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Estudo do remodelamento da lâmina própria da laringe relacionado ao processo de senilidade

Branco, Anete Antunes de Oliveira [UNESP] 15 May 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-05-15Bitstream added on 2015-05-14T16:59:04Z : No. of bitstreams: 1 000828904.pdf: 591447 bytes, checksum: 7b4c470ca585df033c921b121b9ea655 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Objetivo: estudar o remodelamento dos colágenos dos tipos I, III, IV e V, da elastina, da fibronectina, da laminina e do ácido hialurônico, no processo de senilidade da laringe humana por meio de estudo imuno-histquímico. Casuística e Métodos: foram utilizadas 30 pregas vocais humanas masculinas removidas durante a rotina de necrópsia do Departamento de Patologia da Faculdade de Medicina de Botucatu/UNESP, sendo 20 laringes de idosos (n-10; 60-75 anos e n-10; acima de 75 anos) e 10 de adultos controles (de 30 a 50 anos). Os fragmentos das pregas vocais receberam as reações imuno-histoquímicas para os colágenos I, III, IV e V, elastina, fibronectina, laminina e ácido hialurônico. As leituras das lâminas foram realizadas quantificando-se o grau de acúmulo de coloração acastanhada das estruturas da lâmina própria e da membrana basal, sendo a área padronizada em μm2 e o resultado dado em porcentagem de área pelo software ImageJ. Resultados: houve aumento da imunoexpressão dos colágenos I e III nas laringes dos idosos (p<0.05). Os valores registrados do colágeno I na camada superficial nas três faixas etárias foram respectivamente, 34,2%, 39,6% e 40,4%; na camada profunda, 31,8%, 44,4% e 46,9%. Os valores do colágeno III na camada superficial nas três faixas etárias foram respectivamente, 25,6%, 31,2% e 32,4%; na camada profunda, 23,6%, 24,6% e 29,9%. Para os colágenos IV e V, observou-se maior intensidade de marcação desses anticorpos no endotélio dos vasos da camada superficial da lâmina própria e na membrana basal com discreta variação entre os grupos sem diferença estatística. Os valores registrados do colágeno IV na camada superficial nas três faixas etárias foram respectivamente, 20,9%, 20,7% e 21,3%; na camada profunda, 17,6%, 19,3% e 20,4%. Os valores do colágeno V na camada superficial nas três faixas etárias foram respectivamente, 38,5%, 36,2% e 31,8%; na camada profunda ... / Objective: to study the remodeling of collagen types I, III, IV and V, elastin, fibronectin, laminin and hyaluronic acid using immunohistochemical techniques during the aging process of human larynx. Casuistic and Methods: thirty male human vocal folds were removed during routine autopsy in the Department of Pathology at Botucatu Medical School/UNESP, of these, twenty elderly men (n-10; 60-75 years and n-10, over 75 years) and 10 adult male (30-50 years). The fragments of vocal folds received the immunohistochemical techniques for collagens types I, III, IV and V, elastin, fibronectin, laminin and hyaluronic acid. The readings of the lamina propria were carried out taking into account the accumulation of brownish color of its structures as well as basal membrane, given the standard area in μm2 and the result in percentage of area by the ImageJ software. Results: there was an increase of immunoexpression of collagen types I and III in the larynxes of the elderly (p≤0.05). The values registered in the collagen type I on the superficial layer of the three age groups were respectively, 34.2%, 39.6% and 40.4%, whereas 31.8%, 44.4% and 46.9% in the deep layer. The values of the collagen type III in the superficial layer of the three age groups were respectively, 25.6%, 31.2% and 32.4%; while in the deep layer the values were 23.6%, 24.6% and 29.9%. For the collagen types IV and V, a higher intensity in the immunoexpression of these antibodies in the vascular endothelium of the superficial layer as well as the basal membrane was observed. The registered values for collagen type IV in the superficial layer in the three age groups were respectively 20.9%, 20.7% and 21.3% as well as 17.6%, 19.3% and 20.4% in the deep layer. The values of collagen type V in the superficial layer in the three age groups were respectively 38.5%, 36.2% and 31.8%; and in the deep layer, 36.6%, 35% and 31.3%. There was an increase of immunoexpression of fibronectin ...
