Entre los graves problemas nutricionales que afectan a la población Boliviana se encuentran los desordenes por deficiencia de Yodo, que hace de 20 años atrás era de gran magnitud, los que fue controlados y reducidos por acción del exitoso programa de lucha contra el Bocio (PRONALCOBO) A traváes de la Yodación de sal. El imcumplimiento de la norma podria originar la reaparición del problema, sino se mantiene un sistema de control permanente, la norma de yodación de sal abarca varios aspecos que van desde la producción hasta el expendio y también las sanciones por cumplimiento. Pro ello este trabajo de investigacion tubuu tuvo como objetivo evaluar la aplicación de la norma en la Yodación de la Sal en 43 empresas salineras registrandolas en el pais y que funcionan en los departamentos de Oruro, Potosi, Cochabamba y La Paz. El tipo de estudio realizado es descriptivo y propositivo. El área del estudio abarca el territorio nacional. El universo estuvo constituido por el total de la industria Salinera y por el total de muestras desal yodada recolectada, durante un año los metodos utilizados fuerón directos e indirectos. Entre los resultados mas sobresalientes, que tiene la mayoria de las empres yodadas de sal de tipo artesanal: seguidas por el tipo artesanal, seguidas por el tipo semi industrial muy pocas son industriales. Tan solo el 68 % de ls muestras tomadas en los lugares de producción cumple con la norma y el 21 % esta por debajo de la misma (menos de 40 ppm) y el 11 % se encuentra por encima de la norma mas de 80 p.m.) Los niveles de yodación mas bajos en las muestras recolectads en las plantas yodadoras en el momento de producción y en el alcacen son: de Potosi, seguida por Cochabamba y La Paz. En los medios de expendio son los departamentos de: Chuquisaca, tarija, Santa Cruz, Potosi, Cochabamba, La Paz, Oruro y Pando; el que mas cumple llega apenas a un porcentaje de 52.4%.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Desportos. Programa de Pós-Graduação em Educação Física. / Made available in DSpace on 2013-07-15T23:49:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 229198.pdf: 663086 bytes, checksum: eab629903ca8a52b1e9eb1af80db0893 (MD5) / A deficiência mental é ainda hoje muito mal vista pela sociedade, que se reflete pelo distanciamento do convívio, das pessoas assim diagnosticadas, das diferentes esferas da vida social. Consideramos como hipótese inicial da pesquisa que é através da saúde que se forja a concepção que a sociedade apresenta acerca das pessoas com diagnóstico de deficiência mental. Delimitamos então como problema saber qual (ais) a (s) concepção (ões) ontológica (s) da OMS acerca da Deficiência Mental. A escolha da OMS se dá pela sua representatividade no campo da saúde. Para responder ao problema proposto fizemos uso da análise documental com recursos da análise de conteúdo a partir do olhar sobre dois documentos que são referência da OMS, a saber, a CID-10 e a CIF. As reflexões realizadas apontaram para a presença de uma concepção deteriorada da pessoa diagnostica com deficiência mental que reflete quase sempre negativamente sobre o seu convívio na sociedade.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-24Bitstream added on 2014-06-13T19:32:07Z : No. of bitstreams: 1 spagnol_ba_me_mar.pdf: 1432519 bytes, checksum: 9966c79fef6396308554843cc0ddeec9 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A proposta de uma escola inclusiva exige também uma nova postura da escola, a qual deve propor em seu projeto político-pedagógico, no currículo, na metodologia, na avaliação e nas estratégias de ensino, ações que favoreçam a inclusão escolar e práticas educativas diferenciadas que atendam as necessidades específicas de seus alunos. As tarefas de casa, que se constituem em uma prática comum no contexto escolar, também merecem destaque neste momento para que não tenha apenas um caráter figurativo na ação pedagógica, mas que possam valorizar e promover a aprendizagem de todos os alunos, entre eles, aqueles com deficiência intelectual. Assim, os objetivos da pesquisa foram acompanhar e analisar como as tarefas de casa estão sendo propostas pela professora de uma sala de aula regular para um aluno com Síndrome de Down, matriculado no 2º ano do Ensino Fundamental, no período de um ano e verificar as mudanças ocorridas na proposição de suas tarefas após encontros reflexivos com sua professora e, também, investigar a concepção da mãe sobre as tarefas de casa. O estudo foi realizado em uma Escola Municipal de Ensino Fundamental de um município do interior paulista. Os sujeitos envolvidos na pesquisa foram uma professora do 2º ano do ensino fundamental, um aluno com Síndrome de Down e a mãe deste aluno. Os instrumentos utilizados para coleta de dados foram entrevistas iniciais e finais com a mãe do aluno e com a professora, encontros reflexivos com