Orientador: Pedro Duarte Novaes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-14T19:58:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ramos-Perez_FlaviaMariadeMoraes_M.pdf: 885830 bytes, checksum: fc6b33497f6ca471c917c9731d6f59af (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: O objetivo neste trabalho foi avaliar o efeito radioprotetor da vitamina E na função das glândulas salivares por meio da medida do volume de saliva, bem como analisar a concentração de proteína total. Foram utilizados 90 ratos machos (Rattus norvegicus, Albinus, Wistar), os quais foram divididos aleatoriamente em cinco grupos experimentais: controle, que corresponde ao grupo em que os animais receberam óleo de oliva; leo/irradiado, grupo no qual os animais receberam óleo de oliva e foram irradiados com dose única de 15 Gy de radiação gama na região de cabeça e pescoço; irradiado, grupo no qual os animais foram irradiados com dose única de 15Gy de radiação gama; vitamina E corresponde ao grupo em que os animais receberam solução de acetato de alfa tocoferol (vitamina E) mas não foram irradiados e vitamina E/irradiado, no qual os animais receberam solução de acetato de alfa tocoferol (vitamina E) antes de serem irradiados com dose única de 15Gy. Os animais foram sacrificados no tempo de 4 horas, 8 horas e 30 dias após a irradiação. Não foram observadas diferenças significativas entre os grupos nos tempos de 4 e 8 horas. Aos 30 dias, o volume salivar dos animais do grupo óleo irradiado estava diminuído significativamente em relação ao grupo controle. Os animais do grupo irradiado apresentaram volume de saliva significativamente menor quando comparado com os grupos controle, vitamina E e vitamina E/irradiado, os quais apresentaram volumes de saliva similar. Na composição da saliva não houve diferenças significativas no conteúdo de proteína total entre os grupos estudados. Os constituintes medidos mostraram reduções significativas apenas 4 horas após a irradiação para todos os grupos examinados. Podemos concluir que a radiação não exerceu nenhum efeito no conteúdo de proteína total da saliva dos ratos irradiados e que a vitamina E protegeu a função salivar 30 dias após a irradiação, desta forma podemos considerá-la como um radioprotetor em potencial. / Abstract: The aim of this study was evaluate the radioprotective effect of vitamin E in salivary gland function by salivar volume measurements, as well as analize the total protein concentration. For this purpose 90 male rats (Rattus norvegicus, Albinus, Wistar) were used and randomly divided in 5 experimental groups: control (I), which animals received olive oil; irradiated olive oil (II), group that the animals received olive oil and were irradiated with a single exposure dose of 15 Gy of gamma rays to the head and neck region; irradiated (III), which animals were only irradiated with a single exposure dose of 15 Gy of gamma rays; vitamin E (IV), correspond to the group which animals received tocopherol acetate solution but were not irradiated; irradiated vitamin E (V), which animals received tocopherol acetate solution before irradiation with a single exposure dose of 15 Gy gamma rays. The animals were sacrificed 4, 8 hours and 30 days after the irradiation procedure. We did not observe differences between the groups at 4 and 8 hours. At 30 days, the salivar volume in the animals pertaining to the irradiated olive oil group was significantly reduced in relation to the control group. The irradiation group presented salivar volume significantly diminished when compared to the control (I), vitamin E (IV) and irradiated vitamin E (V), which presented salivar volumes similar. In the salivar composition we did not observe significant differences in the total protein content between the groups studied. The constituents measured showed significant reductions only 4 hours for all the groups examined. We conclude that the radiation did not exert any effect in the total protein content of saliva in the irradiated rats and vitamin E protected the salivary function 30 days after irradiation. Thus, we can consider vitamin E as a potential radioprotective substance. / Mestrado / Radiologia Odontologica / Mestre em Radiologia Odontológica

A ressonância magnética (RM) tem sido amplamente utilizada no diagnóstico por imagem de alterações de glândulas salivares. No entanto, a presença de aspectos similares nas imagens com técnicas convencionais de RM dificulta a distinção do diagnóstico entre patologias inflamatórias e neoplásicas. O objetivo deste estudo foi comparar valores dos coeficientes de difusão aparentes (ADC - Apparent Diffusion Coefficient) de imagem ponderada em difusão (DWI - Difusion Weighted Imaging) com ressonância magnética, entre glândulas salivares normais, casos com sialoadenite e com adenoma pleomórfico das glândulas salivares maiores. Vinte e dois pacientes (totalizando 44 glândulas salivares maiores) diagnosticados com sialoadenite unilateral (em glândula parótida ou submandibular) ou adenoma pleomórfico (apenas em parótida) foram selecionados. Todas as glândulas contralaterais não afetadas também foram analisadas. Imagens de RM ponderadas em T1, T2 e DWI foram obtidas utilizando sequências de pulso spin-eco (SE) com um aparelho de ressonância magnética de 1.5 Tesla. Primeiramente, a performance diagnóstica (sensitividade, especificidade e acurácia) foi calculada para três observadores após analisarem imagens de RM e DWI, separadamente. Em seguida, os valores médios de ADC foram comparados entre os três grupos analisados (glândulas normais contralateral, sialoadenite e adenoma pleomórfico). O uso da DWI rendeu uma melhor performance diagnóstica em geral para todos os observadores. Além disso, casos de adenoma pleomórfico apresentaram os maiores valores de ADC do estudo. Dentro das limitações deste estudo, os resultados sugerem que DWI permite a diferenciação entre sialoadenite e adenoma pleomórfico. / Alterations of the salivary glands are usually detected by conventional magnetic resonance imaging (MRI) techniques. However, their imaging presentation may present similar aspects. The aim of this study was to compare apparent diffusion coefficient (ADC) values from diffusion-weighted MRI (DWI) among normal salivary glands, cases with sialadenitis and with pleomorphic adenoma of major salivary glands. Twenty-two patients (totaling 44 major salivary glands) diagnosed with either unilateral sialadenitis (on either parotid or submandibular gland) or parotid gland pleomorphic adenoma were selected. Contralateral non-affected glands (normal) were also analyzed. DWI images were achieved using a spin-echo (SE) pulse sequence with a 1.5T MRI device. Mean ADC values were compared among the three groups analyzed (contralateral normal glands, sialadenitis and pleomorphic adenoma). Furthermore, diagnostic performance of MRI and DWI were calculated for three observers. DWI also presented better diagnostic performance results. In addition, cases of pleomorphic adenoma presented the highest ADC values of the study. Within the limitations of this study, the present results suggest that DWI allows for differentiation between parotid sialadenitis and pleomorphic adenoma.

