Submitted by Alessandra Portugal (alessandradf@ioc.fiocruz.br) on 2013-09-17T14:37:08Z No. of bitstreams: 1 TESE RITA DE CASSIA PONTELLO RAMPAZZO.pdf: 4806860 bytes, checksum: 8062bd9dd8843e24004e4dfeb47291c3 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-09-17T14:37:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE RITA DE CASSIA PONTELLO RAMPAZZO.pdf: 4806860 bytes, checksum: 8062bd9dd8843e24004e4dfeb47291c3 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, acomete entre 7 e 8 milhões de pessoas especialmente na América Latina e Caribe, apresentando manifestações em órgãos associados ao sistema digestivo e cardíaco. A principal manifestação na fase crônica determinada é a cardiopatia chagásica e pode acometer entre 10 e 30% dos indivíduos infectados. Diante da ineficiência do tratamento, estudos com ênfase na biologia de interação parasita-hospedeiro têm sido desenvolvidos na busca de moléculas inovadoras que possam ser usadas para a prevenção, tratamento e/ou diagnóstico. A aplicação da genômic a funcional na interação T. cruzi-célula hospedeira tem como desafio desvendar a regulação de genes na célula alvo, buscando estratégias que enfoquem mecanismos de sobrevivência e replicação do parasita. A abordagem cinética utilizada neste trabalho (1, 2, 3, 4, 5, 6 e 24 horas de infecção) para analisar a expressão gênica global através da metodologia inovadora de RNA-Seq proporcionou um melhor entendimento dos eventos que culminam na ativação coordenada e temporal de moléculas durante a interação T. cruzi-cardiomiócito. Identificamos 572 genes modulados, sendo que 371 apresentavam expressão gênica induzida e 201 reprimidos. Nossos resultados revelam que o T. cruzi induz uma modulação gênica dinâmica com 18 genes alterados após uma hora de interação. No estágio inicial da infecção (1 a 4 horas), os genes modulados encontram-se relacionados com a estratégia de invasão do parasita e, principalmente, com a resposta de cardiomiócitos induzindo genes relacionados à resposta imune e atividade tripanocida. Neste contexto, evidenciamos a ativação de genes envolvidos com a resposta pró-inflamatória, estresse oxidativo e metabolismo de radicais livres indicativos da tentativa da célula cardíaca de conter a disseminação do parasita. Com o avanço da infecção, constatamos a modulação de genes integrados com o remodelamento do citoesqueleto e rigidez celular, provavelmente associado com a acomodação do parasita intracelular, e ainda repressão de genes relacionados com junções celulares e manutenção da arquitetura celular. Distúrbios na expressão de genes envolvidos em vias metabólicas mitocondriais apontam para uma deficiência energética e disfunção mitocondrial induzida pelo T. cruzi. Destacamos ainda alterações em genes associados à hipertrofia, principalmente relacionados à IL1 e IL6, receptor toll-like 2 e GSK3B, desde os tempos iniciais de infecção (1 a 4 horas). O remodelamento associado à matriz extracelular apresentou genes com padrão diminuído principalmente no ponto de 24 horas quando a taxa de infecção ultrapassa 75%, sendo as alterações relacionadas aos genes de colágeno e fibronectina. Genes associados à apoptose com perfil pró- e anti-apoptótico foram diferencialmente modulados nas diferentes fases da infecção, sugerindo que a indução ou repressão da apoptose pode estar diretamente relacionada a dispersão do parasita, controle da carga parasitária no hospedeiro e/ou escape da resposta imune Dessa forma, a identificação de genes importantes para adaptação do T. cruzi no microambiente da célula cardíaca aliada à modulação de genes envolvidos na resposta desta célula alvo contribuirá para aplicação de novas estratégias de controle deste parasita, possibilitando a seleção de potenciais alvos vacinais e/ou terapêuticos. / Chagas` disease, caused by Trypanosoma cruzi, affects between 7 and 8 million people especially in Latin America and Caribbean, presenting manifestations in organs associated with the digestive system and heart. The main clinical manifestation on symptomatic chronic phase is chagasic cardiophaty and may affect about 10 to 30% of infected individuals. Given the ineffectiveness of the treatment, studies with emphasis on biology of host-pathogen interaction have been carried out to search innovative molecules that can be used to prevention, treatment and/or diagnosis. The application of functional genomics in the T. cruzi-host cell interaction has as its goal to display the regulation of genes in the target cell, seeking strategies that focus on mechanisms of survival and replication of the parasite. The kinetic approach used on this research (1, 2, 3, 4, 5, 6 and 24 hours of infection) to analyse the global gene expression by RNA-Seq, an innovative methodology, provide a better understanding of events that culminate in coordinated and temporal activation of molecules during T. cruzi-cardiomyocyte interaction. We identified 572 modulated genes, where 371 were induced and 201 repressed. Our results indicate that T. cruzi induces a dynamic gene modulation with 18 genes altered after one hour of interaction. On early stage of infection (1 to 4 hours), the modulated genes are related to immune response and trypanocydal activity. In this context, we observed the activation of genes involved in pro-inflammatory response, oxidative stress and free radical metabolism indicating that the cardiac cell attempts to control the dissemination of the parasite. With the progression of the infection, it was evident the modulation of genes involved in cytoskeleton remodeling and cell stiffness, probably associated with intracellular parasite accommodation and repression of cell junctions genes as well as cell architecture maintenance genes. Alterations in expression of genes involved in metabolic pathways point to a mitochondrial dysfunction and energy deficiency induced by T. cruzi. We also point out changes in genes associated with hypertrophy, mainly related to IL1, IL6, toll like receptor 2 and GSK3B from early times of infection (1 to 4 hours). Remodeling associated to extracellular matrix showed genes with decreased expression mainly at 24 hours when the infection exceeds 75%, specially collagen- and fibronectin-related genes. In addition, genes associated to apoptosis with pro- and anti- apoptotic activity were differentially modulated in different stages of infection, suggesting that induction or repression of apoptosis may be directly related to parasite spread, the parasite load control in the host and/or escape of immune response. Thus, the identification of genes important to adaptation of T. cruzi on the microenviroment of the cardiac cell combined with modulation of genes involved in the response of the target cell will contribute to implementation of new strategies to control this parasite, allowing the selection of potential vaccine and/or therapeutic targets.

