A região objeto do presente estudo compreende uma área localizada às margens do rio Taquari, no município de Triunfo (RS), que pertence à bacia hidrográfica Taquari – Antas, com contaminação de solo específica por preservantes de madeira, cujo passivo ambiental são pentaclorofenol, creosoto e hidrosal arseniato de cobre cromado. O local é percorrido por corpos d’água associados à drenagem principal, formando sub-bacias. Através dos ensaios de microssuspensão com Salmonella/microssoma e Allium cepa, o trabalho teve por objetivo relacionar a atividade genotóxica com rotas de dispersão de poluentes. Analisando a área do sítio contaminado a partir dos extratos orgânicos do material drenado para o corpo d’água, após eventos de chuvas significantes e análises de extrato orgânico, água intersticial e sedimento bruto do rio. No teste Salmonella/microssoma, diversas linhagens permitiram avaliar diferentes danos ao DNA, como deslocamento no quadro de leitura (TA97a e TA98) e substituição de pares de base (TA100) em ausência (-S9) e presença (+S9) de ativação metabólica. No teste de Allium, foi possível verificar alterações em nível cromossômico. Respostas positivas de mutagenicidade pelo teste de Salmonella/microssoma do material exportado para fora da área do sítio indicam que este material pode estar sendo carreado para o rio Taquari. Isto pode ser evidenciado pela atividade mutagênica detectada em ambos os testes, na amostra de sedimento do rio coletada em frente ao sítio contaminado. O ponto a jusante no rio em relação ao ponto em frente ao sítio contaminado também foi avaliado e atividade mutagênica foi detectada, já o ponto de referência a montante mostrou pequena atividade mutagênica proveniente de fonte de contaminação diferente. Entretanto, tais poluentes não foram detectados no ponto abaixo. Os bioensaios empregados puderam indicar um possível risco de contaminação para o rio Taquari e mostraram ser eficientes para avaliar a mutagenicidade no material drenado do solo e no sedimento do rio. Embora a atividade mutagênica possa ser relacionada em parte à presença de hidrocarbonetos policíclicos aromáticos nos extratos orgânicos das amostras, derivados do preservante de madeira creosoto ou de fontes antrópicas diversas, outros compostos orgânicos podem ser encontrados nos extratos, uma vez que resíduos de pentaclorofenol estão presentes no sítio. Além disso, a complexidade das amostras de sedimento do rio poderia ainda sofrer a influência de traços de metais pesados. / Mutagenic activity, using Salmonella/microsome and Allium cepa bioassay, was employed as markers to detect pollutant dispersion routes in contaminated soil site covered by water bodies associated with the drainage toward the river. The site of the present study comprises an area located along the banks of the Taquari River, in the city Triunfo (RS) belonging to the Taquari - Antas river basin with identified environmental contaminants (pentachlorophenol, creosote and hydrosalt CCA). The Salmonella/microsoma test evaluated organic extracts of the material drained into the water body after significant rain events as well as Taquari River samples including organic sediment extract, interstitial water and gross sediment. In the Salmonella/microsome test, different strains enabled evaluation of different DNA mutations including frameshift (TA97a and TA98) and base pair substitution (TA100) in the absence (- S9) and presence (+S9) of metabolic activation. The Allium test allowed verification of chromosomal alterations. Positive mutagenicity results in the Salmonella/microsome assay of material from the area indicate that contaminant mixtures may have drained into the Taquari River, as indicated by mutagenic activity detected in both bioassays in sediment samples collected at the contaminated site. Mutagenic activity was also detected at a site downstream from the contaminated site. Although the reference area upstream showed low mutagenic activity originating from a different pollutant source, such pollutants were not found at the downstream sites. The bioassays employed, mainly the Salmonella/microsome assay, can indicate a possible contamination route toward the Taquari River and were proven efficient at evaluating the mutagenicity of drained soil material and sediment from the river.

