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An?lise da presen?a da invers?o da raz?o CD4:CD8 em idosos e seu perfil celular e bioqu?micoM?ller, Guilherme Cerutti 29 July 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-07-29 / Aging has been associated with increased generation of free radicals as well as immunosenescence. Previous studies have identified older individuals with inverted T CD4:CD8 cell ratio and increased immunity to cytomegalovirus (CMV). Here, we investigated markers of oxidative stress and antioxidant defences in older individuals with inverted CD4:CD8 T-cell ratio. From 421 healthy community-dwelling older adults recruited, 61 subjects were identified with inverted CD4:CD8 T-cell ratio. Older individuals with a CD4:CD8 ratio < 1 had increased levels of plasma advanced oxidation protein products (AOPP) and Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP), but reduced levels of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) as compared to subjects with normal CD4:CD8 T-cell ratio. The CMV IgG serology was negatively correlated with CD4:CD8 ratio. These markers were more evident among elderly men than women. Our data suggest a close relationship between chronic CMV infection and oxidative profile in older individuals in the midst of its influence on the peripheral T-cell subsets. / O envelhecimento tem sido associado com o aumento da gera??o de radicais livres, bem como com a imunossenesc?ncia. Estudos anteriores j? haviam identificado os idosos que apresentavam a invers?o da raz?o CD4:CD8 e a sorologia mais acentuada para citomegalov?rus (CMV). Aqui, investigamos marcadores de estresse oxidativo e as defesas antioxidantes em idosos com a rela??o invertida entre as c?lulas T CD4 e CD8. De um total de 421 idosos recrutados na comunidade, 61 sujeitos foram identificados com a invers?o da raz?o CD4:CD8. Os idosos com CD4:CD8<1 tinham n?veis aumentados de produtos proteicos de oxida??o avan?ada (AOPP) e atividade antioxidante total pelo m?todo de redu??o do ferro (FRAP) no plasma, mas n?veis reduzidos de subst?ncias reativas ao ?cido tiobarbit?rico (TBARS), em compara??o com indiv?duos com raz?o CD4:CD8 normais. A sorologia para CMV (IgG) foi negativamente correlacionada com a raz?o CD4:CD8. Estes marcadores foram mais evidentes entre os homens do que as mulheres idosas. Nossos dados sugerem uma estreita rela??o entre a infec??o por CMV cr?nica e perfil oxidativo em indiv?duos mais velhos no meio de sua influ?ncia sobre os subtipos de c?lulas T perif?ricas.
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Caracteriza??o de diferentes express?es fenot?picas de c?lulas TCD4 na asma at?pica e n?o-at?pica de uma popula??o de escolares de Porto Alegre/RSAra?jo, Patr?cia Dias de 04 March 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-03-04 / Introduction: Asthma is a disease with predominant presence of CD4 Th2 cells that affects children. The disease main characteristics is inflammation and airway hyperreactivity. Asthma has two main phenotypes depending on the presence of atopy. It was not yet fully described in asthmatic children of school age the presence of different profiles of Th1, Th2, Th17 and Treg cells in peripheral blood, which may be related to the pathogenesis of the disease. Aims: To analyze the phenotypic of CD4 T cells in asthmatics children in Porto Alegre/RS. Methods: This was a croos-sectional study when it was recruited children between 9 to 15 years old, asthmatics and controls. The PBMCs were isolated using Ficoll and the cells were cultured with anti-CD3/CD28antibodies, Derp1 or left unstimulated. After 24hs the cells were stained with antibodies specifics for transcription factors in order to analyze Th1, Th2, Treg and Th17 cells by flow cytometry and the supernatant was collected for cytokine analysis by CBA assay. Plasma was used to perform analysis of specific IgE. Results: It was analyzed 104 patients, 12 controls and 92 asthmatics. Atopic asthmatic patients presented higher frequency of Th2 cells compared with non-atopic and atopic controls. When we analyzed cells expressing more than one transcription factor it was observed that atopic asthmatics patients have a higher frequency of CD4+GATA3+FOXP3+, CD4+RORγT+GATA3+ and CD4+GATA3+Tbet+ compared with non-atopic patients and controls atopic. Analyzing the asthma severity it was seen a higher frequency of CD4+RORγT+GATA3+ in patients with moderate asthma compared with patients with mild asthma. Stimulating the cells from atopic asthma patients with anti-CD3 and anti-CD28 induced more Th1 profile while stimulating with DerP1 protein changed the profile of the cells mainly to Th17 and Treg cells. Conclusion: This is the first study in children that analyzes Th1, Th2, Treg and Th17 cells using the tag transcription factor by flow cytometry in asthmatic or atopic and non-atopic controls. We found a Th2 profile in atopic asthmatic children according to the literature. Interestingly non-atopic children showed no predominant profile. Children with moderate asthma have a profile that expresses both the transcription factor GATA3 and RORγT. Depending on the stimulus used it was induced different phenotypes in the cells of this group of patients with asthma. / Introdu??o: A asma ? uma doen?a com predomin?ncia da presen?a das c?lulas T CD4 do tipo Th2, que afeta das crian?as e tem como principais caracter?sticas a inflama??o e hiperreatividade das vias a?reas. A asma apresenta dois fen?tipos principais dependendo da presen?a de atopia. Ainda n?o foi totalmente descrito em crian?as asm?ticas com idade escolar a presen?a dos diferentes perfis de c?lulas Th1, Th2, Th17 e Treg no sangue perif?rico, que podem estar relacionados com a patog?nese da doen?a. Objetivo: Avaliar o perfil fenot?pico de c?lulas T CD4 em pacientes asm?ticos escolares do munic?pio de Porto Alegre/RS. M?todos: Este foi um estudo transversal realizado com o recrutamento de crian?as com 09 a 15 anos de idade, asm?ticas e controles. O sangue perif?rico foi coletado e as c?lulas mononucleares