Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / Trata-se de uma pesquisa qualitativa que buscou descrever e analisar a vivência do pai no trabalho de parto, parto e pós-parto de seu filho e discutir as repercussões advindas com essa vivência em sua vida conjugal e familiar. Foram entrevistados 24 homens-pais, aleatoriamente, dentre aqueles que estavam presentes no momento das consultas/atividades de puericultura de seus filhos, realizadas em quatro centros municipais de saúde do município do Rio de Janeiro e que participaram do processo de parturição de sua companheira. Para coleta de dados foi utilizada a entrevista semi-estruturada na qual se investigou condições sócio demográficas e aspectos relativos à sua vivência no parto. Para análise dos dados, foi utilizada a Análise Temática. Emergiram um tema (A vivência do pai no parto) e quatro subtemas: sentimentos, sensações e emoções paterna, a importância da presença paterna e as repercussões na vida do pai: conjugal e familiar. Os resultados revelaram que o parto foi para os pais um momento único com mistura de sentimentos. Outros se sentiram úteis por terem conseguido oferecer suporte emocional. Sua presença foi vista por eles mesmos como fundamental, seja por desejo da mulher, seja por decisão do casal. Mostraram ainda a existência de um novo modelo de pai, que se preocupa com o sustento de sua nova família e está à disposição para cooperar nas tarefas domésticas. Ressalta-se que a figura do pai provedor ainda se faz presente. Destaca-se a preocupação dos pais para não prejudicar a equipe e os procedimentos médicos no momento do parto. A vivência do pai no parto mudou o imaginário social da figura da mulher, mãe de seu filho, tornando-a mais corajosa, mais forte e até mais bonita aos olhos desse homem. Para outros, sua presença trouxe uma aproximação na relação conjugal, uma demonstração de que agora ele é um homem de confiança. Considera-se urgente uma reavaliação dos profissionais de saúde sobre a presença e preparação do pai durante todo o processo de nascimento. Na vida familiar, os resultados mostraram que os pais não souberam retratar como esta vivência afetou os membros, ditos por eles, como família. Principalmente aqueles que enumeraram pais, irmãos e enteados como integrantes. Nesse sentido, ressalta-se a importância de uma efetiva preparação dos pais para as transformações que uma vivência do parto repercute em todos os campos de sua vida. / This is a qualitative research which tried to describe and analyze the experience of the father present during childbirth labor, childbirth and post childbirth of his child and discuss the repercussions resulting of this experience in his conjugal and family life. There were random interviews with twenty-four fathers, among the ones present at the moment of consultation appointments/ child care of their children, occurred in four municipal health care centers in Rio de Janeiro, who attended their partners childbirth process. For data collection it was used semi-structured interviews in which were investigated social demographic conditions and aspects related to their experience in the childbirth. For data analyses, it was used thematic analyses, which gave origin to a theme (the experience of the father in the childbirth) and four sub-themes: feelings, fathers sensations and emotions, the importance of fathers presence, repercussions in the fathers life: conjugal and familiar. The results revealed that the childbirth was a unique moment with a mix of feelings. Some felt useful for offering emotional support. Their presence was seen by them as fundamental, for the wifes desire or the couples decision. It also showed a new pattern of father, who is concerned with the family sustainability and also ready to help in the domestic chores, the figure of the financially supportive father is still present. The concern of fathers in order not to disturb or interfere on the delivery team work and the medical procedures in the moment of the parturition is highlighted. The experience of the father in the childbirth has changed the social image of the mother, making her seem more courageous, stronger and even more beautiful on the eyes of the man. For others, their presence created a better conjugal atmosphere, a demonstration that he is a man of trust. It is considered urgent to reevaluate health professionals on the fathers presence and preparation during all the childbirth process. In family life, fathers could not explain how the experience affected the members of the family, mainly those who enumerated fathers, brothers and stepson as family members. In this sense, it is important to mention the relevance of an effective preparation for transformations that the experience of childbirth attending can cause in all the fields of his life.

