Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-07-11T17:13:29Z No. of bitstreams: 1 RodrigoPorpinoMafra_DISSERT.pdf: 2938922 bytes, checksum: c44070e8d06f2305cff5199e620a1c1c (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-07-15T20:45:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RodrigoPorpinoMafra_DISSERT.pdf: 2938922 bytes, checksum: c44070e8d06f2305cff5199e620a1c1c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-15T20:45:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RodrigoPorpinoMafra_DISSERT.pdf: 2938922 bytes, checksum: c44070e8d06f2305cff5199e620a1c1c (MD5) Previous issue date: 2016-02-16 / O carcinoma epiderm?ide de l?ngua oral (CELO) apresenta um comportamento biol?gico agressivo, com elevada propens?o ao desenvolvimento de met?stases nodais. Nesse contexto, a linfangiog?nese ? considerada um fen?meno importante para a dissemina??o das c?lulas tumorais e pode sofrer influ?ncia de est?mulos do microambiente. Os mast?citos t?m sido relacionados ? progress?o de neoplasias malignas, no entanto o seu papel na forma??o de vasos linf?ticos ainda n?o est? bem estabelecido. O prop?sito desta pesquisa foi avaliar poss?veis correla??es entre a densidade linf?tica, a contagem de mast?citos e o perfil clinicopatol?gico em casos de CELO, incluindo o estadiamento cl?nico TNM, a grada??o histol?gica de malignidade (Bryne, 1998) e a presen?a/aus?ncia de met?stases nodais. A amostra foi constitu?da por 50 casos de CELO, dos quais 26 apresentavam met?stase nodal, e os 24 restantes eram isentos de met?stases. A densidade linf?tica foi estabelecida como a m?dia de vasos linf?ticos imunomarcados pelo anticorpo anti-podoplanina (D2-40), identificados em cinco campos microsc?picos (200x). Para a an?lise dos mast?citos, foram quantificadas as c?lulas imunorreativas ao anticorpo anti-triptase, em cinco campos (400x). Destaca-se que ambas as imunomarca??es foram analisadas no centro tumoral e no front de invas?o. A densidade linf?tica intratumoral (DLI) foi superior nos casos em est?gios cl?nicos avan?ados (III-IV), quando comparados ?queles em est?gios iniciais (I-II), assim como nos casos metast?ticos em rela??o aos n?o-metast?ticos (p<0,05). N?o houve diferen?as estatisticamente significativas entre os casos de baixo grau e alto grau de malignidade no tocante ? DLI (p>0,05). De outro modo, a densidade linf?tica peritumoral (DLP) e as contagens de mast?citos n?o demonstraram rela??es significativas com nenhum dos par?metros clinicopatol?gicos avaliados (p>0,05). Tamb?m n?o foram encontradas correla??es significativas entre as densidades linf?ticas e as contagens de mast?citos, seja na regi?o intratumoral (r = -0,004; p=0,977) ou na peritumoral (r = -0,154; p=0,285). Os resultados do presente estudo sugerem que os vasos linf?ticos intratumorais contribuem na progress?o do CELO. Por sua vez, a DLP pode n?o ser suficiente para justificar diferen?as no comportamento biol?gico do CELO, o que sustenta a hip?tese de envolvimento de outros mecanismos na dissemina??o metast?tica das c?lulas malignas, que complementariam os efeitos da linfangiog?nese. Os mast?citos, ainda que realizem diversas fun??es pr?- e antitumorais, parecem n?o influenciar diretamente o potencial de agressividade do CELO. Adicionalmente, ? poss?vel que a quantidade destas c?lulas n?o seja um fator determinante para a forma??o de vasos linf?ticos. / Oral tongue squamous cell carcinoma (OTSCC) has an aggressive biological behavior, with a high propensity for the development of lymph node metastases. In this context, lymphangiogenesis is considered an important phenomenon for the spread of tumor cells and may be influenced by microenvironmental stimuli. Mast cells have been implicated in tumor progression, although their influence in the formation of lymphatic vessels is not well established. The aim of this study was to analyze, in a case series of OTSCC (n=50), possible correlations between lymphatic vessel density (LVD), mast cell count and clinicopathological features, including tumor-node-metastasis (TNM) stage, histological grade of malignancy (Bryne, 1998), and nodal metastasis. LVD was established as the mean number of lymphatic vessels immunostained by anti-podoplanin (D2-40) antibody, identified in five microscopic fields (200x). For the analysis of mast cells, tryptase-immunoreactive cells were quantified in five fields (400x). Both immunostainings were analyzed in the tumor center and invasion front. Intratumoral lymphatic density (ILD) was higher in cases in advanced clinical stages (III-IV), compared to those in initial stages (I-II), as well as in metastatic cases in respect of non-metastatic (p<0,05). There were no statistically significant differences between low-grade and high-grade malignancy cases with respect to ILD (p>0,05). Peritumoral lymphatic density (PLD) and mast cell counts showed no significant relations with any of the clinicopathological parameters evaluated (p>0,05). Also there were no significant correlations between LVD and mast cell counts, whether in intratumoral (r = -0,004; p=0,977) or peritumoral region (r = -0,154; p=0,285). The results of the present study suggest that intratumoral lymphatic vessels may contribute in part to the progression of OTSCC, although PLD may be insufficient to justify differences in biological behavior. This supports the hypothesis of involvement of other mechanisms in metastatic spread of malignant cells, which could complement the effects of lymphangiogenesis. Although mast cells perform several pro- and antitumoral functions, they do not appear to directly influence aggressiveness of OTSCC. In addition, the quantity of these cells may not be essential for lymphatic vessel formation.