Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Química / Made available in DSpace on 2012-10-26T09:07:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 302353.pdf: 6545449 bytes, checksum: 332ff7705f7abcf0480505045bdf9786 (MD5) / O objetivo do presente estudo foi modificar internamente capilares de sílica fundida com quitosana (QTS) e sal de quitosana quaternizada (SAQQ), além do uso do polímero aniônico ?-carragena e do agente reticulante glutaraldeído empregado na reticulação da QTS e do SAQQ, e explorar algumas de suas aplicações em eletroforese capilar. Os capilares foram revestidos por simples lavagem com solução dos modificadores de interesse, nos quais se observaram diferentes perfis de mobilidade do fluxo eletrosmótico (EOF) em função do pH. A preparação dos revestimentos em diferentes capilares apresentou uma boa reprodutibilidade e o teste de desempenho realizado em meio ácido (pH 2,4) e básico (pH 8,9) mostrou bons resultados de estabilidade dos EOF medidos. Os diferentes revestimentos com QTS reticulada, SAQQ reticulado e ?-carragena, e SAQQ somente lavando o capilar com solução polimérica (sem reticulação), foram aplicados no desenvolvimento de métodos rápidos de separação por eletroforese capilar. Os métodos desenvolvidos incluíram: determinação de nitrato e tiocianato em saliva humana; determinação de iodeto, betaína e metionina em formulações farmacêuticas; e determinação de creatinina, histidina, ácido hipúrico e ácido mandélico em urina. Alguns dos parâmetros analíticos avaliados nos métodos foram linearidade, limites de detecção e quantificação, precisão e seletividade.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Química / Made available in DSpace on 2013-03-04T20:41:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 304097.pdf: 1264975 bytes, checksum: a56d0892da9b2ed92c98f5a649e64982 (MD5) / Os p-hidroxibenzoatos de alquila, ou parabenos, fazem parte de uma classe de compostos com atividade antimicrobiana mais utilizada em todo o mundo. Desde os anos 20 eles são adicionados às formulações. Entretanto, o avanço científico e tecnológico levantou a hipótese destes apresentarem atividade cancerígena, entre outros malefícios. Por isto este trabalho propõe tanto o controle da concentração destes compostos em produtos comerciais (capítulo 1), quanto um maior entendimento da sua ação biológica (capítulo 2). O primeiro capítulo aborda o desenvolvimento de um método simples e rápido por eletroforese capilar para análises de rotina de metil, etil, propil e butilparabeno em produtos comerciais, com preparo simples de amostra. O pH e os constituintes do eletrólito foram selecionados usando curvas de mobilidade efetiva versus pH e simulações com o software Peakmaster®. Ácido cinâmico foi usado como padrão interno. O eletrólito foi composto por 20 mmol L-1 de ácido 2-hidroxiisobutírico (HIBA), 30 mmol L-1 de trietilamina (TEA) e 0,3 mmol L-1 de brometo de hexano-1,6-bis(trimetilamônio) (HMB), pH = 10,6. Os experimentos foram realizados em um equipamento de eletroforese capilar modelo HP 7100 CE equipado com detector UV em 297 nm.. As separações eletroforéticas foram conduzidas em um capilar com 32 cm de comprimento total, 8,5 cm de tamanho efetivo e 50 m de diâmetro interno (d.i.). O tempo de corrida foi cerca de 1 minuto. O método apresenta R2 > 0,99 num intervalo entre ~ 0,5 e 30 mg L-1, limite de detecção de 0,1 mg L-1 e de quantificação 0,3-0,4 mg L-1, exatidão avaliada pela adição interna de padrão e pela técnica de HPLC/MS/MS com aplicação em amostras cosméticas e farmacêuticas diversas. O segundo capítulo desta dissertação é o estudo in vitro da interação dos parabenos com albumina do soro bovino (BSA) e o ácido desoxirribonucléico (DNA), utilizando para ambos a técnica de eletroforese capilar. Foram aplicados dois métodos para os estudos de interação com BSA e cálculos das constantes de associação (Kass): eletroforese capilar de afinidade (ACE), e o método baseado no preenchimento parcial do capilar (PF-ACE). Os experimentos foram realizados em um equipamento de eletroforese capilar modelo HP3D CE com detector UV a 270 nm. As separações foram conduzidas em