Orientador: Leandro Borges Lemos / Banca: Priscila de Oliveira / Banca: Mara Cristina Pessoa da Cruz / Resumo: O objetivo com este trabalho foi avaliar os atributos agronômicos e qualitativos do feijoeiro irrigado em sucessão a sistemas de cultivo de milho exclusivo, milho consorciado com braquiária e milho consorciado com crotalária, assim como o efeito da adubação nitrogenada em cobertura, no ano de implantação do sistema de plantio direto. O experimento foi instalado em um Latossolo Vermelho eutroférrico de textura argilosa, no delineamento em blocos casualizados arranjados em parcelas subdivididas, com quatro repetições. As parcelas foram compostas por três sistemas de cultivo anteriores ao feijoeiro, representadas pelo milho exclusivo, milho consorciado com braquiária e milho consorciado com crotalária, todos semeados em sucessão ao milheto de primavera. As subparcelas foram constituídas por cinco doses de nitrogênio, sendo 0, 50, 100, 150 e 200 kg ha-1, aplicadas em cobertura na cultivar de feijoeiro IAC Alvorada. A viabilidade dos sistemas de cultivo de milho consorciado com braquiária e crotalária foi confirmada, pois não houve redução na produtividade de grãos do milho em relação ao sistema de cultivo exclusivo. Além disso, os consórcios de milho proporcionaram maior recobrimento do solo, quantidade de palhada, teor e acúmulo de nitrogênio na palhada, enquadrando-se nos padrões recomendados para o sistema de plantio direto de qualidade. Em relação aos atributos agronômicos do feijoeiro, o aporte de nitrogênio em cobertura proporcionou reposta linear crescente nas variáveis: t... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective of this work was to evaluate the agronomic and qualitative attributes of irrigated common bean in succession to systems of exclusive corn cultivation, corn intercropped with brachiaria and corn intercropped with crotalaria, as well as the effect of top-dressed nitrogen fertilization at the year of implementation of the no-tillage system. The experiment was developed in a Eutrophic Oxisol, in randomized complete blocks design, in split-plot, with four replicates. The plots were composed of three cultivation systems prior to the bean, represented by exclusive corn, corn intercropped with brachiaria and corn intercropped with crotalaria, all of them sown in succession to spring millet. The subplots were consisted of five nitrogen doses, being 0, 50, 100, 150 and 200 kg ha-1, as top-dressed applied on the bean cultivar IAC Alvorada. The viability of corn intercropping systems with brachiaria and crotalaria was confirmed, as there was no reduction in maize grains yield in relation to the exclusive cropping system. In addition, maize intercropped provided greater soil cover, amount of straw, content and accumulation of nitrogen in the straw, in accordance with the recommended standards for the quality no-tillage system. In relation to the agronomic attributes of the common bean, the top-dressed nitrogen levels provided an increasing linear behavior in the variables: leaf nitrogen content, relative chlorophyll index, number of pods per plant, mass of 100 grains and grain yield. The bean sown in straw corn with crotalaria yielded higher number of pods per plant, grain per pod and grain yield. There was interaction between treatments tested for agronomic efficiency, which was higher in the 50 kg ha-1 dose of nitrogen applied on the bean in succession of corn intercropped wit... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Departamento de Botânica, Programa de Pós-Graduação em Botânica, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-07-14T18:10:54Z No. of bitstreams: 1 2016_CristinaPimenteldoNascimento.pdf: 960202 bytes, checksum: 48b9f8297f72f32c7392d8dc021c14cc (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-08-16T18:25:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_CristinaPimenteldoNascimento.pdf: 960202 bytes, checksum: 48b9f8297f72f32c7392d8dc021c14cc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-16T18:25:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_CristinaPimenteldoNascimento.pdf: 960202 bytes, checksum: 48b9f8297f72f32c7392d8dc021c14cc (MD5) / No Brasil, o feijão-caupi é considerado uma das espécies alimentares mais cultivadas no Norte e Nordeste. Constitui um dos mais importantes componentes da dieta alimentar proteica e energética das populações rurais dessas regiões, é citada como fonte de folatos uma vitamina pertencente ao grupo vitaminas hidrossolúveis do complexo B9. As moléculas de folatos são formadas por três grupos funcionais: pterina, ácido para-aminobenzoico (pABA) e de um a oito resíduos de gluatamato. Em plantas, a primeira reação de produção de folatos é catalisada pela ação da gch1, que fornece instruções para a produção da enzima GTP ciclohidrolase 1, esta enzima está envolvida na primeira etapa da produção de folatos em plantas, produzindo a pterina, enquanto o precursor de pABA é sintetizado no cloroplasto. O objetivo do presente trabalho foi a quantificação do teor de folatos em 50 genótipos de feijão-caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp.], disponibilizados pelo banco de germoplasma da Embrapa Meio-Norte (Piauí, Brasil), International Institute of Tropical Agriculture (IITA) (Oyo State, Nigéria) e Ahmadu Bello University (Zária, Nigéria). Além disso, estudou-se a correlação dos teores de folatos e os níveis de expressão do gene Vugch1, que codifica para a GTP ciclohidrolase 1, enzima considerada chave na rota de síntese de pterinas, um precursor de folatos. Os genótipos foram plantados em casa de vegetação e as sementes imaturas foram coletadas com 10, 15, 20 e 25 dias após a antese. O maior nível de expressão de Vugch1 foi observado em sementes coletadas 20 dias após a antese. Com as análises realizadas em sementes maduras constatou-se que houve uma variação no teor de folatos entre 177 a 780 μg/100g (Pingo de Ouro e Yarwaja, respectivamente) nos genótipos estudados, valores estes bem acima dos encontrados na literatura para o feijão-caupi. Confirmou-se a correlação entre a expressão do gene Vugch1 e a variação no teor de folatos. Com esses