Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-07Bitstream added on 2014-06-13T19:16:12Z : No. of bitstreams: 1 pereira_mhc_me_botfmvz.pdf: 261210 bytes, checksum: 2050ad8bcfea0fcd04c28e04b116b34b (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O objetivo deste estudo foi avaliar se vacinação contra doenças da reprodução melhora o desempenho reprodutivo de vacas de leite em lactação. Foram realizados quatro experimentos. O experimento 01 foi realizado em 38 fazendas que não utilizavam vacina contra Rinotraqueíte Infecciosa Bovina (IBR), Diarreia Viral Bovina (BVD) e Leptospirose, foram utilizadas 853 vacas Girolando que foram vacinadas (grupo tratado) ou não (grupo controle) no dia -11 (inicio do protocolo de IATF). A segunda dose da vacina foi realizada no dia 30 (diagnóstico de gestação). A vacina que foi utilizada é composta de amostras atenuadas quimicamente alteradas do vírus da IBR associada a amostras citopáticas e não citopáticas do vírus da BVD e culturas inativadas contra cinco sorotipos da Leptospira spp (canicola, grippotyphosa, hardjo, icterohaemorrhagiae e pomona). O experimento 02 foi realizado em 28 fazendas que não utilizavam vacina contra IBR, BVD e Leptospirose, foram utilizadas 287 vacas Girolando que foram pré vacinadas (grupo tratado) ou não (grupo controle) entre os dias -41 a -32, e a segunda dose da vacina foi realizada no dia -11 (inicio do protocolo de IATF). O experimento 03 foi realizado em 17 fazendas que não utilizavam vacina contra IBR/BVDV e Leptospirose, foram utilizadas 1680 vacas holandesas, sendo que vacas com mais de 28 dias em lactação foram vacinadas (grupo tratado) ou não (grupo controle), e a segunda dose da vacina foi realizada 14 dias após a primeira dose. As inseminações foram realizadas entre 15 a 135 dias após a segunda dose da vacina e as perdas de gestação foram avaliadas até 60 dias após a última IA. O experimento 04 foi realizado em 15 fazendas que utilizavam vacina contra IBR, BVD e Leptospirose, foram utilizadas 820 vacas Girolando que foram re-vacinadas... / The aim of this study was to evaluate the effect of vaccination against reproductive diseases on the reproductive performance of lactating dairy cows. The experiment 01 was performed in 38 farms that did not utilize vaccine against IBR/BVD and Leptospirosis, 853 Girolando cows were vaccinated (treated group) or not (control group) on day -11 (beginning of the TAI protocol). The second dose of vaccine was held on day 30 (preganancy diagnosis). The vaccine that was used consists of chemically altered live samples of the IBR virus associated with samples of cytpathic and non cytopathic BVD virus and inactivated cultures against five serotypes of Leptospira spp. (canicola, grippotyphosa, hardjo, icterohaemorrhagiae e pomona). The experiment 02 was performed in 28 farms that did not utilize vaccine against IBR/BVD and Leptospirosis, 287 Girolando cows were pre - vaccinated (treated group) or not (control group), between the days -41 to – 31, the second dose of vaccine was held on day -11 (beginning of the TAI protocol). The experiment 03 was performed in 17 farms that did not utilize vaccine against IBR/BVD and Leptospirosis, 1680 Holstein cows were used in this study, cows with more than 28 days in milk were vaccinated (treated group) or not (control group), the second dose of vaccine was performed 14 days after de first dose. The AI were performed between 15 and 135 days after the second vaccine dose and the pregnancy loss at 60 days after the last AI. The experiment 04 was performed in 15 farms that utilize vaccine against IBR/BVD and Leptospirosis, 820 Girolando cows were vaccinated (treated group) or not (control group) on day -11 (beginning of the TAI protocol). The pregnancy rate was evaluated in the experiments 1, 2 and 4 at 30 and 71 days after TAI, in experiment 03 the pregnancy...(Complete abstract click electronic access below)

A doença diarréica persiste como uma causa importante de mortalidade de crianças menores de cinco anos, especialmente para os paises em desenvolvimento. Nestes, a implantação da terapia de reidratação oral associou-se à redução da mortalidade, especialmente devida a diarréia aquosa aguda. Contudo, estima-se que 2 a 3 % dos episódios de diarréia evoluam para desidratação e choque, representando a causa do óbito para aproximadamente 22% das crianças menores de um ano. A fim de investigar os fatores associados ao risco de desenvolver diarréia complicada por desidratação moderada ou grave (diarréia grave), realizou-se um estudo de casos e controles na região metropolitana de Porto Alegre. Os casos eram crianças menores de dois anos com diarréia aguda hospitalizados por desidratação moderada ou grave. Os controles constituiram-se de crianças sem diarréia, residentes na mesma vizinhança e do mesmo grupo etário dos casos. Fatores demográficos, socioeconômicos, ambientais, maternos, nutricionais e de assistência à saúde associaram-se significativamente com o risco de desidratar. Destacam-se às exposições decorrentes de idade menor do que quatro meses e, para as crianças acima de uma ano, idade menor do que dezoito meses; pai ausente ou analfabeto; ambiente doméstico não limpo; idade materna menor do que vinte anos; gemelaridade; déficits de altura para idade e de peso para idade dois desvios padrões abaixo da mediana; baixo peso de nascimento; substituição do leite materno por leite artificial; menor tempo decorrido após a suspensão do leite materno e não administração recente de antimicrobianos. Conclui-se que é possivel caracterizar exposições de risco para crianças residentes na mesma comunidade. Além da identificação dos fatores de risco, o acúmulo de três ou mais fatores se associa significativamente com o desenvolvimento de diarréia grave.