foram separadas utilizando Ficoll e colocadas em cultura com anticorpos anti-CD3/CD28. Ap?s 24hs as c?lulas foram marcadas com anticorpos espec?ficos para fatores de transcri??o para an?lise do perfil Th1, Th2, Th17 e Treg por citometria de fluxo e o sobrenadante foi recolhido para analise de citocinas por CBA. No plasma foi realizada a an?lise de IgE espec?ficas. Resultados: Foram analisados 104 pacientes, sendo 12 controles e 92 asm?ticos. Os pacientes asm?ticos at?picos apresentaram um perfil Th2 mais acentuado, comparado com os n?o-at?picos e controles at?picos. Quando analisamos as c?lulas que expressam mais de um fator de transcri??o foi observado que os pacientes asm?ticos at?picos apresentam maior frequ?ncia de c?lulas T CD4 positivas GATA3+FOXP3+, RORγT+GATA3+, GATA3+Tbet+ comparada com pacientes n?o-at?picos e controles at?picos. Analisando a severidade foi observado uma frequencia maior de c?lulas T CD4+ RORγT+ GATA3+ em pacientes com asma moderada comparado com pacientes com asma leve. O est?mulo com anti-CD3 e anti-CD28 nas c?lulas dos pacientes asm?ticos at?picos induziu mais um perfil Th1 enquanto que est?mulo com DerP1 mudou o perfil de algumas c?lulas principalmente de c?lulas Tregs e Th17. Conclus?o: Este ? o primeiro estudo em crian?as que analisa o perfil Th1, Th2, Th17 e Treg utilizando a marca??o de fatores de transcri??o por citometria de fluxo em crian?as asm?ticas at?picas ou n?o-at?picas e controles. Encontramos um perfil mais Th2 em crian?as asm?ticas at?picas de acordo com a literatura. Interessantemente as crian?as n?o-at?picas n?o apresentaram nenhum perfil predominante. As crian?as com asma moderadas apresentam um perfil que expressa ao mesmo tempo o fator de transcri??o RORgT e GATA3. Dependendo do estimulo s?o induzidas diferentes fen?tipos nas c?lulas deste grupo de pacientes com asma.
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Achados inflamat?rios e dano estrutural vistos por ultrassonografia em pacientes com artrite reumatoide : correla??o com dados cl?nicos, linf?citos T regulat?rios e TH-17 e citocinas inflamat?rias no sangue perif?ricoPrado, Aline Defaveri do 28 March 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-03-28 / Introduction: Rheumatoid Arthritis (RA) is an autoimmune, inflammatory and chronic disease. Muskuloskeletal ultrasound (MSUS) has been increasingly used for diagnostic evaluation and monitoring of patients. Regulatory T cells (Tregs) and lymphocytes producers of IL 17 (Th17) imbalance and disfuntion, as well as pro inflammatory cytokines, have been implicated in the pathogenesis of RA. There are few studies on the association of circulating lymphocites subtypes and cytokines with MSUS findings in RA. Methods: One hundred and one RA patients (1987 American College of Rheumatology criteria) treated with disease-modifying antirheumatic drugs (DMARDs) were included in this cross sectional study. A blood sample was taken just before clinical and ultrasonographic evaluation, which were all performed on the same day, consecutively and in a blinded fashion. Lymphocytes were isolated and immunophenotyped by flow cytometry to investigate regulatory FoxP3+ T cells and IL-17+ cells. Plasma Th1-Th2-Th17 cytokines (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-17, TNF e IFN-?) and VEGF were searched using a Cytometric Bead Array (CBA; BD biosciences) kit by flow cytometry. Disease acitivity and disability were measured using Disease Activity Score in 28 joints (DAS28) and Health Assessment Questionnaire (HAQ). MSUS (MyLab 60, Esaote, Genova, Italy, 18 MHz linear probe) was performed consecutively by two ultrassound-trained rheumatologists on the wrists, 2th and 3th metacarpophalangeal and 2th and 3th proximal interphalangeal joints of both hands. Gray-scale synovial hypertrophy (PS) and power Doppler signal (pD) were searched using a semi-quantitative scale (0-3). Erosions were classified as present or absent. The sum of the individual joint scores for PS and pD (10-joint PS and pD scores) was calculated and used to correlate with clinical and laboratory data. Mann-Whitney test, Kruskal-Wallis test and Spearman correlation coefficient (rS) were used for statistical analysis, as well as liner multivariate regression. Interater agreement was tested using kappa statistics and intraclass correlation. Results: Among 101 patients, we were able to measure Treg/Th-17 in 90 individuals. Plasma cytokines were searched in 64 patients. Clinical and demographic features were: mean age, 55.8 ? 11 years; female gender, 80%; Caucasians, 85%; median (interquartile range) disease duration 6 (2-13) years; mean ? SD DAS28, 4.28 ? 1.64; mean ? SD HAQ score, 1.11 ? 0.85. Interobserver agreement (kappa) for US features varied from 0.53 to 1.0. Intraclass correlation for 10-joint PS score was 0.964 (95% CI 0.899-0.986, P <0.000) and for 10-joint pD score was 0,859 (95% CI 0.646-0.941, P <0.001). There was no significant correlation of 10-joint PS and pD scores with DAS28 and HAQ score. The presence of bone erosions was associated with 10-joint PS and pD scores (p=0.002), but not with DAS 28 (p=0.079) or HAQ (0.057). Swollen joint count, but not tender joint count, was correlated with 10-joint PS and pD scores (rS=0.54, P<0.001 and rS=0.39, P<0.001; respectively), as well as associated with bone erosions (P<0.001). There was no significant correlation of with 10-joint PS and pD scores with peripheral Tregs (rS=0.122, P=0.254 and rS=0,056, P=0.602) and Th17 cells (rS=-0.083, P=0.438 and rS=-0.060, P=0,575). Tregs and Th17 cells were not associated with erosions (p= 0,831 and p=0,632, respectively). Among all tested cytokines, IL-6 was correlated with DAS28 (rs 0.31 IC95% 0.07 to 0.52), eritrocyte sedimentation rate (rs 0.43 IC95% 0.19 to 0.62) and swollen joint count (rs 0.39 95%CI 0.15 a 0.59). IL-6 was also correlated with 10-joint pD score (rs 0.33 IC95% 0.07 to 0.56), right and left wrists pD (rs 0.34 IC95% 0.11 to 0.54 and rs 0.45 IC95% 0.21 to 0.64), and right and left PS (rs 0.40 IC95% 0.20 to 0.59 and rs 0.35 