Esta dissertação investiga o registro de conteúdo iônico do testemunho de gelo monte Johns (79°55'28"S; 94°23'18"O) obtido na Antártica Ocidental, contribuindo para o adensamento espacial de informações glacioquímicas empregadas em estudos paleoclimáticos. As concentrações de Na+ (16,6 ± 28,2 μg L-1), K+ (1,3 ± 3,7 μg L-1), Mg2+ (3,7 ± 3,7 μg L-1), Ca2+ (5,4 ± 3,4 μg L-1), Cl- (33,3 ± 43,7 μg L-1), SO42- (25,9 ± 17,7 μg L-1), NO3- (50,8 ± 18,5 μg L-1) e H3CSO3- (7,1 ± 5,4 μg L-1) foram determinadas por cromatografia iônica em 2.164 amostras para o período 1882–2008. A variabilidade sazonal de NO3- e, especialmente do nssSO42-, em antifase com Na+, possibilitou a datação pela contagem de ciclos anuais ao longo do período estudado. A identificação dos sinais vulcânicos do Krakatoa (1883), Agung (1963) e Pinatubo/Hudson (1991) foi usada para determinar horizontes de referência (datação absoluta). Eventos de aporte significativo de aerossóis foram identificados e agrupados considerando o conteúdo iônico, proveniência e estação do ano. A avaliação da proveniência dos íons e do balanço iônico mostra a origem da carga iônica: 36% é oriunda de aerossóis de sal marinho, 13% de poeira mineral, 17% de atividade biogênica marinha e 34% de produtos da reatividade química na atmosfera. É observada uma leve redução nas concentrações de Mg2+ (-0,04 μg L-1 ano-1) e K+ (-0,01 μg L-1 ano-1), e mais forte para NO3- (-0,17 μg L-1 ano-1), no período 1909–2008. A média anual da acumulação líquida de neve foi 0,21 ± 0,04 m eq. H2O no período 1882–2008 sem apresentar tendência significante. A acumulação mostra alta correspondência com dados anuais de reanálise climática, com coeficiente de correlação cruzada de +0,42 (α < 0,05) para o período 1979–2008. / This dissertation investigates the ionic content record of the mount Johns ice core (79°55'28"S; 94°23'18"W) recovered from the West Antarctica, contributing to the spatial densification of glaciochemical information used in paleoclimatic studies. The concentrations of Na+ (16.6 ± 28.2 μg L-1), K+ (1.3 ± 3.7 μg L-1), Mg2+ (3.7 ± 3.7 μg L-1), Ca2+ (5.4 ± 3.4 μg L-1), Cl- (33.3 ± 43.7 μg L-1), SO42- (25.9 ± 17.7 μg L-1), NO3- (50.8 ± 18.5 μg L-1) e H3CSO3- (7.1 ± 5.4 μg L-1) were determined by ion chromatography on 2,164 samples for the period 1882–2008. The NO3- seasonal variability and, especially, of the nssSO42- in antiphase with the Na+, allowed the counting of annual cycles over the studied period. The identification of Krakatau (1883), Agung (1963) and Pinatubo / Hudson (1991) volcanic signals was used to determine reference horizons (absolute dating). Significant aerosols events were identified and grouped considering the ionic content, provenance and season of the year. The evaluation of the ions provenance and of the ionic balance points to ionic content origin: 36% come from sea salt aerosols, 13% from mineral dust, 17% originate from marine biogenic activity and 34% are chemical reactivity products in the atmosphere. It is observed a slight reduction in the Mg2+ (-0.04 μg L-1 y-1) and K+ (-0.01 μg L-1 y-1) concentrations, and stronger in the NO3- (-0.17 μg L-1 y-1), during the 1909–2008 period. The annual mean net accumulation rate averaged 0.21 ± 0.04 m w.e. y-1 in the period 1882–2008 did not show any significant trend and shows high correspondence with climatic reanalysis data in years with data overlap, with a cross-correlation coefficient of +0.42 (α < 0.05) for the period 1979–2008.