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Reparo ósseo dedefeitos de tamanho crítico tratados com aspirado de medula óssea associado ou não a terapia com laser em baixa intensidade: estudo imunoistoquímico em calvárias de ratos

Santinoni, Carolina dos Santos [UNESP] 25 February 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-25. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:48:58Z : No. of bitstreams: 1 000829034_20200101.pdf: 115188 bytes, checksum: 993739add14e4ef7cc01bd607d99e86d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este estudo imunoistoquímico avaliou a influência do aspirado de medula óssea (AMO) associado ou não à terapia com laser em baixa intensidade (LLLT) no processo de reparo de defeitos de tamanho crítico (DTC), criados cirurgicamente em calvárias de ratos. 64 ratos foram aleatoriamente distribuídos em 4 grupos: C (controle), AMO, LLLT e AMO/LLLT. Um DTC de 5 mm de diâmetro foi criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o defeito foi preenchido com coágulo sanguíneo somente. No Grupo AMO, o defeito preenchido com AMO. Nos grupos LLLT e AMO/LLLT, o defeito recebeu irradiação com laser (InGaAlP laser), foi preenchido com coágulo sanguíneo ou AMO, respectivamente, e irradiado novamente. Os animais foram submetidos à eutanásia aos 15 e 30 dias pós-operatórios. Foram realizadas reações imunoistoquímicas para detecção do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA), fator de transcrição relacionado à Runt (Runx2), proteína óssea morfogenética-2 (BMP-2), osteopontina (OPN) e osteocalcina (OCN). Um método semi-quantitativo foi usado para avaliar a imunomarcação para VEGF. As células PCNA-positivas, Runx2-positivas, BMP-2-positivas, OPN-positivas e OCN-positivas foram quantificadas. Os dados obtidos foram analisados estatisticamente. Aos 15 dias pós-operatórios, o Grupo LLLT apresentou números de células OPN-positivas e OCN-positivas significativamente maiores que o Grupo C; o Grupo AMO apresentou números de células PCNA-positivas, Runx2-positivas, BMP-2-positivas e OPN-positivas significativamente maiores do que os grupos C e LLLT, além de número de células OCN-positivas significativamente maior que o controle; o Grupo AMO/LLLT apresentou imunomarcação para VEGF e números de células Runx2-positivas, OPN-positivas e OCN-positivas... / This immunohistochemical study evaluated the influence of bone marrow aspirate (BMA) combined or not with low-level laser therapy (LLLT) on bone healing in surgically created critical-size defects (CSDs) in rat calvaria. 64 rats were randomly divided into 4 groups: C (control), BMA, LLLT and BMA/LLLT. A 5 mm diameter CSD was created in the calvarium of each animal. In Group C, the defect was filled by blood clot only. In Group BMA, the defect was filled with BMA. In groups LLLT and BMA/LLLT, the defect received laser irradiation (InGaAlP laser), was filled with blood clot or BMA respectively, and irradiated again. Animals were euthanized at either 15 or 30 days postoperative. Vascular endothelial growth factor (VEGF), proliferating cell nuclear antigen (PCNA), runt-related transcription factor-2 (Runx2), bone morphogenetic protein-2 (BMP-2), osteocalcin (OCN) and osteopontin (OPN) immunohistochemical staining were performed. A semi-quantitative method was used to evaluate VEGF immunolabeling. PCNA-positive, Runx2-positive, BMP-2-positive, OPN-positive and OCN-positive cells were quantified. Data were statistically analyzed. At 15 days postoperative, Group LLLT presented a significantly higher number of OPN-positive and OCN-positive cells than Group C; Group BMA presented a significantly higher number of PCNA-positive, Runx2-positive, BMP-2-positive and OPN-positive cells than groups C and LLLT, and a significantly higher number of OCN-positive cells than control; Group BMA/LLLT presented significantly higher VEGF immunolabeling and number of Runx2-positive, OPN-positive and OCN-positive cells than Group C. At 30 days postoperative, Group LLLT presented significantly higher VEGF immunolabeling and number of OPN-positive and OCN-positive cells than Group C; Group BMA presented a higher number of Runx2-positive, BMP-2-positive and OCN-positive cells than Group C; Group BMA/LLLT presented... / FAPESP: 12/15138-5
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Caracterização imuno-histoquímica de células do infiltrado inflamatório e de citocinas pró e anti-inflamatórias nos carcinomas mamários caninos

Garrido, Eduardo [UNESP] 10 April 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-04-10. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:46:17Z : No. of bitstreams: 1 000845406.pdf: 1146282 bytes, checksum: 60f04846ef59edc815960a1c18e29bf7 (MD5) / A inflamação é um componente crítico para a progressão de tumores e sua malignidade está correlacionada com a resposta inflamatória induzida por citocinas e leucócitos infiltrados no sítio tumoral. O presente estudo teve por objetivo caracterizar, por imuno-histoquímica, o infiltrado inflamatório e citocinas pró e anti-inflamatórias nos carcinomas mamários caninos e determinar a identidade molecular dos tumores em luminal A ou B, C-erbb-2 ou basal. Para isso fez-se a imunodetecção de macrófagos, linfócitos (CD4, CD8, Treg), citocinas (MIF, IL-10, IL-4 e TGF-β e IFN-ɣ), além de C-erbb-2, receptor de estrógeno e receptor de progesterona e avaliou-se as médias das imunomarcações por meio do Teste T e análise