Um total de 144 amostras fecais colhidas de leitões com diarréia provenientes de diversas granjas distribuídas por 10 municípios do Estado de São Paulo, Brasil, foram examinadas para a presença de rotavírus através de eletroforese em gel de poliacrilamida e ELISA, num esquema de triagem em paralelo. Destas, 24 e 39 amostras foram, respectivamente, positivas por estes testes e a caracterização dos genotipos P e G foi realizada em 43 amostras por nested RT-PCR, usando diferentes conjuntos de primers. Utilizando-se primers animais, o genotipo P[6] foi o mais freqüente, detectado em 25,58% das amostras, seguido pelo P[1] (11,62%) e P[7] (9,3%). Infecção concomitante de genotipos P[6]+P[7] (9,3%), P[1]+P[6] (4,65%), P[1]+P[6]+P[7] (2,32%) foi também observada. O genotipo G[5] foi o mais freqüente, detectado em 30,23% das amostras, seguido pelo G[10] (20,93%) e G[6] (4,65%). Infecção concomitante de genotipos G[5]+G[10] (18,6%) foi também observada. Utilizando-se primers humanos, somente o genotipo P[6] (65,11%) foi encontrado. Foram detectados os genotipos G[4] (27,9%), G[3] (13,95%) nas amostras, e as infecções concomitantes G[3]+G[4] (9,3%), G[2]+G[3]+G[4] (4,65%) e G[2]+G[3] (2,32%). A combinação mais freqüente foi G[5]P[6] e G[4]P[6], porém foram encontradas também infecções mistas, genotipos atípicos e reassortants. O seqüenciamento do gene a partir dos produtos de nested PCR dos genotipos animais P e G mostrou diversidade de nucleotídeos e aminoácidos dentro de um mesmo genotipo. As árvores filogenéticas utilizando o critério de maxima parcimônia e o algoritmo branch-and-bound, tiveram topologias nas quais as seqüências de nucleotídeos geradas neste trabalho concordam com as outras descritas anteriormente e pertencentes a um mesmo genotipo, suportadas por índices aceitáveis de \"bootstrap\". Os resultados deste estudo, além de contribuir para um melhor entendimento da epidemiologia dos rotavírus suínos, é relevante ao mostrar que além de haver uma diversidade de genotipos circulantes no campo, há também dentro dos mesmos genotipos, e isto deve ser considerado ao se utilizar e desenvolver métodos de diagnóstico, bem como ao se adotarem medidas preventivas específicas contra esta doença. / A total of 144 fecal specimens collected from piglets with diarrhea from many swine-producing units distributed among 10 municipalities of São Paulo State, Brazil, were examined for rotavirus by polyacrylamide gel electrophoresis and ELISA, in a parallel screening scheme. Twenty-four and thirty-nine samples, respectively, were positive by these tests and the characterization of the P and G genotypes was performed on 43 samples by a nested reverse transcription-PCR typing assay, using different sets of primers. Using the animal set of primers, the P[6] genotype was the most frequent, accounting for viruses in 25.58% of the samples, followed by P[1] (11.62%) and P[7] (9.3%). Concomitant infection of P[6]+P[7] (9.3%), P[1]+P[6] (4.65%), P[1]+P[6]+P[7] (2.32%) genotypes was also observed. The G[5] genotype was the most frequent, accounting for viruses in 30.23% of the samples, followed by G[10] (20.93%) and G[6] (4.65%). Concomitant infection of G[5]+G[10] (18.6%) genotypes was observed. Using human set of primers, only the P[6] (65.11%) genotype was found. It was detected the genotypes G[4] (27.9%), G[3] (13.95%) on the samples. Concomitant infection of the genotypes G[3]+G[4] (9.3%), G[2]+G[3]+G[4] (4.65%) and G[2]+G[3] (2.32%) was also observed. The more frequent combination were G[5]P[6] and G[4]P[6], but it was found mixed infections, atypical genotypes and reassortants. Gene sequencing of nested products of G and P animal genotypes showed a diversity of nucleotides and aminoacids under the same genotype. The phylogenetic trees for P and G genotypes under the maximum parsimony criterion, using the branch-and-bound algorithm, had topologies in which the nucleotide sequences generated by this work agree to others described elsewhere that have the same genotypes, supported by acceptable scores of bootstrapping. The results of the present study, while contributing to a better understanding of epidemiology of porcine rotaviruses, address the relevance that there is not only a diversity of genotypes circulating on the field, but inside the same genotypes, and this must be considered when using and developing diagnostic tests, as well when carrying out specific preventive measures against this disease.

