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"Efeito da colchicina na fibroses hepatica induzida quimicamente em coelhos"

Brandão, Clodomir Garcia 25 March 1999 (has links)
Orientador: Jose Pedrazzoli Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-24T21:48:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Brandao_ClodomirGarcia_M.pdf: 4209082 bytes, checksum: 8e96be5381245e8bb8c9f6f4f60c8fa6 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O desenvolvimento de fibrose é um ponto fundamental na formação da cirrose hepática e sua compreensão é essencial para o entendimento da fisiopatologia da cirrose e da conseqüente hipertensão portal. Assim, o desenvolvimento de um modelo experimental adequado de fibrose hepática é útil para o entendimento das enfermidades que podem evoluir para a cirrose hepática. A colchicina tem sido usada em pacientes com cirrose hepática mas efeitos não são totalmente conhecidos. Este estudo teve como objetivo desenvolvimento da fibrose hepática pela administração de tetracloreto de carbono (CCI4) por via intragástrica e o de avaliar o efeito da administração de colchicina neste modelo. Para este estudo foram utilizados 37 coelhos machos da raça New Zealand .(2,73 :t 0,05 Kg), os quais receberam água e ração ad libitum ao longo go período de experimentação. Estes animais foram divididos em 5 grupos. Catorze dias após o começo do tratamento com fenobarbita,1 os animais começaram a receber semanalmente o CCI4 (dose inicial de 20 mg diluído em-óleo I de milho a 10 %) por via intragástrica. A dose foi ajustada de acordo com controles bioquímicos indicativos de lesão hepática (aspartato aminotransferase [AST] e alanina aminotransferase [AL T], visando-se manter tais níveis plasmáticos entre 400 e 800 UII). Amostras de sangue dos animais foram coletadas 24 h após cada administração de CCI4, para dosagem de aminotransferases (AST e AL T), bilirrubinas (total e indireta), gama glutamil transpeptidase (y-GT), proteínas e albumina. Além dos controles bioquímicos, os animais foram pesados semanalmente. Para avaliar os efeitos do tratamento com fenobarbital e CCI4 sobre o fluxo sangüíneo hepático, foram determinadas as velocidades de depuração do verde de indocianina (ICG) antes e após o final do tratamento (aproximadamente 8 mg/kg em solução salina). A colchicina foi administrada diariamente em 2 grupos de animais (a partir da 11 a semana de tratamento com CCI4 e em outro, desde o início do tratamento com CCI4). Para este trabalho foram feitos 2 grupos controles, onde um dos grupos recebeu doses diárias de fenobarbital durante todo o experimento (controle fenobarbital) e o outro grupo apenas foi tratado com ração e água ad libitum. ' Ao final do período de estudo os animais foram sedados e sacrificados com' uma injeção de ar i. v. e foram retirados 3 fragmentos de cada lobo hepático parR análise histológica. Um número maior de animais que não recebeu colchicina desenvolveu cirrose, comparado com o grupo que recebeu a droga (8/10 vs. 0/10, p<, 0.01), tendo a fibrose sido menor nos animais tratados com colchicina (p<O. 01). Coelhos com 16 - semanas de tratamento com colchicina tiver~m, no final do experimento, ICG, y-GT, bilirrubina e ganho de peso semelhantes aos dos grupos cc 1trole, ao contrário dos animais que não receberam. A baixa letalidade e o elevado número de animais que desenvolveram cirrose hepática (8/10) leva a concluir que este tipo de modelo é eficaz. o peso corporal dos animais não serve como parâmetro para o ajuste da dose de tetracloreto de carbono, pois não houve alteração do mesmo durante o tratamento com CCI4. - Para o controle do desenvolvimento da lesão hepática, apenas a determinação das aminotransferases é suficiente / Abstract: The fibroses development is a fundamental point in the formation of the hepatic cirrhosis, and its comprehension is essential for the understandíng of ~the physiopatology of the cirrhosis and the consequent portal hypertension. The development of an adapted experimental model of hepatic fibroses is useful for the study of the illnesses that may develop the hepatic cirrhosis. The colchicine has been used in patients wíth hepaticcirrhosis, but its effects are not totally known. The aim of this study was to evaluate the colchicine effects in the hepatic cirrhosis chemically deveioped and to evaiuate if the Proctr Chatamra model is suitable to apply in rabbits. Thirty seven male New Zealand rabbtís were used (2.73 :t 0.05 Kg), Group A (n= 10), Group B (n= 10), Group C (n=10) and 7 controls animais. Group A was gíven only carbon tetrachroride (CCI4) and phenobarbitone (FB), Group B received the same treatment as Group A with the addition of colchicine (100 Ilg/daily/five days a week 16 weeks) and Group C received the as Group B ,but had the colchicine treatment for a longer period of time. They were given phenrr¿A dissolved in drinking water (approximately 50 mg/day/animal) and a week j,,-. treatment (10% solution in com oil; 20 mg/animallw,eek) concomítant with PB.The CCI4 dose was adjusted 'weekly in órder to obtain serun AST and AL T levels between 400 U/I and 800 U/I. The indocianine green (lCG) pharmacokinetics were determined after injecting the ICG (8mg/Kg, i.v.) and collecting plasma samples at suitable time points for the ICG quantifcation. At the end of the experiment, animais were sacrificed, and 3 fragments of each liver sent to histology examination. A higher proportion of animais which did not receive colchicine developed cirrhosis compared to those which received the drug (8/10 vs. 0/10, p.0.01), the líver flbrosis was also reduced (p.0.01). Rabbits that had been through the 16 week treatment had at the end of experiment, ICG, y-GT, bilirrubin and weight gain similar to controls. The serum enzymes and the elimination rate of ICG (before and after 16 weeks of treatment) in the CCI4 group were: AL T: 62.6 :t 170.87 UII; AST: 39,40 :t 0.3661 mllmin/kg, respectively. The low mortality and the quantity of the animais wich developed liver cirrhosis conduce to conclude with that model is suitable. The body wight is not suitable to regulate the CCI4 doses. Only the aminotransferases measurement is necessary for control of the liver development. The colchicine reduces the development of liver fibrosis and cirrhosis in a . experimental model of chronic toxic liver damage, supporting its potential therapy of liver díseases / Mestrado / Mestre em Farmacologia
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Investigação da Indigoffera suffruticosa sobre atividade antitumoral e aspectos histológicos e morfométricos do tecido hepático de camundongos portadores de sarcoma 180

Lima, Izabela Rangel 31 January 2012 (has links)
