Orientadores : Lucia Pereira da Silva, Denise Vaz de Macedo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T15:07:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Molnar_AgnesMargareth_M.pdf: 4798652 bytes, checksum: 67ad1ea63c1a6563c6eed7cd225d2319 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: O BN-Page ("Blue Native Polyacrylamide gel electrophoresis") é uma técnica desenvolvida para análise de proteínas de membrana. Associada à coloração histoquímica, essa técnica permite análise e caracterização dos complexos enzimáticos da cadeia de transporte de elétrons. A grande vantagem dessa técnica é a utilização de uma pequena quantidade de tecido (30mg) permitindo análise das atividades das enzimas acima especificadas, sem a necessidade do isolamento de mitocôndrias. Dessa forma, esse método pode ser utilizado no estudo de diversas alterações que podem ser induzidas por condições especiais, dentre as quais: o exercício físico, a DPOC e doenças que afetam a função mitocondrial (Parkinson, Alzheimer etc). O objetivo desse trabalho foi a padronização da técnica de BN-Page associada à coloração histoquímica específica dos complexos I e IV da cadeia de transporte de elétrons em músculo esquelético de rato. Os músculos utilizados foram o sóleo, o gastrocnêmio (porção vermelha e branca) e o semitendinoso. A atividade das enzimas foi medida através de densitometria óptica usando a banda referente ao complexo V isolado por eletroforese e corado com Coomassie Blue como padrão interno. Nossos resultados indicaram uma boa resolução dos géis e uma correlação ótima entre a atividade da enzima citrato sintas e (conhecida como marcador de quantidade de mitocôndria) e a área/intensidade da banda referente ao complexo V, indicando que essa também pode ser utilizada como marcador de conteúdo mitocondrial. A atividade do complexo I e IV dos músculos mais oxidativos (sóleo e gastrocnêmio vermelho) apresentou uma variação bem pequena e uma correlação linear com a área do complexo V. Já nos músculos mais glicolíticos houve maior variação na atividade de ambos complexos e sua correlação com o complexo V foi menor / Abstract: BN-PAGE (Blue Native Polyacrylamide gel electrophoresis) is a technique developed for the analysis of membrane proteins. This technique added to the histochemical staining enables the analysis and characterization of the activity of the enzymatic complexes of the mitochondrial electron transport chain. A key advantage of this technique is the small quantity of tissue required (30 mg) for homogenate extraction, allowing the use of this analysis for tissues from different species, inc1uding humano This method can be used for protein defects characterization in mitochondrial myopaties such as Leber's disease, Parkinson and A1zheimer diseases among other pathologies such as COPD (chronic obstructive pulmonary disease) and biochemical adaptations induced by physical exercise. The aim of this work was the standardization of this technique using histochemical staining for Complexes I and N of the eletron-transport chain in four rat skeletal musdes (soleus, red and white gastrocnemius and semitendinosus). The enzyme activity was measured by optical density (Image master lD - Pharmacia Biotech) using the Blue stained complex V area obtained from BN-Page as an internal standard. Its good resolution and the good correlation between its areajintensity and citrate synthase activity indicates that complex V is a good quantitative marker of mithocondrial contento The activity of complex I and N of oxidative musc1es (soleus and red gastrocnemius) presented a narrow range of values and a dose linear correlation wtih complex V. On the other hand, the glycolytic musdes (white gastrocnemius and semitendinosus) presented a wide range in their enzyme activity of both complexes and had a little correlation / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador : Jose Camillo Novello / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T23:24:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Smolka_MarcusBustamante_D.pdf: 13169476 bytes, checksum: 534084d55f017b34ca272ac8bba62a9e (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A