Submitted by Alison Vanceto (alison-vanceto@hotmail.com) on 2017-02-06T11:01:53Z No. of bitstreams: 1 DissRBA.pdf: 3602024 bytes, checksum: 525d570f80b6ccb445f7c59a1884a872 (MD5) / Approved for entry into archive by Camila Passos (camilapassos@ufscar.br) on 2017-02-06T19:05:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissRBA.pdf: 3602024 bytes, checksum: 525d570f80b6ccb445f7c59a1884a872 (MD5) / Approved for entry into archive by Camila Passos (camilapassos@ufscar.br) on 2017-02-06T19:05:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DissRBA.pdf: 3602024 bytes, checksum: 525d570f80b6ccb445f7c59a1884a872 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-06T19:06:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissRBA.pdf: 3602024 bytes, checksum: 525d570f80b6ccb445f7c59a1884a872 (MD5) Previous issue date: 2016-08-08 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / The Brazillian savanna is one of the largest vegetation with 2,036,448 km2, about 22% of the national territory. This bioma is considered a global hotspot (Mittermeier et al., 2004) and consists of three biomes: tropical fields, grasslands and dry forests (Batalha, 2011; Brasil, 2015). Cerrado flora has a high species richness with herbs, shrubs, tree and vines, totaling 12,356 species occurring spontaneously, as well as a native vascular flora (ferns and phanerogams) totaling 11,627 species (Mendonça et al., 2008) .However, the chemical potential of its plant species is still underutilized. Research plants with allelopathic activity comes against the need to introduce new alternatives in the management of agricultural pests. Studies on the biological effects of these chemical compounds represent an important tool for the development of more specific agrochemicals natural and less harmful to the environment. Piptocarpha rotundifolia (Less.) - Baker belongs to the Asteraceae family, considered the most representative of the brazilian cerrado eudicotyledons, but there are few published works that deal with potential investigations phytotoxic of this species and its secondary metabolites. Thus, the main objective of this study was to analyze the phytotoxic potential of P. rotundifolia extracts, fractions and subfractions on target species of vegetables and weeds and the mode of action of the same. In the first step of this work, an extraction in order of increasing polarity was done and the phytotoxic potential of crude extracts was evaluated on the growth of wheat coleoptile, germination and seedling growth of mono and eudicotyledons invasive and vegetable species: wild poinsettia (Euphorbia heterophylla L.), guinea grass (Megathyrsus maximus J.), onion (Allium cepa L.) and sesame (Sesamum indicum L.), respectively, as well as the evaluation of the root sesame metaxylem cell growth. The acetone extract (D) was selected for the fractionation, due the mass (2370 mg) and and the inhibitory activity on the growth of wheat coleoptile good as on the germination growth indicator target species (onion and sesame) and invasive (wild poinsettia and guinea grass). This fractions and subfractions were also tested on the growth of wheat coleoptile and those who had higher incomes and inhibitory activity (D1 and D1A) were selected for the following bioguided fractioning. After, a liquid-liquid extraction was performed using the extracts 1 (hexane), 2 (ethyl acetate) and 3 (aqueous) and, among these, the extract 2 showed inhibitory activity on the growth of wheat coleoptile and also on the germination and growth of the target species, as well as significantly reduced metaxylem cell root growth of sesame seedlings. Therefore, this extract was refractionated by a countertop chromatography column, and the fraction with the highest income was denominated (2L), then refractioned. The resulting subfractions were tested only growing wheat coleoptile. To complete the survey, a chemical profile analysis was conducted using the extracts, fractions and subfractions of P. rotundifolia from both extraction methodologies, performing the ultra efficiency liquid chromatography technique, which has found a compound identified as glaucolide b and two other compounds known to the genre. Thus, the species Piptocarpha rotundifolia shown as promissing in the search of phytotoxic compounds due to their phytotoxic activity presented by their compounds. / O cerrado é uma das mais extensas formações vegetais brasileiras com 2.036.448 km2, representando 22% do território nacional. O cerrado é considerado um hotspot mundial (Mittermeier et al., 2004) formado por três biomas: campos tropicais, savanas e florestas estacionais (Batalha, 2011; Brasil, 2015). A flora do cerrado apresenta uma elevada riqueza de espécies, com plantas herbáceas, arbustivas, arbóreas e cipós, totalizando 12.356 espécies que ocorrem espontaneamente, além de uma flora vascular nativa (pteridófitas e fanerógamas) somando 11.627 espécies (Mendonça et al., 2008). No entanto, o potencial químico de suas espécies vegetais ainda é subutilizado. A investigação de plantas com atividade alelopática vem de encontro com a necessidade de se apresentar novas alternativas no manejo integrado de pragas agrícolas. Estudos realizados sobre os efeitos biológicos destes compostos químicos representam uma importante ferramenta para o desenvolvimento de agroquímicos naturais mais específicos e menos prejudiciais ao ambiente. Piptocarpha rotundifolia (candeia) (Less.) – Baker, planta pertencente à família Asteraceae, embora seja considerada a maior representante das eudicotiledôneas do cerrado brasileiro, existem poucos os trabalhos publicados que tratam de investigações do potencial fitotóxico de seus metabólitos secundários. Sendo assim, o principal objetivo deste trabalho foi analisar o potencial fitotóxico dos extratos, frações e subfrações de P. rotundifolia sobre espécies-alvo de hortaliças e invasoras e o modo de ação dos mesmos. Na primeira etapa deste trabalho, foi realizada uma extração em ordem crescente de polaridade, onde o potencial fitotóxico dos extratos brutos foi avaliado sobre o crescimento de coleóptilos de trigo, germinação e crescimento de plântulas de espécies invasoras e de hortaliças mono e eudicotiledôneas: amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla L.), capim-colonião (Megathyrsus maximus J.), cebola (Allium cepa L.) e gergelim (Sesamum indicum L.), respectivamente, bem como a avaliação do crescimento de células do metaxilema radicular de gergelim (Sesamum indicum L.). O extrato acetônico (D) foi selecionado para o fracionamento devido ao bom rendimento (2,370g), e apresenta uma atividade inibitória sobre o crescimento de coleóptilos de trigo (Triticum aestivum L.) bem como sobre a germinação crescimento de espécies-alvo indicadoras (cebola e gergelim) e invasoras amendoim-bravo e capim-colonião. Suas frações e subfrações foram também ensaiadas sobre o crescimento de coleóptilos de trigo e as que apresentaram maiores rendimentos e atividade inibitória (D1 e D1A) foram selecionadas para os fracionamentos bioguiado subsequentes. Dando sequência aos estudos, foi realizada uma extração líquido-líquido, que originou os extratos 1 (hexânico), 2 (acetato etílico) e 3 (aquoso) e, dentre estes, o extrato acetato etílico apresentou maior atividade inibitória sobre o crescimento de coleóptilos de trigo e também sobre a germinação e crescimento das espécies-alvo, bem como reduziu significativamente o crescimento de células do metaxilema de raízes de plântulas de gergelim. Sendo assim, este extrato foi refracionado em coluna cromatográfica de bancada, sendo a fração com maior rendimento denominada (2L), submetida a novos subfracionamentos. As subfrações resultantes foram testadas apenas em crescimento com coleóptilos de trigo. Para a complementação da pesquisa foi realizada uma análise do perfil quimico dos compostos presentes nos extratos, frações e subfrações de P. rotundifolia provenientes de ambas metodologias de extração, utilizando a técnica de cromatografia líquida de ultra eficiência, onde foi encontrado um composto identificado como glaucolide b, e outros dois compostos já conhecidos para o gênero. Sendo assim, a espécie Piptocarpha rotundifolia mostra-se como promissora na busca de compostos fitotóxicos, devido à atividade inibitória apresentada pelos compostos presentes nos extratos ou frações.