SILVA, Angela Deyva Gomes da. Programa de controle vetorial da doença de Chagas no estado do Ceará - 1975 a 2002 : histórico e avaliação. 2004. 110 f. Dissertação (Mestrado em Saúde Pública) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2004. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-10-28T13:53:45Z No. of bitstreams: 1 2004_dis_adgsilva.pdf: 929402 bytes, checksum: 00a6e185e2e7e6e72cd7dc633e367c9a (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-11-01T13:29:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2004_dis_adgsilva.pdf: 929402 bytes, checksum: 00a6e185e2e7e6e72cd7dc633e367c9a (MD5) / Made available in DSpace on 2011-11-01T13:29:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2004_dis_adgsilva.pdf: 929402 bytes, checksum: 00a6e185e2e7e6e72cd7dc633e367c9a (MD5) Previous issue date: 2004 / The program for control of Chagas disease (PCCD) was implemented in the State of Ceara in 1975. The cities involved had a follow-up concerning the capture of triatomines, initially by a triatominic survey followed by several evaluations in periodic cycles between 1975 and 2002. During this period there was no systematic evaluation of the program activities or about its impact on the vectorial control, exiting, therefore, a shortage of scientific production regarding the epidemiology of the vectorial control of Chagas disease. It was necessary to have an updated evaluation of the epidemiological situation in the State of Ceara. The research aimed at describing the actions carried out to evaluate indicators of structure-process and of impact of the PCCD in the period from 1975 to 2002. Moreover, another objective of this investigation is to describe some epidemiological characteristics of the disease vector (main species found, index of natural infection of vector and its geographic distribution). We conducted an ecological-descriptive epidemiological study through the survey of the information collected in the routine of the control program recorded in the annual reports of activities of the PCCD of the National Foundation of Health ? FUNASA at the State of Ceara in the period from 1975 to 2002. The indicators relevant for the study were: the indexes of dispersion (positive places), vectorial infestation (at the domiciliary units and in the intradomiciliary environments), coverage of places and domiciliary units in the activities of research and spraying, index of infection by triatomines and major species captured. The methodology of PCCD applied at Ceara State was presented by a description of the program activities. The secondary data presented outline a profile of the current situation of the mentioned program at Ceara State. The major species are: Triatoma brasiliensis, Triatoma pseudomaculata, Panstrongylus megistus, Rhodnius nasutus e Panstrongylus lutzi. Until 2002 it was implemented the Epidemiological Watch (EW) in 13 towns: Aracoiaba, Baturite, Guaramiranga, Mulungu, Pacoti, Maranguape, Pacatuba, Camocim, Martinopole, Chaval, Sobral, Meruoca e Alcantara. We conclude that during the 27 years of activities of the PCCD, there was a high coverage of the program activities in all of Ceara State. There was a significant reduction in the index of infestation in some towns and we found a smaller number of specimens naturally infected by Trypanosoma cruzi among the major species captured in Ceará. / O Programa de Controle da Doença de Chagas (PDCh) foi implantado no Estado do Ceará, em 1975. Os municipios tiveram acompanhamento de captura de triatomineos, inicialmente atraves de um Levantamento Triatominico seguido por virias Avaliacoes em ciclos periodicos entre os anos de 1975 a 2002. Durante esse periodo nao houve nenhuma avaliacao sistematica das atividades do programa e nem sobre o seu impacto no controle vetorial, havendo portanto, deficiencia na producao cientifica em relatorio epidemiologia do controle vetorial da doenca de Chagas, houve a necessidade de se ter uma avaliacao atualizada da situacao epidemiologica no Estado do Ceara. A pesquisa tem como objetivo descrever as acoes desenvolvidas e avaliar indicadores de estrutura-processo e de impacto do PCDCh no periodo de 1975 a 2002. Tambem e objetivo desse trabalho a descricao de algumas caracteristicas epidemiologicas do vetor da doenca (principais especies encontradas, indice de infeccao natural do vetor e sua distribuicao geografica). Foi realizado um estudo epidemiologico ecologico-descritivo, atraves do levantamento das informacoes epidemiologicas coletadas na rotina do programa de controle, registradas nos relatorios anuais de atividades do PCDCh da Fundacao Nacional de Saude FUNASA no Estado do Ceara no periodo de 1975 a 2002. Os indicadores de relevancia para o estudo foram os seguintes: os indices de dispersao (localidades positivas), infestacao vetorial (na Unidade Domiciliar e no Intradomicilio), cobertura de localidades e UDs nas atividades de pesquisa e borrifacao, indice de infecao dos triatomineos e principais especies capturadas. Foi apresentada a metodologia do PCDh aplicada no Ceara atraves de uma descricao das atividades do programa. Os dados secundarios apresentados tracam um perfil da atual situacao do referido programa no Estado. As principais especies sao: Triatoma brasiliensis, Triatoma pseudomaculata, Panstrongylus megistus, Rhodnius nasutus e Panstrongylus lutzi. Ate o ano de 2002, foi instalada a Vigilancia Epidemiologica (VE) em 13 municipios: Aracoiaba, Baturite, Guaramiranga, Mulungu, Pacoti, Maranguape, Pacatuba, Camocim, Martinopole, Chaval, Sobral, Meruoca e Alcantara. Conclui-se que houve, durante 27 anos de atividade do PCDCh, cobertura elevada das atividades do programa em todo o territorio cearense. Houve diminuicao consideravel no indice de infestacao em alguns municipios e foi encontrado um menor numero de especimes naturalmente infectados pelo Trypanosoma cruzi entre as principais espécies capturadas no Ceará.

