Orientadores: Selma Candelaria Genari, Arnaldo Rodrigues dos Santos Jr / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T18:34:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Estacia_Paulo_D.pdf: 6150044 bytes, checksum: 110dea14d6f4f095b413388e63202177 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Os perfluorocarbonos líquidos (PFCLs) são usados em cirurgias oftalmológicas servindo não apenas como ferramenta intra-operatória, mas também como agente tamponante intra­ ocular. Entretanto, alguns autores afirmam que o perfluoroctano (PFOC), um tipo de PFCLs, pode causar reações inflamatórias e danos celulares à retina. Na tentativa de solucionar esses inconvenientes, foram desenvolvidos os alcanos semifluorinados (ASF) com a indicação de substituto vítreo de longo prazo. Nesse sentido, avaliou-se o possível efeito tóxico apresentado pelo PFOC e pelo perfluorohexiloctano (F6Hg), um tipo de ASF, em condições controladas por meio de cultura celular. Utilizou-se, para isso, a linhagem celular Vero, internacionalmente recomendada para ensaios com citotoxicidade e estudos com biomateriais. Foi feita uma análise da toxicidade indireta, onde as células entram em contato apenas com elementos solúveis que possam ser eliminados pelo PFOC ou F6Hs, e toxicidade direta, ou seja, a toxicidade dependente do contato, do PFOC ou F6Hs com as células. A toxicidade indireta foi realizada por métodos quantitativos através da absorbância, indicando a viabilidade celular. A toxicidade direta foi avaliada por meio de métodos citoquímicos, imunocitoquímicos e morfológicos, utilizando-se como controle células em meio de cultura livre de qualquer tratamento, um controle positivo para toxicidade (adesivos de silicone), que apresentam comprovado efeito tóxico, e um controle de peso (lamínulas de vidro) que exercessem uma compressão mecânica similar ao PFOC ou F_s utilizados. A análise da toxicidade, seja direta ou indireta, foi feita, inicialmente, para o PFOC e F6Hs individualmente e, depois, de forma conjunta e comparativa. Em relação ao PFOC, os estudos mostraram que não apresenta toxicidade indireta, mas é capaz de promover algumas alterações tóxicas mediadas pelo contato direto. O F6Hs também não mostrou toxicidade direta, ao contrário do PFOC; as alterações celulares promovidas pelo F6Hs eram similares às feitas pelo controle peso e distintas do controle de toxicidade. Assim, concluiu-se que o F_s não apresenta efeito tóxico direto, apenas compressivo. Esses dados foram corroborados pelo estudo integrado e comparativo, reforçando nossas conclusões. A análise conjunta dos dados mostrou que o F 6Hs é um produto com melhores propriedades como substituto vítreo de longo prazo do que o PFOC, porque, ao contrário deste último, não apresentou efeito tóxico e, por ter um menor peso específico, gerou uma menor ação compressiva sobre as células estudadas / Abstract: Perfluorocarbon liquids (PFCLs) are used in eye surgeries, not only as an intraoperative tool, but also as intraocular tamponading agents. However, some authors state that perfluoroctane (PFOC), a type of PFCL, may cause inflammatory reactions and damage the retina. In an attempt to avoid these effects, semifluorinated alkanes (SFA) were developed as long-term vitreous replacements. Therefore, we comparatively assessed the potential toxic effect ofPFOC and perfluorohexyloctane (F6Hs), a type ofSFA, under controlled cell culture conditions. Vero cells were used for this purpose, as internationally recommended for cytotoxicity tests and studies with biomaterials. We analyzed indirect cytotoxicity, where the cells only come into contact with soluble elements that can be eliminated by PFOC and F_s, in addition to direct toxicity (contact toxicity) of PFOC or F6Hs to the cells. Indirect toxicity was assessed quantitatively by way of absorbance, indicating cell viability. In its turn, direct toxicity was evaluated by cytochemical, immunocytochemical and morphological methods. Cells embedded in a treatment-free culture medium were used as control- a positive control for toxicity (silicone bands), with an undeniably toxic effect on cells, and a weight control (glass slides) that produced a mechanical compression similar to the amount of PFOC or F 6Hs used in the experiment. Both direct and indirect toxicity were fIrst assessed separately and, later on, collectively and comparatively. Our results show that PFOC does not produce indirect toxicity, but it causes some toxic effects mediated by direct contact; and that F6H8 did not present direct toxicity. Differently from PFOC, cellular alterations caused by F6H8 were similar to those produced by the weight