a professora, cadernos de tarefas do aluno e de dois colegas de sua turma, com intenção comparativa e, o plano de ensino referente ao 2º ano do Ensino Fundamental. Os resultados desta pesquisa apontam, em um primeiro momento, a ausência de... / The purpose of an inclusive school also requires a new attitude from school, which should propose in its politics-pedagogical project, in the curriculum, in the methodology, in the assessment and in the learn strategies, actions that be biased toward the inclusive school different educational practice that attend the specifics necessities of its students. The homeworks, which constitute in a common practice in the school context, also deserves to give prominence in this moment to have not just a figurative character in the pedagogical action, but to give value instead of promote the learning of all students, among them, those with intellectual disability. So, the aim of the search were to follow and analyze how the homeworks have been purposed by the teacher of a Down syndrome regular classroom, enrolled in the second year of elementary school, in the period of one year and verify the changes occurred in the propose of the homeworks after the reflective meetings with his/her teacher and, also, investigate the mother’s conception about the homeworks. The study was achieved in a Municipal School of Primary Education of a town of a paulista countryside. The subjects involved in the search were a second year teacher of the Elementary School, a Down syndrome student and his mother. The instruments used to collect datas were initial and finish interviews with the student’s mother and the teacher, reflexive meetings with the teacher, student’s homeworks notebooks and of two classmates, with the comparative intention and, the teaching plan relating to the second year of Primary Education. The results of this search point, in the first moment, the absence of appropriate homework to the intellectual disability student’s necessities... (Complete abstract click electronic access below)

Resumo: Nas ultimas decadas a dieta pobre em iodo vem sendo usada antes do tratamento com 131I em pacientes com doencas da tireoide com o intuito de aumentar a captacao do iodo radioativo pela tireoide. Porem, ate o momento nenhum estudo comprovou convincentemente esse fato. Esse estudo tem como objetivos analisar as diferencas nas taxas de captacao de iodo radioativo nos pacientes portadores de bocio multinodular (BMN), utilizando ou nao dieta pobre em iodo (DPI), analisar a taxa de excrecao urinaria de iodo apos a DPI e o volume da tireoide apos I131. Foram avaliados 30 pacientes portadores BMN e destes 9 foram excluidos. Os pacientes foram divididos em 2 grupos: grupo 1 (n=11), submetidos a DPI (30 a 50ƒÝg por dia); e grupo 2 (n=10) submetidos a dieta regular (DR). Antes da dieta foram verificados: T3, T4, TSH, cintilografia, analise volumetrica com ecografia e medida do iodo urinario. 15 dias apos a dieta foram analisados novamente com cintilografia e dosagem de iodo urinario. Na sequencia foram submetidos a 131I em dose unica ambulatorial de 29,9 mCi e apos 12 meses a nova ecografia. Os grupos foram submetidos a analise estatistica considerando-se um nivel de significancia de 5%. Os grupos 1 e 2 foram estatisticamente semelhantes em relacao a dosagem de T3, T4, TSH, captacao de radioiodo na cintilografia e analise volumetrica. Nao houve diferenca na captacao pela cintilografia. A media de captacao de 131I pre tratamento no grupo 1 foi de 10%„b 3,16, e de 11,75% „b 2,80 apos a DPI. Nao observou-se um aumento na captacao do radioiodo apos a dieta ( p=0,15) Apos a dieta a dosagem do iodo urinario no grupo 1 foi igual ao grupo 2 (p> 0,05). Apos 12 meses da terapia com radioiodo nao houve diminuicao do volume tireoideano (p=0,97) e a media do volume final do grupo 1foi de 55,95„b 25,61ml e a media do grupo 2 foi de 56,56„b 44,14ml. Concluimos que a DPI orientada 15 dias antes da dose terapeutica, nao foi eficaz para aumento de captacao de radioiodo pela tireoide e reducao da concentracao de iodo urinario na populacao estudada. A dose de 29.9 mCi nao foi eficaz para reducao significativa do volume do BMN independentemente da quantidade de iodo na dieta.