Le syndrome de détresse respiratoire aigue (SDRA) est une maladie très grave du poumon. Malgré les nombreuses études entreprises au cours des ans, le taux de mortalité est encore élevé et aux alentours de 35% à 40%. Comme il n'existe aucun traitement spécifique, le praticien doit s'appuyer sur des outils d'évaluations fiables, qui vont lui permettre d'évaluer la réparation (ou la dégradation) du poumon et se contenter d'un traitement de support. Les outils d'imagerie dont dispose le praticien sont nombreux et variés (biopsie, tomographie, résonance magnétique,...). Ces modalités fournissent certes une image globale de la structure du poumon, et permettent de détecter facilement de nombreuses pathologies. Cependant, malgré les dernières avancées en matière de résolution et de qualité d'image, les systèmes d'imageries utilisés actuellement ne donnent pas d'information au niveau cellulaire. Or, c'est à ce niveau que l'on peut vraiment voir les mécanismes d'évolution de cette maladie. Il serait donc intéressant de trouver un moyen de visualiser le poumon à l'échelle cellulaire, sans pour autant être trop invasif, comme l'est la biopsie pulmonaire. La microscopie in vivo peut être une solution à ce problème. A l'aide d'une sonde, placée directement sur le poumon, le praticien pourra évaluer l'état du poumon de son patient en temps réel. C'est ici le but de l'étude, qui a été réalisée sur des rats. Après injection de marqueurs spécifiques (reconnaissance de certaines cellules par exemple), il devient possible d'évaluer l'état du poumon, par des considérations structurelles, cellulaires, et fonctionnelles notamment. Outre l'étape où il a fallu choisir les bons produits de marquage selon ce qu'il était visé de visualiser, il a été nécessaire de développer des outils de stabilisation de la sonde. En effet, les mouvements du coeur et des poumons, apportent sur les images un flou cinétique qui corrompt les résultats, ce qui peut amener une erreur de diagnostic. Il a donc été nécessaire de supprimer ce flou en développant notamment un système de succion pour maintenir un contact entre la sonde et le poumon.

Titre de l'écran-titre (visionné le 10 janvier 2024) / La rétention urinaire post-opératoire est une complication pouvant causer de sérieux inconvénients pour les patients, tels que la distension douloureuse de la vessie, ainsi que des conséquences infectieuses ou urologiques reliées à l'utilisation d'un cathéter. En plus, sa survenue peut nécessiter une admission imprévue et des soins post-hospitalisation additionnels. La microchirurgie transanale endoscopique (TEM) est une procédure plus fréquemment effectuée dans les dix dernières années et la rétention urinaire fait partie des complications les plus fréquentes. En fait, un homme sur quatre présente une rétention urinaire post-opératoire après une résection par TEM. En préparation à une étude à grande échelle dans cinq sites canadiens, nous avons effectué une étude de faisabilité dans deux des centres. Les objectifs étaient le taux de recrutement, l'adhérence au protocole et l'évaluation de l'issue primaire prévue. Nous avons randomisé avec succès 64 patients sur une durée de 13 mois et 62 patients ont été inclus pour l'analyse. L'âge médian des patients était de 66 ans (IQR, 61-73). Les raisons pour le non-recrutement incluaient le refus du patient, le trop court délais entre planification chirurgicale et la date d'opération et la présence de critères d'exclusion . L'objectif pour le taux de recrutement au site coordonnateur a été atteint, mais il n'a pas été atteint à l'autre centre canadien participant. L'adhérence au protocole et à la médication était élevée. Les résultats de cette étude de faisabilité ont montré que le recrutement hors du centre coordonnateur était difficile et la faisabilité d'un essai clinique multicentrique plus large était limitée. / Post-operative urinary retention (POUR) is a complication that can cause significant inconveniences for patients, as painful distension of the bladder, use of a catheter, urological or infectious consequences, unexpected hospital admission and additional outpatient care. Transanal endoscopic microsurgery (TEM) is a procedure that became more frequently performed in that last ten years and POUR is one of the most common complications that occurs. In fact, as many as one in four men experience post-operative urinary retention after TEM resection. In preparation of a large-scale, randomized clinical trial in five Canadian sites, we sought to determine the feasibility with a Vanguard phase in two of the sites. The objectives for the feasibility trial were to evaluate the recruitment rate, the outcome assessment and the protocol adherence. We successfully randomized 64 patients over a 13-month period, and 62 were included for the analysis. The median age of the patients was 66 (IQR, 61-73). The reasons for non-enrolment were the refusal of the patient, the delay before the surgery was too short, the patient did not meet eligibility criteria. The median recruitment rate over the study period target was met locally but not at our other participating site. The protocol and medication adherence were high. The results of this Vanguard phase revealed that recruitment outside the coordinating center was difficult and the feasibility of a larger multicenter randomized clinical trial was limited.