control and different from the toxicity controI. Therefore, our conc1usion is that F6H8 has a compressive rather than a direct toxic effect. These fIndings were corroborated by the integrated and comparative study, thus strengthening our conc1usions. The joint analysis of our data revealed that F6Hs has better properties as long-term vitreous replacement than PFOC, since it showed a lower specifIc weight and no toxic effect, which resulted in a lighter compressive action on the cultured cells / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Marcos Silveira Buckeridge / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:35:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lisboa_CesarGustavoSerafim_M.pdf: 19512076 bytes, checksum: 2f67235487f803777476cf49276d414d (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: As sementes de muitas plantas possuem endosperma, um tecido especializado com funções tanto de reserva como de constrição mecânica do embrião nas primeiras etapas de desenvolvimento. Em muitas espécies de leguminosas, estes tecidos especializados armazenam como polissacarídeo de reserva, o galactomanano. Este polímero apresenta um cadeia central de manose ( ß-1,4 ligadas) e ramificações de galactose (?-l,6 ligadas ao esqueleto central). Três enzimas estão envolvidas na hidrólise do galactomanano: a endo-ß- mananase, a ?-galactosidase e a ß-manosidase. Da forma com que a endo-mananase ataca o polímero, inicialmente produz oligossacarídeos galactosilados que, são posteriormente hidrolisados pelas duas últimas exo-enzimas (?-galactosidase e ß-mananase) até galactose e manose livres. Neste trabalho, uma endo-ß-mananase foi purificada do endosperma das sementes de Sesbania virgata, uma leguminosa nativa. Uma curva de tempo de germinação mostrou que a atividade da mananase aparece inicialmente na região do endosperma próxima à área de protrusão da radícula e, subseqüentemente, aumenta na região lateral do endosperma da semente seguindo o desenvolvimento da plântula. Medindo a atividade em pH 5 a 45°C, o máximo da atividade catalítica correspondeu a 120h de desenvolvimento para, em seguida, decair. Para a purificação da enzima, utilizou-se uma coluna de troca iônica DEAE-celulose seguida de uma coluna de afinidade biológica em Sepharose Concanavalina A. A mananase purificada é uma glicoproteína de peso molecular de cerca de 30KDa, com pH ótimo entre 3,5 e 5, temperatura ótima de 45°C e ponto isoelétrico 4,5. A caracterização da atividade da endo-mananase sobre diferentes galactomananos com diferentes razões manose:galactose, indicou que a ramificação do polissacarídeo com galactose é o "fator-chave" na modulação da própria ação catalítica dessa enzima. Com essas observações, foi concluído que, a atividade da endo-mananase, além de estar relacionada com a mobilização de reservas, facilita a emersão da radícula agindo na área próxima à protrusão. Entendendo que a mananase pura não foi capaz de degradar o galactomanano da Trigonellafoenum-graecum (razão 1:1 de manose/galactose), sugere-se que exista uma relação inversa entre o grau de ramificação e a porcentagem de hidrólise da endo-mananase / Abstract; Many plant seeds have an endosperm, a tissue specialised either as storage or mechanical constraint to embryo growth. In many legume species, endosperms contain galactomannan. This polyssacharide is composed of a main chain of 1,4-ß-mannan branched with variable amounts of 1,6-?-linked galactosyl residues. Three enzymes produced by an aleurone layer are involved in galactomannan hydrolysis: endo-ß-mannanase, ?-galactosidase and ß- mannosidase. The former with mannanase attacks the polymer producing galactosylated oligossacharides which are further hydrolysed by the two last exo-enzymes to free mannose and galactose. In the present work, an endo-ß-mannanase was purified from the endosp erm of Sesbanía vírgata, a Brazilian native legume. The time-course shows that the activity of mannanase appears initially in the endosperm cap of seeds prior to radicle emergence and subsequently increases in the remaining lateral endosperm following seedling growth. Measuring the activity at pH 5 and 45°C, endo-mannanase peaked at 120h and then decreased. We used these conditions to perform purification procedures in DEAE-cellulose followed by affinity chromatography with Sepharose Concanavaline-A. The enzyme is a glycoprotein with an apparent molecular weight of 30Kda, optimum pH at 4.5 and temperature at 45°C, pI at 4.5. The mode of action of the enzyme on different galactomannans indicates the modulation of mannanase activity by the branching pattems of the polymers with galactose. From