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Geoqu?mica e integridade mineral?gica de reservat?rios do campo de Buracica para armazenamento geol?gico de CO2Bressan, Lia Weigert 18 March 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-03-18 / O trabalho versa sobre a an?lise experimental das intera??es CO2-rocha-fluido das amostras de reservat?rio (arenito) coletadas do campo de Buracica, Bacia do Rec?ncavo, Brasil. Neste campo, realiza-se inje??o de CO2 desde 1991 para recupera??o avan?ada ou terci?ria de petr?leo. Foram realizados experimentos em autoclaves de a?o sob condi??es do campo e tamb?m supercr?ticas. Modelagem geoqu?mica de equil?brio foi realizada para comparar com os dados obtidos experimentalmente. An?lises no Microsc?pio Eletr?nico de Varredura (MEV) foram realizadas para identificar a dissolu??o e precipita??o de fases minerais a partir das rea??es ocorridas no sistema estudado. An?lises por Espectroscopia de Emiss?o At?mica por Plasma Indutivamente Acoplado (ICP AES) foram realizadas na solu??o resultante dos experimentos para identificar os ?ons presentes na solu??o. Os resultados indicaram a integridade mineral?gica do reservat?rio estudado para fins de armazenamento geol?gico de carbono.
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Avalia??o das bases biol?gicas e sociais do temperamentoFrizzo, Matias Nunes 08 February 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-02-08 / Temperament can be regarded as the basis of mood, behavior and personality. It has a strong biological basis, manifested early in the development of the individual, guiding the formation of habits and is relatively stable over time. Although it is known that there are environmental influences, the relationship of temperament with biological markers and social environment is not well defined. Evidence suggests that the temperament and personality traits predict psychiatric disorders and that most of them are recurrent and chronic. Thus, this study aims to investigate the biological and social basis of behavior and in animal models of traits to assess the relationship of temperament with hyperucemia and with self-report of having been bullied in humans. To study the neurobiological basis of this trait, we selected mice with high and low exploration of a central object in an open field. Out of one hundred mice tested, the ten mice with higher (HE) and lower exploratory (LE) activity were evaluated with gene expression (Genechip Mouse Gene 1.0 ST Array Affymetrix) in the striatum and frontal cortex. The results showed 118 and 86 differentially expressed genes (DEGs) in the striatum and frontal cortex, respectively. Through analysis of DEGs biological processes were significantly more enriched in nervous system were development and function and cell-to-cell signaling, particularly in the striatum. These results suggest the involvement of translational and post-translational processes as well as striatal synaptic elements in the trait differences of exploratory behavior. Human studies were conducted with the data collected in a large web-survey on psychological and psychiatric measures (BRAINSTEP). In the study of biological basis of behavior we analyzed temperament in 7.155 males (5.1% hyperuricemic) and 25.225 women (1.8% hyperuricemic). Hyperuricemic subjects scored higher in anger and lower in inhibition and control, but hyperuricemic women also showed a higher emotional sensitivity and a lower degree of volition and coping. Subjects with hyperuricemia present more more externalizing and unstable emotional traits and affective temperaments In the study of the social bases of temperament assessed bullying during childhood and adolescence, through a question on time of exposure to bullying (none, <1 year, 1-3 years and> 3 years). Emotional traits and affective temperaments were evaluated with The Affective and Emotional Composite Temperament Scale (AFECTS). About half of the sample reported exposure to bullying and 10% reported being victimized by peers for longer than 3 years. Longer exposure to bullying was associated with lower Volition, Coping and Control. Bullying victimization was also associated with a much lower proportion of euthymic and hyperthymic types in both genders, which was compensated by an increase mainly in the proportion of depressive, cyclothymic and volatile types. Being bullied was associated with a broad and profound impact on emotional and cognitive domains in all dimensions of emotional traits, and with internalized and unstable affective temperaments. These results, taken together, show the importance of social factors and serum markers, as well as genetic markers of temperament. / O temperamento pode ser considerado como a base do humor, do comportamento e da personalidade, tem uma base biol?gica forte, manifesta-se cedo no desenvolvimento do indiv?duo, norteia a forma??o dos h?bitos sendo relativamente est?vel no decorrer do tempo. Apesar de se saber que h? influ?ncias do meio, n?o est? bem definida a rela??o entre temperamento e o meio social. Evid?ncias sugerem que o temperamento e os tra?os de personalidade predisp?em aos transtornos psiqui?tricos e que a maioria deles ? recorrente e cr?nico. Dessa forma, o presente estudo tem como objetivo investigar as bases biol?gicas e sociais do temperamento em modelos animais de temperamento e avaliar a rela??o do temperamento com hiperuricemia (eleva??o dos n?veis s?ricos de ?cido ?rico) e com o autorrelato de ter sido v?tima de bullying em humanos. Na avalia??o das bases neurobiol?gicas do temperamento foram usados modelos animais, no qual foram selecionados camundongos com alta e baixa explora??o em um teste campo aberto. Foram testados cem camundongos, e posteriormente selecionados os dez camundongos mais exploradores (HE) e os dez menos exploradores (LE), cujo mRNA de c?rtex frontal e estriado foi coletado para posteriormente ser avaliado atrav?s de chips para avalia??o da express?o g?nica (Genechip Mouse Gene 1.0 ST Array - Affymetrix). Os resultados mostraram 86 e 118 genes expressos diferencialmente (DEGS) no estriado e no c?rtex frontal, respectivamente. Atrav?s da an?lise dos DEGs os processos biol?gicos mais significativamente enriquecidos foram o do desenvolvimento do sistema nervoso e da fun??o e sinaliza??o celular, especialmente no estriado, numa compara??o entre animas HE com LE. Estes resultados sugerem o envolvimento de processos de transla??o e p?s-tradu??o, assim como os elementos sin?pticos do estriado nas diferen?as de caracter?sticas de comportamento explorat?rio. Nos estudos em humanos, os dados foram coletados em um grande levantamento via Web atrav?s do Brazilian Internet Study on Temperament and Psychopathology (BRAINSTEP). No estudo de bases biol?gicas do temperamento em humanos, analisamos o temperamento em 7.155 homens (5,1% hiperuric?micos) e 22.225 mulheres (1,8% hiperuric?micas). Indiv?duos hiperuric?micos apresentaram escores mais elevados em raiva e inferiores na inibi??o e controle, j? as mulheres hiperuric?micas tamb?m mostram uma maior sensibilidade emocional e um menor grau de vontade e de enfrentamento. Os resultados demonstraram que indiv?duos com hiperuricemia t?m mais tra?os emocionais e temperamentos afetivos externalizados e inst?veis. No estudo sobre as bases sociais do temperamento avaliamos o bullying durante a inf?ncia e adolesc?ncia, atrav?s de uma pergunta sobre tempo de exposi??o ao bullying (nenhum, <1 ano, 1 a 3 anos e > 3 anos). Tra?os emocionais e temperamentos afetivos foram avaliados com a Escala de Temperamento Afetivo e Emocional (AFECTS). Cerca de metade da amostra relatou exposi??o ao bullying e 10% relataram ter sido v?timas por mais de 3 anos. Vitimas de bullying tamb?m apresentam uma propor??o muito menor de temperamentos eut?micos e hipert?micos em ambos os sexos, o que foi compensado por um aumento, principalmente, na propor??o de tra?os depressivos, ciclot?micos e vol?til. Sofrer bullying foi associado com um impacto amplo e profundo sobre os dom?nios cognitivos e emocionais em todas as dimens?es de tra?os emocionais, e com temperamento afetivo internalizado e inst?vel. Esses resultados, em conjunto, mostram a import?ncia de poss?veis marcadores s?ricos (?cido ?rico) e fatores gen?ticos e sociais sobre os tra?os de temperamento.