The proposal of this work was to determine the contribution of functional MR imaging techniques, i.e. secretin-enhanced MRCP (S-MRCP) and dynamic contrast-enhanced magnetic resonance (DCE-MR) imaging in the quantitative assessment of exocrine pancreatic function and perfusion.<p><p>The pancreas is both an exocrine and endocrine organ, though the exocrine tissue accounts for more than 90%. The exocrine pancreas is specialized in the synthesis and storage of digestive enzymes and in bicarbonate and water secretion in response respectively to various secretagogues (CCK, ach, GRP, VIP,…) and to secretin. <p>The arterial supply of the pancreas derives from branches of the celiac trunk and of the superior mesenteric artery. The microvascularity of the exocrine and the endocrine parts of the gland are anatomically and functionally separated, with differentially regulated blood perfusion. <p>Based on the knowledge of a close relationship between the activity of the gland and its blood supply, in normal conditions pancreatic perfusion responds to the functional state of the exocrine parenchyma: increased demands for exocrine secretions are associated with increased pancreatic blood flow. <p>The pancreatic gland can be involved at different degrees of severity in acute and chronic inflammatory processes due to various causes. In both processes microcirculatory changes occur and the pancreatic exocrine function can be impaired. Moreover, an exiguous microvascular component characterizes pancreatic ductal adenocarcinoma (PDA) related to a prominent stroma.<p><p><p>In the first section of this thesis, quantitative assessment of the pancreatic exocrine secretions was performed with S-MRCP in physiologic and non-physiologic conditions. The stimulating effect of secretin as well as the inhibitory effect of somatostatin on normal pancreas, both administered at different dose-regimens, were tested. The results of these investigations showed that quantitative S-MRCP is able to detect changes in pancreatic exocrine secretions correlated to the degree of stimulation or inhibition. <p>In pathologic settings, pancreatic exocrine secretions were assessed in chronic pancreatitis patients showing different degrees of severity, before and after endoscopic pancreatic duct drainage procedures (PDDP). In the group of patients presenting a reduced pancreatic exocrine reserve before treatment, quantitative S-MRCP showed a short-term improvement after PDDP. <p><p>In the second section, the feasibility and the reproducibility of DCE-MR imaging to quantify regional pancreatic perfusion was firstly investigated. DCE-MR imaging was performed in normal volunteers. Reference values for regional pancreatic perfusion were achieved with an intra-individual variability of 21%.<p>DCE-MR investigations were repeated during secretin stimulation and disclosed a significant increase of regional pancreatic perfusion in all individuals. <p>Secondly, DCE-MR imaging investigated benign and malignant focal pancreatic solid lesions and non tumoral tissue in patients undergoing pancreatic surgical resection. The purpose was to correlate DCE-MR quantitative parameters, (reflecting perfusion and/or permeability and the distribution volume fraction) with histologic features such as the degree of fibrosis and the microvascular density (MVD) in the corresponding tissues. A significant correlation was found between DCE-MR and histologic parameters: Ktrans was negatively correlated with the degree of fibrosis (high fibrosis was correlated with low perfusion), while the distribution volume fraction was positively correlated with the degree of fibrosis and with MVD (larger EES was correlated with high fibrosis and higher MVD). <p> / Doctorat en Sciences médicales / info:eu-repo/semantics/nonPublished