A presente pesquisa traça uma cartografia do movimento social pela humanização do parto e nascimento no Brasil, que surge por volta de 1970 e ganha ampla adesão das mulheres usuárias de sistemas de saúde duas décadas depois, em um processo intimamente relacionado à democratização da internet e mais especificamente do ciberespaço. Após retomar os processos históricos do movimento, a dissertação ocupa-se de acompanhar especialmente os fluxos de luta estabelecidos pelas mulheres no ciberambiente, abordando as diferentes produções que nele emergem e seus desdobramentos na sociedade. A partir do aporte conceitual da esquizoanálise, buscou-se compreender como se articulam fluxos individuais e coletivos de luta e busca pelo parto humanizado, e de que modo estes vêm incidindo no cenário da assistência obstétrica no País. Concluiu-se que os itinerários individuais e coletivos se produzem em um plano comum e têm incidido na ampliação do diálogo sobre a assistência à parturiente no País. Tais fluxos parecem abrigar muitas potências, dentre as quais, se evidencia a contribuição à modificação do modelo de atenção ao parto vigente, além do fortalecimento do próprio movimento de humanização do parto. / This research draws a map of the social movement for the humanization of childbirth in Brazil, which arises around 1970 and gains broad support of women health system users two decades later, in a process closely related to the democratization of the Internet and more specifically, of cyberspace. After exposing the historical movement processes, the dissertation deals with follow especially the fight fluxes established by women in cyberspace, addressing the different productions that emerge in it and its consequences in society. We tried to understand how are articulated individual and collective fluxes of struggle and search for humanized birth, and how they affect the scene of obstetric care in the country. It was concluded that the individual and collective itineraries are produced in a common plan, and have affected on expanding the dialogue on assistance to the woman in labor in the country. Such fluxes seem to harbor many powers, among which highlights the contribution to the modification of the attention to current child-birth model besides the strengthen of the childbirth humanization movement itself.

A presente pesquisa traça uma cartografia do movimento social pela humanização do parto e nascimento no Brasil, que surge por volta de 1970 e ganha ampla adesão das mulheres usuárias de sistemas de saúde duas décadas depois, em um processo intimamente relacionado à democratização da internet e mais especificamente do ciberespaço. Após retomar os processos históricos do movimento, a dissertação ocupa-se de acompanhar especialmente os fluxos de luta estabelecidos pelas mulheres no ciberambiente, abordando as diferentes produções que nele emergem e seus desdobramentos na sociedade. A partir do aporte conceitual da esquizoanálise, buscou-se compreender como se articulam fluxos individuais e coletivos de luta e busca pelo parto humanizado, e de que modo estes vêm incidindo no cenário da assistência obstétrica no País. Concluiu-se que os itinerários individuais e coletivos se produzem em um plano comum e têm incidido na ampliação do diálogo sobre a assistência à parturiente no País. Tais fluxos parecem abrigar muitas potências, dentre as quais, se evidencia a contribuição à modificação do modelo de atenção ao parto vigente, além do fortalecimento do próprio movimento de humanização do parto. / This research draws a map of the social movement for the humanization of childbirth in Brazil, which arises around 1970 and gains broad support of women health system users two decades later, in a process closely related to the democratization of the Internet and more specifically, of cyberspace. After exposing the historical movement processes, the dissertation deals with follow especially the fight fluxes established by women in cyberspace, addressing the different productions that emerge in it and its consequences in society. We tried to understand how are articulated individual and collective fluxes of struggle and search for humanized birth, and how they affect the scene of obstetric care in the country. It was concluded that the individual and collective itineraries are produced in a common plan, and have affected on expanding the dialogue on assistance to the woman in labor in the country. Such fluxes seem to harbor many powers, among which highlights the contribution to the modification of the attention to current child-birth model besides the strengthen of the childbirth humanization movement itself.