um capilar de sílica fundida com 32 cm de comprimento total, 8,5cm de tamanho efetivo e 50 m de d.i. As condições eletroforéticas foram escolhidas com base nas condições biológicas: o eletrólito de corrida foi composto por 30 mmol L-1 de fosfato e 50 mmol L-1 de Na+, pH = 7,3, 70 mmol L-1 de força iônica e temperatura do capilar mantida em 36,5ºC. Os resultados qualitativos convergiram em ambos os métodos. Quando estudados simultaneamente, as interações paralelas não apresentaram interferência em cada interação específica. As constantes de associação foram calculadas pelo modelo não-linear e pelo modelo linear do duplo-recíproco, e comparadas. O modelo não-linear demonstrou maior confiabilidade apresentando resultados na ordem de 103 e 104, crescentes com o crescimento da hidrofobicidade dos compostos. O estudo de interação com o DNA, por sua vez, foi realizado apenas para o composto propilparabeno, utilizando-se também dois métodos: PF-ACE e outro, offline, por ultrafiltração. Não foi possível observar interação em nenhum dos métodos empregados. / The alkyl p-hydroxybenzoates or parabens, belong to a class of compounds with antimicrobial activity most used around the world. They have been added to several formulas since 1920. However, the scientific and technological progress opened the possibility of cancer activity and other evils. Therefore, this paper proposes both the control of the concentration of these compounds in commercial products (Chapter 1), and a greater understanding of its biological action (Chapter 2). The first chapter discusses the development of a simple and rapid method by capillary electrophoresis for routine analysis of methyl, ethyl, propyl and butylparaben in commercial products with simple sample preparation. The pH and the background electrolyte (BGE) constituents were selected using effective mobility-versus-pH curves and simulations using PeakmasterR software. Cinnamic acid was used as internal standard. The BGE was composed of 2-hidroxiisobutirico acid 20 mmol L-1, triethylamine 30 mmol L-1 and methyl hexane-1,6-bis(trimethylammonium) 0.3 mmol L-1, pH = 10.6. The experiments were performed on a capillary electrophoresis device model HP 7100 with UV detector at 297 nm. CE separations conducted in a 32 cm long capillary with 8.5 cm effective length and 50 um internal diameter (i.d.). The run time was about 1 minute. The method developed had R2> 0.99 in a range between ~ 0.5 and 30 mg L-1, detection limit of 0.117-0.127 mg L-1 and quantification limit of 0.3- 0.4 mg L-1, accurately assessed by internal standard addition and by LC-MS/MS technique, and application in several cosmetic and pharmaceutical samples. The second chapter of this dissertation is in vitro interaction of parabens study with bovine serum albumin (BSA) and deoxyribonucleic acid (DNA), using both the capillary electrophoresis technique. Were applied two methods for BSA interaction studies and association constants calculation (Kass): affinity capillary electrophoresis (ACE), and the method based on capillary partial filling (PF-ACE). The experiments were performed on a capillary electrophoresis device model HP3D CE with UV detector at 270 nm. The separations were conducted in a 32 cm long fused silica capillary with 8.5 cm effective length and 50 um internal diameter (i.d.) The electrophoretic conditions were chosen based on biological conditions. The BGE composed of phosphate 30 mmol L-1, pH 7.3, ionic strength 70 mmol L-1 and capillary temperature maintained at 36.5 C. The qualitative results in both methods converged. When studied simultaneously, parallel interactions showed no interference in each specific interaction. The association constants were calculated by nonlinear model and by the linear model of the double-reciprocal, and compared. The non-linear model showed a higher reliability results presented in the order of 103 and 104, increasing with the growth of the compounds hydrophobicity. The DNA- interaction study, in turn, was made only for propylparaben, also using two methods: PF-ACE and the other, offline, by ultrafiltration. Interaction was not observed in any methods employed.