IC95% 0.08 to 0.57). Using multivariate linear regression model, 10-joint pD score was positively associated with IL-6 independently of DAS28 (P=0.025). There was no association of any of the tested cytokines with bone erosions (P? 0.17 for all tests). Conclusions: In established RA patients, treated with non biological DMARDs, we observed the following: lack of correlation of 10-joint PS and pD scores and DAS28 and HAQ; positive association of 10-joint PS and pD scores with bone erosions; positive association of swollen joint count, but not tender joint count, with MSUS synovitis and erosions; lack of correlation of MSUS features and circulating Treg and Th-17 cells; positive correlation of plasma IL-6 and MSUS synovitis. The association of IL-6 with 10-joint pD score was independent of DAS28. / Introdu??o. A artrite reumatoide (AR) ? uma doen?a autoimune inflamat?ria cr?nica com envolvimento articular proeminente. O ultrassom de alta resolu??o (US) tem sido empregado de maneira crescente na avalia??o diagn?stica e monitoriza??o da doen?a. O desequil?brio entre as fun??es de linf?citos T regulat?rios (Treg) e Th-17, bem como o papel de citocinas pr? inflamat?rias s?o centrais em sua patog?nese. H? escassez de estudos sobre a associa??o entre os achados ultrassonogr?ficos de atividade da AR e dano estrutural com subtipos linfocit?rios e citocinas no sangue perif?rico. M?todos: Neste estudo transversal, foram inclu?dos 101 pacientes com AR de acordo com os crit?rios de 1987 em tratamento com drogas remissivas n?o-biol?gicas. Uma amostra de sangue foi coletada imediatamente antes das avalia??es cl?nica e ultrassonogr?fica, que foram feitas todas no mesmo dia, em sequ?ncia. Os linf?citos foram isolados e imunofenotipados por citometria de fluxo para identificar c?lulas T reg FoxP3+ e linf?citos produtores de IL-17. Citocinas do perfil Th1-Th2-Th17 (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-17, TNF e IFN-?) e VEGF foram quantificadas no plasma por citometria de fluxo utilizando-se o kit Cytometric Bead Array (CBA; BD biosciences). Atividade da doen?a foi quantificada por DAS28 e capacidade funcional, pelo HAQ, ambos realizados por reumatologista treinado, cegado em rela??o aos achados de US. Dois reumatologistas (cegados em rela??o aos dados cl?nicos) com treinamento em ultrassonografia realizaram avalia??o de sinovite e presen?a de eros?es em punhos, 2? e 3? articula??es metacarpofalangeanas e 2? e 3? interfalangeanas proximais bilateralmente utilizando aparelho de alta resolu??o (MyLab 60, Esaote, It?lia, transdutor linear de 18 mHz). Prolifera??o sinovial na escala de cinzas (PS) e capta??o de power Doppler (pD) foram avaliadas utilizando uma escala semi-quantitativa com varia??o de 0 a 3. Eros?es foram classificadas como presentes ou ausentes. A soma dos escores individuais de PS e pD foi calculada (escore 10 PS e escore 10 pD) e utilizada para correlacionar com dados cl?nicos e de laborat?rio. Teste de Mann-Whitney, Kruskal-Wallis e coeficiente de correla??o de Spearman foram usados na an?lise estat?stica, bem como regress?o linear m?ltipla. Correla??o intraclasse e estat?stica kappa foram usados para concord?ncia interobservador. Resultados: Dentre os 101 pacientes inclu?dos, obtivemos quantifica??o de c?lulas Treg e Th-17 em 90 pacientes e dosagem de citocinas em 64 indiv?duos. Em sua maioria, a amostra foi composta por mulheres (80%) da ra?a branca (85%), com m?dia de idade de 55,8 anos (?11.1anos), tempo de dura??o de doen?a de 6 (2-13) anos (mediana e IIQ). A m?dia do DAS 28 (VSG) foi de 4.28 (?1.64) e do HAQ 1.11 (?0.85). Valores de kappa para a concord?ncia interobservador para o exame ultrassonogr?fico variaram de 0.53 a 1; a correla??o intraclasse para o escore 10 PS foi de 0.964 (IC95% 0.899-0.986, P <0.001) e, para o escore 10 pD, 0.859 (IC95% 0.646-0.941, P <0.001). N?o houve correla??o entre escore 10 PS e escore 10 pD com DAS28 e HAQ. Eros?es ?sseas foram associadas ao escores 10 PS e pD (p=0.002), mas n?o com DAS 28 (P=0,079) e HAQ (P =0,057). Observamos correla??o entre contagem de articula??es edemaciadas com escore 10 PS e escore 10 pD (rS=0.54, P<0.001 e rS=0.39, P<0.001; respectivamente), bem como associa??o com a presen?a de eros?es (P<0.001). N?o observamos correla??o entre contagem de articula??es dolorosas com escore 10 GS (rS = -0.071 P = 0.524), escore 10 pD (rS = -0.196 P = 0.078) ou associa??o com presen?a de eros?es (P=0.248). N?o houve correla??o significativa de escore 10 PS e pD com Treg (rS=0.122, P=0.254 e rS=0,056, P=0.602, respectivamente) e Th-17 perif?ricas (rS=-0.083, P=0.438 e rS=-0.060, P=0,575, respectivamente). N?o se observou associa??o entre percentual de c?lulas Treg e Th-17 e presen?a de eros?es (P=0.831 e P=0.632, respectivamente). A concentra??o de IL-6, mas n?o de outras citocinas, se correlacionou ao DAS28 (rs 0.31 IC95% 0.07 a 0.52), VSG (rs 0.43 IC95% 0.19 a 0.62) e contagem de articula??es edemaciadas (rs 0.39 95%CI 0.15 a 0.59), bem como com escore 10 pD (rs 0.33 IC95% 0.07 a 0.56), capta??o de pD em punhos direito e esquerdo (rs 0.34 IC95% 0.11 a 0.54 e rs 0.45 IC95% 0.21 a 0.64, respectivamente) e PS em punhos direito e esquerdo (rs 0.40 IC95% 0.20 a 0.59 e rs 0.35 IC95% 0.08 a 0.57, respectivamente). Utilizando-se modelo de regress?o linear m?ltipla, observou-se que o escore 10 pD foi positivamente associado a IL-6 independente de DAS28 (P=0.025). N?o houve associa??o entre nenhuma das citocinas testadas e a presen?a de eros?es ?sseas (P? 0.17 para todos os testes). Conclus?es: Em pacientes com AR estabelecida sob uso de remissivos sint?ticos, observamos: aus?ncia de associa??o de escore 10 PS e pD com DAS28 e HAQ; associa??o entre escore 10 PS e pD e eros?es ?sseas; associa??o de contagem de articula??es edemaciadas, mas n?o de articula??es dolorosas, com sinovite e eros?es no US; aus?ncia de associa??o entre achados de US e linf?citos Treg e Th-17 no sangue perif?rico; associa??o entre IL-6 plasm?tica e achados de sinovite no US. A associa??o entre IL-6 e escore pD ocorreu independente do DAS28.
