Only discovered about 20 years ago, the structure of the eukaryotic vault particle has been studied extensively, but the function has yet to be determined. Vault numbers are up regulated in many types of cancer cells that are treated with chemotherapy agents and it is thought that they may act to transport chemotherapy drugs out of such cells, leading to multi-drug resistance (MDR). To determine a possible role of the vault particle in MDR, the goal of this research was to examine one of the functional vault proteins, vault poly(ADP)ribose (VPARP) for interactions with other proteins. Two forms of small cell lung cancer cells were used; GLC4/S which do not exhibit MDR and the MDR cells GLC4/ADR, which are cultured with the chemotherapy drug doxorubicin. Both cell cultures were subjected to a subcellular fractionation followed by gentle immunoprecipitation with an antibody to VPARP. Immunoprecipitated proteins interacting with VPARP were only observed in GLC4/ADR cells, as seen on a PAGE gel. This sample was taken to Monarch Life Sciences and analyzed by mass spectrometry. One interacting protein was found to be NALP1 pyrin domain (PYD), a member of the death domain family of proteins which is involved in inflammation and apoptosis. The interaction of VPARP with NALP1, which only occurred in MDR cells, suggests an exciting, previously unreported possibility – that VPARP binding may inhibit NALP 1-stimulated apoptosis when MDR is occurring. Future studies are needed to examine if levels of NALP1 vary in GLC4 cells with and without treatment with doxorubicin and in normal lung cells. The cellular location (nucleus or cytoplasm) of the interactions should also be identified. Furthermore, immunoprecipitation of proteins interacting with NALP1 should include VPARP and perhaps identify other proteins interacting in the signaling pathways under MDR and normal culture conditions. This information may contribute insight into the function of VPARP and vaults within the cell. / Department of Biology

OBJETIVO: avaliar através da citopatologia, associada a técnica AgNOR, o reflexo da cessação do fumo sobre a velocidade de proliferação das células epiteliais descamadas de borda de língua (BL) e assoalho de boca (AB), ao longo do tempo. MÉTODOS: Foram incluídos na amostra inicial 138 indivíduos. As coletas foram realizadas em um momento inicial (T1), após 8-15 meses (T2) e após 16-30 meses (T3). Os participantes foram divididos em três grupos de acordo com os seguintes critérios: Grupo Controle (GC) (n=71): indivíduos atendidos na Faculdade de Odontologia da UFRGS, que nunca fumaram, e que ingeriam até 30g de álcool por semana. Grupo Abandono de Fumo (GAF) (n=26): indivíduos em acompanhamento no Grupo dos Fumantes do Hospital de Clínicas de Porto Alegra (HCPA), que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que ao longo do tempo cessaram o hábito tabágico. Alcoolistas ou não. Grupo Fumo (GF) (n=41): indivíduos em acompanhamento no Grupo dos Fumantes do HCPA, que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que não cessaram o hábito tabágico ao longo da pesquisa. Alcoolistas ou não. As amostras foram submetidas à técnica de AgNOR e quantificadas por três examinadores previamente calibrados. A média de AgNOR por núcleo (mAgNOR) e a porcentagem de células com mais de 1, 2 E 3 AgNORs (pAgNOR>1, pAgNOR>2 e pAgNOR>3) foram calculados nas 50 primeiras células, nucleadas, não sobrepostas, e bem distendidas. RESULTADOS: ao final dos tempos experimentais os grupos tinham 9 individuos em cada. Não foram observada diferença estatística do mAgNOR e pAgNOR>3 entre os grupos avaliados, nos diferentes tempos em ambos os sítios. Foi observada uma tendência à diminuição na velocidade de proliferação, no tempo intermediário, e uma tendência a aumentar no tempo final, em todos os grupos Em T1, os grupos expostos ao fumo (GAF e GF) apresentavam velocidade de proliferação mais elevada, se comparados ao GC no BL. No AB o GC apresenta valores maiores que GAF. Em T2, os indivíduos do GAF apresentaram uma redução da taxa de proliferação celular, em ambos os sítios analisados, maior do que GC e GF. Em T3 os valores retornam ao equilíbrio, exibindo valores maiores que os em T1. No BL o pAgNOR>1 e 2 mostrou uma diferença estatística entre os grupos em T1 e T2. O sítio AB apresentou diferença estatística no pAgNOR>1, em T2, mostrando que indivíduos do GC e GAF apresentam velocidade de proliferação menor quando comparados ao GF. CONCLUSÕES: O estudo mostrou que o GAF apresenta maior flutuação, de mAgNOR, que o GC e GF, ao longo do tempo. Estudo futuros ampliando o tempo de controle, controlando os agentes carcinógenos, e observando indivíduos com características populacionais seriam convenientes para buscar a padronização deste modelo de prevenção de câncer. / OBJECTIVE: evaluate, through cytopathology associated with AgNOR technique, the reflection of smoking cessation on the speed of proliferation of desquamated epithelial cells of tongue edge (TE) and mouth floor (MF) over time. METHODS: We included in the initial sample 138 individuals. Samples were collected at an early time (T1), after 8-15 months (T2) and after 16-30 months (T3). Participants were divided into three groups, according to the following criteria: control group (CG) (n = 71): patients seen at the Faculty of Dentistry at UFRGS, who had never smoked and who drank till 30g of alcohol a week. Abandonment group Smoke (AS) (n = 26): individuals in monitoring the Group of Smokers of Hospital de clínicas dePorto Alegre (HCPA), who smoked at the time of the initial work, and that over time ceased the smoking habit. Alcoholic or not. Tobacco group (TG) (n = 41): follow-up individuals in the group of smokers HCPA, who smoked at the time of the initial work, and that did not stop the smoking habit during the research. Alcoholic or not. Samples were subjected to AgNOR technique and quantified for three calibrated examiners. The average AgNOR per core (Magnor) and the percentage of cells with 1, 2 and 3 AgNOR (pAgNOR> 1, pAgNOR> 2 and pAgNOR> 3) were calculated on the first 50 cells, nucleated, nonoverlapping, and well- distended. RESULTS: At the end of the experimental time groups had 9 individuals in each. There were no statistical difference of mAgNOR and pAgNOR> 3 between the groups in different times on both sites. A tendency