Depuis sa première adoption en 1990, la politique de ciblage de l'inflation est devenue la politique monétaire la plus adoptée par les banques centrales aussi bien dans les économies développées ou émergentes. Cette priorité stratégique des autorités monétaires nous a conduits à réfléchir sur l'efficacité de ce choix. L'objectif de cette thèse est alors étudier la performance économique de cette politique économique surtout en cas de ruptures structurelles. Le premier chapitre présente l'approche théorique de ce travail en mettant l'accent sur ce débat de performance et l'intérêt à adopter cette politique de ciblage d'inflation afin de maitriser sa volatilité. L'approche empirique de cette thèse cherche à vérifier la performance de ce passage. Le second chapitre traduit l'efficacité du nouveau régime en étudiant son effet sur la dynamique de l'inflation, la croissance et certains indicateurs agissant sur la conjoncture macroéconomique. Ce travail explore également l'existence des différents points de ruptures structurelles. Le troisième chapitre illustre l'existence de ces dates de changement correspondant au changement de régime. La présente étude montre d'un côté qu'il y a performance économique suite au changement de régime. D'un autre côté, les résultats prouvent l'existence de multitude points de changement de rupture structurelle qui coïncident avec la mise en œuvre de la nouvelle politique de ciblage d'inflation. / Since its first introduction in 1990, the policy of inflation targeting has become the most adopted monetary policy by central banks in both developed and emerging economies. This strategic priority of monetary policy has led us to think the effectiveness of this choice. The objective of this thesis is then to study the economic performance of this economic policy especially in the case of structural interruptions. The first chapter presents the theoretical approach of this work focusing on performance and the necessity of adopting this policy in order to control its volatility. The empirical approach of this thesis aims to verify the performance of this transition. The second chapter shows the effectiveness of the new system by studying its effect on the inflation dynamics, the growth and indicators which affect the macroeconomic environment. This work also explores the existence of different points of structural interruptions. The third chapter illustrates the existence of these date changes corresponding to the regime switching. The present study reveals on one side that there is economic performance following the regime change. On the other hand, the results confirm the existence of many structural break points which coincide with the implementation of the new policy of inflation targeting.

Les systèmes théranostiques associant des propriétés thérapeutiques et des propriétés d'imagerie sont développés pour permettre le suivi de traitement in vivo. La stratégie que nous proposons dans cette thèse est de formuler des liposomes magnétiques thermosensibles chargés en principe actif pour traiter des tumeurs murines superficielles du côlon CT26. Ces nanovecteurs peuvent être accumulés dans les tumeurs par ciblage magnétique et le relargage du principe actif peut être déclenché par HIFU (Ultrasons Focalisés de Haute Intensité). Ces liposomes sont développés par co-encapsulation de nanoparticules de maghémite (?-Fe2O3) et de Combrétastatine A4 Phosphate (CA4P) dans des liposomes thermosensibles. La forte encapsulation des nanoparticules magnétiques dans les Liposomes Ultra-Magnétiques (LUM) permet à la fois le ciblage magnétique et leur suivi in vivo par IRM. Le chauffage par HIFU in vitro à la température de transition des membranes des LUM a permis une amélioration du relargage de la CA4P. La biodistribution des LUM in vivo a été évaluée par IRM dynamique de contraste de susceptibilité avec une résolution temporelle adaptée à la cinétique de capture des nanovecteurs, notamment par le foie. L'efficacité du ciblage magnétique a été démontrée grâce à une nouvelle méthode de traitement de l'histogramme des intensités IRM. Enfin, l'ajustement in vivo des séquences d'HIFU permet le relargage du principe actif. L'efficacité du traitement est ensuite suivie par IRM multiparamétrique anatomique, pondérée T2* de diffusion et de perfusion pour évaluer l'impact sur la fonctionnalité vasculaire et l'évolution tumorale, ainsi que par histologie. / Theranostic systems with imaging and therapeutic properties are developed to monitor treatments in vivo. The strategy we propose here is to design thermosensitive drug-loaded magnetic liposomes to treat superficial colon tumors CT26 on mice. These nanocarriers can be accumulated in the tumor by using a magnetic field gradient and the drug release can be triggered by a local heating induced by HIFU (High Intensity Focused Ultrasounds). They have been developed by co-encapsulation of magnetic nanoparticles and the antitumoral drug CA4P (Combretastatin A-4 Phosphate) in thermosensitive liposomes. The high loading of maghemite (γ-Fe2O3) magnetic nanoparticles enables both magnetic targeting and in vivo monitoring by MRI of this Ultra-Magnetic Liposomes (UML). In vitro HIFU heating at the UML membrane transition temperature improved the drug release. In vivo UML biodistribution was evaluated with dynamic susceptibility contrast imaging adjusted in time acquisition in MRI and the magnetic targeting efficiency was shown with a new MRI imaging processing. Adjustments of in vivo HIFU sequences to locally heat the tumor at the UML transition temperature allowed the triggering of drug release. Treatment efficiency was monitored by multiparametric diffusion, T2* weighted, anatomical and perfusion MRI and histology.

