Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:31Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002-06-04Bitstream added on 2015-01-26T13:30:16Z : No. of bitstreams: 1 000214595.pdf: 1597799 bytes, checksum: 25a4c7187a6d25f37c5fbf9cb81088dc (MD5) / A ausência de uma política de prevenção adequada transforma as neoplasias da cavidade oral, que são facilmente detectáveis em seu estagio inicial, numa patologia quase sempre diagnosticada num estado evolutivo avançado. A exceção neste quadro é o carcinoma de lábio, que por características próprias são, em sua maioria, diagnosticados em estágios iniciais. Particularidades inerentes ao tratamento cirúrgico, que é a terapêutica de escolha, faz com que a maioria dos cirurgiões optem pela realização da cirurgia sob anestesia geral No atual estudo procuramos observar, por meio de avaliação clinica, o benefício obtido quando do uso da radiação laser de CO2 como ferramenta de diérese na terapêutica cirúrgica desta patologia quando realizada ambulatorialmente. Selecionamos 9 pacientes portadores de carcinoma epidermóide de lábio inferior no estádio T1N0M0 e 1 no estádio T2N0M0 que foram submetidos a exerése da neoplasia em ambulatório com uso da radiação laser de CO2, com dose de potência de 7 Watts (1 paciente) e 5 Watts (9 pacientes}. Concluímos ser a radiação laser de CO2, na dose de 5 Watts, uma ferramenta extremamente útil proporcionando um campo cirúrgico exangue, a determinação das margens de segurança (radicalidade) na ressecção da doença com extremo conforto e contribui com o princípio oncológico da centripeticidade ao promover o selamento dos vasos sanguíneos e linfáticos. O resultado funcional e estético observado nos pacientes submetidos ao tratamento foram de excelente qualidade / The absence of a policy of adequate prevention transforms malignant lesions of the oral cavity, which are easily detectable in initial stage, in a pathology almost always diagnosed in an advanced evolutionary state. The exception in this case is the lip carcinoma, which proper characteristics are, in majority, diagnosed in initial stages. lnherent particularities to the surgical treatment, that is the choice therapeutics, makes that the most surgeons opt by the accomplishment of the surgery under general anesthesia. In the current study we propose to observe, by means of clinical evaluation, the benefit obtained when of the use of the CO2 laser radiation as a dieresis tool in the surgical therapeutics of this pathology when make in ambulatory room. We select 9 patients with squamous cell carcinoma in inferior lip, in the stadium T1N0M0 and 1 in the stadium T2N0M0 who were submitted for exeresis in ambulatory with use of the laser CO2 radiation, with power of 7 Watts (1 patient) and 5 Watts (9 patient). We conclude be the CO2 laser radiation, in the power dose of 5 Watts, is an extremely useful tool providing a clean surgical field, the determination of the safety margins (radicalit) in resection of the disease with extreme comfort and contributed with the oncological principle of centripecity when promoting the sealing of the blood and lymphatic vessels. The functional and aesthetic results observed in the patients submitted to the treatment went of excellent quality

Made available in DSpace on 2018-07-27T18:26:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-27. Added 1 bitstream(s) on 2018-07-27T18:30:36Z : No. of bitstreams: 1 000872993.pdf: 5261122 bytes, checksum: cf38025db65ae819f1a7eb3008731eab (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O câncer de mama é um dos maiores problemas de saúde pública da atualidade. A projeção é de que, entre 2014 e 2015, cerca de 58 mil novos casos com esta doença serão registrados no Brasil. Estes tumores são motivo de preocupação adicional dada sua grande tendência de evoluir para metástase. Nestes casos, a chance destas células se alojarem no tecido ósseo é particularmente considerável. Acredita-se que isso se deve à grande afinidade das células tumorais da mama pela hidroxiapatita, o principal componente inorgânico do osso. Este trabalho teve como objetivo a síntese de um nano-compósito que contém este composto para explorar tal afinidade no tratamento destes tumores. Além da apatita, foram inseridas nanopartículas magnéticas ao nanocompósito, combinando-se assim a possibilidade de aplicá-lo tanto no tratamento (carreamento magnético de fármacos e hipertermia magnética) como no diagnóstico de tumores [geração de contraste em diferentes técnicas de diagnóstico como, imagens por ressonância magnética nuclear (IRMN) e