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-03-28Bitstream added on 2014-06-13T20:30:32Z : No. of bitstreams: 1 lago_es_me_sjrp.pdf: 1344625 bytes, checksum: aa94e20630fd9f92411207c71bc3cbd7 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A atraente coloração da abóbora 'Rajada Seca' se deve a presença de carotenóides; compostos bioativos que estão associados ao adequado desenvolvimento e manutenção da saúde humana, bem como à redução de riscos de doenças degenerativas. As ações e funções biológicas desses compostos se devem ao sistema de duplas ligações conjugadas de sua estrutura, que os tornam altamente susceptíveis a degradações (isomerização e oxidação) durante o processamento. Dentre as técnicas de conservação de alimentos, a secagem apresenta vantagens por possibilitar a obtenção de produtos com baixos peso e volume, maior vida de prateleira a temperatura ambiente, diminuindo os custos de armazenamento e distribuição. No entanto, pode provocar alterações de cor e sabor e perda de nutrientes, decorrentes da exposição ao oxigênio e a temperaturas relativamente elevadas, principalmente quando realizada de forma convencional com ar aquecido. Assim, aplicação de tratamentos prévios a secagem, com o objetivo de melhorar a aparência, sabor, textura e retenção dos nutrientes, tem despertado o interesse de pesquisadores nos últimos anos. No presente trabalho, avaliou-se o efeito da aplicação de coberturas a base de amido no teor de carotenóides de abóbora desidratada com ar aquecido a 70 ºC, verificando o efeito do tipo de amido (nativo ou modificado de milho, mandioca e batata), da concentração dos géis formadores das coberturas (1,5; 2,0; 2,5; 3,0 e 3,5 %) e temperatura de aplicação (quente ou frio). Para análise dos carotenóides por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), condições cromatográficas foram avaliadas e otimizadas. Fase móvel constituída de metanol e acetato de etila na proporção de 70:30 (v/v) com adição de 0,1 % de TEA mostrou boa separação e resolução de a-caroteno e b-caroteno e seus isômeros, em 35 minutos de corrida... / The attractive colour of the Rajada Seca variety pumpkin is due to the presence of carotenoids; bioactive compounds which are associated to adequate development and maintenance of human's health, and also to a reduction of risks of degenerative diseases. Biological actions and functions of carotenoids are due to the conjugated double bond system which makes them highly susceptible to degradation (isomerization and oxidation) during processing. Among the food preservation techniques, drying is advantageous because it results in lighter and smaller products with a longer shelf-life at room temperature, thus reducing the storage and distribution costs. However, it may cause flavor and colour alterations as well as the loss of nutrients due to exposure to oxygen and relatively high temperatures, principally when conventional drying with hot air is used. Thus, application of drying pretreatments aiming to improve the appearance, flavor, texture and nutrients retention, has awakened researchers' interest over the last years. In this study, the effect of starch edible coats on the carotenoid contents of dried pumpkin using hot air at 70 ºC was evaluated, verifying the effects of the coating gel concentration (1,5; 2,0; 2,5; 3,0 e 3,5 %) and temperature (hot and cold). For carotenoid analysis by high performance liquid chromatography (HPLC) using polymeric C30 column, chromatographic conditions were assessed and optimized. Mobile phase constituted of methanol and ethyl acetate (70:30, v/v) with 0.1 % of TEA provided good separation and resolution of the isomers of a-carotene and b-carotene in a 35 minutes run. Trans-a-carotene and trans-b-carotene content of fresh carrot and pumpkin obtained with C18 and C30 columns did not present significant differences. However, C18 column overestimated the trans-b-carotene content of processed samples due to a-carotene cis isomers coelution... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by Maike Costa (maiksebas@gmail.com) on 2016-05-05T13:54:43Z No. of bitstreams: 1 arquivo total.pdf: 4535008 bytes, checksum: 35f2a65a445c1e8219acb5615d951d72 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-05T13:54:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivo total.pdf: 4535008 bytes, checksum: 35f2a65a445c1e8219acb5615d951d72 (MD5) Previous issue date: 2015-07-01 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / In this work were developed and validated two analytical methodologies using solid phase extraction and High Performance Liquid Chromatography (HPLC), for identification and quantification of endocrine disruptors in surface water. A methodology was used to analyze four estrogens: 17 β-estradiol, ethinyl estradiol, estrone and estriol, and the other methodology was used to analyze six phytoestrogens: biochanin A, genistin, genistein, daidzin, daidzein and formononetin. In the sample preparation step we developed an extraction method using solid phase extraction (SPE).The used cartridges were effective in the extraction for both estrogens and phytoestrogens using 1000 ml of river sample, and reached a pre-concentration factor of 2,857 times and recoveries above 90%. The proposed method uses fluorescence detector for estrogens, while the one for the phytoestrogens uses diode array detector. On methods validation were evaluated analytical performances for both methods. The selectivity shows that there was no presence of interfering peaks in both evaluated methods. The generated calibration curves presented good linearity and good correlation coefficients (above 0.99) for all studied analytes. The curves linearity was evaluated by an ANOVA and analysis of graphical residue which showed that the model shows no lack of fit. The limit of detection (LOD) and of quantification (LOQ) for estrogens and phytoestrogens determined in this study were similar to the observed values in other studies and therefore were considered appropriate for the evaluated matrix type. The accuracy of the methods was assessed by the repeatability and intermediate precision, which presented CV <13%. The accuracy was assessed using the recovery test, which was in the range of 72.9 -113%). In the evaluated stability, standard solutions of both methods were stable for a period of 30 days under refrigeration. The results showed that the proposed methods are reliable and have been validated successfully. After validated the methods were applied in the analysis of water samples from the Cuiá River, located in João Pessoa, Paraíba (Brazil), on different collection points, and three sampling campaigns. In all campaigns it was observed the presence of the four estrogens and phytoestrogens six in concentrations ranging from 1.40 to 