Thesis (MScMedSc)--Stellenbosch University, 2014. / ENGLISH ABSTRACT: Individuals latently infected with Mycobacterium tuberculosis (M.tb) contain the infection without showing signs of illness. Steroid hormones such as glucocorticoids (GCs) however can lead to reactivation of TB. Currently two different injectable contraceptives are available in South Africa, medroxyprogesterone acetate (MPA) and norethisterone enanthate (NET). MPA is able to bind to and activate the glucocorticoid receptor (GR) and possesses selective GC activity, a pharmacological characteristic absent in NET. The aim of this study was to investigate the immune modulatory effects of the two contraceptives MPA and NET on immune responses to mycobacteria in vitro and in vivo. Human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were infected with BCG (M. bovis Bacille Calmette-Guérin) and treated with MPA, NET, progesterone or cortisol and cytokine expression was measured in order to determine whether the synthetic progestins mimic endogenous progesterone or the GC cortisol. MPA, but not NET suppressed the expression of IFN-γ, IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-12p40 and IL-13 similarly to cortisol. Furthermore expression of miRNAs, small double stranded RNA molecules that bind to complementary sequences in mRNAs of target genes and cause their degradation, was determined under the different experimental conditions. The expression of several miRNAs including miR-30c, miR-222, miR-454 and miR-331-3p were differentially influenced by MPA, cortisol and/or NET in PBMCs stimulated with BCG. For example, BCG induced the expression of miR-454 (p=0.003) which was then inhibited to basal levels by cortisol (p=0.008), MPA (p=0.002) and NET (p=0.002). These results demonstrate that steroid hormones including the contraceptives MPA and NET can modulate immune responses to mycobacteria at the miRNA level. To determine the effect of MPA and NET on BCG-induced expression of miRNAs in vivo a mouse model was used. C57BL/6 mice were injected weekly with either MPA or NET using a dose equivalent to humans and then infected with BCG. Mice treated with MPA had a higher spleen bacterial load 21 days after infection compared to both NET treated and control mice (p=0.023). In whole blood, MPA and NET treatment suppressed the BCG-induced production of miR-100 and miR-509-3p to basal levels. In contrast to NET, MPA induced expression of miR-99a expression independent of BCG infection. In the lung, the site of disease, a total number of 22 out of 377 miRNAs tested were differentially expressed 21 days after infection. The results of this study indicate that both synthetic progestins altered the immune response to BCG at the level of cytokine expression as well as the miRNA level. MPA was found to mimic cortisol by inhibiting secretion of inflammatory cytokines whereas NET appeared to have more progestogenic properties. Each of the steroid hormones was observed to induce a characteristic miRNA expression profile, both in vitro as well as in vivo, although not identical. These results highlight that the two contraceptives – although used interchangeably by women in developing countries - are pharmacologically unique and differentially modulate immune responses to mycobacteria. These data support the urgent need for further research into the link