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 425543.pdf: 747447 bytes, checksum: 25a6005ed4d57ac7cb87a5a7d22ed8de (MD5) Previous issue date: 2010-03-31 / O envelhecimento est? associado com o decl?nio progressivo nas fun??es do sistema imunol?gico (imunosenesc?ncia), tanto na imunidade humoral quanto na imunidade mediada por c?lulas, resultando em maior suscetibilidade a infec??es e c?ncer, al?m da diminui??o na capacidade de responder a vacinas. As c?lulas dendr?ticas (DCs) s?o as mais poderosas e eficientes apresentadoras de ant?genos (APC), desempenhando um papel primordial na apresenta??o e conseq?ente resposta imune mediada por c?lulas T. Poucos estudos enfocam a atividade das c?lulas dendr?ticas no envelhecimento, sendo que a maioria dos dados s?o relativos ?s fun??es das c?lulas T. As intera??es entre as c?lulas dendr?ticas e as c?lulas T afetam o processamento e consequente apresenta??o de ant?genos, influenciando a efetividade das respostas imunes mediadas por c?lulas T. Este trabalho teve como objetivo avaliar a capacidade estimulat?ria de c?lulas dendr?ticas de camundongos velhos em uma resposta espec?fica T CD4+ comparada ? resposta imune de camundongos jovens. Para isso, c?lulas T de camundongos transg?nicos TEa, espec?ficas para o complexo Ea:IAb foram transferidas para camundongos normais C57Bl/6, c?lulas T de camundongos jovens para animais velhos e jovens, e c?lulas T de camundongos velhos para animais velhos e jovens. Os resultados demonstram que, ap?s imuniza??o com o ant?geno EaRFP, tanto as c?lulas T jovens quanto as c?lulas T velhas foram estimuladas de modo semelhante por c?lulas dendr?ticas jovens. Contudo, c?lulas dendr?ticas de animais velhos n?o foram capazes de estimular suficientemente as c?lulas T de animais velhos nem mesmo as c?lulas T de animais jovens. Enquanto ambas as c?lulas T, jovens e velhas, adquiriram o fen?tipo CD44+ quando transferidas para os animais jovens, c?lulas T jovens transferidas para animais velhos n?o adquiriram o mesmo fen?tipo. Esse fato sugeriu que c?lulas dendr?ticas de animais velhos possuem baixa capacidade de estimular c?lulas T, mesmo que essas c?lulas venham de um animal jovem. N?s hipotetizamos que esse resultado poderia estar ligado a um n?mero extremamente diminu?do de c?lulas dendr?ticas nos animais velhos, ou ainda em uma defici?ncia em um dos sinais fornecidos pelas c?lulas dendr?ticas no priming de linf?citos T (apresenta??o de ant?geno ou sinais coestimulat?rios). O n?mero total de c?lulas dendr?ticas foi significativamente menor em camundongos velhos comparado a camundongos jovens. Al?m disso, o n?mero de c?lulas apresentando ant?geno foi menor no linfonodo drenante de animais velhos, e a express?o de CD86 por c?lulas dendr?ticas de animais velhos n?o foi diferente da dos animais jovens. Os resultados sugerem que a diminui??o da capacidade de apresenta??o de ant?geno apresentada no envelhecimento ? cr?tica para a perda do potencial estimulat?rio de c?lulas T CD4+ por c?lulas dendr?ticas.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:36:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 321939.pdf: 629614 bytes, checksum: 3a028aa2639bbe16eabae0603dd5e3f1 (MD5) Previous issue date: 2004-06-21 / Perda de fun??o renal ? reconhecidamente uma das complica??es secund?rias ao uso intravascular de radiocontrastes. A membrana celular e os sistemas de transporte s?o poss?veis alvos para a toxicidade destas subst?ncias. O objetivo do presente estudo foi examinar os efeitos de diatrizoato de s?dio (DS), diatrizoato meglumina (DM), um composto de diatrizoatos (CD), e Hypaque-M 76? sobre sistemas espec?ficos de transporte de membrana celular, usando o eritr?cito como modelo. A atividade da bomba de Na+/K+ foi determinada, o n?mero de bombas de Na+/K+ foi verificado, e o transporte celular de L-arginina e colina avaliado em eritr?citos obtidos de indiv?duos saud?veis e de pacientes que sofreram cateterismo card?aco. O influxo de pot?ssio foi 1,50?0,35, 1,32?0,37, 1,28?0,30, e 1,01?0,25 mmol/L cel/h nos grupos controle, DS, DM e CD, respectivamente (P=0,004; CD versus grupo controle). Exposi??o ao radiocontraste composto Hypaque-M 76? durante cateterismo card?aco diminuiu a atividade de bomba de Na+/K+ (1,40?0,36 vs. 1,27?0,40 mmol/L cel/h; P=0,039). O n?mero de bombas de Na+/K+ ativas em presen?a de DS foi diminu?do (156?36 vs. 143?34 bombas/eritr?cito; P=0,015). O transporte de membrana de L-arginina e colina permaneceu inalterado, exceto em concentra??es extracelulares de radiocontrastes muito altas. Estes resultados sugerem que efeitos seletivos sobre a fun??o dos sistemas de transporte de membrana analisados parecem participar do quadro de citotoxicidade que acompanha a insufici?ncia renal aguda induzida pelos radiocontrastes.