Cette thèse présente la conception de nano-objets magnétiques dendronisés permettant à la fois le diagnostic par imagerie par IRM et la thérapie par hyperthermie magnétique (HM). La validation in vitro et in vivo des propriétés de ces nano-objets et la démonstration de leur efficacité pour le ciblage spécifique de tumeurs sont rapportées. Un état de l’art sur la synthèse des NPs d’oxydes métalliques, leur fonctionnalisation ainsi que leurs propriétés en IRM et en HM est présenté. L’influence de la méthode de fonctionnalisation de NPs d’oxyde de fer puis l’influence de l’architecture de la molécule greffée sur la stabilité colloïdale et la relaxivité ont été étudiées. Des NPs de différentes tailles, morphologies et composition ont ensuite été synthétisées et fonctionnalisées par une molécule dendron et leurs les propriétés en IRM et en HM ont été étudiées. Le ciblage spécifique de la mélanine au sein de mélanome a été montré. / This thesis presents the design of dendronized magnetic nano- objects for both diagnostic imaging by MRI and magnetic hyperthermia therapy (HM). In vitro and in vivo validation of these nano-objects properties and the demonstrattion of their effectiveness for specific targeting of tumors are reported. A state of the art on the synthesis of metal oxide NPs, their functionalization and their properties in MRI and HM is presented. The influence of the NPs iron oxide functionalization method and the influence of the molecule architecture on the colloidal stability and relaxivity were studied. NPs of different sizes, morphologies and composition were then synthesized and functionalized with a dendron molecule and the MRI and HM properties were investigated. The specific targeting of melanin in melanoma was demonstrated.

Les SRPs (Small Rigid Platforms) sont des nanoparticules de taille inférieure à 5 nm, constituées d'une matrice de polysiloxane, à la surface de laquelle sont greffés de manière covalente des complexes de gadolinium. Les SRPs ont été développées pour des applications en imagerie multimodale, notamment en imagerie par résonance magnétique, en scintigraphie et en imagerie par fluorescence, ainsi que pour des applications en théranostic, et plus particulièrement, en radiosensibilisation. L'objectif de la thèse consiste à fonctionnaliser les SRPs par des entités de ciblage, capables d'identifier et de se lier à des récepteurs surexprimés par les tumeurs ou par l'endothélium qui leur est associé. Plus précisément, trois molécules ciblantes ont été retenues : (i) le c(RGDfK) – un pentapeptide cyclique contenant le motif Arg-Gly-Asp ciblant spécifiquement l'intégrine αuß3, récepteur de cellule endothéliale pour les protéines de la matrice extracellulaire et surexprimée par de nombreuses cellules cancéreuses, (ii) une molécule dérivée de la quinoxaline – ciblant la mélanine, sur-exprimée par de nombreux types de mélanomes (cancers de la peau), et (iii) un pyridinium – ciblant les protéoglycanes, sur-exprimés par le chondrosarcome (cancer du cartilage). Les différentes molécules ciblantes ont alors été greffées en surface des SRPs afin d'optimiser leur accumulation et leur rétention au sein des tumeurs, et par conséquent, d'augmenter le potentiel de ces SRPs en tant qu'agents théranostiques. Le couplage covalent des différents vecteurs aux SRPs et leur quantification ont été mis en évidence par diverses techniques de caractérisation physicochimiques et complémentaires. Enfin, le ciblage des nanoparticules vectorisées a été démontré par plusieurs tests in vitro et/ou in vivo lors de nombreuses collaborations pour les trois différents vecteurs / SRPs (Small Rigid Platforms) are sub-5 nanometre nanoparticles, composed of a