Submitted by Johnny Rodrigues (johnnyrodrigues@ufcg.edu.br) on 2018-04-10T18:55:15Z No. of bitstreams: 1 VANESSA SENA CORREIA LIMA - DISSERTAÇÃO PPG-CEMat 2014..pdf: 2636512 bytes, checksum: 9ac482edb8899e0ace77f9887e1dd23e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-10T18:55:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 VANESSA SENA CORREIA LIMA - DISSERTAÇÃO PPG-CEMat 2014..pdf: 2636512 bytes, checksum: 9ac482edb8899e0ace77f9887e1dd23e (MD5) Previous issue date: 2014-09-15 / Biomaterial é um termo usado para indicar os materiais que constituem as peças de implantes médicos, dispositivos extracorporais, e descartáveis que têm sido utilizados em medicina bem como em todos os aspectos de saúde do paciente. As aplicações dos biomateriais são muitas e variadas, incluindo desde dispositivos de uso prolongado, como veias e válvulas artificiais, a dispositivos de exames, como endoscópios. Endoscopia, que significa olhar por dentro, trata-se de uma especialidade médica que se utiliza de um equipamento chamado de endoscópio para diagnóstico e tratamento de enfermidades. Através da endoscopia podem-se diagnosticar enfermidades, efetuar biópsias de lesões, extrair corpos estranhos, realizar dilatações, fazer acompanhamentos após cirurgias, passar sondas ou cateteres, tratar sangramentos, retirar pólipos e acessar a via biliar para realizar procedimentos cirúrgicos. Os endoscópios flexíveis possuem em sua ponta flexível uma borracha conhecida como Fluoroelastômero Viton®. Os fluorelastômeros são elastômeros sintéticos fluorados, conhecidos como Borracha Fluorada para serviços em temperaturas elevadas e ambientes quimicamente agressivos. Baseado no exposto este trabalho teve como objetivo estudar o fluorelastômero Viton® utilizado no revestimento de ponteiras dos equipamentos endoscópicos. Foram verificadas três grupos de amostras de ponteiras de endoscópios constituídas de Viton® denominadas G, M e P, em sua forma virgem e tratadas com álcool etílico e HCl, ambos concentrados, onde estas amostras foram caracterizadas por Microscopia Óptica (MO), Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), Espectroscopia na Região de Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR), Espectroscopia por Energia Dispersiva de raios X (EDS), Difração de raios X (DRX), Ensaio de Ângulo de Molhabilidade e Ensaio de Citotoxicidade. Verificou-se para todas as amostras (G, M e P) uma superfície com morfologia granulada e irregular, com presença de elementos contaminantes e imperfeições, com bandas características de fluorelastômeros, difratogramas amorfos típicos de elastômeros, caráter hidrofílico e toxicidade em meio celular exceto para a amostra M. Observou-se que o tratamento com álcool etílico não provocou alteração estrutural no fluorelastômero agindo apenas como eliminador de impurezas superficiais. O tratamento com HCl provocou alterações na morfologia e estrutura química do elastômero. Verificou-se a necessidade de adaptação da rota de produção deste fluorelastômero para utilização como biomaterial. Foi proposta a utilização de revestimentos a base siloxanos que possam aumentar a vida útil do fluorelastômero Viton®. / Biomaterial is a term used to indicate the materials constituting the parts of medical implants, extracorporeal devices, disposable and which have been used in medicine as well as in all aspects of patients' health. The applications of biomaterials are many and varied, ranging from extended use devices such as artificial valves and veins, the devices exams such as endoscopes. Endoscopy, which means looking inside, it is a medical specialty that uses a device called endoscope for diagnosis