Com o objetivo de validar um protocolo de indução de diarréia osmótica e avaliar comparativamente a eficácia de três diferentes tratamentos, foram utilizados 18 bezerros holandeses hígidos, com idade entre oito e 30 dias, e peso variando entre 37 e 50 Kg. A diarréia e a desidratação foram induzidas por via oral, através da administração de leite integral (16,5 ml/Kg), de quatro gramas de sacarose por quilo e de dois tipos de diuréticos (espirolactona e hidroclorotiazida, em dose de 2mg/Kg), a cada oito horas, por um período de 48 horas. Os bezerros foram distribuídos aleatoriamente por três grupos experimentais, cada um com seis animais, que receberam as seguintes soluções: solução salina hipertônica à 7,5% (SSH-4ml/kg IV), solução eletrolítica oral (SEI-60ml/kg) e a associação dessas duas soluções (SSH+SEI), sendo a SEI administrada por mais duas vezes com um intervalo de oito horas. O exame físico e as colheitas de sangue para determinações do hemograma, de dosagens hemogasométricas e de componentes bioquímicos séricos e plasmáticos foram realizadas nos seguintes momentos: 0h (antes da indução), 24 e 48 horas pós-indução(PI) de diarréia, e com 1, 3, 6, 12, 24, 48 e 72 horas pós-tratamento (PT).As amostras de fezes e urina foram colhidas às 0h, 24 e 48 horas PI, e 24, 48 e 72 horas PT. O protocolo de indução da diarréia obteve 100% de resposta produzindo diarréia aquosa e desidratação severa (equivalente a 13% do peso corpóreo) acompanhada de azotemia pré-renal, aumentos no volume globular, no teor de hemoglobina e na proteína total; hipercalemia; hiperlactemia; hiperfosfatemia; acidose metabólica; elevado déficit de volume plasmático; aumentos da densidade urinária, da concentração de uréia e creatinina urinárias e do lactato urinário e fecal; diminuições da pressão venosa central, do pH urinário e fecal. Os animais tratados com SSH+SEI diminuíram de forma rápida e substancial os valores do volume globular e do déficit de volume plasmático; aumentaram o pH sangüíneo e a pressão venosa central entre 1hPT e 3hPT, além de manterem as concentrações de glicose próximas aos valores basais durante todo o período de tratamento. A SEI também promoveu o restabelecimento das variáveis anteriormente citadas, porém de forma mais lenta quando comparada com o uso da SSH+SEI. Os animais tratados apenas com SSH exibiram, no monitoramento através de exames físico e laboratoriais, sinais de desidratação, de depressão clínica e de acidose metabólica ainda às 24hPT, indicando que o uso isolado dessa solução não é eficaz no tratamento da diarréia em bezerros neonatos. / With the purpose of validating a protocol for osmotic diarrhea induction and to comparatively evaluate the efficacy of three different treatments, 18 healthy Holstein calves, with eight to 30 days old, and 37 to 50 Kg of body weight were used. The diarrhea and dehydration were orally induced, through the administration of whole milk (16.5 ml/Kg bwt), sucrose 4g/Kg bwt and two types of diuretics (spironolactone and hydrochlorothiazide, in a dosage of 2mg/Kg bwt), every eight hours, for a total period of 48 hours. The calves were randomly distributed into three experimental groups, each one with six animals, which received the following solutions: 7.5% hypertonic saline solution (HSS - 4ml/Kg bwt, IV), oral electrolytic solution (OES - 60ml/Kg bwt) and the association of both solutions (HSS+OES), being the OES administered two more times with an interval of eight hours. The physical examination and blood sampling for hemogram determinations, hemogasometric dosages and serum and plasmatic biochemical components were done in the following moments: 0h (before the induction), 24 and 48h post-induction (PI) of diarrhea, and within 1, 3, 6, 12, 24, 48 and 72 hours post-treatment (PT). The protocol for osmotic diarrhea induction had a 100% response with aqueous diarrhea and severe dehydration (corresponding to 13% of body weight), followed by pre-renal azotemia, increases in the globular volume, and hemoglobin and total protein levels; hyperkalemia; hyperlactemia; hyperphosphatemia; metabolic acidosis; high plasmatic volume deficit; increases of urinary density, urinary urea and creatinine concentrations and urinary and fecal lactate; diminished central venous pressure and urinary and fecal pH. The animals treated with HSS+OES rapidly and substantially diminished the values of globular volume and plasmatic volume deficit; had the blood pH and central venous pressure increased between 1hPT and 3hPT, besides they maintained glucose concentrations near basal values along the period of treatment. The OES also promoted the reestablishment of the cited variables, although in a slower manner when compared with the use of HSS+OES. The animals treated only with HSS showed, through the physical and laboratory exams, signs of dehydration, clinical depression and metabolic acidosis still at 24hPT, indicating that the isolated use of this solution is not efficient in the treatment of neonatal diarrhea in calves.