MELO, Francisco Rogerlândio Martins de. Epidemiologia e distribuição espacial da mortalidade relacionada à doença de Chagas no Brasil, 1999 a 2007. 2011. 259 f. Dissertação (Mestrado em Saúde Pública) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2011. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-12-17T13:24:29Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_frmmelo.pdf: 10872169 bytes, checksum: 73a17e7b66dc15e9fbf949f27e2e27c0 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2013-12-17T13:25:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_frmmelo.pdf: 10872169 bytes, checksum: 73a17e7b66dc15e9fbf949f27e2e27c0 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-12-17T13:25:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_frmmelo.pdf: 10872169 bytes, checksum: 73a17e7b66dc15e9fbf949f27e2e27c0 (MD5) Previous issue date: 2011 / Chagas’ disease is a Neglected Tropical Disease and a public health problem with significant socioeconomic implications in most Latin American countries, including Brazil. This study aimed to characterize the magnitude and patterns of mortality associated with Chagas disease in Brazil. A descriptive and analytical study was performed based on mortality data obtained from the Mortality Information System of the Ministry of Health (SIM/DATASUS/MS), and a spatial analysis with municipalities as the unit of observation. We studied all deaths occurring in Brazil from 1999 to 2007, where Chagas’ disease was mentioned as underlying or associated cause of death. We calculated mortality rates and proportional mortality and described time trends, using polynomial regression. Factors associated with death from Chagas’ disease were identified, as compared to deaths by other causes. We also described causes of death frequently associated with Chagas disease. For spatial analysis we used the following methods: Global Moran, Getis-Ord General G, local Moran and Gi* statistic. Between 1999 and 2007, 53,930 deaths occurred related to Chagas disease in Brazil (44,543 as underlying cause of death, and 9.387 as associated cause), with a mean mortality of 3.78/100,000/year, and a proportional mortality of 0.6%. Mortality showed a declining trend at national level (p=0.011), but with different patterns between regions. There was a reduction of mortality in the Central West (p=0.001), Southeast (p=0.007) and South (p=0.028), whereas the Northeast showed an increasing trend (p=0.047), and the North a tendency of stabilization (p=0.309). In multivariable analysis, factors independently associated with mortality were: age >30 years (adjusted OR = 10.60; 95% CI: 9.90-11.33, p <0.001); residence in the states of Minas Gerais, Goiás and Distrito Federal (adjusted OR = 4.89; 95% CI: 4.81-4.98, p <0.001); not living in a state capital (adjusted OR = 1.04; 95% CI: 1,02-1,06; p<0,001); and male sex (adjusted OR=1.02; 95% CI: 1,00-1,03; p=0,045). The main conditions associated with Chagas disease as underlying cause of death were cardiac complications, such as conduct disorders/arrhythmias (41.4%) and heart failure (37.7%). Cerebrovascular complications(13.2%), ischemic heart disease (13.2%) and hypertensive disorders (9.3%) were the main underlying causes of death in which Chagas’ disease was an associated cause. Spatial analysis identified a major cluster of high risk for mortality related to Chagas’ disease involving eight states in the central region of Brazil, and four smaller clusters of high risk in the surrounding area. Despite the decline in mortality associated with Chagas’ disease in Brazil, the disease remains an important cause of death in endemic areas and with marked regional differences. With decreasing importance of vector-borne transmission, the deficiencies of the public system in prevention, control and treatment of Chagas disease, mainly in North and Northeast regions, remain a challenge. Adequate access to health services and social assistance need to be guaranteed for the large number of individuals with chronic Chagas’ disease that have accumulated during the last decades. / A doença de Chagas continua sendo uma Doença Tropical Negligenciada e um problema de saúde pública, com significativas implicações socioeconômicas na maioria dos países latinoamericanos, incluindo o Brasil. Objetivou-se caracterizar a magnitude e os padrões da mortalidade relacionada à doença de Chagas no Brasil. Foi realizado estudo descritivo e analítico com dados de mortalidade obtidos do Sistema de Informação sobre Mortalidade do Ministério da Saúde (SIM/DATASUS/MS), além de análise espacial utilizando os municípios como unidades de observação. Foram analisados todos os óbitos ocorridos no Brasil entre 1999 e 2007, nos quais a doença de Chagas foi mencionada como causa básica ou associada de morte. Foram calculados os coeficientes de mortalidade específicos e a mortalidade proporcional para analisar as tendências temporais por meio de regressão polinomial. Investigaram-se os fatores associados ao óbito pela doença de Chagas, comparando-os com os óbitos gerais. Foram descritas as causas de morte que frequentemente se associaram com a doença de Chagas. Para análise de autocorrelação espacial foram utilizados os métodos: Moran global, Getis-Ord General G, Moran local e estatística Gi*. Entre 1999 e 2007, ocorreram 53.930 óbitos relacionados à doença de Chagas no Brasil (44.543 como causa básica e 9.387 como causa associada), com coeficiente médio de mortalidade de 3,78/100.000 habitantes e mortalidade proporcional de 0,6%. Durante o período de estudo, a mortalidade apresentou tendência de declínio a nível nacional (p=0,011), porém com padrões diferenciados entre as regiões. Observou-se redução da mortalidade nas regiões Centro-Oeste (p=0,001), Sudeste (p=0,007) e Sul (p=0,028), mas a região Nordeste apresentou tendência de crescimento (p=0,047) e a região Norte apresentou tendência de estabilidade (p=0,309). Na análise multivariada foram independentemente associados à mortalidade: idade >30 anos (OR ajustada=10,60; IC 95%: 9,90-11,33; p<0,001); residir nos estados de Minas Gerais, Goiás e Distrito Federal (OR ajustada=4,89; IC 95%: 4,81-4,98; p<0,001); não morar em capital de estado (OR ajustada=1,04; IC 95%: 1,02-1,06; p<0,001) e sexo masculino (OR ajustada=1,02; IC 95%: 1,00-1,03; p=0,045). As principais causas associadas à doença de Chagas como causa básica foram as complicações diretas do envolvimento cardíaco, como os transtornos de condução/arritmias (41,4%) e a insuficiência cardíaca (37,7%). As doenças cerebrovasculares (13,2%), isquêmicas do coração (13,2%) e hipertensivas (9,3%) foram as principais causas básicas nos óbitos em que a doença de Chagas foi causa associada. A análise espacial identificou um extenso agregado espacial (cluster) de alto risco para mortalidade relacionada à doença de Chagas envolvendo oito estados na região central do Brasil e mais quatro clusters menores. Apesar do declínio da mortalidade relacionada à doença de Chagas no Brasil, esta continua sendo uma importante causa de morte em áreas endêmicas e com marcantes diferenças regionais. Com o declínio da transmissão vetorial, as deficiências no sistema público para a prevenção, controle e tratamento da doença de Chagas, principalmente nas regiões Norte e Nordeste, precisam ser superadas. O desafio é garantir acesso adequado aos serviços de saúde e assistência social para o grande número de indivíduos com doença de Chagas na fase crônica que se acumularam durante as últimas décadas.