Submitted by Márcio Ropke (ropke13marcio@gmail.com) on 2017-06-19T11:34:19Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Avaliação da eficácia e dos potenciais efeitos adversos de diferentes técnicas.pdf: 4274709 bytes, checksum: a9b3afabb7002d7d3b911a1d5350aa82 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-19T11:34:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Avaliação da eficácia e dos potenciais efeitos adversos de diferentes técnicas.pdf: 4274709 bytes, checksum: a9b3afabb7002d7d3b911a1d5350aa82 (MD5) Previous issue date: 2015-09-23 / Sem bolsa / O objetivo do estudo foi avaliar a eficácia e os efeitos adversos de diferentes técnicas clareadoras através de ensaios In vivo, In situ e In vitro. O ensaio clínico randomizado objetivou avaliar a eficácia e sensibilidade do clareamento de consultório e caseiro. Para isso, 130 pacientes foram selecionados, divididos em dois grupos e submetidos paralelamente aos dois tratamentos, sendo um placebo. A avaliação da cor foi realizada com espectrofotômetro digital, antes, após e após uma semana da finalização do tratamento. Os parâmetros L*, a* e b* foram submetidos à análise estatística pelo teste de Friedman e complementar de Tukey. Para a sensibilidade, uma escala analógica visual com escores variando de 1 (nenhuma sensibilidade) a 5 (sensibilidade severa) foi preenchida diariamente pelos pacientes. Os dados foram submetidos à análise estatística pelo teste Mann Whitney e teste de Friedman. As variáveis ?L, ?a, ?b e ?E foram submetidos ao teste Mann Whitney (a=0,05). Ambos apresentaram efeito clareador significante para os parâmetros L* e b*. Para as variações de cor, houve diferença estatisticamente significante nos parâmetros ?a, ?b e ?E. O tratamento clareador de consultório gerou maior sensibilidade nas duas primeiras semanas de tratamento e o caseiro na primeira semana. Quando comparados os dois tratamentos, somente no primeiro dia, o tratamento de consultório apresentou maior sensibilidade. A avaliação da genotoxicidade objetivou avaliar a formação de micronúcleos gerada pelos tratamentos. Antes do tratamento, 15, e 45 dias após, amostras da mucosa oral de 10 pacientes de cada grupo foram coletadas, com um citobrush. As amostras foram preparadas e fixadas em lâminas histológicas. Um avaliador cego realizou a contagem manual dos micronúcleos em 1000 células por indivíduo e por tempo. Os dados foram tabulados e submetidos ao teste Mann-Whitney e Kruskal-Wallis. O tratamento clareador de consultório apresentou maior formação de micronúcleos tanto em 15 como em 45 dias. O ensaio In situ e In vitro, objetivou avaliar o efeito adverso gerado pelo peróxido de hidrogênio 10% e as fitas adesivas clareadoras sobre o esmalte dental humano através de ensaio de microdureza. Para o ensaio In situ, 6 voluntários utilizaram um aparelho removível com os espécimes fixados. O tratamento clareador foi aplicado por 1h/dia, permanecendo em boca por 23h. Para o ensaio In vitro, os espécimes receberam os mesmos tratamentos, permanecendo em água destilada por 23h à 36,5oC. A avaliação da microdureza foi realizada antes e após o tratamento. Análise estatística foi realizada através de Anova e teste complementar de Tukey. Não houve diminuição significativa da microdureza In situ, no entanto, houve redução significativa no ensaio In vitro, sendo que as fitas adesivas clareadoras apresentaram redução estatisticamente maior que o gel clareador. Em conclusão, os agentes clareadores foram efetivos na recuperação da cor e exibiram baixo nível de sensibilidade, sendo que o tratamento caseiro apresentou resultado levemente superior e menor genotoxicidade que o realizado em consultório. Ainda, o tipo de estudo parece ser importante na determinação da perda mineral pós-clareamento, não sendo observada redução da dureza para a 10 condição In situ, mas menor dureza foi observada para os espécimes tratados In vitro. / The aim of the study was to evaluate the efficacy and potential adverse effects of different bleaching techniques through In vivo, In situ and In vitro studies. The randomized clinical trial aimed to evaluate the effectiveness and sensitivity of the inoffice and at-home bleaching treatment. For this, 130 patients were selected and divided into two groups and subjected to two treatments, being one placebo. The evaluation was performed with digital color spectrophotometer, before, after and one week after the completion of treatment. The parameters L, a* and b* were subjected to statistical analysis by Friedman and Tukey test. The variables ?L, ?a, ?b and ?E were submitted to Mann Whitney test (a = 0.05). For sensitivity evaluation, a visual analogue scale with scores ranging from 1 (no sensitivity) to 5 (severe sensitivity) was daily recorded by patients. Data were statistically analyzed by Mann Whitney and Friedman tests. Both treatments showed significant whitening effect for the L * and b * parameters. For color variations, was no statistically significant difference in parameters ?a, ?b and ?E. The bleaching treatment clinic generated greater sensitivity in the first two weeks of treatment and home in the first week. When comparing the two treatments, only in the first day, the in office treatment showed greater sensitivity than the at-home treatment. The evaluation of genotoxicity aimed to investigate the micronucleus formation generated by the treatments. Prior treatment, 15, and 45 days after bleaching, the oral mucosa samples from 10 patients from each group were collected with a citobrush. Samples were prepared and fixed on slides. A blind examiner performed the manual counting of micronuclei in 1,000 cells per individual and time. Data were tabulated and submitted to the Mann-Whitney and Kruskal-Wallis test. The in-office bleaching treatment produced a higher formation of micronuclei in both 15 and 45 days. The In situ and In vitro testing aimed to evaluate the adverse effect generated by 10% hydrogen peroxide and whitening strips on microhardness of human dental enamel. For In situ assay, six volunteers used a removable appliance with fixed specimens. The bleaching treatment was applied for 1 h / day, remaining in mouth