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-03-23T18:20:10Z No. of bitstreams: 1 deborapaulaferreira.pdf: 1896238 bytes, checksum: 84549c3678d4473a8b148119caabb936 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-03-24T12:54:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 deborapaulaferreira.pdf: 1896238 bytes, checksum: 84549c3678d4473a8b148119caabb936 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-24T12:54:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 deborapaulaferreira.pdf: 1896238 bytes, checksum: 84549c3678d4473a8b148119caabb936 (MD5) Previous issue date: 2009-02-16 / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Manifestações clinicas no trato gastrintestinal como as diarréicas agudas figuram como uma das principais causas de morte em crianças. Espécies do grupo Bacteroides fragilis são importantes constituintes da microbiota intestinal. Sua importância é reconhecida como agente etiológico de infecções endógenas associados ao trato gastrintestinal, além de outros sítios. Nosso objetivo foi avaliar a ocorrência e a distribuição de espécies do grupo B. fragilis em amostras fecais de crianças com e sem diarréia, seu perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos e investigar a presença de linhagens enterotoxigênicas. Foram analisadas 175 amostras fecais provenientes de crianças apresentando (n=110) ou não (n=65) manifestações clínicas no trato gastrintestinal, com idade média de 2 anos de idade, obtidas em Juiz de Fora, MG. As amostras foram avaliadas por métodos bioquímico-fisiológicos e moleculares (PCR-Multiplex), e o perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos foi determinado por metodologia de diluição em Agar, de acordo com CLSI. Dos isolados, foram identificadas 47 linhagens bacterianas representativas do grupo B. fragilis. Pelo método bioquímico, identificamos 8 espécies do grupo e 4 espécies foram identificadas pelo método de biologia molecular. Em 58,3% das amostras fecais, foram detectadas espécies do grupo B. fragilis pela técnica de PCR – Multiplex. Em relação a linhagens enterotoxigências, estas foram detectadas em 4,6% dos espécimes fecais, sendo em 3,7% das amostras diarréicas e em 6,15% das amostras controle. Observou-se resistência a todos os antimicrobianos testados (ampicilina, ampicilina/sulbactam piperacilina/tazobactam, meropenem, ceftriaxona, clindamicina e cloranfenicol). No entanto, as drogas mais eficazes foram ampicilina/sulbactam e piperacilina/tazobactam. Os resultados mostraram que o grupo B.fragilis é prevalente na microbiota fecal de crianças em Juiz de Fora, entretanto, em níveis superiores nas fezes não diarréicas. A metodologia molecular mostrou-se mais eficiente na identificação microbiana, quando comparada às técnicas bioquímico-fisiológicas. Os altos níveis de resistência observados suscitam reflexões sobre o uso indiscriminado de antimicrobianos. Estudos prospectivos são necessários para um melhor conhecimento do papel destas bactérias nas diarréias agudas em crianças. / Clinical conditions in the gastrointestinal tract such as acute diarrhea are one of the major causes of death in children. Species of Bacteroides fragilis group are important constituents of the intestinal microbiota. Its importance is recognized as the etiologic agent of endogenous infections associated with gastrointestinal tract and other sites. Our objective was to evaluate the occurrence and distribution of species of B. fragilis group in fecal samples of children with and without diarrhea, their antimicrobial susceptibility patterns and to investigate enterotoxigenic strains. We analyzed 175 fecal samples from children presenting (n = 110) or not (n = 65) clinical manifestations in the gastrointestinal tract, with an average of 2 years of age, obtained in Juiz de Fora, MG. The samples were evaluated by biochemical-physiological and molecular (PCR-Multiplex) methods. The drug susceptibility patterns were determined by the agar dilution method according to CLSI. Of the isolates were identified 47 bacterial strains representative of B. fragilis group. By the biochemical-physiological methodology, 8 species of the group were identified and 4 were identified by the molecular genetics technique. In 58.3% of the fecal samples, B. fragilis group were detected by the Multiplex - PCR. Enterotoxigenic strains were detected in 4.6% of fecal specimens, of which 3.7% in the diarrheic and 6.15% in the control samples. Antimicrobial resistance was observed against all tested drugs (ampicillin, ampicillin/sulbactam, piperacillin/tazobactam, meropenem, ceftriaxone, clindamycin and chloramphenicol), although the most effective drugs were ampicillin/sulbactam and piperacillin/tazobactam. The results showed that the B.fragilis group is prevalent in the fecal microbiota of children in Juiz de Fora, however, at higher levels in feces from health donors than in diarrheic samples. The molecular methodology was more effective in identifying microbial strains when compared to the biochemical and physiological techniques. The high levels of resistance observed raise thoughts about the indiscriminate use of antimicrobials. Prospective studies are needed to gain a better understanding on the role of these bacteria in acute diarrhea in children.