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-05-31T21:14:12Z No. of bitstreams: 1 Adriana Lima de Oliveira. Microquimerismo fetal em fêmeas de camundongos - CPqGM - Dissertação Mestrado - 2008.pdf: 3543169 bytes, checksum: e3a8306c07bffce080c07532d96950f0 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-31T21:14:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Adriana Lima de Oliveira. Microquimerismo fetal em fêmeas de camundongos - CPqGM - Dissertação Mestrado - 2008.pdf: 3543169 bytes, checksum: e3a8306c07bffce080c07532d96950f0 (MD5) Previous issue date: 2008 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / O papel da persistência de células fetais no organismo materno pós-gestação (microquimerismo materno-fetal) é ainda pouco estudado. Para investigar o potencial de reparo tecidual destas células em lesões de coração e músculo esquelético, avaliamos a presença de células fetais nestes órgãos durante a infecção aguda por T. cruzi de fêmeas parturientes que tiveram filhotes GFP+. Fêmeas C57Bl/6 foram infectadas com tripomastigotas da cepa Colombiana de T. cruzi no oitavo dia pós-parto e sacrificadas no 30º dia pós-infecção. A presença de células fetais GFP+ foi avaliada por citometria de fluxo (sete dias pós-parto), por imunofluorescência utilizando anticorpos anti-GFP e por PCR em tempo real usando sondas específicas para o gene GFP de origem fetal. Células fetais GFP+ foram detectadas na circulação de 20% das fêmeas analisadas. Em secções de corações e de músculo esquelético de fêmeas infectadas, detectaram-se células fetais GFP+, algumas das quais expressando miosina, um marcador de células de músculo estriado. No fígado a presença de células GFP+ também foi detectada, porém estas não apresentaram expressão de albumina. Já em secções de coração, músculo esquelético e fígado de fêmeas sadias com fetos fluorescentes não foram encontradas células GFP+. A presença do trasngene gfp de origem fetal, avaliada pela metodologia de PCR em tempo real, é aumentada pela infecção por T. cruzi no coração e músculo esquelético, em comparação com fêmeas parturientes sadias. A presença do transgene gfp de origem fetal é mais elevada no coração do que no músculo esquelético de fêmeas infectadas. Em conclusão, os resultados sugerem que células fetais participam do processo de reparo de lesões do coração e do músculo esquelético, pelo menos no modelo de infecção aguda por T. cruzi. / The role of fetal cells persistence in maternal organism after gestation (fetal-maternal microchimerism) is poorly understood. To investigate the regenerative potential of these cells in heart and muscle lesions, we evaluated the presence of fetal cells in these organs during the acute infection by T. cruzi of parturient female mice which had GFP+ puppies. C57Bl/6 female mice were infected with trypomastigotes of Colombian strain T. cruzi on the 8th day post-partum, and sacrificed on the 30º day post-infection. The presence of GFP+ fetal cells was evaluated by flow cytometry (7 days post-partum) and by immunofluorescence using anti-GFP specific antibodies and by real time PCR using specific probes for GFP gene of fetal origin 30 days post-partum. GFP+ fetal cells were detected in the circulation in 20% of the analyzed females. GFP+ cells were also detected in heart and striated muscle section of T. cruzi-infected mice, some of which expressed myosin, a marker of striated muscle cells. In the liver, GFP+ cells were also found, but none co-expressing albumin. In sections of heart, striated muscle and liver of healthy chimeric females, we did not find GFP+ cells. The presence of gfp transgene of fetal origin, evaluated by real time PCR, was increased by infection with T. cruzi in the heart and skeletal muscle, compared to healthy parturient females. The presence of gfp transgene of fetal origin is higher in the heart than in the striated muscle of infected females. In conclusion, our results suggest that fetal cells participate in the regenerative process in the heart and striated muscle, at least in the model of acute T. cruzi infection.

Submitted by Tatiana Oliveira (tsilva@icict.fiocruz.br) on 2012-06-06T15:32:21Z No. of bitstreams: 1 denise_gj_batista_ioc_bp_0023_2009.pdf: 5405466 bytes, checksum: 0bb4fce7e31b0593bb33cff01fa3e688 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-06-06T15:32:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 denise_gj_batista_ioc_bp_0023_2009.pdf: 5405466 bytes, checksum: 0bb4fce7e31b0593bb33cff01fa3e688 (MD5) Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz.Instituto Oswaldo Cruz. Rio de janeiro, RJ, Brasil / No centenario da descoberta da doenca de Chagas (DC), esta parasitose negligenciada causada pelo Trypanosoma cruzi e importante causa de mortalidade e morbidade na America Latina, sem vacinas ou agentes quimioterapicos satisfatorios. Esta tese objetivou analisar atividade, seletividade e mecanismos de acao sobre o T.cruzi de 04 classes de compostos (fluorquinolonas - FQ, tiossemicarbazonas - TS, diamidinas aromaticas - DA e arilimidamidas – AIA – uma nova classe a partir de DA) in vitro e in vivo. FQ como NOR e SPAR sao antibioticos com ampla acao bactericida, atuando sobre o DNA via toposoimerases. Embora SPAR e NOR nao tenham sido ativas, seus complexos metalicos de cobre-fenantrolina foram efetivos sobre tripomastigotas e formas intracelulares de T.cruzi, (IC50 1,62 a 4,65µM). TS sao agentes anti-tumorais e microbicidas que atuam sobre ribonucleotideo redutases e cisteina proteases. Todas TS apresentaram baixa toxicidade (>200µM) sobre celulas de mamiferos. Embora N4-metil-4-nitrobenzaldeido-tiossemicarbazona, N4-metill-4-nitroacetofenona-tiossemicarbazona e seus complexos metalicos de manganes (Mn) não tenham sido ativos, o complexo de Mn da N4-metil-4-nitrobenzofenona-tiossemicarbazona revelou-se moderadamente ativo sobre formas sanguineas (IC50 19µM). A terceira classe foi DA, ligantes de DNA com excelente atividade sobre diversos patogenos. Embora todas tenham baixa toxicidade sobre cardiomiocitos, somente tres (DB1645, DB1582 e DB1651) foram ativas contra formas sanguineas e intracelulares (IC50 entre 0,15 a 13,3µM), com atividade relacionada a curvatura das moleculas (sendo as moleculas lineares as nao efetivas). Todas DA localizam-se no nucleo e kDNA dos parasitos, com maior acumulo na ulti Analise in vitro da AIA DB766 sobre T.cruzi revelou: (i) excelente atividade sobre formas sanguineas (60nM) e intracelulares (25nM), mantendo otima acao mesmo quando o parasito e incubado com 96% de sangue de camundongo, sugerindo assim, um potencial uso profilatico, (ii) ação sobre diferentes cepas (peridomiciliares/silvestres), incluindo as naturalmente resistentes ao benznidazole (BZ), com superior eficacia que BZ, (iii) localizacao em compartimentos ricos em DNA, induzindo danos ultra-estruturais na mitocondria. Com base no excelente indice de seletividade (>533 e 714), ensaios foram conduzidos durante a infeccao aguda experimental por T.cruzi (cepas Y e Colombiana), em doses diarias ou alternadas =100mg/kg/dia da DB766 sozinha ou associada ao BZ, administradas via ip ou p.o. por ate 20 dias, com primeira dose no inicio da parasitemia. DB766 (25 e 50mg/kg/dia ip e 100mg/kg/dia p.o.) reduziu (>90%) a carga parasitaria (sangue e tecido cardiaco) e