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 449724.pdf: 6148140 bytes, checksum: 12da4cf8a6d912387d56ee8f32c58f7b (MD5) Previous issue date: 2013-03-27 / The irritant contact dermatitis (ICD) is a non-allergic inflammatory reaction of the skin that occurs independently of the T cells participation. ICD is caused by exposure to low molecular weight chemicals and it is initiated by damage or activation of epidermal cells which trigger the activation of the innate immune system. The purine nucleotide adenosine triphosphate (ATP) is the universal energy molecule and appears as is an important extracellular messenger. In healthy tissues, ATP is almost exclusively localized intracellularly, whereas in pathological conditions as inflammation, the tissue injury leads to the release of large amounts of ATP to the extracellular medium. In the extracellular medium, ATP can be hydrolyzed by nucleotidases to their breakdown products ADP and AMP. These nucleotidases control the availability of nucleotides for purinergic receptors. Currently, experimental observations indicate that extracellular ATP acting via purinergic receptors plays a relevant role on skin inflammation. Several models in vitro and in vivo had been used to study the mechanisms of ICD. However, this pathology is still poor understood. This study aimed to evaluate the involvement of the purinergic receptor P2X7 in ICD using in vivo and in vitro approaches. The croton oil (CrO) is a chemical irritant that has been shown to exert its effects independent of inflammatory T cells, therefore we used the mice model of irritant contact dermatitis induced by CrO to investigate the involvement of P2X7 receptor in the immunes mechanisms of ICD. We use several pharmacological approaches, in vitro and in vivo tests and mice with gene deletion to P2X7 receptor and showed evidences that the P2X7 receptor activation by ATP in macrophages and dendritic cells (DCs) is connected with neutrophil recruitment induced by CrO. Furthermore, we demonstrated that CrO decreased the hydrolysis of ATP and ADP in the serum of mice and caused necrosis of keratinocytes in culture, both effects related to activation of P2X7. Taken together, the data obtained in this study suggested that CrO exerts its toxic effects by promoting keratinocytes necrosis and decreasing the activity of ectonucleotidades leading to an increase of ATP extracellular levels. Then, extracellular ATP promotes the P2X7 receptor activation in DCs and macrophages causing the release of IL-1&#946;, which is partially responsible for the neutrophils recruitment observed in irritant contact dermatitis induced by croton oil. Noteworthy, the treatment with the selective P2X7 receptor antagonist A438079 decreased the edema and others proinflammatory effects induced by croton oil, pointing the P2X7 receptor as an important pharmacological target for the treatment of ICD. / A dermatite de contato irritante (ICD, irritant contact dermatitis) ? uma rea??o inflamat?ria local n?o al?rgica da pele que ocorre independentemente da participa??o de c?lulas T. ? ocasionada pela exposi??o a subst?ncias qu?micas de baixo peso molecular e acredita-se que seja iniciada por dano ou ativa??o de c?lulas epidermais que desencadeiam a ativa??o do sistema imune inato. O nucleot?deo ATP ? uma mol?cula energ?tica que desempenha importantes fun??es como mensageiro extracelular. Em tecidos saud?veis, o ATP est? localizado quase exclusivamente no meio intracelular, entretanto quando ocorre inj?ria tecidual, grandes quantidades de ATP s?o liberadas para o meio extracelular. No meio extracelular, o ATP pode ser hidrolisado por nucleotidases gerando ADP e AMP. As nucleotidases controlam a disponibilidade do ATP para os receptores purin?rgicos. Muitas observa??es experimentais t?m indicado que o ATP atuando via receptores purin?rgicos desempenha um papel preponderante em processos inflamat?rios na pele. V?rios modelos in vitro e in vivo t?m sido utilizados para o estudo da ICD, entretanto a fisiopatologia da doen?a ainda ? pouco conhecida. Este estudo teve como objetivo avaliar o envolvimento do receptor purin?rgico P2X7 (P2X7R) na ICD utilizando abordagens in vivo e in vitro. O ?leo de cr?ton (CrO) ? um irritante qu?mico que tem mostrado exercer seus efeitos inflamat?rios independente de c?lulas T, portanto n?s utilizamos o modelo de dermatite de contato irritante induzida por CrO em camundongos para investigar o envolvimento do receptor P2X7 nos mecanismos imunopatol?gicos da ICD. Atrav?s da utiliza??o de diversas abordagens farmacol?gicas in vitro e in vivo e do uso de camundongos com dele??o g?nica para o receptor P2X7, n?s primeiramente mostramos evid?ncias de que a ativa??o do P2X7R por ATP em macr?fagos e c?lulas dendr?ticas (DCs) est? relacionada com o recrutamento de neutr?filos induzido por CrO. Al?m disso, foi demonstrado que o CrO decresce a hidr?lise de ATP e ADP no soro de camundongos e provoca a necrose de queratin?citos em cultura, ambos os efeitos foram relacionados com a ativa??o do receptor P2X7. Portanto, a partir dos dados obtidos neste estudo, n?s sugerimos que o ?leo de croton exerce seus efeitos t?xicos promovendo a morte celular de queratin?citos, diminuindo a atividade de ectonucleotidades e aumentando os n?veis extracelulares de ATP. O ATP extracelular, via ativa??o de P2X7R em DCs e macr?fagos, provoca a libera??o de IL-1&#946; que ? parcialmente respons?vel pelo recrutamento de neutr?filos observado na dermatite de contato irritante induzida por ?leo de cr?ton. Digno de nota, o tratamento com o antagonista seletivo do receptor P2X7, A438079, diminuiu o edema e outros efeitos pr?-inflamat?rios induzidos pelo ?leo de cr?ton, apontando o receptor P2X7 como um alvo farmacol?gico importante para o desenvolvimento de novas terapias para o tratamento da ICD.

Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2014-12-17T13:10:33Z No. of bitstreams: 2 dirceu_de_souza_melo.pdf: 1243588 bytes, checksum: e609b2371fe339ca91cc379149b3beca (MD5) license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2014-12-17T13:13:48Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dirceu_de_souza_melo.pdf: 1243588 bytes, checksum: e609b2371fe339ca91cc379149b3beca (MD5) license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2014-12-17T13:13:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dirceu_de_souza_melo.pdf: 1243588 bytes, checksum: e609b2371fe339ca91cc379149b3beca (MD5) license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2014-12-17T13:14:26Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dirceu_de_souza_melo.pdf: 1243588 bytes, checksum: e609b2371fe339ca91cc379149b3beca (MD5) license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-17T13:14:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dirceu_de_souza_melo.pdf: 1243588 bytes, checksum: e609b2371fe339ca91cc379149b3beca (MD5) license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Previous issue date: 2013 / Evid?ncias recentes sugerem que a restri??o cal?rica intensa (RCI) (>40%) exerce efeitos ben?ficos sobre o cora??o de ratos. No entanto, a maioria destes estudos avaliaram os efeitos da RCI em cora??es de ratos que iniciaram esta restri??o j? na idade adulta. Neste trabalho, investigamos as conseq??ncias de uma restri??o cal?rica de 50% desde o nascimento sobre a fun??o e morfologia card?aca de ratos adultos e avaliamos os poss?veis mecanismos envolvidos nestas adapta??es. Desde o nascimento at? a idade de 90 dias ratos RC50 tiveram sua alimenta??o restrita a 50% do consumo do grupo ad libitum (AL). Durante o per?odo de 90 dias os animais tiveram sua ingest?o alimentar, peso corporal e press?o arterial monitorados. Ap?s este per?odo, foi realizado um teste de capacidade aer?bica m?xima para avaliar indiretamente a fun??o cardiovascular global. Quarenta e oito horas ap?s este teste os animais foram eutanasiados, o sangue foi coletado para an?lise do hemat?crito, bioqu?mica s?rica e estresse oxidativo e o m?sculo s?leo retirado para an?lise do estresse oxidativo. A t?bia foi retirada para aferi??o do comprimento e f?gado, ba?o, supra-renais, test?culos e gordura viceral removidos para aferi??o do peso. O cora??o foi retirado e o ?ndice de desenvolvimento de tens?o m?xima (+dT/dt) e m?nima (-dT/dt) do mioc?rdio foram analisados pela prepara??o de cora??o isolado. Tamb?m foi realizada an?lise do estresse oxidativo card?aco e o di?metro, n?mero e densidade de cardiomi?citos, assim como os n?veis de fibrose card?aca foram obtidos atrav?s da an?lise histol?gica. Mi?citos ventriculares foram isolados para avalia??o do transiente de Ca2+ em microscopia confocal e os n?veis de fosforila??o da Akt e express?o da SERCA2 foram avaliados pela t?cnica de Western blot. Comparado ao grupo AL, os animais RC50 apresentaram menor peso corporal e de ?rg?os, menor comprimento da t?bia, menor glicemia, maior colesterol HDL, menor press?o arterial, menor estresse oxidativo card?aco, maior desempenho aer?bio e da fun??o card?aca, como mostrado pelo aumento ?dT/dt. Apesar do menor di?metro dos cardiomi?citos, ratos RC50 apresentaram aumento na rela??o cora??o/peso corporal, aumento do n?mero e densidade dos cardiomi?citos, e n?veis semelhantes de fibrose card?aca em compara??o aos animais AL. Os n?veis de fosforila??o da Akt foram superiores nos cardiomi?citos dos animais RC50 e n?o houve diferen?as significativas no transiente de Ca2+ e na express?o de SERCA2 entre os cardiomi?citos dos animais RC50 e AL. Em conjunto, estas observa??es revelaram efeitos positivos de uma RCI de 50% desde o nascimento sobre a fun??o, estrutura card?aca e vias de sinaliza??o da sobreviv?ncia de cardiomi?citos em ratos adultos. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa Multic?ntrico de P?s-gradua??o em Ci?ncias Fisiol?gicas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2013. / ABSTRACT There has been growing evidence suggesting that a severe caloric restriction (SCR) (above 40%) leads to beneficial effects on heart rats. However, most of the reports are focused on the effects of SCR on hearts of rats which started this restriction at adulthood. In this work, we investigated the consequences of a 50% caloric restriction since birth on cardiac morphology and function in adult rats and evaluated the possible mechanisms involved in these adaptations. From birth up to the age of 90 days CR50 rats were fed restricted at 50% of the Ad Libitum group (AL). During the period of 90 days the animals had their food intake, body weight and blood pressure monitored. After this period, a maximal aerobic test was performed in order to indirectly evaluate the global cardiovascular function. Forty-eight hours after this test the animals were euthanized the blood collected for analysis of hematocrit, serum biochemistry and oxidative stress and soleus muscle collected for oxidative stress analysis. The tibia was removed for measurement of length and liver, spleen, adrenals, testes and visceral fat were removed for measurement of weight. The heart was removed and the index of velocity of myocardial contraction (+dT/dt) and relaxation (-dT/dt) was analyzed by isolated heart preparation. We also carried out analysis of cardiac oxidative stress and cardiomyocyte diameter, number, density and myocardium collagen content were obtained through histological analysis. Ventricular myocytes were isolated by standard methods in order to evaluate phosphorylated AKT levels and the expression of SERCA2a was assessed by Western blot. Compared to AL, CR50 animals had lower body and organs weight, lower tibia length, lower blood glucose, higher HDL cholesterol, lower blood pressure, lower oxidative stress in the heart and blood, increased aerobic performance and cardiac function, as shown by increased ? dT/dt. Despite the smaller cardiomyocyte diameter, CR50 rats presented increased heart/body weight ratio, increased cardiomyocyte density and number, and similar levels of myocardium collagen content compared to AL rats. AKT was hyperphosphorylated in cardiomyocytes from CR50 rats and no significant differences in Ca2+ transient and SERCA2 levels were found between cardiomyocytes of CR50 and AL rats. Collectively, these observations revealed beneficial effects of a 50% caloric restriction from birth on cadiac function, structure and signaling pathways for survival of adult rat cardimyocytes.