4754 ng L-1 for estrogens and 3.58 to 2210 μg. L-1 to phytoestrogens in the aquatic studied system. / Neste trabalho foram desenvolvidas e validadas duas metodologias analíticas, utilizando extração em fase sólida e cromatografia líquida de alta eficiência (do inglês: High Performance Liquid Chromatography – HPLC), para identificação e quantificação de interferentes endócrinos em águas superficiais. Uma metodologia foi utilizada para analisar quatro estrógenos: 17 β-estradiol, 17 α-etinilestradiol, estrona e estriol, e a outra metodologia usada para analisar seis fitoestrógenos: biochanin A, genistina, genisteína, daidizina, daidizeína e formononetina. Na etapa de preparo das amostras foi desenvolvido um método de extração empregando extração em fase sólida (SPE). Os cartuchos utilizados foram eficazes na extração dos analitos, tanto dos estrógenos como dos fitoestrógenos, utilizando 1.000 mL de amostra de rio, sendo atingido um fator de pré-concentração de 2.857 vezes e recuperações acima de 90%. O método para os estrógenos utilizou detector de fluorescência, enquanto o método para os fitoestrógenos utilizou o detector de arranjo de diodos. Na validação dos métodos foram avaliadas as figuras de desempenho analítico para ambos os métodos. A avaliação da seletividade demonstrou que não havia a presença de picos interferentes em ambos os métodos avaliados. As curvas analíticas geradas apresentaram linearidade satisfatória e coeficientes de correlação acima de 0,99, para todos os analitos estudados. A linearidade das curvas foi avaliada com os testes de ANOVA e análise dos gráficos de resíduos os quais demonstraram que os modelos não apresentaram falta de ajuste. Os LD’s e LQ’s estimados para os estrógenos mostraram-se similares aos valores apresentados em outros estudos, enquanto que os LD’s e LQ’s estimados para os fitoestrógenos tiveram valores mais altos. No entanto podem ser considerados satisfatórios para o tipo de matriz avaliada. A precisão dos métodos foi avaliada pela repetitividade e pela precisão intermediária, as quais apresentaram CV < 13 %. A exatidão do método foi avaliada através do teste de recuperação, que esteve na faixa de 72,9 a 113 %. Na avaliação da estabilidade, as soluções padrões de ambos os métodos se mostraram estáveis por um período de até 30 dias sob refrigeração. Os resultados demonstraram que os métodos propostos são confiáveis e que foram validados com sucesso. Depois de validados, os métodos foram aplicados nas análises das amostras de água do Rio Cuiá, situado na cidade de João Pessoa, Paraíba (Brasil), em diferentes pontos de coleta e, em três campanhas amostrais. Em todas as campanhas observou-se a ocorrência dos quatro estrógenos e dos seis fitoestrógenos, em concentrações que variaram de 1,40 a 4.754 ng L-1 para os estrógenos e de 3,58 a 2.210 μg L-1 para os fitoestrógenos.

Submitted by ANA KARLA PEREIRA RODRIGUES (anakarla_@hotmail.com) on 2017-08-03T15:37:12Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3685257 bytes, checksum: 74bce31d6388d3b37291990628109a10 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-03T15:37:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3685257 bytes, checksum: 74bce31d6388d3b37291990628109a10 (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The use of pesticide is increasing worldwide especially in Brazil, with a consumption of approximately 5.2 kg/inhabitant. For this reason, national and international regulatory agencies (Codex, FAO and ANVISA) monitor and establish assessments criteria for the quality control of food, regulating the maximum residue limits (MRLs), restricting and prohibiting the use of these products that causes harmful effects to health and the environment. The majority of the methods uses liquid or gas chromatography with mass detector, fluorescence and/or diode array for quantification of pesticides in foods. This paper proposes a methodology for quantifying seven pesticides (carbendazim, thiabendazole, fuberidazole, carbofuran, flutriafol, carbaryl and its degradation product 1-naphthol) in vegetables using QuEChERS extraction, without chean up step, and liquid chromatography with diode array detection. In the chromatographic procedure it was employed a gradient elution of 0.014mM phosphoric acid (eluent A) and methanol (eluent B): 40% B for 3.5 minutes reaching a ratio of 55% B at 22 minutes with a flow rate of 1 mL.min-1 and a temperature of 35°C. These chromatographic parameters and calibration models were developed, optimized and validated aiming an analysis free of interference and to achieve the MRLs established by the national and international standard-setting organizations (INMETRO, ANVISA, EUROCHEM, FAO and Codex). It was found 0.21 mg kg-1 carbendazim and 0.31 mg kg-1 carbofuran in cabbage sample; 0.12 mg kg-1 in beet flutriafol; 0.05 mg kg-1, fuberidazole and flutriafol in tomato and 0.24 mg kg-1 carbendazim in green paprika. It is important to highlight, that ANVISA allows only the use of flutriafol in tomato, with maximum permitted limit of 0.1 mg kg-1 and for the other samples there is no authorization for the use of these pesticides to combat pests on vegetables. / É crescente no mundo o uso de agrotóxicos e principalmente no Brasil, que apresenta um consumo de aproximadamente 5,2 kg/habitante. Por esse motivo, órgãos nacionais e internacionais (Codex, FAO e ANVISA) monitoram e estabelecem critérios de avaliação para o controle da qualidade dos alimentos, regulamentando os limites máximos de resíduos (LMRs), restringindo e proibindo o uso desses produtos que podem causar efeitos nocivos à saúde e ao meio ambiente. A maioria dos métodos utilizados para quantificação de pesticidas em alimentos são realizados por cromatografia em fase líquida ou a gás, empregando detector de massa, fluorescência ou arranjo de diodo. Neste trabalho é proposta uma metodologia para quantificação de sete pesticidas (carbendazim, tiabendazol, fuberidazol, carbofuran, flutriafol, carbaril e seu produto de degradação 1-naftol) em hortaliças utilizando extração QuEChERS e cromatografia líquida com detecção por arranjo de diodos. No processo cromatográfico foi empregado a eluição gradiente usando 0,014 mM de ácido fosfórico (eluente A) e metanol (eluente B): 40% de metanol por 3,5 minutos atingindo a proporção de 55% de metanol aos 22 minutos, com vazão de 1 mL min-1 e uma temperatura de 35ºC. Estes parâmetros cromatográficos, bem como modelos de calibração, foram elaborados, otimizados e validados visando uma análise livre de interferências nas amostras para atingir os LMR’s estabelecidos pelos órgãos normalizadores nacionais e internacionais (INMETRO, ANVISA, EUROCHEM, FAO e Codex). Foram quantificados 0,21 mg kg-1 de carbendazim e 0,31 mg kg-1 de carbofuran na amostra de couve; 0,12 mg kg-1 de flutriafol na amostra de beterraba; 0,05 mg kg-1 de fuberidazol e flutriafol na amostra de tomate e 0,24 mg kg-1 de carbendazim na amostra de pimentão. É importante ressaltar que, para as amostras quantificadas, a ANVISA permite apenas o uso de flutriafol em tomate, com limite máximo permitido de 0,1 mg kg-1 e para as demais amostras não há autorização para o uso desses agrotóxicos no combate às pragas nas culturas dessas hortaliças.