between hormonal contraceptives and susceptibility to infectious diseases. / AFRIKAANSE OPSOMMING: Individue wat latent met Mycobacterium tuberculosis ( M.tb ) geïnfekteer is, onderdruk die infeksie en wys geen simptome van die siekte nie. Steroïed hormone soos glukokortikoïede (GKe) kan egter tot die heraktivering van TB lei. Daar is tans twee verskillende inspuitbare voorbehoedmiddels beskikbaar in Suid-Afrika, medroksiprogesteroon-asetaat (MPA) en noretisteroon enantaat (NET). MPA is staat om aan die glukokortikoïed reseptor (GR) te bind en dit te aktiveer. MPA beskik ook selektiewe GK aktiwiteit, 'n farmakologiese eienskap wat afwesig is in NET. Die doel van hierdie studie was om die immuun-regulerende effekte van die twee voorbehoedmiddels, MPA en NET, op immuunresponse teen mikobakterieë in vitro en in vivo te ondersoek. Menslike perifêre bloed mononukleêre selle (PBMSe) is met BCG geïnfekteer en met MPA, NET, progesteroon of kortisol behandel. Sitokien uitdrukking was gemeet om vas te stel of die sintetiese progestiene, endogene progesteroon of die GK kortisol naboots. MPA, maar nie NET, onderdruk die produksie van IFN-γ, IL- 1α, IL- 1β, IL- 2, IL- 12p40 en IL- 13 soortgelyk aan kortisol. Verder is uitdrukking van miRNAs, klein dubbelstring RNS molekules wat aan komplimentêre volgorde in mRNAs van teiken gene bind en wat hul degradering veroorsaak, bepaal in elk van die verskillende eksperimentele toestande. Die uitdrukking van verskeie miRNAs insluitende miR-30c, miR-222, miR-454 en miR-331-3p is differensieël beïnvloed deur MPA, kortisol en/of NET in PBMSe wat met BCG gestimuleer is. Byvoorbeeld, BCG veroorsaak die uitdrukking van miR-454 wat dan geïnhibeer word tot agtergrondvlakke deur kortisol, MPA en NET. Hierdie resultate toon dat steroïed hormone, insluitend die voorbehoedmiddels MPA en NET, die immuunrespons teen mikobakterieë op miRNA-vlak affekteer. Om die effek van MPA en NET op BCG-geïnduseerde uitdrukking van miRNAs in vivo te bepaal, is ʼn muismodel gebruik. C57BL/6 muise is weekliks met 'n dosis van MPA of NET, ekwivalent aan dosisse gebruik in die mens, ingespuit en met BCG geïnfekteer. Muise wat met MPA behandel is, het 'n hoër bakteriële lading in die milt 21 dae na infeksie in vergelyking met NET-behandelde muise en kontrole muise. In hul bloed, onderdruk MPA en NET behandeling die BCG-geïnduseerde produksie van miR-100 en miR-509-3p tot basale vlakke. In teenstelling met NET, induseer MPA die uitdrukking van miR-99a onafhanklik van BCG infeksie. In die long is 'n totaal van 23 miRNAs differensieël uitgedruk 21 dae na die infeksie. Die resultate van hierdie studie dui daarop dat beide sintetiese progestien die immuunrespons teen BCG verander op sitokien sowel as miRNA vlak. MPA boots hoofsaaklik kortisol na deur inhibering van sitokien-produksie terwyl NET meer progesterone eienskappe het. Op miRNA vlak veroorsaak elk van die steroïed hormone 'n kenmerkende miRNA uitdrukkingsprofiel, beide in vitro asook in vivo. Hierdie resultate beklemtoon dat die twee voorbehoedmiddels - alhoewel hulle afwisselend gebruik word deur vroue in ontwikkelende lande - farmakologies uniek is en differensieël die immuunrespons reguleer teen Mycobacterium. Hierdie data ondersteun die dringende behoefte aan verdere navorsing in verband met hormonale voorbehoedmiddels en vatbaarheid vir aansteeklike siektes.