Considerando a mucosite oral (MO) e a hipofunção das glândulas salivares (HGS) consequências debilitantes da quimioterapia (QT), este trabalho teve como objetivo induzir, em hamsters, MO e HGS, através do quimioterápico 5- Fluorouracil (5-FU), e comparar, através de análises clínicas, bioquímicas e histológicas, diferentes fototerapias no tratamento da MO, assim como o efeito do laser no tratamento da HGS. Cento e oitenta animais foram divididos em dois grupos, controle e experimental, onde, o grupo controle foi subdividido em grupo C, o qual recebeu somente anestesia/veículo de diluição do quimioterápico e o CQ, o qual recebeu anestesia/quimioterapia e indução da MO. O grupo experimental foi também subdividido em grupo L: com indução de MO e tratamento com LED, 630nm, 1,2J/cm2; LA: MO e tratamento com laser de alta potência (LAP), 808nm, 10J/cm2; LB: MO e tratamento com laser de baixa potência (LBP), 660nm, 6J/cm2 e o LG: sem MO e tratamento com LBP, 780nm, 5J/cm², na região das glândulas salivares (GS) submandibulares (GSSM) e sublinguais GSSL). A MO foi induzida através de ranhuras após QT e foi avaliada, clinicamente, através de escalas específicas. Os animais foram sacrificados após 5, 7 e 10 dias de experimento e a mucosa oral e as GS removidas para análises bioquímicas (TNF- e análise de proteína total, LDH e parâmetros do sistema antioxidante, respectivamente) e histológicas (análise por microscopia de luz e imuno-histoquímica para as amostras de mucosa, e por microscopia de luz, eletrônica de transmissão e imunocitoquímica para as amostras de GS). Após análises estatísticas, os resultados clínicos, bioquímicos e histológicos mostraram que os tratamentos com LBP e LED foram eficazes no tratamento da MO, com diminuição da concentração de TNF- no dia 7 (p<0.05) e completa cicatrização das lesões ao termino do experimento, com maior formação de tecido de granulação e angiogênese. Além disso, a expressão de citoqueratina 10, analisada por imunohistoquímica, apresentou-se menos intensa comparada ao grupo CQ. O LAP não prejudicou a cicatrização final da MO quando comparada ao grupo CQ. O LBP também se mostrou eficaz para a HGS causada pelo 5-FU, uma vez que os parâmetros estudados para o grupo LG foram similares para os animais do grupo C na maior parte dos tempos experimentais. A HGS do grupo CQ foi representada por importantes alterações morfológicas, estruturais e bioquímicas, como a atrofia das unidades secretoras terminais, aumento do estroma glandular na GS sublingual e alterações na expressão de EGF, NGF e PIP2 nas GSSM, assim como alteração na expressão de mucina e p16 nas GSSL. De acordo com as análises bioquímicas, foram observadas alterações na atividade das enzimas antioxidantes catalase, peroxidase e superóxido dismutase e da atividade da enzima lactato desidrogenase (p<0.05) tanto para a GSSM quanto para a GSSL. Com base nos resultados, podemos concluir que as fototerapias com LBP e LED diminuem a severidade da MO por acelerar a reparação tecidual e diminuir o processo inflamatório, assim como o LBP é eficaz no tratamento da HGS induzida pelo quimioterápico 5-FU. / Considering oral mucositis (OM) and salivary glands hipofunction (SGH) debilitating consequences of chemotherapy (CT), the aim of this study was to compare, through clinical, biochemical and histological analysis, different photherapies on the treatment of OM and SGH induced by injections of the chemotherapic agent 5-Fluorouracil in hamsters. One-hundred-eighty animals were divided into two groups, control and experimental, which were subdivided in group C: anesthesia/chemotherapy vehicle and CQ: anesthesia, chemotherapy/OM induction, for control group and in group L: anesthesia, chemotherapy/OM and phototherapy with LED (1,2 J/cm², 1.2 J of total energy), LA: anesthesia, chemotherapy/OM and phototherapy with highpower laser (HPL) (10 J/cm², 10 J of total energy), LB: anesthesia, chemotherapy/OM and phototherapy with low-power laser (LPL) (6 J/cm², 1.2 J of total energy) and LG: anesthesia, chemotherapy and phototherapy with LPL (5 J/cm2) on salivary gland (SG) (submandibular and sublingual) areas for experimental group. The OM was induced by slots on oral mucosa, which were performed after chemotherapy treatment. The OM was analyzed through specific clinical scales and after 5, 7 and 10 days, the animals were sacrificed and the oral mucosa and submandibular and sublingual glands removed for biochemical (TNF- and total protein concentration, LDH and antioxidant system parameters, respectively) and histological (light microscopy and immune-histochemical for OM samples, and light microscopy, electronic transmission and immunocitochemical for SG samples) analysis. After statistical analysis, the clinical, biochemical and histological results showed Led and LPL as efficient treatments for OM, with decrease of TNF- concentration on day 7 (p<0.05) and complete lesions healing on last day of experiment, showing increase of granulation tissue and new blood vessels formation. In agreement, the citokeratin 10 expression by immunehistochemistry, showed less intensity when was compared with CQ group. The HPL had no interference on OM final healing in comparison with CQ group. The LPL also showed good results on treatment of SGH induced by 5- FU. The SGH on CQ group included important morphological, structural and biochemical changes, as acinar atrophy, increase of glandular stroma on sublingual glands and important changes for EGF, NGF and PIP2 expression on submandibular glands, and for mucin and p16 gene expression on sublingual glands. Furthermore, the biochemical analysis showed changes on antioxidant enzime system activity, catalase, peroxidase and superoxide dismutase, and also for dehidrogenase lactate activity (p<0.05). The results of the present study suggest the phototherapies with LPL and LED where efficient on decrease of OM severity, accelerating tissue repair and decreasing the inflammatory process, as well as, the LPL efficient as treatment of SGH induced by 5-FU.