Dissertação(mestrado) - Universidade Federal do Rio Grande, Programa de Pós-Graduação em Enfermagem, Escola de Enfermagem, 2012. / Submitted by eloisa silva (eloisa1_silva@yahoo.com.br) on 2013-04-11T16:27:10Z No. of bitstreams: 1 daianebl.pdf: 1315909 bytes, checksum: 0ceceabe6cfccded2b0110a6c7242217 (MD5) / Approved for entry into archive by Bruna Vieira(bruninha_vieira@ibest.com.br) on 2013-06-17T21:49:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 daianebl.pdf: 1315909 bytes, checksum: 0ceceabe6cfccded2b0110a6c7242217 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-17T21:49:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 daianebl.pdf: 1315909 bytes, checksum: 0ceceabe6cfccded2b0110a6c7242217 (MD5) Previous issue date: 2012 / A humanização nos serviços de saúde é essencial na resolução de problemas, satisfação dos usuários, reconhecimento e reivindicação dos direitos, promoção do auto cuidado e proteção da saúde. Na atenção obstétrica e neonatal, o Ministério da Saúde preconiza que a atenção adequada à mulher no momento do parto é um direito fundamental. O objetivo geral deste estudo é conhecer a percepção dos gestores do Hospital Universitário Dr. Miguel Riet Correa Junior sobre a implementação da proposta do Ministério da Saúde acerca do Parto Humanizado. Trata-se de um recorte da macro-pesquisa multicêntrica “Atenção Humanizada ao Parto de Adolescentes”, caracterizada como um estudo transversal multicêntrico envolvendo a Universidade Federal do Rio Grande (FURG) e a Universidade Federal de Pelotas (UFPEL). O local do estudo foi o Hospital Universitário Dr Miguel Riet Corrêa Júnior, da Universidade Federal do Rio Grande, município do Rio Grande/RS , tendo como sujeitos quatro gestores deste hospital. Os dados foram extraídos do banco de dados da macro-pesquisa referida. Foram respeitados todos os aspectos referentes à Resolução N° 196/96 sobre Pesquisa Envolvendo Seres Humanos. A análise foi realizada a partir da interpretação dos dados que foram coletados e transcritos das entrevistas. Os resultados e as discussões encontram-se organizados em dois artigos científicos. O primeiro artigo está relacionado ao conhecimento dos gestores sobre a proposta do Ministério da Saúde acerca do Parto Humanizado. O segundo enfoca as fortalezas e as fragilidades apontadas pelos gestores para a implementação da proposta do Ministério da saúde. Conclui-se que os gestores conhecem o Programa de Humanização do Pré-Natal e Nascimento e suas diretrizes, salientam a necessidade de mudança na área física, e a permissão da presença do acompanhante; demonstraram conhecer os benefícios do Programa de Humanização do Pré-Natal e Nascimento; justificam a necessidade de credenciamento para o recebimento de verbas para a manutenção do processo; evidenciam a necessidade da elaboração de um protocolo de atendimento. Quanto às dificuldades, evidenciou-se a resistência dos 10 profissionais a uma nova proposta, número insuficiente de trabalhadores e um alto índice de cesáreas. Como estratégias, os gestores apontaram que a mudança da área física do Centro Obstétrico pode favorecer, bem como treinamento e capacitações da equipe de saúde, como também uma real cobrança por parte do governo na efetivação do parto humanizado. / Humanization in health services is essential in problem solving, customer satisfaction, recognition and vindication of rights, promotion of self care and health protection. In obstetric and neonatal care, the Ministry of Health recommends that adequate attention to women during childbirth is a fundamental right. The aim of this study the perceptions of managers of the Hospital Dr Miguel Riet Correa Junior º on the implementation of the proposal of the Ministry of Health about the Humanized Delivery. This is an excerpt of the macro-multicenter study "Humanized Care Delivery for Adolescents", characterized as a multicentric study involving the Federal University of Rio Grande (FURG) and the Federal University of Pelotas (UFPEL). The study site was the University Hospital Dr. Miguel Riet Corrêa Júnior, Federal University of Rio Grande, in Rio Grande/RS, with the participants were four managers of this hospital.Data were extracted from the database that the macro-research. We have respected all aspects of Resolution No. 196/96 on Research Involving Human Subjects. The analysis was based on the interpretation of the data that were collected and transcribed the interviews. The results and discussions are organized in two papers. The first article is related to the attention of managers on the proposal of the Ministry of Health about the Humanized Delivery. The second focuses on the strengths and weaknesses