these observations it was concluded that mannanase activity facilitates radicle protrusion through the surrounding endosperm by weakening it in the area close to the radicle tip. On the basis that the pure enzyme can not degrade the fenugreek galactomannan (a fully substituted polysaccharide), we suggest that there is an inverse relationship between galactose branching and the degree of hydrolysis / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Silvia Regina Brandalise / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:28:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aguiar_SimonedosSantos_M.pdf: 8033437 bytes, checksum: 0ffdc5bfb94dfb7c6122cb59ab652e06 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O hepatoblastoma é um tumor embrionário raro (1:1.000.000 nacimentos) , representando o tumor hepático mais freqüente em crianças com idade menor que 3 anos. A importância da histopatologia e o prognóstico do hepatoblastoma é conhecida na literatura , sendo o tipo histológico fetal puro o de melhor prognóstico. Com o desenvolvimento da imuno-histoquímica (llI) e da biologia molecular , nova compreensão dos hepatoblastomas pode ser delineada através de expressões protéicas específicas , cuja relação com o subtipo histopatológico precisa ainda ser elucidada. Objetivos: Este trabalho procurou verificar a associação entre os achados histopatológicos e os marcadores de IH ao diagnóstico e no momento cirúrgico, após o uso de quimioterapia (QT) , com a sobrevida global e livre de eventos, dos pacientes portadores de hepatoblastoma na infância. Material e Métodos: Foram analisados os espécimes do tumor hepático de 21 pacientes, com revisão do diagnóstico histológico por pelo menos dois patologistas experientes. Para a pesquisa da expressão do PCNA , do Ki-67 , do p53 ,da ~-Catenina ,do c-erb-B2 e da glicoproteína P , foi utilizada a técnica de IH . As determinações destas expressões protéicas foram realizadas ao diagnóstico, e no momento cirúrgico, após o 40 ciclo de QT. A análise da expressão do p53 também foi rea1i7~da pela técnica de FISH em 8 pacientes. Quatorze pacientes eram do sexo feminino e 7 do masculino , com idade média ao diagnóstico de 13 meses. Resultados:A expressão do PC NA foi positiva em 100% dos casos avaliados ao diagnóstico, sendo negativo em apenas um paciente no momento cirúrgico. Nos tumores do tipo histológico fetaVembrionário o valor da positividade do PCNA variou de 27% a 52,2% ao diagnóstico, e de 8,2% a 90% no momento cirúrgico . Nos tumores do tipo fetal puro, esta variação foi de 20% a 75,2% ao diagnóstico e, no momento cirúrgico de 4,8% a 29,4%. A ~-CateDiDa apresentou expressão positiva em 59% dos casos ao diagnóstico e 87% no momento cirúrgico.Ao diagnóstico, a expressão do Ki-67 variou de 7% a 43,6% , tornando-se negativo no momento cirúrgico em 84% dos casos. Em 15 pacientes, a positividade do Ki-67 ao diagnóstico estava associada com sobrevida livre de eventos em 12 anos de 66,7% (p=O,OI). A expressão do p53 por IH foi avaliada em 17 casos, sendo negativa em 16 deles. A expressão gênica do p53 pela técnica de FISH foi avaliada em 8 casos, sendo positiva em 5 . Apenas 1 caso apresentou resultados positivos para o p53 nas duas técnicas empregadas. Ao diagnóstico a GpP foi positiva em 2 casos. A expressão negativa da GpP em 10 pacientes, no momento cirúrgico, está associada à sobrevida global em 12 anos de 70% (P=0,67). Os pacientes com expressão positiva do c-erb-B2 ao diagnóstico tiveram sobrevida global de 87,5% em 8 anos , enquanto aqueles com expressão negativa deste marcado r obtiveram sobrevida global de 33,3% (p=0,02). Conclusões. A expressão positiva do c-erb-B2 , ao diagnóstico, teve valor prognóstico, determinando taxas de sobrevida em 8 anos de 87,5 (p=O.02). A expressão positiva do Ki-67 ao diagnóstico, também se associou com melhor prognóstico, determinando taxas de sobrevida global em 12 anos de 66,7% (P=0,01). A expressão dos demais marcadores não se correlacionou com o prognóstico destes pacientes. O subtipo histológico fetal puro teve importância prognóstica , sendo variável independente de risco (p=O.02) / Abstract: Hepatoblastoma is a rare embrionary tumor (1:1.000.000/ new births) , being the most frequent liver tumor in children under the age of 3 years . The pathology prognostic value is well determined in the literature . Tumors with fetal type have the best prognosis. With the advances of immunohistochernical (IR) and biology markers , a new comprehension about this tumor still need to be known. Objectives: The present study investigated the relationship between the pathology results and IH findings , at the moment