Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2018-07-11T17:01:48Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Keila Surama Alves de Oliveira - 2016.pdf: 2075342 bytes, checksum: 2ef6fd7be76314f6aabeab2fa8fd9e9d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-07-12T11:28:59Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Keila Surama Alves de Oliveira - 2016.pdf: 2075342 bytes, checksum: 2ef6fd7be76314f6aabeab2fa8fd9e9d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-12T11:28:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Keila Surama Alves de Oliveira - 2016.pdf: 2075342 bytes, checksum: 2ef6fd7be76314f6aabeab2fa8fd9e9d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-03-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Objective: to determine the oxygen saturation level (SaO2) in human pulps of molars by pulse oximetry. Methods: the oxygen saturation level was evaluated in 112 healthy molars using the pulse oximeter and the patient's response time to stimulus with the cold refrigerant gas Endo Ice and recorded with digital timer. Statistical analysis was performed using SPSS v program. 18.0. Quantitative variables were described by mean and standard deviation when the distribution was symmetric and median and interquartile range when asymmetric. Variables with symmetric distribution were compared between teeth for independent samples and intra-individual for paired samples by Student t test, and the asymmetric distribution with the Mann-Whitney test. To correlate the variables each other was used the Pearson correlation coefficient, and to compare more than two groups together the analysis of variance (ANOVA) followed by post-hoc Tukey, being statistically significant p <0,05. Results: the average level of SaO2 for the 112 pulps of healthy molars was 85,09%, and there was no correlation with the SaO2 average of the patient´s indicator finger (92,89%). There was a significant difference (P = 0,037) between the average level of SaO2 of the first (85,76%) and second superior molars (81,87%), and it was not significant (P = 0,177) between the first (85,58%) and second (88,15%) inferior molars. The superior molars had lower average level of SaO2 (83,59%) when compared to the inferior molars (86,89%), with a statistically significant difference (P = 0,018). The average of the patient's response time to the cold stimulus was 1,12 seconds, with no statistically significant difference between superior (1,25 seconds) and inferior molars (0,99 seconds). Conclusion: the average level of SaO2 in healthy molars pulps was 85,09%, and the average of the superior molars was 83,59% and inferior molars was 86,89%. The average of the patient's response time to the cold stimulus was 1,12 seconds, with no statistically significant difference between superior (1,25 seconds) and inferior molars (0,99 seconds) and there was no correlation between the patient's response time to the cold stimulus and the oxygen saturation level for healthy molars. / Objetivo: determinar o nível de saturação de oxigênio (SaO2) em polpas humanas de molares hígidos por meio da oximetria de pulso. Material e métodos: o nível de SaO2 foi avaliado em 112 molares hígidos utilizando-se o oxímetro de pulso, e o tempo de resposta do paciente ao estímulo ao frio com gás refrigerante e registrado com cronômetro digital. A análise estatística foi feita pelo programa SPSS v. 18.0. Foram descritas as variáveis quantitativas pela média e desvio padrão quando a sua distribuição foi simétrica e mediana e intervalo interquartil quando assimétrica. As variáveis com distribuição simétrica foram comparadas entre dentes para amostras independentes e intra-indivíduo para amostras pareadas pelo teste t de Student, e as com distribuição assimétrica pelo teste de Mann-Whitney. Para correlacionar as variáveis entre si foi utilizado o coeficiente de correlação de Pearson, e para comparar mais de dois grupos entre si o teste de Análise de Variância (ANOVA) seguido do teste post-hoc de Tukey, sendo estatisticamente significativo p < 0,05. Resultados: o nível médio de SaO2 para as 112 polpas dos molares hígidos foi 85,09%, e não houve correlação com a média do dedo indicador do paciente (92,89%). Houve uma diferença significante (P= 0,037) entre o nível médio de SaO2 dos primeiros (85,76%) e dos segundos molares superiores (81,87%), não sendo significante (P= 0,177) entre os primeiros (85,58%) e segundos (88,15%) molares inferiores. Os molares superiores apresentaram menor nível médio de SaO2 (83,59%) quando comparados aos inferiores (86,89%), sendo a diferença estatisticamente significativa (P= 0,018). A mediana do tempo de resposta do paciente ao estímulo ao frio foi de 1,12 segundos, não havendo diferença estatisticamente significativa entre molares superiores (1,25 segundos) e inferiores (0,99 segundos). Conclusão: o nível médio de SaO2 em polpas de molares hígidos foi de 85,09%, sendo a média dos molares superiores de 83,59% e a dos inferiores de 86,89%. A mediana do tempo de resposta do paciente ao estímulo ao frio em molares hígidos foi de 1,12 segundos, não havendo diferença estatística entre superiores (1,25 s) e inferiores (0,99), e não houve correlação entre o tempo de resposta do paciente ao estímulo ao frio e o nível de saturação de oxigênio para molares hígidos. Palavras-chave: oxímetro de pulso, polpa dentária, saturação de oxigênio, teste frio.