identified by managers to implement the proposal of the Ministry of Health. It is concluded that managers know the Humanization Program of Prenatal and Birth and their guidelines, highlight the need for change in the physical area, and allowing the presence of a companion, knew about the benefits of the Program for Humanization of Prenatal and Birth; justify the need for accreditation for the receipt of funds for the maintenance of the process; highlight the need to prepare a protocol of care. As for the difficulties, there was the professional resistance to a new proposal, an insufficient number of workers and a high rate of cesarean sections. As strategies, managers indicated that the change of the physical area of the obstetric center can 12improve, as well as training and skills of health staff, but also a real recovery by the government in the execution of humanized childbirt. / Humanización en los servicios de salud es esencial en la resolución de problemas, la satisfacción del cliente, el reconocimiento y la reivindicación de los derechos, la promoción del autocuidado y protección de la salud. En la atención obstétrica y neonatal, el Ministerio de Salud recomienda que la atención adecuada a las mujeres durante el parto es un derecho fundamental. El objetivo de este estudio, las percepciones de los directivos del Hospital Dr. Miguel Riet Correa º Junior en la aplicación de la propuesta del Ministerio de Salud sobre el parto humanizado. Este es un extracto de la macro-estudio multicéntrico "un cuidado humanizado para Adolescentes", que se caracteriza como un estudio multicéntrico de la participación de la Universidad Federal de Río Grande (FURG) y la Universidad Federal de Pelotas(UFPEL). El sitio de estudio fue el Hospital Universitario Dr. Miguel Riet Corrêa Júnior, de la Universidad Federal de Río Grande, en Río Grande / RS, teniendo como participantes del estudio cuatro gerentes de este hospital. Los datos fueron extraídos de la base de que la macro-investigación. Nosotros hemos respetado todos los aspectos de la Resolución N º 196/96 para la Investigación en Seres Humanos. El análisis se basó en la interpretación de los datos que fueron recopilados y transcritos de las entrevistas. Los resultados y discusiones se organizan en dos artículos. El primer artículo se refiere a la atención de los administradores sobre la propuesta del Ministerio de Salud sobre el parto humanizado. El segundo se centra en las fortalezas y debilidades identificadas por los responsables de implementar la propuesta del Ministerio de Salud. Se concluye que los directivos conocer el Programa de Humanización de las directrices del embarazo y parto y su, poner de relieve la necesidad de cambio en el área física, y permitiendo la presencia de un compañero, sabía acerca de los beneficios del Programa de Humanización del Prenatal y Nacimiento, justificar la necesidad de la acreditación para la recepción de fondos para el mantenimiento del proceso y poner de relieve la necesidad de elaborar un protocolo de atención. En cuanto a las dificultades, no fue la resistencia de los profesionales a una nueva 14 propuesta, un número insuficiente de trabajadores y una alta tasa de cesáreas. Dado que las estrategias, los directivos indicaron que el cambio de la superficie física del centro obstétrico puede mejorar, así como formación y capacitación del personal de salud, sino también una recuperación real por parte del gobierno en la ejecución de parto humanizad.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O tema da Saúde do Homem ficou mais visível para a sociedade brasileira a partir do ano de 2009, em que o Ministério da Saúde lançou a Política Nacional de Atenção Integral à Saúde do Homem (PNAISH) para faixa etária dos 25 a 59 anos. A pesquisa insere-se no atual contexto da implantação da PNAISH das equipes de saúde no município de Boa Vista, Roraima. O interesse da pesquisa surgiu pela importância das equipes de saúde para que sejam esclarecidas e preparadas para atender a demanda masculina, assim como conhecer os pressupostos e as expectativas em relação à implementação dessa política observada pelos coordenadores do programa, possibilitando o entendimento e ações que proporcionam maior cobertura do cuidado à saúde masculina com promoção e prevenção à saúde. Diante disso, surgiu a questão norteadora do estudo: como são desenvolvidas as atividades de cuidados humanizados realizados pelo enfermeiro a Saúde do Homem na ESF em Boa Vista? O estudo teve como objetivo, conhecer e compreender as atividades que viabilizam o cuidado humanizado da população masculina, desenvolvidas pelos enfermeiros na rede de atenção básica do município