bactéria Xy/ella fastidiosa é responsável por várias doenças de plantas economicamente importantes, incluindo a clorose variegada do citros (CVC). Apesar de seu genoma já estar completamente sequenciado, os estudos das proteínas expressas pela bactéria são quase inexistentes. Na presente tese, foi utilizada a eletroforese de duas dimensões em combinação com a espectrometria de massas para identificar os produtos de 142 diferentes genes da X. fastidiosa, incluindo proteínas secretadas e as relacionadas com adesão, que apresentam particular interesse para o estudo da patogenicidade. Análise comparativa do perfil protéico da bactéria crescida como colônias isoladas em meio sólido de cultura com o da bactéria formando biofilme em meio líquido de cultura indicou a expressão específica de uma cisteíno protease, uma lipase e uma isoforma da subunidade da fímbria do tipo IV na condição de formação de biofilme. Análise do índice de uso de códons específicos ("codon bias") das proteínas mais expressas no extrato celular total revelou uma distribuição de valores inesperadamente baixa, o que é proposto como sendo possível causa da natureza fastidiosa da X. fastidiosa. Um banco de dados disponibilizando as informações geradas foi construído e pode ser acessado pela intemet: URL: www.proteome.ibLunicamp.br. Os resultados representam um esforço inicial para a caracterização da expressão de proteínas na X. fastidiosa e devem ajudar a promover um maior entendimento dos mecanismos de sobrevivência, adesão e secreção, bem como viabilizar subsequentes estudos de análise diferencial do proteoma da X. fastidiosa em diversos modelos experimentais. Na segunda parte da tese é mostrado um novo método para análise quantitativa de proteomas por espectrometria de massas. A estratégia proposta se baseia em marcar duas amostras a serem comparadas com diferentes formas isotópicas do reagente ICA T ("Isotope Coded Afinity Tags"), comigrá-Ias num único gel 2DE e identificar e quantificar as proteínas por espectrometria de massas. Os resultados mostram que proteínas rotuladas com as formas isotopicamente pesada e normal do reagente ICA T comigram na mesma posição em géis 2DE. Quando as proteínas são subsequentemente digeridas e analisadas por espectrometria de massas, a razão da abundância relativa das proteínas em cada amostra pode ser determinada precisamente, baseando-se nas intensidades relativas do sinal espectro métrico dos peptídios contendo as diferenças isotópicas. Utilizando esta estratégia, foi possível realizar quantificações com precisão melhor que 20 % / Abstract: The bacteria Xy/ella fastidiosa is the causative agent of a number of economically important crop diseases, including citrus variegated chlorosis (CVC). Although its complete genome is already sequenced, X. fastidiosa is poorly characterized by biochemical approaches at the protein level. In the present work it was used two dimensional electrophoresis in combination with mass spectrometry to identify the products of 142 different X. fastidiosa genes, including secreted and adhesion related proteins that show particular interest for the study of pathogenesis. Comparative proteome analysis of the bacteria grown as isolated colonies on a solid culture medium and the bacteria forming biofilm on a liquid culture medium indicated the specific expression of a cysteine protease, a lipase and an isoform of the type IV fimbriae subunit in the biofilm forming condition. A codon usage analysis of the most expressed proteins from the whole cell extract revealed a low biased distribution, which we propose to be related with the slow growing nature of X. fastidiosa. A database of the X. fastidiosa proteome was developed and can be accessed via the intemet (URL: www.proteome.ibLunicamp.br). The results represent an initial effort to characterize protein expression in X. fastidiosa and should contribute for a better understanding of the survival, adhesion and secretion mechanisms. It also provides the basis for subsequent differential proteome analysis on various experimental models. The second part of the thesis presents a new method for quantitative proteome analysis using mass spectrometry. The proposed strategy is based on labelling two different samples to be compared with the different istopic forms of the ICA T (Isotope Coded Afinity Tags) reagent, combine and comigrate them in a single 2DE gel and identify and quantify the proteins by mass spectrometry. It is shown that proteins labeled with the isotopically heavy and normal forms of the reagent co-migrate in 2DE gels and that the ratio of protein abundance can be accurately determined from the rein active mass spectrometric signal intensities of the heavy and normal forms of labeled, cysteine containing peptides. 