Considerando que o diabetes experimental altera a morfologia e função das glândulas salivares de ratos, o objetivo deste estudo foi analisar o efeito da irradiação com laser em baixa intensidade no metabolismo das glândulas parótidas (GP) e submandibulares (GSM) de ratas diabéticas, assim como analisar a glicemia destes animais. Ratas Wistar com aproximadamente 195 g foram divididas em diabéticas (D) e controles (C), e subdivididas de acordo com a dose de irradiação recebida: C-D0 (0 J/cm2), C-D5 (5 J/cm2), C-D10 (10 J/cm2), C-D20 (20 J/cm2). O diabetes foi induzido por injeção de estreptozotocina 60 mg/kg p.c., e confirmado após 72 h, através da glicemia. Vinte e nove dias após a indução, as ratas receberam a irradiação de acordo com o grupo a qual pertenciam. O laser de diodo (Ecco Fibras®), 660nm, foi utilizado nas áreas correspondentes às GP e GSM. Após 24 h, as ratas foram eutanasiadas e as glândulas removidas para posterior análise iônica, histológica e bioquímica de concentração total de proteína, atividade das enzimas catalase, peroxidase e amilase. Além disso, análise glicêmica também foi realizada. Análise de variância e teste de Tukey revelaram diminuição da glicemia nos grupos D5 e D20 (p<0,05), assim como diminuição na atividade da enzima catalase, nestas mesmas dosagens, nas GP e GSM para valores similares às ratas não-diabéticas (p>0,05), sendo que para as GSM, a dose de 10 J/cm2 também se mostrou efetiva. Análise histológica demonstrou acúmulo de lipídeos nas GP dos animais diabéticos, sendo que para os grupos que receberam irradiação, este acúmulo foi reduzido. Com base nos resultados, podemos concluir que a irradiação com laser vermelho nas GP e GSM altera a atividade enzimática da catalase, assim como altera a concentração de glicose sangüínea e o acúmulo de lipídeos. Com isto, mais estudos devem ser realizados objetivando continuar as análises de parâmetros antioxidantes, assim como, análise glicêmica, uma vez que a hiperglicemia e alterações no sistema antioxidante são diretamente relacionadas às complicações do diabetes. / Considering that experimental diabetes alters rat salivary gland morphology and function, the aim of this study was to evaluate the effect of laser irradiation (LI) on the glycaemic state and some biochemical parameters of the parotid glands (PG) and submandibulary glands (SMG) in diabetic and non diabetic rats, which were divided into 8 groups: D0/5/10/20 and C0/5/10/20, respectively. Diabetes was induced by administration of streptozotocin (60 mg/kg) and confirmed later by the glycaemia results. Twenty-nine (29) days after the induction, the PG and SMG of groups D-C5, D-C10 and D-C20, were irradiated with 5, 10 and 20 J/cm2 of laser diode (660nm/100mW) respectively. On the following day, the rats were euthanized and the blood glucose determined. The PG and SMG were removed and total protein concentration and amylase, peroxidase and catalase activities were performed, as well as, ionic and histological analysis. The analysis of the results (ANOVA and Tukey tests) revealed a decrease in the glycaemia level for groups D5 and D20 (p<0.05). In addition, diabetic rats showed higher catalase and peroxidase activities than non diabetic groups, without radiation. The doses of 5 and 20 J/cm2 decreased catalase activity, of PG and SMG, of diabetic groups to non diabetic values (p<0.05). Moreover, the dose of 10 J/cm2 also was effective to SMGs. Histological analysis showed accumulation of lipids droplets on parotid glands of diabetic animals. However, the lipid droplets quantity was lower in comparison with that observed to non irradiated diabetic animals. The results of the present study suggest that the classical organs which control glycaemia should also be analyzed after being irradiated with LI, once hyperglycaemia and alterations of the antioxidant system are the main causes of diabetes complications.

