O presente trabalho estuda a eficácia e a toxicidade de algumas associações medicamentosas no tratamento da tuberculose pulmonar em 119 doentes,hospitalizados. O critério de seleção dos doentes foi o da normalidade das provas de função hepática, renal, taxa de glicemia e da contagem de plaquetas, antes do início do tratamento, em doentes com tuberculose pulmonar comprovada pelo exame bacteriológico. Foram estudados quatro esquemas terapêuticos: isoniazida-estreptomicina-etambutol, isoniazida-etambutol-rifampcina, etionamida-pirazinamida-rifampcina e etionamida-pirazinamida-etambutol. Os dois primeiros esquemas destinados ao tratamento inicial e os outros dois ao retratamento. A aplicação de testes estatísticos para os dois primeiros esquemas evidenciou que as associações isoniazida- estreptomicina-etambutol e isoniazida-etambutol-rifampcina apresentam o mesmo grau de eficácia. Não houve diferença significativa entre as mesmas quanto as alteraçÕes produzidas nas provas de laboratório, porém o regime isoniazida-estreptomicinaetambutol apresentou maior número de reações adversas que o esquema isoniazída-etambutol-rifampcina. Para os esquemas etionamida-pirazinamida-rifampcina e etionamida-pirazinamida etambutol, estudados em reduzido número de doentes, não foi feita análise estatística, tendo sido descritos os resultados encontrados. / The present paper is a study of the eficcacy and toxicity of some association of drugs used for treatment of pulmonary tuberculosis on 119 hospitalized patients. Criteria for selection of patients were: normal liver function tests, glycemia, plated count and in come. Four therapeutic associations were studied: Isoniazid-Streptomycin-Ethambutol; Isoniazid- Ethambutol-Rifampcin; Ethionamide-Pyrazinamide-Ethambutol The two first associations were used for inicial treatment and the other two for retreatment. Significance tests showed no differences between the first two associations regarding eficcacy whereas Isoniazid-Streptomicin-Ethambutol showed a larger number of adverse reactions than did Isoniazid-Ethambu tol-Rifampcin. The other two associations on account of the small number of patients studied, were not analysed statistically, results being only described.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:54:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Aline Aparecida Bianchi Cavichioli.pdf: 1738539 bytes, checksum: daf87f70d3b9afb9c3c0c7cde9ee9ace (MD5) Previous issue date: 2015-01-29 / This stud had as objective investigate the cause and effect relationship between the cities of zoonoses Aragarças, Arenópolis, Caiapônia, Iporá, Ivolândia and Montes Claros, which comprises the area of direct influence of Small Hydroelectric Power Plant in Goiás Mosquitão Southwest. We considered data on the occurrence of zoonoses, demographic, medical importance of fauna and morbidity, and mortality in the municipalities. Information analyzed was taken from the existing official sources, DATASUS, IBGE and SUS information systems in the years 2004 to 2013. For data analysis, whose aim was to relate the cases for morbidity and mortality through the numbers of confirmed cases in the years surveyed, was applied descriptive statistics. The area surveyed did not suffer considerable population increase. We found 34 species of vectors transmitters of disease such as malaria, yellow fever, leishmaniasis and other filling and post-filling of which stand out with 503 dengue fever cases in the filling with admission rates of 8.54% and post-filling this number increases to 3,393 cases an increase of 73% over the filling. The study had some limitations, especially about the divergence of data released by the various bodies. From the results presented only dengue increased incidence in post-dam filling associated with the rainy season, showing relationship between PCH and Mosquitão the disease. For the other zoonoses the information is not sufficient to prove a relationship between PCH Mosquitão and its incidence. / Este trabalho teve como objetivo investigar a relação de causa e efeito entre as zoonoses