O cloridrato de tizanidina é um relaxante muscular esquelético de ação central, utilizado no tratamento de espasticidade. Esse fármaco é comercializado apenas sob a forma de comprimidos, o que evidencia a necessidade do desenvolvimento de formulações líquidas orais. No ambiente hospitalar, este aspecto é contornado com a preparação de suspensões derivadas, de modo a permitir a administração em crianças e em adultos com deglutição prejudicada, mas não há dados sobre sua estabilidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar a estabilidade físico-química e microbiológica de formas farmacêuticas líquidas preparadas em ambiente hospitalar a partir da derivação de comprimidos de cloridrato de tizanidina, empregando como metodologia a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e análise microbiológica. Um método simples e indicativo de estabilidade foi desenvolvido e validado por CLAE quanto a especificidade, linearidade, limite de detecção e quantificação, precisão, exatidão e robustez. As formulações líquidas foram preparadas em triplicata e acondicionadas em frasco de polietileno tereftalato (PET) âmbar e de vidro âmbar, que foram armazenados sob três diferentes condições: em temperatura ambiente, sob refrigeração e à 40 °C. Foram coletadas amostras a cada 7 dias por um período de 56 dias para a estabilidade físico-química. As formulações líquidas foram analisadas e demonstraram ser quimicamente estáveis durante 56 dias, permitindo um período de utilização prolongado. Entretanto, a determinação da estabilidade microbiológica mostrou que estas formulações estão propensas à contaminação microbiana, o que reduziu drasticamente a sua estabilidade para 7 dias, em ambos os frascos e em todas as temperaturas avaliadas. A qualidade microbiológica foi uma questão crítica, uma vez que as formulações foram produzidas apenas em água para injetáveis e não havia conservantes presentes na formulação. Os resultados deste estudo podem servir de referência para preparar derivações de cloridrato de tizanidina em uso hospitalar, uma vez que se demonstrou a confiabilidade do intervalo de tempo de armazenamento e as condições adequadas para o uso. De acordo com os resultados deste estudo de estabilidade, este fármaco pode ser incorporado na rotina de preparo das derivações dos hospitais, atendendo a uma demanda já há tempos sinalizada. / Tizanidine hydrochloride is a centrally acting skeletal muscle relaxant, used in the manegement of spasticity. This drug is sold only as tablets, which highlights the need to develop oral liquid formulations. In the hospital environment, this aspect is circumvented by the preparation of derived suspensions, to allow administration to children and adults with impaired swallowing, but there is no data regarding their stability. The objective of this work was to evaluate the physicochemical and microbiological stability of liquid dosage forms prepared in hospital environment from tizanidine hydrochloride tablets, applying high performance liquid chromatography (HPLC) and microbiological analysis. A simple and stability-indicating HPLC method was developed and validated for specificity, linearity, limits of detection and quantification, precision, accuracy and robustness. The liquid formulations were prepared in triplicate and placed in amber PET and glass bottles, which were stored under three different conditions: at room temperature, under refrigeration and at 40 °C. Samples were collected every 7 days along 56 days for physicochemical stability. The liquid formulations were analyzed and demonstrated chemical stability for 56 days, allowing the use for long period. However, the determination of microbiological stability showed that these formulations are prone to microbial contamination, which has dramatically reduced its stability to 7 days, in both bottles and all evaluated temperatures. Microbiological quality was a critical issue, since formulations were produced only in water for injectables and there was no preservatives present in the formulation. Results of this study could be applied as a reference for tizanidine hydrochloride derived preparation in hospital, once it was demonstrated the reliability of storage time interval and proper conditions for use. According to the results of this stability study, this drug could be incorporated into the routine of hospital derivations preparation, meeting a demand already indicated.

Nesta dissertação, foram avaliados diferentes materiais adsorventes na remoção de compostos orgânicos presentes em soluções metanólica empregadas em cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Os adsorventes estudados foram carvão ativo, argila Betonita K-10, resinas comerciais da Rohm and Haas: Amberlyst A26OH (resina com grupo quaternário de amônio) e Amberlyst 15WET (resina com grupo sulfônico) e três resinas sintéticas: RP03 (à base de acrilonitrila e divinilbenzeno), RP09 (à base de metacrilamida, estireno e divinilbenzeno) e RP12 (à base de ácido acrílico, estireno e divinilbenzeno). Essas três últimas resinas foram sintetizadas por meio da copolimerização em suspensão glicérica dos comonômeros envolvidos empregando a iniciação via radical livre. As pérolas de copolímeros foram obtidas na presença de um sistema de diluentes objetivando a produção de estruturas porosas. Os copolímeros sintetizados foram caracterizados por meio de densidade aparente, área específica, diâmetro e volume médio de poros, microscopia ótica (MO) e eletrônica de varredura (MEV) e análise elementar (CHN). Esses materiais foram avaliados na remoção de cloridratos de sibutramina e biperideno dissolvidos em metanol em diferentes tempos de extração. As extrações foram realizadas em bateladas a temperatura ambiente. As concentrações iniciais e finais após as extrações foram determinadas por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). De uma maneira geral, os copolímeros sintéticos obtidos no laboratório da UERJ e as resinas comerciais da Rohm and Haas apresentaram as melhores