Les virus Hendra (HeV) et Nipah (NiV) sont des virus émergents appartenant à la famille des Paramyxovirus et au genre des Hénipavirus. Chaque année, ils sont responsables de nombreuses épidémies touchant plusieurs espèces animales dont les hommes, avec une forte morbidité et mortalité. À ce jour, aucun vaccin ni traitement ne sont commercialisés. Ce projet porte sur le développement d’un vaccin génétique pour lutter contre une infection par les Hénipavirus. La stratégie suivie, repose sur l’injection in vivo de vecteurs recombinants dérivés du virus Adéno-Associé (AAVr) codant pour la glycoprotéine d’enveloppe G du virus NiV. Une première expérience réalisée chez la souris, a montré qu’une seule injection de vecteurs AAVr par voie IM permet le développement d’une réponse humorale contre la protéine G, forte et stable dans le temps. Afin de tester le pouvoir protecteur de ce vaccin, des hamsters ont été infectés par les Hénipavirus, compte tenu de leur grande sensibilité à ces infections. L’injection de vecteurs AAVr chez ces animaux a permis de protéger 100 % des animaux infectés par le virus NiV et 50 % des animaux infectés par le virus HeV. Cette étude apporte une nouvelle approche de vaccination et de nouvelles perspectives concernant l’utilisation des vecteurs AAVr pour lutter contre des infections virales émergentes. / Nipah virus (NiV) and Hendra virus (HeV) are closely related, recently-emerged Paramyxoviruses, capable of causing considerable morbidity and mortality in several mammalian species, including humans. Commercially available Henipavirus-specific vaccines are still unavailable and development of novel antiviral strategies to prevent this lethal infection is highly desirable. Here we describe the development of Adeno-Associated Virus (AAV) vaccines expressing the NiV G protein. Characterization of these vaccines in mice demonstrated that a single intramuscular AAV injection was sufficient to induce a potent and long lasting antibody response. Translational studies in hamsters further showed that 100 % of vaccinated animals were protected against a lethal challenge with NiV In addition, this vaccine and induced a cross-neutralizing immune response able to protect 50 % of the animals against a challenge HeV. Altogether, this study presents a new vaccination approach which opens new perspectives toward the evaluation of AAV vectors as a vaccine against these emergent diseases.

L'analyse de la réponse lymphocytaire T représente une exploration de plus en plus importante pour la compréhension de la physiopathologie de maladies et le suivi de protocoles d'immunothérapie. La mise en évidence de la production de cytokines par ces cellules permet d'identifier les sous populations de lymphocytes T (LT) et d'analyser leur fonctionnalité et leur état d'activation. L'Elispot est une technique déjà largement utilisée dans le suivi de la réponse vaccinale pour la détection de cellules sécrétrices de cytokines. Bien que la séroprotection soit le critère reconnu pour déterminer l'efficacité de la vaccination antigrippale, un rôle important de la réponse lymphocytaire T a été démontré dans le contrôle de l'infection. Nos travaux ont permis de mettre en évidence que l'utilisation de vaccins totaux pour le suivi de la réponse lymphocytaire T, par l'introduction de leurs excipients, peut induire un biais dans la détection des cytokines. Le thimérosal, conservateur utilisé dans certains vaccins, provoque in vitro lors de la détection d'interféron (IFN) par Elispot l'apparition de petits spots que nous avons associés a l'activation abortive précoce des LT. Leur taille permet cependant d'éliminer automatiquement du comptage ces spots non spécifiques. Contrairement à l'Elispot dont elle est dérivée, la technique Fluorospot permet l'analyse simultanée de plusieurs cytokines et est donc plus adaptée à la détection des profils de sécrétion et de la fréquence des LT polyfonctionnels, associés à un bon pronostic dans plusieurs pathologies. Nos résultats ont permis la validation technique de ce test pour la détection des couples IFN/interleukine (IL)-10 et IFN/IL-2. Grâce au développement au laboratoire d'une lignée produisant de l'IFN et l'IL-10, nous avons montré que le Fluorospot avait une sensibilité supérieure à la cytométrie intracellulaire pour la détection de l'IFN et de l'IL-10. Il était déjà connu que l'IL-10 était difficilement détectable par cytométrie, renforçant l'intérêt du Fluorospot pour détecter les cellules Tr1. L'utilisation du Fluorospot lors du suivi de la réponse vaccinale antigrippale a également permis de démontrer une équivalence de sensibilité avec l'Elispot. Au cours du suivi de ce protocole anti-grippal, nous avons montré à l'aide du Fluorospot que la réponse LT antigrippale était surtout caractérisée par une forte production d'IL-2 et que la détection isolée d'IFN a une faible sensibilité pour la mesure des réponses LT anti-grippales. Il s'agit de la première utilisation de ce test pour le suivi d'un protocole vaccinal démontrant sa robustesse et sa faisabilité dans un contexte clinique. Nos résultats offrent donc une validation complète de la technique Fluorospot, aussi bien du point de vue technique que clinique, ouvrant des perspectives d'utilisation pour le suivi de futurs protocoles. / The detection of cellular response via its