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 765049 bytes, checksum: dcb0cc188aa67726f24e856817503e00 (MD5) Previous issue date: 2013-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The aim of this study was to evaluate the fertilizing capacity, acrosomal integrity, and qualify and quantify by chromatographic techniques the incorporation of cholesterol to the sperm membrane by cyclodextrin in different diluents on cryopreservation of goat sperm. Four males, Saanen (2) and Parda Alpine (2) breeds were used. It was performed a completely randomized design, with each semen sample divided into the following treatments: TG - Tris-glycerol diluent; TGCCC - Cyclodextrin-cholesterol complex (CCC) + Tris-glycerol diluent; TG15CCC - CCC diluted in isosmotic solution (saline) to semen with 15 minutes of incubation before addition of the Tris-glycerol diluent; EE - egg yolk + ethylene glycol diluent; EECCC - CCC + egg yolk + ethylene glycol diluent; EE15CCC - CCC diluted in isosmotic solution (saline) to semen with 15 minutes of incubation before addition of the egg yolk + ethylene glycol diluent. Fresh semen, after its examination, was submitted to the cryopreservation process and stored in a cryogenic cylinder for 10 days. After thawing, the following analysis were performed: acrosomal integrity, sperm fertilizing capacity through perivitelline membrane of hen egg yolk binding test (MPEY) and analysis of sperm motility and vigor. Besides, techniques of gas and thin layer chromatography were conducted to evaluate the incorporation of cholesterol to the sperm membrane. Data were submitted to Lilliefors and Cochran and Bartlett tests to verify normality and homogeneity of variances, respectively. The characteristics that met the assumptions of these tests were submitted to ANOVA and means were compared by Duncan s test at 5% of probability. When data did not meet the assumptions of normality and homogeneity of variances, the means were compared by Kruskal-Wallis test. Pearson s correlation coefficient was calculated in all features.Addition of cyclodextrin-cholesterol complex did not increase binding of sperm to MPEY (P > 0.05). The EE15CCC treatment was superior to EECCC treatment in maintaining the acrosomal integrity but did not differ from control (EE; P > 0.05). In Tris-glycerol diluent, the values observed in the control treatment were higher (P < 0.05) than values of the other treatments (TGCCC and TG15CCC) in maintaining the acrosomal integrity. There was a negative correlation between the binding assay and acrosomal integrity (r = -0.25) and positive correlation between the binding assay and sperm motility (r = 0.20). The sperm motility and acrosomal integrity were negatively correlated (r = -0.26). In quantitative and qualitative evaluation of cholesterol by chromatographic techniques (gas and thin layer) there was no difference between the samples of semen in different treatments (P > 0.05). Both techniques showed no incorporation of cholesterol to spermatozoa. It was concluding that addition of cholesterol-cyclodextrin complex to the medium did not improve the physical aspects of goat semen, or the sperm binding capacity. Pre-incubation of semen with CCC for 15 minutes before addition of ethylene + egg yolk diluent (EE15CCC) did not enhance the integrity of the acrosome in relation to control (EE). The gas and thin layer chromatography showed, respectively, an efficient method for quantitatively and qualitatively determining the cholesterol present in the cryopreserved goat sperm. The concentration of 1 mg of cholesterol-cyclodextrin complex added to the goat semen was not effective for increasing the concentration of cholesterol in sperm. / O objetivo do presente estudo foi avaliar a capacidade fecundante, integridade acrossomal, além de qualificar e quantificar por técnicas cromatográficas a incorporação do colesterol à membrana plasmática do espermatozoide pela ciclodextrina em diferentes diluentes na criopreservação de espermatozoides caprinos. Foram utilizados quatro machos caprinos das raças Saanen (2) e Parda Alpina (2) seguindo um delineamento inteiramente casualizado, dividido nos seguintes tratamentos: TGcontrole negativo para o diluente a base de Tris-glicerol; TGCCC- Complexo ciclodextrina-colesterol (CCC) + diluente Tris glicerol; TG15CCC- CCC diluído em solução isosmótica ao sêmen (soro fisiológico) com 15 minutos de incubação antes da adição do diluente Tris glicerol; EE- controle negativo para o diluente a base de Gema de ovo + etilenoglicol; EECCC- CCC + diluente Gema de ovo + etilenoglicol; EE15CCC- CCC diluído em solução isosmótica ao sêmen (soro fisiológico) com 15 minutos de incubação antes da adição do diluente Gema de ovo + etilenoglicol. O sêmen fresco, após realização de sua análise física foi submetido ao processo de criopreservação e estocado em botijão de nitrogênio por 10 dias. Após o descongelamento realizou-se análise da integridade acrossomal, capacidade fecundante do espermatozoide por meio do teste de ligação à membrana perivitelina da gema do ovo de galinha (MPGV) e as análises de motilidade progressiva e vigor espermático. Além destes testes foi realizada a avaliação da incorporação do colesterol à membrana plasmática dos espermatozoides pelas técnicas de cromatografia gasosa e de camada delgada. Para verificação da normalidade e homogeneidade dos dados foi empregado, respectivamente, o teste de Lilliefors e Cochran e Bartlett. As características que atenderam as premissas destes testes foram submetidas à ANOVA e as médias foram comparadas pelo teste de Duncan com 5% de probabilidade de erro. Quando as distribuições não atenderam as premissas de normalidade e homogeneidade, as médias foram comparadas pelo teste de Kruskal-Wallis. Realizou-se a correlação simples de Pearson entre todas as características. A adição do complexo ciclodextrina-colesterol não aumentou a ligação dos espermatozoides a MPGV (P>0,05). O tratamento empregando o complexo ciclodextrina-colesterol (CCC) diluído em solução isosmótica ao sêmen com 15 minutos de incubação antes da adição do diluente a base gema de ovo + etilenoglicol (EE15CCC) foi superior aos valores médios do tratamento EECCC na manutenção da integridade acrossomal, porém não diferiu dos valores do tratamento controle para este diluente (EE; P >0,05). No diluente Tris-Glicerol, os valores observados no tratamento controle foi superior (P<0,05) aos valores médios dos demais tratamentos (TGCCC e TG15CCC) na manutenção da integridade acrossomal. Houve correlação negativa entre o teste de ligação e a integridade do acrossoma (r= -0,25) e positiva entre o teste de ligação e a motilidade espermática progressiva (r= 0,20). A motilidade espermática progressiva e a integridade do acrossoma apresentaram correlação negativa (r= -0,26). Na avaliação quantitativa e qualitativa do colesterol pelas técnicas cromatográficas (gasosa e camada delgada) não se verificou diferença entre as amostras do sêmen nos diferentes tratamentos (P>0,05). Ambas as técnicas demonstraram que não houve incorporação do colesterol aos espermatozoides. Conclui-se que o complexo ciclodextrina-colesterol no meio diluidor não melhorou os aspectos físicos do sêmen caprino pós-descongelamento e a capacidade de ligação à membrana perivitelina da gema do ovo de galinha. A pré-incubação do sêmen com o CCC por 15 minutos antes da adição do diluente a base de Etilenoglicol+ gema de ovo (EE15CCC) não proporcionou um aumento na integridade do acrossoma a ponto de diferir dos valores do tratamento controle (EE). A cromatografia gasosa e de camada delgada demonstraram, respectivamente, um eficiente método quantitativo e qualitativo para determinar o colesterol presente no espermatozoide caprino criopreservados. A concentração de 1 mg do complexo ciclodextrina-colesterol adicionada ao sêmen caprino não foi eficaz em aumentar a concentração de colesterol presente no espermatozoide.