exames com biossuscepometria de corrente alternada (BAC)]. O nano-compósito preparado é formado por nanopartículas magnéticas de ferritas de Mn e Zn, de fórmula geral Mn(1-x)ZnxFe(2-y)O4, revestidas com o polímero quitosana modificada com nanocristais de apatita. Visando a aplicação deste sistema como carreador de fármaco antitumoral para o tratamento do câncer de mama, foi também incorporado o fármaco paclitaxel. O nanocompósito foi caracterizado após cada etapa da síntese com as seguintes técnicas físicas de estado sólido: difratometria de raios X (DRX) e difratometria de nêutrons (DN), ambos com refinamento estrutural pelo Método de Rietveld, microscopia eletrônica de varredura (MEV), espectrocopia no infravermelho (FTIR), espectroscopia de raios X na borda de absorção (NEXAFS), microscopia de transmissão e varredura com raios X (STXM), espalhamento inelástico de... / Breast cancer is one for the biggest wordwide health problems. In Brazil, 58,000 new cases of such a disease are expected to be diagnosed between 2014 and 2015. These tumors require additional concerns due to their great tendency in generating metastasis. In these cases, there is considerable chance for the cancer cells to migrate to the bone tissue. Such a behavior is most likely due to the affinity between the breast cancer cells and hydroxyapatite, the main inorganic component of bones. This work aimed to synthesize a nanomposite containing this compound in order to explore such affinity in the treatment of these tumors. Additionally to the apatite, magnetic nanoparticles have been incoporated to the nanomposite, aiming to combine possible applications on both cancer treatment (magnetic drug delivery and magnetic hyperthermia approaches) and diagnosis [contrast generation in magnetic resonance imagine (MRI) and alternate current biosusceptormetry (ACB) exams]. The obtained nanocomposite is composed by magnetic nanoparticles of Mn-Zn ferrites, with general formula Mn(1-x)ZnxFe(2-y)O4, coated with the polymer chitosan modified by apatite nanocrystals. Aiminf the application of this system as an anti-tumor drug delivery tool for breast cancer treatment, the drug paclitaxel has also been incoporated to the material. The nanocomposite was characterized after each synthesis with the following solid state physics techniques: X-ray and neutron powder diffraction (XRD and ND) with structure refinement by the Rietveld method, scanning electron microscopy (SEM), infrared spectroscopy (FTIR), near edge X ray absorption spectroscopy (NEXAFS), scanning transmission X ray microscopy (STXM), inelastic neutrons scattering (INS) and magnetic characterization. By means of in vitro tests, the cytotoxicity of the materials in healthy cells (NIH/3T3) as well as their association to breast tumor cells (MCF7) were evaluated. The results show that...

Orientador: Rafael Henrique Nóbrega / Banca: Rosicleire Veríssimo Silveira / Banca: Sérgio Ricardo Batlouni / Banca: Luís Antonio Justulin Junior / Banca: Maricy Apparício Ferreira / Resumo: Nos vertebrados, a espermatogênese é um processo de desenvolvimento celular altamente conservado e organizado, no qual uma pequena população de espermatogônias tronco produz continuamente milhões de espermatozóides, os quais são os responsáveis pela propagação do genótipo dos machos. Este processo é sustentado pelas espermatogônias tronco através da sua capacidade de auto-renovação e diferenciação. Vários aspectos relacionados com a regulação da atividade e fisiologia das espermatogônias tronco são ainda desconhecidos nos peixes teleósteos. Portanto, a técnica de transplante de células germinativas torna-se uma poderosa abordagem para melhorar o conhecimento da biologia das espermatogônias tronco e da espermatogênese. Resumidamente, a técnica envolve a transferência de células germinativas isoladas de um doador fértil para os testículos de um receptor estéril, e as células transplantadas são capazes de restaurar a gametogênese do receptor. Neste contexto, realizamos uma caracterização morfológica e estereológica dos diferentes tipos de células encontradas na espermatogênese da carpa comum (Cyprinus carpio). Também caracterizamos fenotipicamente as potenciais espermatogônias tronco. Portanto, descrevemos cinco tipos espermatogôniais na carpa comum: espermatogônias indiferenciadas do tipo A (Aund* - Aund), espermatogônias diferenciadas do tipo A (Adiff) e espermatogônias do tipo B (inicial e final). Nesta espécie, o processo espermatogênico durou aproximadamente uma semana. Nos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In