Atualmente a terapia com células-tronco têm sido uma ferramenta útil na medicina regenerativa com alto potencial terapêutico devido à capacidade de auto renovação e diferenciação destas células. Nos últimos anos a ortopedia vem procurando novos métodos para um tratamento que obtenha como efeito a reparação de defeitos articulares de forma mais efetiva e sem procedimentos invasivos. Por isso, muitos estudos envolvendo terapia celular com objetivo de melhorar a reparação articular estão sendo realizados. O objetivo deste estudo foi avaliar a terapia com células-tronco de saco vitelino e de polpa dentária canina em cães com displasia coxofemoral mediante três aplicações celulares (dia 0, 30 e 60, e um controle dia 90). Para a avaliação dos animais tratados foi instituído um grupo controle para cada tipo celular testado, sendo avaliado o escore de claudicação, escore de atrofia muscular, questionário de qualidade de vida, avaliação radiográfica, análise do líquido sinovial e hemograma. Os resultados obtidos demonstraram não haver uma diferença estatística significante quando comparado os animais dos grupos tratamentos e controle. Quando comparado os animais dos grupos tratamento houve uma diferença estatística significante para os animais tratados com células-tronco de saco vitelino em relação aos animais tratados com células-tronco de polpa dentária. O tratamento com células de saco vitelino mostrou melhores resultados nos testes de Ortolani. / Currently, stem cell therapy have been a useful tool in regenerative medicine with high therapeutic potential due to the capacity for self renewal and differentiation of these cells. In recent years, orthopedics has been seeking new methods of treatment to obtain the effect of repair of articular defects more effectively and without invasive procedures. Therefore, many studies involving cell therapy in order to improve the repair articular are being conducted. The aim of this study was to evaluate the therapy with stem cells from the yolk sac and canine dental pulp in dogs with hip dysplasia by three mobile applications (day 0, 30 and 60, and one day control 90). For the evaluation of the treated animals was set up a control group for each cell type tested, and rated the lameness score, muscular atrophy score, a questionnaire about quality of life, radiographic evaluation, synovial fluidanalysis and blood count. The results showed that there was no statistically significant difference when compared animal treatment and control groups. Comparing the animals, treatment groups showed a statistically significant difference for the animals treated with stem cells from the yolk sac for the animals treated with stem cells from dental pulp. Treatment with yolk sac cells showed better results in Ortolani tests.

A regeneração óssea alveolar tem sido um dos principais alvos de estudo na odontologia, tanto humana como veterinária, principalmente na implantodontia e nas cirurgias periodontais e buco-maxilo-faciais. Em função disto, este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar a regeneração óssea alveolar, utilizando como enxerto osso liofilizado e células-tronco mesenquimais (MSCs), oriundas da polpa dentária de um doador macho para enxerto alogênico. Foram utilizados 57 coelhas, Nova Zelândia, sendo um coelho doador das MSCs, distribuídos em sete grupos: controle (G1), osso liofilizado (G2), Matrigel (G3), Matrigel e MSC (G4), osso liofilizado e Matrigel (G5), Osso liofilizado, Matrigel e MSC (G6) e somente MSC (G7). Após a exodontia do incisivo inferior esquerdo, o alvéolo recebia o implante de acordo com cada grupo e avaliados em sete dias. As amostras foram coletadas para análise microscópica, desmineralizadas e não desmineralizadas, PCR, além de terem sido submetidas à análise radiográfica, a qual também era realizada no pré e no pós-operatório imediato. Macroscopicamente, foi observado espessamento do ramo mandibular dos animais dos grupos que receberam Matrigel e aceleração do crescimento dos dentes incisivos remanescentes nos animais que receberam terapia celular. Na análise microscópica, constatou-se que, todos os grupos que receberam como enxerto o osso liofilizado, o tempo de regeneração foi menor, embora o grupo controle tenha apresentado melhor organização na regeneração óssea, sendo que o tratamento com Matrigel resultou ainda em uma reação inflamatória exacerbada, dado este confirmado também nas amostras não desmineralizadas. As radiografias periapicais também apontaram que os grupos que foram tratados com osso liofilizado apresentavam maior área de radiopacidade, sugerindo aceleração do processo de regeneração. Porém, o teste de PCR não detectou a presença do cromossomo Y do doador nas fêmeas receptoras das MSCs. Os resultados sugerem que o uso da terapia celular diminui o tempo de regeneração óssea alveolar e, quando aliada ao osso liofilizado, acelera este processo. Entretanto, decorridos sete dias da aplicação do Matrigel, houve aumento da espessura do ramo mandibular no alvéolo onde foi aplicado, necessitando maior tempo de avaliação para melhor elucidar seu uso clínico. / The alveolar bone regeneration has been a major focus of study in dentistry, both human and veterinary medicine, especially in implant and periodontal surgery and in the bucco-maxillo facial. Because of this, this study was to evaluate alveolar bone regeneration, using