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-03-23Bitstream added on 2014-06-13T21:06:13Z : No. of bitstreams: 1 belucci_mm_dr_arafo.pdf: 1097324 bytes, checksum: 8187e99752ed7ef6feeaf20d01248e04 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O magnésio (Mg+2) é um mineral que possui um importante papel na homeostase mineral, podendo afetar diretamente a função das células ósseas e a formação da hidroxiapatita. Entretanto, até o presente momento existem poucos estudos avaliando os mecanismos relacionados à alteração do metabolismo ósseo frente à deficiência de Mg. O objetivo desse estudo foi avaliar, in vitro, o efeito da deficiência de magnésio sobre a osteoclastogênese e atividade de osteoclastos. Também foi objetivo avaliar, in vivo, o efeito da deficiência de magnésio na dieta sobre o metabolismo ósseo, doença periodontal e tecido ósseo ao redor de implantes com osseointegração estabelecida. Para o estudo in vitro, foram avaliadas células indiferenciadas da medula óssea de ossos longos e mandíbula de camundongos. As células foram cultivadas em plástico e sobre tecido ósseo, em meios de cultura com diferentes concentrações de Mg (0.8 Mm que é considerada a quantidade adequada de Mg; e meios com redução do Mg, 0.4 Mm; 0.08 Mm; e 0 Mm). Após 3 dias de cultura, foram avaliadas a viabilidade celular, a taxa de proliferação celular e a expressão gênica, por PCR, de genes relacionadas à osteoclastogênese (c-fms, RANK, DC STAMP, c-fos, TNF-α e IL-1β) e ao metabolismo do Mg (TRPM-7 e MRS2). Após 6 dias de cultura, foram avaliados os parâmetros: número de células osteoclásticas (coloração de TRACP), atividade (liberação de TRACP) e taxa de proliferação celular. Após 8 dias de cultura a atividade dos osteoclastos foi avaliada por análise de pit de reabsorção. Para o estudo in vivo, foram utilizados 30 ratos, divididos em 2 grupos: grupo controle (CTL), que recebeu dieta com conteúdo adequado de magnésio, e grupo Mg, que recebeu dieta... / Magnesium (Mg) deficiency is very common condition in the world population. This mineral has an important role on bone homeostasis. However, there has been little research regarding the mechanisms in which magnesium deficiency alters bone metabolism. Also, the understanding of the factors associated to bone metabolism is of interesting for the prognosis of oral therapies, such as on periodontal disease and on osseointegrated dental implants. The aim of this study was to evaluate, in vitro, whether Mg deficiency affects the formation and/or activity of osteoclasts. And also to evaluate, in vivo, the effect of Mg intake deficiency on bone metabolism, periodontal disease and the bone tissue around osseointegrated implants. For the in vitro study, bone marrow cells from long bone and jaw of mice were seeded on plastic and on bone in medium containing different concentrations of Mg (0.8 mM which is 100% of the normal value, 0.4, 0.08 and 0 mM). The effect of Mg deficiency was evaluated on cell viability after 3 days and proliferation rate after 3 and 6 days, as was mRNA expression of osteoclastogenesis-related genes (M-CSF, RANK, c-fos, DC STAMP, TNF-α and IL-1β) and Mg-related genes (TRPM7 and MRS2). After 6 days of incubation, the number of tartrate resistant acid phosphatase-positive multinucleated cells (TRACP+-MNCs) was determined, and the TRACP activity of the medium was measured. Osteoclastic activity was assessed at 8 days by resorption pit analysis. For the in vivo studies, 30 rats received an implant in the right tibial metaphysis. After 60 days for healing of the implants, the animals were divided into groups according to the diet received. Control group (CTL) received a standard diet with adequate... (Complete abstract click electronic access below)

Resumo: O magnésio (Mg+2) é um mineral que possui um importante papel na homeostase mineral, podendo afetar diretamente a função das células ósseas e a formação da hidroxiapatita. Entretanto, até o presente momento existem poucos estudos avaliando os mecanismos relacionados à alteração do metabolismo ósseo frente à deficiência de Mg. O objetivo desse estudo foi avaliar, in vitro, o efeito da deficiência de magnésio sobre a osteoclastogênese e atividade de osteoclastos. Também foi objetivo avaliar, in vivo, o efeito da deficiência de magnésio na dieta sobre o metabolismo ósseo, doença periodontal e tecido ósseo ao redor de implantes com osseointegração estabelecida. Para o estudo in vitro, foram avaliadas células indiferenciadas da medula óssea de ossos longos e mandíbula de camundongos. As células foram cultivadas em plástico e sobre tecido ósseo, em meios de cultura com diferentes concentrações de Mg (0.8 Mm que é considerada a quantidade adequada de Mg; e meios com redução do Mg, 0.4 Mm; 0.08 Mm; e 0 Mm). Após 3 dias de cultura, foram avaliadas a viabilidade celular, a taxa de proliferação celular e a expressão gênica, por PCR, de genes relacionadas à osteoclastogênese (c-fms, RANK, DC STAMP, c-fos, TNF-α e IL-1β) e ao metabolismo do Mg (TRPM-7 e MRS2). Após 6 dias de cultura, foram avaliados os parâmetros: número de células osteoclásticas (coloração de TRACP), atividade (liberação de TRACP) e taxa de proliferação celular. Após 8 dias de cultura a atividade dos osteoclastos foi avaliada por análise de pit de reabsorção. Para o estudo in vivo, foram utilizados 30 ratos, divididos em 2 grupos: grupo controle (CTL), que recebeu dieta com conteúdo adequado de magnésio, e grupo Mg, que recebeu dieta... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Magnesium (Mg) deficiency is very common condition in the world population. This mineral has an important role on bone homeostasis. However, there has been little research regarding the mechanisms in which magnesium deficiency alters bone metabolism. Also, the understanding of the factors associated to bone metabolism is of interesting for the prognosis of oral therapies, such as on periodontal disease and on osseointegrated dental implants. The aim of this study was to evaluate, in vitro, whether Mg deficiency affects the formation and/or activity of osteoclasts. And also to evaluate, in vivo, the effect of Mg intake deficiency on bone metabolism, periodontal disease and the bone tissue around osseointegrated implants. For the in vitro study, bone marrow cells from long bone and jaw of mice were seeded on plastic and on bone in medium containing different concentrations of Mg (0.8 mM which is 100% of the normal value, 0.4, 0.08 and 0 mM). The effect of Mg deficiency was evaluated on cell viability after 3 days and proliferation rate after 3 and 6 days, as was mRNA expression of osteoclastogenesis-related genes (M-CSF, RANK, c-fos, DC STAMP, TNF-α and IL-1β) and Mg-related genes (TRPM7 and MRS2). After 6 days of incubation, the number of tartrate resistant acid phosphatase-positive multinucleated cells (TRACP+-MNCs) was determined, and the TRACP activity of the medium was measured. Osteoclastic activity was assessed at 8 days by resorption pit analysis. For the in vivo studies, 30 rats received an implant in the right tibial metaphysis. After 60 days for healing of the implants, the animals were divided into groups according to the diet received. Control group (CTL) received a standard diet with adequate... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Silvana Regina Perez Orrico / Coorientador: Carlos Rossa Junior / Banca: Denise Carleto Andia / Coorientador: Vicent Everts / Banca: Juliana Rico Pires / Banca: Paulo Sergio Cerri / Banca: Joni Augusto Cirelli / Doutor

Orientador: Anna Augusta Sampaio de Oliveira / Banca: Sadao Omote / Banca: Lúcia Pereira Leite / Resumo: A proposta de uma escola inclusiva exige também uma nova postura da escola, a qual deve propor em seu projeto político-pedagógico, no currículo, na metodologia, na avaliação e nas estratégias de ensino, ações que favoreçam a inclusão escolar e práticas educativas diferenciadas que atendam as necessidades específicas de seus alunos. As tarefas de casa, que se constituem em uma prática comum no contexto escolar, também merecem destaque neste momento para que não tenha apenas um caráter figurativo na ação pedagógica, mas que possam valorizar e promover a aprendizagem de todos os alunos, entre eles, aqueles com deficiência intelectual. Assim, os objetivos da pesquisa foram acompanhar e analisar como as tarefas de casa estão sendo propostas pela professora de uma sala de aula regular para um aluno com Síndrome de Down, matriculado no 2º ano do Ensino Fundamental, no período de um ano e verificar as mudanças ocorridas na proposição de suas tarefas após encontros reflexivos com sua professora e, também, investigar a concepção da mãe sobre as tarefas de casa. O estudo foi realizado em uma Escola Municipal de Ensino Fundamental de um município do interior paulista. Os sujeitos envolvidos na pesquisa foram uma professora do 2º ano do ensino fundamental, um aluno com Síndrome de Down e a mãe deste aluno. Os instrumentos utilizados para coleta de dados foram entrevistas iniciais e finais com a mãe do aluno e com a professora, encontros reflexivos com a professora, cadernos de tarefas do aluno e de dois colegas de sua turma, com intenção comparativa e, o plano de ensino referente ao 2º ano do Ensino Fundamental. Os resultados desta pesquisa apontam, em um primeiro momento, a ausência de... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The purpose of an inclusive school also requires a new attitude from school, which should propose in its politics-pedagogical project, in the curriculum, in the methodology, in the assessment and in the learn strategies, actions that be biased toward the inclusive school different educational practice that attend the specifics necessities of its students. The homeworks, which constitute in a common practice in the school context, also deserves to give prominence in this moment to have not just a figurative character in the pedagogical action, but to give value instead of promote the learning of all students, among them, those with intellectual disability. So, the aim of the search were to follow and analyze how the homeworks have been purposed by the teacher of a Down syndrome regular classroom, enrolled in the second year of elementary school, in the period of one year and verify the changes occurred in the propose of the homeworks