and treatment of diseases. By endoscopy can be diagnosed illnesses, perform biopsies of lesions, extracting foreign bodies, perform dilations, do follow ups after surgery, spend probes or catheters, to treat bleeding, remove polyps and access to the surgical procedures biliary. Flexible endoscopes have in your flexible rubber tip one known as Viton® fluoroelastomer. The fluoroelastomers are synthetic fluorinated elastomers, known as Rubber Fluorinated services to high temperatures and chemically aggressive environments. Based on the above this work was to study the Viton® fluoroelastomer coating used on tips of endoscopic equipment. Three groups of samples from the tips of endoscopes consist of Viton® called L, M and P, in its virgin form and treated with HCl and ethyl alcohol, both concentrated where these samples were characterized by Optical Microscopy (OM), Electron Microscopy Were Verified (SEM), Spectroscopy in the Region of Fourier Transform Infrared (FTIR) Spectroscopy Energy Dispersive X-ray (EDS), diffraction (XRD), test of Angle Wettability and Cytotoxicity Assay rays. It was found for all samples (L, M, P) and a surface irregular with granular morphology, presence of contaminants and imperfections, characteristic bands of fluoroelastomers, typical XRD of amorphous elastomers, hydrophilic, and toxicity in cell except for M. In the sample was observed that treatment with ethanol did not cause structural changes in the fluoroelastomer as scavenger only surface impurities. Treatment with HCl caused changes in the morphology and chemical structure of the elastomer. There was a need to adapt the production of fluoroelastomer route for use as a biomaterial. The use of coatings siloxanes base that can increase the life of Viton® fluoroelastomer was proposed.

Cette thèse porte sur la conception d'hydrogels injectables pouvant être utilisés en chirurgie mini-invasive, par exemple en dissection endoscopique sous-muqueuse (ESD) ou en réparation de hernie.Les polyamidoamines (PAAm) constituent une classe d'hydrogel intéressante à ces fins. Après avoir étudié les différents facteurs qui affectent leurs propriétés, nous montrons qu'il est également possible d'obtenir des microgels à base de PAAm pour la délivrance de médicaments ou l'encapsulation de cellules. Il est possible de synthétiser des PAAm dégradables qui peuvent être injectés dans la sous-muqueuse de l'estomac pour la ESD.Nous avons montré que les hydrogels hybrides alginate / PAAm peuvent être utilisés pour le traitement percutané de la hernie inguinale directe et des crèmes à base d'hydrogel ont été préparées pour être utilisées pour le colmatage des fistules. Le dernier chapitre de la thèse est consacré à la réticulation de l'acide hyaluronique pour la chirurgie esthétique. / This thesis deals with the design of injectable hydrogels that can be used in minimally invasive surgery, such as endoscopic submucosal dissection (ESD), percutaneous hernia repair or fistulas closure.Polyamidoamines (PAAm) constitute a class of hydrogel of special interest for these purposes. After studying the different factors that affect their properties, we show that it is also possible to obtain PAAM-based microgels for applications in drug delivery or cell encapsulation.It is possible to synthesize redox-responsive nanocomposite degradable PAAm that can be injected into the submucosa of the stomach to facilitate the ESD.We show that hybrid alginate/PAAm hydrogels can be used for the percutaneous treatment of direct inguinal hernia and hydrogel-based creams have been prepared for use in fistulas closure. The last chapter of the thesis is devoted to the development of a new crosslinking strategy for hyaluronic acid in cosmetic surgery.

