Orientador: Alexandrina Sartori / Resumo: A vitamina D (VitD) ativa possui várias funções importantes incluindo efeitos imunomoduladores na imunidade inata e na específica. A deficiência desta vitamina já alcançou proporções epidêmicas em várias regiões e por isto sua suplementação tem sido sugerida em algumas doenças. Diferentes linhagens de camundongos têm sido utilizadas para avaliar os efeitos imunomoduladores da VitD. O estudo dos efeitos da deficiência e da suplementação com VitD tem sido realizado em seres humanos e também em linhagens isogênicas de camundongos. Neste trabalho comparamos o efeito da suplementação com 0,1 µg de VitD e de paricalcitol nas linhagens murinas C57BL/6 e DBA/1J. Estes animais foram injetados com 0,1 µg de VitD ou paricalcitol durante 15 dias, em dias alternados. O peso corporal foi avaliado diariamente e sangue e baço foram coletados 24 horas após a última dose. Na linhagem C57BL/6 a VitD diminuiu o peso corporal e aumentou a concentração de cálcio sérico. Em relação aos parâmetros imunológicos, houve diminuição da produção de citocinas por células esplênicas e maior expressão de MHC II nas células dendríticas. O paricalcitol não afetou o peso corporal e o nível de cálcio sérico, mas diminuiu a produção de citocinas nesta linhagem. Com exceção do peso corporal que diminuiu, os demais parâmetros não foram afetados pela VitD ou pelo paricalcitol nos camundongos DBA/1J. A suplementação com 0,2 µg de VitD nos animais DBA/1J desencadeou a diminuição de peso corporal, queda na produção de ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Orientador: José Rafael Modolo / Coorientador: Helio Langoni / Banca: Antonio Carlos Paes / Banca: Carlos Roberto Padovani / Banca: Sílvio Arruda Vasconcellos / Banca: Lígia Barrozo Simões / Resumo: A leptospirose é uma zoonose cosmopolita que acomete animais domésticos, silvestres e roedores. Entre os domésticos, em nível urbano, no Brasil, os cães são as principais fontes de infecção para os seres humanos. Em 20 postos distribuídos homogeneamente pela área territorial urbana de Botucatu, SP, foram colhidas 1 000 amostras de sangue de cães. Foi utilizado para diagnóstico a soroaglutinação microscópica (SAM) com 24 sorovares de Leptospira spp. Houve 179 soros caninos reagentes. Cães de idade acima de cinco anos (66/248) foram os que apresentaram maior freqüência de sororeagentes, demonstrando diferença significativa (p<0,05). Os machos (110/548) apresentaram maior freqüência de sororeagentes que as fêmeas (69/452) (p<0,05). Cães sem raça definida (127/670) apresentaram maior freqüência absoluta que os com raça (52/330), porém não houve diferença significativa (p>0,05). Entre os cães que tiveram contato com outros animais (cão/gato/bovino/eqüino) (7/11) houve maior freqüência de sororeagentes (p<0,05). Entre os animais que tinham acesso a águas (23/107) houve maior freqüência de sororeagentes que os sem acesso (156/893), contudo não ocorreu diferença significativa (p>0,05). Os cães com acesso a córrego/lago (5/13), apresentaram maior freqüência de sororeagentes, porém não houve diferença significativa (p>0,05). Alimentados com ração/caseira (70/285) foram mais sororeagentes (p<0,05). A quantidade de cães sororeagentes dos proprietários que não deixaram alimento e água durante a noite (65/326) foi mais elevada (p>0,05). Houve maior freqüência de sororeagentes para leptospirose entre os cães de proprietários com formação de ensino fundamental (122/627) (p<0,05). Em proprietários com renda de um a três salários mínimos houve maior quantidade de cães sororeagentes (83/411) (p<0,05). O posto da Vila São Luís apresentou... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Leptospirosis is a cosmopolitan zoonosis that affects domestic and wild animals, and rodents. Among the domestic animals, in urban environment, in Brazil, dogs are the main source of infection for human beings. In 20 points distributed homogenously for urban territorial area of Botucatu, SP, 1 000 blood samples of dogs were collected. Microscopic agglutination test (MAT) was used to the diagnosis, with 24 serovars of Leptospira spp., there were 179 canine sera reagents. Dogs with age over than five years (66/248) were those that presented higher frequency of reagents, demonstrating significative difference (p<0.05). Male dogs (110/548) presented higher frequency of reagents than females (69/452) (p<0.05). Dogs without defined breed (127/670) presented higher absolute frequency than those with breed (52/330), but there was not significative difference (p>0.05). Among the dogs that had contact with other animals (dog/cat/bovine/equine) (7/11) there was higher frequency of reagents (p<0.05). Among the animals that had access to waters (23/107) there was higher frequency of reagents than those without access (156/893), however did not occur significative difference (p>0.05). In the dogs with access to stream/lake (5/13), presented higher frequency of reagents, but there was not significative difference (p>0.05). Those fed with concentrate/homely food (70/285) were more reagents (p<0.05). The quantity of dogs reagents from owners that did not offer food and water during the night (65/326) was higher (p>0.05). There was higher frequency of reagents to leptospirosis among the dogs from owners with basic teaching formation (122/627) (p<0.05). In owners with income of one to three minimum wages there was higher quantity of dogs reagents (83/411) (p<0.05). Vila São Luís point presented higher quantity (44.2%) and the lower was the one from COHAB - V (6.0%). Twenty serovars... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Márcio Garcia Ribeiro / Banca: Paulo Francisco Domingues / Banca: André Mendes Jorge / Banca: Lília Paulin / Banca: Daniel Moura de Aguiar / Resumo: O perfil sorológico de 21 fêmeas bubalinas vacinadas entre três a oito meses de idade, com amostra-padrão da vacina B19 (Brucella abortus), foi avaliado pelas provas do antígeno acidificado tamponado corado com rosa bengala (AAT), 2-mercaptoetanol (2-ME) e fixação de complemento (FC). As colheitas foram realizadas no dia zero (vacinação), 15, 30, 45,60 e, subsequentemente, a cada 30 dias até o 720o dia pós-vacinal. Nenhum animal foi reagente no dia zero. No 15o dia pós-vacinal, acima de 95% dos animais reagiram em todas as provas. Os títulos máximos na soroaglutinação lenta em tubos e 2- mercaptoetanol foram obtidos entre 15o e 45o dia após a vacinação. Entre 120 e 150 dias foi observado o declínio das reações nos animais em todas as provas. Na FC, AAT e 2-ME todos os animais resultaram não reagentes, respectivamente, aos 270, 300 e 360 dias da vacinação. Nenhum dos animais apresentou oscilação de títulos ou reações nas três provas após 360 dias de acompanhamento. / Abstract: The serological profiles of 21 female buffaloes, vaccinatedd at three to eight months of age using the B19 standard strain of Brucella abortus were evaluated by rose bengal plate, 2-mercaptoethanol and complement fixation tests. The serum samples were collected in day zero (vaccination), 15, 30, 45, 60th and, subsequently to each 30 months, until 720th day after vaccination. No animal showed reaction in day zero. In 15th day, more tham 95% of animals showed reaction in all tests. The maximum levels of antibodies detected by the tube agglutination and 2-mercaptoethanol tests were found between the 15 and 45th days after vaccination. Between 120 and 150 days after vaccination was observed decreased of reactions in all the tests. All the animals showed absence of reactions in complement fixation, rose bengal plate and 2- mercaptoethanol tests at 270, 300 and 360 days respectively after vaccination. None of animals presented oscillation of titers on reactions in any test after 360 day of study. / Doutor

