O trabalho foi conduzido com uvas Cabernet Sauvignon do distrito de Pinto Bandeira, Bento Gonçalves, RS. Essa cultivar se destaca no Brasil pela produção de vinhos tintos de guarda, tendo-se adaptado relativamente bem na Serra Gaúcha. Como outras cultivares tintas, possue, em determinadas safras, dificuldades para obtenção de uma adequada maturação, dificultando a elaboração de vinhos com boa estrutura. Dentre as estratégias adotadas para minimizar esse problema, está a adoção de um adequado manejo do vinhedo e acompanhamento da maturação, aliados a operações enológicas, como controles na maceração e uso de insumos enológicos. Em função desse contexto objetivou-se estudar a aplicação de taninos enológicos e goma arábica para avaliar este uso na composição físico-química e qualidade sensorial do vinho Cabernet Sauvignon. Na safra 2004 foram usados taninos de quebracho e de castanheira, aplicados em três dosagens (5,0 g.hl-1 , 10,0 g.hL-1, 20,0 g.hl-1 ), e em três momentos de aplicação (maceração, 02 dias após o esmagamento; descuba, 08 dias após o esmagamento; após a fermentação malolática, 04 meses após o esmagamento). Na safra 2005 aplicaram-se os taninos de quebracho, de castanheira e de acácia negra, todos na dosagem de 10,0 g.hl-1 , aplicados na maceração. Ainda nessa safra, os vinhos foram tratados com quatro dosagens de goma arábica (0,0 g.L-1 , 1 ,O g.L-1 , 2,0 g.L-1 e 3,0 g.L-1 ) no ato do engarrafamento. Na safra 2006 aplicaram-se os três taninos testados na safra 2005, todos na dosagem de 20,0 g.hl-1 , durante a maceração, e mais um "pool" de quatro taninos (casca de uva, semente de uva, quebracho, carvalho), na dosagem de 10,0 IPT (Índice de Polifenóis Totais), durante a maceração e no vinho estabilizado. Ainda se testaram duas dosagens de goma arábica (0,0 g.L-1 e 3,0 g.L-1 ), aplicadas no momento do engarrafamento. Nos vinhos estabilizados, realizaram-se as análises físico-químicas clássicas, mais características cromáticas e polifenóis, além de uma análise sensorial detalhada. Em função das boas condições meteorológicas apresentadas nas safras estudadas, que levaram à obtenção de uvas de boa qualidade, no que conceme às características físico-químicas clássicas, de modo geral, se verificou que a adição dos taninos teve pouca influência na composição do vinho. Aquelas variáveis que seriam, hipoteticamente, mais influenciáveis, como antocianinas e índices de cor, mostraram, da mesma forma, poucas mudanças significativas. A goma arábica influenciou uma série de características, denotando que sua utilização afeta de maneira mais significativa a composição do vinho. Na análise sensorial, principalmente o perfil aromático dos vinhos foi influenciado pelo uso dos taninos enológicos, especialmente quando aplicados na maceração. Assim, parece ser prudente inferir que o uso associado de taninos de origens diversas, contribuiu de maneira mais efetiva para a qualidade final dos vinhos. A goma arábica, por sua vez, manteve a tendência de influir positivamente na qualidade gustativa dos vinhos, em especial no aumento da maciez e redução da adstringência. Mesmo que parcialmente, em função das diferentes safras, comprovou-se a expectativa que os taninos enológicos contribuem para aumentar a capacidade antioxidante dos vinhos. / The study was performed with Cabemet Sauvignon grapes from the Pinto Bandeira district, Bento Gonçalves, Rio Grande do Sul, Brazil, a cultivar known throughout the country for the production of cellaring red wine which adapted fairly well to the Serra Gaucha region. Like other red wine vines, there can be obstacles to proper maturation in certain harvests, which can curtail the production of well-structured wines. Among the strategies adopted to minimize the problem are using correct vineyard management and monitoring the maturation process, as well as enological operations such as contrais in maceration and the use of enological inputs. This situation has led to the study of the application of enological tannins and gum arabic to assess their use in the physicochemical composition and sensory properties of Cabernet Sauvignon wine. Quebracho and chestnut tannins were used in the 2004 harvest in three different dosages (5.0 g.hL-1, 10.0 g.hL-1, 20.0 g.hl-1 ) and at three different moments (maceration, 02 days after crushing; devatting, 08 days after crushing; after malolactic fermentation, 04 months after crushing). Quebracho, chestnut and black green-wattle acacia tannins were applied to the 2005 harvest, at 10.0 g.hL-1 dosages, ali during maceration . Wines from the same vintage were also treated with four dosages of gum arabic (0.0 g.L-1 , 1.0 g.L-1 , 2.0 g.L-1 and 3.0 g.L-1 ) at bottling. Three tannins tested on the 2005 harvest were applied to the 2006 one, ali at 20.0 g.hl-1 dosages during maceration, as well as a pool of four tannins (grape skins, grape pips, quebracho, oak) at dosages of 10.0 TPI (Total Polyphenollndex) during maceration and to the stabilized wine. Two gum arabic dosages were also tested (0.0 g.L-1 and 3.0 g.L-1 ), applied at bottling. The classical physicochemical analyses were performed on stabilized wines as well as chromatic characteristics, polyphenols and detailed sensory analysis. Due to the good weather conditions of the vintages studied, which led to the harvest of quality grapes regarding the classical physicochemical characteristics, tannin addition had little overall influence on wine composition. Those variables that would, hypothetically, be the most affected by their addition, such as anthocyanines and colar indexes, did not have significant changes either. Gum arabic influenced several characteristics, which shows that their use has more significant effects on wine composition. In sensory analysis, enological tannins primarily affected the aromatic profile of the wines, especially when applied in the maceration, so it seems safe to inter that the concomitant use of tannins from various origins contributed effectively to the final quality of the wines. Gum arabic, in turn, continued to have a positive effect on the palate of the wines, especially by increasing their softness and decreasing their astringency. The hypothesis that enological tannins contribute to the increase in antioxidant capacity in wines proved correct, even if only partially so due to the different harvests.

