Submitted by SIMONE SILVA FRUTUOSO DE SOUZA null (simone_mat@hotmail.com) on 2017-03-29T13:28:59Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado - Final.pdf: 4108375 bytes, checksum: d0138f5bfaaf0248f430b27319d3c9e2 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-03-30T17:35:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 souza_ssf_dr_ilha.pdf: 4108375 bytes, checksum: d0138f5bfaaf0248f430b27319d3c9e2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-30T17:35:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 souza_ssf_dr_ilha.pdf: 4108375 bytes, checksum: d0138f5bfaaf0248f430b27319d3c9e2 (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Neste trabalho são apresentados três algoritmos imunológicos artificiais para resolver o problema de reconfiguração de sistemas de distribuição de energia elétrica considerando demanda fixa e também demandas variáveis. Para resolver este problema foram utilizados os algoritmos CLONALG (Clonal Selection Algorithm), Copt-aiNet (Artificial Immune Network for Combinatorial Optimization) e Opt-aiNet (Artificial Immune Network for Optimization). O problema de reconfiguração considerando demandas variáveis é um problema complexo e de natureza combinatória, que tem por objetivo identificar a melhor topologia radial para um sistema de distribuição de energia elétrica, de modo a minimizar os custos das perdas de energia ao longo de um período de operação. Para avaliar a factibilidade em relação às restrições de operação dos sistemas de energia elétrica, e calcular as perdas ativas para cada demanda foi utilizado o algoritmo de fluxo de carga radial de varredura. Os algoritmos foram escritos na linguagem C++. Para avaliar os algoritmos propostos foram realizados testes com os sistemas elétricos de 33, 84, 136, 417 e 10477 barras. Os resultados foram comparados com os existentes na literatura, de modo a verificar a eficiência e robustez dos algoritmos. / This work presents three artificial immune algorithms to solve the reconfiguration problem of electrical distribution systems (EDSs) with fixed demand and variable demands. To solve this problem were used the algorithms CLONALG (Clonal Selection Algorithm), Copt-aiNet (Artificial Immune Network for Combinatorial Optimization) and Opt-aiNet (Artificial Immune Network for Optimization). The reconfiguration problem with variable demands is a complex problem having combinatorial nature and aiming at identifying the best radial topology for an EDS, in order to minimize the cost of the energy losses in a given operation period. To evaluate the feasibility of the topology regarding the operating constraints of the EDS and to calculate the active power losses for each demand level it was used a specialized sweep load flow for radial systems. The mentioned algorithms were implemented in C++. To evaluate the proposed algorithms were performed testing using test systems with 33, 84, 136, 417 and 10477 nodes. The results were compared with the ones in the literature in order to validate the efficiency and robustness of the algorithms.

Orientador: Rubén Augusto Romero Lázaro / Resumo: Neste trabalho são apresentados três algoritmos imunológicos artificiais para resolver o problema de reconfiguração de sistemas de distribuição de energia elétrica considerando demanda fixa e também demandas variáveis. Para resolver este problema foram utilizados os algoritmos CLONALG (Clonal Selection Algorithm), Copt-aiNet (Artificial Immune Network for Combinatorial Optimization) e Opt-aiNet (Artificial Immune Network for Optimization). O problema de reconfiguração considerando demandas variáveis é um problema complexo e de natureza combinatória, que tem por objetivo identificar a melhor topologia radial para um sistema de distribuição de energia elétrica, de modo a minimizar os custos das perdas de energia ao longo de um período de operação. Para avaliar a factibilidade em relação às restrições de operação dos sistemas de energia elétrica, e calcular as perdas ativas para cada demanda foi utilizado o algoritmo de fluxo de carga radial de varredura. Os algoritmos foram escritos na linguagem C++. Para avaliar os algoritmos propostos foram realizados testes com os sistemas elétricos de 33, 84, 136, 417 e 10477 barras. Os resultados foram comparados com os existentes na literatura, de modo a verificar a eficiência e robustez dos algoritmos. / Abstract: This work presents three artificial immune algorithms to solve the reconfiguration problem of electrical distribution systems (EDSs) with fixed demand and variable demands. To solve this problem were used the algorithms CLONALG (Clonal Selection Algorithm), Copt-aiNet (Artificial Immune Network for Combinatorial Optimization) and Opt-aiNet (Artificial Immune Network for