Submitted by Geyciane Santos (geyciane_thamires@hotmail.com) on 2015-06-09T13:36:11Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Selma Barboza Perdomo.pdf: 714589 bytes, checksum: adb7bad1bf0a14396d51897811aafd0a (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-06-09T19:36:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Selma Barboza Perdomo.pdf: 714589 bytes, checksum: adb7bad1bf0a14396d51897811aafd0a (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-06-09T19:38:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Selma Barboza Perdomo.pdf: 714589 bytes, checksum: adb7bad1bf0a14396d51897811aafd0a (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-09T19:38:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Selma Barboza Perdomo.pdf: 714589 bytes, checksum: adb7bad1bf0a14396d51897811aafd0a (MD5) Previous issue date: 2008-11-10 / Não Informada / The Wound Version of Ferrans and Powers about the Life Quality Rate (IQVFP-VF) was firstly applied in diabetic people with wound on the foot. The lack of specific studies made in Brazil on life quality (QV) about this population has been a motivation for this paper to be carried out, which aims at – a) describing the socio-demographic profile of the diabetic patients with wounds on the foot; b) to correlate the QV scores according to its sociodemographic characteristics e; c) to describe the clinic characteristics, related to Diabetes mellitus (DM). This study has been descriptive, transversal, carried out through interviews and IQVFP-VF application on people who have been assisted in three different public services in Manaus-AM, where two in ambulatories and one at an internment sector of vascular surgery. The IQVFP-VF was built up and certified by Yamada (2006) and it is constituted of 70 items divided into four dominions: Health/Functioning (SF), Socioeconomics (SE), Psychological/Spiritual (PE), and Family (Fa). Initially the study received the author’s instrument authorization, also a favorable opinion of the Amazon Federal University - UFAM’s Ethic Committee, and the Hospitals’ authorization for datum gathering. There was a predominance of: men (54%); average age of 59,65 years old; people in stable matrimony (47,5%); Catholics (82%); dismissal from labor activities because of the wound (36%). About the clinical conditions there was: DM predominance type 2; average age of 9,89 years old for the time with the DM; use of oral hypoglycemia and balanced alimentation as a way to control glucose. Concerning to the wound it was verified: 1,19 wound average; 29,5% of the samples had a wound unleashing factor, the bruise by cutting/perforating object when walking bare foot; 31,1% with amputation. For a better results discussion it was used adistributed categorization in such a way that “zero” indicates very bad QV and 30 very good QV. Concerning to the QV, we had an average scores of 20,66 (±5,29) for IQVT. The most affected dominion was the Health/Functioning with an average score of 17,07 (±6,46) and with the highest score the PE with the average of 25,96 (±6,12). There was not correlation among the variables: professional activity, age, number of wounds, time with the DM; with the IQVT. There was a positive, but weak, correlation between family income (r=0,11), sex (r=0,11), time with the wound (r=0,11) and a strong correlation among amputation (r=0,49) and IQVT and its dominion. Patient in stable matrimony situation had an average higher than the others under Fa dominion (p=0,045). There was no meaningful difference either among intern patients and the ones who had been assisted at the ambulatories in the IQVT nor in its dominions. In conclusion, it has been attested that the IQVFP-VF is adequate to assess the diabetics’ life quality with wounds on the feet, and this population has shown to have a life quality considered “good”, but it has shown low score in the Health/Functioning dominion showing that the wound on the diabetic’s foot is a complication from the DM that has negative impact over these people’s life quality. / O Índice de Qualidade de Vida de Ferrans e Powers–Versão Feridas (IQVFP-VF) foi aplicado pela primeira em pessoas diabéticas com ferida no pé após sua construção e validação. A escassez de estudos realizados, no Brasil, específicos acerca da Qualidade de Vida (QV) nessa população, foi a motivação para realizar este estudo que teve como objetivos: a) descrever o perfil sócio-demográfico dos pacientes diabéticos com ferida no pé; b) correlacionar os escores de Qualidade de Vida segundo as características sócio-demográficas e c) descrever as características clínicas, relacionadas ao Diabetes mellitus (DM). O estudo foi descritivo, transversal, realizado por meio de entrevista e aplicação do IQVFP-VF nas pessoas atendidas em três serviços públicos da cidade de Manaus-AM, sendo dois ambulatórios e um setor de internação de cirurgia vascular. O IQVFP-VF foi construído e validado por Yamada (2006) é composto por 70 itens e está dividido em quatro subescalas: Saúde/Funcionamento (SF), Sócio-Econômico (SE), Psicológico/Espiritual (PE), e Família (Fa). Inicialmente o estudo recebeu autorização da autora do instrumento, parecer favorável do Comitê de Ética da Universidade Federal do Amazonas-UFAM e autorizações dos hospitais para a coleta dos dados. Houve predomínio de: homens (54%); idade média de 59,65 anos; pessoas com união estável (47,5%); católicos (82%); afastamento da atividade profissional por causa da ferida (36%). A respeito das condições clínicas houve: predomínio de DM do tipo 2; média de 9,89 anos para o tempo com DM; uso de hipoglicemiante oral e alimentação balanceada com forma de controle da glicemia. Concernente à ferida ficou constatado: média de 1,19 feridas; 29,5% da amostra tiveram como fator desencadeador da ferida objeto cortante/perfurante ao andar descalço; 31,1% com amputação. Para melhor discussão dos resultados, foi utilizada categorização distribuída de tal forma que “zero” indica QV muito ruim e 30 QV muito boa. Acerca da QV, foi obtido escore médio de 20,66 (±5,29) para IQVT. O Domínio mais afetado foi o Saúde/Funcionamento com escore médio de 17,07 (±6,46) e com maior escore o PE com média de 25,96 (±6,12). Não houve correlação entre as variáveis: atividade profissional, idade, número de feridas, tempo de DM, com o IQVT. Houve correlação positiva, porém fraca, entre renda familiar (r=0,11), sexo (r=0,11), tempo com a ferida (r=0,11) e correlação forte entre amputação (r=0,49) e IQVT e seus domínios. Os pacientes com união estável tiveram média superior aos demais no Domínio Fa (p=0, 045). Em conclusão, ficou constatado que o IQVFP-VF é adequado para avaliar a QV de diabéticos com ferida no pé, que essa população mostrou ter qualidade de vida “boa”, porém, apresentou escore baixo no Domínio Saúde/Funcionamento demonstrando que a ferida no pé do diabético é uma complicação do DM que tem impacto negativo sobre a Qualidade de Vida dessas pessoas.