Orientador: José Maurício Sforcin / Banca: Sandra Cordellini / Banca: Glenda Nicioli da Silva / Resumo: O estresse pode exercer atividades imunossupressoras, acarretando o desenvolvimento de doenças como câncer, inflamações crônicas, neurodegeneração, autoimunidade, além de maior susceptibilidade a infecções por microrganismos. Os recém-descobertos receptores Toll-like (TLRs) têm sido extensamente investigados recentemente por reconhecer microrganismos patogênicos, ativando, consequentemente, a resposta imune. Devido ao pouco conhecimento quanto ao papel da própolis no sistema imune desafiado pela ação do estresse, o objetivo deste trabalho foi verificar o possível efeito deste apiterápico sobre a produção de citocinas pró-inflamatórias (IL-1β e IL-6) e de padrão Th1 (IFN-γ e IL-2) e Th2 (IL-4 e IL-10), e sobre a expressão do receptor TLR-4 por células esplênicas de camundongos submetidos a estresse. Camundongos BALB/c foram divididos em 3 grupos: G1 (controle), G2 (estresse) e G3 (própolis + estresse). G2 foi submetido a estresse por imobilização por 3 dias consecutivos, e G3 foi tratado com própolis e submetido a estresse. Após o sacrifício, o sangue foi coletado para a dosagem de corticosterona, como indicador de estresse. O baço de cada animal foi extraído e culturas celulares foram estimuladas com LPS por 24h ou com Con A por 48 h para determinação da produção de citocinas. Parte do baço foi utilizada para a realização de PCR quantitativo em tempo real a fim de verificar a expressão gênica de TLR-4 pelas células esplênicas. Os grupos submetidos a estresse, tratados ou não com própolis, apresentaram aumento na concentração de corticosterona. Houve inibição na produção de IL-1β e IL-6 nestes mesmos grupos, em comparação ao controle. Não houve alterações na produção de IL-2 em nenhum dos grupos, enquanto que a de IFN-γ esteve inibida nos grupos submetidos a estresse, tratados ou não com própolis. Já a produção de IL-4... (resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Stress can exert immunossupressive activities, which lead to the development of diseases such as cancer, chronic inflammation, neurodegenerative dysfunctions, autoimmunity and a higher susceptibility to infectious microorganisms. Recently, Tolllike receptors (TLRs) have been widely investigated for recognizing pathogenic microorganisms and, as a consequence, activating the immune response. Since little is known about propolis effects on the immune system challenged by stress, the aim of this work was to verify the possible effect of this bee product on pro-inflammatory (IL- 1β and IL-6), Th1 (IFN-γ and IL-2) and Th2 (IL-4 and IL-10) cytokines and on TLR-4 expression by spleen cells from stressed mice. BALB/c mice were divided into 3 groups: G1 (control), G2 (stress) and G3 (propolis + stress). G2 was submitted to restraint stress for 3 consecutive days and G3 was treated with propolis and immediately submitted to stress. After sacrifice, blood was collected for corticosterone determination as a stress indicator. Spleens of all groups were removed and cell cultures were stimulated with LPS for 24h or with Con A for 48 h to further cytokines determination. A portion of the spleens was used for quantitative PCR real time assay in order to verify TLR-4 gene expression. An increased corticosterone concentration was seen in stressed groups, treated or not with propolis. IL-1β and IL-6 production was inhibited in these same groups, comparing to control. No alterations were found in IL-2 production in the experimental groups, while IFN-γ was inhibited on stressed group even when treated with propolis. IL-4 production was inhibited on stressed mice, but propolis treatment was able to antagonize this inhibition. There were no alterations in IL-10 production between the experimental groups. TLR-4 expression was inhibited in stressed mice, but propolis treatment exerted... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Ismael Forte Freitas Júnior / Coorientador: Marcelo Papoti / Banca: Patrícia Monteiro Seraphim / Banca: Alessandro Moura Zagatto / Resumo: Os objetivos do presente estudo foram analisar a validade do glicosímetro portátil, para avaliação da capacidade aeróbia. Para isso dois estudos foram realizados no intuito de: I) verificar a reprodutibilidade do limiar glicêmico (LG), determinado por meio de glicosímetro portátil e compará-lo à intensidade de máxima fase estável de lactato (MFEL). II) comparar as intensidades de limiar anaeróbio determinado por parâmetros glicêmicos (LG), lactacidêmicos (LAN) e ventilatórios (PCR). No estudo I, nove indivíduos foram submetidos a dois testes incrementais para verificação da reprodutibilidade dos valores. Para comparação a MFEL, além de um teste incremental, dezesseis participantes realizaram de dois a quatro esforços constantes com duração de 30min para a determinação da MFEL (todos em esteira rolante). Os resultados mostraram que o LG da situação teste (11±1,2 km·h-1) e reteste (11±1,2 km·h-1) não foram diferentes, apresentaram significativo coeficiente de correlação intraclasse (ICC= 0,70) e baixo ET (0,47 km·h-1). Embora os valores de LG (10,7±1,4) e MFEL (10,2±1,5) não tenham sido significativamente diferentes e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aims of this study were to analyze the validity of the portable glucometer to evaluate aerobic capacity. For two studies that were conducted in order to: I) verify the reproducibility of glycemic threshold (LG), determined using portable glucometer and compare it to the intensity maximum lactate steady state (MLSS). II) compare intensities of anaerobic threshold determined by glycemic parameters (LG), analysis lactate (LAN) and ventilation (RCP). As I study, nine subjects underwent two incremental tests (treadmill) to determine the reproducibility of values. To compare the MLSS, plus an incremental test, sixteen participants performed two to four constant efforts lasting 30 min for the determination of MLSS. The results showed that the LG situation test (11 ± 1.2 km·h-1) and retest (11 ± 1.2 km·h-1) were not different, showed significant intraclass correlation coefficient (ICC = 0, 70) and low ET (0.47 km·h-1). Although the values of LG (10.7 ± 1.4) and MLSS (10.2 ± 1.5) were not significantly different and highly correlated... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: José Maurício Sforcin / Resumo: O estresse compreende uma multiplicidade de eventos, envolvendo o sistema imune e ativação do sistema nervoso autônomo, bem como a ativação do eixo hipotálamo-pituitária-adrenal, com conseqüente aumento de catecolaminas e glicocorticóides, respectivamente. Além do papel imunomodulador dos leucotrienos na síntese de citocinas, este mediador contribui para a produção de óxido nítrico (NO), o qual é importante no controle da replicação de fungos, bactérias e vírus. Estudos sobre a participação de leucotrienos e intermediários reativos do oxigênio contribuem para uma melhor compreensão da resposta imune durante o estresse. O objetivo deste trabalho foi avaliar a ação de um inibidor de leucotrienos (MK 886), in vivo e in vitro, sobre o estado de ativação de macrófagos peritoneais de camundongos BALB/c submetidos a estresse por imobilização, determinando a produção de intermediários reativos do oxigênio (H2O2) e do nitrogênio. Animais submetidos a estresse agudo ou crônico não apresentaram alterações significativas na produção de H2O2 e NO. Entretanto, macrófagos de animais submetidos a estresse agudo ou crônico e estimulados in vitro com MK 886 apresentaram inibição na geração de NO. Animais submetidos a estresse crônico e tratados com MK 886 apresentaram elevação na geração