Optimization). The reconfiguration problem with variable demands is a complex problem having combinatorial nature and aiming at identifying the best radial topology for an EDS, in order to minimize the cost of the energy losses in a given operation period. To evaluate the feasibility of the topology regarding the operating constraints of the EDS and to calculate the active power losses for each demand level it was used a specialized sweep load flow for radial systems. The mentioned algorithms were implemented in C++. To evaluate the proposed algorithms were performed testing using test systems with 33, 84, 136, 417 and 10477 nodes. The results were compared with the ones in the literature in order to validate the efficiency and robustness of the algorithms. / Doutor

Orientador: Winston Bonetti Yoshida / Banca: Carlos Eli Piccinato / Banca: Marcone Lima Sobreira / Banca: Ana Terezinha Guilaumon / Banca: Valter Castelli / Resumo: O uso da circulação extracorpórea desencadeia uma resposta inflamatória sistêmica, que somada às reações em cadeia relacionadas à isquemia-reperfusão de coração e pulmões pode levar a lesões celulares e até falência de órgãos no pós-operatório de cirurgia cardíaca. Vários estudos foram feitos visando melhor entendimento desses processos inflamatórios associados à circulação extracorpórea. Assim, esta revisão abordará os mecanismos de isquemia-reperfusão cardiopulmonar a ativação da cascata inflamatória por esse processo e o papel dos leucócitos na fisiopatologia destas lesões. Serão consideradas as interações de proteínas imunomoduladoras na resposta leucocitária e o bloqueio das mesmas por meio de filtros biológicos, do uso de anticorpos monoclonais e do estímulo à apoptose. / Abstract: The use of extracorporeal circulation starts a whole body inflammatory response that when added with a chain reactions related to heart and lung ischemia-reperfusion may cause cellular injuries and organ failures in the cardiac surgery pos-operative period. Many studies were made to achieve better comprehension of the inflammatory process that occur with use of extracorporeal circulation. So, this review discusses the ischemia- reperfusion events, their large activated inflammatory cascade as well as the leukocytes role on the pathophysiology of their associated injuries. The interactions of immunomodulatory proteins with the leukocitary response and their blockade through leukocytes filters, the monoclonal antibody use and the apoptosis stimuli will be approached too. / Doutor

Paracoccidioidomicose (PCM) é uma doença sistêmica granulomatosa causada pelo fungo termo-dimórfico Paracoccidioides brasiliensis. A gp43 é o principal antígeno diagnóstico que contém o peptídeo de 15 aminoácidos designado como P10, que desenvolve a resposta imune do tipo Th1 dependente de IFN-<font face=\"Symbol\">g. No presente trabalho, comparamos a efetividade de diferentes adjuvantes em camundongos BALB/c infectados intratraquealmente com o isolado virulento Pb18. Alúmen, Adjuvante Completo e Incompleto de Freund, FliC flagelina e o lipídeo catiônico, foram testados em associação ou não com P10. Após 52 dias de infecção, o lipídeo catiônico mostrou os melhores resultados, com o menor número de UFCs, redução de fibrose e baixo número de células fúngicas no tecido pulmonar, além do incremento significativo de IFN-<font face=\"Symbol\">g e TNF-<font face=\"Symbol\">a e a redução dos níveis de IL-4 e IL-10. Estes resultados sugerem que a interação do peptídeo P10 com o lipídeo catiônico pode gerar uma melhor resposta imune mediada por células do tipo Th1, evitando a rápida disseminação da PCM experimental. / Paracoccidioidomycosis (PCM) is a systemic granulomatous disease caused by the dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis. The gp43 is the major diagnostic antigen that contains the peptide P10. This peptide has 15 amino acids and develops a Th1- dependent IFN-<font face=\"Symbol\">g immune response. In this work, we compare the effectiveness of different adjuvants in BALB/c mice infected intratracheally with virulent isolate Pb18. Alum, Complete Adjuvant and Incomplete Freund\'s adjuvant, fliC flagellin from Salmonella enterica and cationic lipid were tested in combination or not with P10. After 52 days of infection, the cationic lipid showed the best results with the least number of colony forming units, reduction of fibrosis, low number of fungal cells in lung tissue and the significant increase of IFN-<font face=\"Symbol\">g and TNF-<font face=\"Symbol\">a with reduced levels of IL-4 and IL-10. These results suggest that, the interaction of peptide P10 with cationic lipids can lead to a better immune response mediated by Th1 type cells by avoiding the rapid spread of experimental PCM.