Une cicatrice apparente au cou après une chondrolaryngoplastie chez une femme transgenre a le pouvoir d’agir comme stigmatisation pour cette population et peut provoquer une détresse psychologique importante. L’approche sans cicatrice du cou antérieur a été décrite dans les dernières années comme sécuritaire et efficace pour la chirurgie thyroïdienne, via une approche endoscopique transvestibulaire. À notre connaissance, cette approche est encore très peu étudiée pour la chondrolaryngoplastie. Avec cette étude, nous avons cherché à détailler et évaluer la faisabilité d'une chondrolaryngoplastie via une approche transvestibulaire. Trois cadavres mâles ont été utilisés pour cette étude. Une approche endoscopique transvestibulaire, utilisant trois trocarts insérés dans la région vestibulaire, a été réalisée. Une dissection mousse dans le plan sous-platysmal et la division des muscles de la sangle ont été effectuées pour exposer le cartilage thyroïdien. Une laryngoscopie directe a été réalisée avec une lame Mac standard. Une aiguille a ensuite été insérée à travers la peau et le cartilage thyroïdien afin de confirmer le niveau de la commissure antérieure sur le cartilage thyroïdien avant de poursuivre. Enfin, le cartilage thyroïdien a été poli à l'aide d'un microdébrideur et l’étendue a été guidée par l'apparence du cou antérieur et la position de l'aiguille. Le cartilage thyroïdien des trois cadavres était significativement réduit après l’intervention et la commissure antérieure a été préservée. Cette approche transvestibulaire est une technique réalisable pour la chondrolaryngoplastie, permet une chirurgie sans cicatrice cervicale et permet au chirurgien de confirmer la position de la commissure antérieure avant de procéder à l’intervention. Nous pensons qu'il s'agit d'une chirurgie prometteuse pour les femmes transgenres. / An apparent neck scar following chondrolaryngoplasty can cause significant psychological distress. For thyroid surgery, a scarless transvestibular endoscopic approach to the anterior neck has already been described as safe and efficient. With this study, we sought to describe and assess the feasibility of a transvestibular approach for chondrolaryngoplasty. Three male cadavers were used for this study. A transvestibular endoscopic approach, using three trocarts inserted in the vestibular region of the inferior lip was performed. A blunt dissection in the subplatysmal plane with division of the strap muscles was completed to expose the thyroid cartilage. A direct laryngoscopy was performed with a standard Mac blade. A needle was then inserted through the skin and the thyroid cartilage to confirm the level of the anterior commissure on the thyroid cartilage before proceeding. Finally, the laryngeal prominence was reduced using a powered shaver. The amount of cartilage to be removed was guided by the appearance of the anterior neck and the position of the needle. The thyroid cartilage appeared significantly reduced after the procedure and the attachment of the anterior commissure was safely preserved. This transvestibular approach is a feasible technique for chondrolaryngoplasty, allows a scarless surgery and allows the surgeon to confirm the position of the anterior commissure before proceeding. We believe this is a promising surgery for transgender women.

Cette thèse présente des développements techniques et méthodologiques visant une alternative viable pour le traitement des cancers digestifs (rectum, œsophage). Par rapport aux méthodes standards de thérapie, les ultrasons de contact de haute intensité sous guidage IRM sont une approche moins invasive. L’IRM offre 2 avantages: bonne résolution spatiale et contrôle en temps réel de la température. Cette méthode de traitement demande efficacité et sécurité. Trois prototypes d’antenne RF intégrées à des transducteurs ultrasonores ont été réalisés afin d’améliorer la résolution spatiale et temporelle des images IRM et la précision de la mesure de température. Les antennes intégrées ont montré une meilleure sensibilité par rapport à une antenne extra corporelle standard. Des images IRM haute résolution, anatomiques (voxel0.4x0.4x5 mm3) et de thermométrie (voxel 0.75x0.75x8 mm3, 2s/image) ont été acquises in-vivo.La température a été mesurée, dans un rayon de 20 mm au-delà du ballon, avec un écart type<1°C. Les artéfacts de flux causés par l’eau circulante à l’intérieur du ballon de refroidissement ont pu être projetés hors de la région d’intérêt. L’évolution de la température a été contrôlée automatiquement, à des profondeurs variables, avec un point de contrôle par faisceau. Le contrôleur a montré une grande précision in-vivo (écart type <5%). Le transducteur ultrasonore matriciel permet d’activer successivement plusieurs faisceaux pendant la même dynamique de tir.Des simulations ont été conduites afin de proposer une planification du traitement optimale pour une tumeur désignée. Un nouveau concept de sonde ultrasonore à 