80th identification and accurate quantification (better than 20 %) are therefore achieved in a simple single-step analysis / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Clarice Weis Arns / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-25T00:16:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Castro_TerezinhaAparecidaMartinsGomesde_D.pdf: 3942349 bytes, checksum: 197c32f0bac44952abb9c2999cf2dd2b (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O pneumovirus aviário (PVA) causa infecção aguda no trato respiratório em perus (rinotraqueite de perus) e galinhas (síndrome da cabeça inchada) com início abrupto e disseminação. No presente trabalho foram estudados dois isolados de PVA: SHS BR-119 e SHS BR-12l quanto a morfologia, sorología, cultivo em anel de traqueal, inoculação experimental em aves SPF, propriedades físico-químicas e perfil eletroforético em PAGESDS frente a quatro isolados de PVA de diferentes origens. Inicialmente, todos os isolados de PVA foram inoculados e adaptados em culturas de células CER para produção de antígenos, que resultou em títulos virais variando de 105,5 a 106,5 TCID50/ml. Em cultivo de aneal traqueal observou-se ciliostase na segunda passagem apenas em uma das amostras virais analisadas. O estudo físico-químico demonstrou que os isolados brasileiros tratam-se de vírus RNA envelopados, termolábeis e sem atividade hemaglutinante e de hemadsorção. As observações morfológicas à microscopia eletrônica demonstraram ser um vírus pleomórfico e espiculado. O perfil eletroforético em PAGE-SDS demonstrou uma composição similar dos polipeptídeos virais entre as diferentes amostras estudadas. Os antissoros produzidos a partir dos vírus purifícados foram utilizados no teste de soroneutralização cruzada. Os resultados deste ensaio mostraram que as duas cepas virais brasileiras cruzam com as outras cepas estudadas, confírmando a ocorrência de semelhanças antigênicas amplamente descritas na literatura internacional. O resultado do estudo sorológico do PVA em aves matrizes mostrou que das 901 amostras de soro analisadas através dos testes de ELISA e soroneutralização, ambos os testes demonstraram uma positividade anti-SHS BR119 (67% e 66,5% respectivamente). Também foram analisadas 724 amostras de soro de frangos de corte através dos testes de ELISA e SN com positividade de 2,9% e 5,1%, respectivamente / Abstract: Avian Pneumovirus (APV) causes an acute respiratory tract infection both in turkeys (turkey rhinotracheitis) and chicken (swollen head syndrome) with sudden onset and rapid spread through the flocks. In this work were characterized two types of avian pneumovirus from brazilian chicken by electron microscopy, serological analysis (serum neutralization and ELISA tests), physico-chemical properties (thermostability, chloroform sensitivity, effect of IUDR and pH, haemagglutination and haemodsortion tests) and compared its polypeptide composition with four other avian pneumoviruses using SDSP AGE. AlI isolates from APV were propagated in cells cultures of CER for antigens production with titre varying from 105.5 to 106.5 TCID50/ml. Only one isolated showed ciliostasis after the second passage. The physico-chemical tests and morphological observation showed that brasilian' s isolates are pleomorphic RNA viruses, spicular, enveloped, thermolabile and not haemagglutinating. The SDS-PAGE profile of the viruses were very similar. Virus neutralisation tests revealed non reaction of the two brazilian isolates with the other different isolates. Nine hundred one serum samples of breeders and seven hundred twenty four serum samples of broilers were analysed using the serological tests of serum neutralization (SN) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and both tests showed serum positivity, respectively, 66.5 and 67% to breeders and 5.1 and 2.9 to broilers. In the experimental inoculation of SPF birds with two brazilian isolates and one germany isolated observed serological conversion after the first inoculation / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Ciências