after the reflective meetings with his/her teacher and, also, investigate the mother's conception about the homeworks. The study was achieved in a Municipal School of Primary Education of a town of a paulista countryside. The subjects involved in the search were a second year teacher of the Elementary School, a Down syndrome student and his mother. The instruments used to collect datas were initial and finish interviews with the student's mother and the teacher, reflexive meetings with the teacher, student's homeworks notebooks and of two classmates, with the comparative intention and, the teaching plan relating to the second year of Primary Education. The results of this search point, in the first moment, the absence of appropriate homework to the intellectual disability student's necessities... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientadores: Antonia Paula Marques de Faria, Marilisa Mantovani Guerreiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T19:26:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Steiner_CarlosEduardo_M.pdf: 6992635 bytes, checksum: 55ac9c32e9c223658484126afd347cf4 (MD5) Previous issue date: 1998 / Mestrado

Orientador: Mario Jose Abdalla Saad / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-19T04:22:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alegre_SarahMonte_D.pdf: 1722619 bytes, checksum: 9f52c232fe3cdfeb33a536b700d294f7 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: A deficiência de G-6-PD é um erro inato do metabolismo de carboidratos em que a atividade ou estabilidade da glicose-6-fosfato desidrogenase (enzima que cataliza a reação inicial da via das pentoses-fosfato) está reduzida. Uma variedade de alterações é esperada, pois a referida enzima está presente em diferentes células e tecidos, incluindo pâncreas e o córtex da adrenal. Em nosso estudo anterior demonstramos que os portadores dessa deficiência enzimática apresentavam redução na fase rápida de secreção de insulina. No presente trabalho de pesquisa, tivemos como objetivo avaliar de forma mais precisa a secreção de insulina através da quantificação do peptídeo C plasmático após estimulo glicidico, assim como, após a L-arginina, outro estimulante da secreção de insulina, além da sensibilidade periférica à insulina. Constou dos objetivos avaliar a secreção de cortisol após estímulo com ACTH. Para tanto, foram estudados 11 individuos com deficiência de G-6-PD e 11 indivíduos controle que formaram o grupo I e foram submetidos aos testes par avaliar a função secretória da célula ß pancreática (Teste Endovenoso de Tolerância à Glicose - TETG e Teste da Arginina) e a sensibilidade periférica à insulina (Teste de Tolerdncia à Insulina - TTl). E, o grupo II composto com 12 indivíduos com deficiência de G-6-PD e 16 individuos controle que foram submetidos à estimulação das adrenais com ACTH (Teste do Cortisol). Para os dois grupos de estudo os procedimentos experimentais foram realizados após jejum de 12 -14 h. As amostras de sangue para as determinações séricos de glicose, insulina e peptideo C foram coletadas nos tempos: 0 (jejum}, 1, 3, 5, 7, 10, 30 e 60min. após a infusão de 0,5g de glicose/ Kg de peso corporal para o TETG e, 2, 3, 4, 5, 7 e 10 min. após o término da infusão de 50ml de L-arginina a 10% para o teste da arginina. A sensibilidade à insulina foi calculada pelo decaimento dos niveis séricos de glicose nos primeiros 15 min. após a infusão de 0,1 U de insulina regular humana / Kg de Peso corporal. A secreção de cortisol foi avaliada através de amostras basais de cortisol e, 30, 60 e 120 min. após infusão de 0,25mg de ACTH. Os resultados demonstram que pacientes com deficiência de G-6-PD e individuos controle apresentaram valores semelhantes de glicose plasmática durante o TETG. Os niveis séricos de insulina nos primeiros 10 min. do TETG, bem como os índices de avaliação da fase rápida de insulina foram significativamente menores nos pacientes com deficiência de G-6-PD. A quantificação do peptideo C está em concordância com esses resultados, pois os pacientes com deficiência enzimática apresentaram valores de peptideo C significativamente menores nos tempos: 1 min. (C: 3,2 ± 0,5 ng/ml X G-6-PD: 1,2 ± 0,5 ng/ml, p < 0,01); 3 min. (C: 4,5 ± 0,9 ng/ml X G-6-PD: 1,9 ± 0,4 ng/ml, p < 0,02); 5 min. (C: 4,8 ± 0,9 ng/ml X G-6-PD: 1,8 ± 0,3 ng/ml, p < 0,01); 7 min. (C: 4,1 ± 0,7 ng/ml X G-6-PD: 1,4 ± 0,3 ng/ml, p < 0,01); aos 10min. (C: 4,7 ± 1,0 ng/ml X G-6-PD: 1,5 ± 0,4 ng/ml, p < 0,01) e aos 30 min. (C: 4,3 ± 0,5 ng/ml X G-6-PD: 1,9 ± 0,5 ng/ml, p < 0,01) do T. E. T.G. Também a determinação das áreas sob as curvas de peptideo C, nos 60 min. do teste, bem como os índices de avaliação da fase rápida de secreção de insulina demonstram valores menores, estatisticamente significativos para o grupo de pacientes com deficiência de G-6-PD. A extração