polysiloxane network surrounded by gadolinium chelates. SRPs have previously demonstrated their efficiency for multimodal imaging and theranostic applications, especially magnetic resonance imaging, scintigraphy, fluorescence imaging, and radiosensitization. The purpose of this thesis deals with the functionalization of these SRPs by targeting entities able to recognize and to bind to receptors that are over-expressed by tumours or by the matching endothelium. More specifically, three targeting molecules drew our attention: (i) c(RGDfK) – a cyclic pentapeptide containing the Arg-Gly-Asp motif, able to target the αuß3 integrin, an endothelial cell receptor for the proteins of the extracellular matrix and frequently expressed by tumour cells, (ii) a quinoxaline derivative – targeting melanin, which is over-expressed by melanomas (skin cancers) and (iii) a pyridinium moiety – targeting proteoglycans, which are over-expressed in chondrosarcoma (cartilage cancer). The different targeting molecules were then grafted to the SRPs in order to maximize their accumulation and retention in tumours with the aim to enhance the SRP efficiency as theranostic agents. The covalent coupling of the different targeting molecules to the SRPs and their quantification were performed by various physicochemical characterization techniques. Finally, the targeting of the functionalized SRPs was highlighted by several in vitro and/or in vivo assays thanks to numerous successful collaborations

La riboflavine (RF) est une vitamine essentielle pour la croissance et le développement cellulaire. Elle possède des propriétés physico-chimiques intéressantes et est internalisée dans les cellules par des transporteurs spécifiques. Le premier objectif de ce projet était de synthétiser des dérivés amphiphiles de la RF (RFA) et d'étudier leurs capacités d'auto-assemblages. Le second objectif était d'insérer les RFA dans des liposomes et d'évaluer leur efficacité de ciblage tumoral in vitro et in vivo. La préparation des différents RFA repose sur l'ajout d'un lipide en différentes positions de la RF. L’un d'eux, de type phospholipide (RfdiC14) a été capable de former des objets tridimensionnels de taille μm constitués de lamelles multicouches dont l’architecture et la dynamique sont très différentes de celles des phospholipides classiques. L’insertion de RfdiC14 dans des liposomes est efficace et n’influence pas leurs propriétés physico-chimiques. Les liposomes fonctionnalisés ont montré une internalisation cellulaire spécifique dans les lignées A431, PC3 et HUVECs. Afin de tester l’efficacité du ciblage tumoral in vivo, un analogue de RfdiC14 portant un espaceur PEG a été préparé puis inséré dans des liposomes péguylés. Grâce à un marquage adéquat (ICG et DiR), leur accumulation tumorale a été suivie par imagerie photoacoustique dans un modèle A431 et leur biodistribution évaluée par imagerie μCT/FMT dans un modèle PC3. Les résultats montrent une légère amélioration de l’accumulation tumorale dans les xénogreffes A431 et une augmentation du ciblage vasculaire dans le modèle tumoral PC3. La biodistribution globale des liposomes marqués est comparable à celle des contrôles. / Riboflavin (RF) is an essential vitamin for cell growth and development. It possesses interesting physicochemical properties and is internalized by the cells through specific transporters. The first aim of this study was to prepare amphiphile derivatives of RF (RFA) and study their auto-assembly. The second aim was to insert RFA into established drug delivery systems and test their tumour-targeting potential in vitro and in vivo. RFA were prepared by the molecule functionalization with lipid moieties in different positions. One