nas cidades de: Aragarças, Arenópolis, Caiapônia, Iporá, Ivolândia e Montes Claros, que compõe a área de influência direta da Pequena Central Hidrelétrica de Mosquitão no Sudoeste de Goiás. Foram considerados dados relativos à ocorrência de zoonoses, condições demográficas, fauna de importância médica, morbidade, internação e mortalidade nos municípios. As informações analisadas foram extraídas das fontes oficiais existentes, DATASUS, IBGE e Sistemas de Informação do SUS nos anos de 2004 a 2013. Para análise dos dados, cujo intuito foi relacionar os casos de morbimortalidade através dos números de casos confirmados nos anos pesquisados, foi aplicada estatística descritiva. A área pesquisada não sofreu aumento populacional considerável. Foram encontradas 34 espécies de vetores transmissores de doença como: Malária, Febre Amarela, Leishmanioses e outras no enchimento e pós-enchimento dos quais se destacam dengue com 503 casos no enchimento com taxas de internação de 8,54% e no pósenchimento esses números crescem para 3.393 casos, apresentando um aumento de 73% em relação ao enchimento. O trabalho apresentou algumas limitações, principalmente acerca da divergência dos dados divulgados pelos diversos órgãos. Dos resultados obtidos, somente dengue apresentou incidência aumentada no pósenchimento da barragem associado ao período de chuvas, evidenciando relação entre a PCH Mosquitão e a doença. Em relação às demais zoonoses as informações não são suficientes para provar uma relação entre PCH Mosquitão e sua incidência.

Este trabalho apresenta técnicas de teoria de controle ótimo aplicadas no tratamento de pacientes portadores do vírus HIV. Através de um modelo matemático efetua-se um controle sobre os medicamentos com objetivo de minimizar um funcional para um índice de desempenho elaborado com o intuito de avaliar os efeitos colaterais. As técnicas utilizadas neste trabalho envolvem o Princípio do Máximo de Pontryagin para definição do controle ótimo, juntamente com o Método da Colocação, um método numérico para resolução de problemas de valor de contorno. Os resultados obtidos através da simulação computacional estão divididos em dois cenários de tratamentos distintos: quando o paciente possui uma infecção em estágio avançado e quando o paciente possui o vírus e a proliferação é inicial. Através das comparações entre dados reais e os resultados de simulação usando o controle ótimo, conclui-se que é possível obter condições de tratamentos semelhantes aos obtidos clinicamente e robustos em relação a incerteza dos parâmetros.Observa-se através dos resultados numéricos dos casos estudados, que a utilização do controle ótimo levou a um compromisso melhor entre os efeitos terapêuticos e colaterais do que a medicação com dosagem constante.

Doenças infecciosas têm sido causa de mortes e prejuízos para a humanidade durante séculos. No século XXI, a iminência de novas epidemias têm motivado o aumento de esforços para a compreensão dos mecanismos de transmissão de doenças. A correta compreensão destes mecanismos de transmissão é fundamental no desenvolvimento de modelos matemáticos para epidemias. Estes modelos são utilizados para prever o comportamento dinâmico da epidemia e seus efeitos na população. Neste trabalho foram elaborados os conceitos teóricos e os algoritmos base de um ambiente virtual para simulação de epidemias em populações heterogêneas e metapopulações. Foi utilizada a modelagem baseada em indivíduos para implementação de heterogeneidades e de migração entre populações acopladas ou metapopulações. As heterogeneidades são incorporadas utilizando o tamanho das subpopulações, o número de indivíduos por região, a probabilidade de infecção, a probabilidade de migração e o número de contatos entre pares de indivíduos. Os modelos desenvolvidos permitem a visualização de fenômenos como a persistência da epidemia e o efeito do acoplamento entre populações com características heterogêneas. O ambiente virtual pode contribuir no desenvolvimento de estratégias de prevenção e de controle mais eficazes e com menores custos.