to decrease in the proliferation rate was observed, at the intermediate time, and a trend of increase in the end time for all groups in T1, the smoke exposed groups (AS and TG) showed higher proliferation rate, compared the CG in the TE. MF in the CG presents values greater than AS. In T2, AS individuals showed a reduction in cell proliferation rate in both sites evaluated greater than TG and CG. In T3 values return to equilibrium, exhibiting values greater than the T1. TE in the pAgNOR> 1 and 2 showed a statistical difference between groups in T1 and T2. The site MF showed statistical difference in pAgNOR> 1, T2, showing that CG and the AS show less proliferation of speed when compared to the TG. CONCLUSIONS: The study showed that the AS has greater fluctuation mAgNOR that CG and TG, over time. Future study extending the time control, controlling carcinogens, and observing individuals with population characteristics would be convenient to seek standardization of this cancer prevention model.

OBJETIVO: avaliar através da citopatologia, associada a técnica AgNOR, o reflexo da cessação do fumo sobre a velocidade de proliferação das células epiteliais descamadas de borda de língua (BL) e assoalho de boca (AB), ao longo do tempo. MÉTODOS: Foram incluídos na amostra inicial 138 indivíduos. As coletas foram realizadas em um momento inicial (T1), após 8-15 meses (T2) e após 16-30 meses (T3). Os participantes foram divididos em três grupos de acordo com os seguintes critérios: Grupo Controle (GC) (n=71): indivíduos atendidos na Faculdade de Odontologia da UFRGS, que nunca fumaram, e que ingeriam até 30g de álcool por semana. Grupo Abandono de Fumo (GAF) (n=26): indivíduos em acompanhamento no Grupo dos Fumantes do Hospital de Clínicas de Porto Alegra (HCPA), que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que ao longo do tempo cessaram o hábito tabágico. Alcoolistas ou não. Grupo Fumo (GF) (n=41): indivíduos em acompanhamento no Grupo dos Fumantes do HCPA, que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que não cessaram o hábito tabágico ao longo da pesquisa. Alcoolistas ou não. As amostras foram submetidas à técnica de AgNOR e quantificadas por três examinadores previamente calibrados. A média de AgNOR por núcleo (mAgNOR) e a porcentagem de células com mais de 1, 2 E 3 AgNORs (pAgNOR>1, pAgNOR>2 e pAgNOR>3) foram calculados nas 50 primeiras células, nucleadas, não sobrepostas, e bem distendidas. RESULTADOS: ao final dos tempos experimentais os grupos tinham 9 individuos em cada. Não foram observada diferença estatística do mAgNOR e pAgNOR>3 entre os grupos avaliados, nos diferentes tempos em ambos os sítios. Foi observada uma tendência à diminuição na velocidade de proliferação, no tempo intermediário, e uma tendência a aumentar no tempo final, em todos os grupos Em T1, os grupos expostos ao fumo (GAF e GF) apresentavam velocidade de proliferação mais elevada, se comparados ao GC no BL. No AB o GC apresenta valores maiores que GAF. Em T2, os indivíduos do GAF apresentaram uma redução da taxa de proliferação celular, em ambos os sítios analisados, maior do que GC e GF. Em T3 os valores retornam ao equilíbrio, exibindo valores maiores que os em T1. No BL o pAgNOR>1 e 2 mostrou uma diferença estatística entre os grupos em T1 e T2. O sítio AB apresentou diferença estatística no pAgNOR>1, em T2, mostrando que indivíduos do GC e GAF apresentam velocidade de proliferação menor quando comparados ao GF. CONCLUSÕES: O estudo mostrou que o GAF apresenta maior flutuação, de mAgNOR, que o GC e GF, ao longo do tempo. Estudo futuros ampliando o tempo de controle, controlando os agentes carcinógenos, e observando indivíduos com características populacionais seriam convenientes para buscar a padronização deste modelo de prevenção de câncer. / OBJECTIVE: evaluate, through cytopathology associated with AgNOR technique, the reflection of smoking cessation on the speed of proliferation of desquamated epithelial cells of tongue edge (TE) and mouth floor (MF) over time. METHODS: We included in the initial sample 138 individuals. Samples were collected at an early time (T1), after 8-15 months (T2) and after 16-30 months (T3). Participants were divided into three groups, according to the following criteria: control group (CG) (n = 71): patients seen at the Faculty of Dentistry at UFRGS, who had never smoked and who drank till 30g of alcohol a week. Abandonment group Smoke (AS) (n = 26): individuals in monitoring the Group of Smokers of Hospital de clínicas dePorto Alegre (HCPA), who smoked at the time of the initial work, and that over time ceased the smoking habit. Alcoholic or not. Tobacco group (TG) (n = 41): follow-up individuals in the group of smokers HCPA, who smoked at the time of the initial work, and that did not stop the smoking habit during the research. Alcoholic or not. Samples were subjected to AgNOR technique and quantified for three calibrated examiners. The average AgNOR per core (Magnor) and the percentage of cells with 1, 2 and 3 AgNOR (pAgNOR> 1, pAgNOR> 2 and pAgNOR> 3) were calculated on the first 50 cells, nucleated, nonoverlapping, and well- distended. RESULTS: At the end of the experimental time groups had 9 individuals in each. There were no statistical difference of mAgNOR and pAgNOR> 3 between the groups in different times on both sites. A tendency to decrease in the proliferation rate was observed, at the intermediate time, and a trend of increase in the end time for all groups in T1, the smoke exposed groups (AS and TG) showed higher proliferation rate, compared the CG in the TE. MF in the CG presents values greater than AS. In T2, AS individuals showed a reduction in cell proliferation rate in both sites evaluated greater than TG and CG. In T3 values return to equilibrium, exhibiting values greater than the T1. TE in the pAgNOR> 1 and 2 showed a statistical difference between groups in T1 and T2. The site MF showed statistical difference in pAgNOR> 1, T2, showing that CG and the AS show less proliferation of speed when compared to the TG. CONCLUSIONS: The study showed that the AS has greater fluctuation mAgNOR that CG and TG, over time. Future study extending the time control, controlling carcinogens, and observing individuals with population characteristics would be convenient to seek standardization of this cancer prevention model.