Os receptores nucleares são uma família de fatores de transcrição que regulam a transcrição gênica em resposta a ligantes e estão envolvidos em vários processos fisiológicos e metabólicos do organismo. O receptor ativado por proliferadores peroxissomais γ (PPARγ) está envolvido em vários processos fisiológicos incluindo adipogênese, homeostase da glicose, metabolismo de lipídios e inflamação e foi identificado como alvo molecular para o tratamento do diabetes tipo II. A importância desse receptor ficou ainda mais evidente pela descoberta de mutações que prejudicam sua função, causando a Síndrome de Resistência ao Ligante, na qual os pacientes apresentam um fenótipo de lipodistrofia parcial, profundas desordens metabólicas como severa resistência à insulina e início precoce de diabetes mellitus tipo II. O PPARγ possui um amplo bolsão de ligação que permite que uma variedade de ligantes possa se ligar ao receptor. Essa variedade de ligantes pode induzir interações diferenciadas com correguladores, o que induzirá uma resposta biológica específica. Os agonistas totais, como as tiazolinedionas (TZDs) são eficientes sensibilizadores da insulina utilizados no tratamento do diabetes tipo II, porém seu uso tem sido limitado devido a efeitos adversos e novas abordagens terapêuticas são necessárias. Neste trabalho, o PPARγ foi caracterizado na presença de ligantes naturais (luteolina, ácidos graxos) e sintéticos (aintiinflamatórios não esteroidais AINEs) e também os mutantes envolvidos na Síndrome de Resistência aos Ligantes do PPARγ através de ensaios funcionais e cristalografia de proteínas. A luteolina apresentou um comportamento de agonista parcial, com atividades antiinflamatórias e com modo de ligação ao receptor diferente da rosiglitazona, resultando em uma diferenciação na expressão gênica em adipócitos. Os AINEs por sua vez, apresentaram diferentes perfis de ativação e modos de ligação ao receptor, além da capacidade de induzirem a diferenciação de adipócitos. Por fim, foi resolvida a estrutura cristalográfica do mutante V290M envolvido na Síndrome de Resistência ao Ligante, que mostrou que a mutação causa significativas alterações na estrutura do receptor, prejudicando sua função, o que representa um importante passo no entendimento das bases moleculares dessa síndrome. / Nuclear receptors are a family of ligand activated trancription factors that regulate gene transcription in response to ligands and are involved in several aspects of human physiology and metabolism. Peroxisome proliferator activated receptor γ (PPARγ) is involved in a range of distinct physiological processes including the regulation of adipogenesis, glucose homeostasis, lipid metabolism and inflammatory responses and it has been identified as a molecular target in the treatment of several diseases as diabetes type II. The importance of this receptor became even more evident by the discovery of mutations that impair its function causing Ligand Resistance Syndrome, in which patients have a phenotype of partial lipodystrophy, profound metabolic disorders such as severe insulin resistance and early onset of diabetes mellitus type II. PPARγ has a large binding pocket that permits that a wide range of ligands can bind to this receptor. This variety of ligands can induce differential interactions with coregulatory factors that will be translated into a specific biological response. PPAR full agonists, like thiazolidinediones (TZDs), are effective insulin sensitizers and antiinflammatories but their use is limited by adverse side effects and new therapeutic approaches are needed. In this study, the PPARγ, as well as their respective mutants involved in Ligand Resistance Syndrome, were characterized in the presence of natural (luteolin) and synthetic ligands (nonsteroidal anti-inflamatory drugs - NSAIDs) by functional assays and protein crystallography. Luteolin showed a partial agonist behaviour, with anti-inflammatory activity and a different binding mode in comparion with rosiglitazone, resulting in a different pattern of gene expression in adipocytes. NSAIDs showed different profiles of activation and binding modes, and they can promote adipocyte differentiation. Finally, we solved the crystal structure of the mutant V290M involved in the Ligand Resistance Syndrome, which showed that the mutation causes significant changes in the structure of the receptor, impairing its function. This structure represents an important step in understanding the molecular basis of this syndrome.

FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Este trabalho descreve o estudo de investigaÃÃo quÃmica da espÃcie Lippia rigida Schauer (Verbenaceae), coletada no municÃpio de MuncugÃ, Bahia. A anÃlise cromatogrÃfica do extrato etanÃlico das folhas de L. rigida permitiu o isolamento e caracterizaÃÃo de 3 flavonÃides do tipo flavanonas: sakuranetina, pinocembrina e 2 flavanonois: 7-metil-aromadendrina e taxifolina; 1 flavona: genkwanina; 3 flavonois: ramnocitrina, canferol e quercetina. Na determinaÃÃo estrutural dos metabÃlicos secundÃrios isolados, utilizou-se tÃcnicas espectroscÃpicas como Infravermelho (IV) e RessonÃncia MagnÃtica Nuclear de hidrogÃnio (RMN 1H) e de carbono-13 (RMN 13C), incluindo tÃcnicas bidimensionais (COSY, HMBC e HSQC), alÃm de espectrometria de massa (EM) e comparaÃÃo com os dados da literatura. Embora todos os compostos isolados sejam conhecidos na literatura, o isolamento de flavonÃides para a espÃcie L. rigida corrobora com a dispersÃo quimiotaxonÃmica desta classe para o gÃnero Lippia. AlÃm disso, os compostos 7-metil-aromadendrina, ramnocitrina, genkwanina e canferol estÃo sendo relatados pela primeira vez para o gÃnero, alÃm do mais os flavonoides 7-metil-aromadendrina e ramnocitrina estÃo sendo relatados pela primeira vez para a famÃlia Verbenaceae. O Ãleo essencial das folhas de Lippia rigida foi obtido por hidrodestilaÃÃo e analisado em CG-EM e CG-DIC. Os componentes majoritÃrios do Ãleo essencial foram α-humuleno (42,3%) e β-cariofileno (13, 0%). O Ãleo foi submetido ensaio de atividade larvicida frente a larvas no estÃgio III do mosquito Aedes aegypti com e apresentou CL50 de 138, 97 Â 1,2 μg/mL. Ensaio de atividade de citotoxicidade frente a linhagens de cÃlulas MDA-MB435, HCT-8 e SF-295, apresentou IC% 83,79, 86,80 e 79,41, respectivamente. A atividade de inibiÃÃo da enzima acetilcolinesterase revelou com halo de inibiÃÃo de 9 mm similar ao controle fisostigmina. / This paper describes the study of chemical research of the species Lippia rigida Schauer (Verbenaceae), collected in the municipality of MuncugÃ, Bahia. Chromatographic analysis of the ethanol extract from leaves of L. rigid allowed the isolation and characterization of flavonoid-type flavanones 3 sakuranetin, pinocembrin and naringenin 2 flavanonois 7-methyl aromadendrin and taxifolin, 1 flavone genkwanin, 3 flavonois ramnocitrin, kaempferol and quercetin. In the structural determination of secondary metabolites isolated, we used spectroscopic techniques such as infrared (IR) and hydrogen nuclear magnetic resonance (1H NMR) and carbon-13 (13C NMR), including two-dimensional techniques (COSY, HMBC and HSQC), and mass spectrometry (MS) and comparison with literature data. Although all the compounds are known in the literature, the isolation of flavonoids for the species L. rigida chemotaxonomy corroborates dispersal of this class to the genus Lippia. Moreover, the compound 7-methyl-aromadendrin, ramnocitrina, genkwanina and kaempferol are being reported for the first time for the genus, besides the more flavonoids 7-methyl-aromadendrin ramnocitrina and are being reported for the first time for the family Verbenaceae. The essential oil of Lippia rigida leaves was obtained by hydrodistillation and analyzed in GC-MS and GC-FID. The major components of the essential oil were α-humulene (42.3%) and β-caryophyllene (13,0%). The oil was subjected testing larvicidal activity against larvae in stage III of the mosquito Aedes aegypti and presented with LC50 of 138.97 Â 1.2 mg/mL. Assay of cytotoxicity activity against cell lines MDA-MB435, HCT-8 and SF-295, IC% showed 83.79, 86.80 and 79.41, respectively. The activity of inhibiting the enzyme acetylcholinesterase inhibition zone revealed with 9 mm similar to control physostigmine.

O trabalho foi conduzido com uvas Cabernet Sauvignon do distrito de Pinto Bandeira, Bento Gonçalves, RS. Essa cultivar se destaca no Brasil pela produção de vinhos tintos de guarda, tendo-se adaptado relativamente bem na Serra Gaúcha. Como outras cultivares tintas, possue, em determinadas safras, dificuldades para obtenção de uma adequada maturação, dificultando a elaboração de vinhos com boa estrutura. Dentre as estratégias adotadas para minimizar esse problema, está a adoção de um adequado manejo do vinhedo e acompanhamento da maturação, aliados a operações enológicas, como controles na maceração e uso de insumos enológicos. Em função desse contexto objetivou-se estudar a aplicação de taninos enológicos e goma arábica para avaliar este uso na composição físico-química e qualidade sensorial do vinho Cabernet Sauvignon. Na safra 2004 foram usados taninos de quebracho e de castanheira, aplicados em três dosagens (5,0 g.hl-1 , 10,0 g.hL-1, 20,0 g.hl-1 ), e em três momentos de aplicação (maceração, 02 dias após o esmagamento; descuba, 08 dias após o esmagamento; após a fermentação malolática, 04 meses após o esmagamento). Na safra 2005 aplicaram-se os taninos de quebracho, de castanheira e de acácia negra, todos na dosagem de 10,0 g.hl-1 , aplicados na maceração. Ainda nessa safra, os vinhos foram tratados com quatro dosagens de goma arábica (0,0 g.L-1 , 1 ,O g.L-1 , 2,0 g.L-1 e 3,0 g.L-1 ) no ato do engarrafamento. Na safra 2006 aplicaram-se os três taninos testados na safra 2005, todos na dosagem de 20,0 g.hl-1 , durante a maceração, e mais um "pool" de quatro taninos (casca de uva, semente de uva, quebracho, carvalho), na dosagem de 10,0 IPT (Índice de Polifenóis Totais), durante a maceração e no vinho estabilizado. Ainda se testaram duas dosagens de goma arábica (0,0 g.L-1 e 3,0 g.L-1 ), aplicadas no momento do engarrafamento. Nos vinhos estabilizados, realizaram-se as análises físico-químicas clássicas, mais características cromáticas e polifenóis, além de uma análise sensorial detalhada. Em função das boas condições meteorológicas apresentadas nas safras estudadas, que levaram à obtenção de uvas de boa qualidade, no que conceme às características físico-químicas clássicas, de modo geral, se verificou que a adição dos taninos teve pouca influência na composição do vinho. Aquelas variáveis que seriam, hipoteticamente, mais influenciáveis, como antocianinas e índices de cor, mostraram, da mesma forma, poucas mudanças significativas. A goma arábica influenciou uma série de características, denotando que sua utilização afeta de maneira mais significativa a composição do vinho. Na análise