As glândulas salivares são glândulas exócrinas que vertem seus produtos para cavidade oral. As principais glândulas são as parótidas, sublinguais e submandibulares sendo elas as responsáveis pela contribuição do maior volume de saliva durante o processo de secreção que, assim como todas as atividades que nosso corpo exerce, também dependem de energia. A secreção salivar consome glicose e mobiliza o glicogênio para adquirir energia, e este processo pode sofrer influencia de alguns fatores dentre eles o estado diabético e o ritmo circadiano. O diabetes altera todo o metabolismo de carboidratos e diminui o fluxo salivar. Já o ritmo circadiano promove uma alteração fisiológica no fluxo e composição da saliva de acordo com o horário do dia. Desta forma o objetivo deste trabalho foi em um primeiro momento observar o comportamento da concentração de glicogênio em glândulas parótidas e submandibulares de ratos com diferentes idades e condições alimentares em um determinado período do dia. Em um segundo momento observar as alterações que ocorrem na concentração de glicogênio em ratos diabéticos durante o dia. Na primeira fase do estudo foram utilizados ratos saudáveis com 21, 30 e 60 dias de vida, divididos em grupos alimentado e alimentados com restrição. No grupo com restrição de alimento os animais ficaram restritos a alimentação noturna (19 7 horas) desde 2 dias antes do sacrifício. Na segunda fase do estudo, com ratos diabéticos, foram utilizados animais com 60 dias de vida e a indução do diabetes foi realizada através de uma injeção intraperitoneal de estreptozotocina (65 mg/Kg p.c.). 30 dias após a indução os animais foram sacrificados. Em todos os grupos o sacrifício foi realizado nos seguintes horários - 7, 9, 11, 13, 15, 17 e 19 horas. As glândulas submandibulares e parótidas foram removidas imediatamente para posterior análise da concentração de glicogênio. Os dados foram analisados estatisticamente pelos testes ANOVA e o teste de Tukey (p<0.05). Os resultados obtidos com os animais normais mostra uma variação da concentração de glicogênio durante o período analisado nas duas glândulas, sendo mais evidente quando os ratos não foram submetidos a restrição de alimento. Nesta condição a variação da concentração de glicogênio em glândulas parótidas pouco alterou independente da idade. Nos animais diabéticos observamos um acúmulo de glicogênio nas glândulas parótidas e uma diminuição da concentração de glicogênio em submandibulares. Durante o período analisado também houve pouca variação da concentração de glicogênio, assim como nos animais não diabéticos, sendo evidente a menor interferência do ritmo circadiano no estado diabético. Esse estudo nos mostrou que o ritmo circadiano interfere na concentração de glicogênio das glândulas salivares parótidas e submandibulares de ratos durante o período analisado e que a restrição de alimento durante o dia alterou a concentração de glicogênio principalmente nas glândulas parótidas. Observamos também que no estado diabético ocorre um acúmulo do glicogênio em glândulas parótidas e uma diminuição nas glândulas submandibulares. / The secretory process is very important for oral health. The majors salivary glands (parotid, submandibular and sublingual) are the most important for secretion of saliva, for this activity the glands needs energy and a common way obtain is using glucose from the mobilization of glycogen during the fast period. Because of the importance of glycogen in this process, this study aimed to analyze the behavior of glycogen concentration during the day (7 to 19 hours) in parotid, and submandibular glands of rats. In the first moment the study was made with health male rats in different ages (21, 30 and 60 days old), divided in a group with free access to food and other group fed only during the night (19 to 7 hours). The second part of the study was made using diabetic male rats to search for alterations caused by this disease in glycogen concentration. All animals were killed during the day in different hours (7, 9, 11, 13, 15, 17,19 hours), their glands were removed and clamped between aluminium plates pre-cooled in dry ice. The frozen glands were then stored at -80oC until analysis of glycogen concentration. The statistical analyses was made using ANOVA test and Tukey (p<0,5). In the group of health rats we observed a variation of the glycogen concentration during the period analyzed in both glands, but it became more evident when the animals had free access to food. When they were fed during the night the variation of the glycogen concentration in parotid glands were not so evident. The results with diabetics rats showed a higher accumulation of glycogen in parotid glands and a lower concentration of glycogen in submandibular glands. In this period we could not see the variation of glycogen that happen in health rats. This study showed that circadian rhythm modify the concentration of glycogen in parotid and submandibular glands in health rats and the restriction of food made alterations in glycogen concentration of parotid glands. In diabetic rats was possible to see a higher concentration of glycogen in parotid and lower concentration in submandibular gland compared with health rats.

