Les anomalies cromosòmiques numèriques i estructurals, són sovint causa d'infertilitat. Es conegut el fet que els homes portadors de translocacions recíproques equilibrades presenten un increment en la incidència de pèrdues embrionàries i de descendència afectada. La característica principal de l'espermatogènesi d'aquests pacients és la presència d'un tetravalente que permet l'aparellament a paquité dels cromosomes reorganitzats amb els seus homòlegs. La configuració del tetravalent determina el seu comportament i, conseqüentment, la producció de diferents proporcions de gàmetes equilibrades i desequilibrades. La seva estructura està condicionada pels fenòmens de recombinació. Diferents factores poden alterar la freqüència de recombinacions dins el tetravalente, com per exemple la morfologia dels cromosomes implicats i la llargada dels segments intersticials i translocats. Els cromosomes translocats poden segregar seguint quatre patrons diferents: alternant, adjacent I, adjacent II i 3:1. El fenotip alternant és el més freqüent, i també és l'únic que pot donar lloc a descendència normal. Cal remarcar que, en el cas que ocorri una recombinació intersticial, el fenotip alternant també pot produir-se a partir de la segregació adjacent I.En aquest treball, hem analitzat mostres d'esperma i/o biòpsies testiculars en cinc pacients portadors de les següents translocacions: t(4;8)(q28;p23), t(1;13)(q41;q22), t(3;19)(p21;p13.3) t(11;17)(q13.1;p11.2) i t(10;14)(q24;q32). L'ús de tècniques d'hibridació in situ fluorescent (FISH) ha permès establir els percentatges de gàmetes equilibrades i desequilibrades per a cada un dels pacients. Els resultats obtinguts oscil·len entre 30.5% i 44.3% per a les formes equilibrades, i entre 55.7% i 69.5% per a les desequilibrades. La segregació meiòtica del portador de la t(4;8)(q28;p23) es va determinar a partir de dues metodologies diferents, el sistema hàmster-humà i la tècnica de nuclis d'espermatozoide descondensats. La comparació dels resultats obtinguts no mostrà diferències significatives entre el total de gàmetes equilibrades i desequilibrades. No obstant, les freqüències de la segregació 3:1 obtingudes en els dos anàlisis sí foren significativament diferents (p<0.0001). Aquesta diferència es podria explicar per factors limitants de cada una de les tècniques (una mala eficiència d'hibridació o una descondensació excesiva del DNA poden donar lloc a guanys o pèrdues aparents de senyals fluorescents).L'ús de FISH sobre nuclis descondensats també permet la detecció de possibles efectes intercromosòmics (ICE). Els resultats obtinguts en l'anàlisi realitzat en els cinc pacients no evidencia la presència d'ICE, excepte en el portador de la t(4;8).L'aplicació de FISH sobre cromosomes meiòtics dels portadors t(11;17) i t(10;14) ha permès la identificació dels cromosomes translocats en estadi de MI i MII. Així, s'han obtingut dades relatives a la configuració del tetravalent, a la distribució de les recombinacions en el tetravalent i a la segregació dels cromosomes. Els resultats obtinguts mostren una disminució en el nombre de recombinacions per cèl·lula en la t(11;17) (p=0.001). En la t(10;14), la freqüència de recombinació en el segment intersticial és major que l'observada en bivalents controls dels cromosomes 10 i 14. També s'ha analitzat el comportament dels cromosomes sexuals al llarg del procés meiòtic. La incidència de les anomalies sexuals disminueix a mesura que avança l'espermatogènesi. Resumint, els nostres resultats suggereixen que el bloqueig meiòtic estaria més condicionat per la presència d'univalents que per la presència de desequilibris cromosòmics originats durant la segregació del tetravalent. Finalment, hem aplicat la tècnica de cenM-FISH sobre extensions de complexes sinaptonemals, prèviament detectades mitjançant immunocitogenètica, identificant cada un dels bivalents en el 92% de les cèl·lules analitzades (n=60). Posteriorment, els bivalents es poden cariotipar en estadi de paquitè. La tècnica de cenM-FISH pot ser molt útil per a la caracterització simultània de tots els bivalents en paquitè. / As it is well known, chromosome aberrations are a major cause of infertility. Moreover, male heterozygous carriers of reciprocal translocation have an increased risk of pregnancy loss and the birth of handicapped progeny. The main particularity of the spermatogenesis in human male translocation carriers is the way the translocated chromosomes found to associate themselves during the meiosis I. This structure is known as quadrivalent. The configuration of the quadrivalent determines the behaviour of this structure, and consequently the production of different proportions of balanced and unbalanced gametes. The quadrivalent structure's configuration is strongly defined by the formation of crossing-over. Different factors can affect the likelihood of crossing-over within the quadrivalent: the morphology of the chromosomes involved and the length of the interstitial and translocated segments are some of them. Translocated chromosomes segregate following one of the four possible segregation modes: alternate, adjacent I, adjacent II and 3:1. The predominant forms of segregation are alternate and adjacent I. Alternate phenotype is the most common found in many of the translocations studied and it is also the only phenotype that yields normal offspring. It is important to observe that if an interstitial chiasma occurs, alternate phenotypes may also be generated by an adjacent I segregation, and vice versa. In this study, meiotic analysis has been performed by either sperm data (human-hamster system or decondensed sperm nuclei) or testicular biopsy analysis in five different translocation carriers, t(4;8)(q28;p23), t(1;13)(q41;q22), t(3;19)(p21;p13.3) t(11;17)(q13.1;p11.2) and t(10;14)(q24;q32) . Using fluorescence in situ hybridisation techniques (FISH), percentages of balanced and unbalanced spermatozoa have been established for each carrier. The results obtained range between 30.5% and 44.3% for balanced and 55.7% and 69.5% for unbalanced gametes. Part of this work was the determination of meiotic segregation of a t(4;8)(q28;p23) carrier by two different methods, human-hamster system and sperm nuclei. Comparison made between the results obtained in the two analyses showed a lack of statistical differences between the total of balanced versus unbalanced forms. However, a statistically significant difference was found between the frequencies of 3:1 segregants obtained from the two methods (p<0.0001). Technical artefacts could explain this discrepancy (overlapping of signals in the sperm nuclei assay, unequal hybridisation efficiency of the used probes or even an over decondensation of the DNA can lead to apparent gains of fluorescent signals). FISH on decondensed sperm nuclei also allows for the detection of interchromosomal effects. Results obtained in the aneuploidy analysis performed on all five subjects have not shown any evidence for an interchromosomal effect, except for t(4;8) carrier.FISH has also been applied on meiotic chromosome spreads to identify translocated chromosomes in two different translocation carriers, t(11;17) and t(10;14). In doing so, data about pairing of homologous chromosomes, configurations of the quadrivalent, crossing-over distributions within a tetravalent, and segregation pattern frequencies have been obtained. Results obtained have shown a significant decrease in the chiasma frequency per cell in t(11;17) (p=0.001). In t(10;14), the recombination frequency within the interstitial segment of the quadrivalent is higher than the observed in control bivalents of chromosomes 10 and 14. The behaviour of sex chromosomes throughout meiotic process has been analysed. The incidence of sex anomalies decreased progressively in subsequent spermatogenic stages. Our results suggest that meiotic arrest processes would be more conditioned by the presence of univalents rather than by chromosomal unbalances. Finally, cenM-FISH has been applied on synaptonemal complexes spreads previously analysed using immunocytogenetic technique, allowing us to unequivocally identify all chromosomes in 92% of the studied cells (n=60). Then, bivalents can be karyotyped at pachytene stage. CenM-FISH can be a very useful tool for the simultaneous characterization of all pachytene chromosomes.