Para conseguirem se alimentar com sucesso, os mosquitos hematófagos possuem componentes em sua saliva capazes de regular a hemostasia e modular a imunidade dos hospedeiros. Entretanto, a avaliação das atividades biológicas dessas moléculas no hospedeiro ainda carece de estudos mais aprofundados. No presente projeto, propomos caracterizar as atividades biológicas do produto do transcrito AET-7393, uma serpina presente nas glândulas salivares de fêmeas do mosquito Aedes aegypti. Nossos dados mostram que a serpina AET-7393 recombinante provoca um aumento no sangramento quando inoculada em camundongos, mas aparentemente esse efeito não está ligado à interferência com a cascata de coagulação. Mostramos ainda que a AET-7393 é capaz de inibir a proteinase 3 e aumentar a produção de IL-1b. Por fim, observamos a ausência de capacidade moduladora sobre a ativação de macrófagos ou sobre a inflamação, e que presença de anticorpos específicos contra a serpina no hospedeiro não interfere no ciclo de vida do mosquito. / In order to successfully feed, hematophagous mosquitoes possess salivary components capable of regulating hemostasis and modulate the host immunity. However, the evaluation of the biological activities of the salivary molecules in the host still needs further investigation. In this study, we intend to characterize the biological activities of the AET-7393, a serpin that is present in the saliva of the females Aedes aegypti mosquitoes. Our data show that the recombinant AET-7393 serpin increases bleeding when inoculated in mice, but apparently this effect is not due to its interference on the coagulation cascade. In addition, AET-7393 is able to inhibit proteinase 3 and enhance the production of IL-1b. Finally, we observed the absence of modulatory effect on macrophage activation or inflammation, and that the presence of host anti-AET-7393 antibodies does not interfere in the life cycle of the mosquitoes.

O remodelamento cardíaco é uma sequela da hipertensão. Receptores do tipo Toll (TLRs) pertencem a imunidade inata e sua ativação produz moléculas inflamatórias. O objetivo do trabalho foi avaliar a participação do TLR4 no remodelamento cardíaco de ratos espontaneamente hipertensos (SHR). Utilizamos SHR e Wistar de 6 e 21 semanas. O nível do RNAm do TLR4 de SHR de 21 semanas é maior em relação aos outros grupos. Outros grupos de Wistar e SHR de 19 semanas foram tratados com anticorpo anti-TLR4, os controles receberam anticorpo IgG inespecífico. Observamos redução no nível do RNAm do TLR4 e MyD88 e expressão protéica do TLR4, MyD88, TNF-<font face=\"symbol\">a e IL-1<font face=\"symbol\">b de SHR anti-TLR4 em relação aos SHR controle. Não houve alteração nos valores pressóricos. Verificamos redução no nível do RNAm de colágenos I e III, de metaloproteinases 2 e 9, de ANP, BNP e <font face=\"symbol\">a-actina esquelética e de deposição de colágeno, área e diâmetro de cardiomiócitos de SHR anti-TLR4 em relação aos SHR controle. Nossos resultados sugerem que o TLR4 participa do processo de remodelamento cardíaco de SHR adultos. / The cardiac remodeling is a sequel of hypertension. Toll-Like Receptors (TLR) are innate immunity receptor and its activation produces inflammatory molecules. The objective of this study was to evaluate the involvement of TLR4 in cardiac remodeling of spontaneously hypertensive rats (SHR). We used male Wistar and SHR with 6 and 21 weeks. The level of TLR4 mRNA in SHR with 21 weeks is higher than the other groups. Wistar and SHR with 19 weeks were treated with anti-TLR4 or nonspecific IgG antibody (control group). We observed a reduction in the level of TLR4 and MyD88 mRNA and protein expression of TLR4, MyD88, TNF-<font face=\"symbol\">a and IL-1<font face=\"symbol\">b in anti-TLR4 SHR compared to control SHR. There was no change in blood pressure values in SHR after anti-TLR4 treatment. We observed reduction in mRNA level of collagens I and III, metalloproteinases 2 and 9, ANP, BNP, <font face=\"symbol\">a-skeletal actin, collagen deposition, cardiomyocyte area and diameter in anti-TLR4 SHR compared to control SHR. Our results suggest that TLR4 participates of cardiac remodeling process in adults SHR.