of diagnosis and surgery after the 4th cycle of chemotherapy (CREMO) with the overall survival rates (OS) and event free survival (EFS) of pediatric hepatoblastoma patients (pts). Patients and Methods: Twenty one pediatric hepatoblastoma's specimens had the hystological subtype reviewed at least for 2 experimented pathologysts. To evaluate the protem expression for PCNA, Ki-67 , p53 , ~-Catenin, c-erb-B2 and Glycoprotem P (GpP) IR techniques were performed at the moment of diagnosis and after CREMO (surgery time). The p53 analysis was also done by FISH m 8 pts. Fourteen pts were female and 7 male , with the median age at diagnosis of 13 months . ResuIts . One hundred per cent ofthe pts had overexpression ofPCNA at the moment of diagnosis , being negative in just one pt at surgery time .Considering tumors with hystological fetal/embryonal type , the PCNA labeling index ranged ftom 27% to 52.2% at diagnosis , and ftom 8.2% to 90% at surgery .In those eases with the fetal type , this positivity was ftom 20% to 75.2% at diagnosis , and ftom 4.8% to 29.4% at surgery . Overexpression of ~-Catenin at the moment of diagnosis was deteeted in 59% ofthe pts and in 87% ofthem at surgical time. Ki-67 ranged ftom 7% to 43.6 % and remained nega tive after CREMO, in 10 pts (84%) . The overexpression of Ki-67 at the moment of diagnosis determined an event ftee survival (EFS) of66.7% in 12 years (p= 0.01). One out 21 pts (4.7%) presented p53 over expression by IH , eonfumed by FISH . Controversially, among 57.1 % of pts with nega tive p53 by IR , the overexpression by FISH analysis was defined as positive. Considering GpP positivity at diagnosis , it was detected in 2 pts , being nega tive after CREMO mIO pts. Pts with overexpression of GpP at surgery time had an OS rate of 80% versus 70% for the pts with this negative expression (p=O.67) .So the overexpression ofGpP was not a worse prognosis prediet factor . Finally the overexpression of c-erb-B2 at diagnosis was related with an OS of 87.5% at 8 years , while for those pts with negative expression the OS rate was 33.3% (p=O.02). Conclusion. The overexpression of c-erb-B2 at diagnosis is related to better survival rates in those pts with hepatoblastoma (p=O.02). The overexpression of Ki-67 at diagnosis is a good prognostic factor by determining an OS rate of 66.7% in 12 years (p=O.OI).The overexpression of remaining markers did not correlate with the OS neither EFS rates .According to histology , pts with fetal type had better prognosis (p=O.02) / Mestrado / Pediatria / Mestre em Saude da Criança e do Adolescente

Orientador: Oslei Paes de Almeida / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:53:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kaminagakura_Estela_D.pdf: 2395331 bytes, checksum: 0a1f7bb59a9515dc8659979817aecfb8 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A paracoccidioidomicose (Pmicose) é uma micose sistêmica, comum na América Latina, com apresentação clínica variável. Na sua forma crônica, freqüentemente envolve a mucosa bucal com lesões múltiplas de aspecto moriforme. Microscopicamente, caracteriza-se por hiperplasia pseudoepiteliomatosa (HPE) e resposta inflamatória granulomatosa, além de acúmulos de neutrófilos no epitélio e no conjuntivo. Os objetivos deste trabalho foram descrever, através da imunohistoquímica, a expressão de citoqueratinas (CKs) e a proliferação celular da HPE, assim como a distribuição das células inflamatórias nos tecidos epitelial e conjuntivo. Adicionalmente, foi descrito um caso clínico de Pmicose bucal. HPE foi evidente nos 28 espécimes de Pmicose bucal oriundas da mucosa jugal, lábio, gengiva e palato duro avaliados quanto à expressão de CKs (AE1/AE3, 34j3E12, CK1, CK5, CK6, CK7, CK8, CK10, CK14, CK16, CK18 e CK19) e proliferação celular (Ki-67). Na camada basal, os resultados foram semelhantes para todas as CKs, nos casos de mucosa bucal normal (MBN) e HPEs. As diferenças observadas na camada suprabasal entre a MBN e a Pmicose estão descritas a seguir. Na Pmicose, CK1 e CK10 não foram expressas nas camadas espinhosa e superficial do lábio, gengiva e palato duro; CK14 foi expressa na camada suprabasal da mucosa jugal e lábio; CK6 foi mais freqüentemente expressa apenas na camada espinhosa do lábio, gengiva e palato duro, entretanto a expressão de CK16 foi menor nas camadas espinhosa e superficial da gengiva e palato duro. O índice de proliferação celular foi determinado utilizando-se a marcação imunohistoquímica para Ki-67 e quantificado com o auxílio do analisador de imagem Kontron 400. Os índices de proliferação foram de 7,7 (:t3,6) e 28,2 (:t9,8) para a MBN e HPE, respectivamente. Assim