vertebrates, spermatogenesis is a highly conserved and organized developmental process, in which a small population of spermatogonial stem cells (SSC) continuosly produce millions of spermatozoa, which are responsible for spreading the male genotype. Likewise other stem cells, SSC are capable of either self-renew or differentiate. Several aspects related to the regulation of SSC activity and physiology are still unknown in teleost fish. Thus, the germ cell transplantation technique becomes a powerful approach to improve the knowledge of SSC biology and spermatogenesis. Briefly, the technique involves the transfer of germ cells isolated from a fertile donor into the testes of a sterile recipient, and transplanted donor germ cells are able to restore the recipient gametogenesis. Taking advantage of this background, we performed morphological and stereological characterization of the different cell types found in the common carp (Cyprinus carpio) spermatogenesis. We also characterized the putative SSC candidates by morphology. Therefore, we described five spermatogonial types in common carp: type A undifferentiated spermatogonia (Aund* - Aund), type A differentiated spermatogonia (Adiff) and type B spermatogonia (early and late). In this species, the spermatogenic process lasted approximately one week. Our findings demonstrated that the spermatogonial population expressed the c-Kit, Gfrα1 and POU2 proteins. Donor germ cells isolated from goldfish were transplanted non-surgically through urogenital papilla into the sexually mature cytoablated common carp recipients. Donor transplanted germ cells were able to colonize and develop in recipients' testes. Overall, our results strengthens the knowledge of germ cell biology, focusing on stem cells. Finally, transplantation, standardized here, is an approach with significant implications for the conservation and management of endangered and valuable fish species. / Doutor

Orientador: Estela Kaminagakura Tango / Coorientadora: Renata Falchete Do Prado / Banca: Luana Marotta Reis de Vasconcellos / Banca: Eduardo Rodrigues Fregnani / Resumo: A sobrevida de pacientes submetidos a tratamentos para câncer de cabeça e pescoço está aumentando e a busca por reabilitação é necessária para promover qualidade de vida. O objetivo deste estudo é avaliar o perfil da expressão gênica de transcritos relacionados na osteogênese e osteoclastogênese em uma cultura primária de células mesenquimais de fêmures de ratos submetidos a radioterapia e colocação de implantes de titânio. Setenta e dois ratos receberam implantes de titânio em ambos fêmures. Os animais foram divididos em quatro grupos: 1) Grupo controle (C): cirurgia de colocação dos implantes; 2) Implante + irradiação imediata (IrI): irurgia de implantes e seguido de irradiação imediata; 3) Implante + irradiação tardia (IrT): cirurgia de implantes e irradiação após 4 semanas; 4) Irradiação prévia + implantes (IrP): irradiação e após 4 semanas cirurgia de implantes. A dose de irradiação foi de 30 Gy fracionadas em duas sessões. As eutanásias nos períodos de 3, 14 e 49 dias após o tratamento. A células cultivadas sofreram diferenciação em osteoblastos. A expressão gênica dos genes Fosfatase alcalina (Alp), Colágeno 1 (Col-1), Integrina !1 (Itg ! ), Osteocalcina (Bglap), Osteopontina (Osp), Osteonectina (Osn), Sialoproteína Óssea (Bsp), Fator de crescimento transformador (Tgf- ! ), Osterix (Osx),Fator relacionado ao Runt (Runx2), Fator estimulador de colônias de macrófagos (M-csf), Interleucina -6 (Il-6) Apolipoproteína E (Apo-E), Prostaglandina E2 (PgE2), foram avaliados por qRT-PCR e os resultados validados por ELISA. A expressão mais alta de Alp foi encontrada no grupo IrP (p=0.0001) e foi subexpressa nos grupos IrI e IrT (p<0.0001 e p=0.0041 respectivamente). Resultados similares foram encontrados nos transcritos de Itg !, On, Bsp, Osx e Runx2. mRNA do Tgf- ! foi hiperexpresso em todos os grupos principalmente...