lyophilized bone and implant as mesenchymal stem cells (MSCs) derived from the dental pulp of a male donor for allogeneic graft. We used 57 female New Zealand rabbits, one rabbit MSCs from donor, divided into seven groups: control (G1), lyophilized bone (G2), Matrigel (G3), Matrigel and MSC (G4), lyophilized bone and Matrigel(G5), lyophilized bone, MSC and Matrigel (G6) and MSC only (G7). After extraction of the left lower incisor, the socket receiving the implant according to each group and evaluated in seven days. The samples were collected for microscopic analysis, demineralized and non-demineralized, PCR, and they have been subjected to X-ray analysis, which was also held in pre-and postoperatively. Grossly, there was thickening of the mandibular branch of animals that received and accelerate growth of the incisor teeth remaining in the Matrigel animals that received cell therapy. Under microscopic analysis, we found that all groups that received the bone graft as lyophilized, regeneration time was lower, although the control group had a better organization in bone regeneration, and treatment with still resulted in a Matrigel exaggerated inflammatory response, since this is also confirmed in samples not demineralized. The periapical radiographs also showed that the groups were treated with lyophilized bone had a greater area of radiopacity, suggesting acceleration of the regeneration process. However, the PCR test failed to detect the presence of Y chromosome in female recipients of the donor of MSCs. The results suggest that the use of cell therapy reduces the duration and alveolar bone regeneration when combined with lyophilized bone, accelerates this process. However, Matrigel, there was increased thickness after seven days of applying of the mandibular alveolus in which it was applied, requiring longer evaluation to elucidate its clinical use.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-01-03T10:15:16Z No. of bitstreams: 1 jairobarrosweiss.pdf: 2866288 bytes, checksum: 6a66e32be09e44bc95cfaeb7a5534cb2 (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2017-01-31T10:23:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 jairobarrosweiss.pdf: 2866288 bytes, checksum: 6a66e32be09e44bc95cfaeb7a5534cb2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-31T10:23:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 jairobarrosweiss.pdf: 2866288 bytes, checksum: 6a66e32be09e44bc95cfaeb7a5534cb2 (MD5) Previous issue date: 2016-08-30 / A polpa dentária é considerada uma fonte de células-tronco mesênquimais adultas, e o interesse na obtenção da polpa dentária e na sua estocagem aumentou substancialmente nos últimos anos. As variações na forma de obtenção da polpa mudam drasticamente a característica final do material removido, sendo que manualmente a polpa é obtida em partes maiores, mais estruturada. Já na forma mecanizada, se obtém um material macerado, semi-triturado. A remoção do tecido pulpar por via endodôntica caracteriza uma forma pouco conhecida de se coletar este importante tecido sem a necessidade de extração dentária. Em face das possibilidades de variação na técnica, foi observada a necessidade da elaboração de um estudo para elucidar as variações na coleta dos tecidos pulpares. Trinta polpas dentárias foram colhidas e divididas em dois grupos, sendo quinze polpas removidas por instrumentação mecanizada e outras quinze por instrumentação manual. Após Isolar células-tronco da polpa dentária de dentes permanentes humanos, estas foram caracterizadas quanto à sua viabilidade celular e plasticidade: diferenciação osteogênica e adipogênica. Através da análise dos resultados obtidos observou-se que a técnica de remoção manual da polpa permitiu o estabelecimento de cultura de células-tronco derivadas de polpa dentária de dentes permanentes humanos em 53% das amostras. Não se estabeleceu cultura de células-tronco derivadas de polpa dentária de dentes permanentes humanos, a partir de nenhuma das amostras obtidas pela instrumentação rotatória. / The dental pulp is considered a source of adult mesenchymal stem cells, and the interest in obtaining the dental pulp and its storage has increased substantially in recent years. Variations in the way of obtaining the pulp drastically change the final characteristic of the material removed, and the pulp is obtained manually in larger parts, more structured. In the mechanized mode, obtaining a macerated material, semi-milled. The removal of the pulp tissue via endodontic features a little known form of collecting this important tissue without the need for tooth extraction. Given the range of possibilities in technique, we observed the need to prepare a study to elucidate the changes in the collection of pulp tissues. Thirty dental pulps were collected and divided into two groups, fifteen pulps removed by mechanical instrumentation and fifteen other for manual instrumentation. After isolate stem cells from human dental pulp of permanent teeth, they were characterized as to their cell viability and plasticity: osteogenic differentiation and adipogenic. Through analysis of the results was observed that manual removal technique allowed pulp stem cell culture property derived from human dental pulp of permanent teeth in 53% of samples. Any stem cell culture was established from human dental pulp of samples obtained by rotary instrumentation.