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Efeito do estresse cr?nico imprevis?vel no metabolismo de nucleot?deos e nucleos?deos em enc?falo de zebrafish (Danio rerio)Zimmermann, Fernanda Francine 05 March 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-03-05 / According to data from the World Health Organization (WHO), stress affects more than 90% of the world's population and is considered a global epidemy. Stress has become an integral part of human life and organisms are constantly subjected to stressful stimuli that change various physiological processes, representing a risk factor for many diseases, such as cancer, cardiovascular, metabolic, infectious and gastrointestinal deseases and depression. The zebrafish (Danio rerio) has many similarities with mammalian in terms of overall organization and the functioning of their stress regulatory systems. The zebrafish hypothalamic-pituitary-interrenal (HPI), analogous to the mammalian hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA), has been found in zebrafish and the activation of this pathway is essential for the maintenance of vital functions in response to stressful events. Despite extensive knowledge regarding stress responses in mammals, data on the relationship between chronic unpredictable stress and its effects on purinergic signaling is limited. Purinergic signaling is mediated by ATP and adenosine receptor activation through P2 and P1, respectively. The catabolism of extracellular ATP to adenosine is promoted by the ectonucleotidases, such as Ecto-nucleoside triphosphate diphosphohydrolases (E-NTPDases) and ecto-5 '-nucleotidases (E-5?NT). Adenosine is deaminated by adenosine deaminase (ADA) producing inosine. Thus, these enzymes control the levels of extracellular nucleotides and nucleosides, exerting an influence on purinergic signaling. Considering some models of stress can affect the signalling systems, the objective of this study was to verify whether the unpredictable chronic stress changes ectonucleotidases and adenosine deaminase activities in zebrafish brain. In addition, we analyzed the metabolism of ATP as well as the expression of genes related to ADA, ada1, ada2.1, ada2.2, adaL, adaasi and the effects of agonists and antagonists of adenosine receptors in an unpredictable chronic stress model in zebrafish. Our results demonstrated that there are no changes on ATP (P = 0.1499), ADP (P = 0.3615) and AMP (P = 0.8987) hydrolysis in zebrafish brain membranes submitted to unpredictable chronic stress. In contrast, ecto-ADA activity significantly decreased (26.8%; 8,164 ? 0.78 NH3 min − 1 mg− 1 of protein; p 0.05; n = 5 <) in brain membranes of animals exposed to the unpredictable chronic stress when compared to the control group (11.15 ? 2.16 NH3 min − 1 mg − 1 of protein; p 0.05; n = 5). However, the activity of cytosolic ADA was not changed after the unpredictable chronic stress. Quantitative analysis by RT-qPCR did not show significant changes after chronic unpredictable stress exposure on gene expression in the genes ada1, ada2.1, ada2.2, adaL, adaasi. ATP metabolism in brain membrane preparations of zebrafish in the control group and stressed was measured by high-performance liquid chromatography (HPLC) and showed a significant increase of adenosine in stressed animals. Considering adenosine A1 receptor agonists have an anxyolitic activity and the A2A receptor antagonists can exert neuroprotective effects, we investigated the effect of administration of an agonist of A1 receptor, N⁶-ciclopentiladenosine (CPA), and an antagonist of A2A receptors, (ZM241385) on behavioral parameters of animals submitted to unpredictable chronic stress to check a possible relationship between the adenosinergic system and the stress. As a result we showed that these compounds have not been able to reverse the anxiogenic effect caused by unpredictable chronic stress. Since adenosine has neuromodulatory and anxiolytic effects, changes in its levels could play a role in counteracting the stress, which could be related to a compensatory mechanism in order to restore the homeostasis. / De acordo com dados da Organiza??o Mundial de Sa?de (OMS), atualmente o estresse afeta mais de 90% da popula??o mundial, sendo considerado uma epidemia global. O estresse tornou-se parte integrante da vida humana e os organismos s?o constantemente submetidos a est?mulos estressantes que alteram v?rios processos fisiol?gicos, sendo um fator de risco para diversas patologias, como c?ncer, doen?as cardiovasculares, metab?licas, infecciosas, gastrointestinais e depress?o. O peixe-zebra (Danio rerio) tem muitas semelhan?as com mam?feros em termos de organiza??o geral e o funcionamento dos respectivos sistemas reguladores do estresse. O eixo hipot?lamo-pituit?ria-interrenal (HPI), um sistema an?logo ao eixo hipot?lamo-pituit?ria-adrenal (HPA), foi descrito em zebrafish e a ativa??o desta via ? essencial para a manuten??o das fun??es vitais como resposta a eventos estressantes. Apesar do amplo conhecimento das respostas do estresse em mam?feros, os dados sobre a rela??o entre o estresse cr?nico imprevis?vel e seus efeitos na sinaliza??o purin?rgica s?o limitados. A sinaliza??o purin?rgica ? mediada por ATP e adenosina por meio da ativa??o dos receptores P2 e P1, respectivamente. O catabolismo de ATP extracelular at? adenosina ? promovido pelas ectonucleotidases, como as Ecto-nucleos?deo trifosfato difosfoidrolases (E-NTPDases) e Ecto-5 - nucleotidases (E-5?NT). A adenosina produzida pode ser desaminada pela adenosina desaminase (ADA), produzindo inosina. Assim, estas enzimas controlam os n?veis de nucleos?deos e nucleot?deos extracelulares, exercendo uma influ?ncia na sinaliza??o purin?rgica. Considerando que alguns modelos de estresse podem afetar os sistemas de sinaliza??o, o objetivo deste estudo foi verificar se o estresse cr?nico imprevis?vel altera as atividades ectonucleotid?sicas e adenosina desaminase em c?rebro de zebrafish. Al?m disso, analisamos o metabolismo do ATP, bem como a express?o de genes relacionados ? ADA, ada1, ada2.1, ada2.2, adaL, adaasi e os efeitos de agonistas e antagonistas de receptores de adenosina em zebrafish submetidos a um modelo de estresse cr?nico imprevis?vel. Nossos resultados demonstraram que n?o h? altera??es na hidr?lise de ATP (P = 0.1499), ADP (P = 0.3615) e AMP (P = 0.8987) em membranas cerebrais de zebrafish submetidos ao estresse cr?nico imprevis?vel. Em contraste, a atividade da ecto- ADA diminuiu significativamente (26,8%; 8.164 ? 