O Diabetes mellitus é um distúrbio metabólico de etiologia múltipla que leva a uma hiperglicemia, podendo ocasionar inúmeras disfunções e falências de alguns órgãos e também alterações em cavidade oral. Estudos demonstraram diminuição da glicemia de ratas diabéticas com o uso de laser de baixa potência (LBP) em glândulas salivares. Como o insulin-like growth factor 1 (IGF-1) tem uma estrutura semelhante a da insulina, podendo mimetizar algumas de suas funções, o objetivo do presente trabalho foi analisar o efeito da irradiação com LBP na concentração de IGF-1, nas glândulas parótidas (GP) e submandibulares (GSM), e o efeito na glicemia de ratas diabéticas induzidas por estreptozotocina. Ratas da raça Wistar foram utilizadas e receberam uma injeção intraperitoneal de estreptozotocina ou de tampão conforme o grupo ao qual pertenciam, C (controle) ou D (diabético). Posteriormente, as ratas foram divididas em 4 subgrupos (C0, D0, C5 e D5), de acordo com a dose de irradiação recebida (0 ou 5 J/cm²). O estado diabético dos animais foi confirmado através da glicemia e, após 29 dias, os animais foram submetidos à simulação ou irradiação. O LBP utilizado foi o Photon Lase III (DMC Equipamentos LTDA®). Vinte e quatro horas após o procedimento os animais foram sacrificados para coleta de sangue e das glândulas salivares para as análises da glicemia (método da glicose oxidase e do glicosímetro) e concentração de IGF-1, respectivamente. Os resultados foram analisados pelo teste estatístico de Análise de Variância (ANOVA) e teste de contraste de Tukey, admitindo-se significância de 5%. A glicemia do dia do sacrifício, dos animais diabéticos que receberam irradiação, estava diminuída quando comparada com a glicemia de sacrifício dos animais diabéticos que não receberam o laser (p0,05). Além disso, a glicemia de sacrifício dos animais diabéticos irradiados foi menor que a aferida no dia do diagnóstico, quando foi utilizado o método do glicosímetro (p0,05). A concentração de IGF-1, entretanto, não sofreu influência da doença e nem da irradiação, se mostrando alterada somente quando comparada a GP e GSM. Com base nestes resultados podemos concluir que o LBP pode alterar a glicemia dos animais diabéticos, no entanto, este efeito parece não estar relacionado com a concentração de IGF-1. / Diabetes mellitus is a metabolic disorder of multiple etiologies that leads to hyperglycemia and can cause numerous dysfunctions and failures of some organs and also changes in the oral cavity. Studies have shown a decrease on glucose blood concentration in diabetic rats when low-power laser was used upom salivary glands. As insulin-like growth factor 1 (IGF-1) has a structure similar to insulin, the aim of this study was to analyze the effect of low-power laser irradiation on IGF-1 concentration of the parotid and submandibular glands as well as on glycemia of diabetic rats induced by streptozotocin. Wistar rats were used and received an intraperitoneal injection of streptozotocin or buffer, depending on the group to which they belonged, being C (control) or D (diabetic). Subsequently, the rats were divided into 4 subgroups (C0, D0, C5 and D5) according to the irradiation dose received (0 or 5 J / cm ²). The diabetic state of the animals was confirmed by blood glucose concentration and, after 29 days, the animals were subjected to irradiation or simulation, depending on the group to which they belonged. The laser used was the Photon Lase III (DMC Equipamentos LTDA®). Twenty-four hours after the procedure, the animals were sacrificed and blood and the salivary glands were collected to analyse the glycemia and IGF-1 concentration, respectively. The results were analyzed by Analysis of Variance statistical test (ANOVA) and Tukey\'s contrast test, assuming a significance of 5%. The sacrifice day glycemia of diabetic animals that received irradiation was decreased in comparison with the sacrifice day glycemia of non-irradiated diabetic animals as well as was lower than that measured on the day of diagnosis of irradiated animals (p0,05). The concentration of IGF-1, however, was not affected by diabetes or irradiation. However, IGF-1 concentration was increased on parotid than submandibular glands. Based on these results of the present study, we conclude that LBP can decrease blood glucose concentration of diabetic animals, however, this effect does not appear to be related to the concentration of IGF-1.

O presente estudo teve por objetivo avaliar a influência da administração do tungstato de sódio (2 mg/ml) num período de 6 semanas sobre alguns parâmetros de parótida, submandibular e saliva de ratas diabéticas induzidas por estreptozotocina. Os grupos estudados foram divididos em controle (C), controle tratado com tungstato de sódio (CT), diabético (D) e diabético tratado (DT). Os parâmetros estudados foram o metabolismo energético, a composição protéica das glândulas e de saliva total estimulada por pilocarpina e isoproterenol, bem como a via de secreção de proteínas. No metabolismo energético foi determinada a concentração de glicogênio e a atividade enzimática da hexoquinase, fosfofrutoquinase-1, piruvato quinase, glicose-6-fosfato desidrogenase, lactato desidrogenase. Foram determinadas a concentração de proteína total, a atividade enzimática da amilase e peroxidase e o teor de ácido siálico em glândulas salivares e saliva. A via de secreção de proteínas foi estudada pela avaliação da expressão de proteína quinase C por western blot. Os resultados obtidos confirmam o potencial hipoglicemiante do tungstato de sódio, bem como sua ação no controle da polifagia, da polidipsia e do peso corporal e glandular. A concentração de glicogênio sofreu um incremento nos grupos diabéticos e o tratamento com tungstato de sódio potencializou esse aumento nas glândulas salivares. A glândula parótida sofreu um aumento de alguns parâmetros da via glicolítica e de sua composição protéica nas semanas iniciais do estudo, com normalização nas semanas finais. O tungstato se mostrou efetivo no controle da atividade de peroxidase em glândulas salivares, com efeitos pouco significativos sobre os demais parâmetros estudados. Os animais diabéticos apresentaram um aumento da proteína total em saliva, porém nenhuma diferença foi observada na atividade da amilase e