of them, a phospholipid-like derivative (RfdiC14) was able to self-assembly in aqueous solutions into μm-sized 3D objects constituted from slightly curved multilayer lamellas. The bilayer architecture and dynamics were very different from ordinary phospholipids. In contrast, the insertion of small amount of RfdiC14 in a liposome did not influence membrane dynamics and physicochemical characteristics. RfdiC14-functionalised liposomes displayed high and specific uptake in vitro in A431, PC3 cells and HUVECs. The efficiency of RF targeting was also tested in vivo. For that purpose, liposome composition was optimized and a new RF amphiphile with a PEG spacer between RF and lipid was prepared. The tumour accumulation of the liposomes labelled with ICG was studied by photoacoustic imaging in A431 tumour model. The biodistribution of DiR labelled liposomes was accessed by combined μCT/FMT imaging in PC3 tumour model. The results show slight improvement of the tumour accumulation in A431 xenographts and the enhancement of vascular targeting in PC3 tumour model. The overall biodistribution of the RF-targeted liposomes was comparable to control.

Le mélanome métastatique reste à l’heure actuelle une pathologie dramatique avec une survie moyenne de 13 mois après diagnostic, démontrant l’échec des chimiothérapies. Ces travaux de thèse ont pour but de développer une stratégie alternative utilisant les siRNA (petits ARN interférents) encapsulés au sein de nanocapsules lipidiques (LNC) pour une injection intraveineuse. Les premiers travaux ont porté sur le développement et l’amélioration du procédé de formulation des LNC chargées en siRNA. Les résultats ont permis une encapsulation à hauteur de 35%, une stabilité prolongée supérieure à 3 mois et une efficacité d’extinction du gène cible dans les cellules de mélanome. La deuxième partie de la thèse s’est orientée sur les stratégies de ciblage du mélanome après administration systémique. Différentes modifications de surface des LNC à l’aide de polyéthylène glycol (PEG) et d’Affitins (peptide d’affinité) ont été mises au point. La biodistribution sur des animaux « sains » ou des animaux greffés en sous-cutanés (mélanome humain) a révélé des comportements distincts en fonction des recouvrements utilisés. Les formes pegylées ont montré une accumulation préférentielle au site tumoral en comparaison avec les formes non modifiées ou modifiées avec les Affitins. Dans une troisième partie, des études d’efficacité anti-tumorale ont été réalisées avec un siRNA ciblant la protéine Bcl-2 ou la sous unité alpha 1 de la pompe Na/K ATPase. Une réduction du volume tumoral de 25% est observée avec les LNC siRNA Bcl-2. Par ailleurs, l’association de nouvelles chimiothérapies, les ferrocifènes, et des siRNA Bcl-2, montrent grâce à leur co-encapsulation au sein des LNC, des effets prometteurs. Ces travaux démontrent ainsi la capacité des LNC à délivrer des siRNA par voie intraveineuse dans de nouvelles stratégies de ciblage du mélanome. / Metastatic melanoma represents the most aggressive form of skin cancer with a median survival around 13 months. The low efficacy of actual chemotherapy is explained by important resistance phenomenon. The objective of this work consists in developing a new alternative strategy based on siRNA (small interfering RNA) encapsulated into lipid nanocapsules (LNCs) for intravenous injection. Firstly, the experiments were focused on development and optimization of formulation process for the encapsulation of siRNA into LNCs. The result demonstrated an encapsulation efficiency evaluated at 35% by spectrophotometer analysis, an important stability at 4°C (for at less 3 month) and an efficient gene inhibition in