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Altera??es fenotipicas e transcricionais em linf?citos T de uma popula??o idosa em risco imune no sul do BrasilOrnaghi, Ana Paula Maciel 27 March 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-03-27 / The elderly population, characterized as people over 60 years old, has grown rapidly in recent years in Brazil, and with this increase in life expectancy, age-related changes appear, for example, immunosenescence. Some studies have shown that there are differences in the immunological profile of the elderly, often related to the numbers of T cells. The immune risk profile (IRP) has been defined as CD4/CD8 T-cell ratio <1 and positivity for serum anti-cytomegalovirus (CMV) antibodies. In this study, we investigated patterns of activation and differentiation of T lymphocytes by flow cytometry in an elderly population in IRP, compared with elderly people without risk profile (non-IRP), seeking to identify additional markers for this risk profile immune. For this study we recruited 60 elderly SUS patients in Porto Alegre, aged 60 years, 30 IRP and 30 non-IRP. Lymphocytes were isolated and stimulated in vitro to evaluate the production of cytokines and the expression of transcription factors. The subpopulations of T lymphocytes found were consistent with previous studies in which IRP patients had fewer naive and central memory T cells, as well as an increase was observed in the percentage of T cells CD8 + CD28-T cells and CD8 + PD-1 + in the IRP individuals. Furthermore, there was a reduction in mean fluorescence intensity (MFI) of transcription factors to canonical subtypes of T cell help (CD4 +) in IRP patients when compared to patients without IRP. The percentages of the different subtypes (TH1, TH2, TH17; Treg) of these cells were not different between the two groups. After stimulation with anti-CD3/anti-CD28 antibodies in culture for 24 hours, the concentration of cytokines in culture supernatants increased, but no significant differences between the two groups were found, except for IL-10, which was higher in IRP patients before stimulation. These results suggested that transcriptional mechanisms important in the differentiation of helper T cells are altered in IRP patients, which may affect the immune response of these individuals. / A popula??o de idosos, caracterizada como pessoas com mais de 60 anos, vem aumentando muito nos ?ltimos anos no Brasil, e com esse aumento da expectativa de vida surgem altera??es relacionadas com a idade, por exemplo, a imunossenesc?ncia. Alguns estudos t?m demonstrado que existem diferen?as no perfil imunol?gico dos idosos, frequentemente relacionadas ao n?mero de c?lulas T. O perfil de risco imune (IRP) tem sido definido como taxa de c?lulas T CD4/CD8<1 e soro positividade para citomegalov?rus (CMV). Neste estudo, n?s investigamos padr?es de ativa??o e diferencia??o de linf?citos T, por citometria de fluxo, em uma popula??o idosa IRP, comparando com a popula??o idosa sem perfil de risco (n?o-IRP), buscando identificar marcadores adicionais para esse perfil de risco imune. Foram recrutados para esse estudo 60 idosos da rede SUS (sistema ?nico de sa?de) de Porto Alegre, com idade superior a 60 anos, sendo 30 IRP e 30 n?o-IRP. Linf?citos foram isolados e estimulados in vitro para avaliar a produ??o de citocinas e a express?o de fatores de transcri??o. As subpopula??es de linf?citos T encontradas foram condizentes com estudos anteriores em que os pacientes IRP possu?am menos c?lulas T naive e de mem?ria central, assim como foi observado um aumento nas porcentagens das c?lulas T CD8+CD28- e das c?lulas T CD8+PD-1+. Al?m disso, foi observada uma redu??o na m?dia de intensidade de fluoresc?ncia (MFI) dos fatores de transcri??o can?nicos para subtipos de c?lulas T de ajuda (CD4+) em pacientes IRP quando comparados com pacientes n?o-IRP. As porcentagens dos diferentes subtipos (TH1; TH2; TH17; Treg) dessas c?lulas n?o foram diferentes entre os dois grupos. Ap?s estimula??o com anticorpos anti-CD3/anti-CD28 em cultura por 24h, a concentra??o de citocinas no sobrenadante das culturas aumentou, mas n?o houve diferen?a significativa entre os dois grupos em rela??o ? concentra??o das citocinas em geral, exceto na IL-10 antes da estimula??o, que foi maior em pacientes IRP. Esses resultados sugerem que mecanismos transcricionais importantes para a diferencia??o de c?lulas T de ajuda est?o alterados em pacientes IRP, o que pode afetar a resposta imune desses indiv?duos.