de H2O2 e inibição na produção de NO. Nossos resultados sugerem um importante papel dos leucotrienos quanto à síntese de NO, o qual é importante no controle da replicação de agentes infecciosos, principalmente em animais estressados e imunossuprimidos. / Abstract: Stress comprises a great variety of events involving the immune system and the central nervous system, providing evidence for autonomic pathways and endocrine modulation of the immune response following stress exposure. Besides the immunomodulatory role of leukotrienes in cytokines synthesis, this mediator contributes for nitric oxide (NO) production, which is important to the control of fungi, bacteria and virus replication. Studies regarding the involvement of leukotrienes and oxygen (H2O2) and nitrogen intermediates contribute for a better comprehension of the immune response during stress. The objectives of this research were to evaluate peritoneal macrophages activation as well as to observe the effect of a leukotrienes inhibitor (MK 886) in mice submitted to immobilization stress. Mice submitted to acute or chronic stress showed no alterations in H2O2 and NO production. However, macrophages of acute or chronic stressed-mice and stimulated in vitro with MK 886 showed NO inhibition. Chronically stressed-mice treated with MK 886 showed an increase in H2O2 generation and inhibited NO production. Our data suggest an important role of leukotrienes with regards to NO synthesis, which is important to control several infectious agents replication, mainly in stressed and immunossupressed animals. / Mestre

Orientador: Carlos Alberto de Magalhães Lopes / Banca: Eduardo Bagagli / Banca: Hélio Langoni / Banca: Ida Maria Foschiani Dias Baptista / Banca: Patrícia Sammarco Rosa / Resumo: A hanseníase é, ainda hoje, um problema global de saúde pública. O Brasil e a Índia são os países com maior prevalência da doença. A existência de tatus Dasypus novemcinctus naturalmente infectados por Mycobacterium leprae foi relatada nos Estados Unidos, México, Argentina e no Brasil, no Estado do Espírito Santo. Micobactérias potencialmente patogênicas e algumas ambientais já foram isoladas destes animais. A identificação do bacilo é dificultada, particularmente pela sua incapacidade de crescimento in vitro. Portanto, o uso de ferramentas moleculares representa uma alternativa mais rápida e sensível para diagnóstico de micobacterioses. Neste trabalho foram feitas baciloscopia, cultura e PCR com primers específicos para seqüências repetitivas de M. leprae, a partir de DNA extraído de amostras de fígado, baço, linfonodos e pele de 21 tatus D. novemcinctus, Euphractus sexcintus e Cabassous tatouay provenientes da região Centro-Oeste do Estado de SP, dos quais 17 eram provenientes do Banco de DNA do Laboratório de Biologia de Fungos do Departamento de Microbiologia e Imunologia - IBB. Para a padronização da metodologia foram utilizados hamsters experimentalmente infectados por M. avium e o modelo experimental para hanseníase (D. novemcinctus) do Biotério de Experimentação Animal do Instituto Lauro de Souza Lima, Bauru-SP. Com exceção de dois tatus, cujas amostras fezes foram positivas pela PCR, nenhum tatu selvagem apresentou infecção natural por micobactérias. Somente o tatu inoculado com biópsia de paciente virchowiano foi positivo, tanto na PCR, quanto no seqüenciamento genômico, que revelou 100% de identidade com o M. leprae. Os resultados preliminares deste estudo, com base na metodologia empregada, sugerem que existe um indicativo de que os tatus selvagens podem apresentar papel de reservatório de M. leprae na cadeia epidemiológica da doença, na região estudada. / Abstract: Leprosy is still a worldwide public health problem. Brazil, in addition to India, show the highest prevalence rates of the disease. Natural infection of armadillos Dasypus novemcinctus with Mycobacterium