sendo, na HPE a proliferação celular mostrou-se aumentada, resultando no aumento da espessura e diminuição da queratinização. Para comparação, também foram incluídos 13 casos de displasia epitelial bucal de grau moderado, os quais revelaram índice médio de proliferação de 46,0 (:t14,0). Quanto ao infiltrado inflamatório, nos granulomas organizados predominaram as células CD68+, com os linfócitos CD4+ distribuídos na periferia. Nas áreas não granulomatosas, houve equilíbrio entre células CD4+ e CD8+. Linfócitos B (CD20+) estavam esparsamente distribuídos no tecido conjuntivo inflamado. Células dendríticas (8100+) foram observadas no epitélio, assim como no tecido conjuntivo subepitelial e na periferia dos granulomas organizados. Neutrófilos (CD15+) predominaram nos microabscessos intraepiteliais e nas ulcerações. Adicionalmente, descreve-se um caso clínico de Pmicose que apresentou uma lesão crônica, ulcerada e solitária, com aspecto clínico similar ao carcinoma espino celular em rebordo alveolar / Abstract: Paracoccidioidomycosis (Pmycosis) is a common systemic mycosis in Latin America, with variable clinical presentation. The chronic form frequently involves the oral mucosa, showing multiple moriform like lesions. Microscopically, oral Pmycosis is cha_acterized by pseudoepitheliomatous hyperplasia (PEH), and granulomatous inflammatory response, besides polimorphonuclear (PMN) accumulation in the epithelium and connective tissue. This work describes, by immunohistochemistry, cytokeratins (CKs) expression and cellular proliferation in PEH, as well as the distribution of inflammatory cells in the epithelial and connective tissues. Additionally, a clinical case of oral Pmycosis is described. PEHs were evident in ali 28 oral Pmycosis specimens from the buccal mucosa, lip, gingiva and hard palate used to study CKs expression (AE1/AE3, 34_E12, CK1, CK5, CK6, CK7, CK8, CK10, CK14, CK16, CK18 and CK19) and cell proliferation (Ki-67). In the basal cell layer, the results were similar for ali CKs, in normal oral mucosa (NOM) and PEHs. Differences found in the suprabasal layer of NOM and PEH are described below. In Pmycosis, CK1 and CK10 were not expressed in spinous and superficial layers of the lip, gingiva and hard palate. CK14 was positive in suprabasallayer of the buccal mucosa and lip. CK6 was more frequently expressed in spinous layer of the lip, gingiva and hard palate, nevertheless CK16 expression was decreased in the spinous and superficial layers of the gingiva and hard palate. Cellular proliferation index was determined by Ki-67 immunostaining and quantification with the aid of an image analyzer system (Kontron 400). The proliferation index was 7.7 (:t3.6) and 28.2 (:t9.8) for NOM and PEH, respectively. Therefore in PEH, epithelial proliferation was increased, resulting in a thicker and parakeratotic epithelium. Proliferative index of moderate oral dysplasia, included for comparison was 46.0 (:t14.0). Organized granulomas showed a predominance of CD68+ cells, with CD4+ cells at the periphery. Similar number of CD4+ and CD8+ cells were found in non granulomatous areas. B Iymphocytes (CD20+) were sparsely distributed throughout the connective tissue. Dendritic cells (S100+) were found in the epithelium, sub-epithelial connective tissue and periphery of organized granulomas. PMN (CD15+) predominated in areas of intraepithelial microabscesses and ulcerations. Additionally, a clinical case of Pmycosis is described that showed a solitary chronic ulcerated lesion, similar to a spinous cell carcinoma of the alveolar ridge / Doutorado / Estomatologia / Doutor em Estomatopatologia

Orientador: Angelo Luiz Cortelazzo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:56:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Argento_MarcoAntonio_D.pdf: 15864964 bytes, checksum: a88c337703b051d7aa45a6a32fd60566 (MD5) Previous issue date: 2004 / Doutorado

Orientador: Edgard Graner / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:57:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_JulianaPereira_M.pdf: 1647818 bytes, checksum: 1c96341fa46efec38b67cc72afef04e4 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Fibromatose Gengival Hereditária (FGH) é uma doença genética rara, caracterizada por um crescimento lento e progressivo do tecido gengival. Sua causa não é conhecida até o momento, entretanto, evidências indicam que uma elevada síntese de proteínas da matriz extracelular, associada à redução da sua degradação e a uma maior proliferação dos fibroblastos gengivais são importantes na patogenia. A Ácido Graxo Sintetase (FAS) é a enzima anabólica responsável pela produção de ácidos