OBJETIVO: avaliar através da citopatologia, associada a técnica AgNOR, o reflexo da cessação do fumo sobre a velocidade de proliferação das células epiteliais descamadas de borda de língua (BL) e assoalho de boca (AB), ao longo do tempo. MÉTODOS: Foram incluídos na amostra inicial 138 indivíduos. As coletas foram realizadas em um momento inicial (T1), após 8-15 meses (T2) e após 16-30 meses (T3). Os participantes foram divididos em três grupos de acordo com os seguintes critérios: Grupo Controle (GC) (n=71): indivíduos atendidos na Faculdade de Odontologia da UFRGS, que nunca fumaram, e que ingeriam até 30g de álcool por semana. Grupo Abandono de Fumo (GAF) (n=26): indivíduos em acompanhamento no Grupo dos Fumantes do Hospital de Clínicas de Porto Alegra (HCPA), que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que ao longo do tempo cessaram o hábito tabágico. Alcoolistas ou não. Grupo Fumo (GF) (n=41): indivíduos em acompanhamento no Grupo dos Fumantes do HCPA, que fumavam no momento do inicial do trabalho, e que não cessaram o hábito tabágico ao longo da pesquisa. Alcoolistas ou não. As amostras foram submetidas à técnica de AgNOR e quantificadas por três examinadores previamente calibrados. A média de AgNOR por núcleo (mAgNOR) e a porcentagem de células com mais de 1, 2 E 3 AgNORs (pAgNOR>1, pAgNOR>2 e pAgNOR>3) foram calculados nas 50 primeiras células, nucleadas, não sobrepostas, e bem distendidas. RESULTADOS: ao final dos tempos experimentais os grupos tinham 9 individuos em cada. Não foram observada diferença estatística do mAgNOR e pAgNOR>3 entre os grupos avaliados, nos diferentes tempos em ambos os sítios. Foi observada uma tendência à diminuição na velocidade de proliferação, no tempo intermediário, e uma tendência a aumentar no tempo final, em todos os grupos Em T1, os grupos expostos ao fumo (GAF e GF) apresentavam velocidade de proliferação mais elevada, se comparados ao GC no BL. No AB o GC apresenta valores maiores que GAF. Em T2, os indivíduos do GAF apresentaram uma redução da taxa de proliferação celular, em ambos os sítios analisados, maior do que GC e GF. Em T3 os valores retornam ao equilíbrio, exibindo valores maiores que os em T1. No BL o pAgNOR>1 e 2 mostrou uma diferença estatística entre os grupos em T1 e T2. O sítio AB apresentou diferença estatística no pAgNOR>1, em T2, mostrando que indivíduos do GC e GAF apresentam velocidade de proliferação menor quando comparados ao GF. CONCLUSÕES: O estudo mostrou que o GAF apresenta maior flutuação, de mAgNOR, que o GC e GF, ao longo do tempo. Estudo futuros ampliando o tempo de controle, controlando os agentes carcinógenos, e observando indivíduos com características populacionais seriam convenientes para buscar a padronização deste modelo de prevenção de câncer. / OBJECTIVE: evaluate, through cytopathology associated with AgNOR technique, the reflection of smoking cessation on the speed of proliferation of desquamated epithelial cells of tongue edge (TE) and mouth floor (MF) over time. METHODS: We included in the initial sample 138 individuals. Samples were collected at an early time (T1), after 8-15 months (T2) and after 16-30 months (T3). Participants were divided into three groups, according to the following criteria: control group (CG) (n = 71): patients seen at the Faculty of Dentistry at UFRGS, who had never smoked and who drank till 30g of alcohol a week. Abandonment group Smoke (AS) (n = 26): individuals in monitoring the Group of Smokers of Hospital de clínicas dePorto Alegre (HCPA), who smoked at the time of the initial work, and that over time ceased the smoking habit. Alcoholic or not. Tobacco group (TG) (n = 41): follow-up individuals in the group of smokers HCPA, who smoked at the time of the initial work, and that did not stop the smoking habit during the research. Alcoholic or not. Samples were subjected to AgNOR technique and quantified for three calibrated examiners. The average AgNOR per core (Magnor) and the percentage of cells with 1, 2 and 3 AgNOR (pAgNOR> 1, pAgNOR> 2 and pAgNOR> 3) were calculated on the first 50 cells, nucleated, nonoverlapping, and well- distended. RESULTS: At the end of the experimental time groups had 9 individuals in each. There were no statistical difference of mAgNOR and pAgNOR> 3 between the groups in different times on both sites. A tendency to decrease in the proliferation rate was observed, at the intermediate time, and a trend of increase in the end time for all groups in T1, the smoke exposed groups (AS and TG) showed higher proliferation rate, compared the CG in the TE. MF in the CG presents values greater than AS. In T2, AS individuals showed a reduction in cell proliferation rate in both sites evaluated greater than TG and CG. In T3 values return to equilibrium, exhibiting values greater than the T1. TE in the pAgNOR> 1 and 2 showed a statistical difference between groups in T1 and T2. The site MF showed statistical difference in pAgNOR> 1, T2, showing that CG and the AS show less proliferation of speed when compared to the TG. CONCLUSIONS: The study showed that the AS has greater fluctuation mAgNOR that CG and TG, over time. Future study extending the time control, controlling carcinogens, and observing individuals with population characteristics would be convenient to seek standardization of this cancer prevention model.