Anseriformes mantidos em lagos de zôos e parques estão sob constante risco de exposição às doenças presentes nas populações de aves migratórias, que dividem com eles o mesmo local durante um determinado período todos os anos. São doenças que podem ter implicações para as aves cativas, para a população humana que tem contato com essas aves e para os plantéis de produção. Assim, ações de vigilância, com o objetivo de detectar rapidamente determinadas doenças, representam alternativas interessantes para se fazer gestão de risco. O objetivo do presente estudo foi pesquisar a presença de agentes etiológicos selecionados na população de Cisnes Negros (Cygnus atratus), mantida nos lagos da FPZSP, visto que essa população tem contato com as seguintes aves migrantes que visitam a FPZSP todos os anos: irerês (Dendrocygna viduata), marreca caneleira (Dendrocygna bicolor) e marreca asa de seda (Amazoneta brasiliensis). Assim, foram colhidos suabes de traquéia e cloaca de uma amostra capaz de detectar doença com prevalência estimada em 1% para um nível de confiança de 95%. Além disso, foi realizado um estudo retrospectivo (2001 a 2006) das principais causas de morte nessa população. As principais causas de mortalidade registradas em 184 registros analisados foram: desvio de tendão extensor tarso-metatarsiano (37, 20,1%), desnutrição (20, 10,9%), problemas hepáticos (17, 9,2%), traumas (15, 8,2%), problemas respiratórios (8, 4,3%), septicemias (6, 3,3%), intoxicações (5, 2,7%) e problemas gastrointestinais (3, 1,6%). Um terço das carcaças (62, 33,7%) foi encontrado em estado de putrefação. A taxa de mortalidade foi decrescente de 2001 a 2006 e apresentou sazonalidade, sendo maior entre os meses de novembro a maio. No momento das coletas, não houve nenhuma evidência clínica ou laboratorial da presença dos seguintes agentes: Pasteurella multocida., Salmonella sp., Chlamydophila psittaci, Orthomixovírus (Influenza Aviária), Paramixovirus (Doença de Newcastle) e Coronavirus (Bronquite Infecciosa). / Waterfowls housed in ponds of zoos and parks are under constant risk of exposure to pathogens of migratory birds that visit these places every year. Some of them involving zoo animals and humans. The spread of particular diseases may also become a serious threat for domestic poultry. So, surveillance, focused in early detection of some diseases, can be an interesting tool to do risk management. The goal of the present work was to search the presence of some select pathogens in the captive black swan population (Cygnus atratus) present in the ponds of the Fundação Parque Zoológico de São Paulo (FPZSP), because these animals have contact with the following free-living waterfowls: white-faced whistling-duck (Dendrocygna viduata), fulvous whistling-duck (Dendrocygna bicolor) e brasilian teal (Amazoneta brasiliensis). Swabs of trachea and cloaca were sampled from 239 animals, the sample size required for detecting disease present in at least 1% of the animals (CI = 95%). Moreover, a retrospective study was done about the causes of death to the period from 2001 to 2006. The mainly causes of black swan death in FPZSP were: slipped tendon (37/184, 20,1%), malnutrition (20/184, 10,9%), hepatic problem (17/184, 9,2%), trauma (15/184, 8,2%), respiratory problem (8/184, 4,3%), septicemias (6/184, 3,3%), intoxication (5/184, 2,7%) e gastro-intestinal problems(3/184, 1,6%). One third of the carcass (62/184, 33,7%) was in autolysis. The mortality presented peaks of occurrence from november to may and a decreasing trend from 2001 to 2006. At the moment of the sampling, there was no clinical or laboratorial evidence of the infection by the following pathogens: Pasteurella multocida., Salmonella sp., Chlamydophila psittaci, Orthomixovírus (Avian Influenza), Paramixovirus (Newcastle Disease) e Coronavirus (Infectious Bronchitis).