de Boa Vista-RR. A modalidade de pesquisa escolhida foi qualitativa fenomenológica, apoiada no referencial de Edmund Husserl e Edith Stein e interpretada por Bello, sendo que o método fenomenológico permite o modo de compreender e analisar o ser humano na sua totalidade - física, psíquica e espiritual, o que possibilita um aprofundamento e uma correlação entre a sua interioridade e exterioridade e evidencia-se nos desdobramentos das análises desenvolvidas. O mesmo foi submetido ao Comitê de Ética em Pesquisa da Universidade Federal de Roraima (UFRR) com aprovação, atendendo aos critérios da resolução 466/2012 que regulamenta a pesquisa com seres humanos, cumpridos todos os preceitos ético-legais. Dentre os participantes da pesquisa foram selecionados nove (09) enfermeiros das Unidades de Saúde, incluídos como critério de seleção apenas um enfermeiro de cada macroárea, pelo fato que esses profissionais geralmente coordenam os programas de saúde, participam da assistência dos usuários do posto de saúde. Na análise fenomenológica das experiências dos participantes foi apreendido dois pontos essenciais para a discussão: Compreensão do Conceito de Saúde e Políticas Públicas e Compreensão da atuação do Enfermeiro na Atenção Básica para Saúde do Homem. As principais ações do cuidado desenvolvidas pelos enfermeiros mediante as contribuições de Husserl e Stein de modo significativo do lugar epistemológico do humano estão relacionado aos aspectos biológicos, mas biopsicossocial e cultural, desse olhar fenomenológico. Concluindo, ao compreender os aspectos que facilitam e∕ou dificultam o vínculo masculino ao programa de saúde do homem no município, está diretamente relacionado ao Planejamento Estratégico dos Serviços de Saúde, onde envolve os gestores, coordenadores e equipe. A identificação desses aspectos torna-se ponto relevante nesta pesquisa, pois oferece à possibilidade de subsidiar novas discussões referentes à temática. Além disso, constitui-se uma importante ferramenta a ser utilizada na construção coletiva de estratégias que gradativamente eliminem e/ou potencializam os elementos envolvidos na acessibilidade do público masculino a estes serviços de saúde, fortalecimento das ações humanizadas de promoção e prevenção na prática do enfermeiro.

No âmbito do Cuidado em Saúde, a Arte tem sido vista como potencial meio para a sensibilização de estudantes e profissionais implicados na prática de cuidado. O presente trabalho teve como objetivo principal investigar e analisar a percepção de estudantes de fonoaudiologia a respeito das relações entre cuidado em saúde e arte. O estudo ocorreu de forma interdisciplinar e intersetorial, a partir da proposta de experiência da Sala de Arte durante o Programa de Fonoterapia Intensiva (PFI) para correção de alterações de fala relacionadas à fissura labiopalatina e disfunção velofaríngea. Para tanto foram traçados os seguintes objetivos específicos: 1- Descrever as atividades realizadas na Sala de Arte no PFI e 2 Identificar registros que emergiram da experiência proposta pela Sala de Arte que abordem concepções e reflexões a respeito dos seguintes aspectos (analisadores): a) cuidado em saúde; b) arte; c) arte como cuidado; d) cuidado como arte. O estudo de características qualitativas valeu-se da cartografia associada à análise documental, tendo como objeto de pesquisa os registros produzidos por estudantes o curso de graduação em fonoaudiologia durante a ocorrência da Sala de Arte. Sustentados por princípios da arte-educação, os dados produzidos foram organizados considerando os analisadores propostos para este estudo e em seguida categorizados e confrontados com bibliografia pertinente. De acordo com os resultados, a percepção dos estudantes indica que há em sua formação, predomínio do caráter hegemônico, centrado em produção de procedimentos. Os resultados também indicam haver carência de espaços voltados para o diálogo, para a reflexão sobre sua prática de cuidado, assim como, espaços de escuta e interpretação, no âmbito da integralidade. Conclui-se assim, que a proposta de experiência da Sala de Arte, oportunizou espaço aos estudantes para reflexão a respeito de cuidado em saúde e arte, dessa forma contribuindo para sua percepção e prática de saúde de forma integral e sensível. / When considering Healthcare, Art has been proposed as a tool to prepare students and professional to implement more effective and sustainable actions in health. The present study had the objectives of investigating and analyzing the perception of Speech-Language Pathology Students regarding to the relationship between healthcare and art. This proposal was conducted in an interdisciplinary and