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico) / Abstract: Prognosis ofpatient submitted to headand neck cancer treatment has increased and the oral rehabilitation becomes necessary to improve their life quality. The aim of this study was to evaluate the gene expression profile of transcripts related to osteogenesis and osteoclastogenesis in primary culture of mesenchymal cells from rat femurs submitted to radiotherapy and installation of pure titanium implant. Seventy two rats received titanium implants in both femurs. The animals were divided in four groups: 1- Control (C) implant surgery; 2- Implant + immediate irradiation after 24 hours (IrI); 3- Implant + late irradiation after 4 weeks (IrL); 4- Implant + Previous irradiation 4 weeks before surgery (IrP) irradiation. The irradiation dose was 30Gy fractioned in two. The animals were euthanized in day 3, 14 and 49 after surgery. The mesenchymal cells from femurs were extracted and cultivated. The differentiation into osteoblastic cells was verified by calcification nodules formation. The gene expression of Alkaline Phosphatase (Alp), Collagen 1 (Col 1), Integrin β1 (ItgB1), Osteocalcin (Bglap), Osteopontin (Osp), Osteonectin (Osn), Bone Sialoprotein (Bsp), Transforming Growth Factor β-type (Tgf-β), Osterix (Osx), Runt-related transcription factor 2 (Runx2), Macrophage ColonyStimulating Factor (M-csf), Interleukin-6 (Il-6), Apolipoprotein E (ApoE) and Prostaglandin E2 (PgE2) were evaluated by qRT-PCR and the results were validated by ELISA test. Higher mRNA of Alp expression was found in IrP group (p=0.0001) and it was downregulated in IrI and IrT groups (p<0.0001 and p=0.0041, respectively). Similar results were found for transcript levels of ItgB1, Osn, Bsp, Osx and Runx2. mRNA of Tgf-β was overexpressed in all groups mainly in 49 days. After 49 days, Osn and Bsp transcripts were downregulated in the 3 groups evaluated. The Bglap and IL-6 protein ..(Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-12-11Bitstream added on 2014-06-13T20:16:24Z : No. of bitstreams: 1 roncatti_ftlb_me_araca.pdf: 389281 bytes, checksum: a97475a27c32aac594bae9073a20134e (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Morte celular programada (MCP) ou apoptose é um fenômeno correspondente a resposta do hospedeiro a uma infecção viral, envolvida na morte e/ou sobrevivência da célula infectada. O vírus da cinomose, canine distemper virus (CDV) é capaz de induzir a apoptose em células linfoides circulantes, tecidos linfóides e cerebelo de cães naturalmente infectados. O CDV também afeta as células Vero e linhagens de células de tumor cervical modulando várias etapas da MCP. Além disso, a fase de imunossupressão, estabelecida a partir da infecção pelo CDV, nem sempre está associada à detecção de partículas virais nas células infectadas. No presente estudo, células mononucleares de sangue periférico de cães (CMSP) foram coletadas, cultivadas e infectadas com a estirpe vacinal de CDV (Onderstepoort) e após 24 h da infecção os eventos iniciais da apoptose foram evidenciados pela marcação e quantificação das proteínas anexina v™ e ApoTrace™. A expressão do RNA mensageiro relacionado ao gene Bax, BCl-2, caspase-3, 8 e 9 e survivin foi realizada em culturas de CMPC infectadas e não infectadas após 24h pela reação de cadeia de polimerase em tempo real. A infecção viral foi responsável pela perda da viabilidade CMPC com expressão da anexina™ V FITC e Apo-Trace ™ FITC em mais de 80% das células infectadas em comparação ao grupo controle (p < 0,001) após 24 h. Os valores elevados da anexina™ V FITC e Apo-Trace ™ FITC encontrados estão em contraste com a maior expressão do mRNA do survivin e da BCl-2, considerados marcadores anti-apoptotic (p < 0,0002). Além disso, Bax, caspase 3, 8 e 9 foram expressos na mesma proporção nas CMPC infectado e não infectado, sem diferenças entre elas (p < 0,005). Em síntese, as células infectadas pelo CDV aumentaram a expressão de survivin e transcrição de gene BCL-2, um mediador de... / Programmed cell death or apoptosis is a central axis of the host response to virus infection involved in cell survival and death. In this respect, several responses are developed by host cells that may control virus replication and infection. On the other hand, viruses have developed strategies to counteract host responses. Canine distemper virus (CDV) has been described to induce apoptosis in lymphoid tissues, lymphoid cells and cerebellum of naturally infected dogs. It has been also described affecting Vero cells and cervical tumor derived cells line by modulating programmed cell death pathways. In addition, the immunosuppression stage established from CDV infection is not always associated to virus detection in damaged cells. Examining the host response at early stages of immunosuppression, especially the expression of activators and/or inhibitors of apoptosis processes can provide important understanding of how the immune responses to CDV are orchestrated. For this purpose, canine peripheral blood mononuclear cells (PBMC) collected from healthy dogs were cultured and infected by CDV vaccine strain (Onderstepoort) and after 24 h post-infection (p.i.) early events of apoptosis were detected by search for annexin V™ and ApoTrace™ markers. The expression of mRNA of Bax, BCl-2, caspase-3, 8 and 9 and also survivin genes was performed in infected and uninfected canine PBMC at 24 h post- infection by real time polymerase chain reaction. The vaccine strain induced loss of PBMC viability with expression of annexin™ V FITC and Apo-Trace™ FITC in more than 80% of infected cells in comparison to control group (p<0.001) at 24h post-infection. The initial of early apoptosis after 24h post- infection is in contrast with higher expression of mRNA of surviving and BCl-2, two major anti-apoptotic proteins (p < 0.0002...