Submitted by Heitor Rapela Medeiros (heitor.rapela@ufpe.br) on 2015-03-05T18:59:20Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Izabela_Rangel_Lima.pdf: 1174915 bytes, checksum: c599a74335603a70bc195a00a2a7c731 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T18:59:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Izabela_Rangel_Lima.pdf: 1174915 bytes, checksum: c599a74335603a70bc195a00a2a7c731 (MD5) Previous issue date: 2012 / CAPES, Universidade Federal de Pernambuco / Indigofera suffruticosa Mill (Fabaceae) ocorre em abundância no nordeste brasileiro e tem intenso uso popular no tratamento de infecções, inflamações e outros processos. Os estudos farmacológicos do extrato aquoso de folhas têm demonstrado atividades biológicas tais como: antiinflamatória, embriotóxica, antimicrobiana e antitumoral. Este trabalho foi desenvolvido para isolar a fração alcalóide de folhas de I. suffruticosa, investigar sua atividade antitumoral e estudar a histologia e a morfometria do tecido hepático de camundongos portadores de sarcoma 180. O material da pesquisa foi obtido a partir de um screening fitoquímico de folhas onde foram realizados os protocolos extrativos para identificar e isolar a fração alcalóide presente na espécie. Camundongos albinos suíços (Mus musculus), machos, adulto-jovens, 40 dias de idade, pesando em média 25 a 35g foram divididos em três grupos de 6 animais: G1 (portadores de sarcoma/salina), G2 (sem sarcoma/salina) e G3 (sarcoma/fração alcalóide). Nos grupos G1 e G3 foram injetados na área axilar direita uma suspensão de aproximadamente 0,3 ml de células do Sarcoma 180 (3x106 células/ml). Após 48 horas da implantação tumoral, a quimioterapia foi iniciada no grupo G3 com a fração alcalóide (25mg/kg.ip), G1 e G2 com salina (1.4ml/Kg). Após sete dias de tratamento os animais foram eutanaziados por deslocamento cervical, os tumores foram analisados e fragmentos de fígado foram utilizados para o estudo histológico e morfométrico. A fração alcalóide isolada, obtida do extrato aquoso de folhas de I. suffruticosa não reduziu significativamente o volume médio de Sarcoma 180 no grupo G3 comparado com G1. De acordo com o estudo histopatológico e morfométrico o tecido hepático de G2 e G3 apresentou arquitetura normal, quando comparado com G1 que mostrou congestão hepática. Esta pesquisa demonstrou que a fração alcalóide isolada de folhas de I. suffruticosa não inibiu o crescimento tumoral, por outro lado o estudo histológico, apresentou a arquitetura preservada do tecido hepático sugerindo um meio alternativo hepatoprotetor.
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Consequências da exposição materna à formulação comercial contendo glifosato nos parâmetros bioquímicos e morfológicos em fígado e sangue periférico de ratos imaturos

Rieg, Carla Elise Heinz January 2016 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:11:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340465.pdf: 1864087 bytes, checksum: 83a075bebaed00c5f5f7d2ebf138c9d4 (MD5) Previous issue date: 2016 / Este estudo investigou os efeitos da exposição materna ao glifosato-Roundup® em diferentes parâmetros bioquímicos em fígado e soro de ratos imaturos. Ratas Wistar prenhas foram expostas a 1% de Roundup® (0,36% de glifosato) na água de beber a partir do 5º dia gestacional até os filhotes completarem 15 dias de idade, sendo que os animais controles receberam apenas água durante o mesmo período. Os resultados obtidos demonstraram que a exposição crônica ao glifosato-Roundup® diminuiu a massa do fígado e aumentou o influxo de 45Ca2+ no órgão. A formulação comercial contendo glifosato foi capaz de produzir espécies reativas de oxigênio (EROs) no fígado dos filhotes. A indução de estresse oxidativo no fígado da prole foi confirmada pela depleção de glutationa reduzida (GSH) e aumento na concentração de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e de carbonilação de proteínas. Além disso, a exposição ao pesticida alterou o sistema de defesa antioxidante enzimático ao aumentar a atividade da catalase (CAT), glutationa-redutase (GR), glutationa-S-transferase (GST) e ?-glutamil transferase (GGT), inibir a atividade da superóxido dismutase (SOD) e da glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PD), sem modificar a atividade da glutationa-peroxidase (GPx) em fígado de ratos imaturos. A exposição crônica ao glifosato-Roundup® também estimulou a atividade das aminotransferases hepáticas, alanina aminotransferase (ALT) e aspartato aminotransferase (AST). O aumento na concentração de ferro hepático e sérico, bem como na capacidade de ligação de ferro sérico, juntamente com a diminuição na concentração de transferrina no soro dos ratos indicaram acúmulo de ferro total no corpo dos filhotes expostos ao herbicida. Estes dados sugerem que o glifosato-Roundup® pode induzir um processo de hemocromatose secundária associada ao aumento nas concentrações de íons Fe2+ levando, consequentemente, à geração de EROs. Além disso, observou-se hepatotoxicidade induzida por glifosato-Roundup® devido à elevação na atividade sérica da GGT, ALT e AST, marcadores periféricos de dano ao fígado. No entanto, a morfologia hepática não foi afetada pela exposição ao pesticida. Acredita-se que isso ocorra devido à alta capacidade regenerativa do fígado. Os dados do presente estudo sugerem que a exposição ao Roundup® pode comprometer diferentes vias metabólicas no fígado, induzir estresse oxidativo e hepatotoxicidade, sem alterar a morfologia hepática. <br> / Abstract : This study investigated the effects of maternal exposure to glifosato-Roundup® in different biochemical parameters in serum and liver of immature rats. Female Wistar rats were exposed to 1% glyphosate-Roundup® (0.36% glyphosate) in drinking water from gestation day 5 and continually up to lactation day 15. Experiments were carried out with 15-day-old pups. Results showed that chronic exposure to glyphosate-Roundup® decreased liver mass and increased 45Ca2+ influx in hepatic cells. The commercial formulation containing glyphosate was able to cause reactive oxygen species (ROS) in the offspring liver. Roundup® decreased the levels of reduced glutathione (GSH) and increased the amounts of thiobarbituric reactive species (TBARS) and protein carbonyl, characterizing oxidative damage. Also, exposure to the pesticide stimulated the activity of catalase (CAT), glutathione reductase (GR), glutathione-S-transferase (GST) and ?-glutamyl transferase (GGT), while the activities of superoxide-dismutase (SOD) and glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) were inhibited without modifying the activity of glutathione peroxidase (GPx) in pup liver. The chronic exposure to glyphosate-Roundup® also led to the induction of hepatic alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) activities. Iron overload was demonstrated by its increased concentration observed in hepatic tissue, as well as in serum from glyphosate-Roundup® exposed animals, which was associated with the increased total iron-binding capacity of serum and decreased serum transferrin levels. These events increased the total amount of iron in the body of the offspring, suggesting secondary hemochromatosis and, probably, increased Fe2+ ion concentration in the body of animals in such a way this event might lead to the formation of ROS. Moreover, hepatotoxicity was attested by the elevation in serum GGT, ALT and AST activities, biomarkers of hepatic damage. However, the liver histology was unaffected by pesticide exposure, probably due to the high regenerative capacity of the liver. The data of this study suggest that exposure to Roundup® might compromise different metabolic pathways in the liver, inducing oxidative stress and hepatotoxicity, without changing the liver histology.