for 23h. For the In vitro assay, the specimens received the same treatments, remaining in water for 23h to 36.5oC. Microhardness readings were performed before and after treatment bleaching protocols. Statistical analysis was performed using ANOVA and Tukey’s test. None significant decrease in microhardness was observed In situ; however, a significant reduction of hardness values were observed for In vitro condition, where the whitening strips statistically decreased the values compared to the whitening gel. In conclusion, the at home or in office bleaching protocols were effective in improving color, with a low level of sensitivity response, and the at home treatment produced a slightly better performed and produced lower genotoxicity effect. In addition the type of study was important to evaluate the mineral loss after bleaching treatment, where those specimens treated in situ have not exhibited microhardness decrease, which was only observed In vitro.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A utilização de testes de biocompatibilidade de materiais odontológicos é necessária para avaliar a segurança dos mesmos. Listerine é um enxaguatório comercial usado para a prevenção e tratamento da gengivite. O objetivo do estudo foi avaliar os efeitos citotóxico e genotóxico do Listerine em culturas de Escherichia coli e plasmídios. Na avaliação da citotoxicidade, culturas de E. coli AB1157 e BW9091 foram incubadas com Listerine (10, 50 e 100%) e o crescimento acompanhado pela densidade óptica (DO) em 600nm por 7 horas(h). Para avaliar a sobrevivência, culturas de E. coli AB1157, em fase exponencial, foram centrifugadas, ressuspensas em solução salina (NaCl 0,9%) e incubadas (1h, 37C) com Listerine (10, 50, 100%, 1h, 37 C). Alíquotas foram semeadas em placas de Petri contendo meio nutritivo nos tempos 0, 30 e 60 minutos e armazenadas em estufa bacteriológica (18h, 37 C). As unidades formadoras de colônias contadas e as frações de sobrevivência (FS) calculadas. Como controles, culturas tratadas salina ou etanol (21,6%). Para genotoxicidade, plasmídios pBSK foram incubados com Listerine (10, 50 e 100%) e com etanol (2,16%, 10,8% e 21,6%), associados ou não ao SnCl2(200g/mL, 30 minutos, temperatura ambiente), realizada eletroforese em gel de agarose (0,8%, 8V/cm), observados por transiluminação UV e obtido o percentual da forma superespiralada (%SE). Os resultados indicam que o enxaguatório Listerine foi capaz de inibir o crescimento bacteriano de culturas de E. coli na maior concentração utilizada. O enxaguatório, na maior concentração, diminuiu a sobrevivência das culturas bacterianas testadas. Listerine não modificou o perfil eletroforético do plasmídios, indicando ausência de efeito genotóxico e também foi capaz de proteger os plamídios da ação do SnCl2. Além disso, o etanol, na mesma concentração presente no Listerine, não alterou o perfil eletroforético dos plasmídios, sendo capaz de protegê-lo da ação do SnCl2. Os resultados indicaram que o Listerine apresentou efeito citotóxico em culturas de E. coli e ausência de potencial genotóxico em plamídios, sendo capaz de protegê-los, bem como o etanol, dos efeitos genotóxicos do SnCl2. / The uses of biocompatibility tests to evaluate dentistry materials are necessary to assess safety. Listerine is a commercial mouthwash used to prevent and treat gingivitis. The aim of this study was to evaluate the citotoxic and genotoxic effects of Listerine on Escherichia coli cultures and bacterial plasmids. To citotoxicity tests, E.coli cultures AB1157 and BW9091 was incubated with Listerine (10, 50 and 100%) and de growth observed by optic density at 600nm for 7 hours. To cellular survival tests, E.coli AB1157 cultures, in exponential phase, was centrifuged, ressuspended in saline solution (NaCl 0.9%) and incubated (1h, 37 C) with Listerine (10, 50 and 100%). Aliquots were spread on Petri dishes with nutritive medium at 0, 30 and 60 minutes and incubated (18h, 37 C). The colony-forming units were counted and survival fractional (SF), calculated. As controls, cultures treated with saline and ethanol (21.6%). In genotoxicity assays, plasmids pBSK were incubated with Listerine (10, 50 and 100%) and ethanol (2.16%, 10.8% and 21.6%) in presence or absence of SnCl2 (200g/mL, 30 minutes, room temperature), electrophoresis agarose gel (0.8%, 8V/cm) was performed and plasmid forms were observed. Data indicated that Listerine is capable to inhibit bacterial growth of E. coli cultures at the highest concentrations used. The mouthwash, at the higher concentration used, decreased the survival of bacterial cultures tested. Listerine didnt modify the electrophoretic profile of plasmids indicating no genotoxic effect but this mouthwash could protect plasmids from action of SnCl2. In addition, ethanol, at concentration present in Listerine, didnt alter the electrophoretic profile of plasmids but was capable of protect plasmid from action of SnCl2. The results indicated that Listerine could present citotoxic effect on E. coli cultures, absence of genotoxic potential on plasmids but it could protect, similar to ethanol, plasmids from genotoxic effect of SnCl2.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-06-02Bitstream added on 2014-06-13T19:19:45Z : No. of bitstreams: 1 souza_ts_dr_rcla.pdf: 1037350 bytes, checksum: 91b3f00c26815136b8cd76e95397bc77 (MD5) / O sistema de biorremediação denominado landfarming tem sido utilizado por refinarias de petróleo para dispor e tratar, em grandes áreas de solo, localizadas na própria indústria, o resíduo sólido final gerado, que é composto por uma emulsão formada por água, diversas frações de hidrocarbonetos e metais. Contudo, em landfarmings, a biodegradação de algumas classes de hidrocarbonetos pode levar tempo, meses ou anos. Desse modo, tratamentos complementares podem ser utilizados, visando estimular o metabolismo microbiano, tais como a adição de agentes descompactantes e nutrientes no solo. O progresso da biorremediação pode ser acompanhado por meio de medidas da concentração dos contaminantes de interesse, pela análise do metabolismo microbiano e por meio de ensaios biológicos que mensuram as