resultados, existe a possibilidade de avaliar os genótipos mais adequados para utilização de programas de melhoramento genético com variedades de feijão-caupi que possuam maior concentração no teor de folato. Espécies silvestres têm sido exploradas como fonte de alelos de tolerância para o melhoramento genético vegetal de várias culturas. O parental silvestre do amendoim, Arachis duranensis, é um genótipo que apresenta alta adaptabilidade ao déficit hídrico e foi utilizado em um ensaio de dry drown para sequenciamento do transcriptoma. A análise in silico e a validação por RT-qPCR de genes diferencialmente expressos auxiliaram na identificação de genes candidatos associados à resposta a seca. Dentre eles, uma proteína LEA mostrou-se positivamente regulada mediante a esse estresse. Sabe-se que proteínas LEA se comportam como chaperonas e são encontradas em abundância em tecidos sob dessecação, diante disso, o objetivo desse trabalho foi caracterizar, clonar e introduzir esse gene via transgenia em planta modelo (Arabidopsis thaliana) para compreender os efeitos da sua superexpressão. O gene foi inserido em plantas de A. thaliana, ecotipo Columbia 0, utilizando o método de floral dip e os eventos em homozigose (geração T3) foram testados. As linhagens foram plantadas em placas de meio MS com 150 mM de NaCl e 200 mM de manitol, separadamente, além de outro grupo que foi plantado em meio MS e colocado em temperaturas extremas (-18°C por uma hora e 37°C por oito horas). Foram calculadas as taxas de sobrevivência e o teor de açúcares solúveis totais de cada amostra/ensaio. O teste de seca também foi feito, onde a irrigação foi suspensa por 15 dias e foram feitas análises de área foliar, teor relativo de água e coexpressão de genes relacionados à tolerância a seca. Nos ensaios com NaCl e manitol não houveram diferenças entre as linhagens e as plantas não transformadas, além de ter sido observado desenvolvimento reduzido das plantas. Nos ensaios com temperaturas extremas as linhagens mantiveram seus teores de açúcares iguais ao controle enquanto as não-transformadas (NT) aumentaram seu teor de açúcares solúveis totais apenas no tratamento de calor e sem diferença significativa na taxa de sobrevivência entre as linhagens e NT. No ensaio com seca houve maior desenvolvimento da área foliar em algumas linhagens quando comparadas às plantas NT. Na análise de teor relativo de água as linhagens mostraram maiores teores relativos de água quando comparado à NT, sob condição de rega controlada e após 15 dias sem irrigação, sendo uma linhagem com maior teor significativo. Esse evento foi selecionado para a análise de expressão gênica de três genes coexpressos com a Dehidrina. Houve aumento da expressão dos três genes em diferentes situações, tanto pelo fato da planta superexpressar a AdDHN quanto pela indução da seca. Os resultados sugerem que esse gene possa conferir uma melhor resposta aos estresses abióticos. _________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / In Brazil, the cowpea is considered one of the most cultivated food species in the North and Northeast. It is one of the most important components of protein and energy diet of rural populations in these regions, is cited as a source of folate a vitamin belonging to the watersoluble vitamins group B9 complex. Folate molecules consist of three functional groups: pterin, para-aminobenzoic acid (pABA) and one to eight residues of gluatamate. In plants, the first folate production is catalyzed by the action of gch1, which provides instructions for the production of the enzyme GTP cyclohydrolase 1, the enzyme is involved in the first step of folate production in plants producing pterin as the precursor pABA is synthesized in the chloroplast. The aim of this study was to quantify the folate content in 50 cultivars of cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.] provided by the germplasm bank of Embrapa Meio Norte (Piauí, Brazil), International Institute of Tropical Agriculture (IITA) (Oyo State, Nigeria) and Ahmadu Bello University (Zaria, Nigeria). In addition, the correlation of folate content and the expression of the gene Vugch1 was studied. Vugch1 codes for GTP cyclohydrolase 1, a key enzyme for the pterins pathway. The cultivars were planted in the greenhouse and the immature seeds were harvested 10, 15, 20 and 25 days after anthesis. The highest expression level of Vugch1 gene was observed 20 days after anthesis. It was ibserved a variation in the folate content in mature seeds ranging from 177 to 780 μg/100g (Pingo de Ouro and Yarwaja respectively). It was confirmed the correlation between the expression of the Vugch1 gene and folate content. With these results, it is possible to perform appropriate genotype crosses in order to generate new elite varieties with high folate content.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-09-27T16:59:30Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 169523 bytes, checksum: eac94df5b909158b9ef20535240828ee (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-27T16:59:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 169523 bytes, checksum: eac94df5b909158b9ef20535240828ee (MD5) Previous issue date: 2002-03-15 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente trabalho foi conduzido com o objetivo de avaliar a composição centesimal, os teores de minerais (Fe, Ca, Mn, Mg, Cu, Zn e K ) e de taninos e o grau de digestibilidade protéica in vitro, das variedades de feijão (Phaseolus vulgaris L.) Aporé, Aruã, Rudá, Pérola, Carioca, Ouro Branco, RAO 33, A 774, Vermelho Coimbra, Ouro Negro e Diamante Negro, fornecidas pela EMBRAPA - Arroz e Feijão, localizada em Goiânia-GO. Os resultados obtidos mostraram que os teores de minerais expressos em mg/100 g de amostra seca variaram de 4,46 a 6,40 para ferro; 122,53 a 207,41 para cálcio; 1,31 a 2,16 para manganês; 164,56 a 239,48 para magnésio; 1,22 a 2,74 para cobre; 2,34 a 3,35 para zinco; e 1172,55 a 1542,45 para potássio. O teor de taninos variou entre 3,21 e 31,71 mg de catequina/100 g de feijão. A variedade Ouro Branco foi a que apresentou menor teor de taninos e o cultivar Vermelho Coimbra maior conteúdo. O