Objetivos: Puesta a punto de la técnica de reducción del número de placas (PRA), para estudiar la sensibilidad in vitro al ganciclovir (GCV) y al foscarnet (FOS) de las cepas de herpesvirus humano tipo 5 (HHV-5) y al aciclovir (ACV) y al FOS de las cepas de herpesvirus humano tipo 3 (HHV-3). Puesta a punto de las técnicas de reducción del efecto citopático (REC) y de coloración vital (DUA), para estudiar la sensibilidad in vitro al ACV y al FOS de las cepas de herpesvirus humanos tipos 1 y 2 (HHV-1 y HHV-2). Análisis de los valores de sensibilidad a los antivíricos de las cepas de HHV-1, 2 y 5 y comparación con la evolución clínica de los pacientes tras el tratamiento. Material y métodos: Se ha estudiado la sensibilidad de 204 cepas de HHV-1 y 2 aisladas de diferentes muestras de 165 pacientes inmunodeprimidos. Los valores de sensibilidad al antivírico se expresan como dosis inhibitoria 50% (DI50) y se calculan mediante el método de Spearman-Kärber cuando la técnica utilizada es la de REC y estadísticamente, mediante una estimación lineal, cuando se utiliza la de DUA. Asimismo, se ha estudiado la sensibilidad de 80 cepas de HHV-5 aisladas de las muestras de 73 pacientes con o sin patología de base y de nueve cepas de HHV-3 aisladas de las muestras tomadas de lesiones cutáneas de nueve pacientes. Los valores de DI50 se calculan mediante el método de Reed-Muench modificado. Resultados: El 96% de las cepas de HHV-1 y 2 estudiadas fueron sensibles a valores de DI50 del ACV inferiores a 3 mg/ml y todas fueron sensibles a valores de DI50 del FOS inferiores a 200 mg/ml. El 98% de cepas de HHV-5 fueron sensibles a valores de DI50 de GCV inferiores a 12 mM e inferiores a 400 mM en el caso del FOS. Todas las cepas de HHV-3 fueron sensibles tanto al ACV como al FOS.Conclusiones: 1 - La técnica de REC es sencilla y útil para estudiar la sensibilidad de los HHV-1 y 2.2 - La técnica de REC presenta una reproducibilidad del 87%. 3 - La adición de colorante vital en la técnica de REC añade complejidad a la técnica. 4 - Los valores obtenidos con las técnicas de REC y de PRA correlacionan con la evolución clínica de los pacientes. 5 - La frecuencia de HHV-1 y 2 resistentes al ACV en pacientes inmunodeprimidos es baja (4%) y cuando se observa no es necesariamente indicativa de fallo terapéutico. 6 - La técnica de PRA para el estudio de la sensibilidad de los HHV-5 y 3 es sencilla y requiere entre seis y ocho semanas lo que limita parcialmente su utilidad clínica.7 - La frecuencia de cepas de HHV-5 resistentes in vitro al GCV (4%) y al FOS (4%) en pacientes no tratados previamente es baja. 8 - No se detectó ninguna cepa de HHV-3 resistente al ACV o al FOS. 9 - Nuestra experiencia confirma que no es necesaria la realización de estudios de sensibilidad de los herpesvirus de forma rutinaria. Estos estudios estarían indicados en las cepas aisladas de pacientes con alteraciones inmunológicas graves cuyas lesiones siguen evolucionando o empeoran estando en tratamiento con el antivírico. / Objectives: Standarize the plaque reduction assay (PRA), to study in vitro susceptibility to ganciclovir (GCV) and foscarnet (FOS) of human herpesvirus type 5 (HHV-5) strains and to aciclovir (ACV) and FOS of human herpesvirus type 3 (HHV-3) strains. Standarize the cytopathic effect reduction assay (CRA) and the dye-uptake assay (DUA), to study in vitro susceptibility to ACV and FOS of human herpesvirus types 1 and 2 (HHV-1 and HHV-2) strains. Analize the antiviral susceptibility values obtained with the HHV-1, 2 and 5 strains to compare with the clinical evolution of the patients after treatment. Material and methods: We studied the susceptibility of 204 HHV-1 y 2 strains isolated from different samples isolated from 165 immunosuppressed patients. Antiviral susceptibility values are expressed as the 50 per cent inhibitory dose (ID50). When the antiviral susceptibility was determined by CRA we used the Spearman-Kärber method to calculate the ID50 and with the DUA we determined this value, statistically, using a linear stimation. We studied the susceptibility of 80 HHV-5 strains isolated from the samples of 73 patients with o without underlying disease. Finally, we studied the susceptibility of nine HHV-3 strains isolated from the samples recovered from the skin lesions of nine patients. The ID50 values were determined using the Reed-Muench modified method. Results: Approximately 96% of HHV-1 and 2 strains were inhibited by ACV ID50 values lower than 3 mg/ml. All the strains were susceptible to FOS ID50 values lower than 200 mg/ml. Ninety eight per cent of HHV-5 strains were inhibited by GCV ID50 values lower than 12 mM and by FOS ID50 values lower than 400 mM. All the HHV-3 strains were susceptible to ACV and FOS.Conclusions: 1 - The CRA is easy to perform and can be used to study the susceptibility of HHV-1 and 2. 2 - The reproducibility of the CRA is about 87%. 3 - The addition of vital dye to the CRA adds complexity to this assay. 4 - The values obtained with CRA and PRA had a close correlation with the clinical outcome of patients. 5 - The frequency of HHV-1 and 2 resistant to ACV in immunosuppressed patients is low (4%) and when it's observed not necessarily indicates therapeutic failure. 6 - The PRA is easy to perform the study of susceptibility of HHV-5 and 3 and needs between six and eight weeks to obtain results limiting parcially its clinical utility. 7 - The frequency of HHV-5 strains in vitro resistant to GCV (4%) and to FOS (4%) is low in patients no treated previously. 8 - We didn't detect any HHV-3 strain resistant to ACV or to FOS. 9 - In our experience, there is no need to routinely test susceptibility of HHV-1 and 2 isolated to ACV. Study of HHV-1 and 2 susceptibility should be indicated only in viruses isolated from patients with a severe immunologic disturbance in whom lesions persist or worsen while on ACV therapy.