sensorial, principalmente o perfil aromático dos vinhos foi influenciado pelo uso dos taninos enológicos, especialmente quando aplicados na maceração. Assim, parece ser prudente inferir que o uso associado de taninos de origens diversas, contribuiu de maneira mais efetiva para a qualidade final dos vinhos. A goma arábica, por sua vez, manteve a tendência de influir positivamente na qualidade gustativa dos vinhos, em especial no aumento da maciez e redução da adstringência. Mesmo que parcialmente, em função das diferentes safras, comprovou-se a expectativa que os taninos enológicos contribuem para aumentar a capacidade antioxidante dos vinhos. / The study was performed with Cabemet Sauvignon grapes from the Pinto Bandeira district, Bento Gonçalves, Rio Grande do Sul, Brazil, a cultivar known throughout the country for the production of cellaring red wine which adapted fairly well to the Serra Gaucha region. Like other red wine vines, there can be obstacles to proper maturation in certain harvests, which can curtail the production of well-structured wines. Among the strategies adopted to minimize the problem are using correct vineyard management and monitoring the maturation process, as well as enological operations such as contrais in maceration and the use of enological inputs. This situation has led to the study of the application of enological tannins and gum arabic to assess their use in the physicochemical composition and sensory properties of Cabernet Sauvignon wine. Quebracho and chestnut tannins were used in the 2004 harvest in three different dosages (5.0 g.hL-1, 10.0 g.hL-1, 20.0 g.hl-1 ) and at three different moments (maceration, 02 days after crushing; devatting, 08 days after crushing; after malolactic fermentation, 04 months after crushing). Quebracho, chestnut and black green-wattle acacia tannins were applied to the 2005 harvest, at 10.0 g.hL-1 dosages, ali during maceration . Wines from the same vintage were also treated with four dosages of gum arabic (0.0 g.L-1 , 1.0 g.L-1 , 2.0 g.L-1 and 3.0 g.L-1 ) at bottling. Three tannins tested on the 2005 harvest were applied to the 2006 one, ali at 20.0 g.hl-1 dosages during maceration, as well as a pool of four tannins (grape skins, grape pips, quebracho, oak) at dosages of 10.0 TPI (Total Polyphenollndex) during maceration and to the stabilized wine. Two gum arabic dosages were also tested (0.0 g.L-1 and 3.0 g.L-1 ), applied at bottling. The classical physicochemical analyses were performed on stabilized wines as well as chromatic characteristics, polyphenols and detailed sensory analysis. Due to the good weather conditions of the vintages studied, which led to the harvest of quality grapes regarding the classical physicochemical characteristics, tannin addition had little overall influence on wine composition. Those variables that would, hypothetically, be the most affected by their addition, such as anthocyanines and colar indexes, did not have significant changes either. Gum arabic influenced several characteristics, which shows that their use has more significant effects on wine composition. In sensory analysis, enological tannins primarily affected the aromatic profile of the wines, especially when applied in the maceration, so it seems safe to inter that the concomitant use of tannins from various origins contributed effectively to the final quality of the wines. Gum arabic, in turn, continued to have a positive effect on the palate of the wines, especially by increasing their softness and decreasing their astringency. The hypothesis that enological tannins contribute to the increase in antioxidant capacity in wines proved correct, even if only partially so due to the different harvests.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-07-26T13:27:36Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese_VersaoCorrigida_MagalyLyra.pdf: 1673411 bytes, checksum: 405d398a3391107f6e4300cf86341f21 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-26T13:27:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese_VersaoCorrigida_MagalyLyra.pdf: 1673411 bytes, checksum: 405d398a3391107f6e4300cf86341f21 (MD5) Previous issue date: 2013-05-29 / FACEPE / A diabetes mellitus, por tratar-se de uma doença crônica e por apresentar um crescimento acentuado na sociedade mundial, tornou-se alvo da comunidade científica na busca de novas alternativas terapêuticas. Diversos estudos evidenciam as propriedades farmacológicas (hipoglicemiante e antidiabética) de espécies vegetais empregadas no tratamento desta enfermidade. Nesse contexto, Bauhinia forficata Link, comumente conhecida como pata-de-vaca, figura entre as espécies mais utilizadas para esse fim. Os esforços atuais focalizam na simplificação dos esquemas terapêuticos, para isso, vem sendo desenvolvidas formulações multifármacos, denominadas Associação-dose- fixa (ADF), que através da associação de ativos combinados em uma mesma forma farmacêutica. O objetivo deste trabalho foi desenvolver uma forma farmacêutica granulado efervescente à base de extratos de Bauhinia forficata Link para uma futura obtenção de uma ADF como nova alternativa no tratamento do diabetes melittus. A obtenção da solução extrativa foi realizada através de métodos com parâmetros otimizados para aumento da eficiência extrativa de metabólitos. Os métodos extrativos avaliados foram percolação, maceração, aquecimento a 50ºC, agitação a 200 rpm e agitação com aquecimento. As metodologias por Espectrofotometria no Ultravioleta (UV) e por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) para a quantificação dos marcadores foram desenvolvidas e validadas segundo a legislação vigente. As soluções extrativas sofreram processo de secagem por aspersão e por liofilização, os quais foram caracterizados por diferentes técnicas como Termogravimetria (TG), Calorimetria de Varredura Diferencial (DSC), Espectroscopia no Infravermelho (IV), Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e outras, como também foi avaliado toxicologicamente através do estudo agudo e subcrônico em animais. O produto farmacêutico foi desenvolvido através da elaboração da formulação de granulados efervescentes por um estudo qualiquantitativo, em que se utilizaram diferentes proporções de extratos e excipientes. Nos resultados, observou-se para as amostras um perfil fitoquímico, apresentando: flavonóides, proantocianidinas, leucoantocianidinas, triterpenos e esteróides. As metodologias