Investigamos o agonista de Guanilato Ciclase solúvel, BAY 41-2272, como alternativa para compensar falhas nas funções de monócitos. Avaliamos in vitro o efeito do fármaco em células humanas de linhagem e de sangue periférico. O BAY, em células THP-1 e monócitos, aumentou a expressão de CD11b, CD18, CD14, TLR4, TLR2 e CD163 e induziu a produção de TNF-<font face=\"Symbol\">a, IL-1<font face=\"Symbol\">b, IL-6 e IL-12p70. Além disso, o fármaco aumentou a expressão gênica (CYBB, CYBA e NCF2) e protéica (p67PHOX e gp91PHOX) da NADPH oxidase. Ainda, o BAY ativa a via do NF-kB (p65) (dependente de PKG). Mais importante, o fármaco aumentou a atividade microbicida de monócitos de pacientes com DGC e deficiência de MPO a S. aureus e C. albicans. Em animais, o BAY 41-2272 induziu intenso influxo de macrófagos para o peritônio e inflamação. Ainda, potencializou o espraiamento, atividade fagocítica, atividade microbicida, produção espontânea de óxido nítrico e de peróxido de hidrogênio induzida por PMA, em macrófagos peritoneais, aumentando a proteção dos animais desafiados com C. albicans. Em conjunto, nossos resultados confirmam o potencial do BAY 41-2272, ou sua via (GCs/PKG), como alternativa para o desenvolvimento de terapias contra infecções. / We investigated the soluble guanylate cyclase agonist, BAY 41-2272, as an alternative to compensate for failures in of monocytes function. We evaluated the in vitro effect of the drug on human cells lines and peripheral blood cells. The BAY increased expression of CD11b, CD18, CD14, TLR4, TLR2 and CD163 and induce the production of TNF-<font face=\"Symbol\">a, IL-1<font face=\"Symbol\">b, IL-6 and IL-12p70 in THP-1 cells and monocytes. Furthermore, the drug increased NADPH oxidase gene (CYBB, CYBA and NCF2) and protein (gp91phox and p67phox) expression. Also, BAY activates the PKG-dependent NF-kB pathway (p65). More importantly, the drug increased microbicidal activity against S. aureus and C. albicans of monocytes from patients with CGD and MPO deficiency. In animals, BAY 41-2272 induced intense influx of macrophages to the peritoneum and inflammation. BAY potentiated the spreading, phagocytic activity, microbicidal activity, spontaneous production of nitric oxide and PMA-induced hydrogen peroxide release by peritoneal macrophages, increasing host protection against C. albicans. Taken together, our results confirm the potential of BAY 41-2272, or its pathway (sGC / PKG), as an alternative for the development of therapies against infections.