capacidades de remoção dos cloridratos. Em especial, a resina Amberlyst 15WET apresentou o melhor desempenho de sorção dos dois cloridratos quando comparada aos outros adsorventes. / In this dissertation, different absorbent materials were evaluated for extraction of organic compounds from methanolic solution used for high efficiency liquid chromatography (CLAE). The active coal, Betonite K-10 clay, commercial resins from Rohm and Haas: Amberlyst A26OH (resin containing quaternary ammonium group) and Amberlyst 15WET (resin containing sulfonic group) and three synthetic resins: RP03 (based on acrylonitrile and divinylbenzene), RP09 (based on methacrylamide, styrene and divinylbenzene) and RP12 (based on acrylic acid, styrene and divinylbenzene) were evaluated. These resins had been prepared by means of the copolymerization in glyceric suspension of the involved comonomers using the free radical initiation. The copolymer pearls had been produced in the presence of a diluent system aiming the production of porous structures. The copolymers had been characterized by means of apparent density, specific area, average diameter and volume of pores, optical (OM) and scanning electron microscopies (SEM) and elemental analysis (CHN). These materials had been evaluated in the removal of sibutramine and biperidene chlorhydrates dissolved in methanol in different extraction times. The extractions had been carried out in batch at ambient temperature. The initial and final concentrations had been determined by high efficiency liquid chromatography (CLAE). In a general way, the synthetic and commercial copolymers had presented the best extraction capacities of the chlorhydrates. In special, the Amberlyst 15WET resin has presented the more efficient sorption of the two chlorhydrates compared to the other absorbent.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Petiveria alliacea L. é uma planta pertencente à família Phytolaccaceae, conhecida popularmente no país como guiné, erva-de-alho, erva-tipi ou amansa-senhor. Nativa da Região Amazônica tem sido cultivada em muitas áreas tropicais com propósito medicinal ou ritualístico. O objetivo desse trabalho foi (i) o desenvolvimento e a multiplicação de plantas de P. alliacea L. através de métodos de cultura de tecidos, e monitoramento fitoquímico das culturas, e (ii) avaliação comparativa das potencialidades genotóxica e antigenotóxica entre plantas coletadas no campo e produzidas in vitro. Exemplares de diferentes populações ocorrentes no estado do Rio de Janeiro foram utilizados como matrizes para a cultura. Foi estabelecido um protocolo para multiplicação das plantas em meio MS suplementado com BAP e ANA em diferentes concentrações e combinações, que forneceu como melhor resultado em média 8 plantas por explante na concentração de BAP 4,4 &#956;M + ANA 0,54 &#956;M. A análise fitoquímica foi baseada em métodos cromatográficos de diferentes extratos de plantas de campo e plantas in vitro das populações estudadas resultando em diferentes substâncias identificadas nas amostras analisadas por cromatografia em camada delgada. Os extratos foram também avaliados por cromatografia gasosa acoplada á espectrometria de massas, sendo identificadas diferentes substâncias, entre as quais o dibenzil dissulfeto, um produto de degradação de tiosulfinatos com importantes atividades biológicas na defesa das plantas. Os extratos aquosos das plantas de campo e daquelas estabelecidas in vitro foram submetidos à avaliação da potencialidade genotóxica e antigenotóxica, usando-se como modelo o DNA plasmidial pUC 9.1. Os resultados demonstraram que as concentrações utilizadas do extrato aquoso foram capazes de induzir alterações na conformação estrutural do DNA, indicando a ocorrência de quebras simples e duplas nesta molécula. Observou-se também que as lesões aumentaram, proporcionalmente ao aumento da concentração dos extratos, caracterizando-se, assim, um efeito dose-resposta. Os dados também apontaram para um efeito protetor do extrato aquoso, em relação aos danos oxidativos causados pelo cloreto estanoso, indicando, também, uma potencialidade antigenotóxica do extrato aquoso. / Petiveria alliacea L. popularly known in Brazil as Guiné, Amansa-senhor or Tipi belongs to the Phytolaccaceae family. Native from the Amazon region, it has been cultivated in many tropical areas for medicinal or ritualistic purposes. The aim of this study was: i) the development and multiplication of plants of P. alliacea L. through tissue culture methods as well as monitoring phytochemical cultures; ii) comparative assessment of genotoxic and antigenotoxic potentialities between field collected and in vitro grown plants. Specimens from different populations occurring in the state of Rio de Janeiro were used as matrices for the culture. It was established a protocol for propagation in MS medium supplemented with different BAP + ANA concentrations and combinations whose best result (BAP 4,4 &#956;M + ANA 0,54 &#956;M) provided 8 plants per explant in average. The phytochemical analysis was based on chromatographic methods of different extracts both of field and in vitro plant populations resulting in different substances identified through the Thin-layer chromatography analyzing samples. The extracts were also assayed by cromatografia gasosa acoplada á espectrometria de massas having identified various substances, including the dibenzyl disulfide, a degradation tiosulfinatos product with important function in plant defense and increasing use by the pharmaceutical industry. Field and in vitro plant aqueous extracts were evaluated for genotoxic and antigenotoxic potentialities using PUC 9.1 plasmid DNA. These results showed changes in the DNA structural conformation indicating the occurrence of single and double strand breaks induced by the extracts in a dose-response way. Finally, data also pointed to a protective effect of aqueous extract against stannous chloride oxidative damage, characterizing an antigenotoxic potentiality of aqueous extract.