protegeu 90-100% contra mortalidade, com semelhante eficacia ao BZ. AIA reverteu inflamacao e alteracoes eletricas cardiacas e protegeu contra lesoes hepaticas e musculares induzidas pela infeccao. Doses sub-otimas de BZ associado com a DB289 (DA - pro-droga da DB75 – via p.o.) ou com a DB766 (ip) resultaram em =99% reducao de parasitemia e 100% de protecao sobre mortalidade. BZ (p.o)+DB766 (ip) resultou em cura parasitologica (2 em 15 animais) avaliada por hemocultivo e PCR. AIA foi a mais ativa e seletiva sobre T. cruzi, estimulando a continuidade de ensaios pre-clinicos com representantes desta classe visando identificacao de novos farmacos para a DC / In the centenary of the discovery of Chagas' disease (AD), this parasitosis caused by Trypanosoma cruzi neglected and important cause of morbidity and mortality in Latin America, no vaccines or chemotherapeutic agents satisfactory. This thesis aims to analyze activity, selectivity and mechanisms of action of T. cruzi on the 04 classes of compounds (fluoroquinolones - CF thiosemicarbazones - TS, aromatic diamidines - DA and arilimidamidas - AIA - a new class from DA) in vitro and in vivo. CF as NOR and SPAR are antibiotics with broad antibacterial action, acting on the DNA via toposoimerases. Although SPAR and NOR have not been active, their metallic complexes of copper-phenanthroline were effective on trypomastigotes and intracellular forms of T. cruzi (IC50 1.62 to 4.65 mM). TS are anti-tumor agents and microbicides that act on ribonucleotide reductase and cysteine ​​proteases. All TS showed low toxicity (> 200μM) on cells of mammals. Although N4-methyl-4-nitrobenzaldehyde thiosemicarbazone, N4-methyl-4-nitroacetophenone thiosemicarbazone and its metal complex of manganese (Mn) were not active, the complex of Mn N4-methyl-4-nitrobenzophenone thiosemicarbazone revealed was moderately active on blood forms (IC50 19μM). The third class was DA, DNA binders with excellent activity against many pathogens. Although all have low toxicity cardiomyocyte, only three (DB1645, DB1582 and DB1651) were active against blood forms and intracellular (IC 50 from 0.15 to 13.3 mM), activity related to the curvature of the molecules (the molecules being the non-linear effective). OF all located in the nucleus and kDNA from parasites, with greater accumulation in the ulti In vitro analysis of EIA DB766 on T.cruzi revealed: (i) excellent activity against bloodstream forms (60nm) and intracellular (25nm), while maintaining optimal action even when the parasite and incubated with 96% blood of mice, thus suggesting a potential prophylactic use, (ii) act on different strains (peridomestic / wild), including naturally resistant to benznidazole (BZ), with higher efficacy than BZ, (iii) location compartments rich DNA damage inducing ultrastructural the mitochondria . Based on the excellent selectivity index (> 533 and 714), tests were conducted during experimental acute infection by T. cruzi (Y and Colombian strains) in daily doses or alternate = 100mg/kg/day of DB766 alone or associated with BZ, administered ip or po for up to 20 days with the first dose at the onset of parasitaemia. DB766 (25 100mg/kg/day and 50mg/kg/day ip and po) reduced (> 90%) the parasite load (blood and cardiac tissue) and 90-100% protected against mortality, with similar efficacy to the BZ. EIA reversed inflammation and cardiac electrical changes and protected against liver injury induced by infection and muscle. Sub-optimal doses of BZ associated with DB289 (DA - pro-drug of DB75 - via po) or DB766 (ip) resulted in ≥ 99% reduction of parasitemia and 100% protective on mortality. BZ (po) + DB766 (ip) resulted in parasitological cure (2, 15 dogs) assessed by blood culture and PCR. EIA was the most active and selective against T. cruzi, encouraging the continuation of pre-clinical trials with representatives of this class in order to identification of new drugs for AD

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2012-08-21T13:33:45Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Joao Paulo dos Santos.pdf: 183057 bytes, checksum: bde089904a6da0f1799c43a07c62b706 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-08-21T13:33:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Joao Paulo dos Santos.pdf: 183057 bytes, checksum: bde089904a6da0f1799c43a07c62b706 (MD5) / A doença de Chagas, ainda constitui-se como um dos principais problemas médicosociais, sendo reconhecida pela Organização Mundial da Saúde (OMS) como uma das 13 doenças tropicais mais negligenciadas do mundo e um grave problema de saúde pública na América Latina. Com o objetivo de verificar os aspectos nutricionais associados à infecção crônica pelo Trypanosoma cruzi em idosos residentes no município de Bambuí, Minas Gerais, foi realizado um estudo seccional entre participantes do Projeto Bambuí. Os 1742 residentes na área urbana com 60 ou mais anos de idade foram selecionados em 1997 para participar da linha de base do estudo de coorte, sendo que 1606 (92,2%) foram entrevistados e 1496 (85,9%) foram examinados. Para verificar a associação entre a infecção crônica pelo T. cruzie as variáveis nutricionais, ajustadas por potenciais fatores de confusão, utilizou-se a regressão de Poisson robusta e respectivos intervalos de confiança (95%). Foram consideradas as seguintes variáveis antropométricas: Índice Massa Corporal (kg/m2) (IMC), Circunferência da Cintura (cm) (CC), Dobra Cutânea Tricipital (mm) (DCT), Perímetro Braço (cm) (PB), Circunferência Muscular do Braço (cm) (CMB) e Área Muscular do Braço corrigida (cm2) (AMBc). As variáveis bioquímicas foram: dosagem de albumina (g/dL), nível de hemoglobina (g/dL), razão colesterol total / colesterol HDL, glicemia (mg/dL). Do total de idosos avaliados, 60,9% eram do sexo feminino, com média de idade de 69,3 anos (desvio padrão = 7,4 anos). A infecção pelo T.cruzi foi observada em 38,1% dos idosos, sendo 31,1% entre homens e 42,5% entre mulheres (p<0,001). Considerando a população total, todas as variáveis antropométricas apresentaram associação significativa com a infecção pelo T. cruzi,apontando menores valores entre os infectados. Entre as variáveis bioquímicas, apenas o nível de glicemia se mostrou significativamente mais baixo entre os idosos infectados. Quando se estratificou por faixa etária, algumas diferenças foram observadas, sendo que a DCT manteve a associação apenas entre os mais velhos, e as variáveis CMB, AMBc e glicemia apresentaram associação significativa apenas entre os idosos de 60 a 69 anos. O estudo permitiu concluir que idosos chagásicos comparados àqueles sem a presença da infecção, apresentaram um pior estado nutricional, demonstrando um desequilíbrio nesta relação. / Chagas disease, has established itself as a major medical-social problems, being recognized by the World Health Organization (WHO) as one of the 13 most neglected tropical diseases in the world and a serious public health problem in Latin America. In order to check the nutritional aspects associated with chronic infection with Trypanosoma cruzi in elderly residents in the municipality of Bambuí, Minas Gerais, a cross-sectional study was conducted among participants of the Bambuí. The 1742 residents in the urban area over 60 years of age were selected in 1997 to participate in the baseline cohort, and 1606 (92.2%) were interviewed and 1496 (85.9%) were examined. To investigate the