O hidróxido de cálcio (HCa), o agregado de trióxido mineral (MTA) e o óleo-resina de copaíba (COP) isoladamente apresentam características biológicas do material de capeamento pulpar direto mais apropriado. Com o pressuposto que associados poderiam originar materiais mais apropriados para serem aplicados em capeamento pulpar direto, este estudo objetivou analisar in vitro proliferação, diferenciação e migração de células-tronco de polpa de dente decíduo humano esfoliado (SHEDs) em resposta a substâncias liberadas pelo COP isolado ou associado ao HCa ou ao MTA. Proliferação, diferenciação e migração de SHEDs (Linhagem PDH3) foram analisadas através do ensaio de redução do MTT; da atividade de fosfatase alcalina (ALP), formação de nódulos mineralizados pelo ensaio de Vermelho de Alizarina e expressão dos genes (BGLAP, DSPP, DMP1 e HSP-27) pelo qRT-PCR; e, do ensaio do Scratch, respectivamente. As células foram submetidas à ação de meios condicionados pelos biomateriais, de acordo com os seguintes grupos experimentais: COP isolado (COP); HCa isolado (HCa); HCa associado ao COP (HCa+COP); MTA isolado (MTA) e MTA associado ao COP (MTA+COP). Células crescidas em meio de cultura fresco serviram de controle. Os dados foram comparados utilizando ANOVA complementado pelo teste de Tukey (p 0,05). O grupo HCa apresentou número de células viáveis significativamente menor que o dos demais grupos, inclusive o do grupo HCa+COP (p<0,01) em todos os tempos experimentais. A atividade de ALP em 14 dias foi similar em todos os grupos experimentais. Em 21 dias, o grupo COP apresentou quantidade maior de mineralização que os demais grupos (p<0,01) e o grupo HCa+COP maior que o grupo HCa (p<0,01). O gene DMP1 não foi expresso pelas células em nenhum grupo experimental. O grupo COP apresentou as menores expressões dos genes BGLAP, DSPP e HSP-27. As SHEDs do grupo MTA+COP apresentaram superexpressão dos genes BGLAP, DSPP e HSP-27, e as do grupo HCa+COP superexpressão dos genes BGLAP e HSP-27. O grupo HCa foi o único que não apresentou células em migração em todos os tempos experimentais. Os demais grupos apresentaram migração similar à do grupo Controle, exceto o grupo MTA em 12 e 24 horas. As SHEDs dos grupos HCa+COP e MTA+COP migraram significativamente mais que as dos grupos HCa e MTA, respectivamente. O COP, isolado ou em associação aos demais biomateriais, não interfere na proliferação de SHEDs e quando associado ao HCa é capaz de anular a citotoxicidade deste biomaterial isolado. O COP, isoladamente ou em associação, não interfere na atividade de fosfatase alcalina. Isoladamente, o COP induz a maior diferenciação funcional e quando associado ao HCa melhora substancialmente a diferenciação induzida por este biomaterial isolado. Os biomateriais isolados ou associados não são capazes de induzir expressão de DMP1. O COP associado aos biomateriais induz superexpressão de genes relacionados à formação de matriz extracelular e de diferenciação odontoblástica. O COP isoladamente não interfere na migração celular e, quando associado ao HCa, anula por completo a inibição de migração causada por esse biomaterial isolado. Quando associado ao MTA, o COP aumenta a velocidade de migração das células em relação ao MTA isolado. Óleo-resina de copaíba (COP) promove proliferação, diferenciação e migração de células-tronco de polpa dental sendo uma proposta de um biomaterial para capeamento pulpar. / The calcium hydroxide (CaH), the mineral trioxide aggregate (MTA) and the oil-resin copaiba (COP) by themselves have biological characteristics of the ideal direct pulp capping material. With the assumption that when associated they could originate materials more appropriated for direct pulp capping, this study aimed to analyze the in vitro proliferation, differentiation and migration of stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHEDs) in response to substances leached from COP alone or associated with CaH or MTA. Proliferation, differentiation and migration of SHEDs (PDH3 lineage) were analyzed through the MTT reduction assay; alkaline phosphatase (ALP) activity, mineralized nodules formation using the Alizarin Red assay and gene expression (BGLAP, DSPP, DMP1 e HSP-27) using qRT-PCR; and the Scratch assay, respectively. The cells were submitted to the culture medium conditioned by the biomaterials according to the following experimental groups: COP alone (COP); CaH alone (CaH); CaH associated to COP (CaH+COP); MTA alone (MTA) and MTA associated to COP (MTA+COP). Cells grown in fresh culture medium served as control. Data were compared by ANOVA complemented by the Tukey´s test (p 0.05). The CaH group presented number of viable cells significantly smaller (p<0.01) than those of all other experimental groups, including the CaH+COP, during whole experimental time. The ALP activity in 14 days was similar in all experimental groups. In 21 days, the COP group presented the amount of mineralization higher (p<0.01) than those of all other groups. The gene DMP1 was not expressed by the cells in all experimental groups. The COP group presented the smallest expression (p<0.01) of BGLAP, DSPP and HSP-27 genes. The SHEDs of the MTA+COP group presented superexpression of the