M. Tech. / The persistent presence of neutrophils is associated with a wide range of inflammatory diseases. Resolution of inflammation in these diseases is also associated with the ingestion of apoptotic neutrophils by macrophages. Inflammation and apoptosis of inflammatory cells are common known features observed in the lung following exposure to crystalline silica. What is not known is how well these apoptotic cells are cleared by macrophages in the presence of crystalline silica? To investigate the latter, we incubated the U937 macrophages and neutrophils with crystalline silica and found that it could increase their apoptosis and necrosis especially those of the U937 cells. We then examined the ability of crystalline silica to induce the production of cytokines (TNF-α, IFN-γ and IL-1β) as well as NO by these cells. We found that these particles could increase the production of TNF-α, IL-1β and NO but not IFN-γ in a time-and concentration-dependent manner. We also assessed the ability of crystalline silica to alter the levels of GSH in neutrophils and U937 macrophages. We found that it could drastically decrease the levels of this antioxidant in U937 macrophages with no additional effect in neutrophils as these latter cells would have low levels of GSH prior to their incubation with crystalline silica. Finally, we examined the effect of crystalline silica on the ability of U937 macrophages to phagocytose apoptotic neutrophils. We found that while untreated U937 macrophages were able to phagocytose apoptotic neutrophils, the presence of crystalline silica reduced this ability by 15%. Taken together, our results suggest that exposure to crystalline silica impairs the clearance of apoptotic neutrophils by decreasing their phagocytosis by macrophages and thus prevents the resolution of inflammation.

The viral determinants of African horsesickness virus (AHSV) cytopathology are not well understood. Several AHSV proteins may play a role, including non-structural protein NS3, a cytotoxic membrane protein that localises to sites of virus release and plasma membrane disorganisation in infected cells. AHSV NS3 is highly variable and clusters into three phylogenetic groups, termed α, β and γ. In chapter 2 we examined the role of NS3 in determining the phenotypic characteristics observed during AHSV infection of cells. Three AHSV strains, AHSV-2 (γ NS3), AHSV-3 (β NS3) and AHSV-4 (α NS3), were shown to have quantitatively different phenotypes in Vero cells. To investigate the contribution of NS3 to these differences, reassortants were generated between these strains in which the S10 genome segment encoding NS3 was exchanged, alone or in combination with other segments. Exchange of NS3 resulted in changes in virus release and membrane permeability, indicating an important role for NS3 in these viral properties. The cytopathic effect and decreased viability of infected cells was not associated with NS3 alone and it is likely that a number of viral and host factors contribute to these complex phenotypes. In chapter 3 the cytolytic effect of the NS3 proteins of the orbiviruses AHSV, bluetongue virus (BTV) and equine encephalosis virus (EEV) were compared. Inducible expression in Escherichia coli (E. coli) showed differences in cytotoxicity, with EEV NS3 having a greater lytic effect than than AHSV and BTV NS3. Cytotoxicity was linked to increased membrane permeability of the cells as confirmed by an increased uptake of membrane impermeant compounds. When expressed in insect cells however all three NS3 proteins caused a marked but equivalent decrease in cell viability. Although the orbivirus NS3 proteins have similar predicted secondary structures, differences could lie in structural stability and association with membranes of specific cell types, which impacts on cytotoxicity. To determine the regions within AHSV NS3 that mediate cytotoxicity, a series of truncated mutants of NS3 where constructed and expressed in E. coli. The combined presence of both hydrophobic domains of AHSV NS3 was found to be critical for membrane permeabilisation and cytotoxicity. In chapter 4 the AHSV-2, AHSV-3 and AHSV-4 NS3 proteins (from the γ, β and α NS3 clades)were compared to examine the impact of sequence variation in NS3 on structure and function. The proteins were expressed in the baculovirus expression system as both wild-type proteins and C-terminal eGFP (enhanced green fluorescent protein) fusions. Exogenous addition of the baculovirus expressed proteins to Vero cells resulted in different permeabilisation levels that could be linked to that induced by the AHSV strains. Cell viability and membrane association assays in insect cells showed that all three proteins were equivalently cytotoxic and membrane associated. The subcellular localisation of the eGFP-NS3 fusion proteins was examined by confocal fluorescen imaging of live cells. NS3 localised to the plasma membrane, and as distinct punctuate foci in the perinuclear region. This suggests localisation to the internal membrane systems of cells and has important implications for the function of this membrane permeabilising protein. / Thesis (PhD)--University of Pretoria, 2011. / Genetics / unrestricted