Made available in DSpace on 2016-06-07T17:11:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-12. Added 1 bitstream(s) on 2016-06-07T17:16:30Z : No. of bitstreams: 1 000865789.pdf: 2921479 bytes, checksum: ecf5e55db0c7c0922cb7c414afe853c8 (MD5) / As tiazolidinodionas (TZDs) são fármacos agonistas do receptor PPAR-γ (peroxisome proliferator activated receptor) cuja ativação leva a modulação de cerca de 100 genes, o que confere a esta classe de fármacos diversas ações no organismo como o controle de glicemia, do colesterol e atividade antiinflamatória. Entre as TZDs que foram lançadas no mercado apenas a pioglitazona permanece disponível uma vez que suas antecessoras rosiglitazona e troglitazona - apresentaram alta toxicidade. Considerando o vasto potencial terapêutico das TZDs, pesquisadores do Laboratório de Planejamento e Síntese de Fármacos da Universidade Federal de Pernambuco sintetizaram a LYSO-07 ((5-(5-bromo-1H-indol-3-metieleno)-3-(4-cloro-benzil)tiazolidina-2,4-diona), um derivado tiazolidino-2,4-diona cujos ensaios de atividade biológica demonstraram que a nova TZD possui atividade antiinflamatória promissora. No desenvolvimento de novos fármacos é impreterível a avaliação precoce do seu perfil farmacocinético e de sua toxicidade com o intuito de obter informações relevantes à avaliação de risco e ao avanço dos estudos com a nova molécula. No presente trabalho foram avaliados aspectos físico-químicos e o perfil farmacocinético em dose única da nova molécula administrada em ratos Wistar por via intravenosa e por gavagem. Ainda, foram determinados alguns parâmetros bioquímicos para avaliar os efeitos da exposição de ratos Wistar a doses múltiplas de LYSO-07 por 28 dias administrado por gavagem. A LYSO-07 apresentou instabilidade em ambiente aquoso em pH 1,2 e 7,4 e logP acima de 6,5. Os parâmetros farmacocinéticos determinados após administração via intravenosa foram: meia vida de eliminação (t1/2) de 2,3 horas; clearance (Cl) de 33,18 mL/min/Kg e volume de distribuição (Vd) de 6.648,71 mL/kg. A LYSO-07 não foi detectada no plasma dos animais que receberam... / Thiazolidinediones (TZDs) are agonists of PPAR-γ (peroxisome proliferator-activated receptor) receptor whose activation modulates the expression of about 100 genes, which gives this class of drugs several actions in the body as the control of blood glucose, cholesterol and anti - inflammatory activity. Among the TZDs that were released on the market, only pioglitazone remains available once their predecessors - rosiglitazone and troglitazone - showed high toxicity. Considering the vast therapeutic potential of TZDs, researchers from the Laboratory of Drug Synthesis and Planning from the Federal University of Pernambuco synthesized the LYSO-07, a thiazolidine- 2,4-dione derivate whose biological activity assays demonstrated that the new TZD has a promising anti-inflammatory effect. In the development of new drugs the early assessment of their pharmacokinetic profile and toxicity is unavoidable in order to obtain relevant information of the risks of the molecule and contribute to the advancement of the studies of the new molecule. The present study assessed the physicochemical properties and the single dose pharmacokinetic profile of the new molecule in rats administered intravenously and by gavage. Further, some biochemical parameters were measured to assess the effects of the exposure of LYSO-07 ((5-(5-bromo-1H-indol-3-methylene)-3-(4-chlorobenzyl)-thiazolidine-2,4-dione) to rats in multiple doses for 28 days administered by gavage. The LYSO-07 showed instability in an aqueous environment at pH 7.4 and 1.2 and log P above 6.5. Pharmacokinetic parameters determined after IV administration were: elimination half-life (t1/2) of 2.3 hours, clearance (Cl) 33.18 mL/min/kg and volume of distribution (Vd) of 6,648.71 mL/kg. The LYSO 07 could not be detected in the plasma of animals given the compound by gavage (LOQ=78.125 ng/mL). The 28 days of exposure of animals at a dose of ...