0,78 NH3 min−1 mg−1 de prote?na; p < 0,05; n = 5) em membranas de c?rebro de animais expostos ao estresse cr?nico imprevis?vel quando comparado ao grupo controle (11.15 ? 2,16 NH3 min−1 mg−1 de prote?na; p < 0,05; n = 5). No entanto, a atividade da ADA citos?lica n?o foi alterada. A an?lise quantitativa por RT-qPCR n?o apresentou altera??es significativas ap?s a exposi??o do estresse cr?nico imprevis?vel na express?o g?nica nos genes ada1, ada2.1, ada2.2, adaL, adaasi. O metabolismo do ATP em prepara??es de membrana de c?rebro de zebrafish no grupo controle e estressado foi medido por cromatografia l?quida de alta efici?ncia (HPLC) e mostrou um aumento significativo de adenosina nos animais estressados. Considerando que os agonistas de receptores A1 t?m uma atividade ansiol?tica e os antagonistas dos receptores A2A podem exercer efeitos neuroprotetores, investigamos o efeito da administra??o de um agonista do receptor A1, N⁶-ciclopentiladenosina (CPA), e de um antagonista de receptores A2A, (ZM241385) em par?metros comportamentais de animais submetidos ao estresse cr?nico imprevis?vel, para verificar uma poss?vel rela??o entre o sistema adenosin?rgico e o estresse. Como resultado, observamos que esses compostos n?o foram capazes de reverter o efeito ansiog?nico causado pelo estresse cr?nico imprevis?vel. Uma vez que a adenosina tem efeitos neuromodulat?rios, as altera??es nos n?veis de adenosina podem desempenhar um papel nos mecanismos relacionados ao estresse, representando um mecanismo de compensa??o a fim de restaurar a homeostase.
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Avalia??o do papel do sistema purin?rgico e dopamin?rgico no efeito antidepressivo promovido por MK-801 em peixe-zebra (Danio rerio)Souza, Raquel Bohrer da Silva 25 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-25 / Depression is a serious and recurrent disease characterized by anhedonia, loss of interest in daily activities, appetite, and sleep disturbances, reduced concentration and psychomotor agitation. Antidepressant drugs currently used have a very slow onset of action, with that comes the need for fast-acting treatments. Therefore, there is a growing interest in NMDA antagonists as a target for the development of new antidepressant drugs. Considering that the purinergic and dopaminergic systems are involved in anxiety, depression, and sleep, we characterize the role of these signaling pathways on antidepressant effects induced by MK-801 in zebrafish. The animals treated with MK-801 at 5, 10, 15, and 20 ?M during 15, 30, and 60 minutes showed higher permanence in the top area of the tank, in comparison with the control group, indicating an antidepressant effect induced by this drug. The animals treated with MK-801 remained within 2 hours in the top of the tank when treated with 5 ?M MK-801 and 4 hours when treated with 20 ?M MK-801, returning to basal levels 24 hours after exposure.The repeated treatment did not induce cumulative effects, since animals treated daily for seven days showed the same pattern of behavioral response observed from the first day until the 7th day. In order to investigate the action of agonists and antagonists of A1 and A2A receptors and the influence of modulation on adenosine levels in antidepressant effects induced by MK-801, animals were pretreated with Caffeine, DPCPX, CPA, ZM 241385, CGS 21680, AMPCP, EHNA, dipyridamole, and NBTI before the exposure to MK-801 for 30 minutes. The nonselective adenosine receptor antagonist Caffeine (50 mg/kg) and the selective A1 adenosine receptor antagonist DPCPX (15 mg/kg) blocked the behavioral changes induced by MK-801. Dipyridamole (10 mg/kg), a selective inhibitor of nucleoside transport (NT), exacerbates the behavioral changes induced by MK-801. Dopamine receptor antagonists (sulpiride and SCH23390) did not induce changes on the behavioral alterations induced by MK-801. Our results have shown that the antidepressant effects induced by MK-801 in zebrafish are mediated by the activation by A1 adenosine receptor. / A depress?o ? uma doen?a grave, recorrente, caracterizada por anedonia, perda de interesse em atividades di?rias, dist?rbios do apetite e do sono, concentra??o reduzida e agita??o psicomotora. Os f?rmacos antidepressivos utilizados atualmente t?m um in?cio de a??o muito lento, com isso, surge a necessidade de tratamentos de a??o r?pida. Portanto, h? um interesse crescente em antagonistas de receptores NMDA como um alvo para o desenvolvimento de novos f?rmacos antidepressivos. Considerando-se que os sistemas purin?rgicos e dopamin?rgicos est?o envolvidos na ansiedade, sono e depress?o, caracterizamos o papel destas vias de sinaliza??o sobre os efeitos antidepressivos induzidos por MK-801, um antagonista NMDA, em peixe-zebra. Os animais tratados com MK-801 em doses de 5, 10, 15 e 20 ?M durante 15, 30 e 60 minutos apresentaram maior perman?ncia na ?rea superior do aqu?rio, em compara??o com o grupo controle, indicando um efeito antidepressivo induzido por este composto.Os animais tratados com MK-801 permaneceram at? 2 horas na parte superior do aqu?rio quando tratados com 5 ?M de MK-801 e 4 horas quando tratados com 20 ?M MK-801, retornando aos par?metros basais ap?s 24 horas de exposi??o. O tratamento repetido n?o induziu efeitos cumulativos, uma vez que os animais tratados diariamente durante sete dias apresentaram o mesmo padr?o de resposta comportamental observada desde o primeiro at? o dia 7? dia. Com o objetivo de investigar a a??o dos agonistas e antagonistas dos receptores A1 e A2A e a influ?ncia da modula??o dos n?veis de adenosina nos efeitos antidepressivos induzidos por MK-801, os animais foram pr?-tradados com cafe?na, DPCPX, CPA, ZM 241385, CGS 21680, AMPCP, EHNA, Dipiridamol e NBTI por 30 minutos antes da exposi??o ao MK-801. O antagonista n?o seletivo de receptores de adenosina cafe?na (50 mg/kg) e o antagonista seletivo do receptor A1 DPCPX (15 mg/kg) bloquearam as altera??es comportamentais induzido pelo MK-801.O Dipiridamol (10 mg/kg), um inibidor n?o seletivo do transportador de nucleos?deo (NT), exacerbou as altera??es comportamentais induzidos pelo MK-801. Os antagonistas dos receptores de dopamina (sulpirida e SCH23390) n?o apresentaram modifica??es nas altera??es comportamentais induzidas por MK-801. Os nossos resultados sugerem que o efeito antidepressivo induzido por MK-801 em peixe-zebra ? mediado principalmente pela ativa??o do receptor de adenosina A1.