aEPEC é capaz de causar lesão A/E, provocada por proteínas codificadas na região LEE. Foi realizada a análise estrutural e funcional da região LEE de amostras de aEPEC que expressam os padrões ALL, AA e AD, e amostra não aderente (NA). O padrão de adesão característico e capacidade de causar a lesão A/E foram investigados em células epiteliais. As amostras mantiveram o padrão de adesão independentemente da origem da linhagem celular. A lesão A/E foi detectada em algumas linhagens celulares após o contato com as amostras ALL e AD. A presença da região LEE foi detectada intacta e ensaios de PCR em tempo real, microarray e imunodetecção, mostrando a funcionalidade da mesma em todas as amostras. Um plasmídio que expressa a proteína EspFu foi introduzido em todas as 4 amostras, demonstrando não influenciar nos padrões de adesão e nem na capacidade de causar a lesão A/E nas amostras ALL, AA e AD. Mas, a amostra NA expressou o padrão ALL e foi capaz de causar a lesão A/E. Assim, EspFu desempenhou papel na adesão celular além do estabelecimento da lesão A/E in vitro. / aEPEC is capable to cause A/E lesion, triggered by proteins encoded by LEE region. We analyzed structurally and functionally the LEE region of aEPEC strains displaying LAL, AA, DA, and one nonadherent (NA) strain. The adherence characteristics and ability to cause A/E were investigated in epithelial cells. The displayed adherence patterns were independent of the cell line origin. A/E lesion was detected in some cellular lines after contact only with ALL- and AD-strains. LEE region presence was detected intact and real time PCR, microarray and immunodetection, in all samples tested. An EspFu-expressing plasmid was introduced in all strains, demonstrating no influence of this protein neither in the adherence patterns nor in the capacity to cause A/E of the LAL-, AA- and DA-strains. But, NA-strain expressed the LAL pattern and was able to cause A/E. Therefore, EspFu was shown to play a role in cell adhesion in addition to the establishment of the A/E lesion in vitro.

Submitted by Maria Creuza Silva (mariakreuza@yahoo.com.br) on 2014-10-03T17:40:16Z No. of bitstreams: 1 Tese Maria Yury Ichihara. 2014.pdf: 2248119 bytes, checksum: 821a02dd8be59ca78df05111c9fdd559 (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Creuza Silva (mariakreuza@yahoo.com.br) on 2014-10-07T13:52:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese Maria Yury Ichihara. 2014.pdf: 2248119 bytes, checksum: 821a02dd8be59ca78df05111c9fdd559 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-07T13:52:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Maria Yury Ichihara. 2014.pdf: 2248119 bytes, checksum: 821a02dd8be59ca78df05111c9fdd559 (MD5) / A diarréia é uma das causas mais freqüentes de atendimentos ambulatoriais e de hospitalização em menores de 5 anos. Bactérias e o rotavírus são os principais agentes etiológicos envolvidos nas diarréias graves, sendo o rotavírus responsável por 22% a 38% das admissões hospitalares. Para abordar o tema sobre a internação de crianças brasileiras menores de 2 anos devido a diarréia foram realizados três estudos casos-controles com base hospitalar. Inicialmente, foi estimada a associação dos fatores de risco e a internação por diarréia aguda (exceto àquela causada por rotavírus) de acordo com as rotas de transmissão dos agentes etiológicos, as várias fontes de infecção e as condições de vida das populações. Foi demonstrado que os principais fatores de risco associados à internação por diarréia foram a falta de esgotamento sanitário e de água de boa qualidade e ter uma ou mais internações prévias devido à diarréia. Em relação à diarréia aguda causada por rotavírus, a OMS recomenda o uso de duas vacinas licenciadas no mundo (Rotarix® e RotaTeq®). A vacina oral monovalente contra rotavirus (G1P[8], Rotarix®) foi introduzida no Programa Nacional de Imunização do Brasil em 2006. A eficácia e efetividade da vacina variam entre países com renda alta e baixa, embora exista forte evidência de proteção cruzada para os genótipos G1-G4 e G9. Avaliamos a efetividade global e genótipo-específica da vacina oral monovalente na prevenção de internação de crianças brasileiras com diarréia causada por rotavirus. Além disso, estimamos a efetividade da vacina global e genótipo-específica por tempo de vacinação após a segunda dose da vacina (até dois anos) e EV para as Regiões brasileiras. Elevadas efetividades geral e genótipo-específica da vacina foram observadas, mesmo num contexto de