Orientador: Sergio Roberto Peres Line / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-04T07:06:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Saito_CristianePereiraBorges_M.pdf: 564825 bytes, checksum: 5269d44f821d1f56b82c7e9a9767304d (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A ausência congênita de um ou mais dentes, denominada agenesia dentária ou hipodontia, figura entre as anomalias mais bem reconhecidas em humanos, porém de etiologia ainda desconhecida. Os dentes permanentes mais comumente ausentes são: terceiros molares, segundos pré-molares e incisivos laterais superiores. A hipodontia não representa um sério problema de saúde pública, mas pode causar disfunções mastigatórias e da fala, bem como problemas estéticos. O gene MSX1 tem um papel crítico no desenvolvimento crânio-facial, como já foi observado em experimentos de expressão em fenótipos de ratos transgênicos. Com isso, mutações no gene homeobox humano MSX1 podem ser responsáveis por alguns tipos de hipodontia ou agenesia dentária em humanos. O objetivo do presente estudo foi correlacionar polimorfismos no gene MSX1 com a agenesia dentária ou hipodontia em indivíduos da espécie humana. Foram coletadas amostras de 200 pacientes ¿ 100 pacientes sem agenesia e 100 pacientes com agenesia de incisivos, pré-molares e/ou terceiros molares permanentes. Para ambos os grupos (controle e agenesia), 4 alelos foram encontrados: 169, 171, 173 e 175, utilizando-se eletroforese em gel desnaturante para a separação dos alelos de interesse. O alelo 169 foi o mais prevalente em ambos os grupos e pacientes portadores do genótipo 169-169 têm 1,85 mais chance de desenvolver agenesia, segundo a análise de odds-ratio (OR=1,85; 95% CI= 1,03 ¿ 3,32; p=0,05). Pacientes não portadores do alelo 175 possuem maior chance (p=0,04) de desenvolver esta alteração (OR= 2,12; 95% CI=1,05¿4,26) / Abstract: Congenital agenesis of one or more permanent teeth, also known as hypodontia, is among the most well-recognized morphologic anomalies in humans, and yet the etiology is largely unknown. The most common permanent missing teeth are the third molars, second premolars and maxillary lateral incisors. Hypodontia does not represent a serious public health problem, but it may cause masticatory and speech dysfunctions and esthetic problems. MSX1 has a critical role in craniofacial development, as indicated by expression assays and transgenic mouse phenotypes. Thus, mutations in the homeobox of human MSX1 must be responsibles for some instances of tooth agenesis in humans. DNA was extracted from oral epithelial cells of 100 control individuals and 100 individuals with tooth agenesis. PCR (polymerase chain reaction) and denaturing gel electrophoresis were employed in the investigation of four alleles: 169,171,173 and 175 (corresponding to their respective size in base numbers). The shortest allele, 169, was the most prevalent in both groups. In this work, patients who presented the 169-169 genotype had a 1.85 higher risk to develop hypodontia (OR=1.85; 95% CI= 1.03 ¿ 3.32; p=0.05). Patients who did not showed the 175 allele had higher risk to develop hypodontia (p=0.04), (OR= 2,12; 95% CI=1,05¿4,26) suggesting an important role for this polymorphism in the etiology of tooth agenesis / Mestrado / Morfologia / Mestre em Biologia Buco-Dental