intersectoral way within the Arts Room experience, during the Intensive Speech Therapy Program (ISTP) for correction of speech disorders related to cleft lip and palate and velopharyngeal dysfunction. The following specific objectives were addressed: 1- To describe the activities conducted in the Arts Room at the ISTP and 2- To identify the written records registered by the students while experiencing the Arts Room, that addressed the following aspects (analysers): a) healthcare; b) arts; c) arts as healthcare; d) healthcare as art. The qualitative feature study was based in cartography associated to documental analysis, using as research subject records of Speech-Language Pathology students within the Arts Room. Supported by the principle of art-education, the produced data has being organized considering proposed analyzers for this study and then categorized and confronted with pertinent literature. The findings indicate that the students are prepared within a hegemonic model with emphasis in procedures. There is a lack of spaces focused on the dialogical interaction, to reflect on their care practice, as well as listening and interpretation spaces, at comprehensive health scope. The Arts Room experience, therefore, provided opportunities to the students to think about healthcare and art, contributing for their health perception and practice in a whole, sensitive manner.

Parmi les nouvelles stratégies thérapeutiques, la thérapie génique contre le VIH connaît actuellement un regain d'intérêt. La description du premier cas de guérison avéré après greffe de cellules souches mutantes pour le corécepteur majeur du VIH (CCR5) a relancé l'intérêt de la communauté pour développer des stratégies de thérapies géniques ciblant CCR5. Durant ma thèse, j'ai développé une stratégie basée sur l'inhibition de l'entrée du virus dans les lymphocytes T CD4 humains. Nos gènes thérapeutiques comprennent un inhibiteur de fusion membranaire (peptide C46) et un inhibiteur d'expression de CCR5. L'expertise de l'équipe dans les modèles de souris humanisées m'a permis de valider l'intérêt pré-clinique de cette stratégie dans un modèle de transfert de lymphocytes T modifiés. J'ai pu montrer que les lymphocytes T modifiés possédaient un avantage sélectif massif in vivo comparé à des cellules non protégées, ainsi qu’une protection totale contre la délétion induite par le VIH. De plus, dans une autre étude, j'ai montré que la dynamique virale dans les modèles de souris humanisées par transfert de CSH est plus proche des patients. Cette étude nous montre qu'il n'est pas nécessaire d'invoquer la réponse immune, pour expliquer les profils de réplication virale observés dans la phase primaire de l'infection. Ce résultat suggère donc qu'une partie de la dynamique virale est dépendante du nombre de cellules à infecter et du nombre de virions disponibles. L'ensemble des résultats de ma thèse a permis (i) de faire progresser notre compréhension de la dynamique virale, et (ii) de valider la combinaison d'inhibiteurs d'entrée dans un vecteur lentiviral. / Among new therapeutic strategies to fight the infection, gene therapy targeting CCR5 will be an asset. Indeed, the first patient to be cured from the infection received hematopoietic progenitors deprived of CCR5. This finding has ignited a flurry of research on genetic means to decrease CCR5 from the cell surface.During my PhD, I developed a gene therapy strategy based on entry inhibition of HIV in CD4 T cells. Our therapeutic genes are a membrane fusion inhibitor (the C46 peptide) and a CCR5 expression inhibitor, based on a super-agonist ligand. The experience of the team in humanized mice models allowed the validation of the strategy in vivo in a model of gene-modified T cell transfer. I first showed that the combination of the transgenes was able to prevent HIV infection in vitro in a dose dependent manner. Most importantly, I then showed that this protection conferred modified T cells with a huge selective advantage in vivo. This advantage was associated with a complete protection of CD4 T cells from HIV-induced deletion. Moreover, in another study, I showed that the viral dynamics in mouse models humanized by transferring HSC is closer to patients. This study also teaches us that it is not necessary to invoke the immune response to HIV, to explain the profiles of viral replication observed early after infection. This result suggests that part of the viral dynamic is dependent on the target/virus ratio. Together, results collected during my PhD thesis provides new information on viral dynamic and establish the interest of combining two viral entry inhibitors for gene therapy of HIV infection.