association between chronic infection by T. cruzi and nutritional variables, adjusted for potential confounders, we used Poisson regression and robust confidence intervals (95%). We considered the following anthropometric variables: Body Mass Index (kg/m2) (BMI), Waist Circumference (cm) (CC), triceps skinfold thickness (mm) (TSF), arm circumference (cm) (PB), Muscle Circumference Arm (cm) (CMB) and corrected arm muscle área (cm2) (CAMA). The biochemical variables were: albumin (g / dL), hemoglobin (g / dL), ratio of total cholesterol / HDL cholesterol, blood glucose (mg / dL). Of all elderly patients, 60.9% were female, mean age of 69.3 years (SD = 7.4 years). Infection with T. cruzi was observed in 38.1% of the elderly, 31.1% men and 42.5% among women (p<0.001). Considering the total population, all anthropometric variables were significantly associated with infection by T. cruzi, showing lowest values among those infected. Among the biochemical variables, only the blood glucose level was significantly lower among the elderly infected. When stratified by age, some differences were observed, and the DCT remained only the association between the older and the AMC, CAMA and glucose showed a significant association only between aged 60 to 69 years. The study showed that elderly chagasic patients compared to those without the presence of infection, showed a worse nutritional status, demonstrating an imbalance in this relationship.

Submitted by Tatiana Silva (tsilva@icict.fiocruz.br) on 2013-01-25T16:35:56Z No. of bitstreams: 1 raquel_t_nogueira_ioc_bcm_0036_2011.pdf: 26030733 bytes, checksum: f5f3242630bf6c38b49320fb704ac2e4 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-01-25T16:35:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 raquel_t_nogueira_ioc_bcm_0036_2011.pdf: 26030733 bytes, checksum: f5f3242630bf6c38b49320fb704ac2e4 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz.Instituto Oswaldo Cruz. Rio de janeiro, RJ, Brasil / O vírus vivo atenuado de Febre Amarela (FA) YF 17D é uma das vacinas virais mais seguras e eficazes já administradas a humanos, a qual induz uma resposta imune polivalente. Estas características tornam este vírus vacinal umaplataforma tecnológica para o desenvolvimento de novas vacinas. Através da tecnologia do clone infeccioso, nós utilizamos o arcabouço de YF 17D para expressar epítopo indutor de linfócitos T CD8 + , TEWETGQI e um fragmento imunogênico, ambos provenientes da proteína de superfície de amastigota 2 (ASP-2) de Trypanosoma cruzi, parasita causador da Doença de Chagas. Este estudo objetivou evidenciar o potencial deste vírus em expressar antígenos heterólogos. O epítopo TEWETGQI foi clonado e expresso baseando-se em doissítios distintos do genoma: na alça fgda proteína de Envelope (E) (YF17D/E200/Tc) e no sítio de clivagem proteolítico entre NS2B e NS3 (YF17D/NS2B3/Tc). Uma terceira estratégia envolveu a montagem de um cassete heterólogo expressando um fragmento imunogênico de 120 aminoácidos de ASP-2 entre as proteínas E e NS1 (YF17D/ENS1/Tc). Nós investigamos se o sítio de expressão poderia influenciar a imunogenicidade do antígeno heterólogo. Assim, foram gerados vírus que se replicaram em cultura de células similar ao YF 17DD e permaneceram estáveis geneticamente após algumas passagens seriadas em célula Vero. A expressão dos antígenos heterólogos pelos vírus recombinantes revelou distintos padrões de detecção em diferentes regiões da célula. Outros estudos de caracterizaçãomostraram que os vírus YF17D/E200/Tc e YF17D/NS2B3/Tc são mais atenuados do que YF 17DD, quando inoculados via intracerebral em camundongos, sendo YF17D/E200/Tc o mais atenuado. Estudos de imunogenicidade revelaram que todos os vírus foram capazes de induzir anticorpos neutralizantes para Febre Amarela e o vírus YF17D/ENS1/Tc induziu anticorpos que reagem especificamente com amastigotas. Além disso, os vírus recombinantes induziram em camundongos imunizados uma resposta celular T produtora de interferon-gama(IFN-γ) antígeno-específica, além de uma resposta balanceada T CD4 + e T CD8 + para Febre Amarela. A vacinação de uma linhagem murina altamente suscetível à infecção por T. cruzicom um regime de dose-reforço homólogo que utilizou uma formulação de vírus YF 17D recombinantes induziu células T CD8 + TEWETGQI específicas após uma única dose, a qual poderia explicar o maior grau de proteção após desafio com T. cruzi. Assim, concluímos que a plataforma de YF 17D é útil para expressar antígenos de protozoários (T. cruzi) em regiões funcionais distintas do genoma com um impacto mínimo na viabilidade viral. Além disso, o uso de novas formulações contendo diferentes vírus YF 17D recombinantes parece ser uma estratégia promissora, a qual será explorada para outros patógenos. / The attenuated Yellow Fever (YF) 17D vaccine virus is one of the safest and most effective viral vaccines administered to humans, inwhich it elicits a polyvalent immune response. These characteristics make this vaccine virus a technological platform to the development of new vaccines. Herein, through the infectious clone technology, we used the YF 17D backbone to express a CD8 + T cell epitope, TEWETGQI and an immunogenic fragment, both originated from the Trypanosoma cruzi (the causative agent of Chagas disease) Amastigote Surface Protein 2 (ASP-2). This study aimed to provide further evidence for the potential of this virus to express foreign epitopes. The TEWETGQI epitope was cloned and expressed in two different genomic insertion sites:the fg loop of the viral Envelope protein (E) (YF17D/E200/Tc) and the protease cleavage site between the NS2B and NS3 (YF17D/NS2B3/Tc). A third strategy involved the construction of a heterologous cassette expressing an immunogenic ASP-2 fragment between E and NS1 (YF17D/ENS1/Tc). We investigated whether the site of expression had any influence on foreign antigen immunogenicity. In this sense, we generated virus that replicated similarly to vaccine virus YF 17DD in cell culture and remained genetically stable after some serial passages in Vero cells. The expression of the heterologous antigens by the recombinant viruses revealed distinct patterns of detection regarding different regions of the cell. Other characterization studies showed that YF17D/E200/Tc and YF17D/NS2B3/Tc were more attenuated than YF 17DD, when inoculated intracerebrally in mice, YF17D/E200/Tc being the most attenuated. Immunogenicity studies revealed that all viruses elicited neutralizing antibodies to YF virus and YF17D/ENS1/Tc virus induced antibodies that react specifically to amastigotes. Moreover, recombinant viruses generated an antigen specificgamma interferon (IFN-γ) mediated T-cell response in immunized mice as well as a balanced YF T CD4 + and T CD8 + response. Vaccination of a mouse lineage highly susceptible to infection by T. cruziwith a homologous prime-boost regimen of a YF 17D recombinant formulation elicited TEWETGQI specific CD8 + T cells after only one dose which could explain the higher degree of protection after T. cruzichallenge. We conclude that the YF 17D platform is useful to express Protozoan (T. cruzi) antigens at different functional regions of its genome with minimal reduction in vector viability. Besides, the use of new viral formulations composed of different YF 17D recombinant viruses seem to be a promising strategythat will be explored to other pathogens.