Orientador: Iracema Matos Paranhos Calderon / Resumo: Introdução – Diabetes Melito Gestacional é definido por diabetes diagnosticado no segundo ou terceiro trimestres da gestação, com prevalência mundial de 2 a 20%. Essa condição tem repercussões maternas e fetais, na gestação e após, e constitui risco para Diabetes Melito tipo 2, síndrome metabólica e doença cardiovascular. A meta é o controle da hiperglicemia materna, iniciado por mudança no estilo de vida – adequação alimentar e exercício e, se necessário, associação de insulina. Entretanto, não há definição sobre a dieta ideal, sendo recomendadas orientações individuais, com dietas de baixo teor de calorias e gorduras, especialmente saturadas, e fibras. Por consenso, a restrição calórica está indicada, apenas, nas mulheres com peso excessivo. Apesar da indefinição, a adequação no consumo alimentar e o equilíbrio de macro e micronutrientes, tem sido a regra. Micronutrientes específicos, como cálcio, vitamina D, selênio, magnésio e zinco, ganham destaque, pela potencial ação na resistência à insulina, elemento chave para a hiperglicemia nessas gestações. Objetivo – Avaliar o perfil nutricional de gestantes com Diabetes Melito Gestacional, considerando macro e microelementos, na gestação e no período de quatro anos após o parto, e relacionar este perfil com marcadores de síndrome metabólica, controle glicêmico, peso do recém-nascido e ocorrência de intolerância à glicose e Diabetes Melito tipo 2 após a gestação. Método – Estudo de coorte que incluiu 65 gestantes com Diabetes Me... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Diabete melito (DM) é uma doença freqüente, complexa e multifatorial, caracterizada pela ausência absoluta ou relativa de insulina, correspondendo a uma das principais endocrinopatias no cão. Freqüentemente, o cão diabético é acometido por catarata, resultando em cegueira e impossibilitando a oftalmoscopia, diferentemente do homem, no qual a oftalmoscopia permite diagnosticar, estadiar e tratar a retinopatia diabética (RD) que é uma microangiopatia que afeta primariamente as arteríolas précapilares, capilares, vênulas pós-capilares e vasos de maior calibre. Na presença de opacidade densa de meios, a avaliação da função retiniana pode ser feita com o Eletrorretinograma de Campo Total (ERG) que é o traçado obtido da resposta elétrica produzida pela retina, em conseqüência à estimulação luminosa, fornecendo dados objetivos. O presente estudo objetivou avaliar as alterações eletrorretinográficas em cães diabéticos portadores de catarata madura ou hipermadura, seguindo o protocolo da International Society for Clinical Electrophysiology of Vision (ISCEV), avaliando a prevalência e a gravidade da retinopatia diabética nesta espécie. Foram realizados exames em 74 cães (53 fêmeas e 21 machos), de 6 a 13 anos de idade (média 9,4 anos), provenientes do Hospital Veterinário da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo divididos em 3 grupos: GN (grupo normal) - cães normais; GC (grupo catarata) - cães com catarata (madura e hipermadura); GD (grupo diabete melito) - cães com catarata e com DM. Nos três grupos, foram mensurados a amplitude pico a pico em microvolts (&micro;V) e o tempo de culminação da onda-b em milisegundos (ms). Observou-se tendência de queda nas amplitudes das respostas no grupo dos animais diabéticos (GD), quando comparado com os grupos GN e GC. Esta redução foi estatisticamente significante (p< 0,05) na amplitude dos bastonetes e nos potenciais oscilatórios quando se comparou GN com GD (61,4&micro;V versus 46,7&micro;V; 9,8&micro;V versus 6,2&micro;V, respectivamente); e na amplitude do Flicker quando se comparou GN com GC (14,1&micro;V versus 9,2&micro;V) e GN com GD (14,1 versus 5,9&micro;V). Houve aumento (atraso) do tempo de culminação da onda-b nos grupos GC e GD comparado com GN. Esta diferença foi estatisticamente significante quando se comparou GN com GC (48,3ms versus 54,0ms) e GN com GD na resposta de bastonetes (48,3ms versus 55,8ms), máxima resposta (29,6ms versus 33,0ms), resposta de cones (29,0ms versus 31,5ms) e Flicker. (21,6ms versus 24,4ms). Com estes dados, pode-se sugerir que estes cães portadores de DM apresentaram retinopatia diabética. / Diabetes mellitus (DM) is a common, complex and multifactorial disease characterized by absolute and/or relative absence of insulin, composing one of the most important dog\'s endocrinopathies. Diabetic dogs are frequently affected by cataracts, resulting in blindness and impossibility to visualize the fundus, in contrast to the humans in whom the ophthamoscopic examination allows the diagnosis, staging