leprae has been reported in the United States, Mexico, Argentina and Brazil, in the State of Espírito Santo. Potentially pathogenic and ambiental mycobacteria have been isolated from these animals. Identification of bacilli is difficult, particularly because its inability to grow in vitro. The use of molecular tools represent a fast and sensitive alternative method for diagnosis of mycobacteriosis. In the present study, the diagnostic methods used were bacilloscopy, culture and PCR using specific primers for M. leprae repetitive sequences. The PCR were performed using genomic DNA extracted from liver, spleen, lymphnodes and skin of 21 D. novemcinctus, Euphractus sexcintus and Cabassous tatouay armadillos from the Middle Western region of the State of São Paulo. From those, 17 samples were taken from the DNA Bank of the Fungal Biology Laboratory at Department of Microbiology and Immunology IB - Botucatu, UNESP. Standardization of the technique was done in M. avium experimentally infected hamsters and M. leprae experimentally infected D. novemcinctus tissue from the Laboratory Animal House at Instituto Lauro de Souza Lima, Bauru-SP. No one of the wild armadillos showed natural mycobacterial infection. Only the armadillo inoculated with material collected from untreated multibacillary leprosy patient was PCR positive. The genomic sequencing revealed 100% identity with M. leprae. According to these preliminary studies, based on the methodology, we may conclude that wild armadillos seem play a role on epidemiology of leprosy in the Middle Western region of the State of São Paulo. / Doutor

O remodelamento cardíaco é uma sequela da hipertensão. Receptores do tipo Toll (TLRs) pertencem a imunidade inata e sua ativação produz moléculas inflamatórias. O objetivo do trabalho foi avaliar a participação do TLR4 no remodelamento cardíaco de ratos espontaneamente hipertensos (SHR). Utilizamos SHR e Wistar de 6 e 21 semanas. O nível do RNAm do TLR4 de SHR de 21 semanas é maior em relação aos outros grupos. Outros grupos de Wistar e SHR de 19 semanas foram tratados com anticorpo anti-TLR4, os controles receberam anticorpo IgG inespecífico. Observamos redução no nível do RNAm do TLR4 e MyD88 e expressão protéica do TLR4, MyD88, TNF-<font face=\"symbol\">a e IL-1<font face=\"symbol\">b de SHR anti-TLR4 em relação aos SHR controle. Não houve alteração nos valores pressóricos. Verificamos redução no nível do RNAm de colágenos I e III, de metaloproteinases 2 e 9, de ANP, BNP e <font face=\"symbol\">a-actina esquelética e de deposição de colágeno, área e diâmetro de cardiomiócitos de SHR anti-TLR4 em relação aos SHR controle. Nossos resultados sugerem que o TLR4 participa do processo de remodelamento cardíaco de SHR adultos. / The cardiac remodeling is a sequel of hypertension. Toll-Like Receptors (TLR) are innate immunity receptor and its activation produces inflammatory molecules. The objective of this study was to evaluate the involvement of TLR4 in cardiac remodeling of spontaneously hypertensive rats (SHR). We used male Wistar and SHR with 6 and 21 weeks. The level of TLR4 mRNA in SHR with 21 weeks is higher than the other groups. Wistar and SHR with 19 weeks were treated with anti-TLR4 or nonspecific IgG antibody (control group). We observed a reduction in the level of TLR4 and MyD88 mRNA and protein expression of TLR4, MyD88, TNF-<font face=\"symbol\">a and IL-1<font face=\"symbol\">b in anti-TLR4 SHR compared to control SHR. There was no change in blood pressure values in SHR after anti-TLR4 treatment. We observed reduction in mRNA level of collagens I and III, metalloproteinases 2 and 9, ANP, BNP, <font face=\"symbol\">a-skeletal actin, collagen deposition, cardiomyocyte area and diameter in anti-TLR4 SHR compared to control SHR. Our results suggest that TLR4 participates of cardiac remodeling process in adults SHR.