de variância nos tecidos mamários com ou sem carcinomas. Houve diferença estatística (p<0,0001) entre o grupo controle e o grupo de animais com carcinoma mamário simples em todos os parâmetros avaliados, apresentando aumento nas médias de animais acometidos por neoplasias. Quando ocorreu a divisão por tipo histológico, todos os anticorpos apresentaram diferença com o grupo controle (p<0,0001). Os carcinomas mamários simples (tubulares e papilares) apresentaram aumento na contagem de macrófagos, linfócitos T, linfócitos T auxiliares, T regulatórios, assim como, aumento na imunomarcação das citocinas MIF, IL-10, IL-4 e TGF-β em comparação ao grupo controle. Os carcinomas mamários sólidos tiveram menor detecção de macrófagos e das subpopulações de linfócitos T, bem como de IFN-ɣ, IL-4 e TGF-β, possivelmente por um menor estímulo do sistema imune como mecanismo de evasão. Os macrófagos e linfócitos T CD4, bem como a citocina IL-10 foram predominantes no padrão tubular. Os carcinomas mamários caninos apresentam um perfil celular e de citocinas com ação pró-tumor, favorecendo seu crescimento e metástase. Na identificação molecular os tumores basais apresentaram menor... / Inflammation is a critical component of tumor progression and its malignancy is correlated with the inflammatory response induced by cytokines and infiltrating leukocytes in the tumor site. This study aimed to characterize, by immunohistochemistry, the inflammatory infiltrate and pro- and anti-inflammatory cytokines in canine mammary carcinomas and determine the molecular identity of tumors in luminal A or B, C-erbB-2 or basal. For this, we made immunodetection of macrophages, lymphocytes (CD4, CD8, Treg), cytokines (MIF, IL-10, IL-4 and TGF-β and IFN-ɣ), further on c-erbB-2, estrogen receptor and progesterone receptor and evaluated the average of immunostainings through the T test and analysis of variance in the breast tissue with or without carcinomas. There was statistical difference (p <0.0001) between the control group and the group of animals with simple breast carcinoma in all parameters, an increase in average animal affected by cancer. When the split occurred by histological type, all antibodies showed differences with the control group (p <0.0001). Simple breast carcinoma (papillary and tubular) showed increased macrophage counts, T lymphocytes, T helper lymphocytes, regulatory T as well as increase in the immunostaining of the cytokines MIF, IL-10, IL-4 and TGF-β compared to control group. The solid breast carcinomas have had a decreased of macrophages and subsets of T lymphocytes and IFN-ɣ, IL-4 and TGF-β, possibly for less stimulation of the immune system as evasion mechanism. The macrophages and T CD4 + lymphocytes and IL-10 cytokine were prevalent in the tubular pattern. The canine mammary carcinomas have a cell profile and cytokines with pro-tumor action, favoring their growth and ...
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Avaliação do desempenho de colírio usando soro alogênico e fatores de crescimento derivados de plaquetas em cultura de células do anel córneo-escleral

Martins, Juliana Ravelli Baldassarre [UNESP] 28 February 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-28Bitstream added on 2014-11-10T11:57:31Z : No. of bitstreams: 1 000786133.pdf: 2473732 bytes, checksum: 2718404dbc454aa4d3963273c33b3ecc (MD5) / Introdução: Muitas patologias podem acometer a córnea, entre elas a síndrome do olho seco e as doenças relacionadas. Tratamentos inovadores para a síndrome do olho seco têm surgido, entre eles, o uso de colírio produzido com soro autólogo de uso ocular, soro de sangue de cordão umbilical, meio condicionado obtido pela expansão de células tronco do epitélio limbal (modelo ex vivo), entre outros. Pacientes com provável indicação do colírio de soro autólogo podem ter a contra-indicação na produção oriunda do status imune para doenças virais como HIV, hepatites B e C, sífilis, doença de Chagas e HTLV I e II, que do ponto de vista de produção do autocolírio, encontram barreiras. Para estes casos, o colírio de soro alogênico, oriundo de doadores saudáveis, é uma alternativa viável. Objetivos: Analisar o efeito in vitro da ação de colírio alogênico em cultura de células da região córneo-escleral, estabelecer a cultura e expansão de células aderentes obtidas da região córneo-escleral, comparar a cultura das células aderentes em meio de cultura contendo colírio e fatores de crescimento derivados de plaquetas, avaliar as células por meio da técnica de imunohistoquímica e analisar os dados médicos dos pacientes que utilizam autocolírio por meio de prontuários. Casuística e Métodos: Os anéis córneo-esclerais foram obtidos no centro cirúrgico após cirurgia de doação de córnea, sendo que estes anéis são materiais de descarte após a cirurgia. Em seguida, o tecido foi encaminhado ao Laboratório de Engenharia Celular do Hemocentro de Botucatu, onde foi fragmentado em pequenas partes e digerido com colagenase tipo I. As células foram plaqueadas em frascos de 25 cm² com meio DMEM Knockout, em uma primeira parte do experimento, e em meio Keratinocyte na segunda parte do trabalho. Após confluência de 80%, as células passaram pelo processo de tripsinização para desprendimento ... / Introduction: Many diseases can affect cornea, including dry eye syndrome and related diseases. Innovative treatments for dry eye syndrome have emerged , among them the use of autologous