grande diversidade genotípica e com predominância do genótipo G2P[4]. A duração da proteção global e genótipo-específica da vacina permaneceu até dois anos e foi maior para G1P[8] do que para G2P[4]. Por outro lado, consideramos plausível que a EV poderia variar em diferentes populações e em diferentes períodos de tempo, mediante a grande diversidade genotípica, a ocorrência de genótipos incomuns, de combinações mistas de G e P e de emergência de novas cepas advindas de combinações inter-espécies (homem e animal). Analisamos a EV estratificada por Regiões brasileiras e ficou demonstrado que a EV para a Região Norte foi similar à EV global. Porém a EV para as outras Regiões foi menor, talvez devido ao pequeno número de casos. Baseado nos resultados dos estudos nós recomendamos: 1) implementar ações voltadas para o domínio público (ambiente, saneamento, higiene na comunidade e acesso a serviços de saúde) para reduzir a morbidade por diarréia; 2) a continuidade do uso da vacina oral monovalente no Programa Nacional de Imunização; e 3) o monitoramento de genótipos para detecção precoce de cepas novas e incomuns. Além disso, novos estudos precisam ser conduzidos para avaliar variações da efetividade da vacina entre as Regiões, as sub-regiões e as áreas mais vulneráveis do Brasil. Será importante realizar estudos de custo-efetividade para subsidiar a política nacional de imunização. / Diarrhea has been a frequent reason of visits to the health services and hospitalization among children under five. Bacteria and rotavirus are the main agents involved in severe diarrhea, in which rotavirus is responsible from 22% to 38% of children hospital admissions. To address the issue of hospitalization of Brazilian children under 2 years due to diarrhea, we conducted three hospital based case-control study. Initially, we aimed to estimate the association of risk factors and acute diarrhea hospitalization (except those caused by rotavirus) according to the routes of transmission of etiologic agents, the various sources of infection and the living conditions of populations. It was demonstrated that the main risk factors were lack of sewage and water of good quality, and already having one or more hospitalizations due to diarrhea. In relation to the rotavirus acute diarrhea, the World Health Organization has been recommended the use of two licensed vaccines worldwide (Rotarix ® and RotaTeq ®). The oral monovalent rotavirus vaccine (G1[P8] strain, Rotarix®) was introduced in Brazilian National Immunization Program in 2006. The vaccine efficacy and effectiveness vary between high and low income countries, although there is strong evidence of cross-protection for G1-G4 and G9 genotypes. We evaluated overall and genotype-specific oral monovalent rotavirus VE in preventing RV-A diarrhea hospital admission of Brazilian children. Also, we estimated overall and genotype-specific VE by time since second dose vaccination (up to two years) and VE according to Brazilian Regions. High overall and genotype-specific VE were observed, even though there was a great diversity of rotavirus genotypes circulating in Brazil and a predominance of G2P[4] genotype. The overall and genotype-specific VE lasted for two years after second dose vaccination and it was higher for G1P[8] than G2P[4]. Besides, we considered that it was plausible that RV-A VE could vary in different populations (Regions) and in different periods of time, since there was a great genotype diversity, an occurrence of unusual genotypes, mixed combinations of G and P and emergence of new strains from combinations of inter-species (human and animal). We analyzed the VE for Brazilian Regions and we demonstrated that the VE for Northern Region was similar to the overall VE. However, the VE for other Regions was lower than VE for Northern Region, maybe because of the small number of the cases. Based on the findings of the studies we recommend: 1) to implement actions of the public domain (environment, sanitation, hygiene in the community and access to health services) to reduce the diarrhea morbidity; 2) the continued use of oral monovalent rotavirus vaccine in the National Immunization Program; and 3) the monitoring for early detection of unusual and novel rotavirus genotypes. In addition, new studies should be conducted to evaluate the variations of rotavirus VE in different Regions, sub-Regions and vulnerable areas in Brazil. It might be useful to conduct cost-effectiveness studies to inform national immunization policy.