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Níveis hepáticos de vitamina A em fetos, recém nascidos e idosos

Tavares Montenegro, Luciano January 2007 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T23:02:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8593_1.pdf: 317407 bytes, checksum: 6918931df01e83b442a333d1e6fe5fc8 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / A hipovitaminose A é um dos principais problemas de saúde pública em países em desenvolvimento e afeta milhares de crianças em todo o mundo. A carência de vitamina A afeta a integridade do sistema imunológico, o sistema reprodutor, causa problemas oftalmológicos, como a xeroftalmia, podendo afetar as taxas de morbidade e mortalidade infantil. O artigo de revisão Papel das Células estelares na Fibrose Hepática aborda a participação das células armazenadoras de vitamina A (células de Ito) como as células formadoras de fibrose em algumas patologias hepáticas, sua localização e número no fígado, bem como seu aspecto ultra-estrutural. Apresenta ainda aspectos históricos da descoberta desta célula assim como as diversas denominações recebidas e as técnicas para a identificação das mesmas no fígado. No artigo Concentração de Vitamina A em Fígado de Feto e Recém-nascidos foi avaliada a concentração de vitamina A em fragmentos hepáticos de cadáveres de fetos e recémnascidos necropsiados no Serviço de Verificação de Óbitos (SVO) do Departamento de Patologia do CCS da UFPE. Foram examinadas 34 amostras de fígado quanto à concentração de vitamina A. As concentrações variaram entre 0,60&#956;g/g e 83,45&#956;g/g, com 76,5% do total apresentando níveis baixos de vitamina A. Isto reflete uma concentração de retinol hepático inadequada nos fetos e recém-nascidos, mas ainda assim, acima do nível crítico (<5&#956;g/g). Este achado é corroborado pelos dados da Secretaria de Saúde do Estado de Pernambuco, quando informa não mais se observar quadros de xeroftalmia no estado. O artigo Concentração de Retinol Hepático em Idosos: Um Indicador de Carência de Vitamina A foi realizado a partir de 50 fragmentos hepáticos obtidos em necropsias realizadas no SVO. As concentrações obtidas variaram entre 11,46&#956;g/g e 937,34&#956;g/g, com 94% das amostras demonstrando estar bem acima do valor de normalidade (20&#956;g/g). Os resultados observados nesta pesquisa estão em consonância com os resultados encontrados na literatura
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O desempenho da tomografia computadorizada na quantificação da esteatose hepática / The performance of computed tomography in quantifying hepatic steatosis

Thiago Dieb Ristum Vieira 03 May 2010 (has links)
INTRODUÇÃO: A esteatose hepática é uma doença metabólica caracterizada por acúmulo de gordura nos hepatócitos. Dentre suas causas, destacam-se o alcoolismo crônico, a obesidade, o diabetes mellitus do tipo II e a síndrome metabólica. O interesse pela detecção e quantificação da esteatose hepática tem crescido nos últimos anos devido à elevação da sua prevalência e aos avanços da técnica cirúrgica hepática. A quantificação da infiltração gordurosa hepática é importante para o acompanhamento do tratamento de pacientes com esteatose alcoólica e não alcoólica e para a avaliação pré-operatória de transplantes hepáticos com doadores vivos e de hepatectomias parciais. O diagnóstico pode ser feito por diversos estudos de imagem, como a ultrassonografia (US), a tomografia computadorizada (TC) e a ressonância magnética (RM), mas o método consagrado para a sua quantificação é a biópsia hepática. Caso a TC se provasse um método confiável para a realização dessa quantificação, poderia ser utilizada como alternativa à biópsia, minimizando custos e eliminando os riscos inerentes a esse procedimento. OBJETIVO: O objetivo deste estudo é avaliar a confiabilidade da tomografia computadorizada na quantificação da esteatose hepática, comparando seus resultados com os achados histopatológicos. MÉTODOS: Foi realizado um estudo transversal prospectivo e retrospectivo com 64 pacientes submetidos à biópsia hepática e TC do abdome em intervalo de até seis meses. A esteatose hepática foi estratificada em graus 0 (ausente), 1 (de 1% a 33%), 2 (de 34% a 66%) e 3 (superior a 66%) na análise histopatológica. A partir da avaliação dos exames de TC, foram obtidos três índices de atenuação hepática para cada paciente: a razão da atenuação hepática para a esplênica, a diferença da atenuação hepática da esplênica e a atenuação hepática livre do componente relacionado ao sangue, definidos como IF/B, IF-B e IPH. Esses índices foram correlacionados com o grau de esteatose hepática evidenciado na análise histopatológica, por meio do coeficiente de correlação de Spearman, do teste t- Student, da curva de estatísticas operacionais (ROC), do teste de análise de variância (ANOVA), do teste de Bonferroni e do modelo de regressão ordinal. RESULTADOS: A análise estatística dos dados obtidos no presente estudo evidenciou uma relação moderada significativa e negativa entre os índices de esteatose calculados com os dados dos exames de TC e os graus de infiltração gordurosa hepática observados na análise histopatológica. Foi possível, ainda, determinar valores de corte dos índices que permitissem o diagnóstico de esteatose hepática graus 2 ou 3 (de 33% ou superior) com sensibilidade e especificidade adequadas. Entretanto, o desempenho dos índices não foi satisfatório para a discriminação de cada grau de infiltração gordurosa hepática. CONCLUSÔES: A TC é um método que permite a quantificação da esteatose hepática, desde que abaixo (graus 0 ou 1) ou acima de 33% (graus 2 ou 3), mas não é adequada para a discriminação de cada grau isoladamente / INTRODUCTION: Hepatic steatosis is a metabolic disease characterized by accumulated fat in hepatocytes. Among its causes, chronic alcoholism, obesity, type II diabetes mellitus and syndrome metabolic. The interest in detecting and quantifying hepatic steatosis has grown in the past years due to higher prevalence and advances in hepatic surgical technical. Quantifying hepatic fat infiltration is important to follow up treatment of patients with alcoholic and nonalcoholic steatosis and for preoperative assessment of living donor hepatic transplants and of partial hepatectomies. The diagnosis can be made by