and treatment of the diabetic retinopathy (DR). The DR is a microangiopathy that affects specially the pre-capillary arterioles, capillaries, post-capillary venulas and large vessels. In the presence of dense opacity of the lens, the retina function may be evaluated with Full Field Electroretinography (ERG), which is the trace obtained from the retina electric response due to the luminous stimulation resulting in objective data. The aim of this study was to evaluate the electroretinographic alterations in diabetic dogs with mature or hypermature cataracts, following the International Society for Clinical Electrophysiology of Vision (ISCEV) protocol. Thus, the prevalence and the severity of the diabetic retinopathy were evaluated in this specie. ERG examinations were performed in seventy-four dogs, from 6 to 13 years old (medium 9.4 years old). Fifty-three were females and 21 males, from the Hospital Veterinário da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo. The animals were divided in three groups: Group N (GN) - normal dogs; Group C (GC) - dogs with cataracts (mature and hypermature); Group D (GD) - dogs with cataracts and DM. The peak to peak amplitude in microvolts (&micro;V) and the b-wave implicity time in milliseconds (ms) were measured. There was a decrease in amplitude of the responses in diabetic animals, compared to groups N and C. This reduction was statistically significant (p< 0.05) in rod amplitude and POs when compared GN with GD (61.4&micro;V versus 46.7&micro;V; 9.8&micro;V versus 6.2&micro;V, respectively); and Flicker amplitude when compared GN with GC (14.1&micro;V versus 9.2&micro;V) and GN with GD (14.1 versus 5.9&micro;V). There was an augmentation of the implicity time in the diabetic animals, compared to groups GN and GC. This difference was statistically significant when compared GN with GC in rod response (48.3ms versus 54.0ms) and GN with GD in rod response (48.3ms versus 55.8ms), maximum response (29.6ms versus 33.0ms), cone response (29.0ms versus 31.5ms) and Flicker (21.6ms versus 24.4ms). Based on these data from ERG exam, it can be suggested that these diabetic dogs presented diabetic retinopathy.

The present study sought to compare the in vitro antioxidant potentials of a newly synthesized organodiselenide, dicholesteroyl diselenide (DCDS) and diphenyl diselenide (DPDS) and their possible interactions with some thiol containing enzymes in different tissues from mammalian system. In addition, the potency of DPDS as antioxidant and antihyperglycaemic agents, and its interaction with thiol containing proteins in various mammalian tissues and organs (hepatic, renal and spleenic and more importantly cerebral tissues) were evaluated in animal models of streptozotocin induced diabetic rats. The in vitro results show that DPDS exhibited a higher glutathione-peroxidase mimetic activity as well as increased ability to oxidize both mono- and di- thiols than DCDS. In addition, while DPDS inhibited thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and protein carbonyls formations in both cerebral and hepatic tissues, induced by either iron (II) or SNP, DCDS exhibited a prooxidant effect in both cerebral and hepatic tissues when iron (II) serves as the prooxidant, However, when TBARS was induced by SNP, DCDS slightly modify TBARS formation in both hepatic and cerebral tissues. Also the activities of cerebral and hepatic delata aminolevulinic acid dehydratase (ð-ALA-D), cerebral Na+/K+- ATPase were significantly inhibited by DPDS and only weakly inhibited by the DCDS. Further studies reveal that the inhibition caused by organodiselenides (in this case, DPDS) on Na+/K+-ATPase activity likely involves the modification of the thiol groups at the ATP binding site of the enzyme. Similarly, different isoforms of lactate dehydrogenase (LDH) were significantly inhibited by both DPDS and DCDS in vitro. Likewise, we observed that the in vitro inhibition of different isoforms of lactate dehydrogenase by DCDS and DPDS likely involves the modification of the -SH groups at the NAD+ binding site of the enzyme. Oral administration of DPDS dissolved in soya bean oil administered to streptozotocin induced diabetes in male albino rats shows that there was significant reduction in blood glucose levels accompanied by a marked reduction of glycated proteins in streptozotocin induced diabetic rats treated with DPDS in relation to untreated streptozotocin induced diabetic. In addition, DPDS was able to significantly ameliorate the levels of Vitamin C and GSH (liver, kidney and spleen), which were decreased in streptozotocin treated