Made available in DSpace on 2014-05-29T12:32:35Z (GMT). No. of bitstreams: 4 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 69316.pdf: 16389099 bytes, checksum: 74eb72078f131d9d9be7efc37391f1e6 (MD5) 69316.pdf.txt: 484412 bytes, checksum: 46c33af71747059817ce7b4a20b609af (MD5) 69316.pdf.jpg: 1433 bytes, checksum: 084dde94865696f7af0cab1566875cf5 (MD5) Previous issue date: 2014-05-06 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, é uma doença tropical negligenciada que representa um grave problema de saúde pública. Assim, compreender a biologia da interação T. cruzi-hospedeiros constitui um grande desafio, uma vez que o ciclo de vida deste parasito exige um repertório de adaptações para garantir sua dispersão em hospedeiros vertebrados e invertebrados. O presente estudo demonstra o potencial das proteínas com propriedade de ligação à heparina (PLHs) em atuar no ciclo biológico do T. cruzi. Durante este trabalho foi oportuno isolar uma fração de proteínas hidrofóbicas com propriedade de ligação à heparina, com massas moleculares entre 70 kDa e 59 kDa em formas epimastigotas e tripomastigotas de T. cruzi por cromatografia de afinidade à heparina. A presença destas proteínas na superfície celular destes parasitos foi confirmada por ressonância plasmônica de superfície. Tais ensaios também foram decisivos na determinação da especificidade e estabilidade da ligação das PLHs a heparina, heparam sulfato (HS) e condroitim sulfato (CS). Os ensaios de competição realizados indicaram que a interação entre PLHs e GAGs pode influenciar a adesão dos epimastigotas à superfície de células epiteliais do trato intestinal de Rhodnius prolixus O envolvimento de GAGs na invasão de amastigotas em cardiomiócitos, célula alvo da infecção pelo T. cruzi, também foi demonstrado através de ensaios de competição com 20 \03BCg/ml de GAGs solúveis, incluindo heparina, HS, CS, dermatam sulfato (DS) e queratam sulfato (KS). Uma drástica redução no nível de infecção foi evidenciada apenas com heparina e HS, atingindo 82% e 65% de redução da invasão, respectivamente. Ensaios com células deficientes em GAGs (CHO-745) corroboraram o importante papel destes componentes de matriz extracelular no processo de reconhecimento e invasão de amastigotas. Na continuidade deste estudo, avançamos na caracterização bioquímica de PLHs, na determinação da expressão e distribuição espacial destas proteínas em tripomastigotas. As análises por citometria de fluxo revelaram que PLHs são abundantes na superfície de tripomastigotas, clone Dm28c, e a detecção destas proteínas por imunofluorescência indireta revelou uma localização predominante na membrana flagelar do parasito. Com os ensaios de zimografia realizados neste trabalho, revelamos que as PLHs de tripomastigotas tem atividade de protease sobre gelatina em uma ampla faixa de pH (5,5 - 8,0). A sensibilidade destas enzimas a presença de inibidores de serino protease indicam que as PLHs de tripomastigotas têm propriedades similares à tripsina. O conjunto de resultados deste trabalho aponta para o importante papel das PLHs em todas as etapas do ciclo biológico do T. cruzi a partir de eventos de adesão e invasão celular, através do reconhecimento de glicosaminoglicanos sulfatados / Chagas disease, caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, is a neglected tropical disease that causes a serious public health problem. Thus, understanding the biology of the T. cruzi-hosts interaction is a major challenge, since the life cycle of this parasite requires a repertoire of adaptations to ensure their dispersion in vertebrate and invertebrate hosts. The present study demonstrates the potential of proteins with heparin-binding property (HBPs) to act in the biological cycle of T. cruzi. During this study, it was opportune to isolate a hydrophobic protein fraction with property to bind to heparin, with molecular weights ranging from 70 kDa to 59 kDa, in epimastigotes and trypomastigotes of T. cruzi by heparin affinity chromatography. The presence of these proteins on the cell surface of these parasites was confirmed by surface plasmon resonance. These assays were also decisive in determining the specificity and stability of the binding of HBPs to heparin, heparan sulfate (HS) and chondroitin sulfate (CS). The competition assays indicated that the interaction between HBPs and GAGs can influence the adhesion of the epimastigote to the surface of epithelial cells of the intestinal tract of Rhodnius prolixus. The involvement of GAGs in the invasion of amastigotes in cardiomyocytes, target cell of T. cruzi infection, was also demonstrated by competition assays with 20 μg/ml of soluble GAGs, including heparin, HS, CS, dermatan sulfate (DS) and keratan sulfate (KS). A drastic reduction in the level of infection was observed only with heparin and HS, reaching 82% and 65% reduction of the invasion, respectively. Experimental assays using cells deficient in GAGs (CHO-745) corroborated the important role of extracellular matrix components in the recognition and invasion of amastigotes. In continuation of this study, we advanced in the biochemical characterization of HBPs and also determined the expression and spatial distribution of these proteins in trypomastigotes. The flow cytometric analysis revealed that HBPs are abundant at the surface of trypomastigotes, Dm28c clone, and the detection of these proteins by indirect immunofluorescence revealed a predominant location in the flagellar membrane of the parasite. With the zymography assays conducted in this work, we revealed that HBPs of trypomastigotes have proteinase activity on gelatin in a wide pH range (5.5 - 8.0). The sensitivity of these enzymes in the presence of serine proteinase inhibitors indicates that HBPs of trypomastigotes have properties similar to trypsin. All together, the results of this study points out to the important role of HBPs at all stages of the life cycle of T. cruzi from events of adhesion and cell invasion, through the recognition of sulfated glycosaminoglycans