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Avalia??o do metabolismo da adenosina em um modelo de s?ndrome alco?lica fetal em zebrafish (Danio rerio)Lutte, Aline Haab 18 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-18 / The ethanol exposure during early embryonic development can cause morphological and behavioral changes even when ingested in low doses. Growth retardation, microcephaly and mental retardation are some of the features observed in children with FAS (fetal alcohol syndrome) whose mothers ingested ethanol during pregnancy. The mechanisms by which ethanol affects embryonic development and cause such changes have not been fully elucidated. The increase in the extracellular adenosine levels after chronic and acute exposure to ethanol indicates that the purinergic system has an important role in this situation. Adenosine is a neuromodulator that acts through the activation of metabotropic receptors type P1 (A1, A2A, A2B and A3) and can act as an endogenous neuroprotector. In the extracellular space, adenosine can be produced by sequential hydrolysis of adenosine triphosphate (ATP) held by ectonucleotidases, a cascade of a family of enzymes located on the cell surface, which the key process to hydrolyze to adenosine is performed by ecto-5'-nucleotidase. The use of zebrafish in toxicology studies and development offers a number of advantages. Its size and breeding allow the maintenance of a large quantity of fish in a relatively small space. The production of a large number of eggs and the development occurs rapidly, and progresses through well-defined steps. Recent studies have employed the zebrafish as a model for fetal alcohol syndrome and demonstrated that embryonic exposure to ethanol results in phenotypes comparable to those observed in other vertebrate models. The objective of this study was to evaluate the role of adenosine metabolism in the morphological and locomotor parameters of zebrafish larvae exposed to ethanol. The results showed that in addition to morphological damage already known, there is a change in the enzymatic activity of ecto-5'-nucleotidase in larvae of seven days, in both treatments, acute and chronic, independent of gene expression form, which in time was not changed. Pre-treatment with AOPCP, an inhibitor of ecto-5'- nucleotidase, was unable to prevent the morphological damage in a relevant way, although statistically there was a slight prevention. Pre-treatment with dipyridamole, an adenosine transport blocker further worsened the effects caused by ethanol. Considering the changes that occur in extracellular levels of adenosine after exposure to ethanol and the involvement of the purinergic system in early stages of development, our results suggest that there is a combined action of the enzyme ecto-5'-nucleotidase and nucleoside transporters in this rising of extracellular adenosine levels, with emphasis on the inhibition of nucleoside transporters. Additionally, we can infer that there is a correlation between elevated levels of adenosine and morphological defects after exposure to ethanol. These results suggest that the purinergic system is a target for the toxic effects induced by ethanol in the early stages of development. / A exposi??o ao etanol durante as fases iniciais de desenvolvimento embrion?rio pode causar altera??es morfol?gicas e comportamentais, mesmo quando ingerido em baixas doses. Retardo no crescimento, microcefalia e retardo mental s?o algumas das caracter?sticas observadas em crian?as portadoras da SAF (s?ndrome alco?lica fetal), cujas m?es ingeriram etanol durante a gesta??o. Os mecanismos pelos quais o etanol afeta o desenvolvimento embrion?rio e causa tais altera??es ainda n?o foram completamente desvendados. O aumento extracelular da adenosina ap?s exposi??es cr?nicas e agudas ao etanol indica que o sistema purin?rgico tem um importante papel nesses mecanismos. A adenosina ? um neuromodulador que atua atrav?s da ativa??o de receptores metabotr?picos do tipo P1 (A1, A2A, A2B e A3) e pode agir como um neuroprotetor end?geno. No espa?o extracelular, a adenosina pode ser produzida pela hidr?lise sequencial da adenosina trifosfato (ATP) realizada pela cascata das ectonucleotidases, uma fam?lia de enzimas localizada na superf?cie celular, sendo o processo chave ? hidr?lise da adenosina monofosfato (AMP) ? adenosina ? realizada pela ecto-5?- nucleotidase. A utiliza??o do peixe-zebra em estudos toxicol?gicos e de desenvolvimento oferece uma s?rie de vantagens. Seu tamanho e a forma de cria??o permitem a manuten??o de uma grande quantidade de peixes em um espa?o relativamente pequeno. O cruzamento resulta em um grande n?mero de ovos e o desenvolvimento ocorre rapidamente, e progride atrav?s de etapas bem definidas. Estudos recentes t?m empregado o peixe-zebra como modelo para a s?ndrome alco?lica fetal e demonstrado que a exposi??o embrion?ria ao etanol resulta em fen?tipos compar?veis com aqueles observados em outros modelos vertebrados. O objetivo deste estudo foi avaliar o papel do metabolismo da adenosina nos par?metros morfol?gicos e locomotores de larvas de peixe-zebra expostas ao etanol. Os resultados obtidos demonstraram que al?m dos danos morfol?gicos j? conhecidos, h? altera??o na atividade enzim?tica da ecto- 5?-nucleotidase em larvas de 7 dias, em ambos os tratamentos, agudo e cr?nico, de uma forma independente da express?o g?nica, que por sua vez, n?o foi alterada. O tratamento pr?vio com AOPCP, um inibidor da ecto-5?-nucleotidase, n?o foi capaz de prevenir os danos morfol?gicos de forma relevante, embora estatisticamente verificou-se uma leve preven??o. O pr?-tratamento com dipiridamol, um bloqueador do transporte de adenosina, piorou ainda mais os efeitos causados pelo etanol. Considerando as mudan?as que ocorrem nos n?veis extracelulares de adenosina ap?s exposi??es ao etanol e o envolvimento do sistema purin?rgico em est?gios iniciais do desenvolvimento, nossos resultados sugerem que existe uma a??o combinada da enzima ecto-5?-nucleotidase e dos transportadores de nucleos?deos nesta eleva??o dos n?veis extarcelulares de adenosina, com ?nfase na inibi??o dos transportadores de nucleos?deos. Adicionalmente, podemos inferir que h? uma correla??o entre a eleva??o dos n?veis de adenosina e os defeitos morfol?gicos caracter?sticos da exposi??o ao etanol. Tais resultados sugerem que o sistema purin?rgico ? um alvo para os efeitos t?xicos induzidos pelo etanol nas fases iniciais do desenvolvimento.