In this work the quantitative methodologies for determination of amlodipine besilate in tablets and capsules were validated. The methods used for drug determination were: liquid chromatography (LC) and ultraviolet spectrophotometry. The LC system was operated isocratically at controlled-ambient temperature with reverse phase C18 (250 mm x 4.6 mm), using a mobile phase composed of ortho-phosphoric acid 0.1% (v/v) pH 3.0 : acetonitrile (60:40, v/v) at a flow rate of 1.0 mL min-1. The detection was achieved with an ultraviolet detector at 238 nm. In the spectrophotometry method the drug was extracted in 1% of 0,1N hydrochloric acid in methanol (v/v) and its concentration was measured at maximum wavelength of 238 nm. These two methods showed good linearity, precision and accuracy and the results obtained were not statistically different. Moreover, a method for the dissolution of amlodipine besilate in solid dosage formulations was developed and validated. Dissolution studies were conducted by basket and paddle methods at 37 ± 0,5°C in 500 mL of 0,01N hydrochloric acid at 50 rpm. The quantification was achieved by LC and ultraviolet spectrophotometry. The data validation showed good linearity, specificity, accuracy and precision. Afterwards, tests of the dissolution rate and pharmaceutical equivalence of some available commercial formulations were developed. The tests evidenced that most of the commercial products possesse good quality and they are pharmaceutical equivalents. / Neste trabalho foram validadas metodologias para determinação de besilato de anlodipino em comprimidos e cápsulas. Os métodos utilizados para quantificação do fármaco foram: cromatografia líquida (CL) e espectrofotometria na região do ultravioleta. O sistema por CL foi conduzido isocraticamente em temperatura ambiente controlada com coluna de fase reversa C18 (25 cm x 4.6 mm), usando fase móvel composta de ácido fosfórico 0,1% (v/v) pH 3,0 : acetonitrila (60:40, v/v) com vazão de 1,0 mL/min. A detecção foi realizada no ultravioleta a 238 nm. No método espectrofotométrico o fármaco foi extraído em 1% de ácido clorídrico 0,1N em metanol (v/v) e sua concentração foi avaliada no comprimento de onda de máxima absorção: 238 nm. Os métodos apresentaram linearidade, exatidão e precisão, não havendo diferença significativa entre eles. Desenvolveu-se e validou-se, também, método de dissolução do fármaco nas formas farmacêuticas em estudo, utilizando como meio de dissolução 500 mL de ácido clorídrico 0,01N a 37 ± 0,5°C, aparato 1 (cápsulas) e 2 (comprimidos), com rotação de 50 rpm e quantificação por cromatografia líquida e espectrofotometria na região do ultravioleta. Os resultados demonstraram linearidade, especificidade, exatidão e precisão adequadas. Posteriormente, realizou-se teste do perfil de dissolução e equivalência farmacêutica de algumas formulações disponíveis comercialmente. Os testes evidenciaram que a maioria dos produtos comerciais possui boa qualidade e são equivalentes farmacêuticos.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The aim of this work was to evaluate the efficiency of ozonification oxidation for horticulture submitted to pesticide decontamination, as well as to assess ozonification‟s effects on the physical-chemical properties and shelf time of the treated crops. Two experiments were carried out in 2015, using tomato and pepper crops. The experiments were performed in accordance with the recommendations for the crops. The crops were treated with two fungicides and two insecticides. In the tomato experiment, we applied the fungicide pyraclostrobin ® and the insecticide deltamethrin ®, while in the chili experiment we applied the fungicide and insecticide deltamethrin ® difenoconazole, using a sprayer pressurized with CO2 with a cone-type jet plane (XR TeeJet 11004). The treatments were the recommended dose, twice the recommended dose, and four times the recommended dose of the pesticides. In the tomato experiment, the fruit was harvested 3 hours after application, whereas in the chili experiment the pepper crop was held after the withdrawal period of the pesticide, and less treatment than the recommended dose was performed 24 hours before the withdrawal period. After harvesting, the samples were ozonized for 0, 10, 20, or 40 minutes and chromatographic analysis was conducted to measure the levels of pesticide degradation and to evaluate the physical and chemical qualities and shelf times of samples treated with ozone / O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência do uso do processo de oxidação por ozonização na descontaminação de tomate e pimentão submetidas à aplicação de agrotóxicos, bem como avaliar as qualidades (físicos-químicas) e tempo de prateleira, pós ozonização. Foram realizados dois experimentos em 2015, utilizando as culturas de tomate e pimentão, conduzidos a campo. A implantação dos experimentos foi realizada de acordo com a recomendação para as culturas. Os tratamentos foram submetidos a dois fungicidas e dois inseticidas. No experimento com a cultura do tomate foi aplicado o fungicida piraclostrobina® e o inseticida deltametrina®, enquanto no experimento com a cultura do pimentão foi aplicado o fungicida difenoconazol e o inseticida