Nos últimos dez anos, milhares de trabalhos foram publicados somente no desenvolvimento da técnica de eletroforese capilar (CE) e suas aplicações em ciências biológicas, química e em outras áreas. Apesar disto, muitos tópicos de pesquisa básica da CE ainda continuam sendo desenvolvidos. Algumas vantagens da CE sobre as demais técnicas de separação são marcantes, tais como: possibilidade de automação, rapidez na obtenção dos resultados e alto poder de resolução. A pequena quantidade de amostra que é necessária para uma análise é uma característica muito interessante no estudo de sistemas biológicos, sendo que normalmente são injetados no capilar, volumes de 5 a 50 nl de amostra. Por outro lado, esta reduzida quantidade de amostra utilizada, a pequena janela de detecção e as baixas concentrações dos analitos nas amostras biológicas, são fatores que desafiam os pesquisadores nesta área. Para contornar este problema diversos métodos de pré-concentração de amostra foram desenvolvidos. Neste trabalho, foi desenvolvido um método inédito de pré-concentração de amostras através de gradientes térmicos em CE. O princípio do método é concentrar o analito quando ele passa de uma zona de alta temperatura para uma zona de baixa temperatura. Um modelo teórico foi desenvolvido para auxiliar o planejamento experimental no que diz respeito à determinação das condições em que a corrida deve ser realizada (pH, tipo de tampão, temperatura) para aplicar a compressão térmica em um analito. Foi utilizado L-Lisina derivatizada com naftaleno 2,3-dicarboxialdeído (Lys/NDA) como analito modelo. Uma diferença de temperatura de 58 °C entre as duas zonas térmicas foi suficiente para comprimir em 2,5 vezes a banda da Lys/NDA em um tampão de baixo coeficiente térmico com o pH ajustado para 8,7. O método de compressão de banda por gradientes térmicos proposto neste trabalho é uma nova opção para aumentar a sensibilidade e a resolução em CE. Ao contrário dos métodos clássicos de pré-concentração, esse novo método pode ser aplicado em amostras tanto com alta ou baixa condutividade iônica, comprimir bandas de analitos aniônicos ou catiônicos e ser aplicado em corridas em solução livre ou não. Além disso, considerando que o controle de temperatura seja realizado de maneira automatizada, pode apresentar altas taxas de reprodutibilidade, além de ser de simples e de fácil aplicação, podendo ser empregado em análises de rotina. Diferentes LEDs (Light Emitting Diode) foram testado em detector por fluorescência induzida por LED. Além disso, um novo sistema de aquisição de dados e tratamento de sinal utilizando a placa de som de um PC (Personal Computer) e um amplificador Lock-in emulado por software foi montado e comparado com um sistema de aquisição de dados convencional. O equipamento de CE utilizado neste trabalho com esses componentes, apresentou uma elevada sensibilidade, na faixa de 0,5 à 1 fmol para os peptídeos e aminoácidos testados e foi superior ao sistema convencional em vários aspectos como: sensibilidade de detecção, faixa linear de detecção em concentração do analito, facilidade de operação e custo do sistema.

O presente estudo propõe uma metodologia para caracterizar o comportamento eletroforético e reológico de argilas em meio aquoso para visando ao processamento eletroforético de barbotinas. Para tanto, foram utilizadas seis argilas com características cauliníticas, caulinítica-esmectítica e esmectíticas de diferentes procedências. Foram desenvolvidos três dispositivos que permitiram analisar suspensões aquosas dessas argilas, obtendo-se informações que dizem respeito à corrente elétrica, viscosidade relativa e mobilidade eletroforética de barbotinas em fluxo, além de dispositivos de conformação eletroforética de amostras de argilas. As suspensões de argilas, com e sem adição de silicato de sódio, foram feitas em água deionizada. Foram determinados ainda o potencial zeta, a viscosidade aparente e o índice de azul de metileno dessas suspensões. O principal resultado em destaque, no presente trabalho, foi o comportamento singular da variação da corrente elétrica quando da adição de silicato de sódio às suspensões aquosas de argila. A quantidade relativa de silicato de sódio e argila determinada por essa singularidade levou à realização de experimentos associados à viscosidade e mobilidade eletroforética. Os resultados obtidos para a corrente elétrica, viscosidade relativa e mobilidade eletroforética a partir de experimentos com suspensões aquosas de argila sem e com silicato de sódio foram analisados e correlacionados sob o enfoque do fenômeno eletroforético. A metodologia desenvolvida apresenta as correlações das três propriedades eletroforéticas citadas, além do potencial zeta e índice de azul de metileno (que é uma medida da capacidade de troca catiônica da argila), com as análises das propriedades físicas, como área superficial e distribuição do tamanho de partícula. O método mostrou-se eficaz na interpretação dessas correlações, determinando com precisão o ponto em que a suspensão aquosa de argila atinge sua melhor estabilidade pela adição de silicato de sódio. O conhecimento exato desta estabilidade é de suma importância nos processos de conformação eletroforética de barbotinas. / The present study shows experiments with aqueous suspensions of clays. It was studied six kaolinitics clays from different sources, but mainly a kaolinite-smectite and smectite clay. Three devices have been developed that allowed the analysis of aqueous suspensions of these clays, obtaining information concerning the electrical conductance, viscosity and electrophoretic mobility of the slips in flow. It was also built a device for electrophoretic conformation of pieces. Aqueous suspensions and solution of sodium silicate were made with deionized water. Laboratory tests were also performed of zeta potential, viscosity and methylene blue index. The main result highlighted in this study, was the singular behavior of the variation of the electric current when the addition of sodium silicate to an aqueous suspensions of clay. The relative amounts of sodium silicate and clay determined by of the uniqueness of the performed experiments were associated with viscosity and electrophoretic mobility. The results for the electrical conductance, relative viscosity and electrophoretic mobility from these tests, i.e., experiments with clay aqueous suspensions with and without sodium silicate, were correlated and analyzed under the approach of electrophoretic phenomena. The developed method showed the correlation of these three properties, electrophoresis, zeta potential and methylene blue index, with the physical properties of the clays such as surface area and particle size distribution. Thus, the method was effective in interpreting these correlations, and determining the precise point where the aqueous clay suspension reaches its improved stability by the addition of sodium silicate. Accurate knowledge of this stability is of paramount importance in electrophoretic process and slip casting.