BGLAP, DSPP and HSP-27 genes, and in the CaH+COP group the cells superexpressed the BGLAP and HSP-27 genes. The CaH group was the only one where there was no cell migration during whole experiment. Migration of all other groups was similar to that of the control group, except by the MTA group in 12 and 24 hours. The CaH+COP and MTA+COP migrated significantly more than the CaH and MTA groups, respectively. COP, alone or in association to the other biomaterials, does not interfere with the proliferation of the SHEDs, and when associated to CaH is able to annul the cytotoxicity of the CaH alone. The COP, alone or in association to the other biomaterials, does not interfere with the ALP activity. The COP alone induces the highest functional differentiation of the SHEDs and when associated to the CaH substantively improves this differentiation. The biomaterials, alone or in association, are not able to induce the expression of the DMP1 gene. The COP associated to the biomaterials induces superexpression of the genes related to the extracellular matrix formation and odontoblastic differentiation. The COP alone does not interfere with the cell migration and, when associate to CaH, completely annuls the inhibition of migration caused by this material alone. When associated to MTA the COP increases the cell migration speed compared to the effect of the MTA alone. Oil-resin copaiba (COP) promotes proliferation, differentiation and migration of stem cells from dental pulp with a proposal for a biomaterial for pulp capping.

Submitted by Edineia Teixeira (edineia.teixeira@unioeste.br) on 2018-04-20T13:11:28Z No. of bitstreams: 2 Giovani _Hartmann2018.pdf: 1083042 bytes, checksum: 4c6c31040314a6b8b1914db7eec998ac (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-20T13:11:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Giovani _Hartmann2018.pdf: 1083042 bytes, checksum: 4c6c31040314a6b8b1914db7eec998ac (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-01-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This study analyzed sericin as a potential biomaterial in contact with dentin pulp, histologically comparing its response to direct pulp capping with calcium hydroxide. These are the first morphological and functional data derived from application of this protein directly on pulp exposure. 20 maxillary first molars from Wistar male mice were used, with 60 days of age, between 200 and 300 grams, which were divided in 4 groups (n=5): G1 and G3, controls, capped with calcium hydroxide in 7 and 30 days, respectively; G2 and G4, capped with sericin in 7 and 30 days, respectively. Circular cavities were prepared for pulp exposure, where capping materials were applied, being posteriorly restored with glass ionomer cement. At the end of the groups period, animals were euthanized and molars were histologically processed for analysis in light microscopy to evaluate presence of necrosis in pulp tissue, inflammatory cells infiltration and tertiary dentin formation. After 7 days, there was less necrosis and inflammatory cells infiltration in G1 when compared to G2 (p=0.007 and p=0.008, respectively). After 30 days, a sample of G3 induced tertiary dentin formation and G4 showed decrease in inflammation (p=0.041) compared to G2. Among the determined experiment conditions, it was concluded that sericin did not present to be viable to treatment as it did not induce tertiary dentin formation, although, its contact with pulp tissue has shown improve in inflammatory response during the treatment and new cells proliferation. / Este estudo analisou a sericina como potencial biomaterial em contato com a polpa dental comparando histologicamente sua resposta ao capeamento pulpar direto com hidróxido de cálcio. Estes são os primeiros dados morfológicos e funcionais procedentes da aplicação desta proteína diretamente sobre a exposição da polpa. Foram utilizados 20 primeiros molares superiores de ratos Wistar machos, com 60 dias de idade entre 200 e 300 gramas, os quais foram divididos em 4 grupos (n=5): G1 e G3, controles, capeados com hidróxido de cálcio em 7 e 30 dias, respectivamente; G2 e G4, capeados com sericina em 7 e 30 dias, respectivamente. Cavidades circulares foram preparadas para exposição pulpar, onde foram aplicados os materiais capeadores, sendo posteriormente restauradas com cimento de ionômero de vidro. Transcorridos os tempos dos grupos, os animais foram eutanasiados e os molares foram processados histologicamente para análise em microscopia de luz para avaliar presença de necrose no tecido pulpar, infiltração de células inflamatórias e formação de dentina terciária. Aos 7 dias, a necrose e a infiltração de células inflamatórias foram menores em G1 quando comparado ao G2 (p=0,007 e p=0,008, respectivamente). Aos 30 dias, uma amostra do G3 induziu formação de dentina terciária e G4 apresentou diminuição de inflamação (p=0,041) em relação ao G2. Dentro das determinadas condições experimentais, concluiu-se que a sericina não se mostrou viável ao tratamento por não induzir formação de dentina terciária, entretanto, seu contato com o tecido pulpar demonstrou melhora na resposta inflamatória ao longo do tratamento e proliferação de novas células.