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Estudo de altera??es em c?lulas Treg e TH17 no linfonodo drenante de animais com tumoresSalin, M?lvaro Maculan 12 March 2014 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-06-19T11:36:44Z
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Previous issue date: 2014-03-12 / Melanoma is one of the most aggressive malignant tumors, and its incidence has been increasing steadily in recent years. Usually in the early stages, treatment for melanoma is local surgery with reasonable efficiency. However, treatments such as chemotherapies for advanced melanoma have limited benefits, prolonging the patient's life in a few months. Thus the search for more effective therapies for melanoma is necessary. More recent studies suggest that tumor immune response conducted by subtypes of CD4+ T helper cells subsets have an important role in cancer control. According to tumor infiltrating Th17 and Treg cellsand the cytokines they secrete the tumor microenvironment profile may be suggested anti or pro-tumor activities or exerted by these cells. In this study, we investigated the transcriptional markers of CD4+Foxp3+ T cells and CD4+ROR?t+ T cells in draining lymph nodes of animals throughout the melanoma tumor growth and evaluate whether the combined action of cisplatin (cis-diamino-dichloro-platin, CDDP) and TLR2 (peptidoglycan) or TLR3 (acid-Polyribosilic Polyribocytidilic) or TLR4 (lipopolysaccharide) agonists, can change these parameters. The animals were injected with melanoma cell line B16F10 and according tumor progression the tumor draining lymph node (TDLN) were excised for analysis of Treg and Th17 cells by flow cytometry. Furthermore, we analyzed the survival of animals treated with combined therapies. We found an increase in the percentage and absolute number of Th17 and Treg cells in TDLN according tumor progression, which was consistent with previous studies. Our results indicate that treatment with cisplatin promotes tumor growth by increasing Treg and Th17 cells. Treatment with CDDP plus TLR2 agonist significantly decreases the percentage of Th17 cells in TDLN. We demonstrated here, that combinated CDDP and TLR3 or TLR4 agonist therapy impairs tumor growth and modulate the frequency of these cells by decreasing the percentage of CD4+Foxp3+ T cells. In addition, this combination also showed a modest increase insurvivalof the melanoma bearing mice. These results showed that TLRs agonists may be used in combination with cisplatin as a potential adjuvant capable impair tumor growth in melanoma bearing mice. / Melanoma ? um dos tumores malignos mais agressivos, e sua incid?ncia vem aumentando continuamente nos ?ltimos anos. Geralmente em est?gios iniciais, o tratamento para melanoma ? local, por cirurgia, com razo?vel efic?cia. Contudo, os tratamentos para melanoma em est?gios avan?ados por quimioterapia t?m benef?cios limitados, prolongando a vida do paciente em poucos meses. Assim se faz necess?ria a busca por terapias mais efetivas para melanomas. Estudos mais recentes sugerem que a resposta imunol?gica tumoral realizada pelos subtipos de c?lulas T CD4+ auxiliares possuem papel importante no controle do c?ncer. Conforme o infiltrado tumoral de c?lulas Th17 e Treg e o perfil de citocinas que elas secretam no microambiente tumoral, pode-se sugerir atividades anti ou pr?-tumorais exercidas por essas c?lulas. Neste estudo, n?s investigamos os marcadores transcricionais de c?lulas T CD4+Foxp3+ e c?lulas T CD4+ROR?t+ em linfonodos drenantes de animais com melanoma ao longo do crescimento tumoral e avaliamos se a a??o combinada de cisplatina (cis-diamino-dichloro-platin, CDDP) com agonistas de TLR2 (Peptidoglicano) ou TLR3 (?cido Polyribosilic-Polyribocytidilic) ou TLR4 (Lipopolissacar?deo) podem alterar esses par?metros. Os animais foram injetados com c?lulas de melanoma linhagem B16F10 e conforme a progress?o tumoral os linfonodos drenantes tumorais (TDLN) foram excisados para an?lise de c?lulas Th17 e Treg por citometria de fluxo. Al?m disso, analisamos a sobrevida dos animais com a a??o combinadas das terapias. Encontramos um aumento na porcentagem e n?mero absoluto de c?lulas Th17 e Treg no TDLN conforme a progress?o tumoral o qual foi condizente com estudos anteriores. Nossos resultados indicam que o tratamento apenas com cisplatina, promove o crescimento tumoral atrav?s do aumento de c?lulas Th17 e Treg. O tratamento de cisplatina com agonista de TLR2 diminui consideravelmente a porcentagem de c?lulas Th17 no TDLN. Demonstramos aqui que a combina??o de terapias utilizando CDDP juntamente com agonistas de TLR3 ou TLR4, prejudica o crescimento tumoral e pode modular a frequ?ncia dessas c?lulas atrav?s da diminui??o na porcentagem de c?lulas TCD4+Foxp3+. Adicionalmente, essa combina??o tamb?m mostrou um modesto aumento na sobreviv?ncia dos animais. Esses resultados mostram que agonistas de TLRs podem ser utilizados em combina??o com cisplatina como potencial adjuvante capaz de induzir inibir o crescimento tumoral em modelo de melanoma murino.