serum eye drops produced with the use of eye serum, umbilical cord blood, conditioned medium obtained by expansion of limbal epithelial stem cells (ex vivo model) among others. Patients with probable indication of autologous serum eyedrops may be contraindicated in production originating immune status for viral diseases such as HIV, hepatitis B and C, syphilis , Chagas disease and HTLV I and II, from the point of view of eye drops´s production, have barriers . For these cases, eye drops from healthy donors allogeneic serum can be an alternative. Objectives: Evaluate in vitro effect of the action of allogeneic eye drops in corneal-scleral cell culture, established the culture and expansion of adherent cells obtained from the corneal- scleral region, compare the culture of adherent cells in culture medium containing eye drops and platelets derived growth factors, evaluating the cells by immunohistochemistry and analyze medical data of eye drops´s patients. Materials and Methods: The corneal- scleral rings were obtained in the operating room after surgery of tissue donor, and these rings were discarded after surgery. Then, tissue was sent to the Laboratory of Cell Engineering of Botucatu Blood Center, which was fragmented into small pieces and digested with collagenase type I. Cells were plated in 25 cm² flasks with DMEM Knockout in the first part of the experiment, and Keratinocyte in the second part of the experiment. After 80% confluence, cells passed through the trypsinization procedure for detachment of the cells from the culture flask. Mounting plaque experiment, cells were placed to control, or untreated cells, treated cells with eye drops and cells treated with platelets derived growth factors was performed. After 5 days, immunohistochemistry ...
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Imuno-histoquímica e análise filogenética de pneumocystis sp. e detecção imuno-histoquímica de circovírus suíno tipo 2 em pulmões de javalis (Sus scrofa)

Borba, Mauro Riegert January 2009 (has links)
Pneumocystis é um importante patógeno oportunista que pode causar um quadro de pneumonia intersticial fatal em animais infectados por alguma doença imunodepressora. Pneumocystis sp. tem sido identificado em suínos domésticos e selvagens coinfectados com o circovírus suíno tipo 2 (PCV2) que desenvolvem a síndrome multissistêmica do definhamento dos suínos (SMDS). O presente trabalho analisou 78 javalis (Sus scrofa) com histórico de SMDS procedentes de 6 diferentes propriedades com sistema de confinamento intensivo no Rio Grande do Sul no período de março de 2006 a junho de 2008. Amostras de tecido pulmonar de seis javalis que não desenvolveram clinicamente a SMDS, assim como, amostras de suínos procedentes de abatedouros dos Estados do Rio Grande do Sul e Mato Grosso foram incluídas nas análises molecular e filogenética do trabalho. O teste de imunohistoquímica (IHQ) para a detecção de Pneumocystis sp. foi positivo em 50% dos pulmões analisados. A IHQ para a detecção de PCV2 foi positiva em 37% dos animais, sendo que o linfonodo mesentérico foi o órgão que apresentou maior grau de marcação positiva. Coinfecção entre Pneumocystis sp. e PCV2 foi confirmada pela IHQ em 20,5% dos javalis. O teste de nested-PCR dos genes mtLSU rRNA e mtSSU rRNA identificou a presença de material genético de Pneumocystis sp. em pulmões de javalis que desenvolveram a SMDS e em pulmões de javalis que não apresentaram clinicamente a doença, sugerindo que somente a presença de Pneumocystis sp. não se caracteriza como causa suficiente para o desenvolvimento de pneumonia intersticial. Identificou-se pela análise filogenética que javalis e suínos no Brasil são afetados pela mesma espécie de Pneumocystis sp. e que esta subdividese em dois grupos distintos. / Pneumocystis is an important opportunistic pathogen that may cause lethal interstitial pneumonia in infected animals due to some immunosuppressive disease. Pneumocystis sp. has been found in domestic and feral swine co infected with porcine circovirus type 2 (PCV2) that developed the postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS). This study analyzed 78 wild boars (Sus scrofa) with PMWS background from 6 different farms with intensive confinement system in Rio Grande do Sul from March 2006 to June 2008. The lung tissue samples of six wild boars that did not develop PMWS, as well as the swine samples from slaughterhouses in Rio Grande do Sul and Mato Grosso were included in the molecular and phylogenetic analyses of this study. The immunohistochemistry test (IHC) for detection of Pneumocystis sp. was positive in 50% of the analyzed lungs. The IHC for PCV2 detection was positive in 37% of the animals and the mesenteric lymph node was the organ with the highest degree of positive staining. Co infection in Pneumocystis sp. and PCV2 was confirmed by IHC in 20.5% of wild boars. The nested-PCR test of the mtLSU rRNA and mtSSU rRNA genes identified the presence of genetic material of Pneumocystis sp. in lungs of wild boars that developed the PWMS and in wild boars that did not presented clinical disease, which may mean that only the presence of Pneumocystis sp. was not characterized as sufficient cause to interstitial pneumonia development. Through phylogenetic analysis it has been identified that wild boars and swine in Brazil are affected by the same specie of Pneumocystis sp. and its subdivision in two different groups.