graxos, sendo expressa em grandes quantidades em células com alto potencial proliferativo, como as células endometriais durante a fase proliferativa do ciclo menstrual e as células de diversas neoplasias malignas. A inibição da atividade desta enzima em células tumorais leva a um bloqueio do ciclo celular que culmina com a morte por apoptose. Com o objetivo de verificar se o aumento do crescimento celular observado nas células de FGH está associado com a expressão ou atividade de FAS, oito linhagens de fibroblastos de FGH e oito de Gengiva Normal (GN) foram utilizadas neste estudo. Algumas linhagens de FGH apresentaram um potencial proliferativo significantemente maior do que os fibroblastos de GN, o que foi demonstrado através de curvas de proliferação e dos índices de positividade para as proteínas nucleares Ki-67 e PCNA. Através de experimentos de western blot, estas mesmas linhagens exibiram grandes quantidades da enzima FAS e de receptor de andrógeno (RA). A inibição da atividade de FAS, com o bloqueador natural cerulenina, provocou uma redução da proliferação tanto dos fibroblastos de FGH como dos de GN. Além disso, o tratamento destas células com DHT resultou em um aumento na expressão do RA e de FAS em linhagens de FGH e GN. Estes resultados mostram que a enzima FAS é sintetizada por fibroblastos normais e de FGH e é essencial para a proliferação destas células. Além do mais, a produção de FAS nestas linhagens pode ser regulada por andrógenos / Abstract: Hereditary Gingival Fibromatosis (HGF) is a rare genetic condition clinically manifested by a slow and progressive growth of the gingival tissue. The exact biochemical and genetic mechanisms underlying this disease are not known. However, HGF is characterized by an abnormal accumulation of collagen and other extracellular matrix molecules associated with a decrease in the activity of matrix metalloproteases. Moreover, enhanced proliferation of gingival fibroblasts has also been described as important for the HGF pathogenesis. Fatty Acid Synthase (FAS) is the major anabolic enzyme involved in the endogenous production of saturated fatty acids. It is expressed in large amounts in highly proliferative cells such as in the endometrium during its proliferative phase and cancer cells. The specific inhibition of FAS in tumor cells leads to an inhibition of the cell cycle progression and apoptosis. In order to verify if the increased proliferation of the HGF cells is associated with the expression and activity of FAS, eight primary cultures of HGF fibroblasts and seven of fibroblasts from clinically normal gingiva (NG) were analyzed in this study. Proliferation curves and immunocytochemistry for Ki-67 and PCNA demonstrated that some HGF cell lines have a significantly higher proliferation than the NG fibroblasts. By using protein lysates and western blot experiments, high amounts of FAS and androgen receptor (AR) were detected in the HGF cell lines with the highest proliferative potential. The inhibition of FAS activity with cerulenin promoted a strong reduction in the proliferation of both HGF and NG fibroblasts. In addition, the treatment of HGF and NG cells with DHT enhanced AR and FAS protein levels. Taken together, these results show that FAS is synthesized by normal and HGF fibroblasts under an androgen-dependent control and is important for the proliferation of these cells / Mestrado / Patologia / Mestre em Estomatopatologia

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:07:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6437_1.pdf: 333606 bytes, checksum: e93c5a225d5876158ca1324ee0a7204e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2002 / Investigações feitas com organismos que apresentam o fenótipo de resistência a compostos tóxicos são importantes nas áreas biotecnológica, clínica e agrícola. Neste trabalho, foi observada a correlação entre os níveis de resistência de células de levedura ao fungicida agrícola Benomyl􀂣 e a presença de determinados genes envolvidos com o processo. Uma linhagem selvagem da K. marxianus e várias linhagens industriais de S. cerevisiae foram testadas para a variação inter e intraespecífica desta resistência. A metodologia usada abordou os genes TUB2 e ICT1. O gene TUB2 codifica a proteína 􀁅-tubulina que está relacionada com a formação do citoesqueleto. Variações alélicas desta proteína estão relacionadas com a sensibilidade ao fungicida Benomyl®. O gene ICT1 é componente do sistema MDR (Multidrug Resistence) de leveduras. Sua função é desconhecida, embora sua inativação parece promover sensibilidade as drogas. As análises da cinética do crescimento celular das linhagens testadas na presença de Benomyl®, juntamente com o perfil de amplificação gênica destes dois genes, sugerem um complexo mecanismo de defesa celular