O câncer de colo de útero é o terceiro tipo de neoplasia mais comum em mulheres no estado do Rio de Janeiro, perdendo apenas para câncer de mama e pulmão. Não há informação disponível sobre a qualidade dos exames utilizados para prevenção do câncer do colo do útero nos municípios fluminenses. O trabalho teve como objetivo avaliar a distribuição geográfica das unidades laboratoriais e a cobertura de exames e a performance da rede de laboratórios de citopatologia do estado do Rio de Janeiro, segundo regiões mesopolitanas e municípios, no que diz respeito aos exames citopatológicos realizados no âmbito do SUS, considerando a qualidade, a normalização dos procedimentos e a gestão do laboratório e propor melhorias. A pesquisa usa um desenho de estudo do tipo transversal incluindo dados relativos ao funcionamento dos laboratórios que fazem exame papanicolaou no âmbito do SUS no estado do Rio de Janeiro. Trata-se de um estudo com dados secundários, já coletados para atender a ação de avaliação dos laboratórios de citopatologia no âmbito do SUS, nesse trabalho também é usada a abordagem ecológica para estimar a cobertura dos exames em relação à população-alvo do programa de rastreamento de câncer de colo de útero. A rede de laboratórios de citopatologia do estado do Rio de Janeiro não teve desempenho satisfatório. As regiões que tiveram laboratórios com melhor desempenho foram Baia da Ilha Grande e Baixada Litorânea e aquelas com laboratórios de pior desempenho foram Médio Paraíba e Noroeste. Os critérios avaliados com melhor desempenho foram da dimensão qualidade e o mais fraco desempenho foi observado para os critérios da dimensão normalização. A dimensão de gestão de laboratórios teve desempenho regular. Um relevante achado desse estudo foi a insuficiente qualidade da leitura de lâminas, inclusive procedimentos de releitura, que pode ser explicado pela suposta falta de capacitação dos profissionais em todo o processo exigido desde a identificação, fixação, e formas de encaminhamento do material até a chegada aos laboratórios. Com relação à cobertura, alguns municípios se aproximam do parâmetro (0,30) porém, embora este dado revele a capacidade da rede estadual do rio de Janeiro de ofertar exames, é preciso que ele seja analisado em conjunto com as situações de citologia anterior e tempo da citologia anterior para verificação da periodicidade da oferta e o melhor dimensionamento do alcance da população alvo assim como a abrangência da rede laboratorial de cada município. Conclusão: Os dados mostram repetição desnecessária de exames citopatológicos, o que implica custos injustificados e uma situação ainda mais deficitária de alcance das ações do que tem revelado o indicador razão. Ocorrendo principalmente em regiões com predominância de laboratórios privados. A expansão da cobertura com base na periodicidade recomendada do exame é relevante no quadro estadual encontrado e deve vir associada a iniciativas que garantam a qualidade no processo de coleta e análise do material, bem como a adequada capacitação dos profissionais para adoção de condutas recomendadas para as lesões identificadas. / Cancer of the cervix is the third most common type of cancer in women in the state of Rio de Janeiro, second only to breast cancer and lung. No information is available about the quality of tests used to prevent cancer of the cervix in municipalities of Rio de Janeiro. Objective: To evaluate the geographic distribution of laboratory units and the coverage and network performance tests of cytopathology laboratories in the state of Rio de Janeiro, according mesopolitanas regions and municipalities, with respect to Pap smears performed within SUS, considering the quality , standardization of procedures and laboratory management and propose improvements. The research uses a design of cross-sectional study including data concerning the operation of laboratories performing Pap smears within the SUS in the state of Rio de Janeiro. This is a study of secondary data already collected to meet the action assessment of cytopathology laboratories within the SUS, is also used in this study the ecological approach to estimate the coverage of the tests in relation to the target population of the program screening of cancer of the cervix. The network of cytopathology laboratories in the state of Rio de Janeiro did not perform satisfactorily. Regions that had laboratories that performed well were the Big Island and Coastal Lowlands and those with worse performance labs were Middle Paraíba and Northwest.The criteria evaluated were the best performing of the size and quality weakest performance was observed for the criteria of size normalization. The size of laboratory management had regular performance. An important finding of this study was insufficient to read quality blades, including rereading procedures, which can be explained by the supposed lack of professional training required in the whole process from identifying, securing, routing and forms the material until the arrival laboratories. With respect to coverage, some municipalities approach the parameter (0.30) but, although this figure reveals the ability of the state of Rio de Janeiro to offer examinations, he must be considered in conjunction with situations of previous cytology and time of cytology prior to checking the periodicity of supply and better scaling of the reach of the target population as well as the scope of the laboratory network in each city. The data show unnecessary repetition of Pap smears, which implies unnecessary costs and an even more deficient range of actions that the indicator has revealed razão. Ocorrendo especially in regions with predominantly private laboratories. The expansion of coverage based on the recommended frequency of examination is relevant under state and found to be associated with initiatives to ensure quality in process of collection and analysis of the material, as well as adequate training of professionals to adopt guidelines recommended for lesions identified.