Les modèles animaux actuellement disponibles pour l’étude des leucémies humaines ne sont pas adaptés pour le développement optimal de nouvelles thérapies ciblées. Au cours de ce projet, qui s’inscrit dans une double perspective fondamentale et industrielle, nous avons cherché à générer un modèle versatile de leucémogénèse humaine chez la souris humanisée BRGS (BALB/c Rag2-/- IL-2Rγc-/- SIRPα.NOD). Les animaux sont greffés avec des progéniteurs hématopoïétiques transduits par des vecteurs lentiviraux surexprimant les oncogènes MYC et BCL2 et placés sous le contrôle d’un promoteur ubiquitaire (EF1α ou SFFV). Le suivi longitudinal des animaux sur une période de 5 mois montre que seule la construction SFFV/Myc-T2A-Bcl2 entraîne la transformation des progéniteurs hématopoïétiques. Entre 12 à 14 semaines post-greffe, >90% des animaux développent des lympho-proliférations de type pro-B (CD19+CD10+CD9+CD20-cytIgM-) infiltrant principalement la rate et la moelle osseuse, et circulant en abondance dans le sang. Le caractère transmissible des tumeurs est validé par des greffes secondaires de tumeurs spléniques. Les cultures in vitro de progéniteurs hématopoïétiques suggèrent que l’émergence des blastes est liée à la réactivation d’un programme B latent dans les précurseurs T, dont le développement est bloqué. Nous avons développé en parallèle un modèle de tumeur autologue. L’ensemble de ces résultats valide le modèle de leucémogénèse humaine développé chez la souris humanisée BRGS et ouvre des perspectives pour la caractérisation fonctionnelle des mécanismes de leucémogénèse, et la validation préclinique de nouvelles stratégies anti-tumorales. / Existing animal models for the study of human leukemia are not accurate for the proper development of innovative, targeted therapies. The aim of this project, which contains both a fundamental and an industrial perspective, therefore was to develop a new, versatile model of human leukemogenesis in the BRGS (BALB/c Rag2-/- IL-2Rγc-/- SIRPα.NOD) humanized mouse. Animals are grafted with hematopoietic progenitors transduced with lentivirals vectors to allow overexpression of MYC and BCL2 proteins under the control of an ubiquitous promotor (EF1α or SFFV). Longitudinal monitoring of the animals over five months shows that only the SFFV/Myc-T2A-Bcl2 construction induces the transformation of humans hematopoietics progenitors. Between 12 and 14 weeks post-transplantation, more than 90% of the animals develop pro-B lympho-proliferations (CD19+CD10+CD9+CD20-cytIgM-), with tumor cells being mainly found in the spleen, the bone marrow and in blood. Tumor transferability is achievable through secondary transplantation in immunodeficient mouse recipients. In vitro culture of bone marrow T cell progenitors suggest that the blasts arise from these cells after reactivation of a latent B cell program with blockade of their T cell development. In parallel, we have also developed an autologous tumor model. Altogether, these results validate the human leukemogenesis model constructed here in humanized BRGS mice and provide attractive prospects regarding the functional characterization of leukemogenesis and a preclinical validation of new anti-tumor strategies.