melanoma cells. The second part of this work studied the melanoma targeting potential of surface modified LNCs after systemic injection. In this way, pegylation with different polymers and Affitin grafting (affinity peptide) was performed on siRNA LNCs. The biodistribution on healthy animals and subcutaneous melanoma tumor bearing mice revealed the distinct behavior of various modified LNCs. All pegylated LNCs showed a preferential accumulation in tumor site in comparison with non-modified or Affitins LNCs. In a third part, the anti-cancer efficacy was tested with siRNA targeting Bcl-2, an anti-apoptotic member, or Alpha 1 subunit of Na/K ATPase. A reduction of tumoral volume evaluated at 25% was observed for Bcl-2 siRNA LNC. Moreover, the association with new promising anticancerous drug, ferrocifens, and Bcl-2 siRNA co-encapsulated into LNCs evidenced promising effects. This work demonstrated the capacity of LNC to deliver siRNA into melanoma cells and tumor after systemic administration thank to new targeting strategies in melanoma

Dans ce travail, nous avons pu sélectionner par la méthode SELEX un aptamère à ARN modifié, appelé Apt1, qui se lie avec une haute affinité au récepteur CD44. L'aptamère sélectionné a été modifié avec par des 2'-F-pyrimidines afin d’augmenter sa stabilité vis-à-vis des nucléases pour une application thérapeutique. Cet aptamère a été ensuite greffé sur des liposomes contenant des séquences de siRNA dirigées contre un gène rapporteur, dans le but d’un ciblage actif des cellules tumorales exprimant le récepteur CD44. Cette fonctionnalisation a été réalisée par la conjugaison d’un dérivé 3'-thiol de Apt1 et un dérivé maléimide de phospholipides, directement à la surface des liposomes, ou bien séparément puis par post-insertion sur les liposomes. Les liposomes ainsi formulés présentent une forte affinité pour les cellules exprimant le CD44 sans déclencher de réponse inflammatoire au sein de ces cellules. En outre, nous montrons que l'inhibition du gène rapporteur est augmentée et prolongée lorsque l’aptamère est couplé aux liposomes chargés aux siRNA, in vitro ainsi qu’in vivo sur un modèle murin orthotopique de cancer du sein. De tels vecteurs de siRNA constituent donc un outil prometteur pour le ciblage actif de tumeurs exprimant le récepteur CD44. L'étape suivante consistera charger ces vecteurs par des séquences de siRNA permettant de réprimer des oncogènes. / In this work we succeeded to select a modified RNA aptamer, named Apt1, to bind the human CD44 receptor protein with high affinity using the Systemaic Evolution of Ligands by EXponential enrichment (SELEX) method. The selected aptamer was modified with 2'-F-pyrimidines to increase its stability against nucleases for therapeutic applications. Furthermore, we designed and characterized aptamer-functionalized liposomes loaded with siRNA molecules against a reporter gene as a model drug delivery system for the active targeting CD44-expressing tumor cells in vitro and in vivo. Such functionalization was performed by conjugation of 3'-thiol-modified Apt1 to maleimide-modified phospholipids, either on the surface of liposomes, or separately, followed by post-insertion onto liposomes. The targeted liposomes displayed high affinity for CD44-positive cells without triggering any inflammatory response within these cells. Moreover, we show that a higher and prolonged inhibition of the targeted gene can be achieved when siRNA-loaded liposomes are functionalized by the aptamer, both in vitro and in vivo on a murine orthotopic breast cancer model. Such a delivery system may thus be a useful tool for the active targeting of CD44-expressing tumors and silencing oncogenes in vivo.