diverse imaging studies, such as ultrasonography (US), computed tomography (CT) and magnetic resonance (MRI), but the most used method for quantifying is hepatic biopsy. If CT proved to be a reliable method for quantification, it could be used as an alternative to biopsy, minimizing costs and eliminating the risks that are inherent to this procedure. OBJECTIVE: The purpose of this study is to assess reliability of computed tomography in quantifying hepatic steatosis, comparing its results with histopathological findings. METHODS: A prospective and retrospective cross-section study was carried out with 64 patients submitted to hepatic biopsy and abdominal CT in intervals of up to six months. Hepatic steatosis was stratified as grade 0 (absent), 1 (1 to 33%), 2 (34 to 66%) and 3 (over 66%) upon pathological analysis. Based on CT evaluation, three liver attenuation indices were obtained for each patient: the liver to spleen attenuation ratio; the difference between hepatic and splenic attenuation and the blood-free hepatic parenchymal attenuation, defined as CTL/S, CTL-S and CTLP. These indices were correlated to the grade of hepatic steatosis shown on pathology by the Spearman correlation coefficient, Students t test, receiver operating characteristic (ROC) curve, analysis of variance (ANOVA), Bonferroni test and the ordinal regression model. RESULTS: The statistical analysis of data gathered in this study showed a significant moderate and negative relation between the steatosis indices, calculated with CT examination data and the hepatic fat infiltration grades observed upon pathological analysis. It was also possible to determine the cutoff values for the indices that enabled diagnosis of hepatic steatosis grades 2 or 3 (33% or over) with appropriate sensibility and specificity. However, the performance of the indices was not satisfactory to discriminate each grade of hepatic fat infiltration. CONCLUSIONS: CT is a method that allows quantifying hepatic steatosis if below (grades 0 or 1) or above 33% (grades 2 or 3), but it is not adequate to discriminate each grade separately
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O desempenho da tomografia computadorizada na quantificação da esteatose hepática / The performance of computed tomography in quantifying hepatic steatosis

Vieira, Thiago Dieb Ristum 03 May 2010 (has links)
INTRODUÇÃO: A esteatose hepática é uma doença metabólica caracterizada por acúmulo de gordura nos hepatócitos. Dentre suas causas, destacam-se o alcoolismo crônico, a obesidade, o diabetes mellitus do tipo II e a síndrome metabólica. O interesse pela detecção e quantificação da esteatose hepática tem crescido nos últimos anos devido à elevação da sua prevalência e aos avanços da técnica cirúrgica hepática. A quantificação da infiltração gordurosa hepática é importante para o acompanhamento do tratamento de pacientes com esteatose alcoólica e não alcoólica e para a avaliação pré-operatória de transplantes hepáticos com doadores vivos e de hepatectomias parciais. O diagnóstico pode ser feito por diversos estudos de imagem, como a ultrassonografia (US), a tomografia computadorizada (TC) e a ressonância magnética (RM), mas o método consagrado para a sua quantificação é a biópsia hepática. Caso a TC se provasse um método confiável para a realização dessa quantificação, poderia ser utilizada como alternativa à biópsia, minimizando custos e eliminando os riscos inerentes a esse procedimento. OBJETIVO: O objetivo deste estudo é avaliar a confiabilidade da tomografia computadorizada na quantificação da esteatose hepática, comparando seus resultados com os achados histopatológicos. MÉTODOS: Foi realizado um estudo transversal prospectivo e retrospectivo com 64 pacientes submetidos à biópsia hepática e TC do abdome em intervalo de até seis meses. A esteatose hepática foi estratificada em graus 0 (ausente), 1 (de 1% a 33%), 2 (de 34% a 66%) e 3 (superior a 66%) na análise histopatológica. A partir da avaliação dos exames de TC, foram obtidos três índices de atenuação hepática para cada paciente: a razão da atenuação hepática para a esplênica, a diferença da atenuação hepática da esplênica e a atenuação hepática livre do componente relacionado ao sangue, definidos como IF/B, IF-B e IPH. Esses índices foram correlacionados com o grau de esteatose hepática evidenciado na análise histopatológica, por meio do coeficiente de correlação de Spearman, do teste t- Student, da curva de estatísticas operacionais (ROC), do teste de análise de variância (ANOVA), do teste de Bonferroni e do modelo de regressão ordinal. RESULTADOS: A análise estatística dos dados obtidos no presente estudo evidenciou uma relação moderada significativa e negativa entre os índices de esteatose calculados com os dados dos exames de TC e os graus de infiltração gordurosa hepática observados na análise histopatológica. Foi possível, ainda, determinar valores de corte dos índices que permitissem o diagnóstico de esteatose hepática graus 2 ou 3 (de 33% ou superior) com sensibilidade e especificidade adequadas. Entretanto, o desempenho dos índices não foi satisfatório para a discriminação de cada grau de infiltração gordurosa hepática. CONCLUSÔES: A TC é um método que permite a quantificação da esteatose hepática, desde que abaixo (graus 0 ou 1) ou acima de 33% (graus 2 ou 3), mas não é adequada para a discriminação de cada grau isoladamente / INTRODUCTION: Hepatic steatosis is a metabolic disease characterized by accumulated fat in hepatocytes. Among its causes, chronic alcoholism, obesity, type II diabetes mellitus and syndrome metabolic. The interest in detecting and quantifying hepatic steatosis has grown in the past years due to higher prevalence and advances in hepatic surgical technical. Quantifying hepatic fat infiltration is important to follow up treatment of patients with alcoholic and nonalcoholic steatosis and for preoperative assessment of living donor hepatic transplants and of partial hepatectomies. The diagnosis can be made by diverse imaging studies, such as ultrasonography (US), computed tomography (CT) and magnetic resonance (MRI), but the most used method for quantifying is hepatic biopsy. If CT proved to be a reliable method for quantification, it could be used as an alternative to biopsy, minimizing costs and eliminating the risks