Orientador: Wirla M. S. C. Tamashiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T11:17:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ucelli_Patricia_M.pdf: 5366373 bytes, checksum: 14be996dff374a026b36f1ba0ff78848 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Um dos fenômenos mais críticos no envelhecimento imunológico parece ser as alterações nas subpopulações de linfócitos T. Com o objetivo de realizar um estudo sistemático sobre o envelhecimento do sistema imune, camundongos BALB/c foram empregados em diferentes etapas de seu desenvolvimento pós-natal. A resposta imune de animais de diferentes faixas etária foi medida por: 1) produção de anticorpos dirigidos a antígenos simples (TNP) e complexo (BSA); 2) capacidade proliferativa de linfócitos T frente a Com-A, e 3) níveis de citocinas produzidas por células esplênicas de animais naive ou imunizados e 4) perfil de subpopulações de células T 'CD4 POT. +¿ e 'TCD8 POT. +¿. Para esses estudos, os animais foram imunizados com TNP-BSA emulsionado em ACF 50%, de acordo com esquema de uma ou de duas doses do antígeno. Os níveis de anticorpos contra TNP e contra BSA foram medidos nos soros colhidos periodicamente. Para os estudos da capacidade proliferativa e de produção de citocinas por células T, grupos de camundongos imunizados e controles, foram sacrificados 14, 28 e 60 dias após o início da imunização e os esplenócitos desses animais foram colocados em cultura na presença de Com-A. A proliferação foi acompanhada empregando-se o corante MTT para revelar a multiplicação celular e os sobrenadantes coletados foram utilizados para dosagem de citocinas... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-05-24T17:51:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 337733.pdf: 2596779 bytes, checksum: c5381f2da78b8237b60b5e66535caf71 (MD5) Previous issue date: 2015 / Os decápodes representam um grupo de crustáceos que obteve sucesso evolutivo em ambientes diferentes, e apresentam características que os tornam de interesse para estudos de biologia do desenvolvimento. A espécie Macrobrachium olfersi destaca-se por ter sido estudada amplamente, desde sua distribuição geográfica até biologia reprodutiva e desenvolvimento embrionário. Foram padronizados diferentes estagiamentos para caracterizar a ontogenia dessa espécie, sendo observados alguns processos restritos ao grupo em que ela está inserida. A diferenciação da região posterior do corpo, correspondente a papila caudal, é realizada pelo mecanismo de teloblastia. Esse mecanismo forma os segmentos corporais e é controlado por genes conservados entre os artrópodes. O objetivo desse trabalho foi caracterizar a morfologia dos embriões nos estágios que compreendem o pré-nauplius (E3), nauplius (E4) e pós-nauplius inicial (E5 a E7) e relacionar esses dados com a quantificação da expressão relativa dos genes caudal, engrailed e even-skipped. Foram realizadas marcações nucleares com Hoechst nos preparados totais de ovos e de embriões nas idades que correspondem aos estágios E3 a E7, e observou-se o crescente rearranjo celular organizado pelo processo de teloblastia na região pós-naupliar, sendo visualizados os ectoteloblastos, dispostos em fileiras ao longo da papila caudal. A expressão relativa do gene caudal decresce com o avanço do crescimento da papila caudal e sua expressão também foi identificada nos ovários das fêmeas, comprovando a contribuição materna desse gene nessa espécie. Para o gene even-skipped foram identificadas duas isoformas, na primeira há decréscimo de expressão relativa com o avanço da embriogênese, o que possivelmente está relacionado com a segmentação corporal, e na segunda isoforma há aumento de sua expressão, o que pode estar relacionado com a neurogênese, outra função conhecida desse gene. engrailed se apresentou expresso linearmente entre as diferentes idades, sendo que pode atuar tanto no processo de segmentação quanto no processo de neurogênese. O presente estudo relacionou temporalmente os aspectos morfológicos com o controle a nível molecular, propiciando resultados para melhor compreender a evolução dos artrópodes.