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Infecção experimental de gatas gestantes com cistos teciduais de toxoplasma gondii de diferentes genótipos

Sakamoto, Cláudio Alessandro Massamitsu [UNESP] 06 July 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-07-06Bitstream added on 2014-06-13T20:56:07Z : No. of bitstreams: 1 sakamoto_cam_me_araca.pdf: 208426 bytes, checksum: 3281fa8d04c8778ba11645850210ba58 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Doze gatas, sorologicamente negativas para Toxoplasma gondii, foram distribuídas em três grupos de quatro animais cada. Os animais dos grupos 1 e 2 foram infectados com cistos teciduais de T. gondii, por via oral, no terço médio de gestação, sendo: grupo 1 - isolado tipo I altamente virulento para camundongos; grupo 2 - isolado tipo III não virulento para camundongos; e grupo 3 – gatas controle não infectadas. Antes da infecção e durante todo o período experimental foram efetuadas avaliações clínicas. Amostras sangüíneas foram colhidas nos dias 0 (antes da inoculação), 15 e 30 dias pós-infecão para a realização de hemogramas e pesquisa de anticorpos contra T. gondii pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI 16). A infecção com o isolado de T. gondii virulento (tipo I) ocasionou diarréia, vômito, secreções ocular e vaginal e aborto de uma cria. Nas gatas inoculadas com o isolado tipo III não patogênico, foram observados diarréia, vômito, hiporexia, secreções nasal e ocular purulentas e um parto prematuro com natimortos. Todas as oito gatas infectadas com cistos teciduais de T. gondii apresentaram anticorpos contra T. gondii pela RIFI. Em dois filhotes da mesma ninhada, pertencentes ao grupo 1, foram detectados títulos de 16 e 64 aos 10 dias de vida. No grupo 2, títulos de 16, 32 e 32 foram detectados em três filhotes da mesma ninhada. Os resultados deste estudo demonstram que cistos teciduais de T. gondii de genótipos dos tipos I e III (pelo marcador SAG 2) provocaram transtornos reprodutivos semelhantes em gatas gestantes primoinfectadas. / Twelve pregnant queens, serologically negative to Toxoplasma gondii, were distributed into three groups of four animals each. Animals were infected orally with tissue cysts of T. gondii, in the meddle third of their pregnancies as follows: group 1– was infected with isolate type I highly virulent for mice; group 2 – was infected with isolate type III not virulent for mice; group 3 - no infected control queens. Clinical profiles of the animals were determined before infection and during the whole experimental period. Blood samples of the queens were taken in the following days: 0 (before the inoculation), 15 and 30 days pos infection for blood count and for the antibodies detection against T. gondii by the indirect immunofluorescent antibody test (IFAT 16). Virulent T. gondii (type I) infection caused vomiting, diarrhea, purulent eye secretion, haemorrhagic vaginal secretion and abortion of one pregnancy. Queens infected with non pathogenic type III isolate developed diarrhea, emesis, hyporexia, purulent nose and ocular secretions and one premature stillbirth. In all eight infected queens with tissue cysts T. gondii antibody were detectable by IFAT. In two kittens of the same litter, from group 1, had been detected titers of 16 and 64 at 10 days of age. In group 2, titers of 16, 32 and 32 were detected in 3 kittens of the same litter. Infection with tissue cysts of types I and III (SAG 2 marker) of T. gondii isolates developed similar clinical and reproductive disturbance in primary infected pregnant queens.