Orientador: Lourival Carmo Monaco / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T17:52:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pires_CesarioLangedaSilva_M.pdf: 4614774 bytes, checksum: dc31db7ca2543960b24d9bbaf5aa8bb5 (MD5) Previous issue date: 1983 / Resumo: Alfa esterase e beta esterase foram estudadas em plântulas no estádio "orelha de onça" de 20 populações de E.grandis (19 australianas e 1 brasileira) e 2 de E. saligna (1 australiana e 1 brasileira) em gel de amido. Foi testado o estudo de 11 sistemas enzimáticos para a determinação das diferenças genéticas dos 22 tratamentos. Inicialmente foram escolhidos como os de melhor resolução a leucina aminopeptidase, alfa esterase, beta esterase e fosfatase ácida. Porém pela perfeição da resolução obtida, só foram estudadas as frequências de 3 possíveis locos de alfa esterase e 3 de beta esterase, os quais forneceram informações suficientes apenas para a identificação da população G1l, da S1 e de um grupo formado por todas as outras populações. As diferenças pequenas, entre as populações sugerem uma apreciação recente. Os dados sugerem que a população brasileira de E. Saligna se afastou mais da espécie tipo do que E. grandis (de sua espécie tipo). Uma das possíveis causas seria a maior facilidade de cruzamento dentro do subgênero. O isolamento das populações do planalto de Atherton determinou distâncias genéticas entre si maiores do que a distância entre as populações do planalto e as do sul. As distâncias entre as populações estudadas e situadas ao sul do planalto, foram bem menores. Das populações do planalto destaca-se a de E de Mareeba com frequência de alelos bem distinta. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Alfa esterase and beta esterase were studied in seedlings (before the emergency of the first nomophyllous leaves and possessing on1y the pair of cotyledonary 1eaves) of 20 E. grandis populations (19 from Australia and 1 from Brazil) and 2 E. saligna (1 from Australia and 1 from Brazil), using the horizontal electrophoresis technique in Connaught starch gel. Eleven enzymatic systems were tested to determine the genetic differences among the 22 populations. Leucine aminopeptidase, alfa esterase, beta esterase and acid phosphatase had reasonable good resolution. Because the perfection of the resolution, on1y the frequency of 3 possible alfa esterase loci and 3 possible beta esterase loci were studied which gave not sufficient information to permit a proper identification of different populations. It was possib1e to identify the population G11, from the S1 and from a group formed by the other populations. The small differences among the populations suggest a recent speciation. The data suggest that the Brasilian population of E. saligna is genetically more distant from the tipical species than E. grandis from its species. The possible reason is that E. saligna cross more easily with the other species of the subgenus. The isolation of the populations at the Atherton table-land determined genetic distances among them greater than the distance between the Atherton populations and the southern ones. The distance among the southern populations were smaller. The population of Mareeba presented a distinct allele frequency. ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Luiz Gonzaga Santoro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-18T08:47:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Chagas_ElianaPereira_M.pdf: 10551524 bytes, checksum: ad805eaf5ab8d6369340586c89502e6a (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: Sementes de Phaseolus vulgaris de 3 cultivares (Aeté-3, Goiano precoce e Carioca) foram analisadas sob diferentes aspectos: concentração das diferentes frações proteicas de albuminas e de globulinas, padrões eletroforéticos, composição de aminoácidos, avaliação do pI das principais vicilinas e seus valores nutritivos. A principal proteína de reserva, a faseolina, ainda, foi analisada em seu grau de glicosilação, conteúdo de carboidratos e padrão de degradação enzimático in vitro. Vários métodos foram utilizados para extraçâo, separação, análise e dosagem das diferentes frações proteicas, tais como, precipitação com tampões, sais e pH diferenciais, diálise, cromatografias (exclusão, afinidade e líquida). eletroforese denaturante, densitometria, reações enzimáticas, colorimétricas e imunológicas. Aeté e Carioca demonstraram ser cultivares muito semelhantes, pois mostraram o mesmo padrão eletroforético de albuminas e globulinas e a mesma concentração destas