Submitted by Renato Miani Goncalves null (renatomiani@gmail.com) on 2016-08-05T18:39:41Z No. of bitstreams: 1 Tese - Renato Goncalves.pdf: 4535061 bytes, checksum: ea8e64f761cc44656f8a8018ef7c2d85 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-08-10T16:44:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 goncalves_rm_dr_araiq.pdf: 4535061 bytes, checksum: ea8e64f761cc44656f8a8018ef7c2d85 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-10T16:44:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 goncalves_rm_dr_araiq.pdf: 4535061 bytes, checksum: ea8e64f761cc44656f8a8018ef7c2d85 (MD5) Previous issue date: 2016-07-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O sudeste brasileiro é a região mais populosa do país, estando nele o estuário de Santos-São Vicente, com aproximadamente 1,5 milhões de habitantes. Localizado nesse complexo estuarino, está o Porto marítimo mais movimentado da América Latina e um dos mais importantes pólos petroquímicos do país. Nessa região o tratamento de esgoto sanitário é praticamente inexistente (cobrindo aproximadamente 20% de toda população), não havendo estudos sobre a ocorrência ambiental e a dinâmica de estrógenos ou outros alteradores endócrinos no local. Por outro lado, frequentemente os estudos ambientais existentes sobre a ocorrência de contaminantes, negligenciam a confiabilidade analítica. Frente à esse cenário, o presente estudo apresenta a determinação de estrógenos (17α–etinilestradiol (EE2), 17β-estradiol (E2) e estriol (E3)) em água do mar com alta confiabilidade, utilizando método baseado em extração em fase sólida (SPE) e análise por HPLC-FLD, com o uso de ferramentas estatísticas para a modelagem da curva analítica, avaliação do efeito matriz e estudo de conservação dos cartuchos SPE após a eluição da amostra. O processo de validação analítica mostrou valores adequados de recuperação (76-94%, para diferentes concentrações de EE2, E2 e E3), precisão (coeficiente de variação menor que 20%) e seletividade. Os limites de deteção do método para o EE2, E2 e E3 foram respectivamente de 9,7, 2,3 e 4,3 ng L-1. Cinco curvas analíticas para cada composto foram utilizadas para avaliar o efeito matriz, sendo as soluções padrões preparadas em solvente (acetonitrila), água marinha artificial (S=30) e agua marinha, sendo para essas últimas, os padrões adicionados hora antes da extração, hora após a eluição da amostra no cartucho. Para o preparo de cada curva analítica foram utilizados seis concentrações diferentes dos padrões, sendo as curvas analíticas refeitas para cada amostragem realizada. O modelo teve por base a regressão linear, utilizando ajuste por mínimos quadrados, sendo o mesmo avaliado por análise de variância (ANOVA). Os resultados mostraram efeito matriz para todos os analitos. A conservação dos analitos nos cartuchos SPE foram avaliados para 6; 22; 29; 55 e 80 dias, e os resultados evidenciaram que não houve diferença significativa entre eles. Foram realizadas três amostragens no estuário de Santos-São Vicente, em março de 2014 (12 pontos amostrais de superfície), e fevereiro e junho de 2015 (com 15 pontos amostrais de superfície e 6 pontos amostrais de águas de fundo, na baía de Santos). Os valores de concentração para o estriol (mais frequentemente encontrado) variaram entre ND-354 ng L-1, para o 17β-estradiol de nd-18 ng L-1 enquanto o 17α–etinilestradiol não foi quantificado em nenhuma das amostras. Não foram observadas diferenças entre as amostragens nas diferentes estações do ano, sendo as maiores variações de concentrações observadas no âmbito de diferentes comportamentos de maré (sizígia e quadratura). No geral, os valores de concentrações encontrados para o estriol e estradiol podem acarretar riscos aos organismos aquáticos quando os mesmos são expostos à esses alteradores por longos períodos. / Southeast is the Brazilian most populated region. Santos-São Vicente estuary, located there, includes c.a. 1.5 million inhabitants, one of the most important Brazilian petrochemical sites and the bigger harbor from Latin America. In this region, the sewage treatment is almost inexistent (covers c.a. 20% of all population), nevertheless there are not studies about the occurrence and environmental dynamics of estrogens or others endocrine disruptors there. On the other hand, the analytical reliability in environmental studies have been frequently neglected. Thus, this work presents a reliability evaluation for estrogens (EE2, E2 and E3) determination in marine water, using a method based in solid phase extraction (SPE) and HPLC-FLD analysis, statistical tools were used to accomplish the calibration curve, storage time of SPE cartridges after sample elution and matrix effects. The analytical validation process showed adequate selectivity, recovery (76-94%, for different concentrations of EE2, E2 and E3) and precision (RSD below 20%). The method detection limit for EE2, E2 and E3 was 10, 2 and 4 ng L-1, respectively. Five analytical curves for each compound were used to evaluate the matrix effect wherein the standard solutions were prepared in solvent (acetonitrile, or on the SPE extract from artificial seawater (S=30) or in natural seawater). Additionally, for artificial and natural seawater, the standards were spiked to matrix before the SPE. All standard solution contained all the studied estrogens, at the same concentration, for each curve it was used six standards concentrations. Model fitting was done by linear regression models, using ANOVA to evaluate the fittings. The results showed matrix effects for all analytes, thus matrix-matched (natural seawater) analytical curves were used at the following method validation steps. SPE cartridges storage time (after sample loading) was studied for 6, 22, 29, 55 and 80 storage days, data demonstrated no significant differences for these storage times. Three sampling was made at Santos estuary, in march 2014, february 2015 and june 2015, with 15 samples collected each. Estriol (E3) concentrations ranging ND-354 ng L-1, estradiol (E2) ND-18 ng L-1 while 17α–ethynylestradiol (EE2) were not detectable in any samples (below method LOQ). Overall, estriol concentration are above no-observed-effect concentrations from long-term exposition, which can lead to risk for aquatic organisms.

Submitted by LILIAN CHERUBIN CORREIA null (lilian_cherubin@hotmail.com) on 2016-09-02T14:12:24Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Lilian_Cherubin_Correia_2016_ficha e aprovação.pdf: 3233262 bytes, checksum: 3421e95ec88996d4b21b559ade72faf5 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-09-05T21:08:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 correia_lc_me_araiq.pdf: 3233262 bytes, checksum: 3421e95ec88996d4b21b559ade72faf5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-05T21:08:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 correia_lc_me_araiq.pdf: 3233262 bytes, checksum: 3421e95ec88996d4b21b559ade72faf5 (MD5) Previous issue date: 2016-08-12 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Separações utilizando cromatografia líquida bidimensional têm atraído grande interesse nas últimas décadas devido ao seu elevado potencial no poder de separação para análises de misturas complexas. Apesar do uso de colunas ortogonais e da multiplicação teórica da capacidade de picos quando essa técnica é utilizada, uma questão permanece: "As técnicas bidimensionais são realmente melhores do que as monodimensionais para análises de extratos vegetais?". Esta questão motivou o presente trabalho, que consistiu em comparar o desempenho entre LC e LC×LC, utilizando amostras de folhas de Casearia sylvestris, também conhecida como "guaçatonga", uma árvore amplamente utilizada na medicina popular brasileira por apresentar diversas atividades biológicas. Além disso, devido ao grande volume de resíduos gerados em LC, a substituição de solventes convencionais por etanol (EtOH), um candidato menos tóxico e biodegradável, foi implementada. A parte mais desafiadora de qualquer cromatografia multidimensional é o desenvolvimento