Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: La población de adultos mayores en Chile (AM) ha experimentado un aumento gradual en las últimas décadas. La enfermedad oral más prevalente en este segmento de la población es la estomatitis protésica (EP), siendo el mayor factor de riesgo el uso de Prótesis Removible (PR), lo que genera disminución del pH y la velocidad flujo salival (VFS), favoreciendo la proliferación de levaduras del género Candida (LGC) en la cavidad oral. El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto del consumo de leche con probiótico durante tres meses en las características salivales y en el recuento y diversidad de LGC en portadores de PR con EP asociada a candidiasis oral. Metodología: La población objetivo corresponde a 40 AM con PR y EP, 20 recibieron leche con probiótico (EP Probiótico) y 20 recibieron leche sin probiótico (placebo) (EP Placebo) y, 26 AM con PR Sanos, (20 Sano Placebo y 6 Sano Probiótico). Los AM fueron examinados intraoralmente y se recolectó muestra de saliva para análisis bioquímico (pH, VFS) y portación/recuento y diversidad de Candida, al inicio del estudio (T ) y luego de 3 meses de consumo del lácteo con o sin probiótico (T 3 0 ). Para el recuento microbiológico, diluciones de la saliva se sembraron en medio Sabouraud-agar. La identificación de especies se realizó mediante CHROMagar, test bioquímico y/o PCR. Se utilizaron los test estadísticos T-test y Wilcoxon considerando significativo un valor de p<0,05. Resultados: Al comparar las variables en T 0 y T se observó un descenso significativo en las variables pH salival y VFS (p<0,05) en los grupos EP Placebo y 3 Sano Placebo. Para los grupos EP Probiótico y Sano Probiótico no se observaron diferencias significativas. La portación/recuento de Candida presentó diferencias significativas inter-grupo. Las especies de Candida más frecuentes en todos los grupos fueron C. albicans, C. dubliniensis y C. glabrata. Conclusiones: Los parámetros químicos (pH y VFS) y microbiológicos (recuento y portación de LGC) salivales analizados luego de 3 meses de tratamiento, se mantuvieron similares a los valores obtenidos al inicio de éste, tanto en los pacientes que consumieron el lácteo con probiótico como los que consumieron el placebo, por lo cual no podemos asignar el efecto benéfico del probiótico sobre la variables analizadas en las condiciones estipuladas de este estudio. En cuanto a la identificación de LGC, la especie más frecuentemente aislada de los grupos estudiados fue C. albicans.

MudanÃas importantes na epidemiologia das infecÃÃes fÃngicas nas Ãltimas dÃcadas tÃm resultado no isolamento frequente de leveduras do gÃnero Candida. As leveduras do complexo Candida parapsilosis, por exemplo, tÃm sido apontadas tanto como agentes de infecÃÃes como componentes da microbiota de animais. Diante disso, os objetivos deste trabalho foram realizar a identificaÃÃo molecular de cepas do complexo C. parapsilosis, isoladas de fontes veterinÃrias e mantidas no Centro Especializado em Micologia MÃdica; assim como avaliar seus atributos de virulÃncia e perfil de sensibilidade a antifÃngicos, in vitro. Para tanto, foram utilizados 28 cepas do complexo C. parapsilosis obtidos de cÃes, psitacÃdeos, rapinantes e camarÃo. Inicialmente foi realizada a fenotipagem das cepas, com base na anÃlise de suas caracterÃsticas morfolÃgicas e bioquÃmicas, que as ratificou como C. parapsilosis (lato sensu). A identificaÃÃo molecular das espÃcies foi realizada por PCR-REA. A fim de analisar o perfil de sensibilidade das cepas, empregou-se o teste de microdiluiÃÃo em caldo com anfotericina B, itraconazol, fluconazol, voriconazol e caspofungina, segundo metodologia padronizada pelo M27-A3. CLSI (2008). No tocante aos atributos de virulÃncia, a capacidade da produÃÃo de fosfolipases foi avaliada pelo mÃtodo de cultivo em Ãgar gema de ovo, a produÃÃo de proteases foi analisada atravÃs de cultivo em Ãgar albumina bovina e a formaÃÃo de biofilme foi em microplaca de poliestireno com 96 poÃos. A anÃlise genotÃpica evidenciou 13 C. parapsilosis (stricto sensu), 10 C. orthopsilosis e 05 C. metapsilosis. As concentraÃÃes inibitÃrias mÃnimas (MICs) variaram de 0,125 a 1 &#956;g/mL para anfotericina B, de 0,5 a 16 &#956;g/mL para fluconazol, de 0,03125 a 0,5 &#956;g/mL para itraconazol, de 0,03125 a 0,25 &#956;g/mL para voriconazol e de 0,0625 a 2 &#956;g/mL para caspofungina. Foi observada resistÃncia em 03 cepas de C. parapsilosis (stricto sensu) ao fluconazol e 01 cepa apresentou MIC elevado (2 &#956;g/mL) para caspofungina. No que tange aos isolados de C. orthopsilosis, notou-se que 05 isolados apresentaram MICs elevados (2 &#956;g/mL) para a caspofungina. Enquanto que, 02 isolados de C. metapsilosis revelaram-se resistentes ao fluconazol. Quanto à virulÃncia, todas as cepas foram capazes de formar biofilmes, sendo, 20, 7 e 01, classificadas como produtoras moderadas, fortes e fracas respectivamente. Observou-se, ainda que 23/28 isolados apresentaram atividade proteolÃtica. Por outro lado, nenhuma foi capaz de produzir fosfolipases. Estes dados sinalizam que padrÃes de