Para determinar a prevalência e epidemiologia dos enteropatógenos bacterianos e parasitários na diarréia aguda infantil, foram estudadas 290 crianças menores de 24 meses com diarréia e 290 crianças controles, que procuraram o serviço de emergência do Hospital Infantil Arlinda Marques em João Pessoa, Nordeste do Brasil. Enteropatógenos foram identificados em 78,2% dos casos e em 12,4% dos controles; Escherichia coli enteroagregativa (EAEC) foi o patógeno mais freqüente sendo detectada em 25% dos casos e em 8,3% dos controles; seguida por E. coli enteropatogênica (EPEC) em 11% dos casos (dos quais 9,3% foram cepas atípicas) e em 0,3% dos controles; E. coli Enterotoxigência (ETEC) em 10% dos casos e 2,8% dos controles; Salmonella sp em 7,9% dos casos; Shigella sp em 4,1% dos casos; E. coli enteroinvasora (EIEC) em 1,7% dos casos; Campylobacter sp em 2,4% dos casos e enteroparasitas foram detectados em 15,5% dos casos e 1,0% dos controles. Infecções mistas foram verificadas em 32 (11%) casos e em apenas 1 (0,3%) controle. A faixa etária mais atingida foi a dos menores de um ano e as associações mais frequentes ocorreram entre EAEC + Salmonella e EAEC + EPEC atípica. Neste estudo foram identificados fatores de risco associados com episódios de diarréia em crianças de acordo com o agente etiológico bacteriano. As análises estatísticas demonstram uma importante associação de EAEC com diarreia aguda infantil em João Pessoa, Brasil, sendo a ingestão de leite de vaca em pó e a exposição a aglomerados e creche os fatores de risco mais associados a diarreia causada por EAEC. / In order to determine the prevalence and epidemiology of enteropathogens in acute infantile diarrhoea, 290 infants younger than 24 months of age with diarrhoea and 290 age-matched control subjects who came to ER of the Hospital Infantil Arlinda Marques in João Pessoa, Northeastern of Brazil were studied. Enteropathogens were identified in 78,2% of case infants and 12,4% of controls. Enteroagregative Escherichia coli (EAEC) was the most frequently found pathogen and was detected in 25,0% of cases and 8,3% of controls. The second most frequent pathogen was Enteropathogenic E. coli (EPEC), in 11,0% of cases and 0,3% of controls, followed by Enterotoxigenic E. coli (ETEC) in 10% of cases and 2,7% of controls; Salmonella sp was found in 7,9% of cases, Shigella sp in 4,1% of cases, Enteroinvasive E. coli (EIEC) in 1,7% of cases and Campylobacter sp in 2,4% of cases. Enteroparasites were detected in 15,5% of cases and 1,0% of controls. Mixed infections (more than one pathogen) were found in 32 (11%) of cases and in only 1 (0,3%) control. The most affected age group was of those smaller than 1 year of age and the most frequent associations were of EAEC + Salmonella e EAEC + atypical EPEC. In this study risk factors associated with episodes of diarrhoea among infants by bacterial etiological pathogens were identified. Statistical analysis demonstrated a significant association of Enteroagregative E. coli (EAEC) with acute infantile diarrhoea in João Pessoa, Brazil. The risk factors most strongly associated diarrhoea caused by EAEC were the ingestion of powdered cow milk and exposure to crowds and day care centres.

Submitted by Priscila Nascimento (pnascimento@icict.fiocruz.br) on 2012-11-13T12:18:47Z No. of bitstreams: 1 waldemir-de-castro-silveira.pdf: 669613 bytes, checksum: b8a4602ed033af1429638f26a5325f0d (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-13T12:18:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 waldemir-de-castro-silveira.pdf: 669613 bytes, checksum: b8a4602ed033af1429638f26a5325f0d (MD5) Previous issue date: 2005 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / O rotavírus humano (RV) pode ser detectado prontamente pelo método de aglutinação do látex (LTE), com elevada sensibilidade e especificidade, através da reação cruzada com o anticorpo anti-rotavírus decarneiro. As partículas de látex revestidas com a imunoglobulina G anti-rotavírus, são especificamente aglutinadas na presença do RV, com resultados macroscopicamente evidentes dentro de poucos minutos. Para a sensibilidade e a especificidade do método de LTE proposto, comparou-se com outro método similar (Rota-Kit Slidex®; BioMérieuxl), um total de 81 amostras fecais de crianças até 5 anos com gastroenterite aguda. Com 36 amostras diarréicas RV-positivos e 45 RV-negativos, a ensibilidade analítica do teste de LTE proposto foi > 99,99%, e a especificidade analítica também foi > 99,99%. O LTE demonstrou ser capaz de detectar partículas de rotavírus em fezes diarréicas em concentrações 20 vezes menores que o limite de detecção do Rota-Kit Slidex®. A freqüência de testes positivos de LTE pareceu ser proporcionalà concentração de viríons na amostra fecal. O LTE demonstrou uma sensibilidade de 94,0% (34 de 36 positivos), e uma especificidade > 99,99% (45de 45 negativas) quando comparado com o Rotazyme II®, um ensaio imunoenzimático (Abbott Laboratories). O método do LTE é rápido, facilmenteutilizável para detectar o RV em amostra fecal de crianças e é apropriado para a aplicação como um teste diagnóstico simples, principalmente para triagem de grandes grupos de pacientes. O