atividades tóxica, genotóxica e mutagênica das amostras avaliadas. O objetivo do presente trabalho foi investigar os efeitos da adição de dois resíduos agroindustriais, casca de arroz e vinhaça, na biorremediação, na genotoxicidade e na mutagenicidade de um solo de landfarming proveniente de uma refinaria de petróleo, por meio de análises químicas, taxa de CO2 liberado por microrganismos e por meio do teste de anormalidades mitóticas e cromossômicas na espécie vegetal Allium cepa. Também foi objetivo desse trabalho avaliar o potencial bioindicador do invertebrado terrestre Rhinocricus padbergi após exposição a amostras do landfarming desativado. Análises histológicas e histoquímicas no intestino médio e no corpo gorduroso perivisceral do diplópodo foram realizadas. Os resultados do presente trabalho mostraram que a casca de arroz, empregada como agente descompactante do solo, constitui uma alternativa economicamente viável para a biorremediação de resíduos derivados da indústria do petróleo. A adição desse material promoveu um aumento da quantidade... / The bioremediation system called landfarming has been used by petroleum refineries to dispose and treat, in large areas of soil, located in the own industry, the final solid residue generated, which is composed by an emulsion formed by water, several fractions of hydrocarbons and metals. However, in landfarmings, the biodegradation of some classes of hydrocarbons can take time, months or years. Thus, complementary treatments can be used in order to stimulate the microbial metabolism, such as addition of uncompressing agents and nutrients in the soil. The bioremediation progress can be monitored by measuring the concentrations of contaminants of interest, by the analysis of the microbial metabolism and by biological assays that measure toxic, genotoxic and mutagenic activities of the assessed samples. The aim of this study was to investigate the effects of adding two agroindustrial residues, rice hull and vinasse, in the bioremediation, genotoxicity and mutagenicity of a soil of landfarming from a petroleum refinery by chemical analyses, rate of CO2 released by microorganisms and by the mitotic and chromosomal abnormalities test in the plant species Allium cepa. It was also objective of this study assess the bioindicator potential of the terrestrial invertebrate Rhinocricus padbergi after exposure to deactivated landfarming samples. Histological and histochemical analyses of the midgut and fat body of this invertebrate were also carried out. The results of this study showed that rice hull, used as an uncompressing agent of the soil, constitutes an economically viable alternative for the bioremediation of residues derived from petroleum industry. The addition of this material promoted an increase in the quantity of CO2 released, decreased the concentration of total petroleum hydrocarbons (TPHs) of the landfarming soil and reduced its genotoxicity. On the contrary, vinasse... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2018-04-04T11:49:33Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Nícolas Gustavo Matias de Oliveira - 2018.pdf: 1671663 bytes, checksum: 77209b17924ba8b6327e4442c9878a74 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-04-04T13:24:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Nícolas Gustavo Matias de Oliveira - 2018.pdf: 1671663 bytes, checksum: 77209b17924ba8b6327e4442c9878a74 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-04T13:24:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Nícolas Gustavo Matias de Oliveira - 2018.pdf: 1671663 bytes, checksum: 77209b17924ba8b6327e4442c9878a74 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-03-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Schizophrenia (EQZ) is a chronic mental illness that affects about 1% of the world population and is characterized by behavioral domains such as positive symptoms characterized by hallucinations and delusions and negative symptoms that involve apathy, anhedonia and social blunting. The cause of EQZ remains unknown, but it is known to be a disease whose etiology involves environmental and genetic factors. Several studies seek to identify factors that clarify the etiology of the disease. The agent that causes toxoplasmosis, Toxoplasma gondii, seems to be related to the development and progression of the disease, evidenced by studies that argue that T. gondii infection may be a triggering factor for psychosis in some individuals, since the parasite has a certain tropism by the central nervous system. Furthermore, studies have reported parasite infection as a factor related to genotoxicity, including toxoplasma infection in an animal model. Based on the foregoing, the present study aimed to evaluate the seropositivity to T. gondii (IgM or IgG) and the avidity of IgG in a group of individuals diagnosed with EQZ in the city of Goiânia and to evaluate the occurrence of genotoxicity in these, of genotoxicity with exposure to xenobiotics such as tobacco, alcohol, especially drugs, and / or T. gondii infection. Seropositivity was observed above 70% among individuals diagnosed with EQZ in relation to the controls, with avidity above 50%, indicating that individuals had contact with T. gondii at some time prior to the survey. Despite the genotoxic damage found, there was no significant difference in genotoxic damage among the infected individuals evaluated. The present study did not demonstrate that T. gondii may be a contributing factor to the occurrence of DNA damage, and the use of antipsychotic drugs, tobacco and alcohol, despite being a risk factor for genotoxicity, did not demonstrate an influence significant difference in the present study. However, it is necessary to carry out other analyzes and investigate parameters such as the time of drug use and exposure to other xenobiotics. In order to know better the life habits of individuals, it may help to provide more information about this relationship between T. gondii and EQZ. / A esquizofrenia (EQZ) é uma doença mental crônica que afeta cerca de 1% da população mundial e se caracteriza por domínios comportamentais, como sintomas positivos, caracterizados