deltametrina®, utilizado um pulverizador costal pressurizado com CO2, munido com barra com duas pontas do tipo cone jato plano (XR TeeJet 11004) . Os tratamentos foram formados pela aplicação da dose, duas vezes a dose e quatro vezes a dose recomendada dos agrotóxicos. No experimento com tomate a colheita dos frutos foi realizada três horas após a aplicação. Enquanto que, no experimento com pimentão a colheita foi realizada após o intervalo de segurança do agrotóxico, menos o tratamento com a dose recomendada foi realizado a colheita desrespeitando (24 horas antes) o intervalo de segurança. Após a colheita as amostras de frutos foram ozonizadas com os tempos de 0 (zero), 10 (dez), 20 (vinte) e 40 (quarenta) minutos e posteriormente foram realizadas as análises cromatográficas. Para medir os níveis de degradação dos agrotóxicos também foram determinadas as qualidades físicos- químicas e tempo de prateleira dos frutos sobre o efeito de tratamento com ozônio. No experimento com tomate a ozonização teve efeito significativo na redução do princípio ativo piraclostrobina, em 64% quando aplicada na dose recomendada em dez minutos de ozonização, a qualidade pós-colheita e o tempo de prateleira não apresentaram diferença em relação à testemunha. No experimento com pimentão a ozonização não teve efeito significativo, no entanto, numericamente atingiu uma redução de 45% no difenoconazol, no tratamento com dez minutos de ozonização na dose de 4 vezes acima da recomendada. As principais qualidades físico-químicas e tempo de prateleira se mantiveram semelhantes com a testemunha.

Psidium cattleianum Sabine, also known as strawberry guava, is a Brazilian native species whose fruits are valued for a high level of vitamin C, which are consumed in natura. Besides, it is also a species used for medicinal purposes. The use of plants as a therapeutic resource is a widely spread practice in popular medicine worldwide, although there have been few studies about their chemical composition as well as their potential risks to human health. Besides, the germplasm characterization of a species, as the pollen viability determination for instance, is important in maintaining a database that may be useful for future research. Considering that some plants cause adverse effects, the purpose of the present study was to analyze the antiproliferative and genotoxic effect of strawberry guava juice and strawberry guava leaf aqueous extracts by Allium cepa test system. This study also aimed at analyzing strawberry guava pollen grains through different colorimetric techniques so as to assess their viability. Fruits from three accessions were used for preparing juice at the concentration of 125 g.L-1, and dried leaves from four accessions were used for preparing aqueous extracts at the concentrations of 15 g.L-1 and 75 g.L-1. Distilled water was used as negative control, whereas glyphosate served as positive control. Inhibition of cell division as well as the occurrence of chromosomal abnormalities in the meristematic cells of Allium cepa roots were also analyzed. In order to identify the phenolic compounds, juice and aqueous extract samples were analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC). The pollen viability of twenty accessions was determined by two colorimetric methods. The statistical analysis was carried out using Chi-square and Scott-Knott tests (p < 0,05). The analysis of genotoxicity showed that the strawberry guava juice induced cell proliferation and chromosomal abnormalities, besides inhibiting the formation of the mitotic spindle. The extracts prepared with leaves from four strawberry guava accessions caused a decrease in cell proliferation, however, only the extracts prepared with leaves collected in Cerro Largo (CL) induced chromosomal alterations. The following phenolic compounds were identified in the composition of the strawberry guava juice and the leaf aqueous extracts: gallic acid, catechin, chrologenic acid, caffeic acid, ellagic acid, epicatechin, rutin, quercitrin, isoquercitrin, quercetin and kaempferol. The pollen viability determined through 2% acetic orcein was higher than 97,9%, and between 43% and 97% when determined through Alexander s stain. One concluded that the strawberry guava juice has proliferative, genotoxic and anti-mitotic action upon Allium cepa. Moreover, the leaf aqueous extracts produce an antiproliferative effect, whereas the accession collected in Cerro Largo is genotoxic, which may be valid to other types of eukaryotic cells. The most predominant phenolic compounds identified in the strawberry guava juice were epicatechin (two accessions) and isoquercitrin (one accession). Quercitrin was the most predominant compound in the leaf aqueous extracts from one accession, and quercetin was the most predominant one in the remaining accessions. One also concluded that the Alexander s stain was more accurate in regard to the actual pollen viability mainly due to its two stains (green malachite and fuchsine). / Psidium cattleianum Sabine, também conhecido como araçá, é uma espécie nativa do Brasil, valorizada pelo alto teor de vitamina C em seus frutos, que são consumidos in natura. Além disso, também é uma espécie utilizada com fins medicinais. O uso de plantas como recurso