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Avaliação histológica e imuno-histoquímica do subcutâneo e do alvéolo dentário de ratos com implantes de cimento Portland, MTA e MTA experimental

Viola, Naiana Viana [UNESP] 30 March 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-03-30Bitstream added on 2014-06-13T19:56:31Z : No. of bitstreams: 1 viola_nv_me_arafo.pdf: 6001805 bytes, checksum: 85bd745ed54e4b900bf80a4029faef23 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Atualmente, dentre os materiais retrobturadores, destaca-se o Mineral Trióxido Agregado (MTA) e seus derivados. Devidos as suas boas propriedades biológicas e a necessidade de um cimento endodôntico mais próximo do ideal, modificações têm sido propostas ao MTA na tentativa de se obter um material obturador de canal radicular. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar a resposta biológica dos materias Portland, MTA e um material experimental à base de MTA (CE-MTA), no tecido subcutâneo e alvéolo dentário de ratos. Foram utilizados 80 ratos, divididos em 4 grupos: 1-Cimento Portland (CP); 2-MTA (Angelus); 3- CE-MTA e 4-Controle (tubo de polietileno vazio). Em cada animal, foram implantados dois tubos de polietileno, preenchidos ou não com material, no alvéolo dentário e no subcutâneo da região dorsal. Decorrido os períodos de 7, 14, 30 e 60 dias, os implantes juntamente com os tecidos adjacentes foram removidos, fixados e processados para inclusão em parafina. Os cortes do subcutâneo e do alvélo dentário contendo os implantes corados com H&E, foram utilizados para análise morfológica e quantificação de células inflamatórias; alguns cortes foram submetidos a imuno-histoquímica para detecção de osteopontina (OPN) e osteocalcina (OCN) presentes durante a formação dos tecidos mineralizados. Cortes do subcutâneo contendo os implantes foram submetidos ao método de Von Kossa, usado para identificar estruturas calcificadas. Os resultados mostraram que aos 7 dias todos os materiais promoveram uma moderada reação inflamatória no subcutâneo; aos 14 dias, verificou-se um aumento, embora não estatisticamente significante, no número de células inflamatórias no grupo CE-MTA em comparação aos demais grupos. No entanto, o número de células inflamatórias reduziu significantemente nos períodos de 30 e 60 dias, em todos os grupos... / Currently, among the filling materials, the Mineral trioxide aggregate (MTA) and its derivatives stands. Due to its good biological properties and the need for a sealer closest to the ideal, changes have been proposed to the MTA in an attempt to get a filling material for root canal. The purpose of this study was to evaluate the biological response of the materials Portland, MTA and MTA-based experimental cement in subcutaneous tissue and tooth socket of rats. Were used 80 rats divided into 4 groups: 1-Portland cement (PC), 2-MTA (Angelus), 3 – CEMTA and 4-Control (polyethylene tubes empty). In each animal, polyethylene tubes were implanted into dorsal subcutaneous and in the tooth socket. After 7, 14, 30 and 60 days, fragments of the subcutaneous and of the maxilla containing the implants with surrounding tissues were removed, fixed, processed and embedded in paraffin. H&E-stained sections of the subcutaneous and tooth socket with the polyethylene tubes were used for morphological analysis and quantification of inflammatory cells, some sections were submitted to immunohistochemistry for detection of osteopontin (OPN) and osteocalcin (OCN), typical non-collagen proteins of the mineralized tissues. von Kossa method, used to identify calcified structures, was performed in the subcutaneous sections. Our results showed that, in the period of 7 days, a moderate inflammatory reaction was observed in the all groups; at 14 days, although not statistically significant, the number of inflammatory cells in the CE-MTA group was higher than other groups. However, the number of inflammatory cells decreased significantly in the periods of 30 and 60 days in all groups in comparasion to initial periods. Moreover, significant differences were not found between the groups containing materials (PC, MTA and CE-MTA) and the control group indicating, therefore, that these materials are biocompatible... (Complete abstract click electronic access below)
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Participação de macrófagos M1, M2, MHC e da utrofina na distrofia muscular progressiva de cães

Toledo, Gabriela Noronha de [UNESP] 29 November 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-11-29Bitstream added on 2014-06-13T18:32:16Z : No. of bitstreams: 1 toledo_gn_me_jabo_parcial.pdf: 87307 bytes, checksum: 2a70f76caa5004cf2f4f6946ef44afa8 (MD5) Bitstreams deleted on 2014-06-27T19:00:47Z: toledo_gn_me_jabo_parcial.pdf,Bitstream added on 2014-06-27T19:02:03Z : No. of bitstreams: 1 toledo_gn_me_jabo.pdf: 545355 bytes, checksum: ebe9d8fb1c38b231931ec3d68075ca1f (MD5) / O objetivo do trabalho foi caracterizar lesões musculares e estudar marcação de dois subtipos de macrófagos, M1 (CD68) e M2 (CD163) além de MHC I, MHC II e utrofina, nos músculos mais acometidos pela doença (masseter, diafragma, tríceps braquial e bíceps femoral) em cães distróficos de diferentes idades. Foram utilizadas amostras musculares de 17 cães Golden Retriever (GR) machos e três controles não distróficos e livres de anormalidades neuromusculares, distribuídos em dois grupos: GI – animais distróficos até um ano de idade (n=9) e GII – animais distróficos acima de um ano de idade (n=8). Lesões histopatológicas características foram identificadas e classificadas nos quatro músculos distróficos: hialinização, infiltrado inflamatório mononuclear, necrose, regeneração, atrofia e hipertrofia, calcificação distrófica, fibrose e infiltração adiposa. As lesões variaram em extensão e distribuição de acordo com os músculos e o animal. Resultados mostraram que a imunodetecção do CD163 foi maior que a marcação de CD68 nos dois grupos. CD68 não mostrou variação independente da idade dos animais. A imunodetecção de MHC I foi mais evidente no bíceps femoral e tríceps braquial, seguida de marcações moderadas no masseter e diafragma do grupo com idade superior a um ano de idade. MHC II expressou-se de maneira discreta nos quatro músculos distróficos de ambos os grupos. A imunomarcação de utrofina foi maior no grupo