A Salmonella sp é um importante agente zoonótico no mundo todo e diversas são as técnicas desenvolvidas para a sua identificação, com o isolamento microbiológico ainda sendo a técnica de escolha. Além de sua importância em microbiologia de alimentos e em criações comerciais de aves, ultimamente vem se destacando a sua presença na microbiota de animais silvestres. No presente estudo, foram colhidos \"swabs\" cloacais de 200 aves e 200 répteis, com o intuito de se observar a freqüência de isolamento do agente, caracterizar os isolados através da determinação dos perfis bioquímico e de resistência a antimicrobianos além da sorotipagem. Buscamos também comparar diferentes técnicas de isolamento com diversos meios de cultura e determinar qual a mais eficiente. Desse modo, os \"swabs\" coletados foram submetidos ao plaqueamento em ágar Mac Conkey, suspensão paralela em caldo Rappaport e Tetrationato com posterior plaqueamento em ágar XLT4. Das 200 aves amostradas nenhuma apresentou resultado positivo para o isolamento de Salmonella sp, ao passo que dos 200 répteis, 71 apresentaram-se positivos para o agente, totalizando uma proporção de 35,5%. Dentre os répteis as serpentes foram as que apresentaram maior proporção de animais positivos com 83,9% em contraste às tartarugas que formaram a ordem com menor isolamento (7,1%). Diversos sorotipos foram isolados, muitos não sendo freqüentemente relacionados a animais silvestres com vários apresentando algum grau de resistência aos antimicrobianos testados. A técnica de isolamento que possibilitou a maior recuperação do microorganismo foi a suspensão em caldo Rappaport seguida do plaqueamento em ágar XLT4. Concluímos que os répteis podem ser considerados importantes reservatórios para a Salmonella sp, ao passo que as aves não merecem destaque nesse quesito, embora seu potencial disseminador não deva ser desprezado. / Salmonella sp is an important zoonotic agent in the whole world and many are the techniques developed for its identification, although the microbiological isolation is still the preferred one. Salmonela\'s importance in food microbiology and poultry are unquestionable, but in the late years there is a growing concern about the presence of this bacteria in many species of wild animals. In the present study we collected cloacal swabs from 200 wild birds and 200 reptiles with the following goals: Determination of the isolation frequency, characterization of the isolates through biochemical and antimicrobial susceptibility profiles and serotyping. We also target a comparison between different isolation techniques and culture media to determine wich one is the most effective. In this way, the collected swabs were submitted to direct plating in Mac Conkey agar and parallel suspension in Rappaport and Tetrationate broths with posterior streaking in XLT4 agar. None of the 200 tested birds were positive for Salmonella sp, while 71 from the 200 reptiles were positives for the agent, in a 35,5% proportion. Among the reptiles, the snakes presented the higher prevalence, with 83,9% of the animals being positives, in contrast to turtles, the Order with less isolation, totalizing only 7,1%. A lot of different serotipes were isolated, many of them infrequently related with wild animals and showing at least some degree of antimicrobial resistance. The use of Rappaport broth followed by the XLT4 agar showed the best recovering rates of Salmonella sp from the cloacal swabs. We conclude that reptiles may act as important reservoirs for this pathogen. Wild birds doesn\'t seems to play the same role, but theirs spreading potencial must not be underestimated.