that are inherent to this procedure. OBJECTIVE: The purpose of this study is to assess reliability of computed tomography in quantifying hepatic steatosis, comparing its results with histopathological findings. METHODS: A prospective and retrospective cross-section study was carried out with 64 patients submitted to hepatic biopsy and abdominal CT in intervals of up to six months. Hepatic steatosis was stratified as grade 0 (absent), 1 (1 to 33%), 2 (34 to 66%) and 3 (over 66%) upon pathological analysis. Based on CT evaluation, three liver attenuation indices were obtained for each patient: the liver to spleen attenuation ratio; the difference between hepatic and splenic attenuation and the blood-free hepatic parenchymal attenuation, defined as CTL/S, CTL-S and CTLP. These indices were correlated to the grade of hepatic steatosis shown on pathology by the Spearman correlation coefficient, Students t test, receiver operating characteristic (ROC) curve, analysis of variance (ANOVA), Bonferroni test and the ordinal regression model. RESULTS: The statistical analysis of data gathered in this study showed a significant moderate and negative relation between the steatosis indices, calculated with CT examination data and the hepatic fat infiltration grades observed upon pathological analysis. It was also possible to determine the cutoff values for the indices that enabled diagnosis of hepatic steatosis grades 2 or 3 (33% or over) with appropriate sensibility and specificity. However, the performance of the indices was not satisfactory to discriminate each grade of hepatic fat infiltration. CONCLUSIONS: CT is a method that allows quantifying hepatic steatosis if below (grades 0 or 1) or above 33% (grades 2 or 3), but it is not adequate to discriminate each grade separately
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Papel da caveolina-1 na capacidade de migração e proliferação de células estreladas hepáticas

Ilha, Mariana January 2015 (has links)
A fibrose hepática é uma característica comum de diversas doenças crônicas do fígado e é caracterizada pela deposição excessiva de matriz extracelular no órgão. Em última instância, essa alteração anormal do parênquima hepático acarreta em hipertensão portal, cirrose e insuficiência do fígado, o que pode levar o paciente à morte. As células estreladas hepáticas (HSC) participam ativamente deste processo, modificando seu fenótipo quiescente, rico em gotas lipídicas no citoplasma, para o fenótipo ativado, em resposta a um insulto hepático. A linhagem GRX é um modelo de HSC ativadas. As caveolas são pequenas invaginações de 50-100 nm da membrana plasmática que são ricas em glicoesfingolipídeos, colesterol e proteínas GPI ancoradas. Elas são caracterizadas pela presença de caveolina, uma proteína estrutural específica desta organela. Estas pequenas organelas, consideradas especializações dos “rafts” lipídicos, estão presentes nos mais diversos tipos celulares e podem funcionar como plataformas onde se ancoram várias proteínas de membrana. Estas proteínas reconhecem sinais externos e transmitem sinais moduladores da atividade celular, regulando ou facilitando o transporte de ácidos graxos e de lipídeos, e também são responsáveis pelo transporte de vesículas de membrana. As caveolinas são as principais proteínas estruturais das caveolas, sendo a caveolina-1 (Cav-1) a mais importante. A Cav-1 é encontrada em todos os tipos celulares e está relacionada com a transformação oncogênica e tumorogênese. Estudos já mostraram a interação entre as caveolas e os filamentos de actina, os microtúbulos, e os filamentos intermediários. Em fígados cirróticos foi encontrado um aumento da expressão de Cav-1 nas células endoteliais sinusoidais e nas HSC. Em trabalho anterior, utilizamos o plasmídeo pCav1EGFP para a obtenção de uma linhagem permanente que superexpressa a Cav-1 e a proteína EFGP, a GRXEGFP-Cav. Neste trabalho, nós caracterizamos, bioquímica e morfologicamente, essa linhagem e realizamos outra transfecção com o plasmídeo vazio pCineoEGFP para estabelecer uma linhagem controle, a GRXEGFPpCineo . Através de métodos de análise bioquímica, de imunocitoquímica, de citometria de fluxo e de microscopia confocal e eletrônica de transmissão, mostramos que a superexpressão de Cav-1, aumentou a proliferação e a adesão celular, alterou a morfologia e a estrutura do citoesqueleto das células, a capacidade de migração e de endocitose da GRXEGFP-Cav. A análise ultraestrutural por microscopia eletrônica de transmissão revelou o aumento do número de caveolas na membrana plasmática. As alterações do citoesqueleto de actina e o aumento da afinidade célula-célula são indicativos de maior mobilidade celular. Esses resultados somados ao aumento do conteúdo de αSMA e Col-I sugerem a modulação da GRXEGFP-Cav para um fenótipo de miofibroblasto ativado característico de situações de dano hepático. Como a distribuição e a significância da expressão de Cav-1 em fígados normais e cirróticos são pouco conhecidas, e considerando o papel das HSC nas doenças hepáticas, entendemos que a linhagem permanente GRXEGFP-Cav pode ser uma ferramenta experimental muito interessante para o estudo destas patologias. / Liver fibrosis is a common feature of several chronic hepatic diseases and is characterized by the excessive deposition of extracellular matrix in the organ. Usually, this abnormal change of the hepatic parenchyma causes portal hypertension, cirrhosis and liver failure, which can lead to the patient death. Hepatic stellate cells (HSC) participate actively in this process through modifying their quiescent phenotype rich in lipid droplets in the cytoplasm to the activated phenotype in response to the liver injury. GRX line is a model of activated HSC. The caveolae are small invaginations of plasma membrane that reaches 50-100nm of size, rich in glycosphingolipids, cholesterol, and GPI-anchored proteins. These organelles are characterized by the presence of caveolin, a structural and specific protein. These small organelles, which are considered specializations of lipid "rafts" and can be present in several cell types, can act as anchoring platforms for several membrane proteins. These proteins recognize external signals and transmit these signals to modulate the cell activity through regulating or facilitating the transport