As células dendríticas (DCs) são as principais células apresentadoras de antígenos (APCs). Foi proposto que as DCs selecionam os Ags que serão apresentados em MHC-II baseado na presença de ligantes para TLR na partícula fagocitada. Contudo, esse fenômeno não foi estudado em classe I. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar se o acoplamento de Ags particulados a um agonista de TLR melhoraria a apresentação cruzada (AC) dos mesmos por DCs humanas tratadas com as moléculas acopladas. Nós vimos que a presença de um ligante de TLR no material fagocitado não contribuiu nem para a maturação do fagossomo, nem para a via endossômica de AC. A AC não envolve acidificação endossômica e depende de moléculas de MHC recém-sintetizadas do retículo endoplasmático. Nossos dados confirmam também a importância do estado de maturação das DCs para a indução de proliferação de LT CD8+, embora este não tenha sido associado com o nível de apresentação do complexo MHC-I/peptídeo, ou com as moléculas normalmente utilizadas para indicar a maturação das DCs. / Dendritic cells (DCs) are the main antigen presenting cells (APCs). It was proposed that DCs select the Ags that will be presented at their surfaces on class II based on the presence of a TLR-ligand on the cargo. However, the relevance of the coupling of the Ag to a TLR-ligand on class I was not yet addressed. Thus, the goal of this study was to investigate whether the coupling of particulate Ags to a TLR-agonist improve the cross-presentation (CP). We saw that the CP does not involve endosomal acidification and it relies on newly synthesized MHC-I molecules from the endoplasmic reticulum. Also, the presence of a TLR-ligand on the cargo neither contributed to the phagosome maturation nor to the endosomic route of CP. Furthermore, the maturation status of DCs was crucial for the induction of CD8+ T cells proliferation. Although the coupling of the Ag to the adjuvant has neither changed the expression of the markers related to maturation nor the presentation of the complex MHC-I/peptide at the DC surface, it affected its capacity of stimulating CD8+ T cells.

O objetivo deste trabalho foi estudar o efeito da endotoxina durante a sensibilização com extrato de Blomia tropicalis (Bt) Para induzir a alergia pulmonar experimental, camundongos foram sensibilizados s.c. com Bt adsorvido ao alum em presença ou não de LPS e desafiados i.n. com Bt. Os animais sensibilizados e desafiados com de Bt apresentaram intensa inflamação pulmonar eosinofílica, AHR, grande produção de muco, aumento na produção de citocinas do tipo 2 no lavado broncoalveolar (BAL) e aumento de IgE. Quando o LPS foi adicionado, observou-se inibição no influxo de eosinófilos e aumento no influxo de neutrófilos no BAL. O LPS também inibiu IL-4 e IL5 e aumentou IFN<font face=\"Symbol\">g e IL-17. Surpeendentemente, o LPS não afetou a AHR, nem a produção de IgE. Utilizando animais nocautes, verificou-se que a inibição eosinofílica induzida pelo LPS é dependente de IFN<font face=\"Symbol\">g e MyD88 enquanto que o aumento de neutrófilos é independente de IFN<font face=\"Symbol\">g e dependente da sinalização dos TLR2, TLR4 e CD14. Além disso, na ausência de TLR2, TLR4 ou CD14, o LPS suprimiu a alergia pulmonar experimental. Em conclusão, os resultados indicam que camundongos sensibilizados com Bt e LPS co-adsorvidos ao alum desenvolvem um fenótipo de asma não clássico, dependente da sinalização pelos TLR. / The aim of this work was to study the effects of endotoxin during sensitization with Blomia tropicalis extract (Bt). To induce experimental allergic airways, mice were sensitized s.c. with Bt with or without LPS co-adsorbed onto alum, and challenged i.n. with Bt. Wild type mice sensitized and challenged with HDM showed eosinophilic lung inflammation, Arway hyperactivity (AHR), mucus hyperproduction, increased levels of type 2 cytokines in the bronchoalveolar lavage (BAL) fluid, and augmented total IgE. When LPS was added at the sensitization, we observed an inhibition of eosinophil influx and an increase in neutrophil counts in the BAL. Moreover, LPS inhibited IL-4 and IL-5 production and increased IFN-<font face=\"Symbol\">g and IL-17 production. Surprisingly, LPS did not affect AHR or IgE production. Using knockout mice, we found that the eosinophilic inhibition induced by LPS was dependent on IFN<font face=\"Symbol\">g and MyD88, while the neutrophilic increase was independent of IFN<font face=\"Symbol\">g and dependent on TLR2, TLR4 and CD14 signaling. Moreover, in the absence of TLR2, TLR4 or CD14, LPS suppressed AAD. In conclusion, our results indicate that mice sensitized with Bt and LPS co-adsorbed to alum develop a non-classical asthma-like phenotype that is dependent on TLR signaling.