different T cell subpopulations was proved to be crucial to better understand mechanisms of pathologies and monitor protocols of immunotherapy. Unicellular cytokine measurement not only allows the assessment of their inherent role on immunological response, but also the detection of T lymphocytes (LT) secretion profile which gives information on subpopulations involved, their activation state and their functionality. Detection of the cytokine secreting cells frequency is achievable with Elispot. This test is widely used in clinical trials to monitor vaccine response to diseases such as influenza. Although seroprotection is the recognized parameter to assess anti-influenza vaccine efficiency, cellular response has been proved to play an important role in infection control. Our results highlighted that the use of the whole vaccine to monitor T cell response may induce bias in cytokine detection. Indeed, their excipients can be considered as contaminants, like Thimerosal which is used as a preservative in some vaccines. We demonstrated that it induced detection of small spots in interferon (IFN) Elispot. We proved that these spots were associated with in vitro early abortive T cell activation. However, their size enabled us to remove these unspecific spots from bona fide spots.Fluorospot test is suited for multiplex cytokine analysis. Thus it is more adapted than Elispot to detect cytokine secretion profiles and polyfunctional T cells frequency. It is worth noting that polyfunctionnal Tcells are associated with a better clinical outcome in several pathologies. Our results led to technical validation of this test for detection of two cytokines couples, IFN/interleukin (IL)-10 and IFN/IL-2. Fluorospot showed a better sensitivity than intracellular staining cytometry (ICS) in detection of IFN and IL-10 produced by a cell line transfected with the cDNA encoding these cytokines. Moreover, Fluorospot demonstrated a similar sensitivity than Elispot when used to monitor the immunological response to an anti-influenza vaccine. Furthermore, using this technique, we showed that anti-influenza T cell producing IL-2 were the dominant population of T cells. Isolated IFN producing T cells were less sensitive than the detection of IL-2 to detect specific T cell response against influenza. Therefore our results provided a full validation of Fluorospot test, for the technical part as well as for the clinical part. These conclusions open perspectives of using this method to monitor protocols in a near future.

L'électrochimiothérapie est un traitement anticancéreux utilisé en routine en Europe dans près de 130 centres de traitement du cancer. Le taux de réponse objective atteint 85 % pour le traitment de tumeurs cutanées et sous-cutanées et des études sont en cours afin d'appliquer ce traitement à des tumeurs profondes. Au cours de ce doctorat, les méchanismes sous-jacents à cette excellente efficacité antitumorale ont été étudiés. Dans un premier temps, l'objectif a été d'évaluer la capacité de l'électrochimiothérapie à induire la mort des cellules souches cancéreuses, considérées comme les racines du cancer. Ensuite, les mécanismes immunologiques à l'origine du développement d'une immunité antitumorale mise en place par le traitement ont été investigués. Cependant, malgré le haut taux de réponse observé, l'électrochimiothérapie reste un traitement local qui n'induit pas de réponse antitumorale à distance, sur les tumeurs non-traitées. Afin de pallier à cette absence d'activité systémique, une collaboration a été mise en place avec une entreprise innovante de biotechnologies, INVECTYS, dans le but de développer une stratégie de vaccination à ADN ciblant la télomérase et basée sur l'électrogènetransfert. Il est attendu que la combinaison de cette immunothérapie avec un traitement local par électrochimiothérapie, détruise non seulement la tumeur primaire, dont les cellules souches cancéreuses, mais également les cellules cancéreuses circulantes et les métastases. / Electrochemotherapy is an anticancer treatment used in routine in Europe in 130 cancer treatment centers. The objective response rate reaches 85 % for the treatment of cutaneous and subcutaneous tumors and studies are ongoing to spread the use of electrochemotherapy to deep-seated tumors. In the frame of this doctorate, the mechanisms underlying this excellent antitumor efficiency were investigated. First, the goal was to evaluate the ability of electrochemotherapy to induce the death of cancer stem cells, considered as the roots of cancer. Second, the immunological mechanisms responsible for the development of antitumor immune responses following the treatment were investigated. However, although a very high response rate is observed, electrochemotherapy remains a local treatment which does not induce antitumor responses in distant non-treated nodules. In order to circumvent this lack of systemic activity, a collaborative project was initiated with an innovating biotech company, INVECTYS, in order to develop a DNA vaccination strategy targeting the telomerase and based on electrogenetransfer. It is expected that the combination of this immunotherapy with a local treatment by electrochemotherapy could destroy not only the primary tumor, including cancer stem cells, but also circulating cancer cells and metastases.