O câncer de colo de útero é o terceiro tipo de neoplasia mais comum em mulheres no estado do Rio de Janeiro, perdendo apenas para câncer de mama e pulmão. Não há informação disponível sobre a qualidade dos exames utilizados para prevenção do câncer do colo do útero nos municípios fluminenses. O trabalho teve como objetivo avaliar a distribuição geográfica das unidades laboratoriais e a cobertura de exames e a performance da rede de laboratórios de citopatologia do estado do Rio de Janeiro, segundo regiões mesopolitanas e municípios, no que diz respeito aos exames citopatológicos realizados no âmbito do SUS, considerando a qualidade, a normalização dos procedimentos e a gestão do laboratório e propor melhorias. A pesquisa usa um desenho de estudo do tipo transversal incluindo dados relativos ao funcionamento dos laboratórios que fazem exame papanicolaou no âmbito do SUS no estado do Rio de Janeiro. Trata-se de um estudo com dados secundários, já coletados para atender a ação de avaliação dos laboratórios de citopatologia no âmbito do SUS, nesse trabalho também é usada a abordagem ecológica para estimar a cobertura dos exames em relação à população-alvo do programa de rastreamento de câncer de colo de útero. A rede de laboratórios de citopatologia do estado do Rio de Janeiro não teve desempenho satisfatório. As regiões que tiveram laboratórios com melhor desempenho foram Baia da Ilha Grande e Baixada Litorânea e aquelas com laboratórios de pior desempenho foram Médio Paraíba e Noroeste. Os critérios avaliados com melhor desempenho foram da dimensão qualidade e o mais fraco desempenho foi observado para os critérios da dimensão normalização. A dimensão de gestão de laboratórios teve desempenho regular. Um relevante achado desse estudo foi a insuficiente qualidade da leitura de lâminas, inclusive procedimentos de releitura, que pode ser explicado pela suposta falta de capacitação dos profissionais em todo o processo exigido desde a identificação, fixação, e formas de encaminhamento do material até a chegada aos laboratórios. Com relação à cobertura, alguns municípios se aproximam do parâmetro (0,30) porém, embora este dado revele a capacidade da rede estadual do rio de Janeiro de ofertar exames, é preciso que ele seja analisado em conjunto com as situações de citologia anterior e tempo da citologia anterior para verificação da periodicidade da oferta e o melhor dimensionamento do alcance da população alvo assim como a abrangência da rede laboratorial de cada município. Conclusão: Os dados mostram repetição desnecessária de exames citopatológicos, o que implica custos injustificados e uma situação ainda mais deficitária de alcance das ações do que tem revelado o indicador razão. Ocorrendo principalmente em regiões com predominância de laboratórios privados. A expansão da cobertura com base na periodicidade recomendada do exame é relevante no quadro estadual encontrado e deve vir associada a iniciativas que garantam a qualidade no processo de coleta e análise do material, bem como a adequada capacitação dos profissionais para adoção de condutas recomendadas para as lesões identificadas. / Cancer of the cervix is the third most common type of cancer in women in the state of Rio de Janeiro, second only to breast cancer and lung. No information is available about the quality of tests used to prevent cancer of the cervix in municipalities of Rio de Janeiro. Objective: To evaluate the geographic distribution of laboratory units and the coverage and network performance tests of cytopathology laboratories in the state of Rio de Janeiro, according mesopolitanas regions and municipalities, with respect to Pap smears performed within SUS, considering the quality , standardization of procedures and laboratory management and propose improvements. The research uses a design of cross-sectional study including data concerning the operation of laboratories performing Pap smears within the SUS in the state of Rio de Janeiro. This is a study of secondary data already collected to meet the action assessment of cytopathology laboratories within the SUS, is also used in this study the ecological approach to estimate the coverage of the tests in relation to the target population of the program screening of cancer of the cervix. The network of cytopathology laboratories in the state of Rio de Janeiro did not perform satisfactorily. Regions that had laboratories that performed well were the Big Island and Coastal Lowlands and those with worse performance labs were Middle Paraíba and Northwest.The criteria evaluated were the best performing of the size and quality weakest performance was observed for the criteria of size normalization. The size of laboratory management had regular performance. An important finding of this study was insufficient to read quality blades, including rereading procedures, which can be explained by the supposed lack of professional training required in the whole process from identifying, securing, routing and forms the material until the arrival laboratories. With respect to coverage, some municipalities approach the parameter (0.30) but, although this figure reveals the ability of the state of Rio de Janeiro to offer examinations, he must be considered in conjunction with situations of previous cytology and time of cytology prior to checking the periodicity of supply and better scaling of the reach of the target population as well as the scope of the laboratory network in each city. The data show unnecessary repetition of Pap smears, which implies unnecessary costs and an even more deficient range of actions that the indicator has revealed razão. Ocorrendo especially in regions with predominantly private laboratories. The expansion of coverage based on the recommended frequency of examination is relevant under state and found to be associated with initiatives to ensure quality in process of collection and analysis of the material, as well as adequate training of professionals to adopt guidelines recommended for lesions identified.