La reparación de los defectos osteocondrales en la rodilla del conejo ha sido realizada mediante la utilización de:1. Un injerto libre de periostio invertido (con su capa interna dirigida a la cavidad articular)2. Un biomaterial (fosfato tricalcico-hidroxiapatita), con el objetivo de reemplazar al cartílago y hueso respectivamente.Se utilizaron 25 conejos, machos, adolescentes, de raza New Zealand y se realizó un defecto cilíndrico de 3.5 x 3 mm. En el surco intercondileo. Se permitió la movilización libre inmediata en la jaula y fueron sacrificados a las seis semanas. Se cuantificaron los resultados macroscópicos y microscópicos mediante una tabla de valoración confeccionada. Los resultados histomorfométricos determinaron la variación porcentual entre la situación inicial y final. Se obtuvo un tejido de naturaleza y características cartilaginosas en el 66.3% de las rodillas y el biomaterial se reabsorbió en el 73.09%.

Las mutaciones puntuales de p53 representan la lesión molecular más común en neoplasias humanas y se han asociado con mala evolución clínica. Los objetivos de este trabajo han sido:- Establecer la aplicabilidad del análisis mutacional de p53 en las neoplasias hematológicas.- Conocer la contribución de las mutaciones de p53 en las transformaciones agresivas de los síndromes mieloproliferativos crónicos bcr/abl-.- Determinar la frecuencia de inactivación de p53 en leucemias mieloides con reordenamientos MLL y con translocaciones cromosómicas que afectan a 17p.- Analizar la frecuencia de mutaciones de p53 en leucemias agudas linfoblásticas de línea T y B.- Estudiar el rendimiento del análisis mutacional de p53 en casos con diagnóstico morfológico de Burkitt.- Estudiar la presencia de mutaciones en procesos linfoproliferativos de baja frecuencia: neoplasias NK y reordenamientos NPM/ALK.- Conocer la frecuencia de mutaciones de p53 en linfoma folicular.- Comparar el espectro mutacional encontrado en nuestros casos con el descrito en las bases de datos de p53.- Aplicar los métodos de análisis mutacional de p53 a las muestras obtenidas de dos hermanos pertenecientes a una familia con síndrome de Li-Fraumeni.De los resultados originados en forma de artículos y anexos se puede concluir que:- Las mutaciones de p53 son eventos moleculares comunes en las transformaciones agresivas de síndromes mieloproliferativos crónicos bcr/abl -. - Las neoplasias hematológicas con reordenamientos de 17p presentan a menudo mutaciones del gen p53.- Las neoplasias mieloides con lesiones estructurales del brazo largo del cromosoma 3, a pesar de su mal pronóstico, no muestran mutaciones de p53.- Las leucemias agudas mieloides del adulto con reordenamientos del gen MLL pueden presentar mutaciones de p53. Esta asociación es particularmente relevante en casos con cariotipo complejo, deleciones del brazo largo del cromosoma 5 o en casos de LAM secundaria.- Las mutaciones de p53 son frecuentes en dos subgrupos moleculares de leucemias infantiles: c-myc y MLL+.- Las mutaciones de p53 rara vez se asocian a LAL-T en el momento del diagnóstico- En el 11% de los casos de LAL de línea B del niño en recaída se encuentran mutaciones de p53. - Las LAL-B con morfología L3 y los linfomas de Burkitt presentan con frecuencia mutaciones de p53. - Las mutaciones de p53 a menudo son responsables de la fase final agresiva del linfoma folicular y del manto.- Los linfomas foliculares en estadios avanzados pueden presentar mutaciones de p53 en ausencia de transformación histológica evidente. - En linfomas con reordenamientos NPM/ALK no se detectaron mutaciones de p53 .- No se han detectado mutaciones de p53 en linfomas/leucemias NK.- La distribución de las mutaciones recogidas en el presente trabajo coincide con los hallazgos acumulados en las bases de datos internacionales. / P53 point mutations are the most common molecular lesions described in human neoplasia. The aims of this work were as follows:- To establish the applicability of the mutational analysis of p53 in hematologic malignancies.- To gain some insight into the mechanisms associated with the acute transformations of bcr/abl- chronic myeloproliferative disorders.- To determine the frequency of p53 mutations in acute myeloid leukemias with MLL rearrangements and 17p translocations.- To study the presence of p53 mutations in T-cell and B-cell lineage acute lymphoblastic leukemias (T-ALL and B-ALL).- To perform the same analysis in cases with Burkitt´s lymphoma.- To investigate the p53 status in rare hematologic malignancies i.e. NK leukemias and NPM/ALK lymphomas.- To analyze the p53 mutations in cases with follicular lymphoma.- To establish the mutational spectrum in our cases.- To investigate the p53 gene in one Li-Fraumeni pedigree.Based on the results obtained in this thesis, it may be concluded that:- p53 mutations are commonly found in the acute transfromations of bcr/abl- chronic myeloproliferative disorders.- Myeloid malignancies with 17p cytogenetic lesions are frequently associated with p53 mutations.- Myeloid malignancies with cytogenetic involvement of the long arm of chromosome 3 did not show p53 mutations.- In some instances, acute myeloid leukemias (AML) with MLL rearrangements had p53 mutations. This association merits investigation in cases with a complex karyotype, deletions at the long arm of chromosome 5 and in secondary AML.- P53 mutations are common in c-myc and MLL+ B-ALL.- P53 are rarely detected in T-ALL at diagnosis.- P53 mutations are present in a significant percentage (11%) of B-ALL at relapse.- Burkitt´s lymphoma cases frequently displayed p53 mutations.- p53 mutations play a role in the acute transformations arising from follicular and mantle lymphomas.- Follicular lymphomas may harbor p53 mutations even in the absence of documented histologic transformation.- P53 mutations are not detected in NK leukemias or in NPM/ALK lymphomas.- Mutational spectrum obtained from the mutants described in this work is consistent with that reported in international databases.