rats. Similarly, treatment with DPDS was able to markedly abolish the increase levels of TBARS that were observed in STZ diabetes group. Finally, the inhibition of both ð-ALA-D and some isoforms of LDH caused by hyperglycaemia were prevented by DPDS. We also observed that although streptozotocin evoke a significant diminution on brain s antioxidant status and activity of Na+/K+-ATPase, but the activity of acetylcholineesterase and glutamate uptake and release were not altered. However, DPDS was able to markedly restore the observed imbalance in antioxidant status and sodium pump. Finally, we conclude that organodiselenides are promising antioxidant remedy in the management of diseases caused by oxidative stress. However, their toxicity involves an interaction with thiols on proteins and this study has further demonstrated that the sulphydryl groups in question are critical to the normal function of the protein or enzymes. Most likely, these -SH are associated with thiols at the substrate binding (active site) sites of the enzymes. Interestingly, pharmacological doses of organodiselenides 3mg/kg bw for the study on diabetes do not present any observed toxicity. / O presente estudo quis comparar os potenciais antioxidants in vitro de organoselênios novamente sintetizados, diseleneto dicolesterol e diseleneto de difenila e suas possíveis interações com algumas enzimas contendo tióis em diferentes tecidos de mamíferos. Além disso, o potencial de DPDS como agente antioxidante e antihiperglicêmico, e sua interação com proteínas contendo tióis em vários tecidos e órgãos de mamíferos (hepático, renal, esplênico e, mais importante, tecido cerebral) foram avaliados em modelos animais de streptozotocina induzindo diabetes em ratos. Os resultados in vitro mostram que DPDS exibiu uma maior atividade mimética da glutationa peroxidase bem como aumentada habilidade para oxidar mono e di-tióis que DPDS. Além disso, enquanto o DPDS inibiu substâncias reativas ao ácido tiobarbitpúrico (TBARS) e formação de proteínas carboniladas em tecidos cerebral e hepático, induzidas por ferro(II) ou SNP, DCDS exibiu um efeito pró-oxidante em cérebro e tecido hepático quando ferro(II) serviu como próoxidante, porém, quando TBARS foi induzido por SNP, DCDS modificou a formação de TBARS tanto em tecido cerebral como hepático. Também, as atividades da deltaaminolevulinato desidratase (ð-ALA-D) cerebral e hepática e Na+/K+-ATPase cerebral foram significativamente inibidas por DPDS e somente fracamente inibida por DCDS. Mas estudos revelam que a inibição causada por organodiselenetos (neste caso, DPDS) na atividade da Na+/K+-ATPase envolve a modificação de grupos tiólicos ligados ao sítio ATP da enzima. Similarmente, diferentes isoformas da lactato desidrogenase (LDH) foram significativamente inibidas por DPDS e DCDS in vitro. nós observamos que a inibição in vitro de diferentes isoformas da LDH por DCDS e DPDS envolve a modificação de grupos SH no sítio ligante NAD+ da enzima. a administração oral de DPDS dissolvido em óleo soya administrado a ratos albino machos com diabetes induzida por streptozotocina mostrou que houve uma redução significante nos níveis de glicose sanguínea acompanhada por uma marcada redução nas proteínas glicadas em ratos diabéticos induzidos com streptozitocina tratados com DPDS em relação aos não diabéticos. Além disso, DPDS melhorou significativamente os níveis de vitamina C e GSH (fígado, rim e baço), que foram diminuídos em ratos tratados com streptozotocina. Similarmente, tratamento com DPDS marcadamente aboliu os níveis elevados de TBARS que foram observados no grupo diabético. Finalmente, a inibição da ð-ALA-D e algumas isoformas da LDH causada pela hiperglicemia foram prevenidas por DPDS. Nós também observamos que STZ provocou uma significante diminuição no status antioxidante do cérebro e atividade da Na+/K+- ATPase, mas a atividade da acetilcolinesterase e captação e liberação de glutamato não foram alteradas. Porém, DPDS marcadamente restaurou o desequilíbrio observado no status antioxidante e bomba de sódio. Finalmente, nós concluímos que organoselenetos são remédios antioxidantes promissores no manejo de doenças causadas por estresse oxidativo. Porém, sua toxicidade envolve uma interação com tióis em proteínas e este estudo demonstrou que os grupos sulfidril em questão são críticos para a função normal de enzimas e proteínas. Estes SH são associados com tióis dos sítios de ligação do substrato (sítio ativo) de enzimas. interessantemente, doses farmacológicas de organodiselenetos (3mg/kg para o estudo de diabetes) não apresentou nenhuma toxicidade observada.