Submitted by PPG Economia do desenvolvimento (economia-pg@pucrs.br) on 2018-05-14T20:42:09Z No. of bitstreams: 1 ANNE_JULISSA_ADUBER_PENALOZA_TES.pdf: 3031751 bytes, checksum: 27dc405ec8dc4ef1271f4c34d565e5c6 (MD5) / Approved for entry into archive by Sheila Dias (sheila.dias@pucrs.br) on 2018-05-18T15:00:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ANNE_JULISSA_ADUBER_PENALOZA_TES.pdf: 3031751 bytes, checksum: 27dc405ec8dc4ef1271f4c34d565e5c6 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-18T15:11:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ANNE_JULISSA_ADUBER_PENALOZA_TES.pdf: 3031751 bytes, checksum: 27dc405ec8dc4ef1271f4c34d565e5c6 (MD5) Previous issue date: 2017-10-03 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / This thesis is composed of three articles on Health Economics. The first document seeks to analyze the possible spatial integration of the network of public hospitals in Colombia, with the aim of analyzing whether there is efficiency when remitting patients according to the type of care demanded in the hospital. Based on the estimation of a spatial panel model, we analyzed the total of hospitals that make up the public offer system, concluding that although there may be a certain degree of transfer in patient care, it is very low for the case of general medicine, given that the spatial coefficient of the SDM model, rho is less than one. Once the analysis for the static model was estimated, the dynamic SAR and SDM model was estimated, a dynamic model was estimated that decomposed the effects in direct and indirect, where it was evidenced that there is a long-term spatial distribution effect for the attention of appointments of general medicine determined by the number of health care personnel of the 4 closest hospitals, however the presence of transshipments was not found in the short term in general medical care among the hospitals of the public network, since these are the ones that behave as institutions providing basic services, without having a trained staff that allows better care from the development of better medical practices. The same article calculates the SDM, SAR, SAC models for highly complex hospitals, having as dependent variable the number of surgeries performed with a normalized distance matrix of 8 neighbors, concluding that the number of emergencies attended by the hospital affects negative in the total of surgeries practiced, that is to say, the hospitals of high level of complexity carry out in their majority programmed surgeries, nevertheless a change in the total of emergencies. In order to control the existence of random spatial effects in the error, the model is estimated. GSPRE shows that there is a spillover effect that varies little in the time given by the coefficient lambda = 0,10, which is statistically significant but small , and that if there are shocks over time that significantly modify the behavior between hospitals. This type of variation is related as it is expressed cite baltagi2013generalized with technological shocks, changes in the facilities of hospitals that allow to significantly change the capacity to perform surgeries. The second article analyzes decentralization in the health system, studying one of the main objectives in public policy: the prevention of diseases, analyzing the effectiveness of the program in performing preventive cytopathological exams in women, given the availability of resources in the basic care teams located in all the municipalities of Brazil. Based on the analysis of the National Melhoria do Acceso e da Qualidade de Aten??o B?sica -AMPprogram, a factorial analysis is performed that calculates the covariances between the personnel, medical and physical supplies available in the equipment, as well as features such as race, income, literacy level, among others, the decision of women to undergo the cytopathological examination, a model is realized that includes a system of structural equations. It concludes that decentralization is due more than to a system formed in a correct way according to national and international parameters, to a management of the bureaucrats, as it was shown, in the states where there is a deficit or an adequate number of health posts , the estimate had positive coefficients, but this beyond the flow of resources, depends on the political will of each one of the government spheres to increase the number of health establishments or health programs. In this way, and in family health programs such as the performance of cytopathological tests, it is taking place in the basic care network in Brazil, in compliance with the Health Pact established for Brazil. Finally, the analysis of the demand for private health plans is made from different variables of individual, family, social, economic and geographical characterization of individuals and units of family consumption or Brazilian households, based on a logit model. It allows determining that individuals of the amarela race have the highest probability of choosing to demand a private health plan in Brazil, specifically in the North, South and Southeast regions of the country. Thus, in the Southeastern region of Brazil, at a level of significance of 1% the probability of demanding private health insurance is greater for people of that skin color or race, an additional control is created: division by range of monthly per capita income level; In this way, it is observed how the possibility of demanding private health plans varies according to the race declared by the individuals associated with the level of income received in per capita terms by the Brazilian family consumption units, which reflects that with a per capita income monthly of 200 reais, regardless of the declared race, all individuals have the same probability of demanding a private health plan in Brazil. / Esta tesis esta compuesta por tres art?culos sobre Econom?a de la Salud. El primero documento busca analizar la posible integraci?n espacial de la red de hospitales p?blicos en Colombia, con el objetivo de analizar si existe eficiencia la momento de remitir los pacientes de acuerdo a el tipo de asistencia demandada en el hospital. A partir de la estimaci?n de un modelo de panel espacial, se analiz? la el total de hospitales que componen el sistema de oferta p?blica, concluyendo que a pesar de que puede existir cierto grado de transferencia en la atenci?n