L’objectif de cette thèse était d’identifier les freins et les leviers aux stratégies d’éradication de la poliomyélite dans les pays en développement puis d’analyser au travers d’un questionnaire les connaissances, attitudes et pratiques vis-à-vis de la vaccination contre la poliomyélite des parents des enfants âgés de 0 à 5 ans au Tchad. Une revue de la littérature a été effectuée en interrogeant la base de données PubMed avec des mots clés et une limitation des articles publiés entre 2010-2015 en anglais et en français pour identifier les freins et les leviers à la vaccination poliomyélite et ensuite une enquête a été mené apures des parents dans ménages de la ville d’Abéché. Les freins le plus cités étaient le refus de la vaccination, l’insécurité et les conflits armés rendant l’accès difficile aux enfants et favorisant la circulation du poliovirus. Beaucoup de pays ont pris de mesures pour améliorer la couverture vaccinale. L’enquête auprès de 210 parents a révélé qu’aucune famille ne possédait de carnet de vaccination de leurs enfants. Cependant, 97% ont déclaré avoir des enfants ayant participé aux campagnes de vaccination de masse. Près de 97 % connaissaient la poliomyélite et 98 % avaient entendu parler des campagnes de vaccination. Ce travail a permis d’identifier plusieurs freins et leviers à l’éradication de la poliomyélite. Au Tchad, les connaissances sur la maladie et le vaccin sont bonnes malgré l’existence de rumeurs concernant notamment les effets secondaires des vaccins. Néanmoins, l’absence de carnet de vaccination a limité l’analyse des résultats de l’enquête, uniquement déclarative avec un taux de vaccination très élevé déclaré. / The aim of this thesis was to identify the brakes and levers for poliomyelitis eradication strategies in developing countries and then to analyze through a questionnaire the knowledge, attitudes and practices vis-à-vis poliomyelitis vaccination for parents of children aged 0-5 in Chad. A review of the literature was conducted by cross-referencing the PubMed database with keywords and a limitation of articles published between 2010-2015 in English and French to identify the barriers and levers to polio vaccination and then a survey to was conducted to relatives in the town of Abeche. The most cited barriers were the refusal of vaccination, insecurity and armed conflict, making access difficult for children and promoting the circulation of poliovirus. Many countries have taken steps to improve immunization coverage. The survey of 210 parents revealed that no family had a vaccination record of their children. However, 97% reported having children who participated in mass vaccination campaigns. Nearly 97% knew about polio and 98% had heard about vaccination campaigns. This work has identified several brakes and levers for the eradication of poliomyelitis. In Chad, knowledge of the disease and the vaccine is good despite rumors about the side effects of vaccines. Nevertheless, the lack of vaccination cards limited the analysis of the results of the survey, only declarative with a very high vaccination rate reported.

Cutaneous leishmaniasis (CL) is usually a self-limiting lesion on the skin while visceral leishmaniasis is a progressive, systemic disease with high mortality even if treated. The problem associated with treatment and vector control justifies a search for an effective vaccine which seems to be the only practical means to control the disease. The aim of this study is to identify immunological surrogate marker(s) associated with protection against Leishmania infection. The results indicate that a single dose of ALM+BCG induced Thl-like response but the level of such response is not sufficient for full protection. Accordingly, further evaluation of the vaccine is necessary other strategies multiple injections or changing the adjutant.