Nos últimos dez anos, milhares de trabalhos foram publicados somente no desenvolvimento da técnica de eletroforese capilar (CE) e suas aplicações em ciências biológicas, química e em outras áreas. Apesar disto, muitos tópicos de pesquisa básica da CE ainda continuam sendo desenvolvidos. Algumas vantagens da CE sobre as demais técnicas de separação são marcantes, tais como: possibilidade de automação, rapidez na obtenção dos resultados e alto poder de resolução. A pequena quantidade de amostra que é necessária para uma análise é uma característica muito interessante no estudo de sistemas biológicos, sendo que normalmente são injetados no capilar, volumes de 5 a 50 nl de amostra. Por outro lado, esta reduzida quantidade de amostra utilizada, a pequena janela de detecção e as baixas concentrações dos analitos nas amostras biológicas, são fatores que desafiam os pesquisadores nesta área. Para contornar este problema diversos métodos de pré-concentração de amostra foram desenvolvidos. Neste trabalho, foi desenvolvido um método inédito de pré-concentração de amostras através de gradientes térmicos em CE. O princípio do método é concentrar o analito quando ele passa de uma zona de alta temperatura para uma zona de baixa temperatura. Um modelo teórico foi desenvolvido para auxiliar o planejamento experimental no que diz respeito à determinação das condições em que a corrida deve ser realizada (pH, tipo de tampão, temperatura) para aplicar a compressão térmica em um analito. Foi utilizado L-Lisina derivatizada com naftaleno 2,3-dicarboxialdeído (Lys/NDA) como analito modelo. Uma diferença de temperatura de 58 °C entre as duas zonas térmicas foi suficiente para comprimir em 2,5 vezes a banda da Lys/NDA em um tampão de baixo coeficiente térmico com o pH ajustado para 8,7. O método de compressão de banda por gradientes térmicos proposto neste trabalho é uma nova opção para aumentar a sensibilidade e a resolução em CE. Ao contrário dos métodos clássicos de pré-concentração, esse novo método pode ser aplicado em amostras tanto com alta ou baixa condutividade iônica, comprimir bandas de analitos aniônicos ou catiônicos e ser aplicado em corridas em solução livre ou não. Além disso, considerando que o controle de temperatura seja realizado de maneira automatizada, pode apresentar altas taxas de reprodutibilidade, além de ser de simples e de fácil aplicação, podendo ser empregado em análises de rotina. Diferentes LEDs (Light Emitting Diode) foram testado em detector por fluorescência induzida por LED. Além disso, um novo sistema de aquisição de dados e tratamento de sinal utilizando a placa de som de um PC (Personal Computer) e um amplificador Lock-in emulado por software foi montado e comparado com um sistema de aquisição de dados convencional. O equipamento de CE utilizado neste trabalho com esses componentes, apresentou uma elevada sensibilidade, na faixa de 0,5 à 1 fmol para os peptídeos e aminoácidos testados e foi superior ao sistema convencional em vários aspectos como: sensibilidade de detecção, faixa linear de detecção em concentração do analito, facilidade de operação e custo do sistema.