Submitted by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2016-01-04T17:06:18Z No. of bitstreams: 2 rosalina_tossige_gomes.pdf: 1360296 bytes, checksum: 20d9d22baa3b186a5cd4139e7af933da (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2016-01-04T17:06:52Z (GMT) No. of bitstreams: 2 rosalina_tossige_gomes.pdf: 1360296 bytes, checksum: 20d9d22baa3b186a5cd4139e7af933da (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-04T17:06:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 rosalina_tossige_gomes.pdf: 1360296 bytes, checksum: 20d9d22baa3b186a5cd4139e7af933da (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015 / O exerc?cio intervalado de alta intensidade (HIIE) ? caracterizado por breves e repetidas sess?es de exerc?cio intenso, intercaladas por per?odos de repouso ou exerc?cio de baixa intensidade. ? uma modalidade de exerc?cio que tem ganhado muito destaque nos ?ltimos anos por ser uma modalidade de treinamento de baixo volume, embora pouco se saiba a respeito dos seus efeitos na fun??o imune e no estado redox celular. Assim, este estudo avaliou o efeito de uma sess?o de HIIE sobre o estado redox e a fun??o de linf?citos em homens jovens sedent?rios. Esse trabalho foi dividido em dois estudos. No estudo 1 avaliou-se o efeito do HIIE sobre a prolifera??o e produ??o de citocinas e o estado redox de c?lulas mononucleares do sangue perif?rico (PBMC). No estudo 2 avaliou-se o efeito do HIIE sobre a viabilidade e express?o de marcadores de ativa??o em linf?citos. As sess?es de HIIE foram realizadas em bicicleta ergom?trica, e consistiram em oito s?ries de 1 min a 90-100% de pot?ncia pico, com 75 segundos de recupera??o ativa, a 30W, entre as s?ries. O sangue venoso foi colhido antes, imediatamente ap?s e 30 minutos ap?s a sess?o de HIIE. Para avalia??o da prolifera??o celular, por citometria de fluxo, as PBMC foram coradas com Carboxifluoresce?na Succinimidil Ester (CFSE) (10 ?M) e estimuladas com o superant?geno SEB (100 ng/mL), durante 5 dias a 37? C, 5% de CO2. A produ??o de IL-2 e IFN-? em resposta a estimula??o por SEB durante 18 horas, foi avaliada por ELISA. O estado redox celular foi avaliado pela mensura??o da atividade das enzimas catalase (CAT) e super?xido dismutase (SOD), a concentra??o de subst?ncias que reagem ao ?cido tiobarbit?rico (TBARS) e conte?do de glutationa reduzida (GSH). Para avalia??o da viabilidade celular, por citometria de fluxo, as c?lulas foram marcadas com anticorpos anti-Anexina V FITC e iodeto de prop?deo. Para an?lise da ativa??o dos linf?citos, por citometria de fluxo, as PBMC foram estimuladas com SEB por 18 horas, e em seguida marcadas com anticorpos fluorescentes dirigidos contra CD4, CD8, CD19, CD25 e CD69. Os dados foram analisados utitlizando os testes one-way ou two-way ANOVA, considerando p ? 0,05. O HIIE promoveu redu??o na prolifera??o de linf?citos (p = 0,01), aumento na concentra??o de IL-2 (p = 0,02), e desequil?brio redox nas PBMC, marcado por aumento nas concentra??es de TBARS (p = 0,02) e diminui??o na atividade da CAT (p = 0,04). O HIIE n?o alterou a viabilidade das PBMC, mas a frequ?ncia de c?lulas CD4 e CD19, positivas para os marcadores CD25 e CD69, foi menor ap?s o exerc?cio. Contudo, como foi observada redu??o na frequ?ncia de c?lulas CD4+ e CD19+, a redu??o da frequ?ncia de express?o de marcadores de ativa??o refletiu a redu??o do n?mero de c?lulas, e n?o da resposta ao est?mulo superantig?nico. Nossos resultados mostram portanto, que apesar do HIIE promover desequil?brio redox nas PBMC a resposta dos linf?citos ao est?mulo superantig?nico n?o ? alterada. A redu??o da resposta proliferativa ?, provavelmente, reflexo da altera??o da distribui??o das subpopula??es linfocit?rias em decorr?ncia do HIIE. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa Multic?ntrico de P?s-gradua??o em Ci?ncias Fisiol?gicas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2015. / ABSTRACT High-intensity interval exercise (HIIE) is characterized by brief and repeated intense exercise sessions, interspersed with periods of rest or low intensity exercise. This exercise modality has gained much attention in recent years, although little is known about its effects on immune function and cellular redox state. This study evaluated the effect of HIIE on the redox state and lymphocyte function in sedentary young males. This work was divided in two studies. The firsty study evaluated the effect of HIIE on peripheral blood mononuclear cells (PBMC) proliferation, cytokine production and redox status. The second study evaluated the effect of HIIE on lymphocyte viability and activation markers expression. HIIE was performed on cycloergometer, and consisted of eight series of 1 min at 90-100% of peak power, with 75 seconds of active recovery, at 30W, between sets. Venous blood was collected before, immediately after and 30 minutes after HIIE. For cell proliferation evaluation by flow cytometry, PBMC were stained with Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester (CFSE) (10 mM) and stimulated with the superantigen SEB (100 ng/ml) for 5 days at 37? C, 5% CO2. IL-2 and IFN-? secretion in response to SEB stimulation for 18 hours was assessed by ELISA. The cellular redox status was assessed by measuring the activity of catalase (CAT) and superoxide dismutase (SOD), the concentration of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and reduced glutathione content (GSH). To assess cellular viability, using flow cytometry, cells were labeled with anti-Annexin V-FITC and propidium iodide. To analyze lymphocyte activation, by flow cytometry, PBMC were stimulated with SEB for 18 hours, and then stained with fluorescent antibodies directed against CD4, CD8, CD19, CD25 and CD69. One-way or two-way ANOVA was employed for statistical analyzis, with ? ? 