Made available in DSpace on 2014-08-11T12:37:22Z (GMT). No. of bitstreams: 4 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) mayara_chambela_ipec_mest_2012.pdf: 742104 bytes, checksum: 539c5f43343ecbe7c2210f60bd4c0bba (MD5) mayara_chambela_ipec_mest_2012.pdf.txt: 105697 bytes, checksum: 68a4cd335d5a44f983249fa1fd40abb1 (MD5) mayara_chambela_ipec_mest_2012.pdf.jpg: 1466 bytes, checksum: 0ef650b996154e2ccb253b8e5bdde533 (MD5) Previous issue date: 2014-05-06 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A resposta imune é muito importante para a proteção contra doenças. Estudos têm avaliado a resposta imunológica de pacientes com doença de Chagas na tentativa de explicar a fisiopatologia da doença. O objetivo deste trabalho foi avaliar as concentrações das citocinas séricas IL-4, IL- 10, IL-12, TNF- e IFN- em pacientes nas diferentes formas clínicas da doença de Chagas. Foi realizado um estudo caso-controle de 115 indivíduos. Os indivíduos infectados foram divididos em estágios conforme o consenso brasileiro de doença de Chagas: indeterminados ou sem cardiopatia aparente (eletrocardiograma e ecocardiograma normais); cardíacos A (eletrocardiograma alterado e ecocardiograma normal); cardíacos C (eletrocardiograma e ecocardiograma alterados com ICC compensável) e cardíacos D (eletrocardiograma e ecocardiograma alterados com ICC refratária). Também foram incluídos indivíduos não infectados pelo T. cruzi. Foram incluídos 30 pacientes indeterminados; 31 cardíacos A; 14 cardíacos C, 11 cardíacos D e 29 indivíduos não infectados Entre as citocinas pró-inflamatórias, o IFN- apresentou maior concentração sérica em relação às citocinas IL-12 e TNF- . Os cardíacos no estágio A apresentaram maiores concentrações de TNF- , entretanto houve uma queda significativa nas concentrações desta citocina à medida que observamos os estágios mais avançados da CCC. Tanto os indeterminados quanto os cardíacos apresentaram altos níveis de TFN- e IFN- e baixos níveis de IL-4 e IL-10, demonstrando um perfil predominante de Th1, com uma resposta imune não balanceada. Este estudo demonstrou uma proporcionalidade direta nas concentrações das citocinas pró-inflamatórias e antiinflamatórias em relação à FEVE, em todos os grupos de pacientes estudados, sugerindo que essa correlação poderia ser utilizada como um possível marcador de evolução para a CCC / The immune response is very important for protectio n against diseases. Studies have evaluated the immune response of patients with Chagas’ diseas e in an attempt to explain the pathophysiology of the disease. The aim of this stu dy was to evaluate serum concentrations of cytokines IL-4, IL-10, IL-12, TNF- α and IFN- in patients in different clinical forms of Chagas’ disease. We conducted a case-control study of 115 i ndividuals. Infected individuals were divided into 4 stages as the Brazilian consensus of Chagas disease: indeterminate patients or without apparent heart disease (normal electrocardiogram an d echocardiogram) cardiac patients on the stage A (electrocardiogram changes and normal echoc ardiogram), cardiac patients on the stage C (electrocardiogram and echocardiogram altered with compensable CHF) and cardiac patients on the stage D (electrocardiogram and echocardiogram c hanged with refractory CHF). Also were included uninfected individuals with T. cruzi . We included 30 indeterminate patients, 31 cardiac patients on the stage A, 14 cardiac patients on the stage C, 11 cardiac patients on the stage D and 29 uninfected individuals. Among the pro-inflammato ry cytokines, IFN- showed higher serum levels in relation to IL-12 and TNF- α . The cardiac patients on the stage A had higher concentrations of TNF- α , however, there was a significant decrease in the concentrations of this cytokine in the same time that we observed the late r stages of the CCC. Both indeterminate and cardiac patients showed high levels of TFN- α and IFN- and low levels of IL-4 and IL-10, demonstrating a dominant Th1 profile with an imbala nced immune response. This study demonstrated a direct proportionality in concentrat ions of pro-inflammatory and anti- inflammatory cytokines with respect to the LVEF in all groups of patients, suggesting that this correlation could be used as a marker of progressio n to CCC.

Made available in DSpace on 2014-12-05T18:36:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) claudia_oliveira_ipec_mest_2011.pdf: 502761 bytes, checksum: dd808ab2a33dca0d5043c44bf4cf80c3 (MD5) Previous issue date: 2014-10-07 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas, Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Estudos prévios descreveram um desequilíbrio do sistema nervoso autônomo na doença de Chagas causando maior atividade simpática, o que poderia influenciar na gênese da hipertensão arterial. No entanto, pacientes submetidos a exercícios físicos regulares poderiam contrapor esta condição, visto que o exercício provoca respostas fisiológicas através de adaptações autonômicas e hemodinâmicas que influenciam positivamente o sistema cardiovascular. O presente estudo se propõe a avaliar os efeitos da reabilitação cardíaca sobre a pressão arterial em pacientes hipertensos com cardiopatia chagásica crônica. Foram recrutados 17 pacientes submetidos a um programa regular de exercícios durante 24 semanas, sendo utilizado monitorização ambulatorial da pressão arterial (MAPA) antes e após o treinamento Foi descrita a diferença da pressão arterial sistólica (PAS), diastólica (PAD) e média (PAM) do início ao fim do estudo, comparadas pelo teste do sinal de Wilcoxon, com nível de significância de 0,05. As pressões foram avaliadas de forma geral e nos períodos de vigília e sono, respectivamente: PAS (p = 0,3454; 0,2334; 0,8545), PAD (p = 0,4669; 0,4466; 0,9438) e PAM (p = 0,4163; 0,3033; 0,9798). Concluímos que não houve diferença estatisticamente significativa na variação da pressão arterial após o período de reabilitação cardíaca de 24 semanas, no entanto, evidenciamos que o treinamento físico é seguro em pacientes com cardiopatia chagásica crônica, não ocorrendo aumento da pressão arterial