Les vecteurs nanoparticulaires comme systèmes de relargage contrôlé pour des applications vaccinales font l’objet d’intenses recherches, notamment dans le domaine du VIH1. Une approche novatrice consiste à co-administrer des molécules immuno-stimulatrices avec les antigènes d’intérêt, afin d’amplifier le recrutement et l’activation des cellules dendritiques (DCs). Un tel vecteur vaccinal stimulerait l’intensité de la réponse immunitaire et une immunité au niveau des muqueuses vaginales et anales pourrait être obtenue après vaccination. Des nanoparticules de poly(acide lactique) (NP-PLA) ou de chitosane/sulfate de dextrane (NP-CSD) ont été utilisées comme véhicules et adjuvants de protéines du VIH1, gp140 et p24. Le poly(I:C), ligand de TLR3 est la molécule immuno-stimulatrice retenue pour ses propriétés adjuvantes. Les NP-PLA et NP-CSD présentent un potentiel équivalent pour l’adsorption de protéines. Par contre, si les NP-CSD permettent l'adsorption du poly(I:C) (95%), elle est moins reproductible sur les NP-PLA. Pour chaque formulation, la capacité à induire in vitro la maturation des DCs a été évaluée en suivant les marqueurs CD25, CD80, CD83, par cytométrie en flux. L’adsorption de poly(I:C) sur les NP-PLA ou les NP-CSD amplifie les capacités de maturation de ces nanoparticules, un effet synergique étant observé avec les NP-CSD. Nos travaux montrent que la co-adsorption d’un TLR ligand, avec des antigènes protéiques du VIH sur des nanoparticules biodégradables, est possible et confère à la formulation vaccinale un effet immuno-stimulant in vitro. In vivo, les formulations vaccinales contenant du poly(I:C) induisent de très forts taux d’anticorps sériques chez la souris. / Use of nanoparticulate vectors in vaccination as controlled release systems based on biodegradable polymers has been widely studied, particularly for HIV vaccine research. An innovative approach is to co-administer antigens of interest with immuno-stimulatory molecules to amplify the recruitment and activation of dendritic cells (DCs). Such a vaccine candidate could boost the intensity of the immune response, and mucosal immunity in vaginal and anal secretions could be obtained after vaccination.We used nanoparticles of poly(lactic acid) (NP-PLA) or chitosan / dextran sulfate (NP-CSD), as vehicles and adjuvants for HIV-1 proteins, gp140 and p24. Poly (I:C), TLR3 ligand molecule, is the immuno-stimulatory molecule chosen for its adjuvant properties. The NP-PLA and NP-CSD have shown their great potential as carriers of proteins. By cons, if NP-CSD allows the adsorption of poly(I:C) with a yield of 95%, the adsorption is less reproducible on NP-PLA. For each formulation, the ability to induce in vitro maturation of DCs was evaluated by following the marker CD25, CD80, CD83, by flow cytometry. Adsorption of poly(I:C) on the NP-PLA or the NP-CSD amplifies the maturation abilities of particles and has a synergistic effect with the NP-CSD.Our work shows that co-adsorption of a TLR ligand with HIV protein antigens onto biodegradable nanoparticles is possible and gives an immuno-stimulant effect to the vaccine formulation in vitro. In vivo, vaccine formulations containing poly(I:C) induce very high levels of serum antibodies in mice.