Algumas doenças associadas à piscicultura de tilápias trazem enormes prejuízos aos criadores, resultando em expressivos coeficientes de morbidade e mortalidade entre animais de todas as idades. Nesse sentido, exigências para o aprimoramento do diagnóstico laboratorial de doenças de natureza infecto-contagiosa tornaram-se constantes, face às perdas vinculadas. Os Ranavirus são vírus que infectam vertebrados ectotérmicos causando necrose generalizada, hemorragias focais e apoptose celular nos animais infectados. O presente estudo objetivou a realização de infecções experimentais em larvas e alevinos de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus), através de 3 diferentes modelos de infecção, utilizando estirpe de Ranavirus Frog vírus 3-like; recentemente detectada e isolada no Brasil, para avaliação das patologias associadas, incluindo o sequenciamento e análise do genoma da cepa viral. Vários sinais clínicos macroscópicos e microscópicos foram observados, hemólise, hemácias com anisocitose e policromasia, alterações relacionadas a média dos volumes das hemácias e hemoglobina, índices hepato-somáticos e espleno-somáticos com interações estatisticamente significantes, linfócitos reativos, alterações nos níveis das enzimas alanina aminotransferase e corpúsculos de inclusão basofílicos em diferentes tecidos dos animais experimentados com Ranavirus FV3-like foram observados dentro do período de 60 dias pós-infecção. Além disso, animais experimentalmente infectados foram positivos ao Ranavirus através de qPCR. O genoma de cepa brasileira de Ranavirus FV3-like apresentou 105 kilobases, contendo 54,98% de guanina + citosina, sendo 94 potenciais ORFs anotadas. A reconstrução filogenética, baseada em sequencias nucleotídicas, agrupou a amostra brasileira de Ranavirus no clado dos Frog vírus 3-like e as maiores identidades do genoma se deram com cepas norte-americanas de FV3-like. Doze potenciais eventos de recombinação, estatisticamente significantes (p < 0,05), foram identificados entre a cepa brasileira e amostras de referência de Ranavirus FV3-like. Nesse sentido, o presente trabalho contribui para o melhor entendimento da infecção causada por estirpe brasileira de Ranavirus FV3-like em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus). Além disso, adiciona e reforça a potencial recombinação entre diferentes estirpes de Ranavirus, colaborando para uma melhor compreensão das características de agentes virais associados a graves surtos em vertebrados ectotérmicos no país. / Some diseases associated with tilapia fish farming cause enormous losses to breeders, resulting in significant morbidity and mortality rates among animals of all ages. In this sense, requirements for the improvement of the laboratory diagnosis of diseases of infectious-contagious nature, became constant, in view of the related losses. Ranaviruses are viruses that infect ectothermal vertebrates causing widespread necrosis, focal haemorrhages and cell apoptosis in infected animals. The present study aimed to perform experimental infections in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) fry and larvae through 3 different infection models, using Ranavirus Frog virus 3-like strain recently detected and isolated in Brazil, to evaluate the associated pathologies, including sequencing and genome analysis of the viral strain. Several macroscopic and microscopic clinical signs were observed, hemolysis, red blood cells presenting anisocytosis and polychromasia, alterations related to the mean red blood cell volumes and hemoglobin present in the red blood cells, hepato-somatic and spleno-somatic indexes showing statistically significant interactions, reactive lymphocytes, alterations in the levels of the enzymes alanine aminotransferase and basophilic inclusion corpuscles in different tissues of animals tested with Ranavirus FV3-like were observed within the 60-day post-infection period. In addition, experimentally infected animals were positive to Ranavirus through qPCR. The genome of the Ranavirus FV3-like Brazilian strain presented 105 kilobases, containing 54.98% of guanine + cytosine, with 94 potential ORFs annotated. The phylogenetic reconstruction, based on nucleotide sequences, grouped the Brazilian sample of Ranavirus in the clade of Frog virus 3-like, the greater identities of the genome were with North American strains of FV3-like. Twelve potential recombination events, statistically significant (p <0.05), were identified between the Brazilian strain and reference samples of Ranavirus FV3-like. The present work contributes to a better understanding of the infection caused by the Brazilian strain of Ranavirus FV3-like in Nile tilapia (Oreochromis niloticus). In addition, it adds and reinforces the potential recombination between different strains of Ranavirus, contributing to a better understanding of the characteristics of viral agents associated with severe outbreaks in ectothermic vertebrates.