virulÃncia, patogenicidade sensibilidade antifÃngica, in vitro, podem variar entre as espÃcies do complexo C. parapsilosis. / In the past decades, important changes in the epidemiology of fungal infections have resulted in the frequent isolation of yeasts of the genus Candida. Yeasts of the Candida parapsilosis species complex, for example, have been pointed out as infectious agents and components of the microbiota of animals. Thus, the work aimed at identifying molecularly the strains of the C. parapsilosis species complex recovered from veterinary sources and maintained at the Specialized Medical Mycology Center, as well as evaluating their in vitro antifungal susceptibility profile and attributes of virulence. For such, 28 strains of the C. parapsilosis species complex, recovered from dogs, psittacines, raptors and prawn were assessed. Initially, the strains were phenotypically identified, based on their morphological and biochemical characteristics, which confirmed their identification as C. parapsilosis lato sensu. The molecular identification of the strains was then carried out through PCR-REA. In order to analyze the in vitro antifungal susceptibility, the broth microdilution assay was performed, according to the document M27-A3 of the Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI) 2008, using amphotericin B, itraconazole, voriconazole, fluconazole and caspofungin. Concerning the virulence attributes, the ability of producing phospholipase was evaluated on egg yolk agar, while protease production was assessed on bovine serum albumin agar, and biofilm formation was tested in 96-well polystyrene microplates. The genotypical analysis identified 13 C. parapsilosis stricto sensu, ten C. orthopsilosis and five C. metapsilosis. The minimum inhibitory concentrations varied from 0.125 to 1 &#956;g/mL foramphotericin B, from 0.03125 to 0.5 &#956;g/mL, for itraconazole, from 0.03125 to 0,25 &#956;g/mL for voriconazole, from 0.5 to 16 &#956;g/mL for fluconazol and from 0.0625 to 2 &#956;g/mL for caspofungin. Fluconazole resistance was observed in three strains of C. parapsilosis stricto sensu and two of C. metapsilosis, while one strain of C. parapsilosis stricto sensu and five C. orthopsilosis presented high MIC values for caspofungin (2 &#956;g/mL). As for the virulence attributes, none of the tested strains produced phospholipases, while 23/28 presented proteolytic activity, and all of the strains produced biofilm, with one weak producer, 20 moderate producers and seven strong producers. These data show that the in vitro antifungal susceptibility and production of virulence attributes vary among species of the C. parapsilosis species complex, which can lead to differences in pathogenicity and therapeutic response.

Para melhor compreender o papel dos micro-organismos nas doenças da cavidade bucal, é necessário inicialmente avaliar a diversidade microbiana naturalmente existente em indivíduos saudáveis, além de sua distribuição espacial na cavidade bucal. Muitos estudos são conduzidos elucidando o papel do biofilme e das bactérias na saúde bucal, porém poucas pesquisas focaram na atuação das leveduras. Neste sentido, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a diversidade e distribuição de leveduras do gênero Candida na microbiota bucal de indivíduos saudáveis. Foram coletadas amostras da boca pacientes adultos saudáveis. Foram obtidas amostras de 9 diferentes habitats da boca: bochechas direita e esquerda, assoalho da boca, palato, língua dorsal, língua ventral, dente molar, vestíbulo labial e saliva. Foram avaliados 100 pacientes com uma média de 28 dentes. Quarenta e nove indivíduos apresentaram leveduras na sua microbiota bucal. Candida albicans foi o micro-organismo mais prevalente (49%), seguido de Candida krusei, Candida parapsilosis, Meyerozyma guilliermondii (C. guilliermondii), Candida glabrata, Candida tropicalis e Candida dubliniensis. A associação das leveduras encontradas e os habitats bucais sugeriu que comunidades leveduriformes podem distinguir-se entre os diferentes tecidos da cavidade bucal. A língua (dorsal e ventral) apresentou colonização específica, caracterizada pelas espécies C. tropicalis e C. dubliniensis. De forma semelhante, a microbiota dos habitats revestidos por mucosa foi análoga. A microbiota da língua e dos tecidos duros assemelhou-se entre si em menor intensidade. Estes resultados introduzem a dimensão espacial desta diversidade microbiana que vem sendo estudada, complementando as informações obtidas nos estudos do microbioma humano. / To better understand the role of microorganisms in the diseases of the oral cavity, first it is necessary to evaluate the natural microbial diversity in healthy individuals, as well as their spatial distribution in the oral cavity. Many studies are conducted elucidating the role of biofilms and bacteria in oral health, but few research has focused on the yeast’s performance. In this sense, the objective of this study was to evaluate the diversity and distribution of Candida species in the oral microbiota of healthy individuals. Samples were colleted from the mouth of healthy