grau de digestibilidade in vitro variou entre 50,01 e 68,82% para os diferentes cultivares estudados. A variedade Aporé foi a que apresentou o menor valor de digestibilidade protéica (50,01%), seguido pelo cultivar Vermelho Coimbra. Não houve correlação entre os teores de taninos e a digestibilidade in vitro, indicando que o cozimento é suficiente para eliminar a interferência destes compostos na digestibilidade protéica. Os valores encontrados para digestibilidade in vitro de proteínas das variedades estudadas foram próximos àqueles obtidos para a digestibilidade in vivo por vários autores que analisaram diversos cultivares. Neste trabalho, os valores encontrados para digestibilidade in vitro foram cerca de 70% que aqueles encontrados para a digestibilidade in vivo para estas mesmas variedades. Portanto, estas análises utilizando-se feijão sugerem uma possibilidade da utilização, pelas indústrias de alimentos, de métodos de digestibilidade protéica in vitro, desde que sejam devidamente respeitados todos os critérios adequados para a utilização deste parâmetro bioquímico. A aplicação e o uso de digestibilidade in vitro pela indústria é de extrema importância, pois estes testes podem ser realizados em um período de 24 horas, ao passo que experimentos in vivo, além de serem bastante complexos, requerem dias e, muitas vezes, meses para serem concluídos. Em escala industrial, o método in vitro é muito útil, pois permite uma análise prévia do grau de digestibilidade do material em um curto período de tempo. / This work had the objectives of evaluating the chemical composition, mineral content (Fe, Ca, Mn, Mg, Cu, Zn and K), tannins and the degree of in vitro protein digestion, of a different cultivars of beans (Phaseolus vulgaris L.) Aporé, Aruã, Rudá, Pérola, Carioca, Ouro Branco, RAO 33, A 774, Vermelho Coimbra, Ouro Negro and Diamante Negro, provide by EMBRAPA – Arroz e Feijão, situated in Goiania, state of Goias. The results demonstrated that the mineral contents expressed in mg/100g of dry sample varied from 4.46 to 6.40 for Fe, 122.53 to 207.41 for Ca, 1.31 to 2.16 for Mn, 164.56 to 239.48 for Mg, 1.22 to 2.74 for Cu, 2.34 to 3.35 for Zn, and 1172.55 to 1542.45 for K. The content of tannins varied between 3.21 to 31.71 mg of catechin/100g of bean. The variety Ouro Branco showed the lowest content of tannins, and the cultivar Vermelho Coimbra, presented the highest content. The extent of in vitro digestion varied between 50.01% to 68.82% for the different varieties. The variety Aporé showed the smallest value for protein digestion (50.01%), followed by Vermelho Coimbra. There was no correlation between the contents of tannins and the in vitro digestion, which demonstrated that the simple stage of cooking is sufficient for eliminating the interference of these compounds. The values found for in vitro digestion of proteins for the studied varieties were close to those obtained for digestion in vivo by various authors who analysed several varieties. Besides, the values obtained for in vitro digestion were around 70% of those found for digestion in vivo for those varieties. However, these analyses using bean, suggest the possibility of using in vitro protein digestion methods by food industries, as long as respected all suitable criteria for the usage of this biochemical parameter. The application and use of in vitro digestion by the industry is important, because such tests can be carried out in a 24-hour period, whereas, in vitro experiments, require days, and many times even months, to be concluded.

Orientador: Marco Eustáquio de Sá / Banca: Orivaldo Arf / Banca: Ronaldo da Silva Viana / Resumo: O uso de produtos via foliar visando o aumento na produtividade das culturas tem sido objeto de várias pesquisas nos últimos anos. O objetivo do presente trabalho foi estudar o efeito de doses de um complexo de micronutrientes em três épocas de aplicação, com e sem uso de biorregulador, sobre a produtividade e qualidade das sementes obtidas de dois cultivares de feijoeiro. O experimento foi realizado na Fazenda Experimental de Ensino, Pesquisa e Extensão da Faculdade de Engenharia - UNESP, localizada no município de Selvíria - MS, no período de outono/inverno de 2013, com irrigação por pivô central. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados em 36 tratamentos obtidos do esquema fatorial 3 (épocas) x 6 (complexo micronutrientes) x 2 (com e sem uso de biorregulador). As épocas de aplicações foram no estádio V 4 ( V 4-3, V 4-6 e V 4-9 ). As doses do complexo de micronutrientes foram de 0; 0,6; 1,2; 1,8; 2,4; e 3,0 L ha -1, contendo Zn, Mn, Cu, B e Mo, com e sem de biorregulador ( 0 e 1,5 L ha -1 ). Foram utilizados sementes dos cultivares IAC Formoso e IAC Imperador, na densidade de 12 plantas m -1 . A cultura foi implantada sobre palhada de Urochloa ruziziensis em sistema plantio direto em 29 de abril de 2013, no espaçamento de 0,45 m entre linhas. A adubação de semeadura foi de 250 kg ha -1 da formula 4-30-10. Em cobertura foi aplicado 50 kg ha -1 de N utilizando-se como fonte a uréia. Os resultados indicam que existe variação da resposta à aplicação do complexo de micronutrientes no feijoeiro em função da época de aplicação nos diferentes estádios de desenvolvimento nos cultivares IAC Imperador e IAC Formoso; o conjunto de resultados indicam o estádio V 4-6 como melhor época de aplicação; para produção e qualidade das sementes obtidas, são indicados o conjunto doses entre 1,0 e 1,5 L ha -1 do complexo de micronutrientes; o incremento ocorreu de modo semelhante com e sem... / Abstract: The use of foliar products in order to increase the productivity of crops has been the subject of several studies in recent years. The aim of this study was to evaluate the effect of doses of a complex of micronutrients in three application times, with and without use of plant growth regulator on the productivity and quality of seeds on two bean cultivars. The experiment was conducted at the Experimental Farm of Education, Research and Extension of the Engineering College - UNESP, located in Selvíria - MS, in Fall / Winter 2013 with center pivot irrigation. The experimental design was