por alucinações e delírios e sintomas negativos, que envolvem apatia, anedonia e embotamento social. A causa da EQZ ainda permanece desconhecida, mas sabe-se que se trata de uma doença que cuja etiologia envolve fatores ambientais e genéticos. Vários estudos buscam identificar fatores que esclareçam a etiologia da doença. O agente causador da toxoplasmose, Toxoplasma gondii, parece ter relação com o desenvolvimento e progressão da doença, evidenciado por estudos que defendem que a infecção por T. gondii pode ser um fator desencadeante de psicoses em alguns indivíduos, já que o parasito apresenta um certo tropismo pelo sistema nervoso central. Ainda, estudos tem reportado a infecção por parasitos como fator relacionado a genotoxicidade, incluindo a infecção pelo toxoplasma em um modelo animal. Com base no exposto, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a soropositividade para T. gondii (IgM ou IgG) e a avidez da IgG em um grupo de indivíduos diagnosticados com EQZ do município de Goiânia e avaliar a ocorrência de genotoxicidade nestes, procurando relação da genotoxicidade com a exposição a xenobióticos como tabaco, álcool, especialmente medicamentos, e/ou com a infecção pelo T. gondii. Observou- se soropositividade acima de 70% entre os indivíduos diagnosticados com EQZ em relação aos controles, com avidez acima de 50%, indicando que os indivíduos tiveram contato com o T. gondii em algum momento anterior a pesquisa. Apesar do dano genotóxico encontrado, não houve diferença significativa no dano genotóxico entre os indivíduos infectados avaliados. O presente estudo não demonstrou que T. gondii pode ser um fator contribuinte para a ocorrência de danos ao DNA, e o uso de fármacos antipsicóticos, o fumo e o álcool, apesar de serem um fator de risco para a genotoxicidade, não demonstraram uma influência significativa no presente estudo. Entretanto, há a necessidade de realizar outras análises e investigar parâmetros como o tempo de uso dos fármacos, e de exposição a outros xenobióticos, enfim, o melhor conhecimento dos hábitos de vida dos indivíduos pode ajudar a trazer mais informações acerca dessa relação entre T. gondii e a EQZ.

Submitted by Liliane Ferreira (ljuvencia30@gmail.com) on 2018-04-13T11:51:22Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Thays Millena Alves Pedroso - 2018.pdf: 1986082 bytes, checksum: b3aac60659fe2df15ac816445271ea24 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-04-13T12:39:28Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Thays Millena Alves Pedroso - 2018.pdf: 1986082 bytes, checksum: b3aac60659fe2df15ac816445271ea24 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-13T12:39:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Thays Millena Alves Pedroso - 2018.pdf: 1986082 bytes, checksum: b3aac60659fe2df15ac816445271ea24 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-03-09 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Schizophrenia is a complex mental disorder in which the individual has difficulty distinguishing between what is real and what is imaginary. It is a multifactorial disease in which factors such as environment, genetic predisposition, toxoplasmosis and biochemical changes in the brain are closely related to the severity of the disease, both positive and negative symptoms. The present study aimed to evaluate the prevalence of toxoplasmosis and genotoxicity of Toxoplasma gondii in individuals diagnosed with schizophrenia. The ELISA immunoenzymatic assay was used to evaluate the seropositivity to T. gondii and the comet assay to detect genotoxic damage. In the group, 69 individuals and 45 individuals who did not have schizophrenia or any mental disorder were analyzed. A statistically significant difference (p <0.05) was observed when the mean age and tobacco use frequency were analyzed, the individuals diagnosed with schizophrenia showed higher seropositivity (p <0.01) when compared to the control group. Analyzing the mean ± SD (standard deviation), they showed greater genotoxic damage in the case group in relation to the control group. In addition, it was observed that the association between the genotoxic damage of the case group with sex, IgG, disease, smoking and alcoholic beverages presented values of p> 0.05. Thus, it can be concluded that there was no significant difference when comparing the genders to the prevalence of toxoplasmosis in the individuals diagnosed with schizophrenia. In the case group it was possible to verify greater genotoxic damage in the DNA than in the control group. / A esquizofrenia é um transtorno mental complexo em que o indivíduo tem dificuldades para distinguir o que é real e o que é imaginário. É uma doença multifatorial, em que fatores como ambiente, pré-disposição genética, toxoplasmose e alterações bioquímicas no cérebro estão intimamente relacionados com a severidade da doença, sintomas positivos e negativos. O presente estudo teve como objetivo avaliar a prevalência da toxoplasmose e genotoxicidade do Toxoplasma gondii em indivíduos diagnosticados com esquizofrenia. Foi usado o teste imunoenzimático ELISA para avaliar a soropositividade para T. gondii e o ensaio cometa para detectar o dano genotóxico. Foram analisados no grupo caso 69 indivíduos e 45 indivíduos que não possuem esquizofrenia ou qualquer transtorno mental. Observou-se diferença estatisticamente significativa (p<0,05) ao se analisar as médias de idade e na frequência do uso de tabaco, os indivíduos diagnosticados com esquizofrenia apresentaram a soropositividade maior (p<0,01), ao serem comparadas ao grupo controle. Analisando a média ± DP (desvio padrão), mostraram maior dano genotóxico no grupo caso em relação ao grupo controle. Além disso, observou se que a análise quanto a associação entre o dano genotóxico do grupo caso com o sexo, IgG, doença, tabagismo e bebida alcoólica apresentou valores de p>0,05. Sendo assim pode-se concluir que não houve diferença significativa ao se comparar os gêneros quanto à prevalência de toxoplasmose nos indivíduos diagnosticados com esquizofrenia. No grupo caso foi possível verificar um maior dano genotóxico no DNA do que no grupo controle.