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Associa??o de resist?ncia a glicocortic?ides e prolifera??o espont?nea em linf?citos de pacientes infectados com HTLV-I/IILopes, Rodrigo Pestana 12 June 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-06-12 / Introdu??o e Objetivos: As infec??es por HTLV-I/II se caracterizam pelo tropismo viral por infectar c?lulas T humanas e promover um estado de prolifera??o espont?nea deste tipo celular. Leucemia e doen?as inflamat?rias graves, com destaque para as doen?as neurol?gicas, est?o fortemente associadas ?s infec??es por HTLV-I/II e o tratamento usual destas patologias envolve a administra??o de antiinflamat?rios da classe dos glicocortic?ides. Embora haja relatos de resist?ncia farmacol?gica ? terapia com glicocortic?ides, n?o se sabe ao certo se essa condi??o se deve ? infec??o viral ou ao hospedeiro. Neste estudo, avaliou-se a rela??o entre prolifera??o celular espont?nea e sensibilidade de linf?citos T aos efeitos dos glicocortic?ides (dexametasona - DEX). Materiais e M?todos: C?lulas mononucleares de sangue perif?rico foram isoladas de pacientes assintom?ticos e livres de tratamento, com infec??o por HTLV-I (n=18) e HTLV-II (n=10), e foram cultivadas na presen?a e na aus?ncia do mit?geno fitohemaglutinina (PHA 1%). C?lulas foram tamb?m cultivadas com PHA 1% e concentra??es variadas de DEX (10-9 a 10-4 M). Para fins comparativos, as mesmas avalia??es foram realizadas em sujeitos saud?veis (Controle, n=11). Resultados e Discuss?o: Os pacientes com HTLV-I/II apresentaram taxas similares de prolifera??o estimulada (PHA 1%) e n?o-estimulada (PHA 0%), bem como sensibilidade compar?vel ? DEX. N?o houve diferen?a na freq??ncia de indiv?duos resistentes versus sens?veis ? DEX entre os grupos HTLV-I e HTLV-II. Entretanto, linf?citos T de pacientes com prolifera??o espont?nea n?o responderam ao est?mulo mitog?nico por PHA e foram mais resistentes ? modula??o por DEX do que as c?lulas de pacientes com prolifera??o normal. Os resultados aqui apresentados sugerem que a baixa resposta cl?nica ? terapia com glicocortic?ides pode estar associada a um estado de prolifera??o celular espont?nea decorrente da infec??o por HTLV.
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Imunossenesc?ncia em mulheres com c?ncer de mama expostas a maus tratos na inf?nciaTrintinaglia, Lauren 07 March 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-03-07 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Introduction: Individuals who have experienced childhood maltreatment (CM) present a higher sensitive profile to stress. This profile have been associated with dysregulation of the immune system, characterized by reactivation of herpesvirus and increased cellular senescence markers. New traumatic or stressful experiences, such as breast cancer diagnosis, in those sensitized individuals can trigger an increase in stress levels possibly leading to important immunological changes. Here we investigate the presence of immunosenescence markers in women newly diagnosed with breast cancer with and without history of CM. Methods: Twenty-nine women newly diagnosed with breast cancer, without start the treatment, were recruited. Fifteen with history of CM (CM+) and fourteen without history of CM (CM-). Twenty-seven women without breast cancer and CM were selected as the control group. Peripheral blood was assessed by lymphocyte subsets by flow cytometry (B cells, CD4+, CD8+, NK cells, activated T cell, regulatory T cell, early and intermediated T cell, senescent and exhaustion T cells. CMV serology was determinate by ELISA method. Results: The groups CM+ and CM- present similar cancer stage and family history of breast cancer. In peripheral lymphocyte subpopulations we found significantly reduced Early-differentiated T cell (p <0.0001), while intermediate-differentiated T cell (p<0.0001), senescence T cell (p<0.0001) and exhaustion t cells (p<0.0001) were increased in CM+ and CM? patients. The mean fluorescent intensity (MFI) was analyzed and the CD27 expression on CD4 T cells was found lower in controls as compared to CM+ and CM? groups (p = 0.002).There was no difference of CMV IgG levels between CM + and CM? groups (p=0.24), but between controls and CM groups, this association becomes significant (p= 0.008) . Conclusion: Our findings suggest that the presence of CM is not directly related with immunosenescence in women newly diagnosed with breast cancer. However, when evaluated women with breast cancer and healthy controls, this senescent profile is evident. Future longitudinal studies are necessary to explore the role of senescent cells in the disease progression and treatment response. / Introdu??o: Indiv?duos que foram expostos a maus tratos na inf?ncia apresentam um perfil de sensibilidade ao estresse mais acentuado, quando comparado a aqueles que cresceram em um ambiente adequado. Esse perfil est? relacionado com a desregula??o do sistema imunol?gico, sendo caracterizado pela presen?a de um aumento de marcadores de senesc?ncia celular e reativa??es de infec??es virais latentes. O acontecimento de novas experi?ncias traum?ticas, como o diagn?stico do c?ncer de mama, pode acarretar em um aumento dos n?veis relacionados ao estresse, provocando altera??es imunol?gicas importantes. Nesse estudo n?s investigamos a presen?a de marcadores de imunossenesc?ncia em mulheres rec?m diagnosticadas com c?ncer de mama com ou sem hist?rico de c?ncer de mama. M?todos: Vinte e nove pacientes rec?m diagnosticadas com c?ncer de mama foram recrutadas para esse estudo, sendo que quinze mulheres reportaram presen?a de maus tratos na inf?ncia (CM+), enquanto quatorze n?o vivenciaram situa??es envolvendo abuso ou neglig?ncia nesse mesmo per?odo (CM-). Para compor o grupo controle, foram selecionadas vinte e sete mulheres sem c?ncer de mama e que negaram a presen?a de maus tratos. Os linf?citos foram isolados das c?lulas mononucleares do sangue perif?rico (PBMCs), e imunofenotipados por citometria de fluxo para investigar a presen?a dos seguintes subgrupos: c?lulas B, CD4+, CD8+, c?lulas NK, c?lulas T ativadas, c?lulas T reguladoras, c?lulas T rec?m diferenciadas, c?lulas T intermedi?rias, c?lulas T senescentes e com perfil de exaust?o. A sorologia IgG para citomegalov?rus (CMV) foi realizada atrav?s do m?todo ELISA. Resultados: Os grupos CM+ e CM- n?o apresentaram diferen?as significativas em rela??o ao estadiamento da doen?a ou hist?rico familiar. Nas subpopula??es de linf?citos encontramos uma redu??o significativa de c?lulas T rec?m diferenciadas (p <0.0001), nos grupos CM+ e CM-, enquanto c?lulas T intermedi?rias (p <0.0001), senescentes (p <0.0001) e de exaust?o (p <0.0001) apresentaram-se aumentadas nos mesmos grupos. Ao analisar a m?dia da intensidade de fluoresc?ncia (MFI) encontramos uma express?o diminu?da de CD27 em c?lulas T CD4 nos controles quando comparado as mulheres com c?ncer de mama expostas e n?o expostas a maus tratos (p = 0.002). N?o observamos diferen?as entre os grupos CM+ e CM- em rela??o a sorologia IgG para citomegalov?rus entre os grupos CM + e CM - (p=0.24), entretanto foi presenciado entre os controles e indiv?duos com maus tratos (p= 0.008). Conclus?o: nossos achados sugerem que a presen?a de maus tratos n?o est? diretamente associada com um perfil de imunossenesc?ncia em mulheres rec?m diagnosticada com c?ncer de mama. Entretanto, quando avaliamos mulheres com c?ncer de mama e indiv?duos saud?veis esse perfil senescente torna-se evidente. Logo, torna-se necess?rio a realiza??o de novos estudos para explorar o impacto da presen?a de marcadores de senesc?ncia no tratamento e progn?stico do c?ncer de mama.
