e CV + L-DOPA houve uma preservação dos neurônios hipocampais. Os tratamentos com CV e CV+L-DOPA aumentaram a imunorreatividade para TH e diminuíram a imunomarcação para COX-2 no estriado, bem como o CV e EGCG atenuaram a marcação para iNOS no hipocampo dos animais tratados, em relação ao grupo controle. Observou-se que o CV potencializou os efeitos da L-DOPA, evidenciando um possível efeito sinérgico entre essas drogas. Em outra etapa do estudo, avaliou-se a atividade anti-inflamatória/antinociceptiva do CV. Assim, no modelo de edema de pata, induzido por carragenina ou dextrano, verificou-se uma diminuição do volume do edema da pata dos ratos, após tratamento com CV, em relação aos do grupo controle (tratado apenas com água destilada). O CV produziu efeito antinociceptivo, nos testes da formalina e das contorções abdominais, induzidas por ácido acético, como também nos testes da placa quente e de Hargreaves, possivelmente através da ativação de receptores opioides e da redução do processo inflamatório. Nestes testes de nocicepção e inflamação, o CV potencializou os efeitos da morfina, indometacina e dexametasona. Portanto, nossos resultados evidenciaram os efeitos neuroprotetores do CV e de seus princípios bioativos, EC e EGCG, possivelmente decorrentes de suas propriedades anti-inflamatórias e antioxidantes, tornando-as opções terapêuticas futuras para a prevenção ou tratamento de doenças neurodegenerativas, como a doença de Parkinson.

Orientador: Paulo Henrique dos Santos / Coorientadora: Ticiane Cestari Fagundes Tozzi / Banca: André Luiz Fraga Briso / Banca: Eduardo Bresciani / Resumo: Objetivo: Avaliar a influência de inibidores de proteases no potencial de degradação do colágeno das dentina sadia, esclerótica e afetada por cárie. Materiais e métodos: Trinta e nove molares humanos foram utilizados, treze para cada condição dentinária. Três fatias foram obtidas de cada dente, cada uma imersa em diferentes soluções: 1) saliva artificial; 2) clorexidina 2%; 3) EGCG 0,5%. Após incubação nas soluções por 1h, amostras foram sujeitas à degradação enzimática pela colagenase derivada da Clostridium histolyticum. Propriedades mecânicas de nanodureza (HIT) e módulo de elasticidade (Er) dos três diferentes tipos de dentina foram mensuradas antes e após a degradação, bem como a resistência à tração do colágeno. Resultados do teste de resistência à tração e nanoindentação foram submetidos à ANOVA dois e três fatores para medidas repetidas, e pós-teste de Tukey (α=0,05). Resultados: Maiores valores de resistência à tração foram encontrados para dentina sadia, nos grupos controle (40,30 ± 21,38 MPa) e EGCG 0,5% (30,05 ± 19,67 MPa). Antes da degradação, maiores valores de HIT (0,237 ± 0,062 GPa) e Er (5,58 ± 1,75 GPa) foram encontrados para o grupo EGCG 0,5%, na dentina afetada por cárie. Após a degradação, grupo clorexidina 2% apresentou maiores valores de HIT e Er para dentinas sadia (0,134 ± 0,020 GPa e 3,57 ± 0,40 GPa) e esclerótica (0,201 ± 0,048 GPa e 4,30 ± 0,56 GPa). Conclusões: O uso da clorexidina 2%, principalmente em dentina esclerótica, mostrou-se mais efet... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objetive: To evaluate the influence of proteases inhibitors on the collagen degradation from sound, sclerotic and caries-affected dentin. Materials and Methods: Thirty-nine human molars were used, thirteen for each dentin condition. Three slices were obtained from each tooth, each one immersed in different solutions: 1) artificial saliva; 2) 2% chlorhexidine; 3) 0.5% EGCG. After incubation in the solutions for 1h, samples were subjected to enzymatic degradation by collagenase derived from Clostridium histolyticum. Mechanical properties of nanohardness (HIT) and elastic modulus (Er) of the three types of dentin were measured before and after degradation, as well as the microtensile strength. Results of the microtensile strength and nanoindentation tests were submitted to ANOVA two and three factors for repeated measurements, and Tukey post-test (α = 0.05). Results: Higher values ​​of tensile strength were found for sound dentin in control (40.30 ± 21.38 MPa) and 0.5% EGCG (30.05 ± 19.67 MPa) groups. Before degradation, higher values ​​of HIT (0.237 ± 0.062 GPa) and Er (5.58 ± 1.75 GPa) were found for the 0.5% EGCG group in caries-affected dentin. After degradation, 2% chlorhexidine group had higher values ​​of HIT and Er for sound (0.134 ± 0.020 GPa and 3.57 ± 0.40 GPa) and sclerotic (0.201 ± 0.048 GPa and 4.30 ± 0.56 GPa) dentin. Conclusions: The use of 2% chlorhexidine, mainly in sclerotic dentin, was shown to be more effective in promoting increase in the microtensile st... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Bruna de Oliveira null (bruna_dol@hotmail.com) on 2017-08-28T18:37:05Z No. of bitstreams: 1 Dissertação FINAL.pdf: 2838275 bytes, checksum: 88512cc2a992ddfbe636d76b31127af8 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-08-29T18:02:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 reis_bo_me_araca.pdf: 2838275 bytes, checksum: 88512cc2a992ddfbe636d76b31127af8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-29T18:02:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 reis_bo_me_araca.pdf: 2838275 bytes, checksum: 88512cc2a992ddfbe636d76b31127af8 (MD5) Previous issue date: 2017-08-15 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Objetivo: Avaliar a influência de inibidores de proteases no potencial de degradação do colágeno das dentina sadia, esclerótica e afetada por cárie. Materiais e métodos: Trinta e nove molares humanos foram utilizados, treze para cada condição dentinária. Três fatias foram obtidas de cada dente, cada uma imersa em diferentes soluções: 1) saliva artificial; 2) clorexidina 2%; 3) EGCG 0,5%. Após incubação nas soluções por 1h, amostras foram sujeitas à degradação enzimática pela colagenase derivada da Clostridium histolyticum. Propriedades mecânicas de nanodureza (HIT) e módulo de elasticidade (Er) dos três diferentes tipos de dentina foram mensuradas antes e após a degradação, bem como a resistência à tração do colágeno. Resultados do teste de resistência à tração e nanoindentação foram submetidos à ANOVA dois e três fatores para medidas repetidas, e pós-teste de Tukey (α=0,05). Resultados: Maiores valores de resistência à tração foram encontrados para dentina sadia, nos grupos controle (40,30 ± 21,38 MPa) e EGCG 0,5% (30,05 ± 19,67 MPa). Antes da degradação, maiores valores de HIT (0,237 ± 0,062 GPa) e Er (5,58 ± 1,75 GPa) foram encontrados para o grupo EGCG 0,5%, na dentina afetada por cárie. Após a degradação, grupo clorexidina 2% apresentou maiores valores de HIT e Er para dentinas sadia (0,134 ± 0,020 GPa e 3,57 ± 0,40 GPa) e esclerótica (0,201 ± 0,048 GPa e 4,30 ± 0,56 GPa). Conclusões: O uso da clorexidina 2%, principalmente em dentina esclerótica, mostrou-se mais efetivo em promover aumento na resistência à tração e nas propriedades mecânicas, antes e após a degradação. A EGCG 0,5% apresentou melhor efeito sobre as propriedades mecânicas na dentina afetada por cárie, especialmente antes da degradação enzimática. Relevância Clínica: O efetivo conhecimento do mecanismo de ação de inibidores de proteases em diferentes tipos de dentina poderia contribuir para melhoria da resistência do substrato e para maior longevidade dos processos de união sobre este tecido. / Objetive: To evaluate the influence of proteases inhibitors on the collagen degradation from sound, sclerotic and caries-affected dentin. Materials and Methods: Thirty-nine human molars were used, thirteen for each dentin condition. Three slices were obtained from each tooth, each one immersed in different solutions: 1) artificial saliva; 2) 2% chlorhexidine; 3) 0.5% EGCG. After incubation in the solutions for 1h, samples were subjected to enzymatic degradation by collagenase derived from Clostridium histolyticum. Mechanical properties of nanohardness (HIT) and elastic modulus (Er) of the three types of dentin were measured before and after degradation, as well as the microtensile strength. Results of the microtensile strength and nanoindentation tests were submitted to ANOVA two and three factors for repeated measurements, and Tukey post-test (α = 0.05). Results: Higher values ​​of tensile strength were found for sound dentin in control (40.30 ± 21.38 MPa) and 0.5% EGCG (30.05 ± 19.67 MPa) groups. Before degradation, higher values ​​of HIT (0.237 ± 0.062 GPa) and Er (5.58 ± 1.75 GPa) were found for the 0.5% EGCG group in caries-affected dentin. After degradation, 2% chlorhexidine group had higher values ​​of HIT and Er for sound (0.134 ± 0.020 GPa and 3.57 ± 0.40 GPa) and sclerotic (0.201 ± 0.048 GPa and 4.30 ± 0.56 GPa) dentin. Conclusions: The use of 2% chlorhexidine, mainly in sclerotic dentin, was shown to be more effective in promoting increase in the microtensile strength and mechanical properties, before and after the degradation. The 0.5% EGCG showed a better effect on mechanical properties in caries-affected dentin, before the enzymatic degradation. Clinical Relevance: The effective knowledge of the mechanism of action of protease inhibitors in different types of dentin could contribute to the improvement of the resistance of the substrate and to the longer longevity of the bonding processes on this tissue. / FAPESP: 2015/10566-7