of fatty acids and lipids, being also responsible for the transport of membrane vesicles. Caveolins are the main structural proteins of caveolae and caveolin-1 (Cav-1) is the most important. Cav-1 is found in all cell types and is related to the oncogenic transformation and tumorigenesis. Previous studies have shown the interaction among caveolae, actin filaments, microtubules, and intermediate filaments. Also, it was found an increase of Cav-1 expression in sinusoidal endothelial cells and HSC of cirrhotic livers, which was suggested to be related to the portal hypertension that accompanies the process of fibrosis. In a previous work, we used the pCav1EGFP plasmid to obtain a permanent cell strain that overexpresses Cav-1 protein and EFGP, which was named GRXEGFP-Cav. In this work we biochemical and morphologically characterized this strain. We also did another cell transfection with an empty pCineoEGFP plasmid to establish a permanent control cell line, which was named GRXEGFPpCineo. Through biochemical analysis, immunocytochemistry, flow cytometry, confocal and electron transmission microscopy, we showed that Cav-1overexpression increased cell proliferation and adhesion, changed cell morphology and cytoskeleton structure, and the cell migration and endocytosis capacity of GRXEGFP-Cav. The actin cytoskeletal changes and the increased cell-cell affinity are indicative of greater cell motility. These results associated to the increase of αSMA and Col-I contents suggest the GRXEGFP-Cav modulation be the activated myofibroblast that characterizes liver damage. As the distribution and the significance of Cav-1 expression in normal and cirrhotic livers are little known and considering the role of HSC in liver diseases, we believe that the permanent GRXEGFP-Cav line can be a very interesting experimental tool for the study of these pathologies.
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Papel da caveolina-1 na capacidade de migração e proliferação de células estreladas hepáticas

Ilha, Mariana January 2015 (has links)
A fibrose hepática é uma característica comum de diversas doenças crônicas do fígado e é caracterizada pela deposição excessiva de matriz extracelular no órgão. Em última instância, essa alteração anormal do parênquima hepático acarreta em hipertensão portal, cirrose e insuficiência do fígado, o que pode levar o paciente à morte. As células estreladas hepáticas (HSC) participam ativamente deste processo, modificando seu fenótipo quiescente, rico em gotas lipídicas no citoplasma, para o fenótipo ativado, em resposta a um insulto hepático. A linhagem GRX é um modelo de HSC ativadas. As caveolas são pequenas invaginações de 50-100 nm da membrana plasmática que são ricas em glicoesfingolipídeos, colesterol e proteínas GPI ancoradas. Elas são caracterizadas pela presença de caveolina, uma proteína estrutural específica desta organela. Estas pequenas organelas, consideradas especializações dos “rafts” lipídicos, estão presentes nos mais diversos tipos celulares e podem funcionar como plataformas onde se ancoram várias proteínas de membrana. Estas proteínas reconhecem sinais externos e transmitem sinais moduladores da atividade celular, regulando ou facilitando o transporte de ácidos graxos e de lipídeos, e também são responsáveis pelo transporte de vesículas de membrana. As caveolinas são as principais proteínas estruturais das caveolas, sendo a caveolina-1 (Cav-1) a mais importante. A Cav-1 é encontrada em todos os tipos celulares e está relacionada com a transformação oncogênica e tumorogênese. Estudos já mostraram a interação entre as caveolas e os filamentos de actina, os microtúbulos, e os filamentos intermediários. Em fígados cirróticos foi encontrado um aumento da expressão de Cav-1 nas células endoteliais sinusoidais e nas HSC. Em trabalho anterior, utilizamos o plasmídeo pCav1EGFP para a obtenção de uma linhagem permanente que superexpressa a Cav-1 e a proteína EFGP, a GRXEGFP-Cav. Neste trabalho, nós caracterizamos, bioquímica e morfologicamente, essa linhagem e realizamos outra transfecção com o plasmídeo vazio pCineoEGFP para estabelecer uma linhagem controle, a GRXEGFPpCineo . Através de métodos de análise bioquímica, de imunocitoquímica, de citometria de fluxo e de microscopia confocal e eletrônica de transmissão, mostramos que a superexpressão de Cav-1, aumentou a proliferação e a adesão celular, alterou a morfologia e a estrutura do citoesqueleto das células, a capacidade de migração e de endocitose da GRXEGFP-Cav. A análise ultraestrutural por microscopia eletrônica de transmissão revelou o aumento do número de caveolas na membrana plasmática. As alterações do citoesqueleto de actina e o aumento da afinidade célula-célula são indicativos de maior mobilidade celular. Esses resultados somados ao aumento do conteúdo de αSMA e Col-I sugerem a modulação da GRXEGFP-Cav para um fenótipo de miofibroblasto ativado característico de situações de dano hepático. Como a distribuição e a significância da expressão de Cav-1 em fígados normais e cirróticos são pouco conhecidas, e considerando o papel das HSC nas doenças hepáticas, entendemos que a linhagem permanente GRXEGFP-Cav pode ser uma ferramenta experimental muito interessante para o estudo destas patologias. / Liver fibrosis is a common feature of several chronic hepatic diseases and is characterized by the excessive deposition of extracellular matrix in the organ. Usually, this abnormal change of the hepatic parenchyma causes portal hypertension, cirrhosis and liver failure, which can lead to the patient death. Hepatic stellate cells (HSC) participate actively in this process through modifying their quiescent phenotype rich in lipid droplets in the cytoplasm to the activated phenotype in response to the liver injury. GRX line is a model of activated HSC. The caveolae are small invaginations of plasma membrane that reaches 50-100nm of size, rich in glycosphingolipids, cholesterol, and GPI-anchored proteins. These organelles are characterized by the presence of caveolin, a structural and specific protein. These small organelles, which are considered specializations of lipid "rafts" and can be present in several cell types, can act as anchoring platforms for several membrane proteins. These proteins recognize external signals and transmit these signals to