256 éléments avec focalisation géométrique naturelle a été proposé. / This thesis presents technical and methodological developments aiming tooffer a viable alternative for the treatment of digestive cancers (rectum and esophagus). Compared to the standard methods of therapy, the high intensity contact ultrasound guided by MRI is a less invasive approach. MRI offers 2 advantages: good spatial resolution, and real-time temperature control. This treatment method requires efficacy and safety. Three prototypes of RF coil integrated with ultrasound transducers were built in order to increase the spatial and temporal resolution ofthe MR images, and the accuracy of the temperature measurement. The integrated coils showed a better sensitivity compared to a standard extracorporeal coil. Anatomical (voxel 0.4x0.4x5 mm3)and thermometry (voxel 0.75x0.75x8 mm3, 2s/image) high resolution MR images were acquired in-vivo. The temperature was measured, within a radius of 20 mm from the balloon, with a standard deviation <1°C. The flow artifacts caused by the water circulating inside the cooling balloon could be shifted out of the region of interest. The temperature evolution was controlled automatically, at different depths, with one control point per beam. The controller showed a good accuracy during in-vivo experiments (standard deviation less than 5%). The phased-arrayultra sound transducer permits the successive activation of multiple beams during the same dynamic of sonication. Simulations were conducted in order to offer an optimal treatment planning for a defined tumor. A new design of ultrasound transducer with 256 elements with revolution symmetry, based on a natural geometrical focalization, was proposed.

Introduction : La chronicité de la rhinosinusite, sa résistance aux antibiotiques, et ses exacerbations aiguës laissent croire que les biofilms sont impliqués dans la rhinosinusite chronique. Objectifs : Nous avons évalué la capacité des bactéries Pseudomonas aeruginosa, staphylocoques à coagulase négative et Staphylococcus aureus à former des biofilms par un essai in vitro, et si cette capacité de formation a un lien avec l’évolution de la maladie. Nous avons évalué in vitro l’effet de la moxifloxacine, un antibiotique utilisé dans le traitement de la rhinosinusite chronique sur des biofilms matures de Staphylococcus aureus. Méthodes : Trent et une souches bactériennes ont été isolées de 19 patients atteints de rhinosinusite chronique et qui ont subit au moins une chirurgie endoscopique des sinus. L’évolution de la maladie a été notée comme "bonne" ou "mauvaise" selon l’évaluation du clinicien. La production de biofilm a été évaluée grâce à la coloration au crystal violet. Nous avons évalué la viabilité du biofilm après traitement avec la moxifloxacine. Ces résultats ont été confirmés en microscopie confocale à balayage laser et par la coloration au LIVE/DEAD BacLight. Résultat et Conclusion : Vingt deux des 31 souches ont produit un biofilm. La production d’un biofilm plus importante chez Pseudomonas aeruginosa et Staphylococcus aureus était associée à une mauvaise évolution. Ceci suggère un rôle du biofilm dans la pathogenèse de la rhinosinusite chronique. Le traitement avec la moxifloxacine, à une concentration de 1000X la concentration minimale inhibitrice réduit le nombre des bactéries viables de 2 à 2.5 log. Ces concentrations (100 µg/ml - 200 µg/ml) sont faciles à atteindre dans des solutions topiques. Les résultats de notre étude suggèrent que l’utilisation de concentrations supérieure à la concentration minimale inhibitrice sous forme topique peut ouvrir des voies de recherche sur de nouveaux traitements qui peuvent être bénéfiques pour les patients atteints de forme sévère de rhinosinusite chronique surtout après une chirurgie endoscopique des sinus. / Introduction: The role of biofilms in chronic diseases is increasingly recognized. Chronic rhinosinusitis, with its chronic indolent course, resistance to antibiotics, and acute exacerbations, has an evolution that parallels that of other biofilm-related diseases. Objectives: 1-To develop an in vitro method to assess the biofilm formation capacity. 2- To determine whether biofilm-forming capacity of bacteria demonstrated in chronic rhinosinusitis has an impact on persistence of the disease following endoscopic sinus surgery. 