desenvolvidas mostraram-se específicas, sensíveis, precisas, exatas e robustas, sendo adequadas para as análises realizadas. Na avaliação dos métodos extrativos, a extração com agitação a 200 rpm, aquecimento a 50ºC apresentou maior eficiência na extração de canferitrina e flavonoides totais. O melhor método foi otimizado avaliando os parâmetros massa planta/massa solvente, temperatura, teor de álcool do solvente extrator, velocidade de agitação. Na secagem dos extratos não foi observada influência nas características dos constituintes dos pós após secagem por aspersão, em relação ao extrato fluido através das técnicas utilizadas. Não houve alteração do ganho de massa, consumo de água e ração, dos parâmetros hematológicos e bioquímicos e morfológicos analisados em camundongos machos durante o tratamento por 30 dias consecutivos. A formulação de granulados efervescentes desenvolvidas atendeu a todos os requisitos da avaliação de controle de qualidade, o que proporcionará a população diabética uma nova alternativa terapêutica fitomedicamentosa com qualidade. / Diabetes mellitus, because it is a chronic disease and present a sharp growth in Brazilian society, became the target of the scientific community in the search for new therapies. Several studies show the pharmacological properties (anti-diabetic and hypoglycemic) of plant species used in the treatment of this disease. In this context, the Bauhinia forficata Link, commonly known as paw-of-cow, among the species most commonly used for this purpose. Current efforts focus on the simplification of treatment regimens for this, multidrug formulation has been developed, called Association-fixed-dose (ADF), which through the combination of assets combined in a single dosage form. The aim of this study was to develop pharmaceutical form effervescent granules based on extracts of Bauhinia forficata Link to obtaining a Fixed- Dose-Association as a new alternative in the treatment of diabetes mellitus. Obtaining the extraction solution was through methods with parameters optimized to increase the extraction efficiency of metabolites. The methods were evaluated extractive percolation, maceration, heating to 50 ° C, shaking at 200 rpm and stirring with heating. The methodologies by spectrophotometry Ultraviolet (UV) and High Performance Liquid Chromatography (HPLC) for the quantification of active compounds have been developed and validated according to current legislation. The extractive solutions underwent a process of spray drying and freeze drying, which were characterized by different techniques such as thermogravimetry (TG), Differential Scanning Calorimetry (DSC), infrared spectroscopy (IR), scanning electron microscopy (SEM) and other, was also evaluated toxicologically by acute and subchronic studies in animals. The pharmaceutical product was developed through the preparation of effervescent granular formulation qualiquantitativo by a study, which used different proportions of extracts and excipients. In the results, it was observed for samples one phytochemical profile, featuring: flavonoids, proanthocyanidins, leucoanthocyanidins, triterpenes and steroids. The methodologies developed proved to be specific, sensitive, precise, accurate, robust, and suitable for the analyzes. In the evaluation of extractive methods, extraction with shaking at 200 rpm, heating to 50 ° C showed higher extraction efficiency of canferitrina and total flavonoid. The best method was optimized by evaluating the parameters plant mass / mass solvent, temperature, alcohol content of the organic solvent, stirring speed. Drying of the extracts was not observed influence on the characteristics of the constituents of the powder after spray drying in relation to extract fluid through the techniques used. There was no change in mass gain, feed and water consumption, haematological parameters and biochemical and morphological analysis in male mice during treatment for 30 consecutive days. The effervescent granular formulation developed met all the requirements of the assessment of quality control, which will provide the diabetic population a new therapeutic alternative fitomedicamentosa quality.

Orientador: Yong Kun Park / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-08T04:20:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moraes_CleberSilveira_M.pdf: 1307304 bytes, checksum: bcd25bcdff7cb297e4b623a9f7e51872 (MD5) Previous issue date: 2007 / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador: Alba R. M. Souza Brito / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-08T06:30:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Batista_RangelWillians_M.pdf: 2463513 bytes, checksum: 90bd2dae3ec5cefb9c37861d828c29dd (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Em processos de ulcerogênese por isquemia-reperfusão há grande liberação de radicais livres causando peroxidaçâo lípidica e desestruíuração proteica pela oxidação de grupos -SH, o que altera funções da membrana e de enzimas e leva à disfunção celular e necrose tecidual. Ensaios fitoquímícos revelaram que infusos de Turnera diffusa e T. ulmifolia tem como compostos majoritários flavonas C- glicosiladas derivadas de luteonina e apigenina. A atividade antiulcerogênica destes infusos está comprovada, porém faltam estudos sobre o potencial antioxidante. Relacionando o potencial antioxidante de flavonóides e a atividade antíúlcera do extrato, mostramos in vitro que 50 pg/ml salina do extrato de T. ulmifolia e T diffusa protegem em 58 e 47% a oxidação de GSH proteico na mitocôndria oxidada por 10 uM Fe+2 e 200 uM ascorbato, respectivamente. E proteção de 12 e 50% em mitocôndria oxidada por 1,5 mM Pi e 10pM CaCb, demonstrando poder de manter grupos -SH intactos durante diferentes sistemas de danos à mitocôndria. O potencial de estabilizar a membrana foi corroborado com a diminuição na peroxidaçâo lípidica de 62 e 67% para 7. ulmifolia e T diffusa, respectivamente. Quando testados em úlcera por isquemia-reperfusão como modelo in vivo houve uma diminuição no índice de úlceras de 59 e 69%; com diminuição da peroxidaçâo lípidica de 50 e 51% e manutenção na [-SH] total de até 100% na mucosa gástrica para T. ulmifolia e T diffusa, quando comparadas à salina. / Abstract: Turnera ulmifolia L. and Turnera diffusa Wild are known in folk medicine for treatment of several gastric diseases. Other studies have previously reported anti-ulcer