LTE é estável por pelo menos 2 anos searmazenado sob refrigeração (4°C) e se mostra útil para laboratórios de pequeno porte, para rotinas ambulatoriais, de emergências e de triagem e finalmente, para discriminar amostras negativas que poderão então ser testadas por testes mais sensíveis. / Human rotavírus (HRV) can readily be detected by the latex agglutination assay method (LTE), with raised sensitivity and specificity, based on crossed reaction with the anti-rotavirus sheep antibody. The latex particles coated with anti-rotavirus immunoglobulin G, agglutinates specifically when in contact with HRV in few minutes, with evident macroscopically results. The sensitivity and the specificity performance of the proposed method (LTE), was compared with another similar method (Rota-Kit Slidex®, BioMérieux), a total of 81 specimens from children with acute gastroenteritis were tested. With 36 HRV positive samples and 45 HRV negative samples, the analytical sensitivity of LTE was better than 99,99% and the analytical specificity, also, was better than 99,99%. The LTE demonstrated to be capable to detect particles of HRV in fecal samples in concentrations20 lesser times that the limit of detection of Rota-Kit Slidex®. The frequency of positive tests of LTE seemed to be proportional to the concentration of virions in the fecal sample. The LTE demonstrated a sensitivity of 94,0%(34 of 36 positives), and a specificity >99,99% (45 of 45 negatives) whencompared with Rotazyme II® (Abbott Laboratories). The method of the LTE is fast and easily usable to detect HRV in children fecal sample and is appropriate for application as a test of simple diagnosis, mainly for screening of great groups of patients. The LTE is stable per at least 2 yearsif stored under refrigeration (4°C) and it shows useful for small laboratories, clinic routines, emergence rooms and screenings and finally to discriminate negative samples that could then be tested by more sensible tests.

Para determinar a prevalência e epidemiologia dos enteropatógenos bacterianos e parasitários na diarréia aguda infantil, foram estudadas 290 crianças menores de 24 meses com diarréia e 290 crianças controles, que procuraram o serviço de emergência do Hospital Infantil Arlinda Marques em João Pessoa, Nordeste do Brasil. Enteropatógenos foram identificados em 78,2% dos casos e em 12,4% dos controles; Escherichia coli enteroagregativa (EAEC) foi o patógeno mais freqüente sendo detectada em 25% dos casos e em 8,3% dos controles; seguida por E. coli enteropatogênica (EPEC) em 11% dos casos (dos quais 9,3% foram cepas atípicas) e em 0,3% dos controles; E. coli Enterotoxigência (ETEC) em 10% dos casos e 2,8% dos controles; Salmonella sp em 7,9% dos casos; Shigella sp em 4,1% dos casos; E. coli enteroinvasora (EIEC) em 1,7% dos casos; Campylobacter sp em 2,4% dos casos e enteroparasitas foram detectados em 15,5% dos casos e 1,0% dos controles. Infecções mistas foram verificadas em 32 (11%) casos e em apenas 1 (0,3%) controle. A faixa etária mais atingida foi a dos menores de um ano e as associações mais frequentes ocorreram entre EAEC + Salmonella e EAEC + EPEC atípica. Neste estudo foram identificados fatores de risco associados com episódios de diarréia em crianças de acordo com o agente etiológico bacteriano. As análises estatísticas demonstram uma importante associação de EAEC com diarreia aguda infantil em João Pessoa, Brasil, sendo a ingestão de leite de vaca em pó e a exposição a aglomerados e creche os fatores de risco mais associados a diarreia causada por EAEC. / In order to determine the prevalence and epidemiology of enteropathogens in acute infantile diarrhoea, 290 infants younger than 24 months of age with diarrhoea and 290 age-matched control subjects who came to ER of the Hospital Infantil Arlinda Marques in João Pessoa, Northeastern of Brazil were studied. Enteropathogens were identified in 78,2% of case infants and 12,4% of controls. Enteroagregative Escherichia coli (EAEC) was the most frequently found pathogen and was detected in 25,0% of cases and 8,3% of controls. The second most frequent pathogen was Enteropathogenic E. coli (EPEC), in 11,0% of cases and 0,3% of controls, followed by Enterotoxigenic E. coli (ETEC) in 10% of cases and 2,7% of controls; Salmonella sp was found in 7,9% of cases, Shigella sp in 4,1% of cases, Enteroinvasive E. coli (EIEC) in 1,7% of cases and Campylobacter sp in 2,4% of cases. Enteroparasites were detected in 15,5% of cases and 1,0% of controls. Mixed infections (more than one pathogen) were found in 32 (11%) of cases and in only 1 (0,3%) control. The most affected age group was of those smaller than 1 year of age and the most frequent associations were of EAEC + Salmonella e EAEC + atypical EPEC. In this study risk factors associated with episodes of diarrhoea among infants by bacterial etiological pathogens were identified. Statistical analysis demonstrated a significant association of Enteroagregative E. coli (EAEC) with acute infantile diarrhoea in João Pessoa, Brazil. The risk factors most strongly associated diarrhoea caused by EAEC were the ingestion of powdered cow milk and exposure to crowds and day care centres.