La vaccination représente l'un des grands succès des stratégies de santé publique. Cependant, depuis leur introduction, les vaccins ont fait l’objet de controverses. Des polémiques médiatiques ont contribué à ébranler la confiance que les citoyens portent dans la vaccination et les autorités sanitaires. Une communication transparente et fondée sur une démonstration robuste du rapport bénéfice-risque des vaccins est donc nécessaire afin d’éclairer les décisions des autorités de santé et rétablir la confiance du grand public et des professionnels de santé.Les modèles quantitatifs pour l’évaluation du rapport bénéfice-risque (qBRm) sont de plus en plus utilisés par les parties prenantes comme outils d’aide à la décision. Ces modèles fournissent une structure permettant d’incorporer des données provenant de plusieurs sources afin de quantifier et de mettre en perspective les bénéfices et les risques d’une intervention. Cependant, les autorités de santé et les laboratoires pharmaceutiques se préoccupent du manque de cadre explicite et systématique. Des initiatives se développent afin d’optimiser l’évaluation quantitative du rapport bénéfice-risque des produits de santé. Néanmoins, peu d’entre elles sont spécifiques aux vaccins.Au vu de ce contexte, ce travail de recherche avait pour vocation de proposer et de tester de nouveaux outils permettant de structurer l’évaluation quantitative du bénéfice-risque des vaccins afin d’optimiser son utilisation dans l’aide à la décision des différentes parties prenantes.Pour cela, l’objectif de la première partie de ce travail était de synthétiser les données disponibles sur les qBRm appliqués aux vaccins afin de les analyser. L’état de l’art effectué a confirmé que les qBRm étaient de plus en plus utilisés pour aider à l’évaluation du bénéfice-risque des vaccins. Les chiffres montrent une nette augmentation du nombre de publications dans ce domaine depuis le début des années 2000. Un tiers des qBRm identifiés concernait la vaccination contre le rotavirus. Cependant aucune de ces études sur le rotavirus n’avait été développée spécifiquement pour la France. L’analyse des études sélectionnées a mis en évidence des divergences en termes d’approches méthodologiques utilisées et des lacunes concernant la qualité de l’information renseignée dans les études, rendant l’interprétation et la comparaison des modèles complexes.Au cours de la deuxième partie de ce travail nous nous sommes donc attachés à proposer des axes d’amélioration. Tout d’abord nous avons conçu un guide pour améliorer la description des analyses afin d’apporter plus de transparence et de garantir ainsi une meilleure interprétation des résultats sur les qBRm appliqués aux vaccins. Puis, en l’absence d’évaluation quantitative du rapport bénéfice-risque de la vaccination contre le rotavirus en France et compte tenu des interrogations existantes autour de son intérêt, nous avons réalisé un qBRm évaluant la vaccination contre le rotavirus en France. Enfin, nous avons souhaité explorer l’utilisation d’un nouvel outil de modélisation pour le développement de qBRm appliqués aux vaccins : le Discretely Integrated Condition Event (DICE). Le DICE constitue un outil standardisé qui pourrait être utilisé par toutes les parties prenantes. L’application d’une telle interface commune à tous les qBRm pourrait faciliter leur conception, leur analyse et leur comparaison.Cependant, ces axes d’amélioration ne constituent qu’un point de départ des efforts nécessaires à réaliser pour l’évaluation du rapport bénéfice-risque des vaccins. De nouvelles initiatives sont essentielles afin de poursuivre la généralisation des qBRm appliqués aux vaccins, tout en les rendant plus performants et assortis de résultats robustes et transparents. Ces étapes semblent nécessaires pour rétablir la confiance en la vaccination et améliorer les couvertures vaccinales, assurant ainsi une protection optimale des populations face à des maladies infectieuses. / Vaccination is one of the most successful public health achievements in disease prevention. However, since their introduction, vaccines have been relatively contentious. Health controversies have contributed to erode the population’s confidence in vaccination and health authorities. A transparent communication based on a robust demonstration of the benefit-risk assessment (BRA) of vaccines could be therefore necessary to inform decision-makers and restore the public’s confidence.Quantitative benefit-risk models (qBRm) applied on vaccines is an important, and increasingly used, tool to support the BRA from decision-makers. These models provide a structure for incorporating evidence from multiple sources to quantify and put into perspective the benefits and risks of an intervention. However, health authorities and pharmaceutical companies are concerned about the lack of an explicit and systematic framework. While some initiatives that aims at optimising the BRA of health products are emerging, few of them are specific to vaccines. In this context, our research aimed to propose and test new tools to structure qBRm applied on vaccines in order to optimise them use in the decision-making process from different stakeholders. The first part of this work aimed at identifying publications reporting on qBRm for vaccines through a systematic literature review and describing their study characteristics according to specific classification criteria. The analyses confirmed that the number