modulate the cell activity through regulating or facilitating the transport of fatty acids and lipids, being also responsible for the transport of membrane vesicles. Caveolins are the main structural proteins of caveolae and caveolin-1 (Cav-1) is the most important. Cav-1 is found in all cell types and is related to the oncogenic transformation and tumorigenesis. Previous studies have shown the interaction among caveolae, actin filaments, microtubules, and intermediate filaments. Also, it was found an increase of Cav-1 expression in sinusoidal endothelial cells and HSC of cirrhotic livers, which was suggested to be related to the portal hypertension that accompanies the process of fibrosis. In a previous work, we used the pCav1EGFP plasmid to obtain a permanent cell strain that overexpresses Cav-1 protein and EFGP, which was named GRXEGFP-Cav. In this work we biochemical and morphologically characterized this strain. We also did another cell transfection with an empty pCineoEGFP plasmid to establish a permanent control cell line, which was named GRXEGFPpCineo. Through biochemical analysis, immunocytochemistry, flow cytometry, confocal and electron transmission microscopy, we showed that Cav-1overexpression increased cell proliferation and adhesion, changed cell morphology and cytoskeleton structure, and the cell migration and endocytosis capacity of GRXEGFP-Cav. The actin cytoskeletal changes and the increased cell-cell affinity are indicative of greater cell motility. These results associated to the increase of αSMA and Col-I contents suggest the GRXEGFP-Cav modulation be the activated myofibroblast that characterizes liver damage. As the distribution and the significance of Cav-1 expression in normal and cirrhotic livers are little known and considering the role of HSC in liver diseases, we believe that the permanent GRXEGFP-Cav line can be a very interesting experimental tool for the study of these pathologies.
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Papel da caveolina-1 na capacidade de migração e proliferação de células estreladas hepáticas

Ilha, Mariana January 2015 (has links)
A fibrose hepática é uma característica comum de diversas doenças crônicas do fígado e é caracterizada pela deposição excessiva de matriz extracelular no órgão. Em última instância, essa alteração anormal do parênquima hepático acarreta em hipertensão portal, cirrose e insuficiência do fígado, o que pode levar o paciente à morte. As células estreladas hepáticas (HSC) participam ativamente deste processo, modificando seu fenótipo quiescente, rico em gotas lipídicas no citoplasma, para o fenótipo ativado, em resposta a um insulto hepático. A linhagem GRX é um modelo de HSC ativadas. As caveolas são pequenas invaginações de 50-100 nm da membrana plasmática que são ricas em glicoesfingolipídeos, colesterol e proteínas GPI ancoradas. Elas são caracterizadas pela presença de caveolina, uma proteína estrutural específica desta organela. Estas pequenas organelas, consideradas especializações dos “rafts” lipídicos, estão presentes nos mais diversos tipos celulares e podem funcionar como plataformas onde se ancoram várias proteínas de membrana. Estas proteínas reconhecem sinais externos e transmitem sinais moduladores da atividade celular, regulando ou facilitando o transporte de ácidos graxos e de lipídeos, e também são responsáveis pelo transporte de vesículas de membrana. As caveolinas são as principais proteínas estruturais das caveolas, sendo a caveolina-1 (Cav-1) a mais importante. A Cav-1 é encontrada em todos os tipos celulares e está relacionada com a transformação oncogênica e tumorogênese. Estudos já mostraram a interação entre as caveolas e os filamentos de actina, os microtúbulos, e os filamentos intermediários. Em fígados cirróticos foi encontrado um aumento da expressão de Cav-1 nas células endoteliais sinusoidais e nas HSC. Em trabalho anterior, utilizamos o plasmídeo pCav1EGFP para a obtenção de uma linhagem permanente que superexpressa a Cav-1 e a proteína EFGP, a GRXEGFP-Cav. Neste trabalho, nós caracterizamos, bioquímica e morfologicamente, essa linhagem e realizamos outra transfecção com o plasmídeo vazio pCineoEGFP para estabelecer uma linhagem controle, a GRXEGFPpCineo . Através de métodos de análise bioquímica, de imunocitoquímica, de citometria de fluxo e de microscopia confocal e eletrônica de transmissão, mostramos que a superexpressão de Cav-1, aumentou a proliferação e a adesão celular, alterou a morfologia e a estrutura do citoesqueleto das células, a capacidade de migração e de endocitose da GRXEGFP-Cav. A análise ultraestrutural por microscopia eletrônica de transmissão revelou o aumento do número de caveolas na membrana plasmática. As alterações do citoesqueleto de actina e o aumento da afinidade célula-célula são indicativos de maior mobilidade celular. Esses resultados somados ao aumento do conteúdo de αSMA e Col-I sugerem a modulação da GRXEGFP-Cav para um fenótipo de miofibroblasto ativado característico de situações de dano hepático. Como a distribuição e a significância da expressão de Cav-1 em fígados normais e cirróticos são pouco conhecidas, e considerando o papel das HSC nas doenças hepáticas, entendemos que a linhagem permanente GRXEGFP-Cav pode ser uma ferramenta experimental muito interessante para o estudo destas patologias. / Liver fibrosis is a common feature of several chronic hepatic diseases and is characterized by the excessive deposition of extracellular matrix in the organ. Usually, this abnormal change of the hepatic parenchyma causes portal hypertension, cirrhosis and liver failure, which can lead to the patient death. Hepatic stellate cells (HSC) participate actively in this process through modifying their quiescent phenotype rich in lipid droplets in the cytoplasm to the activated phenotype in response to the liver injury. GRX line is a model of activated HSC. The caveolae are small invaginations of plasma membrane that reaches 50-100nm of size, rich in glycosphingolipids, cholesterol, and GPI-anchored proteins. These organelles are characterized by the presence of caveolin, a structural and specific protein. These small organelles, which are considered specializations of lipid "rafts" and can be present in several cell types, can act as anchoring platforms for several membrane proteins. These