O presente estudo teve como objetivo o estabelecimento de um método citogenotoxico, o ensaio cometa, adaptado às células meristemáticas provenientes de raízes de propágulos de mangue da espécie Rhizophora mangle para utilização em estudos sobre genotoxicidade em ambientes marinhos. Foram testados dois tipos de germinação de raízes, quatro diferentes soluções de extração de núcleos, duas soluções de lise e o não uso da lise, dois períodos de exposição à lise, dois períodos de relaxamento, dois períodos de eletroforese e a interação de duas condições de lise com dois diferentes tempos de relaxamento. A validação de método foi realizada através da exposição de núcleos a quatro diferentes concentrações de peróxido de hidrogênio. Os resultados mostraram que é possível a obtenção de cometas com núcleos extraídos de propágulos de Rhizophora mangle e que a validação de método apresenta uma relação concentração dependente entre o índice de dano de núcleos e a concentração do agente genotoxico testado. Os melhores parâmetros utilizados para obtenção de cometas através do método por nós adaptado são: PBS ou solução salina 12&#8240; como solução de extração, exposição à lise alcalina iônica por 60 minutos, 5 minutos de relaxamento e eletroforese em tampão pH>13, 0,8V/cm, 230mA por 20 minutos a 4&#186;C. / This study aimed to establish a citogenotoxic method, the comet assay, adapted to the meristematic cells from propagule roots of red mangrove, Rhizophora mangle, for use in studies of genotoxicity in marine environments. Experiments were carried out to test two ways of root germination, four different nuclei extraction solutions, two lysis solutions and without lysis, two periods of exposure to lysis, two periods of unwinding, two periods of electrophoresis and the interaction of two lysis conditions with two different times of unwinding. Experiments on validation of the method were performed by exposing the nuclei to four different concentrations of hydrogen peroxide. The results showed that it is possible to obtain comets with nuclei extracted from the root of propagules of Rhizophora mangle and the validation data showed a dose-dependent relationship between the damage index and the concentration of the genotoxic agent tested. The best parameters to obtain comets using the method adapted by us are: PBS or saline 12&#8240; as extraction solution, exposure to alkaline lysis for 60 minutes, 5 minutes of unwinding and electrophoresis in buffer pH> 13, 0,8V/cm, 230mA for 20 min at 4&#186;C.

Submitted by Maria Aparecida (cidazen@gmail.com) on 2017-07-31T14:40:37Z No. of bitstreams: 1 Vanessa Ribeiro Moreira.pdf: 4159897 bytes, checksum: a09b5761e215c744dd25a72b0862176f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-31T14:40:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vanessa Ribeiro Moreira.pdf: 4159897 bytes, checksum: a09b5761e215c744dd25a72b0862176f (MD5) Previous issue date: 2017-07-05 / FAPEMA, CAPES / Leishmaniasis is a neglected disease caused by more than 20 species of parasites of the Leishmania genus. Pentavalent antimonials are the drugs commonly used for the treatment of leishmaniasi and among then Glucantime® is the first choice drug recommended by the World Health Organization. Its toxic effects are well known, including as genetic damage inducing. However, the mechanism of its genotoxic effect has not been elucidated yet. Given this, we investigated the mechanism by which Glucantime® causes damage to DNA in BALB/c mice infected with Leishmania (Leishmania) infantum, treated with 20mg/kg/day during 20 days. Damage to DNA have been assessed by the comet assay using peripheral blood leukocytes and for assessment of oxidative damage, the comet assay was followed by treatment with the enzymes formamidopyrimidine-DNA-glycosylase (Fpg) and endonuclease III (ENDO III), which recognize and remove oxidized purines and pyrimidines of DNA. The mutagenic potential of the drug was investigated by the micronucleus test in bone marrow cells. The consequences of the oxidative process were measured by the activity of the enzymes superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione peroxidase (GPx). In addition, we evaluated the expression of genes related to antioxidante defense (GSS, GSTP1, GPx1, SOD1, SOD2 and CAT) and to the DNA repair system (OGG1 and MTH1). Our data demonstrated that Glucantime® causes damage to DNA in mammalian cells by oxidating the nitrogenous bases. The increased frequency of micronucleated cells in animals treated with antileishmanial revealed that the genomic instability was fixed in mutations. In addition, Glucantime® induced overexpression of genes related to the antioxidant defense, as well as the genes OGG1 and MTH1, that work in the DNA repair mechanism of damage caused by oxidation of nitrogen bases. Our data also revealed that infection by L. infantum and the treatment with antimonial significantly increased the enzymatic activity in the SOD-CAT axis, while the SOD-GPx axis was inhibited, probably by the depletion of glutathione. Thus, our data suggests that the antimonial pledges to GPx leading to saturation of the antioxidant system and causes damage to DNA through oxidative stress. These findings were supported by the reduction of genetic damage thought a treatment combined with ascorbic acid, a potent antioxidant. At last, we demonstrated that the stressfull effect of Glucantime® triggers a molecular response in mammalian cells, positively modulating the expression. Of genes related to DNA repair and antioxidant defense. / Leishmaniose é uma doença negligenciada causada por mais de 20 espécies de parasitas do gênero Leishmania. Antimoniais pentavalentes são os fármacos normalmente utilizados para o tratamento das leishmanioses e, dentre estes, o Glucantime® é