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Efeitos do exerc?cio f?sico na mem?ria e comportamento ansioso de camundongos expostos ? separa??o maternaWearick-Silva, Luis Eduardo 27 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-27 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Introduction: The exposure to early life stress (ELS) has been associated with different
psychopathologies in adulthood such as mood- and anxiety-related behaviors. In animal
research, the maternal separation paradigm has been widely used to investigate the longterm
effects of ELS. Considering the negative effects of ELS on development,
evidences suggesting that exercise could attenuate or even reverse such effects are
beginning to emerge. This article aimed to investigate the impact of physical exercise on
anxiety-like behavior and spatial memory in mice exposed to maternal separation.
Method: Litters were assigned to one of 4 groups: The MS animals were subjected to a
procedure where pups were separated from their dams daily for 180 minutes, from
postnatal days (P) 2 to 15. The exercise protocol was performed at P24 and consisted of
one week of habituation to treadmill and 3 weeks of exercise, with 60 min of duration at
10 m/min for 5 days a week. The performance in an open field test was evaluated to
assess locomotor activity and anxiety-like behavior. Object recognition was also
performed to investigate the effects of MS and exercise on spatial memory.
Results: Both maternal separation and exercise increased locomotor activity in the open
field. However, anxiety-like behavior was not affected by MS or exercise. In object
recognition, all groups presented the same exploratory behavior. However, MS impaired
the capability to recognize the new object, suggesting impairment in spatial memory. In
time, MS mice that exercised were able to reverse the negative effects of MS, showing a
performance similar to the control group (AFR). Taken together, our results suggest that
the disruption of the normal development course?here via maternal separation
paradigms?is harmful to a good development and may result in cognitive and
behavioral difficulties in adulthood. Furthermore, the early engagement in a program of
exercise can be effective in reversing the impairments of ELS. / Introdu??o: A exposi??o ao estresse no in?cio da vida est? associada com diferentes
psicopatologias na fase adulta como transtornos de humor e ansiedade. Em pesquisas
com modelos animais, o paradigma de separa??o materna ? amplamente utilizado para
investigar os efeitos de longo prazo do estresse no in?cio da vida. Considerando os
efeitos negativos do estresse no desenvolvimento, come?am a surgir evid?ncias que o
exerc?cio poderia atenuar ou at? mesmo reverter os efeitos delet?rios do estresse. Este
trabalho se prop?s a investigar o impacto do exerc?cio f?sico no comportamento ansioso
e mem?ria espacial de camundongos f?meas expostas a separa??o materna.
M?todo: Os filhotes foram expostos a um protocolo de separa??o materna no qual eram
separados da m?e diariamente por 180 minutos, do segundo dia p?s natal (P2) ao P15. O
protocolo de exerc?cio f?sico foi realizado no P24, e consiste em uma semana de
habitua??o a esteira el?trica e tr?s semanas de exerc?cio, com 5 sess?es por semana de
60 minutos cada, a uma velocidade de 10m/min. O comportamento no teste de campo
aberto foi avaliado para investigar a atividade locomotora e o comportamento ansioso.
O teste de reconhecimento de objetos foi realizado para investigar o efeito do exerc?cio
e da separa??o materna na mem?ria espacial.
Resultados: A separa??o maternal e o exerc?cio aumentaram a atividade locomotora
dos animais no teste de campo aberto. O comportamento ansioso n?o foi afetado pela
separa??o materna ou exerc?cio. No reconhecimento de objetos, todos os grupos
apresentaram o mesmo comportamento explorat?rio. Entretanto, a separa??o materna
prejudicou a capacidade de reconhecimento do objeto novo, sugerindo um preju?zo na
mem?ria espacial. Ainda, os animais separados da m?e que realizaram o protocolo de
exerc?cio foram capazes de reverter os efeitos negativos da separa??o materna, onde
mostraram um resultado semelhante ao grupo controle.
Conclus?es: Nossos resultados sugerem que a interrup??o do curso normal do
desenvolvimento, aqui realizados atrav?s da separa??o materna ? prejudicial para um
bom desenvolvimento e pode levar a dificuldades cognitivas e comportamentais na vida
adulta. Al?m disso, a participa??o precoce em um programa de exerc?cios f?sicos pode
ser efetivo para reverter os preju?zos causados pelo estresse no in?cio da vida.