0.05. Lymphocyte proliferation was reduced (p = 0.01) after HIIE, despite increased IL-2 concentration (p = 0.02), and HIIE also induced PBMC redox imbalance characterized by increased TBARS concentration (p = 0.02) and decreased CAT activity (p = 0.04). PBMC viability was not affected by HIIE, but the frequency of CD4+CD25+/CD69+ and CD19+CD25+/CD69+ cells in response to SEB stimulation was lower after exercise. However, as CD4+ and CD19+ frequencies were reduced, reduced activation markers expression was a consequence of cell number reduction. Our results therefore show that, although HIIE induced redox imbalance, lymphocyte response to superantigen stimulation was not affected. Reduced lymphocyte proliferative response after HIIE is probably due to modifications in lymphocyte subpopulations distribution.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JaniceSC.pdf: 2257338 bytes, checksum: 87ae25d4af8c910f8c675e38f8bfe103 (MD5) Previous issue date: 2005-04-08 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Berberine is an alkaloid used as a fluorochrome in the identification of heparin and DNA. Enerback, 1974, described the technique used until today to study granules rich in heparin of vertebrate mast cells. Santos et al., 2003, studied mast cells of the mollusk Anomalocardia brasiliana using biochemical and histological analysis. This work used the fluorescent dye berberine technique to improve characterization of these cells. Mollusk organs (ctenidium and mantle) were processed with routine histological techniques. Tissue sections were treated with berberine 0,02% in redistilled water acidified to pH 4, by the addition of citric acid for 20 minutes. The visualization was made through fluorescence microscopy with ultraviolet region emission. The mast cell fluorescence had a strong yellow color, where cell nuclei appeared more greenish. This result was very similar to the ones reported before. Mast cells are location at the epithelium surface is the same in both organs, mantle and ctenidium. The fluorescence was easily observed in the granules. Therefore, this technique showed to be good and sensitive to study mast cell of invertebrates / A berberina ? um alcal?ide usado como fluorcromo na identifica??o de heparina e DNA. Enerb?ck, em 1974, descreveu a t?cnica at? hoje empregada deste fluorcromo no estudo dos gr?nulos ricos em heparina dos mast?citos de vertebrados. Santos et al., em trabalhos anteriores, utilizando abordagens bioqu?mica e histol?gica, descreveram a presen?a de mast?citos no marisco Anomalocardia brasiliana. Baseado nestes estudos, testamos a t?cnica de fluoresc?ncia com berberina para a caracteriza??o adicional dessas c?lulas. Destarte, mantos e cten?deos dos esp?cimes foram submetidos a t?cnicas rotineiras de fixa??o e inclus?o em parafina. Os cortes histol?gicos foram desparafinados, hidratados e incubados com cloridrato de berberina (0,02%) em ?cido c?trico (1%) por 20 minutos, sendo o excesso retirado com ?cido c?trico (pH 4) por 5 minutos. A visualiza??o das se??es foi feita por microscopia de fluoresc?ncia com emiss?o no espectro ultravioleta. Pudemos evidenciar c?lulas com conte?do citoplasm?tico fluorescente amarelo-brilhante, correspondentes ?quelas descritas anteriormente como mast?citos, localizadas nos epit?lios dos ?rg?os. Algumas esp?cimes, logo ap?s a disseca??o foram submetidas a tratamento com desgranulantes e depois processadas como citado acima. O uso da fluoresc?ncia tornou mais f?cil a delimita??o do conte?do granular destas c?lulas em rela??o ao n?cleo (que emite fluoresc?ncia esverdeada). Sendo assim, a t?cnica apresentada mostrou ser bastante sens?vel e promissora para o estudo dos mast?citos de invertebrados

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:14:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 IramiAF.pdf: 222778 bytes, checksum: 19ba0c4bd484b69016b906c3ab34fc7f (MD5) Previous issue date: 2005-10-27 / Laparoscopic surgery is associated with reduced surgical trauma, and less acute phase response, as compared with open surgery. Cytokines are important regulators of the biological response to surgical and anesthetic stress. The aim of this study was to determine if CO2 pneumoperitoneum would change cytokine expression, gas parameters and leukocyte count in septic rats. Methods: Wistar rats were randomly assigned to five groups: control (anesthesia only), laparotomy, CO2 pneumoperitoneum, cecum ligation and puncture by laparotomy, and laparoscopic cecum ligation and puncture. After 30 min of the procedures, arterial blood samples were obtained to determine leukocytes subpopulations by hemocytometer. TNF&#945;, IL-1&#946;, IL-6 were determined in intraperitoneal fluid (by ELISA). Gas parameters were measured on arterial blood, intraperitoneal and subperitoneal exsudates. Results: Peritoneal TNF&#945;, IL-1&#946; and IL-6 concentrations were lower in pneumoperitoneum rats than in all other groups (p<0.05). TNF&#945;, IL-1&#946; and IL-6 expression was lower in the laparoscopic than in laparotomic sepsis (p<0.05). Rats from laparoscopic cecum ligation and puncture group developed significant hypercarbic acidosis in blood and subperitoneal fluid when compared to open procedure group. Total white blood cells and lymphocytes were significantly lower in laparoscopic cecum ligation and puncture rats than in the laparotomic (p<0.01). Nevertheless, the laparotomic cecum ligation rats had a significant increase in blood neutrophils and