proteínas, de lectinas e de leguminas. A faseolina desses cultivares apresentou uma subunidade maior e outras 3 menores na proporção de 5:2:1:2. Apresentaram sementes pequenas, sendo classificados como tipo "Sanilac". Eles são filogeneticamente mais próximos, com características bastante distintas de Goiano. Contudo, o conteúdo de Lys e carboidratos ligados à faseolina foi bem superior em Carioca em relação aos demais cultivares. Goiano, por sua vez, mostrou um padrão eletroforético bem diferente dos outros cultivares, onde a faseolina era constituída de 2 subunidades maiores e 2 menores, na proporção de 2:2:1:0,1, apresentando sementes grandes, por isso sendo classificado como tipo "Contender". Além disso, diferiu na concentraçâo de lectinas e leguminas. Apresentou um maior conteúdo de carboidratos que Aeté e maior quantidade de Met e Cys que os demais cultivares. Todas as subunidades da faseolina e as leguminas dos 3 cultivares mostraram ser glicosiladas, embora o grau de glicosilaçâo tenha se distribuído indistintamente. Quanto à degradação, semelhante também nos 3 cultivares, verificou-se que a faseolina foi prontamente hidrolisada pela tripsina, que agiu na porção central das subunidades, formando polipeptídeos com M.M. ao redor de 20 kg/mol. A subunidade Q' pareceu ser a primeira a ser quebrada e, em Goiano, ela provavelmente também foi degradada no C-terminal. A faseolina de Goiano foi mais resistente ao ataque pela tripsina do que aquelas de Aeté e Carioca. Um aspecto comum entre os 3 cultivares, principalmente no que diz respeito à faseolina, foi a verificação da presença de determinantes antigênicos comuns, pois o anticorpo produzido contra a fração de proteínas totais de Goiano reconheceu aquelas de Aeté e Carioca. Há características que indicam que Goiano seria o cultivar potencialmente mais nutritivo, como o alto conteúdo de aminoácidos sulfurados e de Lys e a menor concentração de compostos hemoaglutinantes / Abstract: Seeds of Phaseolus vulgaris cv. Aeté-3, Coiano precoce and Carioca were analysed in different aspects: contents of the different protein fractions of albumins and globulins, electrophoretic banding patterns, amino acid composition, evaluation of the range of precipitaiton of major vicilins, and their nutritional values. The degree of glycosilation, carboydrate content and in vitro enzymatic hydrolysis patterns were also analysed for faseolin. Several methods were used for the extraction, separation and analysis of the different protein fractions, e.g. precipitation using buffers; salts and differencial pH; dialysis; exclusion, affinity and liquid chromatography; SDS-PACE; densitometry; enzymatic, colorimetric and immunological reactions. The cultivars Aeté and Carioca were found to be similar in electrophoretic patterns and contents of albumins, globulins, lectins and legumins. The patterns of faseolin of these cultivars were identical, having one major and three minor bands in a proportion of 5:2: 1:2. They presented small seeds and were classified as "Sanilac". They are phylogeneticaly very similar but unlike Coiano. However, Lys and carboydrates of faseolin were higher in Carioca than the others. Coiano showed a very different electrophoretic pattern of faseolin, having two major bands in a proportion of 2:2:1:0,1, with bigger seeds than the others. Coiano had a pattern similar to "Contender". It was also different in lectin and legumin contents. It presented a higher carboydrate content than Aeté and higher Met and Cys levels than the others. All subunits of faseolin and the protein like-Iegumin of Aeté, Coiano and Carioca were glycosylated but the degree of glycosilation was indistinct. Faseolin of the three cultivars was hydrolysated by trypsin that acts in the central portion of the molecule, producing polypeptides with M / Mestrado / Mestre em Biologia Vegetal