Las personas que experimentan síntomas seudopsicóticos (SSP) presentan un riesgo elevado de sufrir trastornos psicóticos. Sin embargo, asociaciones encontradas entre SSP y trastornos no psicóticos sugieren que la relevancia clínica de los SSP no se limita a la psicosis y por lo tanto, investigar el rol de síntomas adicionales tales como la depresión, puede mejorar la capacidad de predecir el riesgo de desarrollar trastornos psicóticos. Asimismo, estudiar las habilidades en teoría de la mente (ToM), área cognitiva que sufre alteraciones en pacientes con esquizofrenia, en adolescentes de la población general, puede contribuir a clarificar si las personas consideradas en riesgo presentan déficits en ToM. La evidencia sugiere que los déficits en ToM no son exclusivos de los pacientes sintomáticos y que una mayor comprensión de la naturaleza de estas alteraciones se puede lograr a través su estudio antes del inicio del trastorno. Objetivos: (1) examinar la presencia de SSP positivos y negativos y su asociación con síntomas depresivos en una muestra de adolescentes de la población general; (2) analizar la presencia de subtipos de SSP positivos y negativos, y (3) examinar el funcionamiento de ToM, su asociación con esquizotipia psicométrica, SSP y síntomas depresivos. Método: los participantes en este estudio transversal fueron adolescentes con edades entre los 13 y 17 años, estudiantes de secundaria en escuelas de Barcelona, España. Para establecer la presencia de subtipos de SSP positivos y negativos se llevaron a cabo análisis factoriales de las subescalas que evaluaban estos síntomas. La asociación entre los subtipos de síntomas positivos y negativos y los síntomas depresivos se examinó mediante el análisis de regresión múltiple. Resultados: Se identificaron dimensiones de SSP y esquizotipia en esta muestra de adolescentes de la población general. Cuatro factores de síntomas positivos (ideación persecutoria, ideación de grandiosidad, experiencias alucinatorias/de primer rango y pensamiento auto-referencial) y tres factores de síntomas negativos (retraimiento social, aplanamiento afectivo y abulia) fueron identificados. Se encontraron relaciones entre los subtipos de síntomas positivos y negativos y síntomas depresivos, así: la ideación persecutoria y las experiencias alucinatorias y de primer rango se asociaron a puntuaciones más altas en síntomas depresivos, mientras que la ideación de grandiosidad se asoció a puntuaciones más bajas en depresión. No se encontró asociación entre depresión y pensamiento autorreferencial. Se encontraron también asociaciones entre subtipos de síntomas negativos y depresión: retraimiento social y abulia se asociaron positivamente al auto-informe de síntomas depresivos, mientras que el aplanamiento afectivo no se asoció a depresión. No se observaron diferencias en las habilidades de ToM entre los adolescentes con puntuaciones totales más altas en SSP o esquizotipia comparados con los adolescentes con puntuaciones totales más bajas. Las puntuaciones altas en la escala de experiencias inusuales que evalúa esquizotipia positiva, al igual que la subescala de experiencias de primer rango, se asociaron con déficits en ToM, mientras que la ideación persecutoria se asoció a un mejor desempeño en ToM. El desempeño en ToM no se asoció a pensamiento mágico ni a experiencias alucinatorias. Los síntomas negativos y la esquizotipia negativa no se relacionaron con el desempeño en ToM. Un mejor desempeño en ToM se asoció a mayor no-conformidad impulsiva. Conclusiones: los hallazgos presentados en esta tesis confirman que no todos los tipos de SSP positivos y negativos se asocian con depresión y por lo tanto, podrían conferir diferente vulnerabilidad a sufrir trastornos psicóticos. Las alteraciones en ToM no se limitan a la fase aguda de un trastorno psicótico, y podrían asociarse a la esquizotipia positiva y a experiencias de primer rango. Estos hallazgos sugieren que es posible identificar alteraciones en ToM durante la adolescencia antes del inicio de cualquier trastorno. / Individuals who report psychotic-like experiences (PLEs) are at significantly increased risk for clinical psychotic disorders. However, associations between PLEs and non-psychotic disorders indicate that the clinical relevance of PLEs is not limited to psychosis and thus, investigating the role of additional symptoms, such as depression, may improve the capacity to predict risk of developing psychotic disorders. Additionally, studying theory of mind (ToM) abilities, one of the cognitive areas impaired in schizophrenic patients, in adolescents from the general population may contribute to clarify whether ToM deficits are present in at-risk individuals before the onset of the illness and derived impairments. Evidence suggests that ToM impairments are not exclusive of symptomatic patients, and that further understanding of the nature of ToM dysfunction in schizophrenia might be achieved through examination of ToM impairments from the early phases and even before the onset of the illness. Objectives: this thesis was aimed at (1) examining the presence of both positive and negative PLEs and their association with depressive symptoms in a community sample of adolescents; (2) analysing the presence of subtypes of positive and negative PLEs dimensions in adolescents of the community, and (3) exploring ToM functioning, its association with psychometric schizotypy, PLEs, and depressive symptoms, in a sample of adolescents from the general population. Method: participants in this cross-sectional study were adolescents aged between 13 and 17 years, attending compulsory secondary education in schools from Barcelona, Spain. To establish the presence of subtypes of positive and negative PLEs, separate principal component factor analyses of the CAPE positive and negative subscales were performed. Multiple linear regression analysis was conducted to examine the association between specific CAPE positive and negative PLE subtypes and depressive symptoms. Results: PLEs and psychometric schizotypy dimensions were present in this community sample of adolescents. Four factors of positive symptoms (persecutory ideation, grandiose thinking, first-rank-hallucinatory, and self-referential thinking) and three factors of negative symptoms (social withdrawal, affective flattening, and avolition) emerged from the analysis. Different relationships between subtypes of positive PLEs and depressive symptoms were found: persecutory ideation and first-rank/hallucinatory experiences related to higher scores on the depressive symptoms scale whilst grandiose thinking related to lower scores on depression. No association with self-referential thinking was found. Associations between subtypes of the negative dimension and depression were also found: social withdrawal and avolition were positively associated with the self-report of depressive symptoms, while affective flattening did not relate to depression. No differences were found in ToM abilities in adolescents with higher global scores on schizotypy or PLEs relative to those with lower global scores. Higher scores on the unusual experiences subscale assessing positive schizotypy and on first-rank experiences were associated with poorer ToM ability, whereas persecutory beliefs were related to better ToM performance. No association was found between ToM and magical thinking or hallucinatory experiences. Negative PLEs or negative schizotypy were not related to ToM abilities. In addition, an association between better mentalising abilities and higher impulsive nonconformity was found. Conclusions: these findings support the view that not all types of positive and negative PLEs in adolescence are associated with depression and, therefore, may not confer the same vulnerability for psychotic disorders. ToM impairments are not restricted to the acute phase of a psychotic disorder, and may be associated to positive schizotypy and first-rank experiences. These findings constitute evidence indicating that ToM impairments can be identified during adolescence before the onset of any psychotic disease.