(Complete abstract click eletronic acces below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-26Bitstream added on 2014-06-13T18:31:21Z : No. of bitstreams: 1 tapparo_af_me_sjrp.pdf: 812527 bytes, checksum: aac6f17be2c6552511dcaa2c2bd79c32 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Atualmente, as culturas celulares são consideradas uma das ferramentas mais importantes na virologia. Os meios de cultura utilizados na manutenção destes sistemas não oferecem capacidade às células de adsorver e se multiplicar em matrizes plásticas sem a adição suplementar de soro fetal bovino (SFB). Entretanto, o uso do SFB não é aconselhável devido às variações encontradas entre os lotes, o alto grau de proteína animal e a possibilidade da presença de agentes infecciosos. Além dos aspectos sanitários, existe o aspecto ético em relação à obtenção deste produto biológico. Com o aumento dos ensaios in vitro a quantidade estimada de produção de soro fetal bovino no mundo é de aproximadamente 500.000 litros/ano, isto significa, mais de 1.000.000 de fetos bovinos sacrificados para obtenção de SFB. O objetivo deste estudo foi cultivar as células CER (chicken embryo related) em diferentes meios de cultura: M-VSFM, 293- SFMII, VP-SFM, VP-SFM AGT, Glasgow, Leibovitz 15, adicionados de 2mg/ml ou 5mg/ml de IGF-1 (Insulin-like Growth Factor) e verificar a possibilidade das estirpes virais Lukert e Farangher de se adaptarem neste sistema. Nesta cultura a expressão da fibronectina e da laminina (LB1 e LB2) foram dectadas por imunofluorescência e imunoperoxidase indireta, respectivamente. As monocamadas de células CER foram infectadas pela estirpe Lukert e Farangher, sendo a m.o.i (multiplicidade de infecção) utilizada de 1.0. Após três passagens, o RNA viral foi extraído para determinar as substituições genéticas. A região hipervariável do gene VP2 foi amplificada por RT/PCR. Para confirmar as mutações, os produtos da PCR foram seqüênciados e comparados com as seqüências de VDIB publicadas no GenBank. Os resultados demonstraram que o meio VP-SFM e 5µg/mL de IGF-1 aplicado às culturas foi o melhor para a adaptação direta do cultivo das monocamadas... / Currently, the cell culture are considered one of the tools most important in the virology. The culture medium used in the maintenance those systems do not offer capacity to the cells of attachment and if spread in plastic surfaces without the supplementary addition of foetal bovine serum (FBS). However, the use FBS is not advisable due to batch-tobatch variation in composition, the high animal protein content, and the possibility of the presence of infectious agents. Beyond the sanitary aspects, exists the ethical aspect in relation to the attainment of this biological product. With the increase of in vitro assays the amount of FBS produced in the world is estimated at approximately 500.000 litres/year, this carry in 1.000.000 bovine fetuses sacrified for FSB attainment. The aim of this study was to adapt the CER cells (chicken embryo related) on different medium: M-VSFM, 293-SFMII, VP-SFM, VP-SFM AGT, Glasgow, Leibovitz 15, supplemented by 2mg/ml or 5mg/ml IGF-1 (Insulin-like Growth Factor) and to verify the possibility the Lukert and Farangher viral strain adapted in this system. The expression of the fibronectin and laminin (LB1 and LB2) were detected by immunofluorescence and indirect immunoperoxidase, respectively. The CER cells monolayer had been infected by Lukert and Farangher strain, being the m.o.i (infection multiplicity) used of 1.0. After three passages, viral RNA was isolated to determine the genetic changes. The hypervariable regions of the VP2 gene was amplified by RT/PCR. To confirm the genetic changes, PCR products were sequenced and compared to the sequences of the GenBank published VDIB strain.The results had demonstrated that the medium VP-SFM and 5µg/mL IGF-1 applied to the cultures was optimum for the direct adaptation of the culture of the monolayers without addition of FBS. In relation the detection of the extracellular protein, the fibronectin was induced... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-01Bitstream added on 2014-06-13T18:50:09Z : No. of bitstreams: 1 ribeiro_ma_me_botib.pdf: 2954673 bytes, checksum: c990f9b8724da166aa165e88f89d2a7b (MD5) / A infertilidade acomete 10-15% dos casais em idade reprodutiva e o fator masculino pode ser responsável por 30-50% dos casos. A fertilidade masculina e o processo de espermatogênese estão diretamente relacionados à capacidade das células de Sertoli em produzir fatores determinantes para o desenvolvimento das células germinativas. Apenas as célulasde Sertolipossuem receptores paratestosteronaeFSHe, portanto, estascélulassão as principais reguladoras da espermatogênese. Estudos sugerem que 60-70% dos casos de infertilidade masculina são considerados idiopáticos, uma vez que os mecanismos moleculares envolvidos na espermatogênese ainda são desconhecidos. Estudos recentes relatam que homens oligozoospérmicos apresentam mudança no padrão de metilação do DNA nos espermatozoides,nas regiões que controlam a expressão dos genes regulados por imprintingH19 e IGF-2. Um dos grandes responsáveis para a alteração do padrão de metilação desses genes são os fatores ambientais, especialmente compostos orgânicos de alta toxicidade, como o 2,3,7,8- Tetraclorodibenzo-p-dioxina (TCDD). Modelos experimentais de exposição (camundongos) demonstraram que o TCDD ocasiona baixa contagem espermática e atraso na puberdade. O presente estudo correlacionou a ação do composto TCDD sobre as células de Sertoli humanas (in vitro) e sua ação na região controladoras de imprinting (ICR1) dos genes H19 e IGF-2. Inicialmente foi realizada a caracterização da amostra em estudo e foi constatado que esse tipo celular apresentrameilação entre 0 a 25% e é homozigota para os sítios polimórficos dos SNPsrs2839704 e rs10732516. Após 48 de exposição ao TCDD obervou-se tendência de aumento da metilação global do DNA da linhagem HSeC e discreto aumento da metilação dos sítios 4 e 7 de ligação do fator CTCF. A análise da expressão dos genes H19 e IGF2 deve ser finalizada... / Infertility affects 10-15% of couples on reproductive age and male factor may be responsible for 30-50% of cases. Male fertility and the spermatogenesis process are directly related to the ability of Sertoli cells to produce factors for germ cells development. Only Sertoli cells have receptors for testosterone and FSH, and therefore, these cells are the main regulators of spermatogenesis. Studies suggest that 60-70% of male infertility cases are considered idiophatic, once molecular mechanisms involved in spermatogenesis are still unknown. Recent studies report that oligozoospermic men showed an alteration of the DNA methylation pattern in the sperm, specifically in regions that control gene expression of genes regulated by imprinting: H19 and IGF2. Largely responsible for changing the methylation pattern of these genes are environmental factors, specialy organic compounds with high toxicity, such as 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-pdioxin (TCDD). Experimental models of exposure (mice) showed that TCDD causes low sperm count and delayed puberty. This study correlated the action of the compound TCDD on human Sertoli cells (in vitro) and its action on imprinted control region region (ICR1) of H19 and IGF-2 genes. It was initially performed the sample characterization and it was found that this cell type shows methylation between 0-25% and it is homozygous for the polymorphic sites of SNPs rs2839704 and rs10732516. After 48h of exposure to TCDD we observed a trend to increase global DNA methylation in HSEc lineage and also a slight increase in methylation status in the CTCF binding sites 4 and 7. Analysis of H19 and IGF2 expression must be completed to the best correlation between changes in the DNA methylation pattern and expression of these genes. Despite the important results obtained in this work, it is necessary to deepen the studies involving toxic agents such as TCDD and changes... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-05Bitstream added on 2014-06-13T20:10:21Z : No. of bitstreams: 1 000748420.pdf: 10455273 bytes, checksum: 5531ec5e20aa8e0ad2b7bd68b8dde10a (MD5) / O presente estudo teve como objetivo analisar os índices reprodutivos e definir os aspectos reprodutivos da espécie Astyanax fasciatus no Córrego Rico, São Paulo, Brasil e confirmar duas hipóteses - Esta espécie possui desova do tipo parcelada neste ambiente especificamente e uma amostra da população colocada em cativeiro pode desenvolver a maturação gonadal. Foram capturados 40 exemplares da espécie, por meio de coletas mensais padronizadas realizadas no período de outubro de 2012 a janeiro de 2013 por meio de rede espera. Além disso, mais 120 exemplares de A. fasciatus foram coletados e transferidos para um tanque no Centro de Aquicultura da UNESP, Jaboticabal, SP e mantidos em cativeiro. Coletas mensais também foram realizadas no mesmo período das coletas in situ para biometria e análise histológica das gônadas. A hipótese de desova parcelada foi corroborada pela análise concomitante da variação dos índices gonadossomático, hepatossomático, fator de condição e volume gonadal além da análise histológica observando fêmeas parcialmente desovadas em mais de uma coleta. A hipótese de maturação gonadal em ambiente de cativeiro também foi corroborada por meio de análise histológica associada à análise dos índices reprodutivos. Nesse contexto, os resultados obtidos geram subsídios para estudos no tocante à biologia reprodutiva e sua aplicação na reprodução em ambiente de aquicultura / This study aim to study the reproductive biology of redtail tetra Astyanax fasciatus from a stream in Jaboticabal,SP and confirm two hypothesis - this specie have a fractional spawning in this place specifically and A. fasciatus can maturate gonads in capitivity environment. Adult males and females (n=40) were sampled monthly during the rainy season from October 2012 to January 2013 by gillnets. Besides, more 120 adult males and females were sampled and transferred to a pond in UNESP Aquaculture Center, Jaboticabal,SP. Monthly samples were realized in the same period that in situ samples for biometrics and histological analysis. The hypothesis of fractional spawning was corroborated by concurrent analysis of gonadosomatic index, hepatosomatic index, condition factor and gonadal volume in addition to histological analysis watching females partially spawned in more than one sample. The hypothesis of gonadal maturation in captivity environment also be corroborated by histological analysis in addition to reproductive indexes analyslis. In this context, the results generate data for studies regarding the reproductive biology and its application in breeding aquacultural environment

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-07-18Bitstream added on 2014-06-13T20:49:55Z : No. of bitstreams: 1 sousa_facg_me_sjc.pdf: 1490855 bytes, checksum: 2652eb365870bb6ca89eb1e459a435e1 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Ainda hoje muito se discute a respeito da natureza pré-maligna do líquen plano bucal. Neste contexto, o presente trabalho tem como objetivo analisar os tipos e o número de alterações celulares sugestivas de malignidade no líquen plano bucal, comparando-os com aqueles observados na displasia epitelial e no carcinoma epidermóide, através da microscopia de luz. As alterações mais frequentemente observadas no líquen plano bucal foram aumento da relação núcleo-citoplasma (93,33%); irregularidades ou espessamento da membrana nuclear (86,67%); multinucleações e multilobulações (86.67%) e aumento do tamanho e número dos nucléolos (83,33%). A análise de variância (ANOVA) seguida do teste de Tukey, ambos ao nível de significância de 5%, revelou não haver diferença estatisticamente significante entre o número médio de alterações celulares sugestivas de malignidade no líquen plano bucal (5,90l1,56) e na displasia epitelial (5,53l1,41), mas sim entre eles e o carcinoma epidermóide (7,60l1,81). Quanto aos tipos de alterações, também foi encontrada diferença estatística entre as três lesões avaliadas. Tais resultados, portanto, sugerem não haver semelhanças estatísticas entre os casos de líquen plano bucal, displasia epitelial e carcinoma epidermóide que comprovem a natureza pré-maligna do líquen plano bucal, pelo menos no que se refere aos tipos de alterações celulares sugestivas de malignidade avaliadas neste estudo. / Nowadays, a matter of great discussion is regarding the pre-malignant nature of oral lichen planus. Within this context, the present study has the objective of analyzing the types and number of malignancy suggestive cell alterations in oral lichen planus, comparing them with those observed in epithelial dysplasia and in squamous cell carcinoma, through light microscopy. The most frequent observed alterations in oral lichen planus were enhancement of nucleus-cytoplasm relation (93.33%); irregularities or thickening of nuclear membrane (86.67%); multinucleations