Resumo: Objetivo: avaliar o estresse oxidativo no sangue e na placenta de ratas com diabete de intensidade moderada. Métodos: O diabete foi induzido em ratas Wistar recém-nascidas (grupo diabete moderado) no dia do nascimento (dia 0) por streptozotocin (100 mg/kg, via subcutênea). As ratas do grupo nãodiabético (controle) receberam somente tampão citrato. Na vida adulta, as ratas (diabéticas e controle) foram submetidas ao acasalamento e o dia de diagnóstico positivo de prenhez foi considerado dia 0. A glicemia foi determinada nos dias 0, 7, 14 e 21 de prenhez. No 21º dia de prenhez, as ratas foram anestesiadas e dessangradas para determinação das atividades enzimáticas de superóxido dismutase (SOD), glutationa peroxidase (GSH-Px) e glutationa redutase (GSH-Rd) e das concentrações de grupos tiólicos (SH) e de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). Em seguida, as placentas foram retiradas e processadas para determinação das atividades de SOD e catalase e concentração de TBARS, gluationa reduzida e grupos tiólicos. Resultados: Ratas com diabete induzido no período neonatal (grupo diabético) apresentaram glicemia superior a 120mg/dl no dia 0 de prenhez e foi observada hiperglicemia no 14º dia de prenhez. A análise do estresse oxidativo em hemáceas lavadas mostrou que no grupo diabético houve aumento significativo na atividade da GSH-Px. No tecido placentário a atividade da catalase foi significativamente maior em ratas com diabete moderado. Conclusão: Frente às condições experimentais analisadas, o aumento dos biomarcadores do sistema antioxidante em ratas com diabete de intensidade moderada foram suficientes para conter o estresse oxidativo. / Abstract: Objective: To evaluate the oxidative stress in blood sample and placental of female rats that received streptozotocin in the neonatal period. Methods: The diabetes was induced in female offspring (diabetic group) in the day of the birth (day 0) for streptozotocin (100 mg/kg, subcutaneous route). Female control rat (control group) received only citrate buffer. In the adult life, the female rats were submitted to the mating and the day the positive diagnosis, was considered day 0 of pregnancy. The glycemia was measured in the 0, 7, 14 and 21 of pregnancy. At day 21 of pregnancy, the female rats were anesthetized and died by decapitation for collection of the blood for determination of the enzymatic activity of the superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px) and glutathione reductase (GSH-Rd) and of the concentrations of thiols group and thiobarbituric acid reactive substances (TBARS). Afterwards, placental were removed and processed for determinations of the enzymatic activity of the SOD and catalase and of the concentrations of the TBARS, glutathione reduced (GSH) and thiols group (SH). Results: Diabetic rats presented blood glucose concentration greater than 120 mg/dL in the day 0 of pregnancy and hyperglycemia in 14 º day of pregnancy. The analysis of the oxidative stress in maternal blood sample showed increased in GSH-Px activity. In placental tissue catalase activity of diabetic group is found to be increase in homogenate tissue in diabetic group. Conclusion: The hyperglycemia in diabetic rats increased antioxidant system biomarkers, however, these alterations were enough to control oxidative stress. / Orientador: Débora Cristina Damasceno / Coorientador: Tiago Rodrigues / Mestre

La diabetes mellitus es un serio desorden metabólicocrónico que se caracteriza por el incremento anormal de laglucosa en la sangre y por complicaciones vasculares yneurológicas. La diabetes mellitus es causada por una falta oun defecto en la acción de la insulina. Si bien actualmenteexisten varios medicamentos orales además de la insulina oanálogos de la insulina, ninguno de estos es el ideal.El vanadio es capaz de imitar los efectos mostrados por lainsulina tanto in vitro como in vivo y se estudia la posibilidadde usar compuestos de vanadio como agentes antidiabéticos. Eneste artículo se revisará la acción insulino-mimética del vanadioy sus posibles mecanismos en comparación con la insulina. / Diabetes mellitus is a serious chronic metabolic disordercharacterized by an increased plasma glucose concentrationand vascular and neurologic complications as well. Diabetesmellitus results from relative or absolute deficiency of insulinsecretion or insulin deficient action. Although there are anumber of oral antidiabetic agents besides insulin or insulinanalogues, none of them is optimal.Vanadium can mimic insulin effects in vitro and in vivoand the possibility of using vanadium compounds asantidiabetic agents is under study. This review will summarizethe insulin mimetic action of vanadium and its possiblemechanisms in comparison with insulin.

Diabete melito (DM) é uma doença freqüente, complexa e multifatorial, caracterizada pela ausência absoluta ou relativa de insulina, correspondendo a uma das principais endocrinopatias no cão. Freqüentemente, o cão diabético é acometido por catarata, resultando em cegueira e impossibilitando a oftalmoscopia, diferentemente do homem, no qual a oftalmoscopia permite diagnosticar, estadiar e tratar a retinopatia diabética (RD) que é uma microangiopatia que afeta primariamente as arteríolas précapilares, capilares, vênulas pós-capilares e vasos de maior calibre. Na presença de opacidade densa de meios, a avaliação da função retiniana pode ser feita com o Eletrorretinograma de Campo Total (ERG) que é o traçado obtido da resposta elétrica produzida pela retina, em conseqüência à estimulação luminosa, fornecendo dados objetivos. O presente estudo objetivou avaliar as alterações eletrorretinográficas em cães diabéticos portadores de catarata madura ou hipermadura, seguindo o protocolo da International Society for Clinical Electrophysiology of Vision (ISCEV), avaliando a prevalência e a gravidade da retinopatia diabética nesta espécie. Foram realizados exames em 74 cães (53 fêmeas e 21 machos), de 6 a 13 anos de idade (média 9,4 anos), provenientes do Hospital Veterinário da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo divididos em 3 grupos: GN (grupo normal) - cães normais; GC (grupo catarata) - cães com catarata (madura e hipermadura); GD (grupo diabete melito) - cães com catarata e com DM. Nos três grupos, foram mensurados a amplitude pico a pico em microvolts (&micro;V) e o tempo de culminação da onda-b em milisegundos (ms). Observou-se tendência de queda nas amplitudes das respostas no grupo dos animais diabéticos (GD), quando comparado com os grupos GN e GC. Esta redução foi estatisticamente significante (p< 