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Influ?ncia do tempo e dose de heparina em modelo de peritonite agudaArimat?ia, Dayse Santos 05 August 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-08-05 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / In the last years, heparin has become target of many studies related to
inflammation due its ability of biding to proteins involved on immune response.
Recently, it was demonstrated, at our laboratory, using a thIoglycollate-induced
peritonitis model, heparin s capacity of reduce cellular influx into the peritoneal cavity,
3 hours after the inflammatory stimulus. Once neutrophilic infiltration is highest
around 8 hours after the inflammatory stimulus, at the present work, using the same
peritonitis model, it was assessed heparin s ability of keeping the interference on
leukocyte infiltration, 8 hours after inflammation induction. Moreover, using cellular
differential count, it was evaluated how the cellular populations involved in the
inflammatory process would be affected by the treatment. Eight hours after the
inflammatory stimulus, only heparin dosage of 1 μg/Kg was able to reduce the
cellular influx to peritoneum, 62.8% of reduction when compared to positive control (p
< 0.001). Furthermore, heparin dosage of 15 μg/Kg presented a pro-inflammatory
effect in whole blood verified by the increase of 60.9% (p < 0.001) and 117.8% (p <
0.001) on neutrophils and monocytes proportion, respectively, when compared to
positive control. In addition, this dosage also presented a neutrophilic proportion on
peritoneal fluid 27.3% higher than positive control (p < 0.05). This duality between
anti- and pro-inflammatory effects at different times corroborates studies that attribute
a pleiotropic immunomodulator role to heparin. / Nos ?ltimos anos, a heparina vem sendo alvo de v?rios estudos relacionados
? inflama??o, devido sua capacidade de se ligar a diversas prote?nas envolvidas
com a resposta imune. Recentemente, em nosso laborat?rio, foi demonstrada, em
modelo de peritonite induzida por tioglicolato, a capacidade da heparina em reduzir o
influxo celular ? cavidade peritoneal, 3 horas ap?s o est?mulo inflamat?rio. No
presente trabalho, utilizando o mesmo modelo, foi avaliada a capacidade da
heparina em interferir na infiltra??o leucocit?ria ap?s 8 horas da indu??o da
inflama??o, momento em que a infiltra??o neutrof?lica ? m?xima. Utilizando
contagem diferencial celular, avaliou-se a influ?ncia da heparina sobre as
popula??es celulares envolvidas na inflama??o. Oito horas ap?s o est?mulo
inflamat?rio, apenas a dosagem de heparina de 1 μg/Kg, manteve a capacidade de
interferir na migra??o leucocit?ria, apresentando 62,8% de diminui??o (p < 0,001) no
influxo celular, quando comparada ao controle positivo. Enquanto para a dosagem
de heparina de 15 μg/Kg foi observado efeito pr?-inflamat?rio no sangue total
verificado pelos aumentos de 60,9% (p < 0,001) e 117,8% (p < 0,001) na propor??o
de neutr?filos e mon?citos, respectivamente, em compara??o ao controle positivo.
Al?m disso, essa dosagem tamb?m apresentou propor??o neutrof?lica no l?quido
peritoneal 27,3% maior que o controle positivo (p < 0,05). Essa dualidade entre
efeitos anti- e pr?-inflamat?rio nos diferentes tempos e doses analisados corroboram
dados da literatura que atribuem ? heparina um papel como imunomodulador
pleiotr?pico.