Nosso objetivo foi verificar a participação do TLR4 na pressão arterial e reatividade vascular em ratos SHR. O TLR4 está mais expresso em artérias mesentéricas de resistência de SHR com 15 semanas do que em Wistar com 15 e SHR com 5 semanas. SHR e Wistar com 15 semanas foram tratados com anti-TLR4 (1mg/dia) ou IgG (controle) por 15 dias via i.p. A expressão do TLR4, MyD88, a fosforilação da P38 e NF-kB p65, e a secreção de IL-6 foi menor nos SHR anti-TLR4 do que nos SHR IgG. Os SHR tratados com anti-TLR4 apresentaram redução na pressão arterial versus SHR IgG. A resposta máxima ao KCl e à noradrenalina (NA) foram normalizadas após o uso do anti-TLR4 no SHR, por vias dependentes de COX-1, COX-2 e do NF-kB. O uso do L-NAME diminuiu a resposta contrátil à NA no SHR IgG sendo que o anti-TLR4 melhorou essa resposta em SHR. O anti-TLR4 aumentou a expressão da eNOS e preveniu a geração de espécies reativas de oxigênio em SHR. Sugerimos que o TLR4 está associado com o aumento da pressão arterial e com a disfunção vascular presente na hipertensão arterial. / Our objective was to investigate the role of TLR4 in blood pressure and vascular reactivity in SHR. TLR4 is more expressed in mesenteric resistance arteries from SHR 15 week than in Wistar with 15 and SHR 5 weeks. Wistar and SHR with 15 weeks were treated with anti-TLR4 (1mg/dia) or IgG (control) for 15 days via ip. The expression of TLR4, MyD88, phosphorylation of p38 and NF-kB p65, and IL-6 secretion was lower in SHR TLR4 than in SHR IgG. SHR treated with anti-TLR4 had reduced blood pressure versus SHR IgG. The maximal response to KCl and noradrenaline (NA) were normalized after anti-TLR4 treatment in SHR by mechanisms dependent on COX-1, COX-2 and NF-kB. The use of L-NAME decreased the contractile response to NA in SHR IgG and anti-TLR4 improved this response in SHR. The anti-TLR4 increased eNOS expression and prevented the generation of reactive oxygen species in SHR. We suggest that the TLR4 is associated with increased blood pressure and vascular dysfunction in hypertension.

Os esteróides gonadais exercem importantes influências no direcionamento da resposta imune do hospedeiro frente à infecção. Alterações decorrentes de sua ausência ou reposição podem significar em uma evolução distinta de determinada parasitose. Existe também uma relação entre a produção de melatonina e o ritmo de atividade do sistema imune. A resposta imune depende de uma interação entre inúmeros hormônios que irão agir sinergicamente com distintas células imunes. O objetivo desse trabalho foi investigar o efeito dos hormônios sexuais masculinos, através da orquiectomia, e da administração oral de melatonina sobre a resposta imune de ratos Wistar machos infectados com a cepa Y de Trypanosoma cruzi, durante a fase aguda da doença de Chagas experimental. Inúmeros parâmetros foram avaliados, entre eles: parasitemia, histologia cardíaca, peso dos animais e órgãos, linfoproliferação de timócitos e esplenócitos, quantificação de macrófagos, dosagem de óxido nítrico, citometria de fluxo para avaliação das populações de CD3+CD4+ e CD3+CD8+; e ensaios imunológicos como IFN-gama, IL-2, IL-6, IL-12, IL-10. Observou-se em todos os parâmetros analisados a ação sinérgica da melatonina e da orquiectomia sobre o sistema imune, favorecendo uma resposta positiva contra o parasita na fase aguda da infecção. Dessa forma, concluiu-se que a melatonina e a redução dos hormônios sexuais masculinos exerceram um papel imunoestimulador importante, que se refletiu em uma resposta mais efetiva do hospedeiro durante a infecção experimental. / Gonadal steroids exert important influence in the host immune response during infection. Changes resulting from the absence or replacement of these hormones may represent a distinct evolution of a particular parasite. There is also a relationship between melatonin production and the rhythmic activity of the immune system. The immune response depends on the interaction of many hormones that will act synergistically with other immune cells. The objective of this research was to evaluate the effect of male sex hormones through orchiectomy, and oral administration of melatonin on the immune response of male Wistar rats infected with the Y strain of Trypanosoma cruzi, during the acute phase of experimental Chagasdisease. Several parameters were evaluated among them: quantification of blood parasites, heart histology, body weight of animals and organs, lymphoproliferation of thymocytes and splenocytes, quantification of peritoneal macrophages, nitric oxide concentration, alterations in CD3+CD4+ and CD3+CD8+ lymphocyte populations by flow cytometry and immunological assays, as IFN-gama, IL-2, IL-6, IL-12, IL-10. It was observed in all parameters examined the synergistic action of melatonin and orchiectomy on the immune system, promoting a positive response against the parasite in the acute phase of infection. Thus, it was concluded that melatonin and the absence of male sex hormones exerted an important immunostimulating role, which reflected a more effective hosts response during the experimental infection.