El MacArthur Story Stem Battery (MSSB) es una técnica que combina el completamiento de historias y el juego simbólico, puede ser aplicada en niños a partir de 4 años y permite conocer la forma en la que los niños resuelven un conflicto de la vida cotidiana.Este instrumento utiliza los muñecos de la familia para la comprensión de las historias planteadas a los niños, quienes a través del lenguaje y de su narración completan y resuelven la historia planteada. Por lo tanto se analiza tanto el lenguaje del niño como su capacidad de juego. Se presenta una recopilación de los principales autores clásicos sobre el tema del juego, partiendo desde el psicoanálisis, la teoría cognitiva, la escuela rusa y la terapia de juego no directiva, posteriormente se presenta los instrumentos en los cuales el juego se ha utilizado como diagnóstico y finalmente se exponen algunas de las bases para el análisis del lenguaje narrativo del niño. El presente trabajo utiliza el MSSB para evaluar a niños normales y niños con dificultades en el desarrollo de entre 4 a 6 años. El objetivo es conocer como resuelven los conflictos cada grupo de niños y que características presentan los niños que tienen dificultades en el desarrollo.Los niños fueron filmados durante la aplicación del MSSB, después se codificó cada respuesta entre dos tipos: Las Respuestas prosociales y las no sociales, también se registró las consecuencias que mencionaban los niños cuando no respondían de una forma no social y finalmente se registro el tipo de juego y el nivel de ansiedad durante la aplicación del instrumento.Los resultados muestran que los niños normales respondían de una forma prosociales más veces que los niños con retraso en el desarrollo. Cuando los niños respondían de una forma no social, la consecuencia más común era el castigo en igual porcentaje en ambos grupos. El personaje más frecuente fue la madre y su representación fue de tipo positivo en los dos grupos. El tipo de juego predominante fue el juego simple (juego en el que el niño representa acciones) seguido por el juego simbólico y el juego de tipo exploratorio sólo se presentó en el grupo de niños con retraso en el desarrollo y se observó que estaba asociado a los niños que padecían déficit de atención. Finalmente el nivel de ansiedad fue mínimo en los niños normales, mientras que en el grupo de niños con retraso en el desarrollo se observaron varios casos de tensión e inhibición. / The MacArthur Story Stem Battery (MSSB) is a technique that combine the histories complement and the symbolic play, it can be use with children from 4 years old and allow to know the resolution for a diary conflict.This instrument uses the family dolls to facilitate the children's histories comprehension. Children use their narrative language to complete and resolve the history, so the language and the children's play capacity could be analyzed.This thesis shows you a recopilation about play classic conceptualization beginning with psychoanalysis, cognitive theory, Russian school and the children not directed play therapy. Also it presents the instruments that have used play as a diagnostic and finally there is a exposition about the narrative language children analysis.This work uses the MSSB to evaluate normal children and children with development delay between 4 and 6 years old. The objective is to know each group conflict resolution and the special characteristic into the development delay group.During the MSSB application all children were video tape recorded to codify the answers. We have two type of answers, the prosocial answers and the no social answers, we also codify the consequences when the children give a no social answers. Finally we codify the kind of play and ansiety level during the session.The results shown that the prosocial answers percentage were higher in the normal children group than in the children with development delay. When children's answer were no social the principal consequence was punishment (equal percentage in both groups). The most frequent character was the mother and her representation was positive in both groups. The predominant kind of play was the simple play (when the child represents an action) follow by the symbolic play and the exploratory play, which was only present in the development delay children group and was associate to attention deficit disorder. Finally the ansiety level in the normal children group was very low, while in the development delay children group we found some ansiety and inhibition cases.