3- To determine the in vitro activity of moxifloxacin against Staphyylococcus aureus in biofilm form. Method: Thirty-one bacterial strains recovered from 19 patients with chronic rhinosinusitis at least one year post-endoscopic sinus surgery. Evolution of disease was assessed by questionnaire and endoscopy as favorable or unfavorable. The bacteria were cultured on a 96-well culture plaque and a semi-quantitative method using crystal violet to quantify biofilm production was used. Confirmation of the effect of the antimicrobial agents on viability was performed with confocal laser microscopy, using a LIVE/DEAD BacLight staining. Results: Twenty-two of 31 samples produced a biofilm thicker or equal to the positive control. Biofilm formation was associated with a poor evolution for Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus, but not for coagulase-negative staphylococci. Biofilm treated with moxifloxacin at 1000X (0.1mg/ml – 0.2 mg/ml) gave a 2 to 2.5 log reduction in number of viable bacteria. Conclusion: We have shown that Crystal violet method is able to detect biofilm formation. There is a correlation between in vitro biofilm production by Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus and unfavorable evolution after endoscopic sinus surgery, suggesting a role for biofilm in chronic rhinosinusitis. Increased concentrations of moxifloxacin, easily attainable in topical solutions have a potential role in the management of biofilm infections.

Introduction : La chronicité de la rhinosinusite, sa résistance aux antibiotiques, et ses exacerbations aiguës laissent croire que les biofilms sont impliqués dans la rhinosinusite chronique. Objectifs : Nous avons évalué la capacité des bactéries Pseudomonas aeruginosa, staphylocoques à coagulase négative et Staphylococcus aureus à former des biofilms par un essai in vitro, et si cette capacité de formation a un lien avec l’évolution de la maladie. Nous avons évalué in vitro l’effet de la moxifloxacine, un antibiotique utilisé dans le traitement de la rhinosinusite chronique sur des biofilms matures de Staphylococcus aureus. Méthodes : Trent et une souches bactériennes ont été isolées de 19 patients atteints de rhinosinusite chronique et qui ont subit au moins une chirurgie endoscopique des sinus. L’évolution de la maladie a été notée comme "bonne" ou "mauvaise" selon l’évaluation du clinicien. La production de biofilm a été évaluée grâce à la coloration au crystal violet. Nous avons évalué la viabilité du biofilm après traitement avec la moxifloxacine. Ces résultats ont été confirmés en microscopie confocale à balayage laser et par la coloration au LIVE/DEAD BacLight. Résultat et Conclusion : Vingt deux des 31 souches ont produit un biofilm. La production d’un biofilm plus importante chez Pseudomonas aeruginosa et Staphylococcus aureus était associée à une mauvaise évolution. Ceci suggère un rôle du biofilm dans la pathogenèse de la rhinosinusite chronique. Le traitement avec la moxifloxacine, à une concentration de 1000X la concentration minimale inhibitrice réduit le nombre des bactéries viables de 2 à 2.5 log. Ces concentrations (100 µg/ml - 200 µg/ml) sont faciles à atteindre dans des solutions topiques. Les résultats de notre étude suggèrent que l’utilisation de concentrations supérieure à la concentration minimale inhibitrice sous forme topique peut ouvrir des voies de recherche sur de nouveaux traitements qui peuvent être bénéfiques pour les patients atteints de forme sévère de rhinosinusite chronique surtout après une chirurgie endoscopique des sinus. / Introduction: The role of biofilms in chronic diseases is increasingly recognized. Chronic rhinosinusitis, with its chronic indolent course, resistance to antibiotics, and acute exacerbations, has an evolution that parallels that of other biofilm-related diseases. Objectives: 1-To develop an in vitro method to assess the biofilm formation capacity. 2- To determine whether biofilm-forming capacity of bacteria demonstrated in chronic rhinosinusitis has an impact on persistence of the disease following endoscopic sinus surgery. 3- To determine the in vitro activity of moxifloxacin against Staphyylococcus aureus in biofilm form. Method: Thirty-one bacterial strains recovered from 19 patients with chronic rhinosinusitis at least one year post-endoscopic sinus surgery. Evolution of disease was assessed by questionnaire and endoscopy as favorable or unfavorable. The bacteria were cultured on a 96-well culture plaque and a semi-quantitative method using crystal violet to quantify biofilm production was used. Confirmation of the effect of the antimicrobial agents on viability was performed with confocal laser microscopy, using a LIVE/DEAD BacLight staining. Results: Twenty-two of 31 samples produced a biofilm thicker or equal to the positive control. Biofilm formation was associated with a poor evolution for Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus, but not for coagulase-negative staphylococci. Biofilm treated with moxifloxacin at 1000X (0.1mg/ml – 0.2 mg/ml) gave a 2 to 2.5 log reduction in number of viable bacteria. Conclusion: We have shown that Crystal violet method is able to detect biofilm formation. There is a correlation between in vitro biofilm production by Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus and unfavorable evolution after endoscopic sinus surgery, suggesting a role for biofilm in chronic rhinosinusitis. Increased concentrations of moxifloxacin, easily attainable in topical solutions have a potential role in the management of biofilm infections.