terapêutico é uma prática bastante difundida na medicina popular mundial e, apesar dessa generalidade da fitoterapia, são poucos os estudos sobre a composição química das plantas, bem como sobre os seus potenciais riscos à saúde da população. Além disso, a caracterização de germoplasma de uma espécie, a exemplo da determinação da viabilidade polínica, é importante na manutenção de um banco de informações que podem ser úteis em trabalhos futuros. Tendo em vista que algumas plantas apresentam efeitos adversos, o presente trabalho objetivou analisar o efeito antiproliferativo e genotóxico do suco dos frutos de P. cattleianum e do extrato aquoso de suas folhas usando o sistema-teste de Allium cepa L. (cebola). Ademais, o presente também objetivou realizar a análise de seus grãos de pólen e estimar sua viabilidade através de diferentes técnicas de coloração. Frutos de três acessos foram utilizados no preparo dos sucos na concentração de 125 g.L-1, e folhas secas de quatro acessos foram utilizadas na preparação dos extratos aquosos em duas concentrações diferentes: 15 g.L-1 e 75 g.L-1, sendo utilizada a água destilada como controle negativo e o glifosato como controle positivo. Foi analisada a inibição da divisão celular e também a presença de danos cromossômicos nas células meristemáticas de raízes de A. cepa. Para a determinação dos compostos fenólicos, as amostras dos sucos e dos extratos aquosos foram analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). A viabilidade polínica de vinte acessos de P. cattleianum foi determinada usando dois métodos de coloração. A análise estatística foi realizada pelos testes Qui-quadrado e Scott-Knott (p < 0,05). A análise da genotoxicidade mostrou que o suco de araçá induziu a proliferação celular e alterações cromossômicas, além de inibir a formação do fuso mitótico em A. cepa. Os extratos preparados com as folhas dos quatro acessos reduziram a proliferação celular, no entanto, apenas o extrato das folhas coletadas no município de Cerro Largo (CL) induziu alterações cromossômicas. Os sucos e os extratos aquosos das folhas apresentaram na sua constituição os compostos fenólicos: ácido gálico, catequina, ácido clorogênico, ácido cafeico, ácido elágico, epicatequina, rutina, quercitrina, isoquercitrina, quercetina e canferol. A viabilidade polínica determinada pela orceína acética 2% foi superior a 97,9%, enquanto que com o reativo de Alexander variou entre 43% e 97%. Conclui-se que o suco de araçá possui efeito proliferativo, genotóxico e antimitótico em A. cepa, enquanto que os extratos aquosos são antiproliferativos e o acesso CL é genotóxico, o que pode ser extrapolado para outros tipos celulares eucarióticos. Os compostos fenólicos majoritários no suco são de epicatequina (dois acessos) e isoquercitrina (um acesso). Quercitrina é o composto fenólico predominante no extrato aquoso das folhas de um acesso e quercitina nos demais. Conclui-se também que o reativo de Alexander foi mais fiel à viabilidade real, principalmente devido à dupla coloração oferecida por esse corante (verde de malaquita e fucsina ácida).

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2757.pdf: 3606841 bytes, checksum: 1cbaf9d57ef931332c3b9f278a479c5a (MD5) Previous issue date: 2009-09-04 / Universidade Federal de Sao Carlos / In this work methods for determining minoxidil (MX) in commercial samples and electrolytes of synthetic plasma and urine are presented. The minoxidil is a pharmaceutical whose blood vessel dilation property is used in the treatment of the Arterial Hypertension and in the treatment of the Alopécia Areata. Three commercial samples were analyzed, the Regaine® (Pharmacia, USA) and the magistral formulation (Porto Bianco, Brazil) both are topical use solutions, in a mixture of ethanol and propilenoglicol as vehicle, containing 2 % (20 mg mL-1) and 5 % of minoxidil (50 mg mL-1) respectively, and Loniten® (Rhodia, Brasil) containing 10 mg of MX per tablet. Three proposals for the determination of minoxidil in commercial samples and electrolytes of synthetic plasma and urine were considered. The first procedure was the determination of MX in the samples using flow injection analysis with spectrophotometric detection in two setups. For the setup procedure using single line with a wavelength of 400 nm, which can quantify the MX present in samples, showing recovery values of 99.7 and 104.8 % for Loniten® and the Regaine® respectively, and 102.5 % for the magistral sample. In merging-zones setup, the detection was in 345 nm, the MX was determined in the samples with recovery 101.3 % for Loniten® and 99.8 % to Regaine® and 103.7 % for the magistral. For both configurations, all the results from flow agree with the labeled values and the results from the chromatographic method (comparative method) in 95 % confidence (t-Student test). In the second procedure, an electroanalytical determination of MX is described using two composite electrodes, the graphite-polyurethane (GPUE) and graphite-silicone rubber (GSRE). Cyclic voltammetry was used to study the electroactive area of electrodes (GPUE = 0.093 cm2; GSRE = 0.089 cm2), the diffusion coefficient of MX (in order of 8.0 x10-6 cm2 s-1) and to study the mechanism of electro-oxidation of MX of which