O presente estudo propõe uma metodologia para caracterizar o comportamento eletroforético e reológico de argilas em meio aquoso para visando ao processamento eletroforético de barbotinas. Para tanto, foram utilizadas seis argilas com características cauliníticas, caulinítica-esmectítica e esmectíticas de diferentes procedências. Foram desenvolvidos três dispositivos que permitiram analisar suspensões aquosas dessas argilas, obtendo-se informações que dizem respeito à corrente elétrica, viscosidade relativa e mobilidade eletroforética de barbotinas em fluxo, além de dispositivos de conformação eletroforética de amostras de argilas. As suspensões de argilas, com e sem adição de silicato de sódio, foram feitas em água deionizada. Foram determinados ainda o potencial zeta, a viscosidade aparente e o índice de azul de metileno dessas suspensões. O principal resultado em destaque, no presente trabalho, foi o comportamento singular da variação da corrente elétrica quando da adição de silicato de sódio às suspensões aquosas de argila. A quantidade relativa de silicato de sódio e argila determinada por essa singularidade levou à realização de experimentos associados à viscosidade e mobilidade eletroforética. Os resultados obtidos para a corrente elétrica, viscosidade relativa e mobilidade eletroforética a partir de experimentos com suspensões aquosas de argila sem e com silicato de sódio foram analisados e correlacionados sob o enfoque do fenômeno eletroforético. A metodologia desenvolvida apresenta as correlações das três propriedades eletroforéticas citadas, além do potencial zeta e índice de azul de metileno (que é uma medida da capacidade de troca catiônica da argila), com as análises das propriedades físicas, como área superficial e distribuição do tamanho de partícula. O método mostrou-se eficaz na interpretação dessas correlações, determinando com precisão o ponto em que a suspensão aquosa de argila atinge sua melhor estabilidade pela adição de silicato de sódio. O conhecimento exato desta estabilidade é de suma importância nos processos de conformação eletroforética de barbotinas. / The present study shows experiments with aqueous suspensions of clays. It was studied six kaolinitics clays from different sources, but mainly a kaolinite-smectite and smectite clay. Three devices have been developed that allowed the analysis of aqueous suspensions of these clays, obtaining information concerning the electrical conductance, viscosity and electrophoretic mobility of the slips in flow. It was also built a device for electrophoretic conformation of pieces. Aqueous suspensions and solution of sodium silicate were made with deionized water. Laboratory tests were also performed of zeta potential, viscosity and methylene blue index. The main result highlighted in this study, was the singular behavior of the variation of the electric current when the addition of sodium silicate to an aqueous suspensions of clay. The relative amounts of sodium silicate and clay determined by of the uniqueness of the performed experiments were associated with viscosity and electrophoretic mobility. The results for the electrical conductance, relative viscosity and electrophoretic mobility from these tests, i.e., experiments with clay aqueous suspensions with and without sodium silicate, were correlated and analyzed under the approach of electrophoretic phenomena. The developed method showed the correlation of these three properties, electrophoresis, zeta potential and methylene blue index, with the physical properties of the clays such as surface area and particle size distribution. Thus, the method was effective in interpreting these correlations, and determining the precise point where the aqueous clay suspension reaches its improved stability by the addition of sodium silicate. Accurate knowledge of this stability is of paramount importance in electrophoretic process and slip casting.

Orientadores: Tomomasa Yano, Valdemar Atilio Malavolta Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T03:21:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Prestes_ElizabethBiagioni_M.pdf: 3440718 bytes, checksum: 96e33c9c33d6651a4c83a7b6c9f3ae39 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Este estudo objetivou a caracterização ou a confirmação do patovar de diversos isolados bacterianos patogênicos ao pepino, incorporados à Coleção de Culturas da Seção de Bacteriologia Fitopatológica do Instituto Biológico (IBSBF) e caracterizados como Pseudomonas syringae pv. lachrymans, P. s. pv. syringae, P. s. pv. tabaci, ou, então, apenas a nível genérico. Essa caracterização foi feita por testes bioquímicos, culturais, sorológicos e eletroforéticos. Os resultados mostraram que apenas a utilização de testes bioquímicos e culturais podem ser insuficientes para a caracterização de patovares de bactérias patogênicas ao pepino, devido à variabilidade natural ocorrida entre os diferentes isolados. O emprego de reações sorológicas de dupla difusão em ágar com antígeno autoclavado e a eletroforese de proteínas totais em gel de poliacrilamida PAGE/SDS não permitiram, também, a