afetado com idade superior a um ano de idade. Conclui-se que os macrófagos M2 estão entre as principais células inflamatórias mononucleares presentes nas lesões em cães distróficos e que com a idade ocorre aumento moderado de M2 no músculo de cães Golden Retriever distróficos indicando a associação deste tipo celular com a cronicidade da lesão muscular nestes animais / The objective was to characterize the lesions and study the expression of two subtypes of macrophages, M1 (CD68) and M2 (CD163) beyond MHC I, MHC II and utrophin in the most affected muscles by the disease (masseter , diaphragm, triceps braquii and biceps femoris) in dystrophic dogs of different ages. Samples muscle of 17 male Golden Retriever dogs and three controls non dystrophic and free of neuromuscular diseases were classified into two groups: G I - dystrophic animals under one year (n = 9) and G II - dystrophic animals over one year (n = 8). Pathological features were identified and classified in four dystrophic muscles: hyalinization, inflammatory infiltration, necrosis, regeneration, hypertrophy and atrophy, dystrophic calcification, fibrosis and fat infiltration. These lesions varied in extent and distribution according to the muscles and the animal evaluated. The results showed that the CD163 immunostaining detected in GRMD dogs was greater than marking CD68 in both groups. CD68 did not vary regardless of the age of the animals. The immunohistochemical expression of MHC I was most evident in the biceps femoris and triceps braquii, followed by moderate staining in the masseter and diaphragm in the group aged over one year old. MHC II expressed discretely in the four dystrophic muscles of both groups. The immunohistochemical expression of utrophin was higher in the affected group aged less than one year old. We concluded that the macrophage M2 were the main mononuclear inflammatory cells present in the dystrophic lesions in dogs. With the age there is a moderate increase of M2 macrophage in dystrophic muscle Golden Retriever dogs indicating the association of this cell type with the chronicity of muscle damage in these animals
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Relação entre o infiltrado inflamatório e as células dendríticas na resposta imune aos carcinomas do tipo simples em mama de cadelas

Rosolem, Mayara Caroline [UNESP] 10 October 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-10-10Bitstream added on 2014-06-13T19:57:04Z : No. of bitstreams: 1 000735329.pdf: 2941475 bytes, checksum: c05397fe7f5f49eeb21cca723c619b7f (MD5) / As células dendríticas despertam atualmente um grande interesse de estudos, pois são alvos primários da atividade tumoral sobre o sistema imune. O objetivo principal deste estudo foi avaliar a relação entre o infiltrado inflamatório e as células dendríticas (DCs) nos carcinomas mamários do tipo simples em cadelas. Dois grupos de amostras foram formados, o primeiro composto por 18 amostras de tecido mamário sem alterações (grupo controle) e o segundo, de 26 carcinomas mamários do tipo simples (grupo tumor). Além disso, foram analisados 15 linfonodos provenientes das cadelas com tumor de mama e quatro linfonodos oriundos das cadelas sem tumor de mama. Foi realizada a imunodetecção de DCs mieloides imaturas e maduras, DCs plasmocitoides, linfócitos T, macrófagos e moléculas do complexo de histocompatibilidade maior classe II (MHC-II). Foram também identificados os mastócitos pela coloração especial de azul de toluidina. Para os linfonodos, realizou-se apenas a imunodetecção de DCs mieloides imaturas e maduras. A idade média das cadelas com tumor de mama foi de 9,3 anos (30%) e os cães sem raça definida (SRD) foram os mais afetados. Nenhum linfonodo apresentou focos de micrometástases. Das 17 cadelas acompanhadas para o estudo de seguimento, nove estão vivas e oito vieram a óbito. A causa de morte mais ocorrente foi a provocada por metástases (67%). Nas mamas com tumor, observou-se que os mastócitos e as DCs mieloides maduras apareciam nas regiões peritumorais. As DCs mieloides imaturas, as DCs plasmocitoides, os macrófagos e as células imunomarcadas para MHC-II foram visualizados somente no estroma tumoral. Já os linfócitos T foram encontrados nas porções tumoral e peritumoral. Nos linfonodos a marcação das DCs mieloides imaturas concentrou-se nos folículos linfoides e na zona paracortical; já as DCs maduras apareceram somente no centro dos folículos... / Dendritic cells currently represent a big focus of studies, because they’re primary targets of tumor activity on the immune system. The main objective of this study was to evaluate the relationship between the inflammatory infiltrate and dendritic cells (DCs) in mammary carcinomas simple type in female’s dogs. Two groups of mammary gland samples were formed, the first was composed of 18 mammary tissue samples unchanged (control group) and the second, with 26 mammary simple carcinomas (tumor group). In addition, 15 lymph nodes were analyzed from bitches with mammary gland tumor and four lymph nodes derived from bitches without mammary gland tumor. Immunodetection was performed to immature and mature myeloid DCs, plasmacytoid DCs, T cells, macrophages and molecules of the major histocompatibility complex class II (MHC -II). Mast cells have also been identified by the special staining toluidine blue. To lymph nodes, the immunodetection was performed only to immature and mature myeloid DCs. The average age of the bitches with mammary tumor was 9.3 years (30 %) and dogs without breed (SRD) were the most affected. No lymph node showed foci of micrometastases. From 17 bitches monitored for follow-up study, nine are alive and eight died. The cause of death more occurred was caused by metastasis (67%). In the mammary glands with tumor, it was observed that the mast cells and mature myeloid DCs appeared in peritumoral regions. The immature myeloid DCs, plasmacytoid DCs, macrophages and cells immunostained for MHC-II were seen only in the tumor stroma. The T cells were founded into the tumor and in peritumoral areas. Into the lymph nodes, the marking of immature myeloid DCs was concentrated in lymphoid follicles and paracortical zone; the mature DCs appeared only in the center of the lymphoid follicles. In mammary gland control, the number of inflammatory cells as well as DCs was minimal. Statistically ...