0,05) na amplitude dos bastonetes e nos potenciais oscilatórios quando se comparou GN com GD (61,4&micro;V versus 46,7&micro;V; 9,8&micro;V versus 6,2&micro;V, respectivamente); e na amplitude do Flicker quando se comparou GN com GC (14,1&micro;V versus 9,2&micro;V) e GN com GD (14,1 versus 5,9&micro;V). Houve aumento (atraso) do tempo de culminação da onda-b nos grupos GC e GD comparado com GN. Esta diferença foi estatisticamente significante quando se comparou GN com GC (48,3ms versus 54,0ms) e GN com GD na resposta de bastonetes (48,3ms versus 55,8ms), máxima resposta (29,6ms versus 33,0ms), resposta de cones (29,0ms versus 31,5ms) e Flicker. (21,6ms versus 24,4ms). Com estes dados, pode-se sugerir que estes cães portadores de DM apresentaram retinopatia diabética. / Diabetes mellitus (DM) is a common, complex and multifactorial disease characterized by absolute and/or relative absence of insulin, composing one of the most important dog\'s endocrinopathies. Diabetic dogs are frequently affected by cataracts, resulting in blindness and impossibility to visualize the fundus, in contrast to the humans in whom the ophthamoscopic examination allows the diagnosis, staging and treatment of the diabetic retinopathy (DR). The DR is a microangiopathy that affects specially the pre-capillary arterioles, capillaries, post-capillary venulas and large vessels. In the presence of dense opacity of the lens, the retina function may be evaluated with Full Field Electroretinography (ERG), which is the trace obtained from the retina electric response due to the luminous stimulation resulting in objective data. The aim of this study was to evaluate the electroretinographic alterations in diabetic dogs with mature or hypermature cataracts, following the International Society for Clinical Electrophysiology of Vision (ISCEV) protocol. Thus, the prevalence and the severity of the diabetic retinopathy were evaluated in this specie. ERG examinations were performed in seventy-four dogs, from 6 to 13 years old (medium 9.4 years old). Fifty-three were females and 21 males, from the Hospital Veterinário da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo. The animals were divided in three groups: Group N (GN) - normal dogs; Group C (GC) - dogs with cataracts (mature and hypermature); Group D (GD) - dogs with cataracts and DM. The peak to peak amplitude in microvolts (&micro;V) and the b-wave implicity time in milliseconds (ms) were measured. There was a decrease in amplitude of the responses in diabetic animals, compared to groups N and C. This reduction was statistically significant (p< 0.05) in rod amplitude and POs when compared GN with GD (61.4&micro;V versus 46.7&micro;V; 9.8&micro;V versus 6.2&micro;V, respectively); and Flicker amplitude when compared GN with GC (14.1&micro;V versus 9.2&micro;V) and GN with GD (14.1 versus 5.9&micro;V). There was an augmentation of the implicity time in the diabetic animals, compared to groups GN and GC. This difference was statistically significant when compared GN with GC in rod response (48.3ms versus 54.0ms) and GN with GD in rod response (48.3ms versus 55.8ms), maximum response (29.6ms versus 33.0ms), cone response (29.0ms versus 31.5ms) and Flicker (21.6ms versus 24.4ms). Based on these data from ERG exam, it can be suggested that these diabetic dogs presented diabetic retinopathy.

As doenças cardiovasculares e o diabete melito fazem parte das DCNT prioritárias da OMS, devido às altas taxas de morbimortalidade e incapacidade que geram a cada ano. Estima-se que no mundo existam 387 milhões de diabéticos e outros 316 milhões de pessoas com características de risco, como pré-diabete. Cerca de 60% dos pacientes com DM2 desenvolvem doença cardiovascular, a qual inicia de forma concomitante aos distúrbios do metabolismo da glicose, podendo existir mecanismos fisiopatológicos comuns entre as doenças. Metade dos eventos coronarianos, inclusive a morte súbita, ocorrem em indivíduos assintomáticos, evidenciando a necessidade de novos marcadores precoces, já que em muitos deles a morte é a primeira manifestação. Recentemente, tem sido sugerido que os miRNAs envolvidos na regulação da expressão gênica podem ser caracterizados como biomarcadores em diversas doenças. Nosso objetivo é identificar alterações no perfil de miRNAs circulantes em indivíduos euglicêmicos e pré-diabéticos com e sem aterosclerose subclínica, utilizando a tecnologia de qPCR Arrays, com a finalidade de identificar candidatos a biomarcadores moleculares dessa condição. Encontrou-se que a aterosclerose subclínica esteve associada com o envelhecimento, a menopausa, etnia branca, dislipidemia, resistência à insulina, o aumento da adiposidade, leptina e do TNF-&#945;. O aumento do miR98-5p e a diminuição dos miRNAs miR-212-3p, miR-145-5p, miR-93-5p, miR15a-5p, miR-19a-3p, miR32-5p levaram a ativação da via de sinalização da aterosclerose. Os resultados sugerem que a inflamação foi o principal mecanismo associado com o desenvolvimento de aterosclerose subclínica neste estudo. / Cardiovascular Disease and Diabetes Mellitus are relevant NCDs for the WHO. It´s estimated that, worldwide, there are 387 millions of diabetics and 316 millions of people with risk characteristics like prediabetes. About 60% of patients with T2DM develops cardiovascular disease, which starts at the same time as disorders of glucose metabolism, there may be common pathophysiological mechanisms among diseases. Half of coronary events, including sudden death, occurs in asymptomatic individuals. This fact, highlights the need for new early markers of the disease, especially in asymptomatic patients, since in many of them, death is the first manifestation. It has been recently suggested that miRNAs involved in pos-transcriptional regulation of gene expression, could be characterized as biomarkers of diseases. Our goal is to identify changes in the profile of circulating microRNAs in euglycemic and prediabetic patients with or without subclinical atherosclerosis, by quantitative Polymerase Chain Reaction array (qPCR Array) in order to find molecular biomarkers of this condition. We found that subclinical atherosclerosis was associated with aging, menopause, white ethnicity, dyslipidemia, insulin resistance, increased adiposity, leptin and TNF-&#945;. The up-regulation of miR98-5p and the down-regulation miR-212-3p, miR-145-5p, miR-93-5p, miR15a-5p, miR-19a-3p, miR32-5p led to activation of the signaling pathway of atherosclerosis. The results suggest that inflammation was the main mechanism associated with the development of subclinical atherosclerosis in this study.