de pacientes es muy baja para el caso de medicina general, dado que el coeficiente espacial del modelo SDM, ? es inferior a uno. a vez realizado el an?lisis para el modelo est?tico se estimo el modelo din?mico SAR y SDM, se estimo un modelo din?mico que descompusiera los efectos en directos e indirectos, donde se evidencio que existe un efecto de distribuci?n espacial a largo plazo para la atenci?n de citas de medicina general determinado por el n?mero de personal asistencial de los 4 hospitales m?s cercanos sin embargo no se encontr? la presencia de transbordamientos en el corto plazo en la atenci?n de medicina general entre los hospitales de la red p?blica, dado que estas que estos se comportan como instituciones de prestaci?n de servicios b?sicos, sin disponer de un personal capacitado que permita una mejor atenci?n a partir del desarrollo de mejores practicas medicas. El mismo articulo calcula los modelos SDM,SAR,SAC para los hospitales de alta complejidad, teniendo como variable dependiente el n?mero de cirug?as practicadas con una matriz de distancia normalizada de 8 vecinos, concluyendo que el n?mero de urgencias atendidas por el hospital incide de manera negativa en el total de cirug?as practicadas, es decir, los hospitales de nivel alto de complejidad realizan en su mayor?a cirug?as programada, no obstante un cambio en el total de emergencias. con el prop?sito de controlar la existencia de efectos espaciales aleatorios en el errores se estimo el modelo GSPRE muestra que existe un efecto spillover que varia poco en el tiempo dado por el coeficiente ? = 0, 10 , que es estad?sticamente significativo pero peque?o, y que si existen shocks en el tiempo que modifican de manera significativa el comportamiento entre los hospitales. Este tipo de variaciones esta relacionado tal como lo manifiesta [21] con shocks tecnol?gicos, cambios en las instalaciones de los hospitales que permitan var?en de manera significativa la capacidad de realizar cirug?as. El segundo articulo analiza la descentralizaci?n en el sistema de salud, estudiando uno de los principales objetivos en la pol?tica p?blica: la prevenci?n de enfermedades, analizando la efectividad del programa en la realizaci?n de examenes citopatologicos preventivos en las mujeres, dada la disponibilidad de recursos en los equipos de atenci?n b?sica situados en todos los municipios de Brasil. A partir del an?lisis del programa Nacional de Melhoria do Acceso e da Qualidade de Aten??o B?sica ?PMAQ-, se hace un an?lisis factorial que calcula las covarianzas entre los insumos de personal, m?dicos y fisicos disponibles en los equipos, as? junto con caracter?sticas como la raza, ingresos, nivel de alfabetizaci?n, entre otras, la decisi?n de las mujeres de realizarse el examen citopatol?gico, se realiza un modelo que comprenda un sistema de ecuaciones estructurales. Se concluye as? que la descentralizaci?n se debe m?s all? que a un sistema conformado de manera correcta seg?n par?metros nacionales e internacionales, a una gesti?n de los bur?cratas, tal como se mostr?, en los estados donde hay d?ficit o un adecuado numero de puestos de salud, la estimaci?n tuvo coeficientes positivos, pero esto m?s all? del flujo de recursos, depende de la voluntad pol?tica de cada una de las esferas del gobierno para aumentar el numero de establecimientos de salud o de programas de salud. De est? manera, y en programas de salud familiar como la realizaci?n de examenes citopatologicos, se esta dando en la red de atenci?n b?sica en Brasil, dando cumplimiento al Pacto por la salud establecido para Brasil. Por ultimo se realiza el an?lisis de la demanda de planes de salud privados a partir de diferentes variables de caracterizaci?n individual, familiar, social, econ?mica y geogr?fica de los individuos y unidades de consumo familiar u hogares brasileros, a partir de un modelo logit. La permite determinar que los individuos de raza amarela, poseen la probabilidad m?s alta de elegir demandar un plan de salud privado en Brasil, espec?ficamente en las regiones Norte, Sur y Sureste del pa?s. De modo tal que en la regi?n sureste de Brasil, a un nivel de significancia del 1% la probabilidad de demandar un aseguramiento privado en salud es mayor para las personas de dicho color de piel o raza, se crea un control adicional: divisi?n por rango de nivel de renta per c?pita mensual; de esta manera se observa c?mo var?a la posibilidad de demandar planes de salud privados de acuerdo a la raza declarada por los individuos asociada al nivel de ingresos percibidos en t?rminos per c?pita por las unidades de consumo familiar brasileras lo cual refleja que con una renta per c?pita mensual de 200 reales, independientemente de la raza declarada, todos los individuos tienen la misma probabilidad de demandar un plan de salud privado en Brasil.

Orientador: Noeme Sousa Rocha / Resumo: O Osteossarcoma (OSA) refere-se ao tumor ósseo mais comum em cães. A citoinclusão compreende o ato de inserir amostras citológicas em blocos de parafina, auxiliando na qualidade do diagnóstico citológico e obtendo espécimes de reserva para serem utilizadas em outras técnicas, incluindo imunoistoquímica. Com o intuito de avaliar a sensibilidade, especificidade e descrição da técnica de citoinclusão no diagnóstico de OSA de ossos longos de cães, 11 cães de oito a 13 anos com diagnóstico de OSA foram submetidos a exames citológicos, histopatológicos e, técnica da citoinclusão. Para a citoinclusão, foi feita a punção do tumor, fixação com 1mL de álcool a 95%, deixado em repouso por cinco minutos na própria seringa e, aspirou-se aproximadamente 9 mL de formol a 10% e manteve-se fixado por mais 24 horas, mantendo a seringa posicionada para cima para decantação das células. Como imunomarcador, utilizou-se a osteopontina. Em razão da maior preservação arquitetural, a avaliação a partir das amostras de citoinclusão, verificou-se parte de relações arquiteturais mais bem estabelecidas do que em amostras de esfregaços, auxiliando na caracterização do processo. Houve concordância da citoinclusão com a histopatologia e marcação imunoistoquímica de osteopontina positiva com alta sensibilidade e especificidade. É possível afirmar, que a técnica de citoinclusão é eficaz, segura para pesquisa de marcadores prognósticos de tumores ósseos em menor espaço de tempo e baixo custo podendo ser utiliz... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor