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Processos imunobiológicos que regulam a biossíntese e o remodelamento da matriz extracelular na cicatrização de ferimentos cutâneos fotobiomodulados (670nm) e no contexto tumoral

Gonzalez, Ana Cristina de Oliveira 08 1900 (has links)
Submitted by Pós Imunologia (ppgimicsufba@gmail.com) on 2017-02-14T18:23:05Z No. of bitstreams: 1 Gonzalez, ACO.pdf: 3789736 bytes, checksum: 1fbb6dad4c1a43846555898698d711fa (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-03-23T12:50:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Gonzalez, ACO.pdf: 3789736 bytes, checksum: 1fbb6dad4c1a43846555898698d711fa (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-23T12:50:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gonzalez, ACO.pdf: 3789736 bytes, checksum: 1fbb6dad4c1a43846555898698d711fa (MD5) / Os processos imunobiológicos que regulam a biossíntese e o remodelamento da matriz extracelular na cicatrização de ferimentos fotobiomodulados e no contexto tumoral foram contemplados no presente trabalho. Na primeira parte, foram descritas as fases da cicatrização integrantes do processo de reparo tecidual cutâneo, com ênfase no papel biológico desempenhado por diferentes células e suas moléculas sinalizadoras. Na segunda seção, foi realizado estudo experimental, duplo cego a fim de avaliar o efeito do laser de baixa potência na fase tardia da cicatrização, em especial em relação à angiogênese, células do sistema imune e a via de sinalização Hedgehog. Quarenta ratos foram alocados randomicamente em dois grupos experimentais, controle e tratado com laser diodo semicondutor de AsGaAl (670nm). Após indução de ferimento cutâneo padronizado, os espécimes foram eutanasiados em 14, 21, 28 e 35 dias. As secções teciduais foram submetidas à coloração com hematoxilina-eosina e à técnica de imuno-histoquímica com os anticorpos anti CD31, NG2, actina alfa de músculo liso, CD8, CD68, Ptch, Ihh e Gli-2. Os níveis séricos das citocinas IL-2, IL-4, IL-10 e IFNɣ foram avaliados através da técnica de citometria de fluxo. Todos os dados histomorfométricos foram submetidos à análise estatística e o nível de significância adotado foi p<0,05. Observou-se que a neoangiogênese persistiu, pois houve presença de CD31+(p=0,016), NG2+ e alfa actina de músculo liso (p=0,025) em ambos os grupos, sendo que no grupo tratado com laser ocorreu mais cedo. No grupo laser, aos 21 dias houve decréscimo de células CD68+ (p=0,032) e aumento de CD8+ (p=0,038). Os níveis sanguíneos de IL-2 e IL-10 foram indetectáveis em ambos os grupos experimentais, ao passo que o perfil de IL-4 e IFNɣ não foi significativo (p>0,05). Na fase do remodelamento, a sinalização da via Hedgehog pareceu estar ativada, haja vista a presença da expressão fenotípica de algumas proteínas desta via, embora, a expressão de Ihh e Ptch parece não ter sido fotobiomodulada, pois não houve diferenças estatisticamente significativas entre os grupos experimentais. A terceira parte do trabalho abordou o processo de transformação neoplásica através de um estudo comparativo de lesões pré-cancerizáveis de mucosa oral e carcinoma escamocelular, no qual foi investigada a presença de algumas proteínas da via Hedgehog em dezesseis casos humanos. Observou-se significativo aumento progressivo da expressão de todas as proteínas da via Hedgehog, tanto no epitélio quanto na lâmina própria, quando se comparou as secções de mucosa oral normal, displasia e carcinoma (p<0,05). Através da realização do primeiro estudo, conclui-se que o laser de baixa potência foi capaz de modular a fase do remodelamento da matriz extracelular durante a cicatrização experimental, uma vez que os tecidos fotobiomodulados apresentaram alterações mais precoces em relação ao grupo controle e os eventos que ocorrem no reparo tecidual parecem ser cíclicos e continuam se desenvolvendo no tecido, independente do aspecto clínico da lesão que evidencia o seu fechamento e completa cicatrização. Em relação ao estudo realizado em mucosa oral humana, observou-se que a ativação da via Hedgehog pareceu influenciar na transformação neoplásica, pois foi demonstrado aumento progressivo de células Hedgehog positivas nas lesões pré-cancerizáveis presentes no mesmo indivíduo. / This study evaluated the immunological processes that regulate the biosynthesis and extracellular matrix remodeling in the context of photobiomodulated wound healing and tumors. Initially, the stages of the skin tissue repair process were described, with emphasis on the biological role played by different cells and their signaling molecules. Subsequently, a double-blind experimental study was conducted, in order to assess the effect of low power laser in the late stages of healing, with emphasis on angiogenesis, immune cells and Hedgehog signaling. Forty rats were allocated randomly in two groups; control and those treated with laser diode of GaAlAs (670 nm). After induction of standardized skin wounds, the specimens were euthanized at 14, 21, 28 and 35 days. Tissue sections were subjected to hematoxylin-eosin and immunohistochemical techniques with antibodies to CD31, NG2, smooth muscle alpha actin, CD8, CD68, Ptch, Gli-2 and Ihh. Serum levels of the cytokines IL-2, IL-4, IL-10 and IFNɣ were assessed by flow cytometry. All histomorphometric data were statistically analyzed and significance level was at p<0,05. We observed that neoangiogenesis persisted, because of the presence of CD31+ (p=0,016), NG2+ and smooth muscle alpha actin (p=0,025) in both groups. The laser-treated group responded earlier. By day 21, the laser-treated group had decreased CD68+ cells (p=0,032) and increased CD8+ (p=0,038).Blood levels of IL-2 and IL-10 were undectable in both experimental groups, whereas IL-4 and IFNɣ profile was not significant (p>0,05). At the remodeling stage, the Hedgehog signaling pathway seemed to be activated, given the presence of phenotypic expression of some of its proteins, although the expression of Ihh and Ptch did not seem to have been photobiomodulated because there were no statistically significant differences between the experimental groups. The third part of our study dealt with neoplastic transformation process, through a comparative study of pre-cancerous lesions of the oral mucosa and squamous cell carcinoma, in which we investigated the presence of some proteins of the Hedgehog pathway in sixteen human cases. There was a significant progressive increase in the expression of all proteins in the Hedgehog pathway, both in the epithelium and lamina propria, when comparing lesions of normal mucosa, dysplasia and carcinoma (p<0,05). We concluded that laser therapy was able to modulate the remodeling phase because laser treated tissues showed modifications earlier than control group and the events that occur in tissue repair appear to be cyclical and continue to remodel the tissue, independent of the clinical aspects of the lesion such as its closure and completed healing. Regarding the study of human oral mucosa, it was observed that Hedgehog pathway activation seems to influence the neoplastic transformation. Progressive increase of Hedgehog positive cells was observed in precancerous lesions present in the same individual.
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Estudo do perfil de expressão de componentes da via de sinalização sonic hedgehog em displasia epitelial oral

Dias, Rosane Borges January 2014 (has links)
Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-04-02T13:47:38Z No. of bitstreams: 1 Rosane Borges Dias - Estudo do perfil... 2014.pdf: 2418992 bytes, checksum: 9a4f389957bc3f98114112321eee18b4 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-04-02T13:47:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rosane Borges Dias - Estudo do perfil... 2014.pdf: 2418992 bytes, checksum: 9a4f389957bc3f98114112321eee18b4 (MD5) Previous issue date: 2014 / Universidade Federal da Bahia. SAlvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / A displasia epitelial oral (DEO) é um aspecto histológico descrito em lesões potencialmente malignas, cujos mecanismos relacionados a patogênese e potencial de transformação são pouco conhecidos. Sabendo-se que a via de sinalização Sonic Hedgehog(SHH)tem participação no desenvolvimento do carcinoma escamocelular de boca(CEB) e que as proteínas relacionadas a esta via de sinalização estão envolvidas nos mecanismos biológicos relacionados a iniciação e progressão de tumores humanos. O objetivo deste trabalho foi estudar a expressão das proteínas da via de sinalização SHH em DEO, a fim de contribuir para o conhecimento do perfil biológico desta lesão. Material e Métodos: As amostras de DEO foram revisadas e classificadas de acordo com o risco de malignidade descrito por Kujan et al.(2006) e OMS(2005). Vinte e cinco casos de DEO foram submetidos a reação imuno-histoquímica para as proteínas SHH, PTCH1, SUFU, HHIP, GLI1 e Ciclina D1(CCND1)utilizando o sistema polimérico AdvanceTM(Dako). Para fins comparativos, cinco casos de hiperqueratose, oito de hiperplasia fibrosa inflamatória(HFI) e quatro de mucosas não-neoplásica(MNN)também foram avaliados.Todos os casos foram analisados de acordo com os parâmetros semiquantitativos descritos por Gurgel et al.(2008)e os dados foram analisados usando Graph Pad Prism5.01. Resultados: Vinte e um(84%)DEO foram classificados como lesões de baixo risco e 4(16%)como alto risco. A proteína SHH foi predominante no citoplasma(n =14, sendo 56%) e a positividade de PTCH1 foi observada em membrana e citoplasma (n=23, 92%). As proteínas HHIP e SUFU foram observadas principalmente no citoplasma das células epiteliais e foram positivas em 17 (68%) e 11 (44%) das DEO, respectivamente. GLI1 foi positivo em 21 (84%), principalmente localizada nos núcleos das células epiteliais (n=12; 70,6%). A proteína CCND1 foi exclusivamente no núcleo 19(76%).Em DEO, os escores predominantes para SHH, PTCH1, HHIP, SUFU, GLI1 e CCND1 foram: 2+ (57,14%), 3+ (73,91%), 3+ (58,82%), 2+ e 3+ (36,36%), 3+ (90,48 %), 1+(47,37 %), respectivamente. Os casos de DEO exibiram maior expressão de HHIP(p=0,02) e GLI1(p=0,00), em comparação com hiperqueratose. Além disso, níveis elevados de PTCH1 (p=0,05), HHIP (p= 0,01) e CCND1 (p=0,00) foram observados em DEO em comparação com HFI. Ainda, uma maior expressão de PTCH(p=0,01) foi observada nos casos de DEO quando comparados com MNN. Conclusões: Os nossos resultados sugerem que a via SHH pode participar da patogênese da DEO e reforçam a relação desta cascata sinalizadora na carcinogênese oral. / Oral epithelial dysplasia (OED) is a histological aspect described in premalignant lesions and the mechanisms related to the pathogenesis and malignant progression are poorly understood. It is known that Sonic Hedgehog (SHH) signaling pathway participates in the development of oral squamous cell carcinoma, and proteins related to this cascade are involved in biological mechanisms related to the initiation and progression of human tumors. The aim of this study was to investigate SHH signaling molecules in OED, in order to contribute to the knowledge of the biological profile of this lesion. Methods: Samples of OED were reviewed and classified according to the risk of malignancy described by Kujan et al. (2006) and WHO (2005). Twenty five cases of DEO were to submitted to immunohistochemical reactions for SHH, PTCH1, SUFU, HHIP, GLI1 and Cyclin D1 (CCND1) proteins using AdvanceTM polymer system (Dako). For comparative purposes, five cases of hyperkeratosis, eight inflammatory fibrous hyperplasia (IFH) and four non- neoplastic (NNM) mucosa were also evaluated. All OED were analyzed according to the semi-quantitative parameters described by Gurgel et al. (2008) and the data was analyzed using Graph Pad Prism 5.01. Results: Twenty- one (84%) OED were classified as low risk lesions and 4 (16%) as high risk. SHH protein was predominant in cytoplasm (n=14; 56%) and PTCH1 positivity was described in both membrane and cytoplasm (n=23; 92%). HHIP and SUFU proteins were observed in cytoplasm of epithelial cells and were positive in 17 (68%) and 11 (44%) OED, respectively. GLI1 protein was positive in 21 (84%), mainly located in the cells nuclei (n=12; 70.6%). CCND1 protein was exclusively in the nucleus 19 (76%). The predominant scores for SHH, PTCH1, HHIP, SUFU, GLI1 and CCND1 were: +2 (57.14%), +3 (73.91%), +3 (58.82%), +2 and +3 (36.36%), +3 (90.48%), +1 (47.37%), respectively. OED sample had higher levels of HHIP (p=0.02) and GLI1 (p=0.00) as compared to hyperkeratosis. Furthermore, high levels of PTCH (p=0.05), HHIP (p=0.01) and CCND1 (p=0.00) were observed in OED as compared to IFH OED. Also, a high level of PTCH (p= 0.01) was observed in OED as compared to NNM. Conclusions: Our results suggest that the SHH pathway may participate in the pathogenesis of DEO and corroborates to the relationship of this signaling cascade in oral carcinogenesis.
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Detecção de bactérias orais e avaliação da expressão de marcadores inflamatórios e trombogênicos em valvas cardíacas sadias e na estenose aórtica calcificada / Detection of oral bacteria and evaluation of the expression of inflammatory and thrombogenic markers in healthy heart valves and in calcified aortic stenosis

Oliveira, Francisco Artur Forte 03 1900 (has links)
OLIVEIRA, F. A. F. Detecção de bactérias orais e avaliação da expressão de marcadores inflamatórios e trombogênicos em valvas cardíacas sadias e na estenose aórtica calcificada. 2017. 94 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-05-10T15:48:41Z No. of bitstreams: 1 2017_tese_fafoliveira.pdf: 102595336 bytes, checksum: 3a1351e0856f5e81af6c65c01ce6e802 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-05-10T15:49:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_tese_fafoliveira.pdf: 102595336 bytes, checksum: 3a1351e0856f5e81af6c65c01ce6e802 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-10T15:49:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_tese_fafoliveira.pdf: 102595336 bytes, checksum: 3a1351e0856f5e81af6c65c01ce6e802 (MD5) Previous issue date: 2017-03 / The present study aimed to perform molecular, histomorphological and immunohistochemical analysis of oral pathogens in healthy cardiac valves and calcified aortic stenosis, as well as evaluate the expression of Osteopontin, Fibrinogen, CD61 and inflammatory markers in these samples. Dental plaque, saliva and heart valve samples from ten patients with calcified aortic stenosis were collected for molecular analysis of S. mutans, P. intermedia, P. gingivalis and T. Denticola, through real-time Polymerase Chain Reaction (PCR). In addition, heart valve tissue from five healthy young men submitted to necropsy was also collected and analyzed for the same bacteria using the same technique mentioned above. Fragments of all specimens were fixed in 10% buffered formalin for histomorphological (Hematoxylin/eosin), histochemical (Giemsa) and immunohistochemical (Streptavidin-biotin-peroxidase method) analysis for anti-Streptococcus mutans, anti-IL-1β, anti-TNF alpha, anti-COX -2, anti-NF-κB, anti-C-Reactive Protein, anti-Osteopontin, anti-Fibrinogen and anti-CD61. To evaluate caries and periodontal disease, the DMFT (decayed, missing and filled teeth) and PSR (periodontal screening and recording) indexes were used, respectively. Molecular analysis of supragingival and subgingival dental plaque and saliva of dentate and edentulous patients with calcified aortic stenosis revealed a high frequency of S. mutans and P. intermedia in the samples (varying between 90.0% and 100.0%), whereas the frequency of P. and T. denticola was lower (ranging from 10.0% to 67.0%). The evaluation of oral bacteria in valvar tissue by realtime PCR revealed a high frequency of S. mutans (80.0%) in healthy cardiac valves and in calcified aortic stenosis valves, while P. intermedia, P. gingivalis and T. Denticola were not identified. Immunohistochemical analysis identified S. mutans only in valves with calcified aortic stenosis (80%). Areas of calcification, fibrosis and myxoid degeneration were identified in 100% of the diseased cardiac valves, and they were all colonized with Streptococcus, which was revealed by histochemical analysis. The number of decayed, missing and filled teeth (DMFT) was 25.6 ± 6.7 in patients with valve disease. Positive immunohistochemical staining for IL-1β, TNF alpha, COX-2, fibrinogen, C-Reactive Protein and osteopontin was observed in 100% of the calcified aortic stenosis samples that were also immunopositive for S. mutans, whereas the immunoexpression of NF-kB and CD61 was evidenced in 87.5% and 62.5% of those samples, respectively. In healthy samples, the expression of these immunomarkers was negative. The detection of S. mutans in the calcified aortic stenosis through multiple techniques with different sensitivity may suggest the colonization of this bacterium in extraoral sites. In addition, the presence of S. mutans and the expression of 11 inflammatory and thrombogenic immunomarkers in microscopically altered areas was observed in the diseased valves, guiding a possible relation with the calcified aortic stenosis. / O presente trabalho teve por objetivo realizar análises molecular, histomorfológica e imunohistoquímica de patógenos orais em valvas sadias e na estenose aórtica calcificada, além de avaliar a expressão de Osteopontina, Fibrinogênio, CD61 e marcadores inflamatórios. Amostras de placa dental, saliva e valva cardíaca de dez pacientes com estenose aórtica calcificada foram coletadas para análise molecular de S. mutans, P. intermedia, P. gingivalis e T. Denticola, através de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) em tempo real. Adicionalmente, tecido cardíaco valvar de cinco jovens saudáveis submetidos a necropsia também foi coletado e analisado para esse grupo de bactérias, pela mesma técnica supracitada. Em paralelo, fragmentos de todos os espécimes valvares foram fixados em formol 10% tamponado para análises histomorfológica (Hematoxilina/eosina), histoquímica (Giemsa) e imuno-histoquímica (método da estreptavidina-biotina-peroxidase) para anti-Streptococcus mutans, anti-IL-1β, anti-TNF alpha, anti-COX-2, anti-NF-kB, anti-Proteína C-Reativa, anti-Osteopontina, anti-Fibrinogênio e anti-CD61. Para avaliação da cárie e da doença periodontal foram utilizados os índices CPO-D (dentes cariados, perdidos e obturados) e PSR (periodontal screening and recording), respectivamente. Análise molecular das placas dentais supragengival, subgengival e saliva de pacientes dentados e desdentados com estenose aórtica calcificada revelou frequência maior de S. mutans e P. intermedia (variando entre 90% e 100%), enquanto P. gingivalis e T. denticola estiveram presentes em menor número de amostras bucais (variando entre 10% e 67%). S. mutans foi encontrado na mesma proporção em valvas cardíacas sadias e na estenose aórtica calcificada (80%), enquanto que P. Intermedia, T. denticola e P. gingivalis não foram identificadas. A análise imunohistoquímica evidenciou o S. mutans somente na estenose aórtica calcificada (80%). Áreas de calcificação, fibrose e degeneração mixoide estiveram presentes em 100% das valvas doentes, sendo todas sítios de colonização de Estreptococos, revelados através da reação histoquímica. O número de dentes cariados, perdidos e obturados (CPO-D) foi de 25,6±6,7 nos pacientes com doença valvar. Marcação imuno-histoquímica positiva para IL-1β, TNF alpha, COX-2, Fibrinogênio, Proteína C-Reativa e Osteopontina foi observada em 100% das amostras analisadas de estenose aórtica calcificada imunopositivas para S. mutans, enquanto que a imunoexpressão para NF-kB e CD61 foi evidenciada em 87,5% e 62,5% dessas valvas, respectivamente. Em amostras sadias a expressão desses marcadores foi negativa. A detecção de S. mutans na estenose aórtica calcificada através de múltiplas técnicas com diferentes sensibilidades pode sugerir a colonização dessa bactéria em sítios extrabucais. Aliado a este 9 achado, observou-se a presença de S. mutans e a expressão de marcadores inflamatórios e trombogênicos nas áreas microscopicamente alteradas nas valvas doentes, norteando possível relação com a estenose aórtica calcificada.
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Embriogênese somática em mamoeiro (Carica papaya L.): anatomia, histoquímica e influência de ACC, AVG e STS e de pulsos de 2,4-D / Somatic embryogenesis in papaya (Carica papaya L.): anatomy, histochemistry and influence of AVG, ACC, STS and pulses of 2,4-D

Koehler, Andréa Dias 18 March 2004 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-10-13T16:31:11Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2066785 bytes, checksum: c877aba62b5527dd4e90b04a429a3be9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-13T16:31:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2066785 bytes, checksum: c877aba62b5527dd4e90b04a429a3be9 (MD5) Previous issue date: 2004-03-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O presente trabalho objetivou estudar alguns aspectos relacionados à histologia e histoquímica da embriogênese somática em Carica papaya L. ‘Improved Sunrise Solo Line 72/12’. Embriões zigóticos imaturos resgatados a partir de frutos imaturos com 80 a 90 dias após a antese foram cultivados em meio MS meia-força, suplementado com 6% de sacarose, 100 mg L -1 de mio- inositol, 400 mg L -1 de L-glutamina, 2 mg L -1 de ácido diclorofenoxiacético e solidificado com 2,8 g L -1 de Phytagel ® . Para os estudos anatômicos, amostras de calos embriogênicos foram analisadas em microscópio óptico e submetidas à microscopia eletrônica de varredura. Para análise histoquímica foram utilizadas amostras de material fresco ou incluídas em historesina. A análise histológica de amostras, coletadas em vários períodos de cultivo, mostrou que a reação calogênica induzida teve início nas células do meristema fundamental, próximas aos cordões procambiais e embriogênese somática direta ocorrendo a partir das células protodérmicas e subepidérmicas, ao vigésimo dia de cultivo, especialmente na região meristemática do domo apical do embrião zigótico. As células embriogênicas foram caracterizadas por apresentarem núcleos volumosos, nucléolos proeminentes e citoplasma denso com poucos grãos de amido. Aos 45 dias de cultivo, visualizou-se a formação de inúmeros complexos proembriogênicos, com variável número de células, isolados das demais por paredes espessas, típicos de um processo de embriogênese somática indireta. Grande quantidade de grãos de amido foi visualizada nos estádios iniciais da calogênese, especialmente nas células periféricas. A reação positiva ao teste com Sudan detectou uma grande quantidade de lipídeos, evidenciando sua importância como material de reserva. Proteínas em forma de grânulos foram evidenciadas pelo teste XP (Xylidine Ponceau), especialmente nos cotilédones intactos dos embriões zigóticos cultivados. Os efeitos do precursor do etileno 1-aminociclopropano-1- carboxílico (ACC) e dois inibidores – aminoetoxivinilglicina (AVG) e tiossulfato de prata (STS) durante o processo de indução da embriogênese somática foram analisados. Neste experimento o meio indutor foi suplementado com essas substâncias, nas concentrações de 3, 10 e 30 ìM. A presença do ACC não inibiu a formação de calos e a aquisição de competência embriogênica. Contudo, nos maiores níveis testados, observou-se redução no número de embriões somáticos diferenciados por explante. Em presença de AVG na concentração de 3 ìM verificou-se resultados semelhantes ao tratamento controle em relação a formação de calos embriogênicos. Contudo nos níveis de 10 e 30 μM foram observados altos índices de explantes não responsivos, sugerindo possível toxidez desses níveis. Nos tratamentos com STS observou-se intensa proliferação de calos, porém com pouca diferenciação embriogênica. Em outro experimento, verificou-se os efeitos de pulsos de 2,4-D sobre a morfogênese in vitro em mamoeiro, tendo como objetivo inicial determinar o período de exposição necessário para aquisição de competência embriogênica. Foram testadas altas concentrações (10 e 100 mg L -1 ) em tempos reduzidos de 0, 1, 6, 12, 24, 36, 48, 72 horas e a exposição contínua. Em seguida, os explantes foram transferidos para o meio MS, destituído de reguladores de crescimento. Para cada concentração e períodos de exposição foram observadas respostas morfogênicas diferenciadas como rizogênese, calogênese e embriogênese somática. Melhores respostas embriogênicas foram observadas na concentração de 10 mg L -1 durante 72 horas e na concentração de 100 mg L -1 no pulso de 48 horas. / The present study was conducted to evaluate some aspects related to histological and histochemical aspects of somatic embryogenesis of C. papaya ‘Improved Sunrise Solo line 72/12’. Immature zygotic embryos derived from harvested fruits after 80-90d after anthesis were cultured onto a semi-solid half- strength MS-based medium supplemented with 6% sucrose, 100 mg L -1 myo- inositol, 400 mg L -1 L-glutamine, 2,4-D (2.0 mg L -1 ), and solidified with 2.8 g L -1 Phytagel, at pH 5.7 ± 0.1. For anatomical studies embryogenic calli samples were characterized under photonic and scanning electron microscopy. Histochemical analyses were carried out using both fresh and hystoresin embedded samples. Histological analyses carried out throughout several cultural periods, revealed that callusing responses initiated from fundamental meristem-derived cells, close to procambial strands, whereas direct somatic embryogenesis occurred from peripheric, protodermic and sub-epidermic cells, at 20 th d of culture, mainly from apical dome of the zygotic embryo. Embryogenic cells presented typical meristematic characteristics large nuclei, prominent vacuoles, densely cytoplasmic, and few starch grains. At 45 d of culture, several proembryogenic complexes with variable number of cells were visualized, isolated by thick cell-walls, typical of indirect somatic embryogenesis process. Large amounts of starch grains were detected at initial stages of callusing processes, especially in the periphery. Positive reactions with Sudan detected large amount of lipids, evidencing its importance as storage material. Protein granules were also evidenced by Xylidine Ponceau mainly in intact cotyledon of zygotic embryos. The effect of the ethylene precursor 1-aminocyclopropane-1-carboxylic (ACC) and two inhibitors – aminoethoxyvinylglyine (AVG) and silver thiosulfate (STS) during the induction process of somatic embryogenesis were analyzed. In this experiment the inductor medium was supplemented with these substances, in the concentrations of 3, 10 and 30 ìM. The presence of ACC did not inhibit the callusing responses and the acquisition of embryogenic competence. However, at higher tested levels, there was a significant decrease in number of somatic embryos per explant. In the presence of AVG in the concentration of 3 μM, similar results were verified as compared to the control treatment regarding to the formation of embryogenic calli. Therefore, in the levels of 10 and 30 ìM it was observed high percentage of explants without responses, suggesting possible toxicity in these levels. In the treatment with STS it was observed a high proliferation of callus although with few embryogenic differentiation. Another experiment it verified the effects of pulses of 2,4-D upon in vitro morphogenesis in papaya, having as initial goal determine the period of the exposition demanded for acquisition of embryogenic competence. The concentrations de 2,4-D (10 and 100 mg L -1 ) combined with pulsing times 0, 1, 6, 12, 24, 36, 48, 72 hours and the continuous exposition was evaluated. Following, the explants were transferred to the medium MS without growing regulators. For each concentration and exposition period it was observed morphogenic response differing as rhizogenesis, calogenesis and somatic embryogenesis. Better embryogenic response were observed in the concentration of 10 mg L -1 during 72 hours and in the concentration of 100 mg L -1 in the pulse of 48 hours. / Dissertação importada do Alexandria
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Detecção de streptococcus mutans e avaliação da expressão de marcadores teciduais em placas ateroscleróticas de pacientes com doença vascular e vasos sadios / Detection of streptococcus mutans and evaluation of the expression of tissue markers in atherosclerotic plaques of patients with vascular disease and healthy vessels

Fernandes, Clarissa Pessoa 06 March 2017 (has links)
FERNANDES, C. P. Detecção de streptococcus mutans e avaliação da expressão de marcadores teciduais em placas ateroscleróticas de pacientes com doença vascular e vasos sadios. 2017. 87 f. Tese (Doutorado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by PPGO UFC (ufcppgo@gmail.com) on 2017-05-31T13:53:05Z No. of bitstreams: 1 2017_tese_cpfernandes.pdf: 122721977 bytes, checksum: 90712aa0832a939ee513facf14adfa73 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-05-31T15:26:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_tese_cpfernandes.pdf: 122721977 bytes, checksum: 90712aa0832a939ee513facf14adfa73 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-31T15:26:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_tese_cpfernandes.pdf: 122721977 bytes, checksum: 90712aa0832a939ee513facf14adfa73 (MD5) Previous issue date: 2017-03-06 / Over the past few years, the association between oral bacteria and atherosclerosis has been investigated, and studies have suggested that cariogenic bacteria are directly and indirectly involved in the etiopathogenesis and progression of this disease. Streptococcus mutans (SM) has demonstrated the ability to invade and cause damage to endothelial cells, favor the adhesion of leukocytes in vascular endothelium and promote the transformation of macrophages into foam cells, events directly related to the development of atherosclerosis. This microorganism has been detected in atherosclerotic plaques with variable frequency, and laboratory studies have investigated its role in the activation of inflammatory and thrombogenic markers, which are indirectly associated with the pathogenesis of this disease. However, the pathogenic mechanism of atherosclerosis is not yet fully elucidated, and the role of oral bacteria needs to be extensively investigated. The present study aimed to evaluate the association between the presence of SM and tissue and inflammatory alterations in vessels with atherosclerosis. A total of 13 atherosclerotic plaques, collected from patients with carotid stenosis or aortic aneurysm, and 10 control samples of healthy blood vessels (aortic and carotid arteries) collected during necropsy procedure, were submitted to Real-time Polymerase Chain Reaction (qPCR), histopathological analysis, histochemical analysis by Giemsa staining (GS) and immunohistochemical analysis for SM, IL-1!, TNF-", CRP, osteopontin, fibrinogen and CD61 (Streptavidin-biotin-peroxidase method). All microscopically healthy control specimens were positive for SM only through qPCR, whereas atherosclerotic plaque specimens were positive for SM through qPCR and immunohistochemistry, and showed histopathological characteristics of severe atherosclerosis (100%). Presence of fibrous tissue (100.0%) and calcification (92.3%) were the most frequent features, followed by thrombus formation (84.6%), mononuclear inflammatory cells (76.9%) and presence of core lipid (61.5%). GC showed that streptococcus colonized areas of core lipid, fibrous tissue and calcification, and was not positive in vessels of the control group. All 13 atherosclerotic plaques, immunopositive for SM, were positive for the fibrinogen, IL-1!, osteopontin and CD61 antibodies, whereas immunoexpression for CRP and TNF-" was evidenced in 12 samples (92.3%). The reactivity to IL-1!, TNF-", osteopontin and CD61 was not found in the control samples, immunonegative to SM, but in some cases, immunoexpression of fibrinogen (60.0%) and PCR (50.0%) was observed. The detection of SM in atherosclerotic plaques, in addition to the visualization of Streptococcus in areas of tissue alteration, suggests that in these samples, microorganisms found a favorable 10 environment for their proliferation. In addition, positive immunoexpression of TNF-", IL-1!, fibrinogen, CRP, osteopontin and CD61 in atherosclerotic plaque samples immunopositive to SM may suggest a possible association with atherosclerosis. / Nos últimos anos, a relação entre bactérias orais e aterosclerose tem sido investigada, e estudos têm sugerido que bactérias cariogênicas participam direta e indiretamente da etiopatogênese e progressão dessa doença. Streptococcus mutans (SM) tem demonstrado a capacidade de invadir e causar dano às células endoteliais, favorecer a aderência de leucócitos no endotélio vascular e promover a transformação de macrófagos em células espumosas, eventos diretamente relacionados ao desenvolvimento da aterosclerose. Essa bactéria tem sido detectada em placas ateroscleróticas com variável frequência, e estudos laboratoriais têm pesquisado sua relação com a ativação de marcadores inflamatórios e trombogênicos, que são indiretamente associados à patogênese dessa doença. Porém, o mecanismo patogênico da aterosclerose ainda não está completamente elucidado, e o papel de bactérias orais precisa ser amplamente investigado. O presente estudo teve por objetivo avaliar a relação entre a presença de SM e alterações teciduais e inflamatórias em vasos com acometimento de aterosclerose. Um total de 13 placas ateroscleróticas, coletadas de pacientes com estenose de carótida ou aneurisma de aorta, e dez amostras-controle de vasos sadios (artérias carótida e aorta), coletadas durante procedimento de necropsia, foram submetidas a Reação em Cadeia da Polimerase em tempo real (qPCR), análise histopatológica, análise histoquímica por coloração de Giemsa (CG) e análise imuno-histoquímica para SM, IL-1!, TNF-", PCR, osteopontina, fibrinogênio e CD61 (método da estreptavidina-biotina-peroxidase). Todas as amostras-controle, microscopicamente sadias, foram positivas para SM apenas através de qPCR, enquanto que as amostras de placa aterosclerótica apresentaram positividade para SM através de qPCR e imuno-histoquímica, além de exibirem características histopatológicas de aterosclerose severa (100%). Presença de tecido fibroso (100,0%) e calcificação (92,3%) foram as características mais frequentes, seguidas de formação de trombo (84,6%), células inflamatórias mononucleares dispersas (76,9%) e presença de core lipídico (61,5%). A CG mostrou que os Estreptococcus colonizaram áreas de core lipídico, tecido fibroso e calcificação, não sendo positiva nos vasos do grupo controle. Todas as 13 amostras de placa aterosclerótica, imunopositivas para SM, foram positivas para os anticorpos fibrinogênio, IL- 1!, osteopontina e CD61, enquanto que imunoexpressão para PCR e TNF-" foi evidenciada em 12 amostras (92,3%). A reatividade para IL-1!, TNF-", osteopontina e CD61 não foi encontrada nas amostras-controle, imunonegativas para SM, porém, em algumas, observou-se imunomarcação para fibrinogênio (60,0%) e PCR (50,0%). A detecção de SM em placas ateroscleróticas, além da visualização de Estreptococcus em áreas de alteração tecidual, 8 sugere que nessas amostras, os micro-organismos encontraram ambiente favorável para sua proliferação. Além disso, imunoexpressão positiva de TNF-", IL-1!, fibrinogênio, PCR, osteopontina e CD61 em amostras de placa aterosclerótica imunopositivas para SM pode sugerir uma possível relação com a aterosclerose.