activity and this relationship with your majority composition to be flavonoids. Natural flavonoids are known for scavenging properties on oxygen radicals in vivo and in vitro. The oxyradicals generated during the proposed episodes of ischemia-reperfusion provoke severe changes in mitochondria-generated ROS, induce peroxidation of the membrane lipids and oxidation -SH compounds. Therefore, agents that inhibit the oxidation thiol groups, as well as lipid peroxidation, may be of high pharmacological potential. This work showed activity antioxidant when used mitochondria systems in vitro, both species tea plants exhibited effect to inhibit lipid peroxidation and oxidation thiois proteins compounds induced by FeC^/ascorbic acid, succuiate/rotenone or CaCyinorganic phosphate (Pi). Our experiments in vivo demonstrated effect anti-ulcer and antioxidant to both species in models ischaemia-reperfUsion-ulcer-induced after administration orally tea T. diffusa e T. ulmifolia inhibit lesion ulcer index when compared with control group. And in gastric mucosa exhibited effect to inhibit lipid peroxidation or oxidation -SH total compounds. In model ethanol/HCl-ulcer-induced Turnera ulmifolia show effect anti-ulcer partial dependent to compounds SH and Turnera diffusa demonstrated to be independent effect anti-ulcer to SH compounds. / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientadores: Hiroshi Aoyama, Marcio Andre Miranda / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-09T01:06:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Camargo_CamiladeAndrade_M.pdf: 1153945 bytes, checksum: d090e6ed4e436a5029c6e36de7786df1 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Os flavonóides são fitocompostos polifenólicos, caracterizados quimicamente como heterosídeos flavônicos. Apresentam diversas atividades biológicas devido às suas propriedades antioxidantes e habilidades em modular a atividade de diversas enzimas ou receptores celulares, tornando-os responsáveis pelo efeito protetor contra doenças relacionadas ao sistema cardiovascular; certas formas de câncer e doenças de fotossensibilidade e envelhecimento. As fosfatases ácidas, enzimas que hidrolisam ésteres fosfatos em meio ácido, encontram-se amplamente distribuídas no organismo. Estas enzimas são importantes no catabolismo de diversas substâncias, acreditando-se que a alteração da atividade destas enzimas esteja relacionada com modificações induzidas por drogas e por várias doenças. As transaminases são enzimas hepáticas cujo nível aumenta quando há lesão das células hepáticas (hepatócitos) provocada por qualquer tipo de agressão, como vírus, consumo excessivo de álcool ou drogas. O acetaminofeno é uma droga frequentemente usada como analgésico e antipirético. O dano hepático causado pelo uso frequente ou exagerado do acetaminofeno é comum hoje em dia. A manutenção correta dos sistemas metabólicos hepáticos é de grande importância para a manutenção da saúde. Desta forma, o estudo do flavonóide quercetina como possível protetor dos efeitos hepatotóxicos provocados pelo acetaminofeno pode ser muito promissor. O objetivo do presente trabalho foi estudar os efeitos preventivos e terapêuticos, in vivo, do flavonóide quercetina sobre as atividades de fosfatases ácidas (total, tartarato-resistente e de baixa massa molecular relativa) e de transaminases glutâmica oxalacética (TGO) e glutâmica pirúvica (TGP) no fígado de camundongos, tratados ou não com acetaminofeno. Para o desenvolvimento deste trabalho foi realizado um tratamento agudo (24 horas), de camundongos machos da linhagem Swiss, com quercetina e acetaminofeno, utilizando-se óleo de milho ou nujol como veículo para o flavonóide. A dosagem da TGO e da TGP confirmou que o acetaminofeno pode realmente ser considerado hepatotóxico, quando administrado ou ingerido em grandes concentrações no organismo. A quercetina, dissolvida em óleo mineral, reverteu a hepatotoxicidade induzida pelo acetaminofeno, nos tratamento terapêutico e, em conjunto com acetaminofeno. A quercetina dissolvida em óleo de milho, no tratamento preventivo, pode não ser a única responsável pela reversão da hepatotoxicidade causada pela administração do acetaminofeno, uma vez que quando se substituiu o veículo utilizado, óleo de milho pelo óleo mineral, este efeito não foi mais observado. Comparando-se os resultados obtidos entre fosfatases e transaminases pode-se observar que a atividade da FATR, no tratamento com nujol, demosntra uma semelhança muito grande com os resultados observados nos gráficos das atividades das transaminases e provavelmente pode se considerada uma marcadora de dano hepático. O alfa-tocoferol, presente no óleo de milho, pode ter exercido um efeito antioxidante, e mascarado o efeito protetor da quercetina e a hepatotoxicidade do acetaminofeno. Este estudo foi importante para mostrar que a atividade dos flavonóides no organismo vivo pode ser influenciada por diversos fatores, como: a natureza do veículo utilizado na sua administração, ordem de administração e o tempo de permanecia no organismo / Abstract: Flavonoids are polyphenolic phytocompounds chemically characterized as flavonic heterosides. These compounds present several biological activities due to their antioxidant properties and hability to modulate the activities of enzymes or cellular receptors, making them responsible for the protector effect against diseases related to the cardiovascular system, certain forms of cancer, photosensibility diseases and aging. Acid phosphatases, enzymes that hydrolyze phosphate esters at acid medium, are largely distributed in the organisms. These enzymes are important in the catabolism of several compounds and could be related to the modifications induced by drugs and diseases. Transaminases are hepatic enzymes which levels increase in consequence of hepatic cells (hepatocytes) lesions provoked by agressions such as virus and excessive alcohol and drug consumption. Acetaminophen is a drug frequently used as analgesic and antipyretic. It is common the hepatic damage caused by the frequent or exaggerated use of acetaminophen. The correct maintenance of the hepatic metabolic systems is of great importance for the health. In this way, the study of the flavonoid quercetin as a possible protector of the hepatotoxic effects provoked by acetaminophen seems to be promising. The objectif of the present work was to study the in vivo effects of