involves one electron per proton. With the support of analytical curves were determined the levels of MX in the samples by different voltammetric techniques; cyclic voltammetry (CV), square wave voltammetry (SWV) and differential pulse voltammetry (DPV). The recovery values are in the range between 96.0 and 110 %, depending on the sample and the voltammetric technique. The electrochemical impedance spectroscopy showed that the mass transport is controlled by diffusion and also there is a weak and reversible adsorption that for both the electrodes. The third method describes the determination of MX and furosemide (FR) using high performance liquid chromatography (HPLC) with spectrophotometric detection. The wavelengths of 275 and 285 nm were for the detection of FR and MX respectively. The mobile phase used was methanol/triethylamine (99:1, V/V) in the flow rate of 0.5 mL min-1. The column used was a C18 Supelco®. The recoveries were 97.7 and 102.4 % for Loniten® and Lasix® respectively. Finally is presented the characterization of the product of oxidation of MX. The informations obtained from infrared spectroscopy technique, were compared with results obtained by nuclear proton magnetic resonance. Two structures were proposed as product of redox reaction between the MX and KMnO4, the desoximinoxidil and another new structure. / No presente trabalho, são apresentados métodos para a determinação minoxidil (MX) em amostras comercias e eletrólitos de plasma e urina sintéticos. O MX é um fármaco que, devido à sua propriedade vasodilatadora, é usado no tratamento da Hipertensão Arterial e no tratamento da Alopécia Areata (calvice). Foram analisadas três amostras comerciais, Regaine® (Pharmacia, EUA), formulação de uso tópico manipulada pela Farmácia de Manipulação Porto Bianco (São Carlos, Brasil) e o Loniten® (Rhodia, Brasil), sendo o primeiro e o segundo soluções de uso tópico contendo 2 % (20 mg mL-1 m/v) e 5 % (50 mg mL-1 m/V) de MX, respectivamente; o terceiro medicamento é apresentado em forma de comprimidos contendo 10 mg de minoxidil, o qual é utilizado no tratamento da hipertensão arterial. Também foram analisados os teores de MX contido nos eletrólitos do plasma e da urina artificiais.Nesse trabalho foram propostas três metodologias para a determinação do MX nas amostras. O primeiro procedimento foi a determinação de MX nas amostras usando análise em fluxo com detecção espectrofotométrica em duas configurações diferentes, as quais monitoraram a formação de um produto amarelado formado a partir da reação entre MX e HNO2 formado in situ. A primeira configuração foi de linha única, com detecção no comprimento de onda de 400 nm, na qual foi possível quantificar o MX presente nas amostras, com recuperações de 99,7 e 104,8 % para o Loniten® e o Regaine®, respectivamente, e 102,5 % para a amostra manipulada. Na segunda configuração, de zonas coalescentes e detecção 345 nm, o MX foi determinado nas amostras com recuperação entre 101,3 % para o Loniten®, 99,8 % para o Regaine ® e 103,7 % para o Manipulado. Observou-se, para ambas as configurações, que todos os resultados do método de análise em fluxo concordam com os valores rotulados das amostras analisadas e com os resultados do método cromatográfico (método comparativo), em 95 % de confiança (teste t-Student). No segundo método, é descrita a determinação eletroanalítica de MX usando dois eletrodos compósitos de grafite-poliuretana (GPUE) e grafiteborracha de silicone (GSRE). Foi usada voltametria cíclica para o obtenção da área eletroativa dos eletrodos (GPUE = 0,093 cm2; GSRE = 0,089 cm2), do coeficiente difusão do MX (na ordem de 8,0x10-6 cm2 s-1) e para estudo do mecanismo da eletro-oxidação da MX, que é de um elétron por próton. Com o auxílio das curvas analíticas, foram determinados os teores de MX contidos nas amostras por diferentes técnicas voltamétricas, voltametria cíclica (CV), voltametria de onda quadrada (SWV) e voltametria de pulso diferencial (DPV), usando ambos os eletrodos. Os valores de recuperação estão no intervalo entre 96,0 e 110 %, dependendo da amostra e da técnica voltamétrica. A espectroscopia de impedância eletroquímica descreveu qual o circuito elétrico foi equivalente à eletro-oxidação do minoxidil e, ainda, mostrou que há adsorção fraca e reversível para ambos os eletrodos. O terceiro método descreve a determinação de MX e furosemida (FR), usando cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) com detecção espectrofotométrica. Os comprimentos de onda de detecção foram 275 e 285 nm para a FR e o MX, respectivamente. A fase móvel usada foi metanol/trietilamina (99:1; V/V) na vazão de 0,5 mL min-1. A coluna usada foi uma C18 da Supelco®. As recuperações foram 97,7 e 102,4 % para o Loniten® e o Furosem®, respectivamente. Finalmente, é apresentada a caracterização do produto de oxidação do MX. Para a caracterização, foi usada a espectroscopia de infravermelho e as informações obtidas foram comparadas com os resultados obtidos na ressonância magnética nuclear de prótons. Foram propostas, através da técnicas IR e RMN, duas estruturas resultantes da reação redox entre o MX e o KMnO4, o desoximinoxidil e uma outra estrutura, inédita na literatura o 3,5-dióxido-2,4- dinitro-6-piperidinopirimidina.