El actual proyecto de tesis pretende incidir de manera directa en la prevención de la BRC, en los ámbitos más importantes en los que dicha prevención se puede desarrollar. Son muchos los elementos durante la vida del catéter que influyen en el riesgo de provocar bacteriemia. En el proyecto actual nos centramos en: a) Valoración y análisis de las diferentes metodologías para la monitorización de las infecciones relacionadas con catéteres. b) Estrategias de prevención. Papel de los conectores desinfectables sin aguja en la colonización endoluminal. Se abordan algunos de los puntos clave relacionados directamente con la producción de BRC ya que parece claro que el abordaje ha de ser multifactorial, con estrategias de acción a todos los niveles teniendo en cuenta los distintos actores que entran en juego en el proceso. En el primer trabajo presentado se muestra cómo la monitorización y seguimiento prospectivos diarios ofrecen ciertas ventajas en el diagnóstico de la BRC. La valoración inicial de cada episodio de bacteriemia y la determinación de su posible relación con un catéter es el primer paso para aproximarse al problema. Ofrece la posibilidad de un diagnóstico más exacto con lo que permite calcular tasas más aproximadas a la realidad, en base al riesgo real de BRC, que es el número de días de cateterización. La importancia del conocimiento de la tasa real, deriva del hecho de que dicha tasa es uno de los principales indicadores de seguridad del paciente así como de calidad asistencial. Por tanto su conocimiento y control es capital en la asistencia del paciente en términos tanto económicos como de morbilidad y mortalidad. Además poder analizar in situ la situación de un catéter y su probabilidad de desarrollar BRC, permite detectar factores de riesgo de infección con mayor facilidad para incidir en su control, así como objetivar posibles errores de manipulación por parte de personal sanitario y hacer de su implicación directa otro punto clave en el control de tasas. Por último, dado el número cada vez mayor de catéteres en unidades de hospitalización convencionales, aporta una visión del problema de la BRC también en este ámbito. El papel de los CDSA en la patogenia de la colonización endoluminal es objeto de controversia a partir de estudios observacionales retrospectivos que muestran cambios de la tasa de BRC al introducir su uso, o incluso al cambiar de dispositivo. Algunos autores han correlacionado este hecho con un mal uso de los dispositivos. Es a este respecto al que alude el segundo trabajo presentado en el que se compara en un modelo experimental el efecto barrera antimicrobiana de diferentes modelos de conector a fin de valorar la influencia que puede tener en su permeabilidad al paso de microorganismos por un lado el diseño del conector y por otro la manipulación incorrecta del mismo. Esta dualidad entre diseño y correcta o incorrecta manipulación podría explicar que el mismo conector manipulado en distintos escenarios produzca distinta tasa de BRC, o que unidades que cambian de conector reporten incrementos o reducciones de las tasas de BRC. Algunos autores han testado de forma experimental los CDSA a concentraciones suprafisiológicas (108, 105) teniendo en cuenta que la colonización normal en la piel de los trabajadores sanitarios se ha determinado entre 102 y 103 ufc/cm asi como en la piel de pacientes críticos. Uno de los objetos de este segundo trabajo es valorar como la concentración utilizada modifica la permeabilidad y por lo tanto puede dar resultados difícilmente extrapolables a la práctica clínica habitual. A partir de aquí el anexo I presenta un ensayo clínico en una población de pacientes críticos en los que se han monitorizado las tasas de BRC y de colonización endoluminal en dos grupos en los que se han utilizado dos modelos diferentes de CDSA. / The thesis aims to influence directly in preventing Cathetr-related bacteremia (CRB) in the most important areas in which such prevention can be developed. It has been noted that there are many items during the life of the catheter that influence the risk of causing bacteremia. In the current project we focus on: a) Detection and diagnosis. Rating and problem analysis. b) Prevention strategies. Role of disinfectable needleless connectors (DNC) It seems clear that the approach must be multifactorial, with strategies for action at all levels taking into account the different actors that come into play in the process. In the first study presented we show how the prospective monitoring and daily follow-up offers advantages in the diagnosis of the CRB. The initial assessment of each episode of bacteremia and determination of its possible relationship with a catheter is the first step to approach the problem. It offers the possibility of a more accurate diagnosis so that calculates rates more approximate to reality, based on the real risk of CRB, which is the number of days of catheterization. The importance of knowledge of the real rate, derived from the fact that this rate is one of the main indicators of patient safety and care quality. Moreover to analyze the situation of a catheter and the probability of developing CRB allow to detect risk factors for infection and then more easily influence their control. It also allows to detect handling errors by health personnel and make of their direct involvement another important point in controlling rates. Finally, given the increasing number of catheters in conventional hospital units, provides an overview of the problem of the CRB also in this area. The role of DNCs in the pathogenesis of endoluminal colonization is the subject of controversy deriving from retrospective observational studies that show changes in the rate of CRB on the introduction of its use, or even when the device is changed. Some authors have correlated this with a misuse of devices. It is to this respect that the second paper presented refers. In it, a comparison is made in an experimental model of the antimicrobial barrier effect of different models of connector so as to assess the influence to the passage of microorganisms, on the one hand of the connector design and on the other hand of improper handling, to their permeability. This duality between design and right or wrong manipulation could explain that the same connector, manipulated in different scenarios, could produce different CRB rates, or increases and decreases in CRB rates, in units which change the connector model. Some authors have experimentally tested the DNC with supraphysiological concentrations (108, 105) taking into account that the normal skin colonization of healthcare workers has been determined to be between 102 and 103 cfu / cm – the same as in the skin of critically ill patients. One purpose of this second paper is to evaluate how the concentration used modifies permeability and can therefore yield results that are difficult to extrapolate to normal clinical practice. From here on, Annex I presents a clinical trial in a population of critically ill patients in which CRB and endoluminal colonization rates were monitored into two groups which have used two different models of DNC.

Los objetivos principales de la presente tesis fueron estudiar aspectos relacionados con la disregulación emocional y la impulsividad en pacientes con Trastorno Límite de la personalidad (TLP) y evaluar el efecto de una intervención en mindfulness sobre dichas variables. Para ello se llevaron a cabo cuatro estudios (dos de caracterización y dos de evaluación de la eficacia del mindfulness) que fueron publicados en revistas indexadas internacionales. La disregulación emocional observada en los pacientes TLP se caracterizó por niveles anormalmente elevados de emociones negativas a nivel basal pero no por una mayor reactividad emocional al procedimiento de estrés de laboratorio utilizado. Se observaron alteraciones en los niveles de cortisol y alfa-amilasa salivares que podrían ser indicativas de dificultades en la regulación emocional y de estrés crónico. Los pacientes con TLP presentaron déficits atencionales y una mayor impulsividad en comparación al grupo normativo así como un perfil neuropsicológico diferencial respecto a los pacientes con Trastorno Bipolar. No se observaron diferencias significativas entre el grupo asignado a mindfulness y el grupo control en relación a las variables de respuesta emocional estudiadas. Por otro lado, se observaron mayores mejorías en las variables clínicas y neuropsicológicas en el grupo de mindfulness. El número de minutos promedio de práctica formal de mindfulness se asoció positivamente con las mejorías clínicas, con una menor reactividad emocional al procedimiento y con mejorías en la medida de mindfulness de no reactividad a la experiencia interna. Sin embargo, no se encontró esta asociación entre la práctica y la mejoría en las variables neuropsicológicas. La presente tesis contribuye a incrementar el conocimiento existente sobre aspectos sintomatológicos que parecen nucleares en el Trastorno Límite de la Personalidad y aportan evidencia sobre la eficacia del entrenamiento en mindfulness en este tipo de pacientes. / This thesis was aimed at investigating core aspects of emotional dysregulation and impulsivity in Borderline Personality Disorder (BPD) and also at assessing the effects of mindfulness training on such variables in patients with BPD. In order to meet these goals, four studies −currently published in international indexed journals− were performed (two studies to characterize BPD and two more to evaluate mindfulness effects). Higher level of negative emotions at baseline −and no higher emotional reactivity− was considered a hallmark for emotional dysregulation in BPD. Abnormalities in levels of cortisol and alpha-amylase suggestive of problems in emotion regulation and chronic stress were found. Patients with BPD showed attention deficits and higher impulsivity compared to healthy controls. Different neurocognitive patterns between patients with BPD and bipolar patients were also reported. No effect of mindfulness training on emotion response-related variables was found. However, patients allocated to mindfulness group reported significantly larger improvements in clinical and neuropsychological variables compared to control group. Furthermore, formal mindfulness practice in terms of average number of minutes positively correlated with clinical amelioration, with lower emotional reactivity to the procedure, and with higher non-reactivity to inner experience measure of mindfulness. By contrast, no association between formal practice and neuropsychological improvements was found. This thesis may contribute to knowledge about core symptomatologic aspects of the BPD and supports the efficacy of mindfulness training in such type of patients.