A angiogênese é um processo essencial para a formação placentária. Dentre os muitos fatores envolvidos neste evento biológico, destaca-se de forma preponderante o Fator de Crescimento Endotelial Vascular (VEGF), cuja produção é controlada por genes, que podem apresentar variantes polimórficas diversas. As conseqüências funcionais destas variações não estão ainda completamente elucidadas, embora algumas tenham sido já associadas a um comprometimento da angiogênese em diversos sistemas biológicos. Por outro lado, alterações morfológicas na formação, distribuição e arranjo dos vasos placentários foram descritas na placenta de gestantes com distúrbios hiperglicêmicos como a Diabete mellitus e a hiperglicemia moderada. Particularmente nos casos de hiperglicemia moderada, a adaptação vascular observada parece estar relacionada à manutenção da capacidade funcional placentária. Na diabete, este achado foi correlacionado à expressão protéica e gênica atípica de determinados fatores angiogênicos na interface materno-fetal, enquanto que em outras condições hiperglicêmicas a provável participação destes fatores ainda não foi completamente determinada. Desta forma, partindo da hipótese de que as alterações placentárias vasculares em gestantes hiperglicêmicas podem ser decorrentes da expressão ou produção atípica do VEGF e que esta por sua vez pode ser decorrente de polimorfismos gênicos, o objetivo deste estudo foi avaliar polimorfismos do gene deste fator de crescimento em placentas de gestantes com distúrbios hiperglicêmicos. Foi realizada a análise dos polimorfismos -460C/T, -634G/C e 936C/T do gene do VEGF em fragmentos de vilos coriônicos de gestantes normoglicêmicas, com hiperglicemia moderada e com Diabete mellitus prévia à gestação, denominados respectivamente de grupo IA, IB e IIB. Todo o material foi fornecido pelo Serviço de Diabetes e Gravidez da Faculdade de Medicina de Botucatu UNESP. A genotipagem dos polimorfismos do VEGF foi realizada através da Reação de Polimerase em Cadeia (PCR), seguida de digestão por enzima de restrição. As freqüências de distribuição genotípica e alélica dos polimorfismos do VEGF foram comparadas entre os grupos hiperglicêmicos (IB e IIB) e 6 o grupo controle. As freqüências genotípicas estavam em equilíbrio de Hardy-Weinberg. Foram observadas diferenças significantes nas freqüências genotípicas e alélicas do polimorfismo -460C/T do gene do VEGF em placentas de gestantes hiperglicêmicas (grupos IB e IIB) quando comparadas entre si, mas não com o grupo controle. Diferenças estatísticas nas freqüências genotípicas e alélicas do polimorfismo -634G/C VEGF foram detectadas nos grupos hiperglicêmicos em geral comparados ao grupo controle. Não foram identificadas diferenças nas freqüências genotípicas e alélicas do polimorfismo 936C/T do VEGF entre os grupos avaliados. Em conjunto, nossos achados sugerem que a resposta placentária a distúrbios hiperglicêmicos pode estar correlacionada à presença dos dois polimorfismos: -460C/T e 634C/G. No entanto, nenhuma correlação direta funcional positiva foi observada com a angiogênese observada nas placentas de gestações associadas à hiperglicemia moderada. / The angiogenesis is a process essential for placental formation. Among the many factors involved in this biological event, the factor most active is the vascular endothelial growth factor (VEGF), whose production is controlled by genes, which may present different polymorphic variants. The functional consequences of these changes are not yet fully elucidated, although some have been associated with an impairment of angiogenesis in various biological systems. Moreover, morphological changes in distribution and arrangement of the placental vessels were described in the placenta of pregnant women with hyperglycemic disorders such as diabetes mellitus and mild hyperglycemia. Particularly in cases of mild hyperglycemia, the observed vascular adaptation seems to be related to the maintenance of functional placenta. In diabetes, this finding was correlated with the atypical gene and protein expression of certain angiogenic factors in maternalfetal interface, while in other hyperglycemic conditions the likely participation of these factors has not been fully determined. Thus, based on the hypothesis that placental vascular changes in hyperglycemic pregnant women may be due to atypical expression or production of VEGF and that this in turn may be caused by gene polymorphisms, the objective of this study was to assess polymorphisms of this gene factor growth in placentas of women with hyperglycemic disorders. The analysis of the polymorphisms of the VEGF gene was performed in fragments of chorionic villi of normoglycemic, mild hyperglycemic and diabetic pregnant women, respectively named of group IA, IB and IIB. All specimens were provided by the Serviço de Serviço de Diabetes e Gravidez da Faculdade de Medicina de Botucatu UNESP. Genotyping of the VEGF gene polymorphisms -460C/T, -634G/C and 936C/T was done by the polymerase chain reaction (PCR) and restriction fragment length polymorphism methods. The frequency of VEGF alleles and genotype distribution were compared among the hyperglycemic and control groups. The genotype frequencies were in Hardy-Weinberg equilibrium. We have observed significant differences of VEGF -460C/T polymorphism between the hyperglycemic placentas (IB X IIB), but not compared to control group. Statistical differences in the genotypic and allelic frequencies of C of VEGF -634G/C were detected 8 in hyperglycemic groups in general in comparison to controls. There were no significant differences in allelic or genotype frequencies among the evaluated groups. Taken together our findings suggest that the placental response to hyperglycemic disturbs may be correlated to the presence of both -460C/T and -636C/G polymorphism of the VEGF gene. However, no direct functional correlation was detected between these VEGF polymorphisms and the intense angiogenesis seen in placentas of mild hyperglycemiaassociated gestation.