a randomized blocks in 36 treatments obtained from the factorial 3 (times) x 6 (complex micronutrients) x 2 (with and without use of plant growth regulator). Times of applications were in V 4 stage (V 4-3, V 4-6 and V 4-9 ). The complex micronutrients doses were 0; 0.6; 1.2; 1.8; 2.4; and 3.0 L ha-1 Zn, Mn, Cu, B and Mo, with or without a biostimulant (0 and 1.5 L h-1). Seeds of cultivars IAC Formoso and IAC Imperador were used in 12 plant density m -1 . The culture was established on straw of Urochloa ruziziensis under no-tillage on 29 April 2013, at 0.45 m spacing between rows. Fertilization sowing was 250 kg ha -1 formula 4-30-10. Coverage was applied 50 kg ha -1 N using as source urea. The results indicate that there is variation in the response to the application of micronutrient complex on the bean depending on the time of application at various stages of development in the IAC Formoso and IAC Imperador; the result set indicate the V 4-6 stadium as the best time of application; the set doses for production and quality of seeds obtained indicate doses ranging from 1.0 to 1.5 L h -1 micronutrient complex; The increase was the same with and without application of the plant growth regulator; the obtained seeds have high physiological quality with high germination and high vigor / Mestre

Orientador: Antonio Carlos Maringoni / Resumo: Foram avaliados, no presente trabalho, o tempo de sobrevivência de um isolado de Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli (Xap), resistente ao sulfato de estreptomicina, em restos de cultura de feijoeiro no campo, e a presença dessa bactéria em 34 lotes de sementes de feijoeiro produzidas no Estado do Paraná, safras 1998/99 e 1999/99. A sobrevivência de Xap em restos de cultura foi avaliada em diferentes períodos do ano, simulando aproximadamente as três épocas de cultivo de feijão no Brasil (safras das secas, das águas e de inverno), em folíolos infectados mantidos na superfície do solo, com e sem cobertura morta, e enterrados a 10 e 15 cm de profundidade. Os resultados evidenciaram a sobrevivência do agente causal do Crestamento Bacteriano Comum do Feijoeiro de 30 a 45 dias, nos períodos mais úmidos, e de até 90 a 120 dias, nos períodos mais secos, para os tratamentos com tecidos enterrados. Para os tratamentos de superfície, a sobrevivência foi de 45 a 75 dias, nos períodos mais úmidos, e de até 180 dias, nos períodos mais secos. Os dados não mostraram diferenças importantes entre os tratamentos de superfície, solo nu e cobertura com palha, e nem entre os tratamentos com incorporação, 10 e 15 cm de profundidade. Quanto à qualidade sanitária das sementes fiscalizadas de feijoeiro produzidas no Estado do Paraná, nas safras 1998/99 e 1999/99, no que diz respeito à Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli, foi observada a presença dessa bactéria em 50 % dos lotes, com incidência variando de 0,1 % a 1,7 % de sementes contaminadas/infectadas. / Abstract: The present work evaluated the time of survival of a Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli (Xap) isolate, resistant to the streptomycin sulfate, in culture remains of bean in the field, and the presence of this bacteria in 34 lots of bean seeds produced in the State of Paraná, crops 1998/99 and 1999/99. The survival of Xap in culture remains was evaluated in different periods of the year, simulating the three seasons of bean cultivation in Brazil (crop of the droughts, waters and winter), in sick leaves maintained in the soil surface, with and without plant died cover, and buried at 10 and 15 cm of depth. The results obtained evidenced the bacterial common blight of the bean causal agent's survival from 30 to 45 days, in the most humid periods, and up to 90 to 120 days, in the driest periods, for the tissue buried treatments. For the surface treatments, the survival was from 45 to 75 days, in the most humid periods, and up to 180 days, in the driest periods. The data did not show important differences among the surface treatments, nude soil and covering with straw, and nor among the treatments with incorporation, 10 and 15 cm of depth. With relationship to the sanitary quality of the bean seeds produced in the State of Paraná , crops 1998/99 and 1999/99, in what concern the Xap presence, the results of the tests revealed the presence of this bacteria in 50 % of the lots, with incidence varying from 0,1% to 1,7% of infected seeds. / Doutor

Orientador: Antonio Carlos Maringoni / Banca: Margarida Fumiko Ito / Banca: Renate Krause Sakate / Resumo: O feijão-vagem (Phaseolus vulgaris L.) pertence à mesma família e espécie botânica do feijão comum que é cultivado no Brasil. O feijão-vagem é cultivado em cerca de 100 países, envolvendo grande número de gêneros e espécies. A antracnose incitada pelo fungo Colletotrichum lindemuthianum (Sacc. & Magn.) é uma das doenças mais importantes dessa cultura, pois causa severos danos. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a sensibilidade in vitro e in vivo de 12 isolados de C. lindemuthianum de feijão-vagem, oriundos de diversas localidades situadas no Estado de São Paulo, a fungicidas, bem como determinar as raças fisiológicas desse fungo. A sensibilidade a fungicidas in vitro foi determinada através da aferição do crescimento micelial (12 isolados) e da germinação de conídios (4 isolados) em 5 concentrações (0, 1, 10, 100, 1000μg.mL-1) dos produtos oxicloreto de cobre + mancozeb, chlorotalonil, chlorotalonil + tiofanato metílico, tiofanato metílico, mancozeb, metiram + piraclostrobina, piraclostrobina, óxido cuproso e carbendazim foram adicionados em meio batata - dextrose - ágar (BDA) e determinadas as faixas de ED50. Para a avaliação in vivo, folhas primárias de feijão-vagem cultivar Itatiba II foram imersas nas soluções dos fungicidas oxicloreto de cobre + mancozeb (2g/L), chlorotalonil (2g/L), chlorothalonil + tiofanato metílico (3,5g/L), tiofanato metílico (2g/L), mancozeb (4g/L), metiram + piraclostrobina (3g/L), piraclostrobina (0,6ml/L), óxido cuproso (2g/L) e carbendazim (2ml/L), inoculadas separadamente com conídios dos quatro isolados de C. lindemuthianum, mantidas em placas de Petri, sob condições controladas e os... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The snap bean (Phaseolus vulgaris L.) belongs to the same family and botanical species of common bean that is grown in Brazil. It is a crop planted in about 100 countries around the world, involving a large number of genera and species. The anthracnose incited by Colletotrichum lindemuthianum (Sacc. & Magn.) is one of the most important diseases of this crop, it causes severe damage. This study aimed to evaluate the sensitivity in vitro and in vivo to fungicides of 12 isolates of C. lindemuthianum from snap beans of various localities in the state of São Paulo, as well as determine the races of this fungus. The sensitivity to fungicides in vitro was determined by measuring the mycelial growth (12 isolates) and spore germination (4 isolates) in 5 concentrations (0, 1, 10, 100 and 1000μg.mL-1) of fungicides oxychloride copper + mancozeb, chlorothalonil, chlorothalonil + methyl thiophanate, methyl thiophanate, mancozeb, metiram + pyraclostrobin, pyraclostrobin, oxide copper and carbendazim were added in potatodextrose- agar (PDA) and the ED50 interval were determineted. For in vivo evaluation, primary leaves of snap bean cultivar Itatiba II were immersed in solutions of the fungicides mancozeb + copper oxychloride (2g / L), chlorothalonil (2g / L), chlorothalonil + thiophanate methyl (3.5 g / L) , thiophanate-methyl (2g / L), mancozeb (4g / l), metiram + pyraclostrobin (3g / L), pyraclostrobin (0.6 mL / L), cuprous oxide (2 g / L) and carbendazim (2ml / l), conidia of the four isolates of C. lindemuthianum were inoculated separately and kept in petri dishes under controlled conditions. Symptoms of the disease were assessed with a diagrammatic severity. The results showed that the isolates of C. lindemuthianum from snap-beans presented low sensitivity to fungicides on mycelial growth of cooper oxide, mancozeb... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-01-25Bitstream added on 2014-06-13T18:39:33Z : No. of bitstreams: 1 nascimento_ms_me_ilha.pdf: 349212 bytes, checksum: de4a97b4521dc8d83da87f2f700a3e24 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O nitrogênio é o nutriente absorvido em maior quantidade pelo feijoeiro e o molibdênio, além da importância no processo de fixação de nitrogênio atmosférico, está associado ao metabolismo deste nutriente. Assim, o trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar, na cultura do feijão, em sistema de plantio direto, o efeito da aplicação de doses de nitrogênio em cobertura (0, 30, 60, 90 e 120 kg ha-1) bem como a aplicação foliar de molibdênio (0, 80 e 160 g ha-1), aplicado em duas fases de desenvolvimento das plantas (fase de desenvolvimento V3 e fase de desenvolvimento V4) utilizando sementes do cultivar Pérola. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados com 30 tratamentos e 4 repetições. O estudo foi realizado em área experimental pertencente à Faculdade de Engenharia Campus de Ilha Solteira - UNESP, localizada no município de Selvíria-MS, em solo originalmente sob vegetação de cerrado e cultivado anteriormente com a cultura do milho. Foram realizadas as seguintes avaliações: população de plantas, matéria seca de plantas, nitrogênio nas folhas e grãos, molibdênio nas folhas e grãos, altura de inserção da primeira vagem, comprimento da primeira vagem, componentes de produção (número de vagens/planta, número de grão/planta, número de grão/vagem e massa de 100 grãos) e rendimento de grãos. A aplicação de Mo via foliar não 2 interfere na produtividade, e a aplicação de doses crescentes de nitrogênio em cobertura proporciona aumento crescente no teor de nitrogênio nas folhas e na produtividade de grãos. Termos para Indexação: Phaseolus vulgaris L., doses de N... / Nitrogen is the nutrient most uptaken by common bean plant, and molybdenum besides its importance to N fixation process, is associated to N metabolism. Thus, this micronutrient lack produces symptoms like those caused by N deficiency. This research had the objective of evaluating, on common bean crop, the effect of N levels application in side dressing (0, 30, 60, 90 and 120 kg ha-1) as well as the leaf application of Mo (0, 80 and 160 g ha-1) in development phases V3 and V4 under no tillage system. The experimental design was the randomized blocks with 30 treatments and 4 repetitions. The research was carried out in Selvíria-MS on soil previously cropped with corn. Stand, dry matter weight, N in leaves and seeds, Mo in leaves and seeds, 1st pod insertion height, 1st pod length, number of pod per plant, number of seed per plant, number of seed per pod, weight of 100 seeds and yield were evaluated. The application of Mo on leaf does not interfere on the productivity. The application of increasing levels of nitrogen in side dressing causes a crescent increase in nitrogen level on leaves and on grains productivity

Tese(doutorado)—Universidade de Brasília, Departamento de Biologia Celular, Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2011. / Submitted by Sabrina Silva de Macedo (sabrinamacedo@bce.unb.br) on 2012-07-03T15:45:44Z No. of bitstreams: 1 2011_CristianeTeresinhaCitadin.pdf: 2307833 bytes, checksum: 153d8486e61c946638efe8f3e173fc9b (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-07-05T18:09:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_CristianeTeresinhaCitadin.pdf: 2307833 bytes, checksum: 153d8486e61c946638efe8f3e173fc9b (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-05T18:09:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_CristianeTeresinhaCitadin.pdf: 2307833 bytes, checksum: 153d8486e61c946638efe8f3e173fc9b (MD5) / O feijão-caupi (Vigna unguiculata L. Walp) é uma leguminosa de grande importância na alimentação humana, e tem sido alvo de melhoramento clássico por décadas, no entanto, algumas características, como resistência a estresses bióticos e teores de aminoácidos sulfurados em sementes, ainda não puderam ser incorporados. Nas últimas três décadas, uma série de tentativas foi realizada com intuito de desenvolver protocolos reprodutíveis na geração de feijão-caupi transgênico que permitam a expressão de