Les lesions nervioses han estat des de sempre un gran repte per al cirurgià. Si a més, van associades a defectes cutanis, la situació és devastadora. En aquests casos, molts estudis demostren que s’obtenen millors resultats reconstruint el nervi amb empelts nerviosos vascularitzats, cobrint el defecte cutani amb un penjall. En la literatura es troben descrits pocs penjalls compostos de nervi i pell per aquestes situacions. L’objectiu del nostre treball ha estat dissenyar tres penjalls neurocutanis compostos pel nervi cubital i la pell medial del braç, el nervi cutani avantbraquial lateral i la pell lateral del terç distal del braç i el terç proximal de l’avantbraç, i finalment la branca sensitiva del nervi radial i la pell lateral de l’avantbraç, incloent en aquest darrer cas el múscul braquiorradial com a transferència muscular motoritzada. Per açò hem dissecat 45 extremitats superiors criopreservades i injectades amb làtex negre, distribuïdes en tres grups de 15 espècimens en cada un. S’han recollit les dades dels vasos d’origen de cada un dels nervi i de les perforants de la pell associada. En cas del nervi radial, també s’ha estudiat l’origen de la vascularització del múscul braquiorradial. Posteriorment hem valorat si existeix un origen comú de la irrigació d’aquestes estructures per determinar si és possible la realització segura de penjalls compostos neurocutanis o neuromusculocutanis. Els resultats obtinguts confirmen l’existència d’un origen comú de la vascularització de les estructures estudiades en cada un dels treballs. D’aquesta manera, hem vist que el nervi cubital i la pell medial del braç estan irrigats per l’artèria col•lateral cubital superior que permet la utilització d’aquest penjall de forma lliure. La vascularització del nervi cutani avantbraquial lateral i la pell lateral del terç distal del braç i el terç proximal de l’avantbraç prové de branques de l’artèria radial o l’artèria recurrent radial. Açò permet l’ús d’aquest penjall tant de forma lliure com pediculada. Finalment hem observat que la branca sensitiva del nervi radial, el múscul braquiorradial i la pell lateral de l’avantbraç es vascularitzen per branques de l’artèria radial amb una important contribució de l’artèria recurrent radial. Així, també és factible el disseny d’un penjall compost tant pediculat com lliure. / Nerve lesions have always been a great challenge for surgeon. When they are associated to cutaneous defect, the situation is even more devastating. In those cases, many studies demonstrate better results reconstructing the nerve with a vascularized nerve graft, using a skin flap to solve the coverage defect. There are few composted flaps of nerve and skin described in the literature. Our objective was to design three neurocutaneous flaps composed by the ulnar nerve and the medial arm skin, the lateral antebrachial cutaneous nerve and the lateral skin of the distal third of the arm and the proximal third of the forearm, and finally the sensitive branch of the radial nerve and the lateral forearm skin, including in this case the brachioradialis muscle. We dissected 45 injected cryopreserved upper extremities which were distributed into three groups of 15 specimens each one. Data about the origin of the vascularization of each nerve and the source of the perforator vessels to the associated skin were registered. Afterwards, we evaluated whether the vascularization of these structures come from the same arteries or not, in order to determine if the realization of composed neurocutaneous or neuromusculocutaneous flaps is feasible or not. Our results confirm the existence of a common source of the vascularization of the studied structures in each work. So, we found that the ulnar nerve and the medial arm skin are irrigated by the superior ulnar collateral artery which allow the use of this flap either pediculated or free. The vascularization of the lateral antebrachial cutaneous nerve and the lateral skin of the distal third of the arm and the proximal third of the forearm comes from branches of the radial artery and the radial recurrent artery. It also permits the use of this flap either free or pediculated. Finally, we found that the sensitive branch of the radial nerve and the lateral forearm skin are irrigated by the radial artery, being the radial recurrent artery important as well. So, it is possible to design a composted flap of both structures either pediculated or free.

INTRODUCCIÓN La inmunoterapia oral (ITO) es un tratamiento experimental prometedor para alergia alimentaria, que es una enfermedad prevalente que afecta la salud y la calidad de vida. OBJETIVOS 1. Evaluar eficacia y seguridad de ITO en niños alérgicos a huevo y leche de vaca de 5 a 18 años. 2. Definir fenotipos clínicos de acuerdo al perfil de seguridad observado durante ITO. 3. Analizar la utilidad de los parámetros clínicos e inmunológicos basales para predecir el resultado de seguridad de ITO. 4. Estudiar los parámetros inmunológicos humorales a lo largo del seguimiento, así como su correlación con el perfil de seguridad del tratamiento . MÉTODOS Sujetos: Pacientes de 5 a 18 años afectos de alergia alimentaria mediada por inmunoglobulina E (IgE) a huevo (n= 50) y leche (n= 80) Procedimientos: 1. Determinación basal de parámetros clínicos e inmunológicos. 2. Aplicación de protocolo de ITO a huevo o leche. RESULTADOS 1. Eficacia y seguridad La ITO permitió lograr desensibilización completa en el 73% de alérgicos a leche y en el 54% de alérgicos a huevo. La mayoría de pacientes presentó reacciones adversas por ITO (95% por leche y 90% por huevo). La frecuencia de reacciones fue baja en relación a las dosis administradas (6.6% para leche y 7.6% para huevo) en una mediana de seguimiento de 25 y 18 meses, respectivamente. La mayoría de reacciones fueron leves (grados 1-2). 2. Fenotipos de pacientes de acuerdo al perfil de seguridad de ITO Se identificaron 3 fenotipos: a) Los pacientes cuyas reacciones por ITO cedieron a lo largo del seguimiento, presentaron reacciones infrecuentes y generalmente leves, habiendo logrado desensibilización completa (75% de casos en ITO a leche, 48% en ITO a huevo). En ellos, la ITO se consideró segura y eficaz; b) Los pacientes cuyas reacciones no cedieron durante el seguimiento, presentaron reacciones más frecuentes y más graves, y en su mayoría no habían logrado desensibilización completa (17.5% de casos para leche, 34% para huevo); c) En ITO a huevo, un 18% de pacientes fracasó precozmente por reacciones muy frecuentes y más graves. 3. Utilidad de los parámetros clínicos e inmunológicos basales para predecir la seguridad de ITO a. Los casos de fracaso precoz de ITO a huevo, respecto a quienes pudieron progresar, presentaban niveles basales más elevados de IgE, IgA e IgG4 específicas, formas más graves de asma, así como reacciones más graves y dosis umbrales menores en la prueba de exposición basal. b. Determinados parámetros basales resultaron útiles para predecir la frecuencia, gravedad y persistencia de reacciones en el tiempo: - La IgE específica se correlacionan con la frecuencia, gravedad y persistencia de reacciones. - El prick test se correlaciona con la frecuencia de reacciones y es un factor de riesgo independiente para presentar reacciones grado 4 y más persistentes por ITO a leche. - Reacciones más graves en la prueba de exposición basal se correlacionan con la frecuencia de reacciones y son un factor de riesgo independiente para presentar reacciones más persistentes. - Dosis umbrales más bajas en la prueba de exposición basal se correlacionan con la frecuencia, gravedad y persistencia de reacciones por ITO a leche. - Asma de base más grave se asocia con presentar reacciones grado 4. c. La IgE específica tiene buena rentabilidad diagnóstica para predecir una ITO segura. El punto de corte óptimo para seleccionar pacientes para ITO a leche es IgE específica a caseína inferior a 76.35 kU/L y para ITO a huevo, OVA-sIgE inferior a 6.49 kU/L, que asocian una probabilidad de ITO segura del 93.5% y 79% respectivamente. 4. Evolución de parámetros inmunológicos La IgA específica sérica no se modificó tras 12 meses de ITO a huevo. Prick test e IgE específica disminuyeron tras ITO, mientras que sIgG4 aumentó. Los cambios inmunológicos citados ocurrieron tanto en los niños tratados cuyas reacciones cedieron con el tiempo, como en aquellos que continuaron presentando reacciones durante todo el seguimiento. CONCLUSIONES La ITO permite lograr desensibilización en una amplia proporción de pacientes de 5 a 18 años alérgicos a huevo y leche. Las reacciones adversas por dosis de ITO son comunes. Determinados parámetros clínicos e inmunológicos basales, especialmente la IgE específica, ayudan a identificar los pacientes con alta probabilidad de completar la ITO de forma segura, así como aquéllos que fracasarán precozmente o tendrán reacciones persistentes, frecuentes y más graves. La IgA específica sérica no se modifica tras el tratamiento, mientras que la IgE desciende y la IgG4 aumenta. Los cambios inmunológicos citados no se correlacionan con el perfil de seguridad del tratamiento. / BACKGROUND Oral immunotherapy (OIT) is a promising experimental treatment for food allergy. AIMS 1. To evaluate the efficacy and safety of OIT in cow´s milk (CM) and egg allergic children. 2. To define clinical phenotypes according to the OIT safety profile. 3. To analyze the usefulness of baseline clinical and immune parameters to predict OIT safety. 4. To evaluate the evolution of humoral immune parameters and its correlation with safety phenotypes. METHODS Patients aged 5-18 years diagnosed with IgE-mediated CM and egg allergy (N= 80 and 50, respectively). Determination of baseline parameters. OIT protocol implementation. RESULTS 1. Complete desensitization was reached in 73% of CM-OIT and 54% of egg-OIT patients. Most cases experienced OIT-related reactions, which were mainly mild. 2. Three clinical phenotypes were identified based on OIT safety: a) Children whose reactions resolved over time on-OIT experienced infrequent and mainly mild reactions. Most of them had reached complete desensitization. In them, OIT was safe and effective (75% of cases in CM-OIT and 48% in egg-OIT); b) Children who experienced ongoing reactions over the entire period on-OIT had frequent and mainly moderate reactions (17.5% in CM-OIT and 34% in egg-OIT); c) In egg-OIT, 18% of cases required early discontinuation due to frequent and more severe reactions not improved by medication and protocol re-adaptation. 3. Particular baseline parameters were useful to predict OIT safety. Early discontinuation was associated with higher specific IgE, IgG4 and IgA levels, more severe asthma, lower threshold and more severe reactions at baseline challenge. Specific IgE and lower CM threshold correlated with reactions frequency, severity and persistence. Specific IgE showed good diagnostic performance to predict a safe OIT (optimal cut-offs: casein-IgE < 76 kU/L for CM-OIT, ovalbumin-IgE <6.49 kU/L for egg-OIT). Prick test correlated with reactions frequency and it was an independent risk factor for persistent and grade 4 reactions to CM-OIT. More severe asthma is associated to grade 4 reactions to OIT. More severe reactions at baseline challenge correlate with reactions frequency and they are an independent risk factor for persistent reactions. 4. Serum specific IgA remained unmodified after egg-OIT. Specific IgG4 increased, whereas IgE and prick test decreased after OIT, both in children with ongoing and resolved reactions. CONCLUSIONS OIT induced desensitization in a wide proportion of CM and egg-allergic patients. Reactions were common. Baseline parameters, specially specific IgE, may help identify those patients in whom OIT is more likely to be safe. Changes in humoral immune parameters did not correlate with OIT safety phenotype.