Le développement de thérapies ciblées est un enjeu majeur en santé et l’essor des nanovecteurs permet de répondre à ces besoins cliniques. Le premier axe de cette thèse est consacré à l’étude du potentiel thérapeutique de nanoparticules multifonctionnelles pour l’imagerie médicale, la thérapie photothermique et la délivrance de drogue pour le traitement du cancer. Le deuxième axe de recherche s’oriente vers le ciblage thérapeutique actif. L’entreprise NanoMedSyn a pour objectif de développer un ciblage actif du récepteur du mannose 6-phosphate, permettant un meilleur adressage des médicaments et des traitements plus efficaces. Ce type de ciblage peut avoir des retombées multiples pour la thérapie anticancéreuse mais également pour la thérapie des maladies lysosomales qui sont des maladies génétiques rares. NanoMedSyn développe des dérivés synthétiques de glycovecteurs innovants, appelés AMFA, qu’elle exploite en exclusivité. Les AMFA ont une bonne affinité pour le récepteur du mannose 6-phosphate et ont été greffés sur des nanoparticules multifonctionnelles dans le but d’améliorer l’adressage et la thérapie photodynamique biphotonique d’un cancer pédiatrique : le rhabdomyosarcome ; et sur des enzymes lysosomales pour le traitement de maladies lysosomales telle que la maladie de Pompe. / The development of targeted therapies is a major health issue and the rise of nanovectors makes it possible to meet these clinical needs. The first approach of this thesis is dedicated to the study of the therapeutic potential of multifunctional nanoparticles for medical imaging, photothermal therapy and drug delivery in cancer treatment. The second line of research focuses on active therapeutic targeting. The NanoMedSyn company aims to develop an active targeting of the mannose 6-phosphate receptor, allowing a better addressing of drugs and more effective treatments. This type of targeting may have multiple benefits for cancer therapy but also for the treatment of the lysosomal diseases which are rare genetic diseases. NanoMedSyn develops innovative synthetic derivatives of glycovectors, called AMFA, which it exploits exclusively. AMFA have a good affinity for the mannose 6-phosphate receptor and have been grafted on multifunctional nanoparticles in order to improve addressing and two-photon photodynamic therapy of a pediatric cancer: the rhabdomyosarcoma; and on lysosomal enzymes for the lysosomal diseases treatment such as for Pompe disease.

Les mastocytoses systémiques (SM) constituent un groupe hétérogène de maladies rares, caractérisées par l’accumulation anormale de mastocytes malins dans la moelle osseuse et dans d’autres organes extra-cutanés. La majorité des patients avec SM ont une mutation activatrice du gène KIT, le plus souvent la mutation KIT D816V, retrouvée chez plus de 90% de tous les patients. Cette mutation induit l’activation constitutive du récepteur KIT en déclenchant de façon aberrante une cascade de voies de signalisation, dont la voie PI3K/AKT et JAK/STAT5, aboutissant à l’inhibition de l’apoptose et à l’augmentation de la prolifération et de la survie des mastocytes malins. Cependant, l’efficacité des inhibiteurs de tyrosines kinases (ITKs) sur cette mutation est limitée à cause de la résistance et/ou de toxicité liée à un manque de spécificité. Il est donc nécessaire de trouver de nouvelles approches thérapeutiques afin de contourner cette résistance au cours des SM KIT D816V+ avancées. Nous avons utilisé une approche consistant à cibler de façon combinée des molécules activées en aval de KIT D816V, comme AKT et STAT5, par des inhibiteurs pharmacologiques. Ceci nous a permis d’identifier une combinaison synergique entre un inhibiteur d’AKT (GSK690693) et un inhibiteur de STAT5 (BP-1-102). Ces composés sont capables d’inhiber la prolifération des cellules KIT D816V+ seuls ou en combinaison, mais à de très fortes concentrations, malheureusement non utilisables en thérapeutique. Néanmoins, ces premiers résultats ont permis de valider AKT et STAT5 comme cibles potentielles dans le traitement des SM avancées. La seconde approche employée a été de cibler directement le récepteur KIT D816V par des inhibiteurs pharmacologiques. A l’issu d’un criblage, nous avons identifié trois composés - BLU2317, BLU2718 et DCC-2618 - capables d’inhiber sélectivement la phosphorylation de KIT D816V. Ces composés inhibent la prolifération des cellules ROSAKIT D816V et HMC-1.2, et