hepática de insulina,. após estimulo com glicose endovenosa, foi estatisticamente menor para os pacientes com deficiência de G-6-PD (C: 58,4 ± 4,1% X G-6-PD: 38,6 ± 8,8%, p < 0,05). O índice utilizado para avaliar a secreção de insulina no teste da arginna, a média dos três maiores valores nos primeiros 5 min., foi semelhante para os dois grupos quanto aos niveis de insulina, mas significativamente menor no grupo de individuos com deficiência de G-6-PD em relação ao peptideo C. A extração hepática de insulina, durante o teste da arginina, foi menor para o grupo, de portadores de deficiência de G-6-PD, embora esse resultado não tenha sido significativo. A sensibilidade periférica à insulina avaliada pela velocidade de decaimento da glicose foi semelhante nos dois grupos (C: 6,6 ± 1,0%/min. X G-6-PD: 5,56 ± 0.5%/min.). Para o grupo II, onde a secreção de cortisol foi avaliada durante a estimulação com ACTH, os niveis de cortisol plasmático foram significativamente menores nos pacientes com deficiência de G-6-PD aos 30 min. (C: 26 ± 1,2 µg/dl X G-6-PD: 21,1 ± 1,8 µg/dl, p < 0.05). No periodo restante do teste essa diferença desapareceu. A análise das áreas sob as curvas de cortisol foi semelhante nos dois grupos. Esses resultados demonstram que pacientes com deficiência de G-6-PD apresentam diminuição na secreção de insulina (fase rápida) após estimulo com glicose e L-arginina, sensibilidade periférica à insulina semelhante a de indivíduos controle e secreção de cortisol diminuida durante a primeira hora após estimulação com ACTH. / Abstract: Glucose - 6 - phosphate dehydrogenase deficiency ( G-6-PD ) is an inborn error of carbohydrate metabolism in which the activity and/or stability of G-6-PD ( enzyme that catalyses the initial reaction of the pentose phosphate pathway) is decreased. Recognition that deficiency of G-6-PD also occurs in other cells, tissues and biologic fluids raises the question that some specific functional alterations might happens in the affected persons. We demonstrated in our previous study that the patients with G-6-PD deficiency showed. Decreased first phase insulin release after glucose stimulation. The aim of the present study was to investigate the insulin secretory activity of pancreatic ß-cells through the determination of the C-peptide concentration after the intravenous glucose and L-arginine stimulation, and to evaluate the insulin sensitivity. It was also a purpose of this study to investigate the cortisol levels in response to stimulation with ACTH in those patients. The study included 11 male controls and 11 patients with G-6-PD deficiency ( group I ) that were studied with intravenous infusion of glucose, L-arginine and regular human insulin (0,1 UI/Kg B.W) to evaluate the secretion and action of insulin. The group II with 16 normal subjects and 12 G-6-PD deficient patients were submited to stimulation with ACTH ( 0,25 mg corticotropin). All the tests were performed in the morning after a 12-14h overnight fast. Blood samples for glucose, insulin, and C-peptide determination were collected before and 1,3,5,7,10,30 and 60 min. after intravenous glucose infusion (0,5 g/Kg body weight) (IVTT), before and 2,3,4,5,7 and 10 min. after L-arginine infusion ( 5g as a 10% solution ). The insulin sensitivity was calculated by the glucose disappearance rate during the first 15 min. after intravenous injusion of 0,1U of human insulin/Kg B.W. The cortisol secretion was evaluated before and at 30,60 and 120 min. after 0,25 mg of ACTH infusion. In the intravenous glucose tolerance test no significant differences were demonstrated between the mean plasma glucose levels of the G-6-PD deficient patients and those of the control group. The serum insulin levels during IVGTT from G-6-PD deficient patients were significantly lower when compared to insulin levels in the normal men in the first 10 min. as the index of first phase insulin release. The serum C - peptide levels were significantly lower in the G-6-PD deficient patients than the control group at: 1,3,5,7,10 and 30 min., and as the area under the curve of C - peptide levels in IVGTI. The hepatic extraction of insulin during IVGTT were significantly lower in the patients than in the control group. The index used to evaluate insulin secretory response after arginine infusion, mean of the highest values during the first 5 min. were similar between patients and controls for insulin levels, but signiflcantly lower in G-6-PD deficient patients when we analysed C-peptide, after arginine infusion. Patients and controls showed similar hepatic extraction of insulin in the arginine test. In the group II, after stimulation with ACTH, the cortisol levels were significantly lower in the G-6-PD deficient patients than the normal men at 30 min., but this differences between the groups decreased gradually and were no statistically significant, after the first hour. The areas under the cortisol levels for the two groups were similar. These results demonstrate that the G-6-PD deficient patients showed decresead insulin secretion ( first phase ) after glucose and L-arginine stimulation, decreased hepatic insulin extraction during IVGTI, no alteration in insulin peripheral sensitivity and decreased cortisol production in the first 30 min. after corticotropin stimulation. / Doutorado / Doutor em Medicina