the flavonoid quercetin on the activities of acid phosphatases (total, tartrate-resistant and relative low molecular weight) and of transaminases glutamic oxalacetic (GOT) and glutamic pyruvic (GPT) in mice livers treated with acetaminophen. To develop this work, it was performed an acute treatment (24 hours) of Swiss male mice, with quercetin and acetaminophen, using corn oil or nujol as a vehicle for the flavonoid. The determination of GOT and GPT activities confirmed that acetaminophen can be considered hepatotoxic, when administered or ingested in great amount. In the therapeutic treatments, when applied with acetaminophen, quercetin, solubilized in mineral oil, reverted the acetaminophen-induced hepatotoxicity. In the preventive treatment, quercetin, solubilized in corn oil, might not be the only responsible for the reversibility, since this effect was no more observed when the vegetal oil was replaced by the mineral oil. The results with FATR, in the treatment with nujol, showed great similarity with the results obtained with transaminases, suggesting that this class of phosphatases could be considered as markers of hepatic damage. The alphatocopherol, present in the corn oil, could be exerting an antioxidant effect, masking the protector effect of quercetin and the acetaminophen hepatotoxicity. The importance of the present study was to stress that the in vivo flavonoids activities can be influenced by several factors, such as, the nature of the vehicle used in the administration, the order of administration and the retention time in the organism / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Marcelo Alexandre Prado / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-15T06:21:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_RaquelGrandode_D.pdf: 1576825 bytes, checksum: 7999d2afafc08d24b6e5611694936446 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O presente estudo buscou aperfeiçoar e validar metodologias de análise de ácido ascórbico e flavonóides em geléias de frutas. A identificação e a quantificação do ácido ascórbico se deram por três formas: (1) método colorimétrico, utilizando o reagente 2,6- diclorofenol-indofenol, (2) Cromatografia Líquida de Alta Eficiência, (3) Eletroforese Capilar. O primeiro e o segundo método foram aplicados em 10 geléias naturais. Em vista dos resultados obtidos, o fabricante modificou a formulação das geléias para aumentar a quantidade de ácido ascórbico. Posteriormente, seis novas geléias foram analisadas pelo segundo e terceiro método. Os resultados foram comparados entre si e a Eletroforese Capilar foi considerada mais adequada. O ácido ascórbico presente nas geléias variou de ¿não detectado¿ a 608 mg em 100 g de amostra. A identificação e a quantificação de flavonóides se deram por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência e também pela Eletroforese Capilar. Os flavonóides quantificados foram: (+)-catequina, (-)-epicatequina, rutina, narirutina, kaempferol, miricetina e quercetina. Os métodos mostraram boa aptidão para a análise em questão. A verificação da composição dos flavonóides nas amostras exige uma etapa extrativa complexa, com isso, o estudo englobou o aperfeiçoamento dessa extração visando resultados mais precisos. Os flavonóides foram encontrados em concentrações de até 23,3 mg por kg de geléia, sendo que a amostra acerola e maracujá foi a que apresentou menor quantidade total e a contendo acerola e rosela foi a de maior valor. Quanto à capacidade antioxidante, os testes foram realizados utilizado o radical livre difenilpicrazil-hidrazina (DPPH¿). Entre os compostos analisados, a quercetina foi aquela que apresentou maior capacidade antioxidante isolada. Foram realizadas combinações em pares dos antioxidantes estudados e apenas a composição de (+)-catequina com ácido ascórbico apresentou sinergismo. Reações antagônicas foram verificadas para as combinações, entre elas: (+)-catequina e (-)-epicatequina, (+)-catequina e rutina, (-)- epicatequina e rutina, (-)-epicatequina e ácido ascórbico. Das amostras analisadas, aquela que apresentou maior capacidade antioxidante foi a geléia de acerola com abacaxi / Abstract: The aims of this study were improving and validate methods to analyze ascorbic acid and flavonoids in fruit jellies. The identification and quantification of ascorbic acid occurred in three ways: (1) a colorimetric method, using the 2,6-dichlorophenolindophenol, (2) a method using the High Performance Liquid Chromatography and, (3) a method by Capillary Electrophoresis. The first and the second methods were applied in 10 natural jellies. In view of the results, the manufacturer modified the formulation of the jellies to increase de amount of the acid ascorbic. Later, six new jellies were analyzed by the second and the third methods. The results were compared with each other and the Capillary Electrophoresis was considered most appropriate. The ascorbic acid in the jellies varied between ¿not detected¿ and 608 mg per gram of sample, considering all samples. The identification and quantification of flavonoids occurred by High Performance Liquid Chromatography and Capillary Electrophoresis. The flavonoids quantified were: (+)- catechin, (-)-epicatechin, rutin, narirutin, kaempferol, myricetin and quercetin. Both methods showed good performance for this analysis. The composition verification of flavonoids in the samples requires a complex extraction step, and then, this study included the improvement of this extraction for more accurate results. The antioxidant capacity was analyzed employing the free radical diphenylpicryl-hydrazyl (DPPH¿). Between the analyzed compounds, the quercetin was the one that showed the highest antioxidant capacity. Combinations were performed in pairs of antioxidant studied and only the composition of (+)-catechin with ascorbic acid showed synergism. Antagonistic reactions were verified to these combinations: (+)-catechin and (-)-epicatechin, (+)-catechin and myricetin, (+)-catechin and rutin, (-)-epicatechin and rutin, (-)-epicatechin and ascorbic acid, kaempferol and rutin, myricetin and rutin, myricetin and ascorbic acid. Between the samples, the acerola with pineapple was the one that showed the greatest antioxidant capacity / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Submitted by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2015-11-03T19:22:57Z No. of bitstreams: 2 Tese - Geralda