<br> / Abstract : Decapods constitute a group of crustaceans with evolutionary success in different environments, and have features that make them interesting for developmental biology studies. M. olfersi stands out for having been studied widely, since its geographical distribution to reproductive biology and embryonic development. Different stagings were standardized to characterize the ontogeny of this species, being analyzed some processes restricted to the group in which it is inserted. The differentiation of the posterior region of the body, corresponding to caudal papilla, is performed by the teloblastic mechanism. This mechanism forms the body segments and is controlled by genes whose are conserved among the arthropods. The objective of this work was to characterize the morphology of embryos in stages that comprise the pre-nauplius (E3), nauplius (E4) and post-nauplius (E5 to E7) and correlate that data with the genes relative expression quantification caudal, engrailed and even-skipped. Nuclear stainings were held with Hoechst in whole-mounted eggs and embryos in the stages E3 to E7, and noted the growth on cellular rearrangement organized by teloblastic mechanism process in the post-naupliar region, being identified the ectoteloblasts, arranged in rows along the caudal papilla. The relative gene expression of caudal decreases with the advance on the caudal papilla growth and their expression was also identified in oocytes of females, proving the maternal contribution of this gene in this species. For the gene even-skipped, two isoforms have been identified, in the first one there is a decrease on its relative expression with the advancement of embryogenesis, which possibly is related to body segmentation, and in the second isoform there is an increase on its expression, which may be related to neurogenesis, another known function of this gene. engrailed is expressed linearly between the different ages, and possibly acts on both the segmentation process as in the process of neurogenesis. The present study related temporally on the morphological aspects with the control at the molecular level, providing results to better understand the arthropods evolution.

Orientador: Eduardo Dias de Andrade / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-19T06:29:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Martins_DorisAparecidaAntoniodeSouza_D.pdf: 1141217 bytes, checksum: 4277fd9c9507d644a458eae620426674 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: Os corticosteróides, assim como os antiinflamatórios não esteróides, são largamente empregados em clínica médica e odontológica, no controle de doenças ou estados inflamatórios. Os mecanismos de ação antiinflamatória desses agentes são múltiplos e altamente complexos. Dentre estes, destacam-se aqueles relacionados à cinética e função dos leucócitos. Em função disto, objetivou-se neste trabalho avaliar os efeitos da betametasona, piroxicam e diclofenaco potássico, na leucodiapedese, induzida experimentalmente na cavidade peritoneal de camundongos. Para tanto, 40 camundongos foram divididos em 4 grupos e, tratados com betametasona (0,1 mg/Kg), piroxicam (0,5mg/Kg) e diclofenaco potássico (2mg/Kg), em dose única. Os animais controle receberam salina. Exatamente uma hora após os tratamentos descritos, a leucodiapedese foi induzi da através da injeção intraperitoneal de um agente quimiotático. Após 5 horas deste procedimento, o fluído peritoneal foi colhido e a contagem global de leucócitos e diferencial para neutrófilos foi efetuada. Os resultados falam a favor de uma redução significante (p<0,05) da migração de leucócitos, quando a betametasona foi empregada. Ao contrário, os AINEs estudados estimularam a leucodiapedese no mesmo modelo de estudo / Abstract: Corticosteroids, like non-steroidal anti-inflammatories are widely employed in medical and odontological practice in the control of inflammatory-conditions or diseases. The anti-inflammatory mechanisms of these agents are multiple and highly complex. Foremost among these are those related to leukoeytes function and kinetics. As a result, the objetive of this work has been to evaluate tha affects of betamethasone, piroxicam and diclofenae potassium in leukodiapedesis, experimentally induced in the peritoneal cavity of mice. For this purpose, 40 mice were divided into 4 groups and treated with betamethasone (0,1 mg/Kg), piroxicam (0,5mg/Kg) and diclofenae potassium (2mg/Kg) in a single dose. The control animais received saline. Exactly one hour after the treatment described, leukodiapedesis was induced through an intraperitoneal injection of a chemotactic agent. After 5 hours the peritoneal fluid was collected and global count of leukocytes and differential for neutrophils performed. . The results speak favourably for a significant reduction (p<O,05) in the migration of these cells when betamethasone was employed. On the other hand, the AINEs studied stimulated the leukoeytes migration in the same study model / Doutorado / Farmacologia / Mestre em Ciências