adults. Samples of 9 different mouth habitats were obtained: right and left cheeks, floor of the mouth, palate, dorsal tongue, ventral tongue, molar tooth, labial vestibule and saliva. We evaluated 100 patients with an average of 28 teeth. Forty-nine subjects had yeasts in their oral microbiota. Candida albicans was the most prevalent microorganism (49%), followed by Candida krusei, Candida parapsilosis, Meyerozyma guilliermondii (C. guilliermondii), Candida glabrata, Candida tropicalis and Candida dubliniensis. The association found between the yeasts and oral habitats suggested that communities can be distinguished by the different tissues of the oral cavity. The tongue (dorsal and ventral) presented specific colonization, characterized by the species C. tropicalis, and C. dubliniensis. Similarly, the microbiota of the mucous habitats was similar. The microbiota of the tongue and hard tissue resembled each other in a lesser degree. These results introduce the spatial dimension of the microbial diversity that has been studied, complementing the information obtained in the human microbiome research.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:05:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4605_1.pdf: 2369540 bytes, checksum: 26c2f3048d667e91e6789ba6495c8279 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / A produção de biossurfactante por Candida lipolytica UCP0988 foi inicialmente estudada em meio mineral contendo resíduo de refinaria de óleo de soja como substrato de baixo custo. Os resultados obtidos demonstraram um rendimento de 4,5 g/L de biossurfactante, com redução da tensão superficial do meio para 32 mN/m. O biossurfactante isolado apresentou 50% de proteínas, 20% de lipídeos e 8% de carboidratos em sua constituição. A otimização da produção do biossurfactante foi realizada a partir de planejamentos fatoriais seqüenciais. O primeiro planejamento foi estabelecido utilizando-se três variáveis: resíduo industrial, extrato de levedura e ácido glutâmico. Considerando os resultados obtidos, outros planejamentos foram realizados excluindo-se o extrato de levedura do meio de cultivo. Os resultados posteriores demonstraram que as melhores concentrações de resíduo industrial e de ácido glutâmico foram de 6% e 1%, respectivamente, favorecendo a redução da tensão superficial do meio para 26 mN/m. A cinética de produção do biossurfactante obtido no meio otimizado foi avaliada durante 72 horas a 150 rpm e 28°C. O biossurfactante formou emulsões estáveis de 4,5 Unidades de Atividade de Emulsificação. durante a fase estacionária de crescimento, enquanto que a tensão superficial do líquido metabólico livre de células apresentou alterações insignificantes frente a diferentes temperaturas, pH e concentrações de NaCl. O biossurfactante produzido por C. lipolytica, cultivada em meio de baixo custo representa uma alternativa de produção de um biopolímero estável, com perspectivas de aplicações futuras no controle da poluição ambiental causada por petróleo e derivados

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:48:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo109_1.pdf: 1503569 bytes, checksum: 5d8682b58fece33e667c230a3923506b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / Muitos biossurfactantes têm sido produzidos, embora poucos sejam comercializados em virtude do alto custo de produção. Considerando o potencial de aplicação desses compostos na indústria de petróleo e farmacêutica, estudou-se a otimização do uso de dois resíduos industriais, milhocina e resíduo de refinaria de óleo vegetal como nutrientes de baixo custo para a produção de um biossurfactante por Candida sphaerica UCP 0995. Após estabelecimento do meio de produção, o biossurfactante foi isolado e caracterizado quanto às suas propriedades físico-químicas, sendo testado quanto ao seu potencial de aplicação biotecnológica na área ambiental e na medicina. A otimização do meio de produção foi realizada através de planejamentos fatoriais 22 e metodologia de superfície de resposta, selecionando-se a condição de cultivo contendo 9% de resíduo da indústria de óleo de soja e 9% de milhocina. O líquido metabólico livre de células contendo o biossurfactante denominado de Lunasan produzido na condição selecionada, após144 horas de cultivo a 150 rpm, revelou a capacidade de reduzir a tensão superficial do meio de 57 mN/m para valores em torno de 25mN/m, com uma tensão interfacial contra n-hexadecano de 12,5 mN/m. O biossurfactante produzido demonstrou estabilidade em condições extremas de pH (2-12), temperatura (5, 70, 100 e 120°C) e concentrações salinas (2-10%). O rendimento do biossurfactante isolado foi de 9,0 g/L, com uma concentração micelar crítica de 0,025%. O biossurfactante foi caracterizado como um glicolipídeo aniônico composto por 70% de lipídios e 15% de carboidratos. O biossurfactante demonstrou atividades antimicrobiana e anti-adesiva para bactérias (Lactobacillus casei 36, L.casei 72, L.reuteri 104R, L. reuteri ML1, Pseudomonas aeruginosa, Echerichia coli Staphylococcus aureus, S. epidermidis, Streptococcus agalactiae, S. mutans, S. mutans HG, S. mutans NS, S. sanguis 12, S. pyogenes, S. oralis, S, salivarius e R. dentocariosa) e leveduras (C. albicans e C. tropicallis). O biossurfactante foi testado na remoção de metais pesados contidos em solo de uma indústria de bateria automotivas. Remoções de 86, 75 e 50% foram obtidas para Fe, Zn e Pb, respectivamente, quando se utilizou a solução do surfactante a 2,5%, embora o líquido metabólico também tenha removido percentuais comparáveis aos obtidos com o surfactante isolado. Os resultados obtidos demonstraram o potencial biotecnológico do biossurfactante de baixo custo produzido pela Candida sphaerica surgerindo aplicações em diferentes setores industriais e ambientais