diferenciação a nível de patovar entre os isolados empregados neste estudo. Os dados obtidos revelaram, ainda, que alguns isolados bacterianos possuem características que não permitem enquadrá-los em nenhum dos patovares de Pseudomonas syringae patogênicos ao pepino. Os resultados mostraram também que o isolado 1258, que é a estirpe tipo do patovar lachrymans, possui características que diferem da descrição desse patovar, mostrando a necessidade de se redefinir uma outra estirpe como neopatotipo de Pseudomonas syringae pv. lachrymans / Abstract: The objective of this study was the characterization or the confirmation of the pathovar of several bacterial isolates from cucumber that were incorporated in the Coleção de Culturas da Seção de Bacteriologia Fitopatológica do Instituto Biológico (IBSBF) and characterized as Pseudomonas syringae pv. lachrymans, P. s. pv. syringae, P. s. pv. tabaci or simply as Pseudomonas sp. This characterization was made by biochemical, cultural, serological and electrophoretical tests. The results showed that only biochemical and cultural tests can be insufficient for the characterization of the pathovars of cucumber pathogenic bacteria because of its natural variability. The utilization of serological tests with agar double diffusion with heat-treated cells and the electrophoresis by PAGE/SDS with total proteins were not sufficient for the differentiation among the isolates tested in this study. It was observed that some isolates have distinct characteristics of the pathovars of Pseudomonas syringae pathogenic to cucumber. It was also possible to verify that the isolate 1258, the representative strain for the pathovar lachrymans, has different characteristics from the description of this pathovar, confirming the necessity of a redefinition of another strain as neopathotype for Pseudomonas syringae pv. lachrymans / Mestrado / Microbiologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Rita Maria Pereira Avancini / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T04:16:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tirone_Guido_D.pdf: 3993498 bytes, checksum: 6a37e8c5bcf65110ababa187bb0988f5 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: A grande maioria das espécies de dípteros muscóideos cria-se em fezes de vertebrados, carcaças e outros tipos de matéria orgânica em decomposição. Algumas espécies também frequentam o ambiente doméstico e por isto têm importância sanitária para o homem e animais domésticos. Ainda, umas poucas espécies podem causar miíases. O aparelho reprodutor interno das fêmeas possui dois ovários, três espermatecas, oviduto comum e laterais, vagina e um par de glândulas sexuais acessórias. A secreção das glândulas sexuais acessórias dos insetos, de modo geral, tem o papel de adesão dos ovos ao substrato escolhido pela fêmea para oviposição. Outras funções fisiológicas estão sendo descritas para esta secreção, como a fragmentação da membrana acrossomal e da capa micropilar. A função da secreção mais recentemente descrita, é sua ação antibacteriana. As proteínas presentes na secreção das glândulas sexuais acessórias de cinco espécies de moscas, Chrysomya putoria (Calliphoridae), Chrysomya megacephala (Calliphoridae), Muscina stabulans (Muscidae), Synthesiomya nudiseta (Muscidae) e Pattonella intermutans (Sarcophagidae) foram investigadas neste estudo. Determinamos em que quantidade as proteínas estão presentes na secreção das glândulas de cada espécie das famílias Calliphoridae e Muscidae, bem como a sua massa molecular aparente através de eletroforese em gel de SDS-poliacrilamida. O perfil eletroforético variou entre as espécies bem com a massa molecular aparente das proteínas. Em C. putoria a massa molecular aparente variou de 16,5 a 77,5 kDa, em C. megacephala de 15,8 a 79,5 kDa, em M. stabulans de 19,5 a 155,5 kDa, em S. nudiseta de 14,7 a 82,3 kDa e em P. intermutans de 8,5 a 99,4 kDa. Algumas proteínas são comuns às espécies pertencentes à mesma família, outras são características de cada espécie. Algumas proteínas dos Calliphoridae e Muscidae são glicosiladas. A secreção das glândulas sexuais acessórias de C. putoria e S. nudiseta inibiu o crescimento de colônias de Escherichia colí K 12. Dois tipos celulares compõem as glândulas sexuais acessórias de C. putoria: células secretoras e epiteliais, o que não difere de alguns outros dípteros. A célula secretora possui uma grande invaginação, formando um reservatório que armazena a secreção produzida. Estas características foram observadas em nível ultra-estrutural / Abstract: Most species of dipteran Muscoidea breed in vertebrate feces and carcasses, as well as in other decomposing organic material. Several of these species occur around human dwetlings where they represent an important sanitary problem for man and domestic animais and may, in some cases, cause myiasis. The interna I reproductive system of female flies consist of two ovaries, three spermatheca, common and lateral oviducts, a vagina and a pair of accessory sex glands. The secrettons of insect accessory sex glands are important in the adhesion of eggs