genes de importância agronômica, especialmente aqueles que não foram incorporados pelo melhoramento clássico. No momento atual, vários pesquisadores têm estabelecido com sucesso procedimentos para transformação genética de feijão-caupi. Neste trabalho é relatada a obtenção de feijão-caupi transgênico resistente ao herbicida Imazapyr. Para isso, foram utilizados vetores contendo um cassete de expressão constitutivo da enzima AtAHAS. Estas plantas foram transformadas pela técnica de biobalística e um total de 16 linhagens transgênicas confirmadas por análises de Southern blot. Bioensaios para determinar a tolerância ao herbicida foram realizados usando diferentes concentrações de imazapyr. Algumas linhagens mostraram alta tolerância, sobrevivendo em até 400g/ha de imazapyr e não apresentando sintomas ao herbicida, demonstrando que o gene Atahas é capaz de gerar tolerância a herbicida a Imazapyr em feijão-caupi. Também é reportado neste trabalho, a introdução do gene de uma δ-zeína do milho (Zea mays) de 18 kDa (dzs18), que é rica em resíduos aminoácidos de metionina. Análises de Southern blot confirmaram a introdução do transgene no genoma da planta em múltiplos loci. No entanto, a segregação na progênie ficou próxima de uma razão de 1:1, sugerindo interferência na produção de gameta. Análises de expressão da proteína em sementes da única planta transgênica segregante foram negativas. Assim sendo, neste trabalho não foi possível analisar aumento dos níveis de metionina na semente. Não é possível concluir ainda o motivo da não expressão da δ-zeína em caupi, necessitando da geração de um número maior de eventos transgênicos segregantes. Dentre as plantas transformadas para expressar o gene dzs18, duas apresentaram fenótipo de esterilidade juntamente com multibrotação, multifloração e escasso número de folhas. Essas observações levaram a questionar se as mutações eram devido ao um efeito do transgene ou de mutagênese insercional, além de questionar que alterações nas flores poderiam estar levando ao fenótipo de esterilidade. Análises de Southern blot mostraram a presença de múltiplas cópias do transgene, aumentando as chances de que o fenótipo observado esteja relacionado com mutagênese insercional. Análise de polens e óvulos mostrou sérias alterações, além de indeiscência das anteras, explicando o fenótipo de esterilidade, concluindo tratar-se de alterações na maturação dos gametas. RT-PCR das folhas confirmou a presença de transcritos do transgene, sugerindo que as alterações podem estar relacionadas também com a expressão da δ-zeína. Os dados gerados não são capazes de confirmar se as mutações se devem ao transgene ou a mutagênese insercional, por isso mais análises precisam ser realizadas, incluindo a geração de mais eventos para esse transgene. Para isso também, bibliotecas de Genome walking foram confeccionadas para futura análise e correlação entre os lócus de inserção do transgene no genoma de feijão-caupi. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The cowpea (Vigna unguiculata L. Walp) is a legume of great importance for human nutrition. Some characteristics, such as resistance to biotic stress and levels of sulfur amino acids in seeds, have not yet been incorporated by the classical breeding. In the last three decades several attempts were made in order to develop reproducible protocols for generation of transgenic cowpea plants, allowing the expression of genes of agronomic importance. At the present, several researchers have successfully established procedures for genetic transformation of cowpea, presenting evidence of stable transgene integration, which segregated in a Mendelian fashion. In this work it is reported the obtaintion of transgenic cowpea lines resistant to the imidazolinone herbicide group. For this, we used vectors containing a cassette for the AtAHAS enzyme constitutive expression. These lines were transformed by the biolistic system and a total of 16 transgenic lines was confirmed by Southern blot analysis. Bioassays to determine the tolerance to herbicide was carried out using different concentrations of imazapyr. Some lines showed high tolerance, surviving to 400g/ha imazapyr and presenting no herbicide symptoms. Different levels of tolerance could not be associated to the integrity of the expression cassette. It is also reported in this paper, the introduction in cowpea of an 18 kDa δ-zein gene of maize (Zea mays), which is rich in methionine amino acid residues. Southern blot analysis confirmed the introduction of the transgene into the plant genome at multiple loci. However, the segregation in the progeny did not occurred as expected, being closed to a segregation ration of 1:1, suggesting interference with the production of gametes. Analysis of protein expression in transgenic seeds of single plant segregating was negative. Thus, was not possible to analyze increased levels of methionine in the seed. It is not yet possible to conclude the reason for the negative expression of δ-zein in cowpea, necessitating the generation more number of segregating transgenic events. Among the plants transformed to express the δ-zein gene, two of then showed a sterility phenotype with multiple formation of both shoots and flowers. In addition, a small number of leaves was also observed. These lines had multiple copies of the transgene integrated into the genome, as observed in the Southern blot analysis, increasing the chances that the observed phenotype is related to insertional mutagenesis. Analysis of pollen and ovules showed serious change, and indehiscence anthers, explaining the phenotype of sterility, concluding that it is changes in the gametes maturation. RT-PCR confirmed the presence of sheets of transcripts of the transgene, suggesting that the changes may also be related to the expression of δ-Zein. The data generated are not able to confirm if mutations are due to the transgene or insertional mutagenesis, so further analysis must be performed, including generation of more transgene events. Genome walking libraries were prepared for further analysis and correlation between the locus of insertion of the transgene in the genome of cowpea.