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-08-22T13:22:26Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Dissertaçã DRR Version Final (OK).pdf: 1691284 bytes, checksum: 6912ca404ab994c56e027c6e09ea8939 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-22T13:22:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Dissertaçã DRR Version Final (OK).pdf: 1691284 bytes, checksum: 6912ca404ab994c56e027c6e09ea8939 (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / CNPQ / Os biossurfactantes são moléculas anfipáticas produzidas por micro-organismos e possuem importância recentemente devido às várias e importantes aplicações industriais e ambientais. Estes compostos possuem vantagens como biodegradabilidade, produção a partir de fontes renováveis além de funcionalidade sobre condições extremas de pH, salinidade e temperatura. Entretanto, a sua utilização na indústria depende da redução do custo associado a sua produção, sendo uma possível estratégia o uso de fontes renováveis como os resíduos agro-industriais. Neste sentido, a linhagem de Candida tropicalis demonstrou habilidade para converter resíduos agro-industriais (soro de leite, manipueira e óleo de soja pós-fritura) em meio de produção de biossurfactante empregando um planejamento fatorial 2 3 . A seleção da melhor condição do planejamento foi avaliada utilizando como variável resposta tensão superficial. Desta forma, o melhor resultado foi obtido no meio basal (3% de soro de leite, 7% de manipueira e 10% óleo de soja pós-fritura), observando-se uma redução da tensão superficial da água de 72 para 30,8 mN/m. Ao mesmo tempo, a degradação de petroderivados foi avaliada no meio Bushnell Haas, com o indicador redox 2,6- diclorofenol – indofenol e com a linhagem selvagem aclimatada em óleo diesel a 30%. Os resultados obtidos evidenciaram que a levedura aclimatada apresentou o melhor resultado para o diesel com 98% de degradação. Em seguida, a linhagem foi identificada molecularmente como Candida tropicalis. Desse modo foi realizado um perfil de crescimento e produção do biossurfactante durante 96 horas de cultivo a 150 rpm, com redução da tensão superficial do meio de 70 mN/m para 28,9 mN/m. O biossurfactante produzido demonstrou estabilidade em condições extremas de pH (2- 12), temperatura (4, 70, 100 e 120°C) e concentração salina (2-10%). O rendimento do biossurfactante isolado foi de 3,9 g/L, com uma concentração micelar crítica de 1,5%. Além disso, o novo biossurfactante foi caracterizado como polimérico (51% de proteinas, 37% de lípidos e 11 % de carbohidratos), apresentando uma atividade antimicrobiana para as bactérias Pseudomonas aeruginosa sp. Salmonella sp. UCP 6017, Serratia marcescens UCP 1549, Eschericia coli, Lactobacillus sp., Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Bacillus licheniformis UCP 1013, e a levedura Candida albicans. Ao mesmo tempo, o biossurfactante demonstrou não ser tóxico quando testado em sementes de Brassica oleracea, Lactuca sativa L., Solanum lycopersicum. Os resultados obtidos confirmaram o elevado potencial biotecnológico da Candida tropicalis na biotransformação de rejeitos agroindustriais na produção de um novo biossurfactante, indicando uma diversidade de aplicações em processos biotecnológicos (biorremediação com poluentes hidrofóbicos), como também para a saúde atuando contra bactérias Gram positivas e negativas, além da levedura oportunista C. albicans. / Surfactants are amphipathic molecules produced by microorganisms and have been gaining importance recently due to several important industrial and environmental applications. These compounds have advantages such as biodegradability; production from renewable sources other feature under extreme conditions of pH, salinity and temperature. However, its use in the industry depends on reducing the cost associated with its production, being one possible strategy the use of renewable sources such as agro-industrial waste. Therefore, Candida tropicalis demonstrated ability to convert agro-industrial waste (whey, cassava wastewater and post-fry soy oil) in biosurfactant production medium employing a factorial design 23. The selection of the best condition of the planning was assessed using as variable surface tension response. Thus, the best result was obtained in basal medium (3% whey, 7% cassava wastewater and 10% soybean oil post-frying), observing a reduction of the surface tension of water from 72 to 