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A relevância do marcador imunohistoquímico CD30 e dos eosinófilos no diagnóstico diferencial das doenças inflamatórias intestinais / The relevance of immunohistochemical marker cd30 and eosinophils in differential diagnosis of inflammatory bowel disease

Flores, Cristina January 2013 (has links)
As doenças inflamatórias intestinais (DII) são doenças crônicas incapacitantes com significativa morbidade. A Doença de Crohn (DC) e a Retocolite Ulcerativa (RCU) são as maiores representantes. O diagnóstico é baseado na suspeita clínica e complementado por achados endoscópicos, histopatológicos e radiológicos. Como não existe um teste padrão, o diagnóstico destas doenças permanece sendo um problema para gastroenterologistas e patologistas. O desenvolvimento de terapias mais específicas torna cada vez mais importante o diagnóstico preciso para uma escolha terapêutica individualizada. A imunidade inata está ativada de forma semelhante nas duas DII, porém na RCU os linfócitos CD4 TH2 são os principais envolvidos. Estes linfócitos expressam o receptor CD30 na sua membrana plasmática e produzem citocinas que ativam os eosinófilos. Levando em consideração o conhecimento fisiopatológico atual, este estudo tem como principal objetivo avaliar a relevância da expressão do marcador CD30 por imuno-histoquímica, a contagem de eosinófilos e as características histopatológicas no diagnóstico diferencial das DII. Foram avaliados 185 pacientes de um ambulatório especializado em um Hospital Universitário (105 com DC 80 com RCU). O diagnóstico foi estabelecido pelos critérios de Lennard-Jones, revisados por um gastroenterologista especializado e corroborado por cinco anos de seguimento. As biópsias foram realizadas por diversos profissionais na rotina assistencial, porém todas foram analisadas por um patologista com experiência em tubo digestivo. Nenhum paciente estava usando tratamento no momento da coleta das biópsias. As variáveis histopatológicas que demonstraram poder estatístico para auxiliar no diagnóstico diferencial foram a extensão do processo inflamatório para a submucosa, a presença de granuloma, erosões aftóides e variabilidade de acometimento entre os fragmentos. Avaliando estas características em conjunto, foi possível obter uma acurácia de 69.1% para o diagnóstico diferencial entre DC e RCU. Estudando o segmento mais alterado encontrou-se uma mediana de eosinófilos de 42 (25,5 – 63,5), nos pacientes com DC e 107 (67 – 123) nos pacientes com RCU (p< 0.001). Assumindo como ponto de corte um número V a 70 eosinófilos, a sensibilidade foi de 78,3% e a especificidade de 71% favorecendo o diagnóstico de RCU, a área sob a curva ROC foi de 0,767 (IC 95%: 0,696–0,838). A imuno-histoquímica com CD30 demonstrou uma mediana de 3 células CD30+ (2-6) na DC e 33 (24-52) na RCU, demonstrando uma diferença estatística significativa para o diagnóstico diferencial entre as duas doenças (p<0,001). Além disso, nos pacientes com RCU as células CD30+ estavam distribuídas mais frequentemente em agrupamentos nos centros dos folículos linfoides. O ponto de corte determinado pela curva ROC foi de 15 células marcadas (S = 97,5%, E = 94,3%, RV + = 17,1; RV = 0.03, área sob a curva: 0.967, IC 95%: 0.941 - 0.993). Todos estes parâmetros estudados tiveram capacidade discriminatória para o diagnóstico de DC e RCU. Designando um valor para cada variável, baseado no poder estatístico de cada uma e de forma a obter uma soma de 10 pontos no total, foi construído um escore histopatológico para o diagnóstico da DC. Considerando-se a soma das variáveis V 5 obteve-se uma especificidade de 100% e uma sensibilidade de 86,8%. Considerando 4 como ponto de corte do escore, a sensibilidade aumenta para 95,3%, e a especificidade reduz de 100% para 94,9%. Concluindo, o uso rotineiro da avaliação das características histopatológicas descritas em associação com a contagem de eosinófilos e células CD30+ proporciona uma alta acurácia no diagnóstico diferencial entre DC e RCU. Todos os parâmetros estudados são de fácil avaliação tanto por patologistas especialistas quanto generalistas. Sugere-se a realização de um estudo prospectivo para validação deste escore. / Inflammatory bowel diseases (IBD) are chronic disabling diseases with significant morbidity, being Crohn’s disease (DC) and Ulcerative colitis (UC) their greatest representatives. Diagnosis is based on clinical suspicious and complemented by endoscopic, histopathological and radiological findings. However, there is not a gold standard test, so it remained a problem for gastroenterologists and pathologists. The development of more targeted therapies makes it even more important to establish an accurate diagnosis for a better individualized therapeutic approach. Innate immune response is activated in both IBD, but in UC the lymphocytes CD4 TH2-like are mainly engaged, this kind of lymphocytes has CD30 expressed in their plasma membrane and produces cytokines that activate eosinophils. Considering the current pathophysiological knowledge, this study aimed to evaluate the relevance of CD30 expression by immunohistochemical, eosinophil count and histopathological features in differential diagnosis of IBD. A total of 185 patients were evaluated (105 CD/ 80 UC). Patients were followed at a specialized clinic of a university hospital, diagnosed according to Lennard- Jones criteria reviewed by a gastroenterologist expert and corroborated by five years of follow up. Biopsy samples were taken by different professionals in routine care, but analyzed by an experienced gastrointestinal pathologist. None of the patients were using treatment at the time of biopsy. Of all the pathological variables assessed, those that had statistical capacity to assist in the differential diagnosis were extension of the inflammatory process to submucosa, granuloma, aphthous erosion and variability of involvement between fragments. Evaluating these variables together, an accuracy of 69.1% in the differential diagnosis between CD and UC was found. Assessing the most altered sample the median of eosinophils was 42 (25.5 – 63.5) in CD patients and 107 (67 – 123) in UC patients (p< 0.001). Assuming a cutoff V 70 eosinophils, the sensitivity was 78,3% and specificity of 71% favoring the UC diagnosis, the area under the ROC curve was 0.767 (CI 95%: 0,696–0,838). Immunohistochemical CD30+ cells presented with a median of 3 cells (2-6) in CD and 33 cells (24-52) in UC, demonstrating a highly significant statistical difference between the two diseases (p<0.001). Besides, CD30+ cells were distributed most clustered in the center of lymphoid follicles in UC patients. The cutoff determined by ROC curve was 15 (S = 97.5%, E = 94.3%, LR + = 17.1;-RV = 0.03, AUC: 0.967, 95% CI: 0.941 - 0.993). All these parameters studied had discriminatory capacity for diagnosis of CD and UC. A value was assigned to each variable based on the statistical power of each, making a total sum of 10 points to build a histopathological score for the CD diagnosis. Setting the cutoff as V 5 we found a specificity of 100% and a sensitivity of 86.8%. When we consider as cutoff as V 4 points the score sensitivity comes to 95.3%, and reduces the specificity of 100% to 94.9%. In conclusion, the use of routine assessment of the histopathological features described previously in association with the eosinophils and CD30+ cells count provides a high accuracy for CD and UC differential diagnosis. All parameters assessed here are easily performed by pathologists specialists and generalists. The next step seems to be the validation of this score in a prospective study.