peroxidase. O tungstato de sódio potencializou o aumento da concentração de proteínas causado pelo diabete além de reduzir a atividade da amilase na saliva dos animais controle e diabético tratados. A glândula submandibular de ratos diabéticos sofreu uma estimulação na expressão de PKC ativa e inativa após uma semana experimental, além de uma alteração do perfil das isoformas da enzima, o tungstato de sódio potencializou esse aumento. Conclusão: O papel do tungstato de sódio no restabelecimento do metabolismo energético não foi observado em parótida e submandibular, mostrando que esse composto não modifica o metabolismo de tecidos periféricos como as glândulas salivares. A ação do tungstato de sódio sobre a atividade da peroxidase em glândulas salivares indica que esse composto pode atuar como auxiliar no sistema antioxidante no organismo. O tungstato de sódio potencializa uma das vias de secreção de saliva pelo estímulo da PKC. / The aim of study was evaluate the effect of sodium tungstate administration (2mg/ml) on some parameters of parotid, submandibular and pilocarpine/isoproterenol stimulated saliva of streptozotocin induced-diabetes, during six weeks. The groups were divided in untreated control (C), treated control (CT), untreated diabetic (D) and treated diabetic (DT). The parameters studied were energetic metabolism, proteic composition of glands and saliva, besides the protein secretion pathway. In the energetic metabolism were determinated hexokinase, phosphofructokinase-1, pyruvate kinase, glycose-6-phosphate dehydrogenase and lactate dehydrogenase activities. Were evaluated the total protein concentration, amylase and peroxidase activities and free and total sialic acid content on saliva and salivary glands. The protein secretion pathway was studied by evaluation of expression of protein kinase C by western blot. The results obtained confirm the tungstate potential as hypoglycemic, as well as its action in the polifagia, polidipsia and body and glandular weight control. The glycogen concentration suffered an increment in the diabetic group and the tungstate treatment potentialized the increase in the salivary glands. Parotid glands suffered an increased in some parameters of glycolitic pathway and its protein composition in the initial weeks of study, with normalization in the end of experiment. The tungstate was effective in the control of peroxidase activity in salivary glands, but few effects on the other parameters. Diabetic animals presented an increased of total protein concentration in saliva, but no difference was observed in the amylase and peroxidase activities. Sodium tungstate caused an increased in the total protein concentration and a reduction on amylase activity of saliva in the CT and DT groups. Submandibular gland of diabetic rats suffered stimulation in the active and inactive PKC expression after one week and alteration in the isoforms profile of enzyme. Sodium tungstate potencialized this increased. Conclusion: In this study, was not observed effect of sodium tungstate on energetic metabolism of parotid and submandibular, showing that this compound does not alter the metabolism in the peripheral tissue as salivary glands. The tungstate acts on peroxidase activity, this show the possible action of this compound in the antioxidant system. Sodium tungstate stimulates the protein secretion pathway in the salivary glands.

Orientadores: Albina Messias De Almeida Milani Altemani, Elizabeth Ferreira Martinez / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-25T03:06:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Montalli_VictorAngeloMartins_D.pdf: 4723030 bytes, checksum: 1764455ec3666d02c7e74ee7c326caed (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: As lesões salivares tumorais compostas por dupla população celular (epitelial e mioepitelial) são consideradas originárias do ducto intercalado e estas lesões são subdivididas em diversas entidades que apresentam sobreposição morfológica, com delimitações entre elas nem sempre nítidas. Entre as neoplasias benignas estão o adenoma pleomórfico (AP) e o adenoma de células basais (ACB). Recentemente foi descrita uma nova entidade tumoral benigna, com composição epitelial e mioepitelial, denominada de lesão do ducto intercalado (LDI). Diante disso, o nosso primeiro objetivo foi analisar os perfis morfológicos e imuno-histoquímicos de LDIs e ACBs classificados em tubulares (ACB-T) e não tubulares (ACB-NT) para verificar se as LDIs e ACB-Ts representam entidades distintas. Ainda, dado o papel crítico da célula mioepitelial na morfogênese das lesões tumorais salivares histogeneticamente relacionadas ao ducto intercalado, nosso segundo objetivo foi avaliar in vitro a influência de fatores do microambiente tumoral (proteínas da matriz extracelular e fatores de crescimento) sobre a morfologia, viabilidade e proliferação de células mioepiteliais advindas de AP. Para a análise morfológica e imuno-histoquímica, foram estudados oito casos de LDIs, nove ACBs-T e 19 ACBs-NT. Todos os ACB-T continham áreas LDI-like, enquanto nos ACB-NT estas eram raras e escassas. As células luminais das LDIs e ACBs-T exibiram positividade para CK7, lisozima, S100 e DOG1. No grupo ACB-NT, poucas células luminais mostraram tal expressão, sendo principalmente positivas para CK14. As células mioepiteliais das LDIs, ACB-T e ACB-NT foram positivas para CK14, calponina, AML e p63, mas essas eram mais numerosas nos ACBs. No estudo in vitro, a morfologia e diferenciação das células mioepiteliais foram avaliadas qualitativamente por imunofluorescência indireta (expressão da vimentina e AML, respectivamente). As células mioepiteliais exibiram morfologia poliédrica em todas as matrizes, independentemente da suplementação do fator de crescimento. AML foi imunoexpressa de forma heterogênea nas células mioepiteliais, porém houve aumento da expressão desta proteína quando acrescentado o TGF- ?1, independentemente do tipo de matriz usada. TGF- ?1 também aumentou significantemente a viabilidade das células mioepiteliais cultivadas na matriz fibronectina. Conclusões: as LDI, ACB-T e ACB-NT formam um continuum de lesões onde as LDIs estão estreitamente relacionadas com o ACB-T, visto que em ambos o imunofenótipo das células luminais e mioepiteliais é semelhante