A translação da regeneração pulpar com células tronco para a clinica requerirá o uso de scaffolds injetáveis. O objetivo foi estudar o comportamento de células tronco obtidas de dentes decíduos exfoliados (SHED) injetados em canais radiculares de pré-molares humanos com ápice aberto com scaffold de colágeno recombinante humano tipo I (rhC-I) e a base de nanofibras auto-organizáveis (SA). Para determinar a viabilidade e potencial de diferenciação de SHED in vitro, raízes nao instrumentadas foram posicionadas com o ápice em meio de cultura. SHED ressuspendida em rhC e SA foram injetadas nos canais (n=24, 5X105 células/mL). Os controles foram SHED e scaffolds sozinhos. Marcadores para diferenciação odontoblastica (DSPP, DMP-1 e MEPE) foram avaliados semanalmente por RT-PCR por 28 dias. Para avaliar a diferenciação odontoblástica e formação de tecido in vivo, SHED transuzida com GFP foram injetadas em canais radiculares (n=8, 106 célulass/mL) utilizando os mesmos grupos e implantadas subcutaneamente em camundongos imunodeprimidos. O controle (C+) foi um pré-molar humano extraído. Analise estatística foi feita com ANOVA (=0.05). Os marcadores de diferenciação odontoblástica aumentaram para SA e rhC-I mas nao nos controles. Crescimento de tecido pulpar-símile ( do que 60% do comprimento da raiz) foi observado em 75% dos implantes para SA e rhC-I e 0% nos controles. Analise de imunohistoquimica para GFP confirmou a origem tecidual a partir de SHED. PCNA e ensaio de TUNEL mostraram alta ativiade proliferativa e poucas células apoptóticas. Injeções de tetraciclina evidenciaram neoformação de dentina. A densidade microvascular e nomero de odontoblastos delineando a dentinta foi similar em rhC-I, SA e C+. A associação de SHED com scaffolds injetáveis foi capaz de originar um tecido pulpar capaz de produzir dentina e constitui um passo a mais frente ao objetivo de regeneração pulpar em pacientes humanos. / The translation of dental pulp regeneration with stem cells to the clinic will require the use of injectable scaffolds. The aim was to study the behavior of stem cells from exfoliated deciduous teeth (SHED) injected in the root canal of opened-apex human premolars with either recombinant human collagen I (rhC-I) or selfassembling nanofiber (SA) scaffolds. To assess in vitro SHED viability and differentiative potential, non-instrumented roots were set with the apex in culture media. SHED were mixed in rhC-I or SA and injected into canals (n=24, 5X105 cells/mL). Controls were SHED or scaffolds alone. Odontoblastic differentiation markers (DSPP, DMP-1 and MEPE) were assessed weekly by RT-PCR for 28 days. To evaluate odontoblast differentiation and tissue formation in vivo, SHED transduced with GFP were injected in canals (n=8, 106 cells/mL) using same groups and implanted subcutaneously in immunodeficient mice. Positive control (C+) was extracted premolar. Statistic was done with ANOVA (=0.05). Odontoblastic differentiation markers increased in SA and rhC-I but not in controls. Pulp-like tissue growth ( than 60% of root length) was observed in 75% of implants for SA and rhC-I and 0% in controls. GFP staining confirmed SHEDs tissue origin. PCNA staining and TUNEL assay showed high proliferative activity and few apoptotic cells. Tetracycline injections showed newly formed dentin. Microvessel density and odontoblastic-like cell number lining dentin were similar in rhC-I, SA and C+. Injectable scaffolds and SHED allowed for the engineering of a pulp-like tissue and constitute one step forward towards the goal of dental p ulp regeneration in human patients.