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Doença de Jorge Lobo entre os índios Caiabi: epidemiologia. Análise histopatológica e imuno-histoquímica nas diferentes apresentações clínicas / Lobomycosis among the Caiabi Indians: epidemiology. Histopathological and immunohistochemical analysis in different clinical presentations

Floriano, Marcos César [UNIFESP] January 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:46:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014 / Introdução: A doença de Jorge Lobo (DJL) é infecção fúngica crônica de acometimento da pele e há uma prevalência inusitada entre os índios Caiabi, povo que habita a região central do Brasil. Objetivos: 1) Descrever e revisar a epidemiologia da DJL entre os índios Caiabi desde os primeiros relatos até o presente momento. 2) Avaliar e comparar os aspectos histopatológicos e a resposta imune tecidual nas diferentes lesões cutâneas de um mesmo doente, assim como nos nódulos de doentes com formas localizadas e disseminadas. Métodos: 1) Realizada revisão da literatura indexada, de livros e registros de todos os casos da DJL entre os índios Caiabi, desde os primeiros relatos até os dias de hoje. 2) Numa amostra de 24 índios Caiabi com DJL, foram realizados os exames histopatológicos e imunohistoquímicos com marcadores de respostas imunológicas em amostras de diferentes lesões cutâneas num mesmo doente e de nódulos de doentes com formas localizadas e disseminadas. Resultados: 1) O número total de casos da DJL entre os índios Caiabi, desde os primeiros relatos até o presente momento, é de 63. A forma localizada foi significantemente mais presente no sexo feminino e a forma disseminada significantemente mais presente no sexo masculino. 2) Nas diferentes lesões cutâneas (nódulo, úlcera e atrofia), os dados que apresentaram significância estatística (p<0,05) foram: maior presença de células CD68+, CD3+, CD54+ e maior número de fungos no nódulo que na atrofia; maior presença de células CD3+, CD8+, CD20+ e CD25+ na úlcera que na atrofia; maior presença de células CD25+ na úlcera que no nódulo; maior presença de células CD8+ nas formas localizadas que nas formas disseminadas. Discussão e Conclusões: 1) A DJL apresenta uma única e impressionante prevalência entre os índios Caiabi, além de um comportamento distinto entre os sexos, predominando formas disseminadas nos homens e localizadas nas mulheres. 2) A atrofia parece representar uma regressão da atividade da doença e a úlcera parece representar maior atividade imunológica de padrão Th1. Há maior expressão de linfócitos T CD8+ nas formas localizadas, sendo uma das possíveis diferenças de resposta imunológica do hospedeiro que justificam essa apresentação clínica em alguns doentes / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Expressão imuno-histoquímica de galectina-3 em lesões foliculares / Galectin-3 immunohistochemistry for follicular patterned thyroid lesions

Amadei, Marcelo João [UNIFESP] January 2006 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T23:47:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006 / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Análise das expressões imunohistoquímicas da p53, bcl-2 e ki-67 no adenocarcinoma colorretal e suas correlações com os fatores prognósticos / Analysis of the immunohistochemical expressions of p53, bcl-2 and Ki-67 in colorectal adenocarcinoma and their correlations with the prognostic factors

Menezes, Hunaldo Lima de [UNIFESP] 29 April 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-04-29. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:25:24Z : No. of bitstreams: 1 Publico-00205.pdf: 1087268 bytes, checksum: 8ae7e5f6bdd855e97595278010953ec4 (MD5) / Objetivo: Analisar as expressoes imunohistoquimicas das proteinas p53, bcl-2 e Ki-67 no adenocarcinoma colorretal, correlacionando-as com os fatores prognosticos clinico-patologicos. Metodo: Foram confeccionados blocos de parafina de TMA com tecido de adenocarcinoma colorretal ressecados cirurgicamente em 82 pacientes no Hospital Sao Paulo da UNIFESP/EPM, de 2002 a 2005, nao submetidos a radio ou quimioterapia. Cortes de 4 ƒÊm foram submetidos a reacao imunohistoquimica e obtidos escores de intensidade das imunoexpressoes, que foram correlacionados com o grau de diferenciacao celular, estadiamento, tempo livre de doenca, recidiva, sobrevida e mortalidade especifica entre si e com os dados de sobrevida dos pacientes. As variaveis do estudo foram analisadas pelos testes do qui-quadrado e de Kaplan-Meier para verificar as associacoes com os marcadores. A significancia das diferencas entre as curvas do tempo livre de doenca e da sobrevida foi analisada pelos testes de Logrank e Wilcoxon. Resultados: A expressao imunohistoquimica da p53 foi positiva em 70 tumores (85,4%) e negativa em 12 (14,6%). A bcl-2 foi positiva em 26 tumores (31,7%) e negativa em 56 (68,3%). A expressao imunohistoquimica da Ki-67 foi positiva em 62 tumores (75,6%), sendo em 20 (24,4%) negativa. Nao houve correlacao estatisticamente significante entre as expressoes imunohistoquimicas dos marcadores analisadas separadamente ou em conjunto, envolvendo o grau de diferenciacao celular, estadiamento, tempo livre de doenca, sobrevida e mortalidade especifica. Com relacao a recidiva, observou-se uma correlacao estatisticamente significante com a expressao imunohistoquimica positiva da Ki-67 (p= 0,035). Conclusao: A expressao imunohistoquimica positiva da Ki-67 no cancer colorretal esta relacionada com a incidencia de recidiva da doenca. / Purpose: To analyse the immunohistochemical expressions of the proteins p53, bcl-2 e Ki-67 in colorectal adenocarcinoma and correlate it with the clinical pathological prognostic factors. Methods: A TMA paraffin block was constructed with colorectal carcinoma tissue of 82 patients who had undergone surgery in the Hospital Sao Paulo-UNIFESP, from 2002 to 2005, submitted neither to chemo or radiotherapy. Four ìm sections from the was submitted to immunohistochemistry and immunoexpression staining scores were obtained, than was correlated with the degree of cellular differential, stage, relapse-free survival, relapse, survival and specific mortality. The variables of the study were analyzed by tests of the qui-square and Kaplan-Meyer to verify the markers association. The significance of the differences between the curves of relapse-free survival and of the overall survival was analyzed by tests of lgrank and Wilcoxon. Results: The immunohistochemical expression of the p53 was found to be positive in 70 tumours (85,4%) and negative in 12 (14,6%). The bcl-2 was found to be positive in 26 (31,7%) and negative in 56 (68,3%). The immunohistochemical expression of the ki-67 was found to be positive in 62 (75,6%) and negative in 20 (24,4 %). There was no correlation statistically significant between the markers expressions separately and in conjunction, involving the degree of cellular differentiation, stage, relapse-free survival, survival and specific mortality. With respect the relapse, there was a correlation statistically significant with the positive expression of the ki-67 (p53=0,035). Conclusion: The immunohistochemical expression of the Ki-67 in colorectal cancer is related to the incidence of the relapse of the disease. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Imunoexpressão da proteína galectina-3 no câncer colorretal e sua relação com sobrevida / Immunoexpression of Galectin-3 Protein in Colorectal Cancer and its Relationship with Survival