INTRODUCTION: SARS-CoV-2 is a novel virus from the coronavirus family that emerged in the Hubei province of China in December 2019 and rapidly spread throughout the world. On March 11, 2020, the World Health Organization declared a global pandemic. Infection with SARS-CoV-2 causes coronavirus disease 19 (COVID19) which can be fatal. There is an obvious and pressing need for research surrounding SARS-CoV-2 that will aid in eradication of this pandemic. OBJECTIVE: The goal of this study was to absolve the dire need for small animal models of human disease that demonstrate hallmark pathological features of infection. Due to ethical and financial obstacles, the use of animals that closely resemble human immunity, such as non-human primates, is often not a viable option. For this reason, there is a push to develop small animal models that can mimic human disease responses, particularly those in viral infections that have a narrow species tropism. To achieve this in the context of the novel coronavirus, SARS-CoV-2, we studied various mouse models and their capacity to become infected with and mount an immune response to SARS-CoV-2. Our goal was to identify a model that sufficiently mimics severe COVID19 seen in humans as well as provide molecular insight into pathways that prevent the development of severe disease. METHODS: NRG-L and HIS-NRGF-L mice were subcutaneously implanted with human fetal lung xenografts and infected with SARS-CoV-2. Tissues were stained with H&E for histopathological scoring. NRG-L and HIS-NRGF-L tissues were fluorescently labeled using 2 different multiplex immunohistochemistry panels. Slides were digitized by a Vectra Polaris™ fluorescent whole slide scanner and digital analysis was completed using HALO™. Statistical analysis was conducted using GraphPad Prism™ 9.0.1. RESULTS: Infected NRG-L mice present extensive histopathological manifestations when compared to uninfected controls. Cumulative histology scores at both 2 and 7DPI were increased when compared to uninoculated fLX. Neutrophil influx, intra-airspace necrosis, capillary fibrin thrombi, and presence of syncytial cells were the most significant independent observations that contributed to the increased cumulative score. Together these findings indicate that fLX inoculated with SARS-CoV-2 faithfully recapitulate several features of diffuse alveolar damage (DAD) described in severe COVID-19. HIS-NRGF-L mice displayed decreased influx of neutrophils, intra-airway necrosis, and syncytial cells when compared to NRG-L fLX. Hemorrhage was decreased at both 2 and 7 DPI for HIS-NRGF-L fLX compared to NRG-L fLX. Cumulative histology scores were decreased in HIS-NRGF-L fLX at 7 DPI when compared to NRG-L fLX. Taken together these findings support the hypothesis that human myeloid and lymphoid infiltrates suppress or prevent the disparate host response observed in NRGL-L fLX that manifested in pronounced diffuse alveolar damage. CONCLUSION: Using digital image analysis of multiplex immunohistochemistry paired with semi-quantitative histopathological scoring, this study characterized important hallmark lesions observed in severe COVID19 as seen in small animal models. NRG-L and HIS-NRGF-L mice that are subcutaneously implanted with human fetal lung xenografts are susceptible to infection with SARS-CoV-2 and can produce severe and moderate disease phenotypes respectively. Co-engraftment with human fetal lung tissue and human immune system components in HIS-NRGF-L mice suppresses the divergent host response that is observed in NRG-L mice. For this reason, NRG-L mice engrafted with fLX are an ideal small animal model of severe COVID19, whereas HIS-NRGF-L mice severe as a valuable and informative model for deciphering molecular mechanisms driving severe COVID-19 that will serve as targets for therapeutic development.

京都大学 / 0048 / 新制・課程博士 / 博士(医学) / 甲第21022号 / 医博第4368号 / 新制||医||1028(附属図書館) / 京都大学大学院医学研究科医学専攻 / (主査)教授 朝長 啓造, 教授 萩原 正敏, 教授 髙折 晃史 / 学位規則第4条第1項該当 / Doctor of Medical Science / Kyoto University / DFAM