a droga de primeira escolha recomendada pela Organização Mundial de Saúde. São bastante conhecidos seus efeitos tóxicos, inclusive como indutor de danos genéticos. Entretanto, o mecanismo pelo qual o fármaco exerce seu efeito genotóxico ainda não está elucidado. Nesse sentido, investigamos o mecanismo pelo qual o Glucantime® causa danos ao DNA em camundongos BALB/c infectados com Leishmania (Leishmania) infantum, com regime de tratamento de 20mg/kg/dia durante 20 dias. Danos ao DNA foram avaliados pelo ensaio do cometa usando leucócitos de sangue periférico e, para avaliação de danos oxidativos, o ensaio do cometa foi seguido pelo tratamento com as enzimas formamidopirimidina-DNA-glicosilase (Fpg) e endonuclease III (ENDO III), que reconhecem e retiram bases púricas e pirimídicas oxidadas do DNA. O potencial mutagênico da droga foi investigado pelo teste do micronúcleo em células de medula óssea. As consequências do processo oxidativo foram medidas pela atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa peroxidase (GPx). Além disso, avaliamos a expressão de genes relacionados à defesa antioxidante (GSS, GSTP1, GPx1, SOD1, SOD2 e CAT) e ao sistema de reparo do DNA (OGG1 e MTH1). Nossos dados demonstraram que o Glucantime® causa danos ao DNA em células de mamíferos pela oxidação das suas bases nitrogenadas. O aumento da frequência de células micronucleadas nos animais sob tratamento com o antileishmanial revelou que a instabilidade genômica foi fixada em mutações. Além disso, o Glucantime® induziu a superexpressão de genes relacionados a defesa antioxidante, bem como dos genes OGG1 e MTH1, que atuam no mecanismo de reparo de danos ao DNA ocasionados por oxidação de bases nitrogenadas. Os nossos dados revelaram também que a infecção por L. infantum e o tratamento com o antimonial aumentou significativamente a atividade enzimática no eixo SOD-CAT, enquanto que o eixo SOD-GPx foi inibido, provavelmente, pela depleção de glutationa. Assim, nossos dados sugerem que o antimonial Glucantime® compromete a atividade da GPx levando a saturação do sistema antioxidante e causa danos ao DNA por estresse oxidativo. Esses achados foram corroborados pela redução dos danos genéticos pelo co-tratamento com o ácido ascórbico, um potente antioxidante. Finalmente, demonstramos que o efeito estressante do Glucantime® dispara uma resposta molecular nas células de mamíferos, modulando positivamente a expressão de genes relacionados ao reparo do DNA e à defesa antioxidante.

Considerando não apenas a importância das antraciclinas na terapêutica do câncer, mas também os efeitos colaterais associados ao uso destas drogas, o presente estudo procurou avaliar a atividade genotóxica de seis antraciclinas em uso clínico - doxorrubicina (DOX), daunorrubicina (DNR), epirrubicina (EPI), idarrubicina (IDA), além dos análogos de última geração, pirarrubicina (THP) e aclarrubicina (ACLA). Para tanto, foi empregado o Teste de Mutação e Recombinação Somática (SMART) em Drosophila melanogaster, que permite a detecção simultânea de mutação gênica e cromossômica, assim como de eventos relacionados com recombinação mitótica - possibilitando quantificar a contribuição deste último parâmetro genético para a genotoxicidade total induzida pelas drogas em estudo. Os dados obtidos a partir desta análise demonstraram que todas as antraciclinas estudadas induziram acréscimos significativos, relacionados tanto à mutação, quanto à recombinação nas células somáticas deste inseto. Além disso, a recombinação mitótica - entre cromossomos homólogos - foi o evento responsável por, aproximadamente, 62 a 100% da toxicidade genética observada. A comparação do potencial genotóxico dos diferentes análogos, através da padronização do número de danos genéticos por unidade de tratamento (mM), caracterizou a ACLA e o THP como as drogas mais potentes – sendo cerca de 20 vezes mais efetivas, como genotoxinas, do que a DOX, o análogo menos potente. Já que a principal ação genotóxica desta família de compostos está relacionada à inibição da topoisomerase II (topo II) – uma enzima que atua no relaxamento da supertorção da dupla hélice de DNA, através da quebra e posterior religação de suas fitas - as diferenças observadas podem ser atribuídas ao mecanismo envolvido neste bloqueio Enquanto os análogos DOX, DNR, EPI, IDA e THP atuam como venenos de topo II - tornando permanentes as quebras induzidas pela enzima - a ACLA inibe a função catalítica desta enzima, impedindo a sua ligação ao DNA. Cabe ainda ressaltar que a genotoxicidade da ACLA não está restrita à sua atividade catalítica sobre a topo II, mas também à sua ação como veneno de topo I e à sua habilidade de intercalar-se na molécula de DNA. Quando a potência genotóxica destas drogas foi associada a suas estruturas químicas, observou-se que substituições no grupamento amino-açúcar levaram a uma maior atividade tóxico-genética, quando comparadas a modificações no cromóforo. Cabe ainda ressaltar que as modificações estruturais, presentes nos análogos DOX, DNR, EPI, IDA e THP, não alteraram a sua ação recombinogênica. No entanto, no que se refere a ACLA, observaram-se decréscimos significativos na indução de recombinação mitótica - que podem ser atribuídas às múltiplas substituições presentes tanto no grupamento amino-açúcar quanto no cromóforo. O conjunto destas observações evidencia que a genotoxicidade total das drogas em estudo está centrada na indução de recombinação homóloga - um evento predominantemente envolvido tanto na iniciação, quanto na progressão do câncer. A alta incidência de tumores secundários, em pacientes submetidos ao tratamento com as antraciclinas, pode, pois, ser atribuída à ação preferencial destas drogas sobre a recombinação mitótica – embora a atividade mutagênica não possa ser desconsiderada.