Povegliano, Luciana Zaia Della Negra [UNIFESP] 30 April 2008 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-04-30. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:25:50Z : No. of bitstreams: 1 Publico-10919.pdf: 1330138 bytes, checksum: 230069b0ccbd38939c50df79ada51f8e (MD5) / Introdução: O câncer colorretal é um dos tumores mais comuns no mundo atual. A sobrevida e o tempo livre de doença estão sendo cada vez maiores graças ao surgimento de novas drogas quimioterápicas. Marcadores teciduais de prognóstico poderão contribuir para o melhor tratamento desta doença. As galectinas são proteínas pertencentes à família das lecitinas, que se ligam a galactoses, contendo glicoconjugados através de sua afinidade por -galactosídeo. Sua distribuição em tecidos sugere que têm função importante nos processos fisiológicos, como diferenciação celular, adesão celular, regulação do crescimento celular, e inibição ou indução da apoptose. A galectina-3, já estudada no câncer de tiróide, parece também ter um papel importante no câncer colorretal. Objetivos: Avaliar a imunoexpressão tissular da proteína galectina-3 em pacientes com câncer colorretal submetidos à ressecção cirúrgica e tratamento quimioterápico adjuvante ou paliativo e correlacionar a expressão tissular desta proteína com aspectos clínicos e de evolução da doença. Casuística e Método: Estudamos a imunoexpressão citoplasmática da galectina-3 em setenta e cinco adenocarcinomas colorretais. Os tumores foram classificados quanto à coloração citoplasmática em 1 (menos que 50% de células coradas) ou 2 (50% de células coradas). A positividade citoplasmática deste marcador foi comparada aos parâmetros clínicos e de evolução. Resultados: Entre os pacientes, 40 eram do sexo feminino, a média de idade foi de 61.98 anos (variando de 29 a 86 anos). Quanto à localização do tumor, 42,6% eram de reto, 24% de cólon esquerdo e 33,4% de cólon direito. Em relação ao estádio clínico, 33 eram estádio II, 32 estádio III e 10 estádio IV. A imunoexpressão da proteína galectina-3 foi classificada como 1 em 57,33% dos tumores e 2 em 42,67%. Quanto maior o estádio clínico, maior o percentual de células tumorais coradas (escore 2 em 60% dos tumores IV, 40,63% nos tumores estádio III e 39,39% nos estádios II, sendo p=0,4899). Em relação à sobrevida, pacientes com tumores com imunoexpressão 1 da galectina-3 mostraram uma maior sobrevida (65,96% dos doentes vivos sem doença com galectina-3 coloração 1 e 34,04% coloração 2). Em contrapartida entre os pacientes que evoluíram com metástase ou recorrência 52,63% apresentaram positividade das células com coloração 1 e 47,37% coloração 2 (p=0.0465). Nos pacientes que faleceram pela doença, 77,8% apresentaram imunoexpressão da galectina-3 moderada a fortemente coradas. Conclusão: Pacientes com imunoexpressão forte ou moderada da proteína galectina-3 (classificação 2) em maiores proporções faleceram ou evoluíram com recorrência. Observou-se redução marginalmente significante no risco de morte entre os pacientes com galectina-3 fraca ou nula (classificação 1) quando comparado com tumores de pacientes com galectina-3 forte ou moderada. O estudo da imunoexpressão citoplasmática da proteína galectina-3 parece ser um fator prognóstico nos tumores colorretais. / Backgrounds: Colorectal cancer is one of most common tumors nowadays. The survival and the disease-free survival are enhanced because of new chemotherapy drugs. Tumor biological markers will contribute for a better treatment. Galectin-3 is an endogenous galactose-binding protein that is expressed in a wide range of normal and neoplastic tissues and is thought to be involved in cellular adhesion, growth regulation and apoptosis. Galectin-3 is already studied in thyroid cancer, and seems to have an important role in colorectal cancer. Objective: Evaluate the immunoexpression of galectin-3 protein in patients with colorectal cancer under surgery and resection of the tumor and chemotherapy treatment and the relationship of galectin-3 expression and tumor evolution and clinical aspects. Methods: We studied the expression of galectin-3 in 75 colorectal tissues. An immunohistochemical scoring system was used to evaluate the cytoplasmic cells color. We divided the tumor’s cells in two groups: group 1, absent or weak (less than 50% staining cells) and group 2 strong or moderate ( 50% staining cells). Results: Among the 75 patients, 40 were female; the average age was 61.98 years old (from 29 to 86 years old). According to the site, 42.6% was of rectum, 33.4% right colon and 24% left colon. 33 tumors were stage II, 32 stage III and 10 stage IV. Galectin-3 immunoexpression was classified as 1 in 57.33% of tumors. The highest stage appears in the most staining cells (score 2 in 60% of tumors IV, 40.63% in tumors stage III and 39.39% in stage II, p=0.4899). In addition, galectin-3 immunoexpression group 1 showed higher survival (65.96% of no disease patient with galectin-3 group 1 and 34.04% group 2). On the other hand, in the group of patients with metastatic disease the results were 52.63% in group 1 and 47.37% in group 2 (p=0.0465). Conclusion: The imunoexpression of galectin-3 was strong or moderate in 42% of the colorectal tumors. Correlation among sex, age, stage, site or metastases and galectin-3 were not observed. Patients with strong or moderate imunoexpression of the protein in higher proportions died or had recurrence more frequently. The risk of death was marginally reduced in patients with negative or low grade galectin-3. Galectin-3 citoplasmatic immunoexpression seems to be a prognostic factor in colorectal cancer. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

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