Orientador: Celso Antonio Rodrigues / Resumo: Este estudo objetivou a identificação precoce de lesões podais infecciosas e secundárias à laminite, em vacas Holandesas de alta produção, a partir de alterações na pedometria. Foram selecionadas 245 vacas Holandesas de alta produção leiteira, que não apresentaram em 308 dias de lactação, nenhuma enfermidade como: mastite, deslocamento de abomaso, pneumonia, hipocalcemia, retenção de placenta, metrite, diarreia e cetose, que pudesse interferir nos resultados mensurados. Os dados da pedometria (produção de leite, número de passos, número de vezes que o animal deitou e porcentagem de tempo em que ele permaneceu deitado) foram obtidos diariamente e então, calculada uma média semanal. As afecções podais foram avaliadas e classificadas. A úlcera de sola e a dermatite digital foram as de maior incidência com 64,86% e 75% respectivamente, sendo estas associadas aos fatores de risco como o concreto abrasivo, umidade e sobrecarga de peso sobre os dígitos. Nas variáveis pedométricas, a produção de leite foi considerada neste estudo, um fator de risco para desenvolvimento de enfermidades podais. Houve diferença entre o número de passos e quantidade de vezes que os animais deitaram, sendo os animais com lesão aqueles que apresentaram menor atividade pedométrica. Estas variáveis foram adequadas para a detecção precoce de vacas susceptíveis as lesões podais. / Doutor

Submitted by Samira Prince (prince@ufpa.br) on 2012-10-16T14:14:53Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ModulacaoImunologicaInvitro.pdf: 477216 bytes, checksum: b32e46d44b06218c4e2ebe58d0f28a6b (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2012-10-16T18:28:31Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ModulacaoImunologicaInvitro.pdf: 477216 bytes, checksum: b32e46d44b06218c4e2ebe58d0f28a6b (MD5) / Made available in DSpace on 2012-10-16T18:28:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_ModulacaoImunologicaInvitro.pdf: 477216 bytes, checksum: b32e46d44b06218c4e2ebe58d0f28a6b (MD5) Previous issue date: 2008 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As células de Langerhans (CLs) estão localizadas na epiderme e desempenham um papel chave na indução da resposta imune e da tolerância imunológica. Os macrófagos são células fagocíticas que atuam como primeira linha de defesa do organismo, e que estão envolvidos na formação de granulomas em pacientes com hanseníase. A imunopatogenia da resposta celular nos estados reacionais ainda é pouco estudada, porém, diversas evidências sugerem que as drogas prednisona, talidomida, ciclosporina e amitriptilina, utilizadas no controle das reações hansênicas, exercem seus efeitos pela modulação das funções de diferentes células imunocompetentes. O objetivo do presente estudo foi analisar a ação in vitro das drogas prednisona, talidomida, ciclosporina e amitriptilina sobre a produção de citocinas por CLs e macrófagos de camundongos BALB/c. As CLs foram isoladas, purificadas e cultivadas a partir da epiderme pela técnica de “panning” e os macrófagos foram isolados da cavidade peritoneal de camundongos BALB/c. Após 36 h de tratamento com as drogas, os níveis de TNF-, IL-12 e IL-10 foram medidos por ELISA. Prednisona, talidomida, ciclosporina e amitriptilina inibiram os níveis de TNF- produzidos pelas CLs, em ambas as concentrações, no entanto, não foi detectada alteração significativa na produção de IL-12. A produção de TNF- e de IL-12 por macrófagos peritoneais também foi diminuída após o tratamento, porém os níveis de IL-10 não foram modificados por nenhuma das drogas testadas. Nossos resultados mostram que estas drogas podem modular a resposta imune através da regulação das citocinas pró-inflamatórias TNF- e IL-12 por CLs purificadas da epiderme e por macrófagos peritoneais, indicando que as citocinas constituem importante alvo de drogas usadas no tratamento dos estados reacionais. / Langerhans cells (LCs) are localized in the epidermis and performs a key role in the induction of immune response and immunologic tolerance. Macrophages are phagocytic cells that act as first line of defense of the organism, and they are involved in the granuloma formation in patients with leprosy. The immunopathogeny of the cellular response in the reactional states is yet little studied, however, several evidences suggest that the drugs prednisone, thalidomide, cyclosporine and amitriptyline, used in the control of leprosy reactions, perform their effects by the modulation of different immunocompetent cells functions. The objective of the present study was to analyze in vitro action of prednisone, thalidomide, cyclosporine and amitriptyline on the cytokine production by LCs and macrophages of BALB/c mice. LCs were isolated, purified and cultivated from the epidermis by the panning technique and macrophages were isolated by the peritoneal cavity of BALB/c mice. After 36 h of treatment with the drugs, the levels of TNF-, IL-12 and IL-10 were measured by ELISA. Prednisone, thalidomide, cyclosporine and amitriptyline inhibited TNF- produced by LCs, in both concentrations, however no important alterations in IL-12 production were detected. TNF- and IL-12 production by macrophages was also decreased after treatment, but IL-10 levels were not modified for none of the drugs tested. Our results show that these drugs can modulate the immune response by the regulation of pro-inflammatory cytokines TNF- and IL-12 by purified epidermal LCs and peritoneal macrophages, indicating that they constitute an important target for the drugs used in treatment of leprosy reactional states.