do método cromatográfico, pelo grande número de variáveis que devem atuar de forma integrada em uma única análise. Duas estratégias de desenvolvimento foram propostas neste trabalho. A primeira foi dividida em 4 etapas, que consistiram em selecionar o par de colunas mais ortogonal dentre as combinações disponíveis; o desenvolvimento de um método para a 1D utilizando planejamento experimental; seguido do estudo das melhores condições para a 2D (2tc, tempo de modulação e tre, o tempo de reequilíbrio após cada modulação) e por último, a escolha da melhor forma de gradiente para a 2D. A segunda estratégia consistiu em primeiramente, selecionar o par de colunas mais ortogonais dentre as combinações disponíveis; depois otimizar por planejamento experimental as duas dimensões simultaneamente e finalmente a otimização da melhor forma de gradiente para a 2D. As duas estratégias se mostraram eficazes para desenvolvimento de método bidimensional abrangente, porém a segunda estratégia mostrou-se mais rápida, devido ao menor número de experimentos necessários. Porém, o uso de etanol mostrou-se inviável para as análises rápidas e com altas vazões da 2D, devido à sua elevada viscosidade e seu uso foi descontinuado. Finalmente, com o método bidimensional completamente otimizado, este foi comparado com dois métodos em 1D-LC previamente descritos na literatura para C. sylvestris e utilizando-se a métrica de capacidade de picos, um melhor desempenho na técnica de LC×LC pôde ser observado. Concluiu-se, portanto, que a performance observada em LC×LC é significantemente melhor do que foi alcançada em 1D-LC, porém seu uso dependerá do objetivo do estudo, pois essa melhoria foi alcançada em tempos de análise muito mais longos (aproximadamente 4x) e com maior geração de resíduos (aproximadamente 30x), ou de avanços tecnológicos na técnica. / Bidimensional liquid chromatographic separations have attracted intense interest over the past decade based on the potential improvements in resolving power they offer for analysis of complex samples. Despite the use of orthogonal columns and the theoretical multiplication of peak capacity from both dimensions, one question remains: “Are bidimensional techniques superior to monodimensional ones for analysis of vegetal extracts?”. This question led to the purpose of the present work, that was to compare the performance between LC and LC×LC, using leaves from Casearia sylvestris, a widely used tree in Brazilian folk medicine by its biological activities. Furthermore, due to the large volume of waste generated by LC, the replacement of conventional solvents by ethanol (EtOH), a less toxic and biodegradable alternative solvent was chosen. The most challenging issue of any multidimensional chromatography is the method development, since the large number of interacting parameters that must work together in a single run. Two strategies for method development were used in this work. The first one was divided into 4 steps: experiments were carried out to select the most orthogonal pair of columns, 1D method development using design of experiments, another design of experiments for 2D conditions was proposed (2tc, modulation time and tre, re-equilibration time after each modulation) and aware of the best conditions for both dimensions, 2D gradient types were evaluated. The second strategy consisted of selecting the most orthogonal pair of columns, optimization of both dimensions simultaneously by design of experiments and finally evaluation of 2D gradient type. Both strategies were efficient for comprehensive bidimensional method development, but the second one was found to be faster, due to the lesser number of required experiments. Nevertheless, using ethanol as mobile phase proved to be impractical for fast and high flow rates analysis of 2D due to its high viscosity and its use as mobile phase was rejected. Finally, a comparison between the fully optimized bidimensional chromatographic method and two 1D-LC methods previously described in the literature for C. sylvestris were made. Using peak capacity as a metric of comparison, a higher performance was achieved for LC×LC. This study concluded that LC×LC provides a higher performance than 1D-LC, however, its use will depend of the analysis purpose because this gain in performance was achieved with longer analysis times (approximately 4x) and greater generation of residues (approximately 30x), or technological improvements.

Salvia officinalis (Lamiaceae), conhecida popularmente como sálvia, tem sido muito utilizada no sul do Brasil como condimento nos alimentos, tintura hidroalcoólica e chá para o tratamento de vários distúrbios de saúde. As propriedades dessa planta são estudadas por apontar possíveis mecanismos de ação antioxidante e antitumoral. Neste trabalho, o extrato hidroalcoólico e aquoso de sálvia foram analisados quimicamente por meio de cromatografia gasosa acoplada a espectrômetro de massas (GC-MS) e electrospray de alta resolução acoplada a espectrômetro de massas (ESI-QTOF MS/MS) em modo negativo. A identificação química mostrou a presença de ácidos como caféico, rosmarínico, málico, succínico, tartárico, cítrico, ursólico e compostos como luteolina-7-O-glucoronide, eucaliptol, β-tujona, β-cariofileno, α-cariofileno, α- tujona, cânfora viridiflorol, mannol, rosmanol e seus isômeros metilcarnosato e ácido 12-metoxicarnosinico. Os extratos apresentaram compostos polifenólicos com capacidade de varrer os radicais 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH•) e 2,2’- azino-bis(3-etilbenzotiazolina-6-ácido sulfônico) (ABTS•+), além de atividade catalase (CATlike) e superóxido dismutase (SOD-like). Ambos os extratos apresentaram menor citotoxicidade em linhagens não tumorais (HeK-293 e MRC-5) e seletividade para linhagens tumorais (Hep-2, HeLa, A-549, HT-29, A-375 e HepG2). Além disso, verificou-se que o aumento do tempo de exposição ao extrato hidroalcoólico diminuiu a viabilidade em linhagens tumorais. Foram observadas alterações morfológicas por coloração de Giemsa e a avaliação da apoptose com anexina V e iodeto de propídeo mostraram a maioria das células tumorais em estágios finais do processo de apoptose e necrose após 24h de tratamento em ambos os extratos. Sugere-se que o extrato de Salvia officinalis (L.) possui atividade biológica em células tumorais, podendo ser objetivo de mais estudos com a finalidade de comprovar sua eficácia como possível agente para o tratamento do câncer. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2015-02-12T12:00:17Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Charlene Silvestrin Celi Garcia.pdf: 2151872 bytes, checksum: 7bfd73bdf5fd152982466e3f75044d21 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-12T12:00:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Charlene Silvestrin Celi Garcia.pdf: 2151872 bytes, checksum: 7bfd73bdf5fd152982466e3f75044d21 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul, FAPERGS / Salvia officinalis (Lamiaceae), popularly known as sage, has been used in south of Brazil as a condiment in foods, as tincture and tea for the treatment various health disorders. The properties of this plant have been studied and suggest possible mechanisms of antioxidant and antitumor action. Here, the sage hydroalcoholic and aqueous extract were chemically analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) and by high-resolution electrospray ionization mass spectrometry (ESI-HRMS) in negative mode. The chemical identification showed the presence of acids as caffeic, rosmarinic, malic, succinic, tartaric, citric, ursolic and compouns like luteolin-7-O-glucoronide, eucalyptol, β-thujone, β-caryophyllene, α-caryophyllenen and α-thujone, camphor, viridiflorol, mannol, rosmanol and its isomers methylcarnosate and 12-methoxycarnosinic acid. The extracts showed the content of polyphenolic compounds, ability to scavenge the free radical 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH•) and 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS•+), moreover catalase (CAT-like) and superoxide dismutase (SOD-like) activity. Both extracts showed lower cytotoxicity in non-tumor lines (HEK-293 and MRC-5) and selectivity for tumor cell lines (Hep-2, HeLa, A-549, HT-29, A-375 e HepG2). Furthermore, it was found that increasing the treatment exposure time of the hydroalcoholic extract decreases the tumor cell viability. Morphological changes by giemsa were observed and staining for annexin V and propidium iodide showed majority of tumor cells at late stages of the apoptotic process and necrosis after 24h treatment with both extracts. The results of this study suggest that the extract of Salvia officinalis (L.) has biological activity against tumor cell and may be the objective of further studies in order to prove its effectiveness as a possible agent for the treatment of cancer.