O aumento na poluição ambiental é na atualidade uma das grandes preocupações em nível mundial. Especificamente, a poluição atmosférica por material particulado tem demostrado ser um fator determinante no desenvolvimento de doenças cardiopulmonares e câncer de pulmão nas populações expostas. O material particulado é constituído por uma mistura complexa de compostos orgânicos e inorgânicos, muitos dos quais possuem potencial mutagênico e genotóxico. As características destes compostos variam em função da suas propriedades físicas, químicas e em razão das condições meteorológicas prevalecentes. A maior parte dos estudos tem se focado em avaliar o potencial genotóxico da fração orgânica do material particulado e poucos estudos têm explorado a fração solúvel em água e a contribuição diferencial das diversas espécies químicas presentes nesta fração para o dano genotóxico. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos mutagênicos e genotóxicos in vitro da fração orgânica e da fração solúvel em água de material particulado (MP10) coletado em três locais diferentes do estado de São Paulo e estabelecer a relação entre a composição química e o efeito biológico observado. Para isto, realizou­-se a extração orgânica e solúvel em água de 12 amostras de MP10. A mutagenicidade e genotoxicidade foram avaliadas usando o ensaio de Salmonella/microssoma e o teste de micronúcleos (MN) em células A549 e 16 hidrocarbonetos Policíclicos Aromáticos (HPAs) e 15 metais hidrossolúveis presentes nas amostras foram determinados quimicamente. Adicionalmente, foi determinada a metodologia de extração da fracção solúvel em água e se avaliou a estabilidade química e biológica desta fração. Os resultados indicam que a extração assistida por micro-ondas é um método eficiente para a extração da fração solúvel em agua do MP e que um tempo superior a 60 dias de armazenamento e congelamento deste tipo de extrato tem um efeito significativo sobre os resultados analíticos e a resposta biológica. Foi demonstrado ainda que as duas frações de MP estudadas são responsáveis pela indução do dano ao DNA e que não existe uma relação direta entre a concentração de MP e o efeito genotóxico observado, confirmando a importância do uso de bioensaios na avaliação da genotoxicidade de misturas complexas como o MP. Os HPAs prevalecentes nas amostras de PM10 foram fluorantene e benzo(ghi)perileno. Nos extratos solúveis em água, as maiores concentrações de metais foram determinadas para zinco, ferro e cobre. Confirmou-se que a indução de MN e o ensaio de Salmonella/microssoma representam uma poderosa ferramenta na avaliação da polução atmosférica e que as análises químicas por si só não são suficientes para a proteção e predição dos efeitos biológicos em populações expostas. / The increase of environmental pollution is today one a major concern worldwide. Specifically, air pollution by particulate matter has been shown to be a determining factor in the development of cardiopulmonary disease and lung cancer in exposed populations. The particulate material consists of a complex mixture of organic and inorganic compounds, many of which have mutagenic and genotoxic activity. The characteristics of these compounds vary according to their physical and chemical properties and also to the prevailing weather conditions. Most studies have focused on evaluating the genotoxic potential of the organic fraction of particulate material, but few studies have explored the water­-soluble fraction, and the differential contributions of different chemical species present in this fraction to genotoxic damage. The aim of this study was to evaluate the in vitro mutagenic and genotoxic effects of organic and water-soluble fractions of 12 samples of particulate matter (PM10) collected at three different sites in the state of São Paulo and establish the relationship between the chemical composition and the biological effect observed. The mutagenicity and genotoxicity were evaluated using the Salmonella/microssome test and the micronucleus assay (MN) in A549 cells and 16 Polycyclic Aromatic Hydrocarbons (PAHs) and 15 water-soluble metals present in the samples were chemically determined. Additionally, the extraction method of water- soluble fraction was determined and the chemical and biological stability of this fraction evaluated. The results indicate that the microwave­-assisted extraction is an efficient method for the extraction of the water-soluble compounds of PM and that the freezing and storage of the extract over 60 days has a significant effect on the mutagenic and analytical results of PM samples. It was demonstrated that the two PM fractions studied are responsible for the induction of DNA damage and that there is no direct relationship between the MP concentration and the genotoxic effect observed, confirming the importance of using bioassays in the genotoxicity evaluation of complex mixtures as PM. The PAHs prevailing in our samples were fluoranthene and benzo(ghi)perylene. In the water-soluble extracts, highest concentrations of the elements studied were found for zinc, iron, and copper in the three places of sampling. We confirmed that MN induction and Salmonella/microsome assay represents a powerful tool to evaluate the atmospheric air pollution and that the total concentration of PM and the chemical analyses alone would not be sufficient for the prognosis of biological effects in exposed populations