Orientador : Paulo Maria Ferreira de Araujo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-19T01:19:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Azevedo_MariaTeresadeCarvalho_M.pdf: 7005827 bytes, checksum: 7dd48f7a234106492370e6c118e3845a (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: Neste trabalho foi investigada a influência de anticorpos "naturais" obtidos de camundongos BALB/c neonatos na resposta de camundongos BALB/c adultos para eritrócitos de carneiro (E.C.), com ênfase no estudo da ativação policlonal resultante e da produção de auto-anticorpos para os antígenos miosina, colágeno, laminina e TNP-BSA. Camundongos BALB/c adultos foram previamente inoculados por via endovenosa com duas doses do anticorpo monoclonal "natural" IgM 1.3.80 (HOLMBERG et alli, 1986) de 25 µg num intervalo de 2 dias. Após 2 dias, estes animais foram estimulados com E.C. Passados 5 dias, os baços foram retirados para determinação do número de células secretoras de imunoglobulinas por PFC-reverso, e o soro obtido para determinação do título de anticorpos específicos para E.C. e para os auto-antígenos. Os resultados demonstraram que o tratamento prévio dos camundongos com os anticorpos "naturais" e posterior imunização com E.C., reduziu o número de células produtoras de imunoglobulinas totais e aumentou o número de células produtoras de IgM. Entretanto, estas alterações no número de células secretoras de imunoglobulinas não alterou o título de anticorpos específicos para E.C. Quanto ao título de auto-anticorpos, houve um aumento para o antígeno colágeno em animais tratados com anticorpos "naturais" e estimulados com E.C. Estes resultados sugerem uma modulação na atividade imunológica por anticorpos "naturais" de neonatos. A ativação policlonal induzida por E.C. ocasionou alterações no título de auto-anticorpos, com aumento para os antígenos miosina e TNP-BSA / Abstract: Not informed. / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T11:55:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 277463.pdf: 5143669 bytes, checksum: a114c196b97909152349a26f03c935d1 (MD5) / Neste trabalho, foram desenvolvidas três metodologias analíticas utilizando eletroforese capilar com a finalidade de diferenciar uísques autênticos de amostras apreendidas por suspeita de falsificação, cedidas pela Polícia Técnico-Científica do Estado de São Paulo. O primeiro capítulo trata da determinação simultânea dos aldeídos fenólicos: vanilina, seringaldeído, coniferaldeído e sinapaldeído. Estratégias de pré-concentração "on-line" ("stacking") foram desenvolvidas para melhorar a detectabilidade do método para determinação destes compostos. Os valores de R² foram maiores que 0,99 para os métodos sem e com pré-concentração (respectivamente denominados, NSM e SWMR42). A razão sinal/ruído (S/N) de 3 e 10 foram consideradas para estimar o LD e o LQ. Estes valores foram 100 ?g L-1 e 330 ?g L-1; 22 ?g L-1 e 73 ?g L-1 para NSM e SWMR42, respectivamente. Das 30 amostras analisadas, 14 apresentaram os aldeídos fenólicos estudados abaixo do limite de detecção. O segundo capítulo se refere ao desenvolvimento de um método para determinação dos açúcares frutose, glicose e sacarose e, neste estudo, foi utilizado um planejamento fatorial de 2 níveis e 3 variáveis para otimizar os parâmetros instrumentais de temperatura do cartucho, tempo de injeção e voltagem. As curvas de calibração indicaram boa linearidade na faixa de aplicação utilizada (50 a 500 mg L-1), assim como, boa correlação entre a área dos picos e a concentração dos açúcares e os coeficientes de determinação foram superiores a 0,99 para os três analitos. Quanto aos parâmetros de LD e LQ, estes foram de 68,42 e 228,06 mg L-1, respectivamente. O terceiro capítulo se destina à determinação dos ácidos alifáticos: acético, fórmico, láctico e glicólico. Nesta etapa, foram utilizados softwares de simulação para otimizar a composição do eletrólito de corrida. As curvas de calibração para os quatro ácidos apresentaram coeficientes de determinação maiores que 0,99. Os parâmetros de LD e LQ foram melhores que 12,50 e 41,70 mg L-1, respectivamente. A análise por componentes principais possibilitou a distinção entre os uísques autênticos envelhecidos 8 e 12 anos, assim como, a diferenciação entre as amostras autênticas e suspeitas, com base na concentração encontrada para os analitos. Os resultados obtidos nas três análises demonstraram a aplicabilidade da eletroforese capilar na identificação de amostras falsificadas de uísque.