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:16:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EdnaFS.pdf: 447291 bytes, checksum: a8a04d8832020272ded220816f9ad503 (MD5) Previous issue date: 2008-09-23 / Alcohol is one of the few psychotropic drugs that their consumption has admitted legally and sometimes encouraged by the society. Studies show alcohol as the highest consumption of drugs among young people and society in general, probably because of its availability and easy access. The abuse causes public health problems, which was closely related to the violence, socioeconomic problems and the high number of automobile accidents. Transit is one of the main sectors affected by the effects of alcohol, observing a high incidence in the studies. About half of automobile accidents occurs after the consumption of alcoholic beverage, and the vast majority of cases related to high concentrations of alcohol in the bloodstream. The relationship of drunk with traffic accidents is in fact evident everywhere in the world, including Brazil, where studies have shown a high relationship between alcohol consumption and traffic accidents. This study determined the alcohol in fatal victims of traffic accidents in the state of Rio Grande do Norte and established the profile of this population compared with those found in Brazil and other countries. Samples of blood of ethanol added to fulfillment of the standardization of chromatographic conditions and procedures for the analysis, being employed in the determination of alcohol in blood samples of 277 victims of traffic accidents, collected at the Institute of Scientific Technical Police of Rio Grande do North (ITEP) in the year 2007. The blood alcohol level was determined in these samples correlated with the sex, age and marital status of the victim and the location, day of week and month when the accident occurred, is doing a statistical analysis and outlining a profile of the victims of an accident at transit in the state of Rio Grande do Norte. The parameters of standardization studied ensured the quality of the analytical method and, consequently, to obtain reliable laboratory results. Being given the best temperature for injector (150 ?C), detector (250 ?C) and column (50 ?C) with a flow of gas in the column of 2mL/minutos and analysis of time of 12 minutes. The method was linear in the range of 0.01 to 3.2 g / L (r2 = 0.9989) with average recovery of 100.2% and precision with coefficient of variation less than 15%. The analysis carried out on victims of fatal road traffic accidents, ethanol detected in the blood in 66.43% of the victims and these, 96% showed concentration &#8805; 0.2 g / L, 87.73% of victims were male, while 12.27% female. The younger age group (1535 years) was the most involved (52,35%) and most single (55.60%). The accidents occurred with greater prevalence in the day on Monday (27%) followed by Sunday (24,19%) and Saturday (15,52%) and it was found that the prevalence of injuries varied between the different months of the year, and in February (14.4%) and April (10.47%) the months that had a higher number of accidents, however this oscillation showed no statistically significant difference. Also no significant difference was observed between the tracks of concentration found in men and women. The standardized method showed to be efficient, given satisfactorily to the goals of this work, and the high levels of alcohol found in victims of fatal road traffic accidents are consistent with several studies of literature, and the profile of the victim also supported by presenting in its most young adults, male and single / O ?lcool ? uma das poucas drogas psicotr?picas que tem seu consumo admitido legalmente e, ?s vezes, incentivado pela sociedade. Estudos mostram o ?lcool como a droga de maior consumo entre os jovens e na sociedade de forma geral, provavelmente devido ? sua disponibilidade e f?cil acesso. O uso abusivo provoca problemas de sa?de p?blica, estando ele estreitamente relacionado com a viol?ncia, problemas s?cioecon?micos e com o elevado n?mero de acidentes automobil?sticos. O tr?nsito ? um dos principais setores afetados pelos efeitos do ?lcool, observandose alta incid?ncia nos estudos realizados. Aproximadamente metade dos acidentes automobil?sticos ocorre ap?s o consumo de bebida alco?lica, estando a grande maioria dos casos relacionados com altas concentra??es de ?lcool na circula??o sangu?nea. A rela??o da embriagues com os acidentes de tr?nsito ? fato not?rio em toda parte do mundo, inclusive no Brasil, onde estudos demonstraram uma alta rela??o entre o consumo de ?lcool e os acidentes de tr?nsito. Este trabalho determinou a alcoolemia em v?timas fatais de acidente de tr?nsito no Estado do Rio Grande do Norte e estabeleceu o perfil desta popula??o comparando com aqueles encontrados no Brasil e em outros pa?ses. Foram utilizadas amostras de sangue adicionadas de etanol para realiza??o da padroniza??o das condi??es cromatogr?ficas e dos procedimentos de an?lise, sendo empregado na determina??o da alcoolemia em amostras de sangue de 277 v?timas de acidente de tr?nsito, coletadas no Instituto T?cnico Cient?fico de Pol?cia do Rio Grande do Norte (ITEP) no ano de 2007. O n?vel de alcoolemia determinado nestas amostras foi correlacionado com o sexo, idade e estado civil da v?tima e com a localiza??o, dia da semana e m?s em que os acidentes ocorreram, fazendose uma an?lise estat?stica e tra?ando um perfil das v?timas de acidente de tr?nsito no estado do Rio Grande do Norte. Os par?metros de padroniza??o estudados asseguraram a qualidade do m?todo anal?tico e, conseq?entemente, a obten??o de resultados laboratoriais confi?veis. Sendo determinado as melhores temperaturas para injetor (150?C), detector (250?C) e coluna (50?C), com um fluxo de g?s na coluna de 2mL/minutos e tempo de an?lise de 12 minutos. O m?todo foi linear no intervalo de 0,01 a 3,2 g/L (r2 = 0,9989), com recupera??o m?dia de 100,2% e precis?o com coeficiente de varia??o menor que 15%. As an?lises realizadas em v?timas fatais de acidente de tr?nsito, detectaram etanol no sangue em 66,43% das v?timas e destas, 96% apresentaram concentra??o &#8805; 0,2 g/L; 87,73% das v?timas eram do sexo masculino, enquanto que 12,27% do sexo feminino. A faixa et?ria jovem (1535 anos) foi a mais envolvida (52,35%) sendo a maioria solteira (55,60%). Os acidentes aconteceram com maior preval?ncia nos dias de segundafeira (27%), seguido do domingo (24,19%) e s?bado (15,52%) e constatouse que a preval?ncia de acidentes oscilou entre os diferentes meses do ano, sendo fevereiro (14,4%) e abril (10,47%) os meses que apresentaram um maior n?mero de acidentes, contudo esta oscila??o n?o apresentou diferen?a estatisticamente significativa. Tamb?m n?o foi observado diferen?a significativa entre as faixas de concentra??o encontradas nos homens e nas mulheres. O m?todo padronizado demonstrouse eficiente, atendendo satisfatoriamente aos objetivos deste trabalho; e os n?veis elevados de alcoolemia encontrados nas v?timas fatais de acidente de tr?nsito s?o coincidentes com v?rios estudos da literatura, sendo o perfil da v?tima tamb?m compat?vel, apresentandose em sua maioria adultos jovens, do sexo masculino e solteiros