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Efeitos do estresse neonatal por lipopolissacar?deo sobre a resposta a um est?mulo inflamat?rio em camundongosBarth, Cristiane Raquel 13 February 2015 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-10-02T11:49:35Z
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Previous issue date: 2015-02-13 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul - FAPERGS / Neonatal exposure to lipopolysaccharides (LPS) generates a stressful stimulus capable of affecting the development of important systems, which causes lasting behavioral and neuroendocrine alterations. The aim of this study is to evaluate the response to an inflammatory stimulus in Balb/c mice exposed to LPS-induced neonatal stress at different ages and genders. Mice underwent intraperitonial injections on postnatal days 3 and 10 with either LPS (100ug/Kg) or saline solution. After 21 or 60 days of age, either saline solution was injected or an inflammatory stimulus was induced by the injection of 1% carrageenan. Inflammatory cytokines, reactive oxygen species and NETs production were measured in the peritoneal lavage. Our findings indicate that LPS-induced neonatal stress can reduce inflammatory cytokines in young animals, males and females. In adults, however, only females showed the same response pattern. In nLPS group, an increase in NETs production was observed in animals that were 60-days-old when compared to 21-days-old in both genders, which indicates an effect of neonatal stress on the ontogeny of NETs formation. The production of ROS was not affected by neonatal stress, even though an increased production was found among adults regardless of neonatal intervention. The results shown here indicate that LPS-induced neonatal stress can alter cytokine production in response to inflammatory stimuli at different ages, in a gender dependent way. Moreover, it seems like the formation of NETs throughout life is also influenced by alterations undergone during the neonatal period. / A exposi??o neonatal ao lipopolissacar?deo (LPS) gera um estimulo estressor capaz de afetar o desenvolvimento de importantes sistemas, dando origem a altera??es comportamentais e neuroend?crinas duradoras. O objetivo desta disserta??o ? avaliar a resposta a um est?mulo inflamat?rio em camundongos Balb/c submetidos ? estresse neonatal por LPS em diferentes idades e sexos. Os camundongos receberam, no 3? e 10? dias de vida, inje??o i.p. de LPS (100?g /Kg) ou solu??o salina. Ap?s 21 ou 60 dias de vida, os mesmos foram submetidos ? inje??o de solu??o salina ou a um est?mulo inflamat?rio atrav?s da inje??o de carragenina 1%. Foram mensurados no lavado peritoneal citocinas inflamat?rias, esp?cies reativas de oxig?nio e produ??o de Redes Extracelulares de Neutr?filos (NETs). Os resultados encontrados demonstram que o estresse neonatal por LPS diminui a libera??o de citocinas inflamat?rias nos animais jovens machos e f?meas. J? nos adultos, somente as f?meas apresentaram a mesma resposta. Foi encontrado um aumento na produ??o de NETs nos animais do grupo nLPS com 60 dias quando comparado com animais nLPS com 21 dias, em ambos os sexos, indicando um efeito do estresse neonatal sobre a ontogenia da forma??o de NETs. A produ??o de ROS n?o sofreu influ?ncia do estresse neonatal, por?m foi encontrada uma maior produ??o na idade adulta, independente da interven??o neonatal. Os resultados do presente estudo indicam que o estresse neonatal por LPS altera a produ??o de citocinas em resposta a um est?mulo inflamat?rio em diferentes idades, em um efeito dependente do sexo. Al?m disso, parece que a forma??o de NETs ao longo da vida tamb?m ? influenciada pelas altera??es no per?odo neonatal.
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Avalia??o histol?gica e histomorfom?trica da regenera??o ?ssea guiada sob membranas biol?gicas n?o reabsorv?veis em ratas osteopor?ticas com e sem tratamento com ?cido zoledr?nicoBusetti, Juliano 27 October 2015 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-02-12T17:10:17Z
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Previous issue date: 2015-10-27 / Regeneration of lost tissues can be obtained in a predictable way by using the
Guided Bone Regeneration (GBR) concept. The development of such concept is based
on the observation that to regenerate a certain type of tissue, specific cells with the
ability to reconstruct such kind of tissue must repopulate the wound. GBR was applied to
heal different type of bone defects and the isolation of it by using resorbable and nonresorbable
membranes resulted in a predictable healing through the formation of new
bone. Nowadays the GBR concept is used for the treatment of multiple clinical situations
in dentistry, even with dental implants.
Osteoporosis is the most common chronic bone disease and may interfere in the
healing of regenerative procedures. The increase in life expectancy results in a larger
number of elderly patients referred for bone regeneration and dental implants.
Osteoporosis is associated with aging, menopause and chronic use of some types of
drugs. Regenerative protocols must be postulated taking into account this category of
patients. Limited scientific evidence suggests that osteoporosis can negatively influence
bone healing as well as the osseointegration of dental implants. In addition to disease,
the use of drugs for its prevention and treatment may affect healing of GBR procedures.
Bisphosphonates (BP) are the most frequently used drugs for treatment and prevention
of osteoporosis. The drug acts mainly in the inhibition of bone resorption by its action on
osteoclasts. Among the commercially prescribed BP, zoledronic acid (ZA) is known to be
the most potent of all.
In the first paper of this thesis osteoporosis was induced in rats and these
animals were submitted to regenerative procedures comparing samples with and without
osteoporosis as well as with and without the use of ZA. To assess GBR, critical size
defects (CSD) were made in the animals? calvarial bone. Microporous non-resorbable
PTFE (polytetrafluorethylene) membranes were used to promote GBR in healthy,
osteoporotic and osteoporotic animals treated with ZA. Forty-eight Wistar rats with 6
months of age were included in the study. Experimental osteoporosis was induced by
ovariectomy (OVX) associated with hipocalcic diet in 32 animals. Sixteen OVX rats
received a single dose of ZA (OZ) while the other 16 osteoporotic rats received no
treatment (O). The remaining 16 animals were SHAM operated; the ovaries were exposed but not removed, being considered the control group (C). Six weeks after
osteoporosis induction, each animal from the OZ group received a single dose of ZA.
One week latter (7 weeks after baseline) two 5-mm CSD were performed bilaterally in
the parietal bones and one of these defects was treated with two membranes, one
located internally, in contact to the Dura, and the other was placed on top of the defect.
GBR healing periods were 30 and 60 days for each group. Evaluation of new bone
formation (NBF) was done by qualitative and quantitative histological analysis.
Differences in means between groups (O, OZ and C), the use of membranes as well as
the observation period (days 30 and 60) were analyzed by ANOVA for each variable.
When a statistically significant difference was identified between the averages, the
Bonferroni post hoc test was used. The results showed that treatment with ZA (p =
0.001) and the use of membranes (p = 0.000) significantly increased the amount of
regenerated bone tissue and the presence of osteoporosis may have reduced NBF (p =
0.028). / Regenera??o de tecido ?sseo perdido pode ser alcan?ada de forma previs?vel
utilizando-se o conceito de Regenera??o ?ssea Guiada (ROG). O desenvolvimento
deste conceito ? baseado na observa??o de que para realizar a regenera??o de um tipo
de tecido, c?lulas espec?ficas, com habilidade de regenerar este tecido
especificamente, devem repopular a ferida. Quando ROG foi utilizada para regenera??o
de v?rios tipos de defeitos ?sseos, o isolamento destes, com o uso de barreiras f?sicas
reabsorv?veis e n?o reabsorv?veis, as membranas, resultou em uma cicatriza??o
previs?vel atrav?s da forma??o de novo tecido ?sseo. Atualmente, o pr?nc?pio de ROG ?
usado para o tratamento de v?rias situa??es cl?nicas na odontologia, com ou sem o uso
associado de implantes dent?rios.