eosinophils when compared with controls (p<0.05). Conclusions: This study demonstrates that the CO2 pneumoperitoneum reduced the inflammatory and immune response in an animal model of peritonitis with respect to intraperitoneal cytokines, white blood cell count and clinical correlates of sepsis. The pneumoperitoneum produced hypercarbic acidosis in septic animals / A cirurgia laparosc?pica est? associada com trauma reduzido e baixa resposta metab?lica na fase aguda do trauma, quando comparada com a cirurgia aberta. As citocinas e o balan?o ?cido-base s?o fatores importantes da resposta biol?gica ao trauma cir?rgico-anest?sico. O objetivo deste estudo foi determinar se o pneumoperit?nio com CO altera a express?o das citocinas intraperitoneais, a gasometria do sangue arterial, dos exsudatos intraperitoneal e subperitoneal, e a contagem diferencial de leuc?citos em ratos com sepse abdominal. M?todo: Ratos Wistar foram aleatoriamente distribu?dos em cinco grupos: controle (somente 2anestesia), laparotomia, pneumoperit?nio com CO2, ligadura e pun??o do ceco por laparotomia, ligadura e pun??o do ceco por laparoscopia. Ap?s 30 minutos dos procedimentos, sangue arterial foi colhido para leucometria em hemocit?metro. FNT&#945;, IL-1&#946; e IL-6 foram dosadas no lavado intraperitoneal (por ELISA). Os par?metros gasosos foram medidos no sangue arterial e nos exsudatos intraperitoneal e subperitoneal. Resultados: Os valores de FNT&#945;, IL-1&#946; e IL-6 foram significantemente menores nos ratos submetidos ao pneumoperit?nio do que em todos os outros grupos (p<0.05). Express?o de FNT&#945;, IL-1&#946; e IL-6 foi menor no grupo sepse induzida por laparoscopia do que por laparotomia (p<0.05). Os ratos submetidos ? ligadura e pun??o do ceco por via laparosc?pica desenvolveram acidose hiperc?rbica no sangue arterial e exsudato subperitoneal, mais intensa do que no grupo sepse laparot?mica. Leucopenia e linfopenia foram mais acentuadas no grupo sepse laparosc?pica (p<0.01). Entretanto, os animais submetidos a sepse laparot?mica desenvolveram significante aumento de neutr?filos e eosin?filos quando comparados com os controles (p<0.05). Conclus?es: Este estudo demonstrou que o pneumoperit?nio com CO contribuiu para reduzir a resposta inflamat?ria e imunol?gica em ratos submetidos a modelo de sepse abdominal, no que diz respeito a citocinas intraperitoneais e leucometria diferencial. O pneumoperit?nio tamb?m contribuiu para instala??o de acidose hiperc?rbica nos ratos s?pticos

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DeboraAN.pdf: 367004 bytes, checksum: a62b214f06755ba9b9d2aedbea46c4f9 (MD5) Previous issue date: 2006-05-24 / This study aimed builds reference values for copper and zinc, of healthy adults in Natal-RN, and to identify the influence of the gender, age, body mass index (BMI) and diet, on those values. They were assessed 123 healthy students of the Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN), both genders, with age between 19 and 41 years. The project was approved by the Ethics Committee in Research of UFRN. BMI was determined and the food consume was accomplished through a 24h recordatory. Dietary was evaluated as the energy, macronutrients, copper and zinc, according to the recommendations of National Academy of Sciences (2001; 2002). Analyses of the copper and zinc concentrations in the plasma and erythrocytes were accomplished by flame atomic absorption spectrometry. The casuistic came quite homogeneous as for the distribution for gender and age, being the largest number of individuals between the 19 and 24 years old. Most of the volunteers presented anthropometric nutritional state inside of the normality patterns. Chronic diseases family antecedents and sedentarysm were observed. Diet was characterized with low consumption of zinc, appropriate of copper and of lipids. Average concentrations of plasma copper (p=0,002), erythrocyte copper (&#956;g/dL, p=0,036; &#956;g/gHb, p=0,038), and plasma zinc (p=0,022) were different among the genders, what was demonstrated by the largest values of copper in the female gender and larger of zinc in the masculine. Plasma copper values still suffered interference of the variables: energy, carbohydrate and copper consumption, all classified in agreement with the median, besides the protein classified according to the percentage contribution for the dietary total energy. The study allowed to establish reference values for erythrocyte zinc (1.261,6-1.344,0 &#956;g/dL e 51,0-54,3 &#956;g/gHb) and to suggest "indicative" of reference values for plasma (108,4 130,2 &#956;g/dL) and erythrocyte (female = 85,0 91,4 &#956;g/dL; masculine = 80,2 86,5 &#956;g/dL) copper and plasma zinc (female = 98,8 105,8 &#956;g/dL; masculine = 104,6 111,6 &#956;g/dL) / O estudo teve como objetivo construir valores de refer?ncia para cobre e zinco, de adultos saud?veis na cidade do Natal-RN, e identificar a influ?ncia do g?nero, idade, ?ndice de massa corporal (IMC) e dieta, sobre esses valores. Foram avaliados 123 estudantes saud?veis da Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN), de ambos os g?neros, com idade entre 19 e 41 anos. O projeto foi aprovado pelo Comit? de ?tica em Pesquisa da UFRN. Foi estimado o indice de massa corporal e realizado um recordat?rio alimentar de 24h. A dieta foi avaliada quanto a energia, macronutrientes, cobre e zinco, segundo as recomenda??es da National Academy of Sciences (2001; 2002). As concentra??es de cobre e zinco no plasma e no eritr?cito foram realizadas por espectrofotometria de absor??o at?mica de chama. A casu?stica apresentou-se bastante homog?nea quanto ? distribui??o por