A polpa dentária pode responder a uma agressão pela produção de dentina reacional e reparativa. Osteopontina (OPN), proteína abundante no osso, e proteína da matriz dentinária 1 (DMP1) podem estar presentes nessas dentinas. O objetivo do trabalho foi examinar a ultra-estrutura e a presença da OPN e DMP1 na dentina induzida pela extrusão de incisivos. Os incisivos de ratos foram extruídos e depois reposicionados. Após períodos de tempo determinados, as maxilas foram processadas para MET, MEV e imunocitoquímica. Após extrusão, houve formação de dentina reacional e reparativa, as quais variaram em aspecto, espessura e células secretoras. A OPN foi observada apenas na dentina reparativa num padrão semelhante ao encontrado no osso. A DMP1 foi detectada na matriz em mineralização de todas as dentinas estudadas, mas praticamente não foi observada nas suas pré-dentinas, o que confirmou o seu papel na mineralização. Tais achados mostraram que a dentina reparativa e o osso primário, além de semelhantes morfologicamente, são também similares com relação às suas composições / Reactionary dentine (Rc) and (Rp) reparative dentine are two strategies used by the dentine?pulp complex to respond to injury. Osteopontin (OPN) and dentine matrix protein 1 (DMP1) may be present in the matrix secreted after tissue injury. The aim of the present study was to examine the ultrastructure, as well as the presence of OPN and DMP1 in Rc and Rp by provoking extrusion of the rat incisor. The right upper incisors of rats were extruded and then repositioned. After certain periods of time, the maxillae were processed for scanning and transmission electron microscopy and for immunocytochemistry. After extrusive trauma, there was formation of Rc and Rp, which varied in aspect and thickness. OPN was only detected in the Rp in a pattern similar to bone. DMP1 was immunodetected in all the dentine types, but rare colloidal gold particles were observed in predentin, that confirmed its role in mineralization. The present findings showed that Rp shares some compositional characteristics with primary bone, especially in relation to its OPN content

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-08-21T18:31:15Z No. of bitstreams: 1 patriciayannedeoliveira.pdf: 1047015 bytes, checksum: 1a92b1ec7fc7cdc1e6d9f8551e6c4790 (MD5) / Rejected by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br), reason: Favor verificar metadata.dc.contributor.advisor2: Resende on 2017-08-24T12:05:18Z (GMT) / Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-08-24T12:09:35Z No. of bitstreams: 1 patriciayannedeoliveira.pdf: 1047015 bytes, checksum: 1a92b1ec7fc7cdc1e6d9f8551e6c4790 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-08-25T12:00:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 patriciayannedeoliveira.pdf: 1047015 bytes, checksum: 1a92b1ec7fc7cdc1e6d9f8551e6c4790 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-25T12:00:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 patriciayannedeoliveira.pdf: 1047015 bytes, checksum: 1a92b1ec7fc7cdc1e6d9f8551e6c4790 (MD5) Previous issue date: 2017-07-27 / Objetivo: Neste estudo in vitro, avaliou-se a proliferação de células-tronco de polpa dentária (DPSCs) após a aplicação de laser de baixa intensidade. Métodos: A análise da proliferação de DPSCs cultivadas com DMEM e SFB a 10% foi realizada pelo ensaio de redução de MTT. Estas células foram irradiadas a cada 12 horas durante 72 horas ou de 24 em 24 horas durante 72 horas, com um laser Vermelho-InGaAlP (660nm, 30mW e 0,5 ou 1J/cm2) durante 16 ou 33 segundos. O melhor parâmetro dado pelo ensaio do MTT foi utilizado para analisar a diferenciação osteogênica e a viabilidade celular através do teste Trypan Blue. Para a análise estatística foi utilizado o teste ANOVA com nível de significância de 5% (p <0,05). Resultados: Através do MTT, foi possível observar que a menor dose de laser (0,5J /cm2) em aplicações as 0 e 48 horas obteve as melhores taxas de proliferação comparada a todos os outros grupos. Além disso, o laser de baixa intensidade não influenciou estatísticamente na diferenciação osteogênica e na viabilidade celular após a coloração com o vermelho de alizarina e o teste Trypan Blue no melhor parâmetro encontrato pelo MTT (0,5J/cm2). Conclusões: Ao analisar os resultados e considerando os parâmetros utilizados, podemos observar que o laser de baixa intensidade é uma ferramenta que favorece a proliferação de DPSCs. Finalmente, outros estudos devem ser realizados a fim de melhor definir os parâmetros para as aplicações de células-tronco. / Purpose: In this in vitro study, the proliferation of dental pulp stem cells (DPSCs) was evaluated after the application of low intensity laser. Methods: Analysis of the proliferation of DPSCs cultured with DMEM and 10% FBS was performed by the MTT reduction assay. These cells were irradiated every 12 hours for 72 hours or every 24 hours for 72 hours, with a RedInGaAlP laser (660nm, 30mW and 0.5 or 1J/cm2) for 16 or 33 seconds. The best parameter recorded by MTT was used to analyze the osteogenic differentiation and viability using the Trypan Blue test. For the statistical analysis the ANOVA test was used with significance level of 5% (p <0.05). Results: Through the MTT, it was possible to observe that the lowest dose of the laser (0.5J/cm2) in applications at 0 and 48 hours obtained the best proliferation rates then all the other groups. In addition, the low level laser did not appear to influence on the osteogenic differentiation nor the viability of the cells by the Trypan Blue test in the best parameter found by MTT (0.5J /cm2). Conclusions: When analyzing the results and considering the parameters used, we can observe that the low intensity laser is a tool that favors the proliferation of dental pulp stem cells. Finally, further studies should be carried out in order to better define parameters for stem cell applications.