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Neste trabalho foi verificada a eficiência da HS-SPME associada à GC/qMS como ferramenta capaz de detectar alterações no perfil de compostos voláteis de Schinus polygamus e Baccharis spicata. Estas alterações são provocadas por insetos herbívoros (cecidógenos) que utilizam as folhas destas plantas como local para se alimentarem e se reproduzirem e, como conseqüência, produzem alterações no tecido vegetal (galhas). Para este propósito foi usado, como fase extratora, o filme polimérico DVB-CAR-PDMS, que apresenta alta capacidade de extração. Na S. polygamus, tanto folhas sadias, como galhas apresentaram grande quantidade de n-heptano (> 38,2 %) e n-nonano (> 24,4 %), sendo que este não foi detectado no óleo hidrodestilado de folhas da mesma amostra. Nas galhas também foi constatada a presença de alguns mono- e sesquiterpenos não detectados nas folhas, sendo o a-pineno (17,6 %), um dos compostos majoritários. Foi também observado um acréscimo significativo na concentração do limoneno. Os compostos majoritários no headspace das folhas de B. spicata foram: 1-undeceno (17,8 %), limoneno (15,3 %), b-pineno (13,5 %), (E)-cariofileno (12,8 %) e g-muroleno (11,4 %), enquanto que nas galhas, os compostos majoritários foram o a-pineno (40,9 %) e o limoneno (19,1 %). O 1-undeceno não foi detectado no óleo hidrodestilado de folhas desta planta, enquanto que o espatulenol foi o composto majoritário deste óleo (34,3%), encontrando-se em baixas concentrações nos voláteis extraídos por HS-SPME. As diferenças constatadas na composição dos VOC de folhas e galhas nas espécies S. polygamus e B. spicata podem ser um fator indicativo de que a presença do cecidógeno estimula a biossíntese de alguns compostos, que podem apresentar algum tipo de função infoquímica. Evidências de diferenças qualitativas entre o óleo hidrodestilado das folhas sadias e o perfil dos compostos voláteis do headspace das mesmas também são um indicativo de que o emprego de temperaturas amenas na HS-SPME propicia a obtenção de um perfil de compostos voláteis mais próximo daquele da planta in vivo. O acesso a estas diferenças (qualitativas e quantitativas) só foi possível através do emprego da HS-SPME, o que evidencia o potencial desta técnica como ferramenta investigativa para compostos infoquímicos, abrindo horizontes para futuras pesquisas. / HS-SPME coupled to GC/qMS was employed in this work as an efficient tool to verify differences in the volatile compounds composition of Schinus polygamus and Baccharis spicata leaves and galls. Plant volatile composition may be changed when herbivore insects (cecidógenos) use leaves as a site for reproduction and for feeding purposes. The action of those insects may resulting changes in plant tissue, which are called galls. The triple layer DVB-CAR-PDMS fiber was employed as sorbing phase, in order to achieve high efficiency in the extraction process. Galled and ungalled S. polygamus leaves presented high amount of n-heptane (> 38,2 %) and n-nonane (> 24,4 %), while n-heptane was not detected in the hydrodistilled oil of leaves of the same sample. The presence of a-pinene was observed only in galls, along with some other mono- and sesquiterpenes. Also, the amount of limonene was higher in galls than in ungalled leaves. Major compounds in the headspace of B. spicata leaves were: 1-undecene (17,8 %), limonene (15,3 %), b-pinene (13,5 %), (E)-caryophyllene (12,8 %) e g-muurolene (11,4 %), while in galls a-pinene (40,9 %) and limonene (19,1 %) were present in higher concentrations. One-undecene was not detected in the hydrodistilled oil of the leaves of this plant and spathulenol was the major compound of this oil (34,3%), being present in low concentrations in the chromatographic profile of HS-SPME. Differences found in the VOC composition of galls and ungalled leaves of S. polygamus e B. spicata may be an evidence of the cecidogene presence, which might stimulate the biosynthesis of some infochemical compounds. Qualitative differences between hydrodistilled oil and headspace chromatographic profile of the same sample indicates that HS-SPME mild temperatures provide a volatile compounds profile closer to that of in vivo plant. Approaching qualitative and quantitative differences in plant volatile compounds profile was made possible only through the use of HS-SPME. This fact highlights the potential of this technique as a research tool for infochemical compounds studies, and opens new horizons for future investigations of distinct plants.