to the surface chosen for oviposition, as well as in the fragmentation of the acrosomal membrane and the egg micropylar cap; the secretions may also have antibacterial activity. In this work, we investigated the quantities and molecular weights (by SDSPAGE) of the proteins present in the accessory sex glands secretions of five species of flies: Chrysomya putoria (Calliphoridae), Chrysomya megacephala (Calliphoridae), Muscina stabulans (Muscidae ), Synthesiomya nudiseta (Muscidae) and Pattonella intermutans (Sarcophagidae). The number of electrophoretic bands and molecular masses for proteins in the secretion of accessory sex glands of these flies were: C. putoria - 16.5 - 77.5 kDa, C. megacephala - 15.8 - 79.5 kDa, M. stabulans - 19.5 - 155,5 kDa, S. nudiseta 14.7 - 82,3 and P. intermutans - 8.5 - 99.4 kDa. Some of these proteins were common to species belonging to the same family whereas others were characteristic of a particular species. Several of the proteins were glycosilated. The secretion of accessory sex glands of C. putoria and S. nudiseta had antibacterial activity as shown by their ability to inhibit Escherichia colí K12 growth. Ultrastructural examination of the accessory sex glands of C. putoria showed that, in common with other dipterans, this gland has secretory cells and epithelial cells, with the reservoir of secretory cells storing the gland's secretions / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Cesar Francisco Ciacco / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-26T10:50:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Francischi_MarciadeLourdesPereirade_D.pdf: 41883011 bytes, checksum: dd0b40eda0f7e0bd13e6ae2cc009e8cb (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: O trigo duro (Triticum durum L.) tem sido usado na maioria dos países como a matéria-prima adequada para a elaboração de pastas alimentícias pois confere ao produto propriedades reológicas adequadas para o processo de extrusão e quando são submetidos ao cozimento, apresentam boas características de elasticidade, sendo resistentes à desintegração e à pegajosidade, retendo a textura firme. Essa característica do trigo duro, entretanto, está subordinada às condições de cultivo e fatores genéticos. Este trabalho teve como objetivo investigar as características tecnológicas de dez genótipos de trigo duro resultantes de germoplasmas provenientes do CIMMYT (Centro Internacional de Mejoramiento de Maiz y Trígo), México, introduzidos no Brasil pelo Instituto Agronômico de Campinas (LAC.). Esses genótipos foram cultivados, sob irrigação por aspersão, em solos corrigidos com calagem. Os dez genótipos foram avaliados em comparação com uma amostra comercial de trigo duro canadense (CWAD). Em uma primeira abordagem, realizou-se a caracterização fisico-química dos grãos através da determinação de peso hectolitro (kgIhL), dureza (kgm), vitreosidade e testes de sedimentação com dodecil sulfato de sódio (SDS). Além disso determinou-se a composição centesimal aproximada. Os resultados obtidos mostraram que para o peso hectolitro todos os genótipos superaram o valor de 80 kgIhL, considerado minimo para a classificação dos grãos de trigo duro canadense como grau n° 1; que a amostra comercial de trigo duro canadense (CWAD) obteve o menor valor para a dureza, enquanto que os genótipos 1, 2, 4, 7, 8 e 9 se destacaram; para a vitreosidade todos os genótipos apresentaram resultados acima de 750/0,com exceção do 11 (CWAD); para os testes de sedimentação os genótipos 4 e 7 apresentaram os menores volumes de sedimento, tanto pela metodologia AXFORD et al., (1978) quanto pela metodologia proposta pela AAC.C. (1995). Em relação à composição centesimal, os resultados mostraram que os maiores valores para proteínas foram os dos genótipos 7 (14,64%) e 8 (14,50%), enquanto que o 11 (CWAD) foi o menor (12,56%). O conteúdo de cinzas (1,43% a 1,88%) e o de lipídios (3,24 a 4,04%) foram semelhantes aos dados da literatura para trigos duros ¿Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital. / Abstract: Dunun wheat (Triticum durum L) has been used in most countries as the best raw material for pasta production due to its suitable rheological properties for extrusion. Pasta from durum wheat when submitted to cooking also shows good characteristics of elasticity being resistant to disintegration and stickiness, while keeping firm texture. However, this characteristic of durum wheat is dependent on agronomic practices and genetic factors. The purpose of this study was to investigate the technological characteristics of ten Brazilian durum wheats genotypes, imported from CIMMYT (Centro Internacional de Mejoramiento de Maiz y Trigo), México, and propagated in Brazil by the Agronomic Institute of Campinas. These genotypes were cultivated, under sprinkler irrigation, in acid-corrected soils. The ten genotypes were evaluated in relation to a commercial sample of Canadian wheat amber durum (CWAD). As a first approach, a physical-chemical evaluation of the grain was made by the determination of its density (kg/hL), hardness (kgm), vitreousness and sedimentation