Orientador: Alan Roger dos Santos Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-23T07:58:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Faria_KarinaMorais_M.pdf: 4445653 bytes, checksum: 36b816cb52f434b02b350071fe5e34ea (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O tratamento do câncer de cabeça e pescoço está associado a uma série de toxicidades bucais. Neste contexto, evidências clínicas recentes demonstraram que a radioterapia em cabeça e pescoço provoca alterações na microvascularização e na inervação pulpar. Entretanto, estas alterações não foram demonstradas por meio de estudos morfológicos do tecido pulpar oriundo de pacientes oncológicos. Portanto, esta dissertação se propôs a investigar os efeitos diretos da radioterapia sobre a microvascularização, a inervação e a matriz extracelular da polpa de pacientes com câncer de cabeça e pescoço que foram submetidos à radioterapia. Foram utilizadas 40 amostras de polpa dental humana que foram divididas em dois grupos. No grupo irradiado, foram utilizadas 23 amostras de polpa obtidas de pacientes que haviam concluído radioterapia na região de cabeça e pescoço. O grupo controle foi composto por 17 amostras de polpas obtidas de pacientes sem histórico de radioterapia. Os espécimes dos dois grupos foram processados histologicamente e submetidos à coloração por meio da técnica da hematoxilina e eosina para avaliação morfológica da microvascularização, da inervação e da matriz extracelular das polpas. Adicionalmente, foi realizada análise da expressão imunoistoquímica (IHQ) de proteínas relacionadas à vascularização (CD-34 e actina músculo liso), à inervação (S-100; NCAM/CD56 e neurofilamento) e à matriz extracelular (vimentina) da polpa. O estudo morfológico identificou a presença e a preservação da microvasculatura, dos feixes neurais e da matriz extracelular em todas as amostras. A análise IHQ confirmou os achados morfológicos e demonstrou expressão preservada dos marcadores analisados em todas as amostras. Em conclusão, os efeitos diretos da radioterapia não são capazes de gerar alterações morfológicas na microvasculatura, na inervação e na matriz extracelular da polpa dental de pacientes com câncer de cabeça e pescoço / Abstract: The treatment of head and neck cancer is associated with a series of oral toxicities. In this context, recent clinical evidence demonstrated that head and neck radiotherapy causes changes in the microvasculature and innervation. However, such changes have not been demonstrated by morphological studies of the pulp tissue derived from cancer patients. Therefore, this essay aimed to investigate direct effects of radiation on the microvasculature, innervation and extracellular matrix of the pulp from patients with head and neck cancer who underwent radiotherapy. Forty samples of human dental pulp were used and were divided into two groups. In the irradiated group, 23 samples from patients who concluded head and neck radiotherapy were used. The control group was composed with 17 pulp samples obtained from patients without previous history of radiotherapy. Samples from both groups were histologically processed and stained with hematoxylin and eosin for a morphological evaluation of the microvasculature, innervation and extracellular matrix of the pulps. Subsequently, an immunohistochemical (IHC) analysis of proteins related to vascularization (CD-34 and smooth muscle actin), innervation (S-100, NCAM/CD56 and neurofilament) and extracellular matrix (vimentin) of the pulps was performed. The morphological study identified the presence and preservation of the microvasculature, nerve bundles and extracellular matrix of all studied samples. The IHC analysis confirmed the morphological findings and demonstrated a preserved expression for the studied markers in all samples. In conclusion, direct effects of radiotherapy are not able to generate morphological changes in the microvasculature, innervation or extracellular matrix of the dental pulp from patients with head and neck cancer / Mestrado / Estomatologia / Mestra em Estomatopatologia