g?nero e idade, estando o maior n?mero de indiv?duos entre os 19 e 24 anos. A maioria dos volunt?rios apresentou estado nutricional antropom?trico dentro dos padr?es de normalidade. Antecedentes familiares de doen?as cr?nicas e sedentarismo foram observados. A dieta caracterizou-se com baixo consumo de zinco, adequado de cobre e de lip?deos. As concentra??es m?dias de cobre no plasma (p=0,002), cobre no eritr?cito (&#956;g/dL, p=0,036; &#956;g/gHb, p=0,038), e zinco no plasma (p=0,022), foram estatisticamente diferentes entre os g?neros, o que foi demonstrado pelos maiores valores de cobre do g?nero feminino e maiores de zinco no masculino. Os valores de cobre no plasma sofreram ainda interfer?ncia das vari?veis: ingest?o de calorias, carboidrato e cobre na dieta, todos categorizados de acordo com a mediana, al?m da prote?na categorizada segundo o percentual de contribui??o para o valor cal?rico total (VCT) da dieta. O estudo permitiu estabelecer valores de refer?ncia para zinco no eritr?cito, correspondentes a 1.261,6-1.344,0 &#956;g/dL e 51,0-54,3 &#956;g/gHb, e sugerir indicativos de valores de refer?ncia para cobre no plasma (108,4 130,2 &#956;g/dL), no eritr?cito (feminino = 85,0 91,4 &#956;g/dL; masculino = 80,2 86,5 &#956;g/dL) e zinco no plasma (feminino 98,8 105,8 = &#956;g/dL; masculino 104,6 111,6 = &#956;g/dL)

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:32:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ThaisAOM_DISSERT.pdf: 2404087 bytes, checksum: de8e1e5267a7184559b5a6f8a0440fa3 (MD5) Previous issue date: 2014-02-26 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The presence of inflammatory cells within the tumor microenvironment plays a dual role that may contribute both to the progression and for inhibition of tumor growth. Recent studies suggest that the quality, not the quantity, of the inflammatory infiltrate is the most important determinant for prognosis. Therefore, TCD8 cells and natural killer cells are the main effector cells in combating cancer. The aim of this study was to assess, through the immunohistochemical study, the expression of TCD8 lymphocytes and NK cells in epidermoid carcinoma (EC) of the lower lip. The sample consisted of 32 specimens of EC of the lower lip, of which 16 had regional lymph node metastasis, and the 16 remaining, free of metastases. The total number of positive cells at the front of invasion were evaluated quantitatively and the results were related to clinical TNM staging, histological grade of malignancy and prognostic factors. It was observed for the group with metastasis, prevalence of stages III and IV (p<0.0001). Most patients with metastasis, had a high grade of malignancy (p=0.006). Most cases classified as high grade of malignancy had stages III and IV (p=0.032). Of the total sample, there were three cases of recurrence and five with death, however these variables were not statistically significant when associated with clinicopathological parameters. The immunostaining of CD8 and CD57, respectively, showed no statistically significant association with any of the clinicopathological parameters studied, metastasis (p=0.346, p=0.622), TNM classification (p=0.146, p=0.576), histological grade of malignancy (p=0.936, p=936), recurrence (p=0.075, p=0.075) and death (p=0.897, p=0.856). Believing in the function of the immunological system against malignant cells, it is concluded that the TD8 lymphocytes and NK cells, would be acting in the control of the progression of malignant neoplasms, but not in isolated manner / A presen?a de c?lulas inflamat?rias dentro do microambiente tumoral exerce um papel dual podendo contribuir tanto para a progress?o como para a inibi??o do crescimento do tumor. Estudos recentes sugerem que a qualidade, e n?o a quantidade, do infiltrado inflamat?rio ? o determinante mais importante para o progn?stico. Portanto, as c?lulas TCD8 e as c?lulas natural killer (NK), s?o as principais c?lulas efetoras no combate do c?ncer. O objetivo desse trabalho foi avaliar, atrav?s do estudo imunoistoqu?mico, a express?o dos linf?citos TCD8 e das c?lulas NK em carcinoma epiderm?ide (CE) de l?bio inferior e sua rela??o com a progress?o da les?o. A amostra foi composta por 32 esp?cimes de CE de l?bio inferior, dos quais 16 apresentavam met?stase linfonodal regional, e os 16 restantes, livres de met?stase. O total de c?lulas positivas no front de invas?o foram avaliados de forma quantitativa e os resultados obtidos foram relacionados com estadiamento cl?nico TNM, grada??o histopatol?gica de malignidade e fatores progn?sticos. Observou-se para o grupo com met?stases, preval?ncia dos est?gios III e IV (p<0,0001). A maioria dos casos com met?stase, apresentava alto grau de malignidade (p=0,006). A maioria dos casos classificados como de alto grau de malignidade apresentava est?gios III e IV (p=0,032). Do total da amostra, houve tr?s casos com recidiva e cinco com ?bito, no entanto essas vari?veis n?o apresentaram diferen?a estatisticamente significativa quando associadas a par?metros clinico-patol?gicos. A imunoexpress?o do CD8 e do CD57, respectivamente, n?o apresentaram associa??o estatisticamente significativa com nenhum dos par?metros cl?nico patol?gicos estudados, met?stases (p=0,346; p=0,622); estadiamento cl?nico TNM (p=0,146; p=0,576) grada??o histopatol?gica de malignidade (p=0,936; p=936); recidiva (p=0,075; p=0,075) e ?bito (p=0,897; p=0,856). Acreditando na fun??o que o sistema imunol?gico possui frente a c?lulas malignas, conclui-se que os linf?citos TCD8 e as c?lulas NK, estariam atuando no controle da progress?o de neoplasias malignas, mas n?o de forma isolada