L’obésité abdominale est associée à de nombreuses complications métaboliques, telles que la résistance à l’insuline, le diabète de type 2 et les maladies cardiovasculaires. Récemment, il a été suggéré que ces anomalies métaboliques sont étroitement associées à la taille des adipocytes, cellules constitutives du tissu adipeux. En effet, plusieurs travaux suggèrent que plus les adipocytes sont gros, plus ils produisent des adipokines pro-inflammatoires, responsables de l’inflammation chronique associée à l’obésité. Dans ce contexte, le but de ce travail de thèse était, dans un premier temps, d’établir les répartitions en fréquences de tailles des adipocytes dans différentes situations physiologiques et physiopathologiques et dans différents dépôts adipeux à l’aide du Multisizer IV Coulter counter et dans un second temps de corréler la taille des adipocytes à leurs fonctions physiologiques. D’une part, nous avons montré que quels que soient les dépôts adipeux, les répartitions en fréquences de tailles des adipocytes ont toutes le même profil, elles sont bimodales avec une population de petits adipocytes (diamètre < nadir) et une population de gros adipocytes (diamètre > nadir). La privation en insuline (diabète de type I) entraînant une diminution de 60% de la masse du tissu adipeux, altére profondément la répartition bimodale en fréquences de tailles des adipocytes. La supplémentation en insuline de ces animaux diabétiques restaure la cellularité du tissu adipeux et la répartition en fréquences de tailles des adipocytes, suggérant un rôle régulateur majeur de l’insuline sur ces paramètres. La restriction calorique partielle, nous a permis de mettre en évidence un phénomène d’hystérésis dans certains tissus adipeux. De plus, à partir des données de restriction calorique prolongée il a été possible d’établir un modèle prédisant la cinétique des changements de tailles des adipocytes et de la répartition en fréquences de tailles. D’autre part, après avoir séparé les adipocytes en deux populations : les gros (diamètre > 50 µm) et les petits adipocytes (diamètre < 50 µm) nous avons montré que les petits adipocytes sont plus sensibles à l’insuline que les gros. Nous avons aussi constaté que les gros adipocytes sont plus lipolytiques que les petits adipocytes. Ces données sont en accord avec le modèle établi montrant que les échanges avec le micro-environnement tissulaire sont surtout dépendants de la surface des membranes cellulaires. Ainsi, nos résultats mettent en évidence que si la quantité de tissu adipeux est importante, sa qualité, dont la répartition en fréquences de tailles des adipocytes, est également importante et pourrait servir de paramètre prédictif du développement des désordres métaboliques. / Abdominal obesity is associated with several metabolic complications such as insulin resistance, type 2 diabetes and cardiovascular diseases. Recently, it has been suggested that these metabolic abnormalities are closely related to the size of adipocytes, cells constituting adipose tissue. Indeed, numerous studies suggested that the more adipocytes are larger, the more they produce pro-inflammatory adipokines which are responsible for obesity-associated chronic inflammation. In this context, the aim of this work was, in the first time, to establish the size frequency distributions of adipocytes in different physiological and pathological situations and in different fat depots using the Coulter counter Multisizer IV, and in the second time to correlate the size of the adipocytes to their physiological functions. On the one hand, we have shown that, all adipocyte size frequency distributions have the same profile regardless of fat depots, they are bimodal with both the population of small adipocytes (diameter < nadir) and the population of large adipocytes (diameter > nadir). Deprivation of insulin (type I diabetes) resulting in a decrease of 60% of adipose tissue mass, profoundly alters the bimodal distribution of adipocyte size frequency. Insulin supplementation of these diabetic animals restores cellularity of adipose tissue and the size-frequency distribution of adipocytes, suggesting a major regulatory role of insulin on these parameters. Partial caloric restriction has allowed us to a hysteresis phenomenon in some adipose tissues. In addition, following data from extended caloric restriction it has been possible to develop a model predicting the kinetic of changes concerning both the size of adipocytes and the frequency distribution. On the other hand, after separating the adipocytes in two populations: large (diameter > 50 microns) and small adipocytes (diameter < 50 microns), we have shown that small adipocytes are more insulin-sensitive than large ones. We also observed that larger adipocytes are more lipolytic than smaller ones. These data are in agreement with the established model showing that the interactions with the tissue microenvironment are mainly dependent on the surface of cell membranes. Thus, our results show that if the amount of adipose tissue is important, the quality which noticed by the adipocyte size frequency distributions is also important and could be used as a marker to predict the development of metabolic disorders.