proteins recognize external signals and transmit these signals to modulate the cell activity through regulating or facilitating the transport of fatty acids and lipids, being also responsible for the transport of membrane vesicles. Caveolins are the main structural proteins of caveolae and caveolin-1 (Cav-1) is the most important. Cav-1 is found in all cell types and is related to the oncogenic transformation and tumorigenesis. Previous studies have shown the interaction among caveolae, actin filaments, microtubules, and intermediate filaments. Also, it was found an increase of Cav-1 expression in sinusoidal endothelial cells and HSC of cirrhotic livers, which was suggested to be related to the portal hypertension that accompanies the process of fibrosis. In a previous work, we used the pCav1EGFP plasmid to obtain a permanent cell strain that overexpresses Cav-1 protein and EFGP, which was named GRXEGFP-Cav. In this work we biochemical and morphologically characterized this strain. We also did another cell transfection with an empty pCineoEGFP plasmid to establish a permanent control cell line, which was named GRXEGFPpCineo. Through biochemical analysis, immunocytochemistry, flow cytometry, confocal and electron transmission microscopy, we showed that Cav-1overexpression increased cell proliferation and adhesion, changed cell morphology and cytoskeleton structure, and the cell migration and endocytosis capacity of GRXEGFP-Cav. The actin cytoskeletal changes and the increased cell-cell affinity are indicative of greater cell motility. These results associated to the increase of αSMA and Col-I contents suggest the GRXEGFP-Cav modulation be the activated myofibroblast that characterizes liver damage. As the distribution and the significance of Cav-1 expression in normal and cirrhotic livers are little known and considering the role of HSC in liver diseases, we believe that the permanent GRXEGFP-Cav line can be a very interesting experimental tool for the study of these pathologies.
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Avaliação estereológica da microestrutura do fígado em animais desnutridos e submetidos à renutrição protéica / Stereological evaluation of microstructure in the liver of animals denutrition of followed by proteic renutrition

Gomes, Silvio Pires 24 March 2011 (has links)
A fome e a má nutrição permanecem entre os problemas mais devastadores que enfrentam a maioria dos pobres e carentes do mundo. A desnutrição está relacionada com o desequilíbrio do estado nutricional e ocorre sob diversas formas, podendo afetar o fígado. A desnutrição no início da vida pode afetar profundamente o corpo e o cérebro de ratos adultos. Alguns desses efeitos são permanentes enquanto outros desaparecem quando os animais são submetidos ao processo de renutrição. Sendo assim, outra maneira de interferir na regeneração hepática fundamenta-se no fato de que os processos proliferativos do fígado podem ser modulados por fatores alimentares. Experimentos de desnutrição protéico-energética mostraram que o fígado de ratos desnutridos regenera-se mais lentamente após a hepatectomia. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da desnutrição e renutrição protéica na microestrutura dos fígados de camundongos. Foram utilizados 12 camundongos Swiss machos, subdividos nos seguintes grupos: Controle do desnutrido (CD) (n=3), Desnutrido (D) (n=3), Renutrido (R) (n=3) e Controle do renutrido (CR) (n=3). Os animais dos dois grupos controle e do grupo renutrido receberam ração normoprotéica (12%) ao passo que o grupo desnutrido recebeu ração hipoprotéica contendo (2%). Os seguintes parâmetros estereológicos do fígado foram estimados: volume, número total e o volume menor (p= 0,001) em relação ao CR (R= 8020 µm³ e CR= 10018 µm³). O número total de hepatócitos nos animais desnutridos não apresentou diferença significativa (p= 0,055) em comparação ao seu CR (D = 1.1 x 107 e CD=1.6 x 107) e o R não apresentou diferença significativa (p= 0,055) em comparação ao seu CR (R= 2.8 x 107 e CR= 2.2 x 107). Portanto, a renutrição atenuou a atrofia do volume do hepatócito ocasionada pelo processo de desnutrição (carência de proteína). / The hunger and the malnutrition remain the most devastating problems faced by the majority of poor and needy people in the world. The malnutrition is related to an unbalanced nutritional condition and it occurs in different ways may affecting the liver. In the beginning of life, the malnutrition can affect profoundly the body and the brain in adult rats. Most of these effects are permanent while others disappear when the animal are submitted to a renutrition process. In this way, other manner to interfere in the hepatic regeneration is based on the fact that the liver proliferative processes might be modulating by food factors. The energetic protein malnutrition experiments have showed that the undernourished rat livers regenerate slower after hepatectomy. The aim of this study was to evaluate the effects of the caloric protein malnutrition and renutrition in the liver microstructure. In this study were used 12 Swiss male mice divided in: control of the undernourished mice (UC) (n=3), undernourished (U) (n=3), renourished (RN) (n=3) and control of the renourished (RNC) (n=3). The animals from both control groups and the undernourished group received normal protein food (12% protein) and the undernourished group received hypoprotein food (2% protein). The following stereological parameters were estimated: volume, total number and mean volume of the hepatocytes. The mean volume of U was significantly lower (p=0.001) than the UC (U= 23.57 mm³ e UC= 46.5 2mm³) and RN was lower (p=0.001) than the RNC (RN= 38.89 mm³ e RNC= 52.03 mm³).The mean volume of hepatocytes in undernourished animals was lower (p=0.001) in comparison with the respective control (U= 4505 µm³ e CD= 8170.13 µm³) and the RN was lower (p= 0.001) in relation to the RNC (RN= 8020 µm³ e RNC= 10018 µm³). The total number of hepatocytes in undernourished animals did not presented significant difference (p= 0.055) in comparison with the respective control (U = 1.1 x 107 e UC= 1.6 x 107). So, the renutrition attenuated the hepatocyte volume atrophy caused by the malnutrition process (protein deficiency).

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