Osteoporose ? a doen?a ?ssea cr?nica mais prevalente e pode interferir na
cicatriza??o de procedimentos regenerativos. O aumento na expectativa de vida da
popula??o resulta em um maior n?mero de pacientes idosos indicados para
regenera??o ?ssea e implantes dent?rios. Considerando que a osteoporose est?
relacionada com fatores como idade, menopausa e uso cr?nico de alguns tipos de
f?rmacos, a preval?ncia desta doen?a ? alta. Protocolos regenerativos devem ser
postulados levando-se em conta esta categoria de pacientes. Por?m, limitada evid?ncia
cient?fica sugere que osteoporose pode influenciar negativamente a cicatriza??o ?ssea
assim como a osseointegra??o de implantes dent?rios. Somado ? doen?a, o uso de
drogas para preven??o e tratamento da osteoporose pode influenciar na cicatriza??o de
procedimentos regenerativos.
Bisfosfonatos (BF) s?o os f?rmacos mais utilizados para tratamento da
osteoporose. A droga age na inibi??o da reabsor??o ?ssea atrav?s da sua a??o
principalmente sobre os osteoclastos. Dentre os BF existentes comercialmente, o ?cido
zoledr?nico (AZ) ? reconhecidamente o mais potente de todos.
Sendo assim, o primeiro artigo desta tese buscou criar condi??es de osteoporose
em ratas e, nestes animais, procedimentos regenerativos foram feitos comparando
amostras com e sem osteoporose assim como com e sem o uso de AZ. Para avaliar
ROG, defeitos cr?ticos (CSD) foram feitos na calv?ria dos animais. Membranas n?o
reabsorv?veis microporosas de teflon foram utilizadas para ROG em animais saud?veis, osteopor?ticos e osteopor?ticos tratados com AZ. Quarenta e oito ratas Wistar, com 6
meses de idade, foram inclu?das no estudo. Osteoporose experimental foi induzida
atrav?s de ovariectomia (OVX) associada ? dieta hipoc?lcica em 32 animais. Dezesseis
ratos OVX receberam uma dose ?nica de AZ (OZ) enquanto as outras 16 ratas
osteopor?ticas n?o receberam tratamento (O). Os demais 16 animais foram submetidos
? cirurgia controle, onde os ov?rios n?o foram removidos, sendo considerado o grupo
controle (C). Seis semanas ap?s a indu??o da osteoporose, o grupo OZ recebeu uma
dose ?nica de AZ. Ap?s mais uma semana (7 semanas ap?s OVX), dois CSD de 5 mm
foram feitos, bilateralmente, nos ossos parietais, sendo que um destes defeitos foi
tratado com duas membranas, uma instalada internamente ao defeito, sobre a dura
mater, e outra na por??o externa. Os per?odos de cicatriza??o de ROG foram de 30 e
60 dias para cada grupo. Avalia??o da forma??o de tecido ?sseo (NBF) foi feita atrav?s
de an?lise histol?gica qualitativa e quantitativa. Diferen?as entre as m?dias entre os
grupos (O, OZ e C), o uso de membranas assim como o per?odo de observa??o (30 e
60 dias) foram analisados atrav?s de ANOVA para cada vari?vel. Quando uma
diferen?a estat?stica era identificada entre as m?dias, o teste p?s hoc Bonferroni foi
utilizado. Os resultados mostraram que o tratamento com AZ (p=0,001) e o uso de
membranas (p=0,000) aumentaram significativamente a quantidade de tecido ?sseo
regenerado e que a presen?a de osteoporose pode ter reduzido a forma??o de novo
osso (p=0,028).
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Walter Benjamin e a categoria de experi?ncia (Erfahrung)Bortolini, Bruna de Oliveira 03 March 2016 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-03-29T13:22:57Z
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Previous issue date: 2016-03-03 / This study deals with the category of Experience (Erfahrung) in the writings of Walter Benjamin. To this end, it initially investigates the context lived by the author in the modern period with its technological and scientific changes and the influences that he received from the philosopher Franz Rosenzweig, aspects that decisively will mark his own understanding about that category. Secondly, it searches out to highlight the understanding of Benjamin on the subject and the constellation of elements that are related to it, among which we can point the question of time, narrative, tradition, memory and thresholds situations. Still showing the impoverishment of the very notion of Experience against the advent of modernity and the impacts of World War I, as well as its consequent reduction of the scope of experiment occurred in that period. Also adding to this, an instrumental conception of language and philosophy which is now used only as a guide to scientific knowledge. Such point also involves a criticism of the theory of knowledge of Immanuel Kant and the interpretations of it carried out by the school of Marburg. That?s the reason why it discusses, finally, the urgent need to recognize the poverty of Experiences in which we live and the requirement to recover the Experience to its fullest to the speech, especially the philosophical, in order to resume the expressive character of philosophy itself, once consigned to oblivion, as well as its ability to think in temporality. / O presente estudo versa sobre a categoria de Experi?ncia (Erfahrung) no pensamento de Walter Benjamin. Para tanto, investiga inicialmente o contexto vivido pelo autor no per?odo moderno com suas transforma??es tecnol?gicas e cient?ficas e as influ?ncias por ele recebidas do fil?sofo Franz Rosenzweig, aspectos que de forma determinante ir?o marcar a sua pr?pria compreens?o a respeito de tal categoria. Num segundo momento, busca destacar, ent?o, a compreens?o de Benjamin sobre o tema, bem como a constela??o de elementos que a este est?o relacionados, dentre os quais se podem apontar a quest?o do tempo, da narrativa, da tradi??o, da mem?ria e das situa??es limiares. Evidenciando ainda o empobrecimento da pr?pria no??o de Experi?ncia frente ao advento da modernidade e aos impactos da Primeira Guerra Mundial, assim como sua consequente redu??o ao ?mbito do experimento ocorrida nesse per?odo. Agregando a isso tamb?m uma concep??o instrumental da linguagem e da filosofia que passa a ser utilizada exclusivamente como guia para o conhecimento cient?fico. Ponto que envolve ainda uma cr?tica ? teoria do conhecimento de Immanuel Kant e as interpreta??es dela realizadas pela escola de Marburg. Raz?o pela qual discute, por fim, a urg?ncia de se reconhecer a pobreza de Experi?ncias em que vivemos e a exig?ncia de recuperar a Experi?ncia em sua plenitude ao discurso, em especial o filos?fico, como forma de retomar o car?ter expressivo da pr?pria filosofia, outrora relegado ao esquecimento, bem como sua capacidade de pensar na temporalidade.
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