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Efeitos de um extrato aquoso de porangaba (Cordia salicifolia) na marca??o de constituintes sangu?neos com tecn?cio-99m e na morfologia de hem?ciasFrydman, Jacques Natan Grinapel 30 September 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-09-30 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Effects of a Cordia salicifolia (porangaba) extract on the labeling of blood cells (BCs) with technetium-99m ((99m)Tc) and on the morphology of red BCs were evaluated. Labeling of cellular and molecular structures with (99m)Tc depends on a reducing agent. Some physical characteristics, as visible absorbance spectrum, electric conductivity, and refractive index of this porangaba extract, were also determined. Blood samples from Wistar rats were incubated with porangaba extract or with 0.9% NaCl (control). Labeling of blood constituents with (99m)Tc was performed. Plasma (P) and BCs, both soluble (SF-P and SF-BC) and insoluble (IF-P and IF-BC) fractions, were separated. The radioactivity in each fraction was counted, and the percentage of radioactivity incorporated (%ATI) was calculated. Blood smears were prepared, fixed, and stained, and the morphology of the red BCs was evaluated. Data showed an absorbance peak at 480 nm and electric conductibility and refractive index concentration-dependent. Porangaba extract decreased significantly (P < .05) the BC, IF-P, and IF-BC %ATI, and no modifications were verified on the shape of red BCs. Analysis of the results reveals that some physical parameters could be useful to aid in characterizing the extract studied. Moreover, it is possible that chemical compounds of this extract could have chelating/redox actions or be capable of binding to plasma and/or cellular proteins / Extratos aquosos de Cordia salicifolia (porangaba) t?m sido utilizados popularmente para tratamento de diversas doen?as. O uso de radionucl?deos com finalidades diagn?sticas e terap?uticas tem contribu?do para avan?os em Ci?ncias da Sa?de. Radiof?rmacos marcados com tecn?cio-99m (99mTc) tem possibilitado a obten??o de imagens diagn?sticas em Medicina Nuclear. Tem sido descrito que f?rmacos sint?ticos e extratos de plantas medicinais podem interferir na marca??o de constituintes sangu?neos com 99mTc. Este estudo teve como objetivos a obten??o de um extrato aquoso de porangaba (ExPo) com a realiza??o de controles de reprodutibilidade de preparo do mesmo e avalia??o de seu efeito in vitro na marca??o de constituintes sangu?neos com 99mTc e na morfologia de hem?cias de ratos Wistar. Foram determinadas algumas caracter?sticas f?sicas, como o espectro de absorb?ncia, condutividade el?trica e ?ndice de refra??o do ExPo. Amostras de sangue de ratos Wistar foram incubadas com ExPo ou NaCl 0,9% (grupo controle) e a marca??o de constituintes sangu?neos com 99mTc foi realizada. Fra??es sol?vel (FS) e insol?vel (FI) de plasma (P) e c?lulas sangu?neas (CS) foram separadas. A radioatividade em cada fra??o foi contada e a porcentagem de radioatividade incorporada (%ATI) foi calculada. Distens?es sangu?neas foram preparadas, fixadas, coradas e a morfologia de c?lulas sangu?neas foi avaliada. Dados mostraram um m?ximo de absorb?ncia em 480nm e uma condutividade el?trica e ?ndice de refra??o dependente da concentra??o do extrato. O ExPo diminuiu significativamente (p<0,05) a %ATI em CS, FI-P e FI-CS e nenhuma modifica??o foi verificada na forma das c?lulas vermelhas do sangue. A an?lise dos resultados sugere que alguns par?metros f?sicos podem ser ?teis na caracteriza??o do extrato estudado. Al?m disso, compostos qu?micos presentes no extrato poderiam ter a??es quelante, redox ou serem capazes de se ligar a prote?nas plasm?ticas ou celulares. xi Esse estudo ? uma pesquisa experimental com car?ter multidisciplinar. Foi desenvolvido em colabora??o com diferentes Departamentos da Universidade do Estado do Rio de Janeiro e Servi?os da ?rea Biom?dica do Hospital Universit?rio Pedro Ernesto, UERJ, atestando o car?ter multidisciplinar da pesquisa
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Efeitos de uma sess?o de exerc?cio f?sico aer?bico em componentes celulares e moleculares relacionados ? resist?ncia a insulina em indiv?duos obesosMatos, Mariana Aguiar de 17 August 2012 (has links)
Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2016-01-04T16:04:23Z
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Previous issue date: 2012 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do estado de Minas Gerais (FAPEMIG) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (Capes) / A maior quantidade de ?cidos graxos livres e de citocinas pr?-inflamat?rias plasm?tica presentes na obesidade, podem desencadear a resist?ncia a insulina, dentre outros fatores, pela fosforila??o inibit?ria do substrato do receptor de insulina 1 (IRS-1), via ativa??o de quinases relacionadas ao estresse, como a quinase C-jun N-terminal (JNK). Em obesos, a resist?ncia a insulina correlaciona-se com altera??es do sistema imune, e com a baixa express?o da prote?na de choque t?rmico de 72kDa (Hsp72) e aumento da ativa??o da JNK no m?sculo esquel?tico. Considerando que o exerc?cio f?sico aer?bico promove melhora da sensibilidade a insulina e tem um efeito anti-inflamat?rio. O objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos de uma sess?o de exerc?cio f?sico aer?bico na express?o da HSP70, ativa??o da JNK e fosforila??o do IRS-1 no res?duo de serina 612 (IRS-1 ser612) no m?sculo esquel?tico de obesos. Al?m disso, foi avaliada a frequ?ncia dos linf?citos T auxiliares (CD4+) e citol?ticos (CD8+) e das subpopula??es de mon?citos cl?ssicos (CD14++CD16-), intermedi?rios (CD14++CD16+) e n?o cl?ssicos (CD14+CD16++). Os participantes do estudo (n=27) foram alocados em tr?s grupos experimentais (eutr?ficos sens?veis a insulina, obesos sens?veis a insulina, obesos resistentes a insulina) de acordo com a classifica??o do estado nutricional, de acordo com o ?ndice de massa corporal e presen?a ou n?o de resist?ncia a insulina, definida pelo modelo de avalia??o da homeostase (HOMA1-IR). Amostras de sangue venoso e do m?sculo vasto lateral foram obtidas antes e ap?s uma sess?o de exerc?cio f?sico aer?bico realizado a 60% do VO2pico,em cicloerg?metro, com dura??o de 60 minutos. Para avaliar a frequ?ncia das diferentes popula??es de mon?citos e linf?citos T circulantes utilizou-se a citometria de fluxo. As an?lises da express?o da HSP70, ativa??o da JNK e fosforila??o do IRS-1 ser612 no m?sculo esquel?tico foram feitas pelo procedimento de western blot. Nossos resultados demonstraram que obesos resistentes a insulina apresentam uma maior frequ?ncia de mon?citos intermedi?rios e maior fosforila??o do IRS-1 ser612 comparado aos eutr?ficos, maior ativa??o da JNK e menor express?o da HSP70 em rela??o aos demais grupos. Ap?s 1 hora do t?rmino da sess?o de exerc?cio aer?bico houve redu??o da frequ?ncia dos mon?citos intermedi?rios (CD14++CD16+) e dos linf?citos auxiliares (TCD4+) circulantes. Adicionalmente, a sess?o de exerc?cio induziu no m?sculo esquel?tico maior express?o da HSP70, redu??o da fosforila??o do IRS-1 ser612 nos grupos de indiv?duos obesos e menor atividade da JNK nos obesos resistentes a insulina. Conclui-se que uma sess?o de exerc?cio aer?bico promove altera??es que caracterizam redu??o da inflama??o e/ou estresse celular, que podem contribuir para a modula??o da sensibilidade a insulina promovida pelo exerc?cio f?sico. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa Multic?ntrico de P?s-gradua??o em Ci?ncias Fisiol?gicas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2012. / ABSTRACT
The great amount of free fatty acids and proinflammatory cytokines present in obese individuals may trigger insulin resistance, through the inhibitory phosphorylation of insulin receptor substrate 1 (IRS-1), via activation of kinases related to stress, such as kinase C-Jun N-terminal (JNK). In obese individuals, insulin resistance correlates with alterations of the immune system and lower expression of the heat shock protein of 72kDa (Hsp72) and increased activation of JNK in skeletal muscle. Considering that aerobic exercise improve insulin sensitivity and has an anti-inflammatory effect, the purpose of this study was to evaluate the effects of a bout of aerobic exercise in the expression of HSP70, activation of JNK and phosphorylation of IRS-1 in serine residue 612 (IRS-1 ser612) in skeletal muscle of obese patients. Furthermore, we assessed the frequency of helper T lymphocytes (CD4 +) and cytolytic (CD8 +) and subpopulations of classical (CD14 + + CD16-), intermediate (CD14 + + CD16 +) and non-classical (CD14 + CD16 + +) monocytes. Study participants (n = 27) were divided into three experimental groups (eutrophic sensitive to insulin, insulin-sensitive obese, insulin-resistant obese) according to the classification of nutritional status, according to the body mass index, and the presence or absence of insulin resistance, defined by the
homeostasis assessment model (HOMA1-IR). Venous blood and vastus lateralis samples were obtained before and after a bout of aerobic exercise performed at 60% of VO2peak on a cycle ergometer, lasting 60 minutes. To assess the frequency of the different populations of monocytes and T lymphocytes circulating we used flow cytometry. Analyses of of HSP70 expression, JNK activation and IRS-1 phosphorylation of ser612 in skeletal muscle were performed by western blot. Our results showed that obese insulin resistant subjects have an increased frequency of intermediate monocytes and higher phosphorylation of IRS-1 ser612 compared to normal weight individuals, and greater activation of JNK and lower expression of HSP70 than the other two groups. 1 hour after the exercise bout, we observed reductions on the frequency of intermediate circulating monocytes (CD14 + + CD16 +) and helper cells (CD4 +). Additionally, the exercise bout induced in the skeletal muscle higher expression of HSP70, decreased phosphorylation of IRS-1 ser612 in the obese groups and lower activity of JNK in the obese insulin resistant individuals. It is concluded that a bout of aerobic exercise promotes changes that characterize reduction of inflammation and / or cellular stress, which may contribute to the modulation of insulin sensitivity promoted by exercise.
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Avalia??o imunoistoqu?mica de CD34 e triptase em cistos odontog?nicos radiculares e cistos dent?geros inflamadosCosta Neto, Hugo 22 February 2016 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-07-11T17:13:30Z
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HugoCostaNeto_DISSERT.pdf: 13162279 bytes, checksum: 29adac7972f3d85035eb3c3d51febbdb (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-07-14T21:07:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2016-02-22 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / Dentre os cistos odontog?nicos comumente encontrados na pr?tica cl?nica odontol?gica, os cistos radiculares (CRs) e os cistos dent?geros (CDs) representam conjuntamente os mais frequentes cistos dos ossos gn?ticos. Os cistos odontog?nicos possuem origem inflamat?ria ou de desenvolvimento. No entanto, altera??es inflamat?rias secund?rias podem ser vistas nos ?ltimos. Alguns estudos t?m identificado os mast?citos nessas les?es c?sticas e sua poss?vel rela??o com a angiog?nese. Nesta perspectiva, a presente pesquisa objetivou avaliar e comparar a express?o imunoistoqu?mica do CD34 e da triptase em CDs inflamados e CRs e verificar se os mast?citos influenciam na angiog?nese destas les?es. Para tanto, foram selecionados 20 casos de CDs inflamados e 20 casos de CRs para serem submetidos ? an?lise morfol?gica e imunoistoqu?mica. A imunomarca??o de cada caso foi avaliada de forma quantitativa. Ap?s a identifica??o das ?reas de maior imunorreatividade, foram analisadas a densidade microvascular (DMV), a ?rea microvascular (AMV) e o per?metro microvascular (PMV) mensurados atrav?s da imunoexpress?o do CD34 e a densidade dos mast?citos (DMC) mensurada por meio da imunoexpress?o da triptase, realizadas nas mesmas ?reas dos consecutivos campos representativos de cada caso. A an?lise estat?stica foi realizada atrav?s dos testes de Mann-Whitney, Qui-quadrado de Pearson, Exato de Fisher e Correla??o de Spearman (r), com n?vel de signific?ncia estabelecido em 5% (p < 0,05). Os resultados demonstram diferen?as estatisticamente significativas entre as les?es c?sticas supracitadas em rela??o ? avalia??o da DMC (p < 0,001). Al?m disso, a an?lise da DMV revelou diferen?as estatisticamente significativas entre as les?es c?sticas (p = 0,007) e tamb?m no que se refere ? intensidade do infiltrado inflamat?rio (p = 0,021). Por fim, observou-se nos casos de CDs inflamados, moderada correla??o positiva entre a DMC e a AMV (r = 0,660; p = 0,002), assim como moderada correla??o positiva entre a DMC e o PMV (r = 0,634; p = 0,003). Face ao exposto, pode-se concluir que os mast?citos participam em diferentes etapas da angiog?nese associada ? inflama??o dos CRs e CDs.
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