àquele observado nos ductos intercalados. A principal diferença entre LDI e ACB-T é a quantidade de células mioepiteliais, que é maior no último. Além disso, nossos resultados indicam que pelo menos alguns ACBs podem surgir via LDI. Os estudos em cultura de células sugerem que as diferentes matrizes celulares não influenciam a morfologia e diferenciação da célula mioepitelial. Dentre os fatores de crescimento estudados apenas TGF- ?1 associou-se com aumento da expressão de AML (diferenciação celular) e aumentou significantemente a viabilidade celular associado à matriz fibronectina / Abstract: Salivary tumor lesions composed of dual cell population (epithelial and myoepithelial) are considered to originate from the intercalated duct. These lesions are subdivided into several entities that share morphological features. Among the benign tumors are pleomorphic adenomas (PA) and basal cell adenoma (BCA). Recently, a new entity was described that is a benign tumor with epithelial and myoepithelial composition, called intercalated duct lesion (IDL). Our first objective was to analyze the morphological and immunohistochemical profiles of IDLs and BCAs classified into tubular (T-BCA) and non-tubular subtypes (NT-BCA), to determine whether or not IDL and tubular BCA represent distinct entities. Also, given the critical role of myoepithelial cells in the morphogenesis of the salivary tumor lesions histogenetically related to the intercalated duct, our second objective was to evaluate in vitro the influence of tumor microenvironment factors (extracellular matrix proteins and growth factors) on the morphology, viability and proliferation of myoepithelial cells arisen from PA . Eight IDLs, nine tubular BCAs and 19 non-tubular BCAs were studied by immunohistochemical technique. All tubular BCAs contained IDL-like areas, which represented 20-70% of the tumor. In non-tubular BCA, IDL-like areas were occasional and small (<5%). One patient presented IDLs, tubular BCAs and IDL/tubular BCA combined lesions. Luminal ductal cells of IDLs and tubular BCAs exhibited positivity for CK7, lysozyme, S100 and DOG1. In the non-tubular BCA group, few luminal cells exhibited such immunoprofile; they were mainly CK14-positive. Basal/myoepithelial cells of IDLs, tubular BCAs and non-tubular BCAs were positive for CK14, calponin, ?-SMA and p63; they were more numerous in BCA lesions. The in vitro study analyzed morphology and differentiation of myoepithelial cells by vimentin and SMA expressions, respectively, which were qualitatively assessed using indirect immunofluorescence. Myoepithelial cells showed polyhedral morphology in all extra cellular matrixes regardless of the supplementation of growth factors. These cells expressed SMA heterogeneously but when TGF- ?1 was added such expression increased. This modification did not show relationship with the type of extracellular matix. The viability of myoepithelial cells cultured on fibronectin matrix increased significantly with addition of TGF - ?1. Conclusions: IDL, tubular BCA and non-tubular BCA form a continuum of lesions in which IDLs are related closely to tubular BCA. In both, the immunoprofile of luminal and myoepithelial cells recapitulates the normal intercalated duct. The difference between the adenoma-like subset of IDLs and tubular BCA rests mainly on the larger numbers of myoepithelial cells in the latter. Our findings indicate that at least some BCAs can arise via IDLs. The cell culture studies suggest that the different matrixes do not influence the morphology and differentiation of myoepithelial cells. Among the growth factors studied, only TGF - ?1 was associated with an increased expression of SMA (cell differentiation) and a significant increase of the cellular viability associated with the fibronectin matrix / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Osley Paes de Almeida / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-24T19:48:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_ElizabeteBrasildos_D.pdf: 4850924 bytes, checksum: 48a213e7b4224d15baf0fd77d7f93c59 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A candidose é a micose mais comum da boca, estando associada a fatores predisponentes locais ou sistêmicos. Neste estudo verificamos o desenvolvimento de candidose em ratos portadores de carcinoma de língua. É controvertido na literatura a ocorrência e a relevância da infecção por Candida em lesões bucais como liquen plano, leucoplasias e carcinomas espinos celulares. De acordo com alguns trabalhos, a maior presença de Candida em leucoplasias está associada a maior severidade de displasias epiteliais (RENSTRUP, 1970; ]ONES & RUSSEL., 1973; ZHANG et al., 1994). Ratos normais e sialoadenectomizados foram pinceladas com 4NQO por 4 meses e posteriormente acompanhados até o desenvolvimento de carcinoma de língua. Suspensão de C albicans foi então inoculada na boca de ratos normais e portadores de carcinoma e a ocorrência de candidose verificada histologicamente após 24 e 48h. Nos mesmos períodos, leveduras foram recuperadas da boca de todos os animais e os dados foram expressos em ufc/ ml. A sialoadenectomia aumentou a quantidade de leveduras recuperadas, assim como o número de áreas de candidose. Os animais portadores de carcinoma de língua tiveram maior quantidade de leveduras na boca e de áreas de candidose, em relação aos respectivos controles. Nos animais com carcinoma, as candidoses ocorreram principalmente nas áreas de hiperqueratose, sendo pouco frequentes nas regiões de carcinoma francamente invasivos. Concluiu-se que lesões hiperqueratóticas da boca são mais susceptíveis à infecção por C albicans em relação ao epitélio normal, mas o papel no desenvolvimento de displasias epiteliais precisa ser melhor determinado. Num estudo paralelo ao acima descrito verificou-se a aderência. de C albicans, a permanência e o desenvolvimento de candidose na boca de ratos. A aderência de microrganismos é considerada etapa fundamental para o desenvolvimento de infecções. Os estudos de aderência de Candida são feitos in vitro, não havendo na literatura relatos da aderência in vivo. Ratos normais ou sialoadenectomizados, tratados ou não com tetraciclina foram inoculados na boca com suspensão de C. albicans e a aderência das leveduras no dorso da