or multilobuli (86.67%); and bigger and more numerous nucleolus (83.33%). Variance analysis (ANOVA) followed by Tukey test, both at 5% level of significance, revealed not to have statistically significant difference between the mean number of malignancy suggestive cell alterations in oral lichen planus (5.90l1.56) and in epithelial dysplasia (5.53.1.41), but between those and squamous cell carcinoma (7.60l1.81), this difference was present. Regarding the type of alterations, it was found statistical difference between the three evaluated lesions. Therefore, such results suggest no statistical semblances among the oral lichen planus cases, epithelial dysplasia and squamous cell carcinoma, which would confirm the pre-malignant nature of oral lichen planus, at least regarding the type and number of cell alterations evaluated in this study.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-08-09Bitstream added on 2014-06-13T18:20:00Z : No. of bitstreams: 1 freitas_npp_me_botfmvz.pdf: 787656 bytes, checksum: 5f94a47897a0f664877ab4d198e94813 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A utilização de células-tronco adultas autólogas surgiu como uma alternativa terapêutica no tratamento de equinos, com resultados bastante promissores. Adicionalmente, a terapia com células alogênicas viabiliza a manutenção de um banco de células, proporcionando assim seu uso imediato. O objetivo deste trabalho foi avaliar, morfologicamente, a resposta inflamatória e detectar as células-tronco mesenquimais (CTMs) marcadas, autólogas e alogênicas, após a inoculação no músculo gluteus medius de equinos. Para tal, foram utilizados 15 equinos, divididos igualmente em três grupos de cinco animais, sendo o grupo 1 (controle), grupo 2 (células autólogas), grupo 3 (células alogênicas). Os animais foram submetidos à punção de medula óssea e após o cultivo, essas células foram caracterizadas fenotipicamente por citometria de fluxo e submetidas à diferenciação osteogênica, adipogênica e condrogênica, para caracterização da linhagem mesenquimal. Em seguida, as células autólogas e alogênicas foram marcadas com o nanocristal Qtracker 655® e inoculadas no músculo gluteus medius dos grupos 2 e 3, respectivamente. No grupo 1 foi inoculado PBS (solução salina tamponada com fosfato). Em cada grupo foi realizada uma biópsia 30 dias antes e outra 24h após o transplante das células e à inoculação do PBS. A análise dos resultados das biópsias demonstrou, por meio de colorações como Hematoxilina-Eosina, Gomori Modificado e NADH-tr, que a morfologia e o metabolismo das fibras foram mantidos tanto no grupo controle como nos grupos tratados. Além disso, foi possível detectar as CTMs marcadas no tecido muscular por meio de imunofluorescência. Portanto, concluiu-se que as CTMs autólogas e alogênicas transplantadas foram detectadas no tecido muscular de equinos e morfologicamente, não provocaram reação inflamatória 24h após o transplante / The use of autologous adult stem cells appeared as therapeutic alternative in treatment of horses with promising results. Allogeneic cell therapy enables maintenance a bank of cells, thereby providing immediate use. The aim of this study was to evaluate the inflammatory response and tracker autologous and allogeneic, mesenchymal stem cell (MSCs) after gluteus medius muscle horse injection. In this research, we used fifteen horses that were divided equally into three groups of five animals each, with Group 1 (control), Group 2 (autologous cells) and Group 3 (allogeneic cells). The animals undergo bone marrow aspiration for culture and isolation of mesenchymal cells. These cells, after culture were phenotypically characterized by flow cytometry and differentiation for characterization of the mesenchymal lineage. Upon such identification, autologous and allogeneic cells were marked with Qtracker 655® and inoculated in the gluteus medius muscle of groups 2 and 3, respectively. In group 1 was inoculated an equal volume of PBS (phosphate buffered saline). In each group a biopsy was done thirty days before and 24h after inoculation of the cells and PBS. Biopsies results showed through stains such as hematoxylin-eosin, modified Gomori and NADH-tr, that the tissue integrity and fiber metabolism was maintained in both, control and treated groups. Additionally, was possible to detect MSCs tracked in muscle tissue through immunofluorescence. Therefore, we conclude that autologous and allogeneic BM-MSCs could be detected in muscle tissue and through morphology analysis, caused no inflammatory reaction, 24 hours after transplantation