En este trabajo de tesis se estudió la fisiología y fisiopatología del metabolismo del hierro. En células hepáticas, duodenales, renales, pancreáticas, pulmonares y neuronales se evaluaron proteínas que movilizan hierro a través de las membranas celulares en estados de balance de hierro y sus cambios regulatorios en la dishomeostasis del biometal. Se utilizaron Modelos Animales de Sobrecarga y de Deficiencia de Hierro y una línea celular de neuroblastoma humano para el estudio de las proteínas importadoras de hierro Transportador de Metales Divalentes 1 (DMT1), ZIP14 (SLC39A14) y Receptor de Transferrina 1 (RTf1); las proteínas reguladoras Proteína de la Hemocromatosis (HFE), Proteína Reguladora del Hierro 1 (IRP1) y Prohepcidina; la proteína exportadora Ferroportina (FPN) y la proteína de depósito Ferritina. Metodologías: histoquímica, inmunohistoquímica y técnicas de biología molecular (EMSA, Western blot y RT-PCR). Se desarrollaron: 1) Modelos Animales Murinos (ratones CF1; n=6/grupo): a) Sobrecarga de Hierro: hierro sacarato; control (solución fisiológica); b) Deficiencia de Hierro: flebotomía; control (operación simulada); 2) Células SH-SY5Y con/sin N-acetilcisteína y células SH-SY5Y knockdown para IRP1 fueron tratadas con IL-6, TNF-α, LPS y solución salina. Deficiencia de Hierro: la expresión apical de DMT1 en enterocitos y su débil expresión en hepatocitos mostraron un mecanismo que estimula la absorción de hierro de la dieta y disminuye la captación hepática. La expresión apical de DMT1 y RTf1 y la débil expresión de Prohepcidina en células tubulares proximales renales evidencian aumento de la captación renal de hierro en coordinación con duodeno. El aumento de RTf1 y la localización apical de DMT1, HFE y FPN en las células bronquiales les adjudican a estas proteínas funciones en la captación y en el control de hierro para suministrar hierro al pulmón. Prohepcidina pulmonar no regularía la movilización del hierro en pulmón en deficiencia. Sobrecarga de hierro: la localización perinuclear de DMT1 en enterocitos y su intensa expresión en hepatocitos mostraron un mecanismo regulatorio que limita la absorción de hierro de la dieta y aumenta su captación hepática. El aumento de ZIP14 y su localización apical en células proximales evidencian una mayor reabsorción renal de hierro que produce sobrecarga de hierro en el riñón, mecanismo que predomina sobre la función de DMT1 y RTf1. El aumento de ZIP14 y FPN y la localización apical de DMT1 y Ferritina en las células bronquiales les adjudican a estas proteínas funciones en la captación, exportación y almacenamiento de hierro para detoxificar el exceso de hierro. Prohepcidina pulmonar no regularía la movilización del exceso de hierro en pulmón. La disminución de DMT1 y Ferritina y el aumento de Prohepcidina en las células del islote de Langerhans mostraron un mecanismo que limitaría la acumulación del hierro en las células endocrinas, siendo las células de reserva de hierro las del acino y del tejido conectivo. Modelo de Inflamación: el aumento de DMT1 en las células SH-SY5Y inducido por citoquinas y LPS le adjudica a DMT1 una función en la captación de hierro. El aumento de DMT1 sería controlado principalmente por una regulación transcripcional mediada por ROS. La activación de IRP1 independiente de ROS no sería un mecanismo regulatorio predominante sobre el aumento de DMT1 en inflamación. El empleo del antioxidante NAC revierte el efecto de la inflamación sobre el aumento de DMT1, por lo que NAC podría disminuir la captación de hierro en células de neuroblastoma. Finalmente podemos concluir que en Deficiencia de Hierro existen mecanismos regulatorios de las proteínas del hierro en duodeno, hígado, riñón y pulmón que suministran el hierro tisular o sistémico requerido en alta demanda. En Sobrecarga de Hierro, la regulación de las proteínas en duodeno e hígado disminuiría el hierro biodisponible. En pulmón y páncreas, las proteínas del hierro participarían de un mecanismo beneficioso para limitar el daño oxidativo de las células del pulmón y del páncreas endocrino en Sobrecarga de Hierro. En cambio, en el riñón, la regulación de ZIP14 originaría la sobrecarga de hierro en los túbulos proximales que induciría daño celular. En Inflamación DMT1 contribuiría a la captación de hierro libre en las células neuronales a través de una regulación principalmente