induisent l’apoptose des cellules de façon dose-dépendante. Bien que les effets de ces trois composés soient similaires, DCC-2618 agit à des concentrations plus faibles par rapport aux composés BLU2317 et BLU2718. Afin d’apprécier l’efficacité in vivo de DCC-2618, nous avons d’abord établi un nouveau modèle de SM basé sur l’injection intraveineuse des cellules ROSAKIT D816V-Gluc exprimant la Gaussia luciferase (Gluc) dans des souris NSG. La présence de la Gluc sécrétée par les cellules ROSAKIT D816V-Gluc facilite la mise en évidence de prise de greffe et permet un contrôle précis de la progression de la maladie. Ce modèle reproduit, au bout de 4 semaines, chez toutes les souris greffées, une SM avancée similaire à celle retrouvée chez l’homme, avec atteinte de la moelle osseuse, du sang, de la rate et du foie, tandis que la dégradation de l’état général des souris n’est observée qu’à partir de 12 semaines. Ce nouveau modèle offre suffisamment de temps pour explorer la cinétique de la progression de la maladie et surtout pour effectuer des études pharmacologiques précliniques. L’évaluation de l’effet de DCC-2618 in vivo a été réalisée sur ce modèle. Etonnamment, DCC-2618 n’a pas été capable d’inhiber la progression de la maladie chez les souris traitées, bien qu’atteignant des concentrations élevées dans la moelle osseuse et le plasma des souris traitées. Néanmoins, DCC-2618 s’est montré capable d’inhiber la phosphorylation de KIT dans les cellules issues de la moelle osseuse des souris traitées. En revanche, contrairement aux effets observés in vitro, DCC-2618 a induit une surexpression de phospho-ERK1/2 dans les cellules malignes des souris greffées. Ceci suggère qu’ERK1/2 joue un rôle important dans la résistance au composé DCC-2618 et éventuellement à d’autres ITKs, indépendamment du récepteur KIT. ERK1/2 pourrait donc être une nouvelle cible thérapeutique d’intérêt dans le traitement des SM résistantes aux ITKs / Systemic mastocytosis (SM) is a heterogeneous group of rare diseases characterized by abnormal accumulation of malignant mast cells (MCs) in the bone marrow (BM) and other extra-cutaneous organs. The majority of SM patients have an activating mutation in the KIT gene, usually the D816V point mutation, which is found in more than 90% of all patients. This mutation induces constitutive activation of the KIT receptor by triggering a cascade of signaling pathways, including the PI3K/AKT and the JAK/STAT5 pathways, resulting in the inhibition of apoptosis and increased survival and proliferation of malignant mast cells. However, the efficacy of the tyrosine kinase inhibitors (TKIs) on this mutation is limited due to resistance and/or toxicity associated with a lack of specificity. It is therefore critical to find new therapeutic approaches to overcome this resistance to TKIs, particularly for advanced KIT D816V+ SM. In the present thesis, we have used an approach consisting in targeting molecules activated downstream of KIT D816V, such as AKT and STAT5, using pharmacological inhibitors in combination. This allowed us to identify a synergistic combination of an AKT inhibitor (GSK690693) and an inhibitor of STAT5 (BP-1-102). These compounds are able to inhibit proliferation of KIT D816V+ cells, alone or in combination, but at very high concentrations, unfortunately not useful therapeutically. Nevertheless, these initial results have validated STAT5 and AKT as potential targets for the treatment of advanced SM. The second approach used was to target directly the KIT D816V receptor by pharmacological inhibitors. After a large screening, we identified three compounds - BLU2317, BLU2718 and DCC-2618 - which selectively inhibit the phosphorylation of KIT D816V. These compounds inhibit the proliferation of ROSAKIT D816V and HMC-1.2 cells, and induce apoptosis of these cells in a dose-dependent manner. Although the effects of these three compounds are similar, the DCC-2618 compound acts at lower concentrations relative to BLU2317 and BLU2718 compounds. In order to assess the in vivo efficacy of DCC-2618, we first established a new model of SM based on intravenous injection of cells expressing Gaussia luciferase (Gluc), ROSAKIT D816V-Gluc cells, in NSG mice. The presence of the secreted Gluc in ROSAKIT D816V-Gluc cells facilitates the detection of engraftment and allows precise monitoring of disease progression. This model reproduced within four weeks, in all