tests with sodium dodecylsulfate (SDS). The chemical compositionswere also determined Resuits showed that alI genotypes exceeded the density value of 80 kg/hL, considered as a minimum for grade n° 1 according to the Canadian system of durum wheat; that the commercial sample of Canadian wheat amber durum (CWAD) got the lowest value for hardness, while genotypes 1, 2, 4, 7, 8 e 9 had the highest hardness values; al1 genotypes reached results above 75% for vitreouness, except for sample 11 (CWAD); genotypes 4 and 7 showed the lowest sediment volume either by the AXFORD et al. (1978) methodology or by the methodology proposed by AAC.C. (1995). In relation to the chemical composition, the results showed that the highest values for proteins were found for genotypes 7 (14,64) and 8 (14,50%), while 11 (CWAD) had the lowest content (12,56%). The ash (1,43 to 1,88%) and lipids (3,24 to 4,04%) contents were similar to those found in the literature ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations. / Doutorado / Doutor em Ciência da Nutrição

Orientador: Jose Francisco Hofling / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-27T17:42:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_CristinaCrespo_M.pdf: 1894181 bytes, checksum: a8c2297f706d149ed6be72ca9fbb524f (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Amostras de Cândida álbicans isoladas da cavidade oral e de diferentes sítios anatômicos de humanos, foram estudadas. O propósito da presente pesquisa foi analisar os graus de similaridade entre esses isolados, através da técnica de eletroforese de proteínas totais em gel de poliacrilamida, em sistema descontínuo (SDS-PAGE). As amostras foram inoculadas em 50 mL de meio de cultura YPD. Decorrido o tempo de inoculação, as amostras foram centrifugadas a 3000 x g, por 5 minutos e os sedimentos obtidos foram ressuspensos em água destilada gelada, lavados e fracionados em alíquotas de 0,5 mL, os quais foram submetidos ao processo de extração de proteínas por nitrogênio líquido. Os extratos celulares foram submetidos à técnica de SDS-PAGE e após a corrida eletroforética os géis foram revelados e as bandas proteicas foram submetidas a análise computacional no pacote estatístico NTSYS-pc 1.70 empregando-se o programa QUALITATTVE e o coeficiente de similaridade &M(Simple Matching Coefficient). Essas matrizes de similaridade foram tratadas pelo algoritmo UPGMA, a qual gerou os dendrogramas que possibilitaram as análises dos graus de similaridade existentes entre os isolados de C. albicans. A análise dos perfis eletroforéticos de extratos proteicos de isolados de C. albicans da cavidade bucal e outros sítios anatômicos de humanos, originou diversos dendrogramas, o qual permitiu o agrupamento dos isolados em grupos representativos da espécie. As amostras de C. albicans, de um mesmo sítio anatômico, quando comparadas, apresentaram valores de similaridade acima de 80% (Ssm = 0,800), os quais suportam o agrupamento dentro de uma mesma espécie. As amostras de C. albicans em conjunto, envolvendo a linhagem-tipo CBS-562, juntamente com as 14 amostras analisadas (uma de cada sítio anatômico) escolhidas aleatoriamente, apresentaram um alto grau de coeficiente de similaridade, quando comparadas. A composição dos "clusters" presentes nos dendrogramas resultantes da análise dos perfis proteicos das diversas amostras analisadas, independeram dos fatores estudados, como sítios anatômicos e indivíduos / Abstract: Samples of Candida albicans isolated from the human oral cavities and other anatomic sites, were studied. The purpose of the present research was to study the degree of similarity among these isolates through the whole-cell polyacrylamide gel electrophoresis technique (SDS-PAGE). The samples were inoculated in YPD culture medium, and after the incubation, they were centrifuged at 3,000 x g for 5 minutes, with the sediments were washed in cold distilled water and whole-cell proteins were extracted in liquid nitrogen. The cell extracts were submitted to SDS-PAGE technique and after the electrophoresis, the gels were revealed and the protein bands were submitted to computacional analysis on the NTSYS-pc 1.70 version statistical package applying the coefficient similarity SM (Simple Matching Coefficient). Those similarity matrices were treated by the UPGMA algorithm, allowing the analyses of similarity levels among C. albicans isolates by dendrograms. The eiectrophoretic analysis of the C. albicans proteins extracts isolated from oral cavities and others human anatomies sites, allowed the construction of dendrograms including clustering of isolates in representatives groups of species. Samples of C. albicans species of the same anatomic site showed similarity values up 80% (SSm = 0,800) supporting the species grouping. Whole sample of these organisms (all anatomic sites) selected randomly including the type-strain CBS-562 showed high similarity. The clusters composition expressed by the dendrograms of all the sample were not dependent of factor as: anatomic sites and studied persons / Mestrado / Mestre em Biologia e Patologia Buco-Dental