Tese (Doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, 2012. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-09-06T13:53:56Z No. of bitstreams: 1 2012_EmanuelFelipeMedeirosAbreu.pdf: 2453482 bytes, checksum: 74193cbd52cf84b634766a3d957e9018 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-09-06T13:54:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_EmanuelFelipeMedeirosAbreu.pdf: 2453482 bytes, checksum: 74193cbd52cf84b634766a3d957e9018 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-06T13:54:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_EmanuelFelipeMedeirosAbreu.pdf: 2453482 bytes, checksum: 74193cbd52cf84b634766a3d957e9018 (MD5) / O feijão-caupi (Vigna unguiculata (L.) Walp.) é uma importante leguminosa para o Nordeste brasileiro e tem sido tradicionalmente cultivada por pequenos agricultores. Doenças virais são consideradas um dos principais fatores limitantes da produtividade do caupi nesta região. A doença do mosaico severo do caupi é causada pelo Cowpea severe mosaic virus (CPSMV), subfamília Comovirinae, gênero Comovirus, juntamente com o Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV), família Potyviridae, gênero Potyvirus, são consideradas as viroses mais prevalentes da cultura e responsáveis por grandes perdas na produção. O objetivo do presente trabalho foi estudar a variabilidade genética do CPSMV e CABMV obtidos em diferentes municípios do Nordeste brasileiro. Essa informação é crucial para o desenvolvimento de plantas resistentes a essas viroses tanto por métodos convencionais quanto moleculares de melhoramento. Isso é ainda mais crítico para o desenvolvimento de estratégias baseadas em RNA inteferente (RNAi). Plantas com sintomas de infecção pelo CPSMV e CABMV nos estados do Piauí, Ceará, Rio Grande do Norte, Paraíba, Pernambuco, Distrito Federal, Sergipe e Bahia foram coletadas, e os isolados foram identificados por Dot-blot e RT- PCR. Foram amplificados fragmentos de 2200 pb, (correspondendo a região da Helicase (Hel), Proteína ligada ao genoma viral (VPg), Picornain 3C- protease (Pro) e RNA polimerase) e 997 pb (correspondendo a região da proteína Inclusão Cilíndrica (CI) e da proteína 6K2) dos vírus CPSMV e CABMV por RT-PCR, respectivamente. Alguns fragmentos foram clonados e outros sequenciados diretamente do produto de PCR em ambas as orientações. As sequências obtidas a partir de diferentes isolados foram comparadas com sequências disponíveis no GenBank. Os alinhamentos das sequências foram obtidos usando o programa Clustal W, e uma árvore filogenética foi criado usando o software MEGA 5.1. A análise revelou baixa variabilidade entre isolados de CPSMV, variando entre 98 e 100% para sequências de nucleótidos e 96-100% para a sequência de aminoácidos deduzida. Entre os CABMV isolado, a variabilidade foi maior, variando 84-99% entre as sequências de nucleótidos 91 a 99% das sequências de aminoácidos. Este estudo fornece informações que serão a base para o desenvolvimento de estratégias para a produção de linhagens de caupi resistentes a estes vírus por RNA interferente. Os dados indicam a possibilidade de obtenção de resistência durável e aplicável ao caupi nas principais áreas produtoras no Brasil. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Cowpea (Vigna unguiculata) is an important plant crop in Northeast Brazil being traditionally cultivated by small farmers. Virus diseases are considered to be the main factor limiting cowpea yield in the region. The severe mosaic disease caused by the Cowpea severe mosaic virus (CPSMV), subfamily Comovirinae, genus Comovirus, seems to be one of the most prevalent diseases leading to high yield losses in this crop. The Cowpea aphid borne mosaic virus (CABMV) belongs to the genus Potyvirus in the Potyviridae family, and infects cowpea worldwide. In the northeastern region of Brazil, both viruses can be found in cowpea planted areas. The aim of the present study was to access the degree of homology among regions amplified of different isolates of CPSMV and CABMV, respectively; obtained in different northeastern regions in Brazil, and to compare it to isolates throughout the world. Plants with CPSMV and CABMV symptoms from the states of Piauí, Ceará, Rio Grande do Norte, Paraiba, Pernambuco, Alagoas, Sergipe, Bahia and Distrito Federal were collected, and the isolates were identified by RT-PCR analysis. Total RNA was extracted from infected tissue and afterwards used for synthesis of cDNA fragments by RT-PCR. The synthetized primers were able to amplify fragments of 2200 and 997 bp of the CPSMV and CABMV virus, respectively. Amplification products were directly cloned into the pGEMT-Easy plasmid vector (Promega), according to the manufacturer’s instructions. Cloned fragments were sequenced in both orientations. Deduced amino acid sequences of the virus were compared to sequences available from GenBank. Multiple sequence alignments were obtained with Clustal W. Phylogenetic trees using the MEGA version 5.1 software package and the neighbour-joining method with Poisson correction. Tree branches were bootstrapped with 1000 permutations. CPSMV and CABMV diseases remain as limiting factors in this crop in Brazil, and breeding programs, either by conventional or engineered approaches, should be targeted at establishing resistance of cowpeas to CPSMV and CABMV.