A mandioca (Manihot esculenta Crantz) é uma espécie amplamente cultivada no Brasil, possuindo grande variabilidade para caracteres morfológicos, e elevada adaptação a climas e solos diferentes. A avaliação da variabilidade genética através da técnica de eletroforese de isoenzimas é bastante empregada em espécies vegetais. Os acessos mantidos em bancos de germplasma constituem um importante recurso genético para futuros trabalhos de melhoramento, porém é necessário conhecer-se as características peculiares de cada acesso. O estudo da variabilidade genética em bancos de germoplasma contribui para o conhecimento do genótipo de cada acesso, além de identificar materiais duplicados, o que reduz o custo com a manutenção do germoplasma. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a variabilidade genética de 200 acessos de mandioca através de oito sistemas isoenzimáticos [fosfatase ácida (ACP), leucina aminopeptidase (LAP), glucose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH), malato desidrogenase (MDH), xiquimato desidrogenase (SKDH), enzima málica (ME), glutamato desidrogenase (GDH) e isocitrato desidrogenase (IDH)] e verificar a existência de possíveis acessos duplicados. Para a avaliação isoenzimática dos acessos de mandioca utilizou-se folhas tenras (recém-expandidas) e, como meio de suporte, gel de amido de milho a 12% de concentração. Os acessos foram agrupados de acordo com o local de origem, obtendo-se desta forma sete grupos: 1-Amazonas, 2-Amapá, 3-Bahia, 4-Pará, 5-Rondônia, 6-Diversos, incluindo-se neste grupo os acessos que apresentavam-se em pequena quantidade por local de origem (um ou no máximo dois indivíduos), e 7- Acessos sem origem, incluindo-se neste grupo os acessos que não apresentavam local de origem definida. Cada sistema apresentou um loco polimórfico. O número médio de alelos por loco variou de 2,3 a 2,5. A heterozigosidade média observada variou de 0,381 a 0,615 e a esperada de 0,479 a 0,559. A variabilidade genética dentro dos grupos foi maior que a variabilidade entre os grupos para todos os oito locos analisados, com valores médios entre grupos (GST) de 0,049 e dentro de grupos (HS) de 0,482. Através da análise de similaridade genética, utilizando-se o índice de Jaccard, foi confeccionado um dendrograma para cada grupo de acessos, observando-se grande variabilidade genética entre os acessos avaliados. Os dendrogramas foram comparados a uma planilha contendo os 200 acessos agrupados de acordo com a semelhança de seus genótipos para os oito locos avaliados, com a finalidade de verificar a existência de possíveis acessos duplicados. Os dendrogramas mostraram a presença de 11 pares de acessos repetidos. Destes, somente três pares de acessos apresentaram similaridade para os oito locos analisados, os quais podem ser considerados como possíveis materiais duplicados / not available

Orientador: Regildo Márcio Gonçalves da Silva / Co-orientador: André Rolim Baby / Banca: Isabel Cristina Cherici Camargo / Banca: Giuseppina Pace Pereira Lima / Resumo: O desenvolvimento de novos fármacos com ação antioxidante tem sido um importante objeto de estudo, uma vez que a terapêutica farmacológica atual para o tratamento de doenças como Alzheimer, Parkinson, esclerose múltipla, doença de Huntington, epilepsia e alguns tipos de neoplasias pode ser realizada devido às propriedades antioxidantes de muitos compostos naturais e/ou sintéticos. Dessa forma, a busca por novos agentes antioxidantes é extremamente necessária e atualmente é objeto de interesse em novas pesquisas pela indústria cosmética, farmacêutica e nutricional. Neste contexto, este trabalho irá permitir o aumento do conhecimento sobre Moringa oleifera por meio da avaliação do potencial antioxidante, fotoprotetor e antiglicação dos extratos desta espécie, além de elucidar relatos etnobotânicos de sua utilização e enriquecer o conhecimento científico desta espécie amplamente empregada como planta medicinal. Além disso, porque são reduzidas as informações científicas sobre as atividades que serão avaliadas neste projeto / Abstract: The development of new drugs with antioxidant action has been an important subject of study, since the current drug therapy for the treatment of diseases such as Alzheimer's, Parkinson's, multiple sclerosis, Huntington's disease, epilepsy and some types of cancer can be performed because the antioxidant properties of many natural and / or synthetic compounds. Thus, the search for new antioxidants is extremely necessary and is currently the subject of interest in new research by the cosmetic, pharmaceutical and nutritional industry. In this context, this work will enable increased knowledge on Moringa oleifera by evaluating the antioxidant potential, sunscreen and anti-glycation of the extracts of this species, besides elucidating ethnobotanical reports of its use and enrich the scientific knowledge of this widely used species with medicinal plant. In addition they are reduced scientific information on the activities to be evaluated in this project / Mestre