grafted mice, an advanced SM similar to the one found in humans, with neoplastic MCs infiltration in BM, blood, spleen and liver, while the terminal deterioration of the clinical condition of the mice was observed after 12 weeks. Thus, this new in vivo model allows modulating the aggressiveness of the disease by varying the number of injected cells. It provides sufficient time to explore the kinetics of disease progression and especially to conduct preclinical pharmacological studies. We then evaluated the effect of DCC-2618 compound in vivo on this model. Surprisingly, DCC-2618 was not able to inhibit disease progression in treated mice, although it reached high concentrations in the BM and the plasma of treated mice. Nevertheless, we showed that the compound was able to inhibit the phosphorylation of the KIT receptor in cells derived from the BM of treated mice. In addition, contrasting to the effects observed in vitro, DCC-2618 induced an over-expression of phospho-ERK1/2 in the malignant cells of transplanted mice. This suggests that ERK1/2 may play a critical role in the resistance to DCC-2618, and possibly to other TKIs, independently of the KIT receptor. ERK1/2 could thus be a new interesting therapeutic target in the treatment of advanced SM resistant to TKIs

Cette thèse porte sur la problématique de l’application de la politique monétaire en République Slovaque (RS) depuis 1990. Malgré sa courte histoire la Banque Nationale de la Slovaquie (BNS), possédait et possède toujours une position importante dans le processus de transformation, dans la stabilisation de la situation macroéconomique et dans l’accomplissement des ambitions d’intégration de la RS. Par conséquent, la BNS doit réagir aux tendances actuelles dans le domaine des cibles, instruments et stratégies monétaires. La BNS a significativement avancé dans ce domaine dans une direction positive. La mise en oeuvre d‘une stratégie monétaire optimale, la combinaison appropriée de la règle monétaire et de la politique monétaire discretionnaire peuvent influencer favorablement l’efficacite de la BNS. L’application de la règle monétaire en tant que fonction de réaction de la banque centrale augmente la transparence et la clarté des mesures monétaires de la cette dernière. Une règle monétaire permet aux investisseurs, banquiers, analystes financiers et aux autres agents économiques de prévoir plus précisément la direction et le volume des mesures de la BNS. En conséquence de quoi la transmission et l’impact des démarches est plus efficace. Etant donné que la version officielle de la règle monétaire appliquée par la BNS n’est pas encore connue, il est dans l’intérêt de nombreux analystes de calculer cette formule. Cette thèse offre des processus éventuels pour élaboration d’une règle monétaire dans le contexte de la RS et en propose une forme possible. / The objective of this thesis is to characterise and to evaluate evolution of monetary policy in Slovakia as well as to suggest an optimal monetary strategy for the future. Theoretical part treats beginning and evolution of the monetary policy in the world and main approaches in its application within central banking. In the conclusion of theoretical part is review of literature dealing with similar problematic. The thesis analyses evolution of National Bank of Slovakia (NBS) independence, instruments and objectives. Evaluation of NBS monetary policy application, respectively State Bank of Czechoslovakia monetary policy application, is divided into five basic periods since 1990 to 2005. It is crucial to choose an optimal monetary strategy in order to increase central bank effectiveness and at the same time in respect to the Slovak Republic integration procedures. The thesis compares and analyses advantages and disadvantages of several alternative monetary strategies as for intermediate objectives and as for decisional process. According to our conclusions a Taylor-type rule should be the integral part of the optimal NBS monetary strategy. The rule originates from basic Taylor rule that enables to determinate direction and volume of central bank measurements. Our Taylor rule is applied and adopted to Slovak macroeconomic conditions. Time ranks of chosen macroeconomic indicators since 1993 to 2005 were applied in determination and calculation of the rule. Achieved results are significantly consistent with theory, initial pre-assumptions and current NBS activity.