of qBRm of vaccines publications has been increasing since 2000. One-third of the qBRm publications were related to rotavirus vaccination. However, none of these studies on rotavirus vaccination had been performed to specifically address the French context. The analysis of the selected studies revealed divergences in terms of the methodological approaches used and gaps in the granularity of information reported, making complex the interpretation and comparison of the models. In the second part of this research, we therefore endeavoured to propose areas for improvement. To start with, we designed an operational checklist to improve the reporting of qBRm applied on vaccines. Indeed, an adequate reporting is key to ensure a transparent disclosure of the analysis and its reproducibility, thereby facilitating study result interpretation and comparability. Then, to palliate for the absence of qBRm applied on rotavirus vaccination and given the historical context in France, we developed our own qBRm. Finally, we tested a new alternative for designing and structuring qBRm applied on vaccines: the Discretely Integrated Condition Event (DICE) simulation. DICE is a standardised tool that could be used by every stakeholder. The systematic use of such common interface to qBRm could facilitate their design, analysis and comparison. Nevertheless, these areas for improvement are only a starting point, further initiatives are essential to continue the uptake of qBRm applied on vaccines, while making them more efficient, with robust and transparent results. These steps, although not exclusive, seem necessary to enhance public confidence in vaccination and improve vaccine coverage, ensuring as a result an optimal protection of population against infectious diseases.

Hispanic Americans experience a disparate burden of human papillomavirus vaccination (HPV)-related cancers. Despite vaccine availability, HPV vaccine uptake amid Hispanic American adolescent males in the United States is under the national goal. Furthermore, childhood vaccination compliance is driven by the parents; yet, there is little research on parents' perceptions of HPV vaccination of male children. The purpose of this phenomenological study was to explore the attitudes, beliefs, concerns, and decision- making factors of Hispanic American parents of male children aged 11- to 13- years-old surrounding HPV vaccination. The health belief model provided the framework for the study. Face-to-face interviews were conducted with 12 participants in a rural county in Colorado in which Hispanic Americans had a higher rate of reportable sexually transmitted infections than non-Hispanics. Data analysis included descriptive coding to summarize and synthesize the interview results. The results showed Hispanic parents had a positive attitude toward HPV vaccination, and parents believed that the vaccination would protect their child. Most of the parents were aware of the HPV vaccine. The parents believed in healthcare providers and would accept the vaccine if it was recommended by them. Despite several parents having concerns about HPV vaccinations, they still claimed they would vaccinate their child. The findings from the study can be used to inform educational offerings regarding HPV vaccination for Hispanic American boys.

The global rise of anti-vaccination movements has led to serious consequences for the public health such as the recent measles outbreak in the United States. The increased promotion of misleading information on vaccinations by social media influencers as well as by media outlets seems to have resulted into a more negative view on vaccinations. The popularity of these social media influencers and the good reputation and authority of the media outlets could have played a substantial role in these developments. The following experimental study will try to explore whether popularity or authority cues can have an impact on the evaluation of the credibility of these two types of sources via an online survey. Furthermore, it aims to examine whether said heuristic cues and resulting conformity effects or the source credibility in general could have an impact on the opinion of recipients on a potential autism-vaccination link. Results have shown that especially authority cues seem to have a positive impact on source credibility evaluations. Furthermore, a high general trust in the media positively influences assessments of source credibility of well-established news outlets. Popularity cues as well as authority cues seem to have a positive effect on the recipients´ opinion. However, authority cues and the resulting effects of informational conformity seem to lead to greater attitude changes. Particularly people with a high need for conformity exhibit considerable attitude changes when exposed to the well-established news outlet as a source. Also, a high perceived source credibility is positively correlated with a desired attitude change. Especially the high perceived credibility of the social media influencer resulted in significant attitude changes. The results underline the importance and positive impact that a perceived authority can have on source credibility assessments and on recipients’ opinions. This highlights the great necessity for self-proclaimed experts on social media platforms and particularly for well-established news outlets to increase their effort to thoroughly and accurately research health-related topics.