transcripcional mediada por ROS, siendo esta función de DMT1 revertida por el agregado de antioxidantes. En conclusión, la relación entre las proteínas del hierro en diferentes células en modelos animales puede ayudar a comprender mejor los mecanismos implicados en la fisiología y fisiopatología del metabolismo del hierro. / The purpose of this Ph. D. thesis was to study the physiology and physiopathology of iron metabolism. To this end, proteins that mobilize iron across cell membranes in states of iron balance as well as their regulatory changes in the dishomeostasis of this biometal were analyzed in liver, duodenal, kidney, pancreatic, lung and neural cells. Animal Models of Iron Overload and of Iron Deficiency as well as a human neuroblastoma cell line were used to study iron import proteins Divalent Metal Transporter 1 (DMT1), ZIP14 (SLC39A14) and Transferrin Receptor 1 (RTf1); regulators proteins Hemochromatosis Protein (HFE), Iron Regulatory Protein 1 (IRP1) and Prohepcidin; export protein Ferroportin (FPN) and storage protein Ferritin. Methodologies: histochemistry, immunohistochemistry and molecular biology techniques (EMSA, Western blot and RT-PCR). The following were developed: 1) Murine Animal Models (CF1 mice; n=6/group): a) Iron Overload: iron saccharate, control (physiological solution), b) Iron Deficiency: phlebotomy, control (sham-operated); 2) SH-SY5Y cells with/without N-acetylcysteine and SH-SY5Y knockdown cells for IRP1 were treated with IL-6, TNF-α, LPS and saline solution. Iron Deficiency: the apical expression of DMT1 in enterocytes and its weak expression in hepatocytes revealed a mechanism which stimulates iron absorption from the diet and reduces liver uptake. The apical expression of DMT1 and RTf1 as well as the weak expression of Prohepcidin in renal proximal tubular cells were observed to evidence an iron uptake increase in coordination with the duodenum. The increase in RTf1 as well as the apical localization of DMT1, HFE and FPN in bronchial cells were found to be indicative of proper functions of these proteins of iron uptake and control to supply iron to the lungs. Pulmonary Prohepcidin seemed not regulate iron mobilization in the lung under deficiency conditions. Iron overload: perinuclear DMT1 localization in enterocytes as well as its intense expression in hepatocytes were found to be indicative of a regulatory mechanism that restricts dietary iron absorption but increases its hepatic uptake. ZIP14 increase and its apical localization in proximal cells were observed to show a higher renal iron reabsorption producing, in turn, iron overload in the kidney, this being a mechanism that predominates over DMT1 and RTf1 function. ZIP14 and FPN increase and DMT1 and Ferritin apical localization in bronchial cells were observed to confer these proteins functions in iron uptake, export and storage for iron excess detoxification. Pulmonary Prohepcidin seemed not to regulate iron excess mobilization in the lung. DMT1 and Ferritin decrease and Prohepcidin increase in the islet of Langerhans cells revealed a mechanism which appeared to restrict iron accumulation in endocrine cells, iron reserve cells being those of the acinus and connective tissue. Model of Inflammation: cytokine- and LPS-induced increase of DMT1 in SH-SY5Y cells was found to confer DMT1 an iron uptake function. DMT1 increase could be controled mainly by a ROS-mediated transcriptional regulatory mechanism. ROS-independent IRP1 activation seemed not to behave as a predominant regulatory mechanism over DMT1 increase under inflammation conditions. The use of NAC antioxidant was found to reverse the effect of inflammation on DMT1 increase, this being the reason why NAC could reduce iron uptake in neuroblastoma cells. Taken together, results from this Ph. D. thesis lead us to conclude that under Iron Deficiency conditions iron-protein regulatory mechanisms supply highly required tissular or systemic iron in duodenum, liver, kidney and lung. Under Iron Overload conditions, protein regulation seems to reduce bioavailable iron in duodenum and liver. In the lung and pancreas, iron proteins may be part of a beneficial mechanism to reduce the oxidative damage of lung cells and endocrine pancreas under Iron Overload conditions. In contrast, in the kidney, ZIP14 regulation seems to give rise to Iron Overload in proximal tubules, thus inducing cell damage. Under Inflammation conditions, DMT1 appears to contribute to the uptake of iron-free in neuronal cells mainly through a ROS-mediated transcriptional regulatory mechanism, this particular function of DMT1 being reversed by the addition of antioxidants. In conclusion, the relationship between the iron proteins in different cells in animal models may help to better understand the mechanisms involved in the physiology and physiopathology of iron metabolism.