30.8 mN/m. At the same time, petro derivatives degradation was evaluated in the middle Bushnell Haas, redox indicator with 2,6-dichlorophenol - indophenol and the wild type strain acclimatized for diesel fuel to 30%. The results showed that the acclimatized yeast showed the best result for the diesel with 98% degradation. Then, the strain was identified as Candida tropicalis molecularly. Thus, it performed a growth profile and production of the biosurfactant for 96 hours of cultivation at 150 rpm, reducing the surface tension from 70 mN/m to 28,9 mN/m. The produced biosurfactant showed stability in extremes conditions of pH (2-12), temperature (4, 70, 100 and 120°C) and salt concentrations (2-10%). The yield of isolated biosurfactant was 3.9 g/L, with a critical micelle concentration of 1.5%. Furthermore, the new biosurfactant was characterized as a polymeric (51% protein, 37% lipid and 11% carbohydrate), having an antimicrobial activity for Pseudomonas aeruginosa sp. Salmonella sp. UCP 6017, Serratia marcescens UCP 1549, Eschericia coli, Lactobacillus sp., Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Bacillus licheniformis UCP 1013, and the yeast Candida albicans. At the same time, the biosurfactant was not toxic when tested in Brassica oleracea, Lactuca sativa L., Solanum lycopersicum. The results confirmed the high biotechnological potential of Candida tropicalis in the biotransformation of agroindustrial wastes for the production of a new biosurfactant indicating a variety of applications in biotechnology processes (bioremediation with hydrophobic pollutants) as well health acting against positive and Gram negative bacteria, as well as opportunistic yeast C.albicans.

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2017-12-26T18:53:01Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Tese Dra Katrine Escher fevereiro 09-02-17.pdf: 3895718 bytes, checksum: fdab644d3e63c0380843a0e0c9077840 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-26T18:53:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Tese Dra Katrine Escher fevereiro 09-02-17.pdf: 3895718 bytes, checksum: fdab644d3e63c0380843a0e0c9077840 (MD5) Previous issue date: 2016-05-04 / CAPES / As Actinobactérias são representantes de um grupo extremamente diverso de bactérias Grampositivas filamentosas com alto conteúdo de citosina e guanina (G+C) no seu DNA que pertencem à ordem Actinomycetales. Seu metabolismo é extremamente rico e, frequentemente acompanhado pela produção de metabólitos secundários de extrema diversidade química e ação biológica, especialmente antimicrobiana. No presente trabalho foram isoladas actinoboactérias presente na rizosfera de Aniba parviflora Syn A. fragans e avaliado a atividade antimicrobiana do extrato bruto obtido a partir da fermentação submersa em meio M1 e MPE. O potencial antimicrobiano foi avaliado em duas etapas sendo a primeira, por meio da técnica de bloco de gelose frente a micro-organismos de interesse clínico e ambiental, e na segunda etapa, foi realizado a fermentação submersa nos Meio para produção de euromicina (MPE) e MPE modificado (M1), sob agitação contínua por 168h para obtenção dos metabólitos secundários. O líquido fermentado foi testado a cada 24h para avaliação da sua bioatividade pelo método de difusão em disco. Os metabólitos bioativos foram extraídos com os solventes hexano, clorofórmio e acetato de etila a partir do líquido metabólico em pH 2.0, pH 6,5 e pH 9.0. Posteriormente foi determinada a concentração mínima inibitória (CMI) do extrato mais ativo através da técnica de microdiluição em caldo, e também foi realizada a caracterização química preliminar por cromatografia em camada delgada (CCD). Todas as 11 linhagens isoladas foram identificadas através de análise micromorfológica e a partir do RNAr 16S como pertencentes ao gênero Streptomyces. Os isolados MPO4, MPO9, MPO10 e MPO11 não foram selecionadas para obtenção dos metabólitos secundários, pois não apresentaram efeito antagônico contra os micro-organismos teste. Os metabólitos antimicrobianos foram produzidos a partir de 24h da fermentação apresentando halos de inibição variável entre as linhagens. O extrato de hexano obtido em meio M1 apresentou ação fungicida para C. albicans a 78,1 μg/mL e C. krusei a 312,5 μg/mL. Na prospecção química foram identificados metabólitos secundários da classe das xantinas, compostos fenólicos, triterpenos e esteroides, derivados antracênicos e cumarinas. / Actinobacteria are representative of an extremely diverse group of filamentous gram-positive bacteria with high content of guanine and cytosine (G + C) in its DNA belonging to the order Actinomycetales. Your metabolism is extremely rich and often accompanied by the production of secondary metabolites of extreme chemical and biological diversity action, especially antimicrobial. In the present study were isolated actinomycetes present in the rhizosphere of Aniba parviflora Syn A. fragrans and evaluated the antimicrobial activity of the crude extract obtained from the submerged fermentation on medium for euromicin production (MPE) and MPE modifed. The antimicrobial potential was assessed in two stages,with the first through the technique of agar block against micro-organisms from clinical and environmental interest, and second stage, the submerged fermentation was carried out in medium M1 and MPE in continuous agitation for 168 h to obtain the secondary metabolites. The fermented liquid was tested every 24 hours to evaluate their bioactivity by disk diffusion method. Bioactive metabolites were extracted with the solvents hexane, chloroform and ethyl acetate from metabolic liquid at pH 2.0, pH 6.5 and pH 9.0. Posteriously been determined the minimum inhibitory concentration (MIC) of most active extract by the broth microdilution technique, and it was also performed preliminary chemical characterization by thin layer chromatography (TLC). Of the 11 strains isolated, 10 were identified through micromorphological analysis and RNAr16S as belonging to the genus Streptomyces . Strain MPO4, MPO9, MPO10 and MPO11 were not selected for obtaining metabolites because they didn’t have antagonistic effect against test microorganisms. The antimicrobial metabolites were produced at the fermentation 24h with variable sitting inhibition halos between the strains. The hexane extract obtained in medium M1 showed fungicidal action for Candida albicans to 78.1 mg / mL and Candida krusei to 312.5 mg / mL. In chemical prospecting of secondary metabolites have been identified xanthine, phenolic compounds, triterpenes and steroids, antracênicos derivatives and coumarins.

Orientador: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-22T05:18:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ito_CristianeYumiKoga_D.pdf: 3417745 bytes, checksum: 6a4a0cac3afe3b23a6d8bf982b3e331f (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Existem vários estudos sobre 19A secretora anti-Streptococcus mutans, porém ainda. não existem evidências conclusivas da sua participação efetiva no controle da cárie. Muitos também são os trabalhos com relação à imunologia das infecções causadas pelas espécies do gênero Candída. O objetivo do presente trabalho foi correlacionar a presença de estreptococos do grupo mutans e de Candída com níveis de 19A na saliva de indivíduos de faixas etárias e condições bucais diferentes. Foram estudados 320 indivíduos divididos em 7 grupos: I - adulto jovem com cárie; II- adulto, jovem livre de cárie; II- crianças com cárie; IV- crianças livres de cárie; Vadultos com cárie; VI- adultos com candidose e VII- crianças com cárie ativa. Os indivíduos foram examinados quanto ao Índice CPOD, Índice de higiene bucal simplificado (IHBS) e fluxo salivar. Foram realizadas contagem total de microrganismos aer6bios e facultativos, contagem de estreptococos do grupo mutans e Candida na saliva. A quantificação dos níveis de 19A anti-Streptococcus mutans e anti-Candida na saliva foi realizada utilizando-se a técnica ELISA. Não houve cOlTelação estatística na população dos níveis de 1gA anti-S. mutans com as contagens de estreptococos do grupo mutans na saliva. Correlação estatística na população foi observada entre os títulos de anticorpos anti-Candida e as contagens de leveduras no grupo adultos com candidose (VI). Nos demais grupos não foi observada correlação / Abstract: Several studies have been done about 19A against Streptococcus mutans but there are no conclusive evidences about the effective participation in caries control. There are also many studies about the immunity involved with infections caused by Candida species. The aim of this work was to cOITelate the presence of mutans streptococci and Candida with levels of 19A in saliva of individuals with diferent age and oral conditions. Three-hundred-twenty individuals were divided in 7, groups: 1- young adult with caries; II-caries free young adult ; III- children with caries; IV- caries free children ; V- adults with caries; VI- adults with candidosis and VII- children with active caries. AlI the individuaIs were examined for DMFT, oral hygiene index-simplified and salivary flow. Total counts of microrganisms, mutans streptococci and Candida counts were also done. The quantification of 19A levels against Streptococcus mutans and Candida was done through ELISA technique. There was no statistical cOITelation for the population between the levels of 19A against S. mutans and counts of these microrganisms in saliva. Statistical cOITelation for the population was observed between titres of antibodies against Candida and counts of yeasts in candidosis group (VI). No cOITelation was found for the other groups / Doutorado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Doutor em Ciências

Orientadores: Altair Antoninha Del Bel Cury, Tatiana Pereira Cenci / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-15T11:15:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernandes_FredericoSilvadeFreitas_M.pdf: 733963 bytes, checksum: a861bd550ab439f138ef016317f27638 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Biofilme de Candida spp formado na superfície de próteses removíveis é considerado o principal fator etiológico da candidose, a qual é a infecção oral fúngica mais prevalente em humanos. Em pacientes com comprometimento motor, o uso de limpadores químicos é indicado para o controle desse biofilme, entretanto, pouco se conhece sobre o efeito desses agentes sobre o biofilme de Candidas não-albicans. Adicionalmente, a literatura é escassa de estudos avaliando a formação de biofilme de Candida sobre novos materiais para base de próteses. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar o efeito de limpadores químicos sobre o biofilme mono e multi-espécie de Candida formado sobre a superfície de materiais para confecção de próteses removíveis. Foram confeccionados espécimes de resina de polimetilmetacrilato (PMMA) e resina poliamida, os quais, após a padronização da rugosidade de superfície (0,34 ± 0,02 µm), foram submetidos à avaliação da energia livre de superfície (ELS) ou à formação de biofilme. Biofilme de Candida albicans e/ou Candida glabrata foi formado por 72 h, sendo os espécimes, previamente, submetidos à formação da película adquirida. Após o período de formação do biofilme, os espécimes foram submetidos aos tratamentos, segundo o tempo recomendado por cada fabricante: limpador químico enzimático (3 min); limpador químico sem enzimas (5 min); e hipoclorito de sódio (NaOCl) a 0,5% (10 min). A água destilada e deionizada foi utilizada como controle. Após os tratamentos, os espécimes foram sonicados (7W por 30s) em solução salina, para remoção das células aderidas. Essa solução foi serialmente diluída em solução salina e semeada em CHROMagar® Candida. O número de células viáveis de Candida foi expresso em unidades formadoras de colônia (UFC)/mm2. Os dados da ELS e ângulo de contato foram submetidos a ANOVA um fator, enquanto que os dados de células viáveis de Candida foram submetidos a ANOVA três fatores, seguido do teste de Tukey-Kramer. Todos os biofilmes avaliados apresentaram maior crescimento na resina de poliamida (p<0,0001), entretanto, essa resina apresentou um menor valor de ELS quando comparada à resina de PMMA. Os limpadores químicos, contendo ou não enzimas, reduziram significantemente os níveis de Candida, sem haver diferença estatística entre eles (p=0,9999). Entretanto, o NaOCl a 0,5% foi mais eficaz, na medida em que resultou na ausência de células viáveis. Em todas as situações avaliadas, a C. glabrata apresentou maiores valores de células viáveis do que a C. albicans (p=0,0002). Nas condições desse estudo, conclui-se que a resina de poliamida possibilitou uma maior proliferação de Candida; e os limpadores químicos comerciais foram eficazes na redução dos níveis de Candida spp, mas apenas a solução de hipoclorito de sódio a 0,5% resultou na ausência de células viáveis na superfícies dos materiais testados / Resumo: Os limpadores químicos de prótese têm sido bastante indicados para o controle do biofilme formado sobre próteses removíveis de pacientes com comprometimento motor. Apesar de estudos prévios terem mostrado que uma única imersão nesses agentes é capaz de reduzir os níveis de Candida albicans do biofilme formado sobre próteses removíveis, pouco se sabe sobre o efeito do uso diário desses limpadores sobre o biofilme residual de Candida. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar a eficácia do uso diário de um limpador químico enzimático sobre o biofilme de C. albicans formado sobre a superfície de materiais para confecção de próteses removíveis; bem como a atividade enzimática das células de Candida desse biofilme após exposições diárias a esse limpador de prótese. Foram confeccionados espécimes de resina de polimetilmetacrilato (PMMA) e resina de poliamida, nos quais foi realizada, inicialmente, a padronização da rugosidade de superfície (0,34 ± 0,02 ?m). Após a formação da película adquirida, os espécimes foram divididos aleatoriamente em 12 grupos (n=9) para formação do biofilme de C. albicans por 72 horas. Após esse período, os espécimes foram tratados por 1, 4 ou 7 dias, sendo realizado um tratamento por dia, com um limpador químico enzimático (Polident 3 Minutes) ou com água destilada (controle negativo). Após os respectivos períodos de tratamento, os microrganismos remanescentes foram removidos da superfície dos espécimes por meio de ondas ultra-sônicas (7W por 30s). Em seguida, as unidades formadoras de colônia (UFC) foram calculadas e a atividade enzimática das células remanescentes foi avaliada. Os dados foram submetidos à ANOVA um fator ou dois fatores, seguido do teste de Tukey-Kramer. O biofilme de Candida albicans formado sobre a resina de poliamida apresentou maiores níveis de Candida e uma maior atividade fosfolipásica que o biofilme formado sobre a resina de PMMA (p<0,001). O limpador químico enzimático reduziu significantemente os níveis de Candida albicans em todos os períodos avaliados (p<0,001), entretanto os níveis desse microrganismo aumentaram com o tempo, sendo observada diferença estatisticamente significante entre os períodos avaliados (p<0,001). As exposições diárias a esse limpador químico aumentaram a virulência das células de Candida, no que diz respeito à atividade fosfolipásica. Nas condições desse estudo, conclui-se que o uso diário do limpador químico enzimático não foi capaz de impedir a proliferação de Candida albicans no biofilme residual, apesar de ter interferido no crescimento desse biofilme. / Abstract: Candida denture biofilm is considered the the primary aetiological agent for the development of oral candidosis, which is the most common fungal oral infection in humans. Although, for patients with limited motor capacity, chemical cleansing with immersion in denture cleansers has been shown to be effective in controlling Candida biofilm accumulation, limited data is available on the effect of those cleansing agents on other Candida species biofilms. Additionally, few studies have examined the development of Candida biofims on novel denture materials. This study evaluated the efficacy of denture cleansers on C. albicans and C. glabrata single and dual-species biofilms formed on novel denture base materials. Specimens of polymethylmetacrylate resin (PMMA) and polyamide resin were prepared and had their surface roughness standardized (0.34 ± 0.02 µm). Part of the specimens had their surface free energy measured and the other specimens were submitted to the biofilm assays. C. albicans and/or C. glabrata biofilm was formed for 72 hours on saliva-coated specimens. On the 3rd day, specimens were treated with an enzymatic cleanser, denture cleanser or 0.5% sodium hypochlorite (NaOCl) solution by soaking for, 3, 5 and 10 min, respectively. Water was used as negative control. After treatment, adhered cells were detached from the acrylic resin surface by ultrassonic waves at 7 watts for 30 seconds in phosphate buffered saline solution (PBS). This solution was serially diluted in PBS and plated on CHROMagar® Candida. Candida viable cell were expressed in colony forming units per surface area (CFU/mm2). Data of surface free energy and contact angle were analyzed by one-way ANOVA, and data of Candida species were analyzed by three way-ANOVA followed by Tukey-Kramer test. All tested biofilms displayed significantly higher growth on polyamide thermoplastic resin (p<0.0001), which presented the lowest SFE. Denture cleansers significantly decreased Candida spp levels, with no statistical difference between them (p=0.9999); however, 0.5% NaOCl solution was more effective, since, after treatment, no viable cell was observed. Candida glabrata revealed significantly higher CFU counts when compared to Candida albicans under all experimental conditions (p=0.0002). Our study has shown that polyamide resins may present a convenient substratum for microbial colonization. Although denture cleansers reduced Candida levels, sodium hypochlorite should be preferred as it was efficient to eliminate Candida cells from the tested materials / Abstract: Chemical cleansing with immersion in denture cleansers has been indicated for denture biofilm control in patients with limited motor capacity. Although previous studies have shown that a single immersion in those agents is able to substantially reduce Candida albicans biofilm levels, the effect of the routine use of denture cleansers on the Candida residual biofilm is poorly understood. This study evaluated the efficacy of daily use of an enzymatic denture cleanser on C. albicans biofilm formed on denture base materials; and the enzymatic activities of Candida biofilm cells after daily exposure to this cleanser agent. Polymethyl methacrylate (PMMA) and polyamide resins specimens were prepared (n=54), and their surface roughness was standardized (0.34 ±0.02 ?m). Saliva-coated specimens were randomly divided by lottery into 12 groups (n=9) for biofilm assay. C. albicans biofilm was formed for 72 hours, and then specimens were treated for 1, 4 or 7 days, once a day, with an enzymatic cleanser (Polident 3 Minutes), or distilled water (negative control). Remaining adherent microorganisms were removed from the treated specimens by ultrasonic waves at 7 watts for 30 seconds, and then colony-forming units (CFU) were calculated and remaining cells enzymatic activities were determined. Data were analyzed by 1-way or 2-way ANOVA followed by the Tukey-Kramer test. C. albicans biofilm formed on polyamide resin showed significantly higher Candida levels and phospholipase activity (p<0.001) than biofilm formed on PMMA resin. The enzymatic cleanser significantly reduced C. albicans levels in all evaluated periods (p<0.001); however, the number of this microorganism increased with time, showing statistical difference among the treatment periods (p<0.001). The daily exposure to the denture cleanser increased Candida cells virulence, with regard to phospholipase activity. Our study has shown that the enzymatic cleanser daily use did not prevent C. albicans proliferation in residual biofilm; however, this agent reduced this fungus rate of growth. / Mestrado / Protese Dental / Mestre em Clínica Odontológica

Orientador : Oswaldo Di Hipolito Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-01T02:16:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_ClaudioMaranhao_M.pdf: 765395 bytes, checksum: b5645fdbc43b028fd13c326460906042 (MD5) Previous issue date: 2002 / Mestrado