língua e o desenvolvimento de candidose foram avaliados histologicamente após 5, 15, 30, 60 min., e 4, 12, 24 e 48h. Também foi feita a recuperação da levedura presentes na boca nos períodos de 4 a 48h. Os resultados mostraram que a aderência de C. albicans ocorre principalmente na queratina mole das papilas verdadeiras, sobre a placa bacteriana presente nesta área. A xerostomia aumentou a quantidade de placa bacteriana nas papilas linguais e facilitou a aderência da C. albicans, assim como o desenvolvimento de candidose, aumentando também o número de leveduras recuperadas. O tratamento com tetraciclina diminuiu a aderência de Candida, mas aumentou a recuperação de C. albicans e o desenvolvimento de candidose. Concluiu-se que a aderência de C albicans ocorre principalmente através de bactérias e que o desenvolvimento de candidose está associado a maior quantidade de leveduras presentes na boca, que no caso deste trabalho ocorreu pela xerostomia e/ou antibioticoterapia. Outros estudos são necessários para se determinar quais são os mecanismos envolvidos numa aderência transitória ou que caminhe para a formação de candidose / Abstract: Candidosis is the most common fungal infection in the oral cavity, usually associated with local and systemic predisposing factors. ln this study we verified the development of candidiasis in the tongue of rats with carcinomas provoked by 4NQO. The occurrence and relevance of candidal infection in orallesions such as lichen planus, leukoplakias and carcinomas are still to be understood. lt is interesting that according to some works, the prevalence of Candida in leukoplakia is associated with more severe epithelial displasia (RENSTRUP, .1970; JONES & RUSSEL, 1973; ZHANG et al., 1994). Normal and sialoadenectomizad mice were painted with 4NQO during 4 months and thereafter they were observed until the development of carcinomas in the tongue, when they were innoculated in the mouth with a suspension of C albicans. The development of candidosis was verified histologically after 24 and 48h. Yeasts were recovered from the oral cavity of all rats and the results were expressed in ufc/ ml. Sialoadenectomy alone increased the number of yeasts recovered from the mouth and of areas with candidosis. Rats, normal and sialoadenectomizad, bearing carcinoma of the tongue had a higher number of yeasts in the mouth and of candidosis than the respective controls. Candidosis was observed mainly in areas with hiperqueratosis and was less frequente in regions of carcinoma. We concluded that hyperqueratotic lesions of the mouth are more susceptible to candidal infection than normal epithelium, but the role of C albicans in the development of epithelial displasia must be better understood. In a parallel study we verified the adherence of C albicans, its recovery from saliva and the development of candidosis in the rat tongue. The adherence of microorganisms is considered a fundamental step in infection. Most of the studies about candidal adherence to epithelial cells are in vitro and there are no records about the mechanisms in vivo. In this study, normal and sialoadenectomized rats, treated or not with tetracycline received one oral innoculation of a suspension of C albicans and the adherence of the yeasts and the development of candidosis were vetified histologically after 5,15,30 and 60 min., and 4, 12, 24 and 48h. The results showed that the adherence of C albicans occurred in the "soft" keratin of the true papillae of the tongue, and mainly on the bacterial plaque present on this area. Xerostomia caused na increase in bacterial plaque of the papillae and facilitated the adherence of C albicans and the development of candidosis. The treatment with tetracycline decreased bacterial plaque and the adherence of Candida to epithelial cells, but increased the number of yeasts recovered from the mouth of rats and the number of areas of candidosis. We concluded that the adherence of C albicans occurs mainly on the bacterial plaque of the papillae and that the development of candidosis is related to na increased number of yeasts present in the mouths of rats, caused in this study by xerostomia and/or antibiotictherapy / Doutorado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Doutor em Odontologia

Orientador: Oslei Paes de Almeida / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-13T23:29:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ito_ValdirSeije_M.pdf: 3314229 bytes, checksum: 6622452343f04740f9badbbd576aa17d (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: Os efeitos da xerostomia, provocada pela retirada cirúrgica das glândulas salivares maiores, nas estruturas buscais foram estudados em ratos albinos Wistar. Houve significante aumento de cárie dental, sendo que nos dentes inferiores os índices foram bem mais elevados do que nos superiores. Não se observou alterações da mucosa bucal, ou modificações na evolução da doença periodontal provocada pela colocação de irritante gengival an cervical dos primeiros molares inferiores. Após a sialoadenectomia houve perda de grande parte da placa dental dos incisivos inferiores, o mesmo ocorrendo quando os animais xerostómicos foram alimentados com ração pulverizada ou deixados em jejum. Estes resultados sugerem que as secreções das glândulas salivares maiores não são essenciais para a integridade da mucosa oral do rato, e que o incisivoo inferior é interessante modelo para o estudo da formação e degradação da placa dental / Abstract: The effects of xerostomia, provoked by removal of the major salivary glands, were studied in Wistar albino rats. Sialodenectomy resulted in an increase in dental caries, particularly in the lower molars. No alterations in the oral mucosa were observed. The development of periodontal disease caused by the placement of gingival irritant in the cervical region of the first lower molars was unchanged. Sialodenectomy was followed by loss of dental plaque from the lower incisor, and this was not modified by fasting or feeding powdery chow. It is suggested that the major salivary gland secretions are not essential for the integrity of the oral mucosa of the rat, and that the lower incisor is an interesting model to study dental plaque formations and degradation / Mestrado / Patologia / Mestre em Ciências