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-04-20Bitstream added on 2014-06-13T20:40:27Z : No. of bitstreams: 1 matos_dc_dr_arafcf.pdf: 766440 bytes, checksum: d75671cd6c4bdad30b7d9a66e5d5621d (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O termo “câncer” corresponde ao conjunto de cerca de 100 doenças que têm em comum uma divisão celular desordenada invadindo os tecidos e órgãos, podendo metastatisar para outras regiões do corpo. Os tumores de mama e de colo do útero são os tipos mais frequentes no sexo feminino, e as estimativas para 2012, no Brasil, são de 52.680 e 17.540 novos casos, respectivamente. Abrina, obtida de sementes de Abrus precatorius é uma proteína inativadora de ribossomos (RIPs) do tipo 2, compostas por duas cadeias peptídicas, uma apresentando atividade enzimática N-glicosidase e a outra atividade lectínica com afinidade a β-D-galactose. Neste estudo, avaliamos o potencial antitumoral contra o câncer de mama de abrina em um modelo de câncer mamário murino já estabelecido em nosso laboratório, concomitante à avaliação dos efeitos imunológicos do tumor e da proteína testada no animal. Para isso avaliamos a partir dos tumores e células do sistema imunológico retirados dos animais do estudo, o percentual de inibição do crescimento e angiogênese tumorais, o percentual de células imunes e de células apoptóticas no peritôneo e baço, a produção de citocinas e mediadores químicos produzidos pelas células imunes. Com base nos resultados obtidos, observou-se que o tratamento com abrina (7,5μg/kg) apresentou eficácia similar ao da droga padrão pois apresentou infiltrado inflamatório misto dentro tumor, percentuais de inibição de crescimento e de angiogênese tumorais, e de células NK e NKT esplênicas similares ao tratamento padrão (doxorrubicina - 6mg/kg); em contrapartida apresentou menor quantidade de macrófagos peritoneais e células dendríticas esplênicas ativadas, células T CD8+ citotóxicas e células T regs (CD25+Foxp3+), e maior percentual de células T CD4+, maior produção de H2O2, IL- 1β, IL-6 e IL-12 por células peritoneais... / The word Cancer corresponds to a group with about 100 diseases which have in common a disordered cell division, resulting in tissues and organs invasion and also metastasis to other body regions. Breast and cervix tumours are the most common type in women and, in Brazil, the estimates for 2012 are of 52,680 and 17,540 new cases respectively. Abrin is obtained from Abrus precatorius seeds being type 2 ribosome inactivating protein (RIP) composed of two peptide chains, one of them possessing N-glycosylase enzyme activity and the other a lectinic activity with affinity for β-D-galactose. In the present work, the antitumour potencial of abrin against breast cancer was evaluated employing a murine breast cancer model already established in our laboratory and concomitantly determining the immunologic effects of the tumour and the protein in mice. From tumours and immune cells isolated from mice belonging to the different experimental groups, the tumour growth inhibition rate and angiogenesis were determined, the percentage of immune and apoptotic cells in the peritoneum and spleen, and also the production of immunologic mediators by immune cells. Based on the results it was found that treatment with abrin (7.5μg/kg) was as effective as the standard drug (doxorubicin - 6 mg/kg) considering that inflammatory tumour infiltrate, tumour growth inhibition and angiogenesis rate, as well as splenic NK and NKT cells percentage were similar. However, abrin-treated animals had a lower percentage of cytotoxic CD8+ and Treg (CD25+Foxp3+) cells as well as activated peritoneal macrophages and splenic dendritic cells accompanied by a higher percentage of CD4+ T cells and increased production of H2O2, IL-1β, IL-6 and Il-12 by peritoneal macrophages and IL-10, IFNγ and TGF-β by splenic lymphocytes. Moreover, abrin-treated animals presented a higher percentage... (Complete abstract click electronic access below)