de Fátima Lemes - 2015.pdf: 8914121 bytes, checksum: cc152b69cbeac837ed2881f260e379f6 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-11-04T10:11:31Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Geralda de Fátima Lemes - 2015.pdf: 8914121 bytes, checksum: cc152b69cbeac837ed2881f260e379f6 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-04T10:11:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Geralda de Fátima Lemes - 2015.pdf: 8914121 bytes, checksum: cc152b69cbeac837ed2881f260e379f6 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-06-12 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / This work describes the chemical evaluation and, in parallel, the investigation of antioxidant and antimicrobial activity of four medicinal species of Brazilian Cerrado, Cayaponia espelina (Silva Manso) Cogn., C. citrullifolia (Griseb.) Cogn., C. weddellii (Naudin) Gomes-Klein (Cucurbitaceae) and Psychotria trichophora Müll. Arg. (Rubiaceae). The study of ethanol extracts of the species mentioned above led to the isolation of several classes of secondary metabolites, many of them presenting biological activity. Evaluation of ethyl acetate fractions of the leaves of C. espelina and n-butanol and hydromethanol fractions of C. citrullifolia led to the isolation and structural elucidation of seven compounds: luteolin (CE- 1), luteolin 4'-O-glucoside (CE-2), luteolin 7-O-glucoside (CE-3), kaempferol 3,7- O-α-L-dirhamnoside (CC-1), benzyl-O-β-D-xylopyranosyl-(1→6)-β-Dglucopyranoside (CC-4), salicylic acid 2-O-β-glucopyranoside (CC-3) and vicenin-2 (CC-2). The glucosides CE-2 and CE-3 found in C. espelina were also found in ethyl acetate fraction from C. weddellii leaves, indicating that there might be a chemical similarity between these species. The fourth species investigated in this study was P. trichophora and the chemical study of ethyl acetate fraction of its leaves led to the isolation and structural elucidation of six compounds: camelliaside B (PT-3), kaempferol-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-[β-Dxylopyranosyl-( 1→2)]-β-D-galactopyranoside (PT-4), kaempferol-3-O-[β-Dxylopyranosyl-( 1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)]-β-D-galactopyranoside (PT- 5), kaempferol-3-O-robinoside (PT-2) and 3-O-p-coumaroylquinic acid (PT-6). Coumarin scopoletin (PT-1) were identified from its roots. Structural identification of compounds was performed by spectroscopic analysis including IR and 1H and 13C NMR, in one-and two-dimensions. Flavonoids PT-4 and PT-5, previously isolated in the Fabaceae and Leguminosae families, were described for the first time in Rubiaceae. Furthermore, CCDA analysis of acid-base fractions obtained from P. trichophora leaves did not result positive for alkaloids against the Dragendorff reagent. Preliminary tests in Escherichia coli showed that the ethyl acetate fraction from C. espelina presents pharmacological potential, inhibiting 74 % of bacterial growth at a 82 μg/mL concentration. This fraction also exhibited strong antioxidant activity, with IC50 value of 5.40 ± 0.16 μg/ml, being comparable to that of the commercial antioxidant, ascorbic acid. Extracts from C. espelina and C. weddelli were the most promising antioxidants with IC50 values of 131 ± 0.31 and 13.14 ± 0.57 μg/mL, respectively. In preliminary bioassays against Sarcoma 180 tumor cell line, all tested samples presented low activity despite the literature data for antitumor activity of the isolated flavonoids. / O presente trabalho descreve o estudo químico e, paralelamente, a investigação das atividades antioxidante e antimicrobiana de quatro espécies medicinais do Cerrado goiano, Cayaponia espelina (Silva Manso) Cogn., C. citrullifolia (Griseb.) Cogn., C. weddellii (Naudin) Gomes-Klein (Cucurbitaceae) e Psychotria trichophora Müll. Arg. (Rubiaceae). O estudo dos extratos etanólicos das espécies citadas conduziu ao isolamento de metabólitos secundários de diversas classes, sendo vários bioativos. O estudo da fração acetato de etila das folhas de C. espelina e das frações n-butanólica e hidrometanólica de C. citrullifolia viabilizou o isolamento e elucidação estrutural de sete compostos: luteolina (CE- 1), luteolina 4’-O-β-D-glicopiranosídeo (CE-2), luteolina 7-O-β-Dglicopiranosídeo (CE-3), canferol 3,7-di-O-α-L-ramnopiranosídeo (CC-1), benzil- O-β-D-xilopiranosil-(1→6)-β-D-glicopiranosídeo (CC-4), ácido β-Oglucosilsalicílico (CC-3) e vicenina-2 (CC-2). Com exceção da vicenina-2, todos os outros compostos estão sendo relatados pela primeira vez no gênero Cayaponia. O estudo da fração acetato de etila das folhas de C. weddellii levou aos mesmos glicosídeos (CE-2 e CE-3) relatados em C. espelina. A quarta espécie investigada neste trabalho foi P. trichophora. O estudo químico da fração acetato de etila das folhas propiciou o isolamento e elucidação estrutural de seis compostos: cameliasídeo B (PT-3), canferol-3-O-{β-D-xilopiranosil-(1→2)-[α-Lraminopiranosil-( 1→6)]}-β-D-galactopiranosídeo (PT-4), canferol-3-O-[β-Dxilopiranosil-( 1→3)-α-L-raminopiranosil-(1→6)]-β-D-galactopiranosídeo (PT-5), canferol-3-O-β-D-robinosídeo (PT-2) e ácido 5-p-coumaroilquínico (PT-6). Nas raízes foi identificada a cumarina escopoletina (PT-1). A elucidação estrutural dos compostos foi realizada através de análise espectroscópica, tais como IV e RMN de 1H e 13C, experimentos uni e bidimensionais.Os flavonoides PT-4 e PT- 5 estão sendo descritos pela primeira vez em Rubiaceae, isolados anteriormente apenas nas famílias Fabaceae e Leguminosae. Análises em CCDA das frações oriundas da extração ácido/base das folhas de P. trichophora não apresentaram reação positiva para alcaloides com o reagente Dragendorff. Testes preliminares com a Escherichia coli revelaram o potencial farmacológico da fração acetato de etila das folhas de C. espelina, com 74 % de inibição de crescimento bacteriano, na concentração de 82μg/mL. Esta fração também exibiu forte atividade antioxidante, com IC50 de 5,40 ± 0,16 μg/mL, comparável ao antioxidante comercial ácido ascórbico. Os extratos brutos etanólicos de C. espelina e C. weddellii foram os mais promissores como antioxidantes, com IC50 de 13,21 ± 0,31 e 13,14 ± 0,57 μg/mL, respectivamente. Em bioensaios preliminares com a linhagem tumoral Sarcoma 180, todas as amostras testadas exibiram baixa atividade, apesar da descrição na literatura de atividade antitumoral para os flavonoides isolados.