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Imunomarcação de proteínas de estresse (HSP 27, HSP 72, HSP 90) e proteína P53 em neoplasias mamárias de cadelas

Paula, Ana Carolina Barbosa de [UNESP] 28 January 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-01-28Bitstream added on 2014-06-13T19:57:04Z : No. of bitstreams: 1 paula_acb_me_jabo.pdf: 945268 bytes, checksum: 8488b75c904e7af7b9e65ce5c9db72e1 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Os tumores de mama são a principal causa de morte em cães e isso vem despertando maior interesse no desenvolvimento de estudos relacionados a este distúrbio. A proximidade com os seres humanos, tanto na convivência quanto aos hábitos, podem influenciar o aparecimento das neoplasias. A semelhança dos tumores mamários caninos com os tumores de mama da mulher leva a um interesse no estudo da patologia comparada, estimulando o uso de modelos animais. Apesar dos muitos estudos, pouco se conhece sobre o prognóstico e as causas dos tumores mamários caninos, observando-se um esforço crescente na tentativa de acrescentar aos fatores prognósticos clássicos novos parâmetros, de natureza molecular, que auxiliem a decisão clínica, à semelhança do verificado em Medicina Humana, estando entre eles os marcadores moleculares, como a proteína P53 e as proteínas de estresse. A expressão de proteína P53 e das proteínas de estresse tem sido observada em muitas neoplasias, incluindo o câncer de mama. Nesse sentido, o objetivo do presente estudo foi investigar a imunomarcação de HSP 27, HSP 72, HSP 90 e proteína P53 em tecido mamário normal e neoplásico de cadelas e estabelecer uma relação entre a expressão destas proteínas e o grau histológico das neoplasias. Foi realizada análise estatística e o nível de significância (α) adotado foi de 5%. Dentre os tumores malignos, os carcinomas simples foram o tipo histológico predominante. Para a proteína P53, não houve diferença significativa em sua expressão entre os grupos de tumores malignos avaliados, ocorrendo o mesmo para as HSPs 27, 72 e 90. A sensibilidade do teste de imuno-histoquímica para a proteína P53, nesta amostra, foi de 67,5%, a especificidade foi de 100%, o valor preditivo positivo foi de 100%, o valor preditivo negativo foi de 25% e acurácia do teste foi de 92%. Ainda para a proteína P53, comparando-se o grupo... / Breast tumors are the leading cause of death in dogs and this has aroused great interest in developing studies related to this disease. The proximity with humans, much as in living habits, may influence the onset of tumors. The similarity of canine mammary tumors with breast tumors of women take an interest in the study of comparative pathology, stimulating the use of animal models. Despite many studies, little is known about the prognosis and causes of canine mammary tumors, observing a growing effort in trying to add to the classic prognostic factors new parameters of molecular nature, that help the clinical decision, like that seen in Human Medicine, and among them the molecular markers such as P53 and stress proteins. The expression of P53 protein and the stress proteins has been observed in many cancers, including breast cancer. Accordingly, the purpose of this study was to investigate the immunostaining of HSP 27, HSP 72, HSP 90 and P53 protein in normal and neoplastic breast tissue of female dogs and establish a relationship between the expression of these proteins and the histological grade of tumors. Statistical analysis was performed and significance level (α) was 5%. Among the malignant tumors, simple carcinomas were the predominant histologic type. Protein P53, presented no significant difference in expression between the evaluated groups of malignant tumors, the same occurring for HSPs 27, 72 and 90. The test sensitivity of immunohistochemistry for protein P53 in this sample was 67,5%, specificity was 100%, positive predictive value was 100%, negative predictive value was 25% and accuracy of test was 92%. Although protein P53, compared to the control group with other groups in relation to staining intensity and proportion score, there was a significant difference only between the group of simple carcinomas. With regard to staining intensity, we tested the correlation between... (Complete abstract click electronic access below)

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