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2012. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2012-09-04T10:47:40Z No. of bitstreams: 1 MARY-ANN ELVINA XAVIER.pdf: 1811588 bytes, checksum: b6a72e0cbefad213d4d0806947b0b504 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2012-12-21T13:44:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 MARY-ANN ELVINA XAVIER.pdf: 1811588 bytes, checksum: b6a72e0cbefad213d4d0806947b0b504 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-12-21T13:44:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MARY-ANN ELVINA XAVIER.pdf: 1811588 bytes, checksum: b6a72e0cbefad213d4d0806947b0b504 (MD5) / Com o intuito de desenvolver novos materiais para tratamento do câncer, o objetivo deste trabalho foi associar dois componentes, sendo um com atividade anticarcinogênica comprovada: o BTCI e nanopartículas de maghemita recobertas por dextrana (MagDex) e caracterizar magnética e biofisicamente o complexo formado. A atividade antitumoral do BTCI foi comprovada contra células MCF-7 e essa molécula associada às nanopartículas biocompatíveis pode ser direcionada para um local sítio específico e lisar células tumorais no processo de magnetohipertermia. A caracterização do complexo foi feita pelos métodos: microscopia eletrônica de transmissão e de varredura, espalhamento de luz dinâmico (diâmetro hidrodinâmico, potencial zeta e polidispersividade), fluorescência (número de sítios e constante de associação), dicroismo circular, ensaios enzimáticos colorimétricos para avaliação da atividade inibitória do BTCI, birrefrigência magnética estática, ensaios de associação do inibidor. De acordo com análises de diâmetro hidrodinâmico, o BTCI complexou com as nanopartículas de MagDex. A constante de associação do complexo foi de 104 M-1 em pH 4,0 e 103 M-1 em pH 7,4 e pH 10,0. Segundo os parâmetros termodinâmicos, nessas três condições de pH, a associação do complexo foi espontânea, dirigida entropicamente com contribuições de associações hidrofóbicas e ligações de hidrogênio. A associação de BTCI a MagDex não alterou o conteúdo das estruturas secundárias, nem a atividade inibitória do BTCI complexado contra suas enzimas cognatas de forma expressiva. Adicionalmente, BTCI-MagDex manteve as características magnéticas de MagDex, como a maior resposta de susceptibilidade magnética a campos de (300 Oe), mesmo após diluições. O ensaio de sedimentação magnética sugere que 80% do BTCI associa às nanopartículas. Em conclusão, os resultados obtidos nesse trabalho sugerem que BTCI-MagDex apresenta características físico-químicas que favorecem a estabilidade e atividade do BTCI e a manutenção das propriedades magnéticas das nanopartículas, condição esta que é fundamental para estudos futuros que visem a aplicação desse sistema na terapia contra o câncer. / In order to develop new materials for the treatment of cancer, the objective was to associate two components, one with proven anticancer activity: the BTCI and maghemite nanoparticles coated with dextran (MagDex) and magnetic and biophysically characterize the complex formed. The antitumor activity of BTCI was proven against MCF-7 cells and this molecule associated with biocompatible nanoparticles can be targeted to a specific site location and kill tumor cells in the process of magnetohipertermia. The characterization of the complex was made by the methods: transmission electron microscopy and scanning electron microscopy, dynamic light scattering (hydrodynamic diameter, zeta potential and polydispersity), fluorescence (number of sites and association constant), circular dichroism, enzymatic colorimetric assays for assessment inhibitory activity of BTCI, static magnetic birefringence, tests of association of the inhibitor. According to analysis of hydrodynamic diameter, BTCI formed a complex with MagDex nanoparticles. The association constant of the complex was 104 M-1 at pH 4.0 and 103 M-1 at pH 7.4 and pH 10.0. According to the thermodynamic parameters, these three pH conditions, the association of the complex was spontaneous, entropically driven with contributions from hydrophobic associations and hydrogen bonding. The association of BTCI-MagDex did not alter the content of secondary structures, nor the inhibitory activity of the complexed BTCI against their cognate enzymes significantly. Additionally, BTCI-MagDex kept MagDex magnetic characteristics, such as susceptibility response to magnetic fields (300 Oe), even after dilution. The test of magnetic sedimentation suggests that 80% of BTCI associated with nanoparticles. In conclusion, the results suggest that BTCI-MagDex has physicochemical characteristics that favor the stability and activity of BTCI and maintenance of the magnetic properties of nanoparticles, a condition which is critical for future studies aimed at applying this system in therapy against cancer.