La microscopie multiphotonique est une modalité d’imagerie de pointe offrant des opportunités d’avancées remarquables en biologie mais aussi dans le domaine médical. Afin d’en exploiter pleinement le formidable potentiel au cœur même de la pratique clinique, le développement de nombreuses sondes miniaturisées à fibre optique pour l’endomicroscopie multiphotonique (EMMP) a eu lieu depuis de nombreuses années et dans de nombreux laboratoires français et étrangers. Il s’est pour l'instant confronté à des limitations majeures comme l’impossibilité de recueillir les signaux d’auto-fluorescence des tissus qui sont intrinsèquement faibles comme ceux venant des co-enzymes métaboliques NADH et FAD. Cette limitation compromet l'utilité de l’EMMP en la restreignant à une imagerie morphologique requérant un marquage exogène des tissus. Ce manuscrit présente une architecture d’EMMP permettant de dépasser cette limitation, capable de proposer une imagerie fonctionnelle du métabolisme cellulaire en temps réel, in vivo, in situ, sans marquage. Le prototype d’EMMP proposé est une amélioration du précédent, où les Grisms en réflexions sont remplacés par des Grisms en transmission, permettant d’élargir la bande spectrale d’utilisation et la transmission du système. Ce prototype voit aussi l’adjonction d’un second laser excitateur afin d’accéder aux fluorescences du NADH et du FAD. Les résultats démontrent capable que nous sommes à même d’imager les fluorescences cellulaires intrinsèques au travers de 5 mètres de fibre optique avec une résolution subcellulaire. Parmi celles-ci nous sommes capables d’exciter et de collecter spécifiquement les fluorescences du NADH et du FAD. Enfin nous détectons assez de photons pour disposer d‘informations quantitatives et donc de proposer une image du rapport d’oxydo-réduction optique en endomicroscopie. / Nonlinear microscopy is a cutting edge imaging modality leading to remarkable step forward in biology but also in the clinical field. To use it at its full potential and at the very heart of clinical practice, there has been several development of fiber-based micro-endoscope. The application for those probes is now limited by few major restrictions, such as the impossibility to collect auto-fluorescence signal from tissues theses being inherently weak such as the fluorescence from NADH or FAD. This limitation reduces the usefulness of the micro-endoscope effectively restraining it to morphological imaging modality requiring staining of the tissue. Our aim is to go beyond this limitation, showing cellular metabolism monitoring, in real time, without any staining. The experimental setup is an upgrade of our precedent one where the reflection- based Grism stretcher is replace with a new generation transmission-based Grism stretcher. Another Laser was also added in order to tune the first laser at 860nm to allow FAD imaging and the second one to 760nm for NADH. The results prove that we assess and image the level of NADH and FAD at subcellular resolution through a five-meter-long fiber. Thus we demonstrate that we are capable of measuring the optical redox ratio in a micro-endoscopic configuration.