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2013-05-20T22:17:06Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EstudoMicrocultivoVitro.pdf: 1242833 bytes, checksum: 363f0049b2f5b69a5ad4d1659a3c2635 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2013-05-22T17:07:46Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EstudoMicrocultivoVitro.pdf: 1242833 bytes, checksum: 363f0049b2f5b69a5ad4d1659a3c2635 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-22T17:07:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EstudoMicrocultivoVitro.pdf: 1242833 bytes, checksum: 363f0049b2f5b69a5ad4d1659a3c2635 (MD5) Previous issue date: 2010 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Os parasitas do gênero Leishmania apresentam uma variabilidade de espécies na região Amazônica e para sua correta identificação é necessário o isolamento dos mesmos. Atualmente para o isolamento do parasita e posterior diagnóstico da doença têm se utilizado a técnica de microcultivo in vitro. O objetivo de nosso trabalho foi otimizar a técnica de microcultivo in vitro para o isolamento de Leishmania sp. Para o isolamento, além do microcultivo, foi analisado a técnica de vácuo-aspiração adaptada e a viabilidade do parasita a temperaturas abaixo de 25ºC. No total foram utilizados 18 hamsters, infectados com amostras de casos clínicos de Leishmaniose tegumentar americana, sendo 3 de Leishmania.(Leishmania) amazonensis e 2 de Leishmania.(Viannia) braziliensis o qual foram realizados 56 cultivos por vácuo-aspiração em meio NNN, 12 em microtubos e 23 por microcapilares com RPMI suplementado, mantidos entre 25º e 31ºC. Para a segunda etapa, participaram 7 pacientes, totalizando 6 culturas por vácuo-aspiração e 42 por microcapilares. Conservou-se a baixa temperatura 7 tubos com NNN que foram mantidas a 5ºC. Foi observado que os isolamentos por vácuo-aspiração de amostras de L. (L.) amazonensis e L. (V.) braziliensis em hamsters foram sensíveis a adaptação da técnica, diferente das amostras de pacientes. A positividade variou entre 2 a 8 dias e 4 e 5 dias respectivamente. Os microtubos apresentaram positividade para as mesmas amostras de hamsters no período de 5 a 8 dias. Para as amostras dos pacientes, 2/12 tubos por vácuo-aspiração foram positivos e para isolamento em microcapilares 6/42, valores inferiores aos encontrados na literatura. A amostras conservadas a 5ºC apresentaram viabilidade até o 30º dia. Com estes resultados foi observado que o microcultivo é viável para uso dentro de nossa região, entretanto se mostrou limitado para o isolamento de amostras provenientes de pacientes. Devem-se utilizar outros meios de cultivo, de modo a observar o comportamento do parasito e também aperfeiçoar a coleta do material da lesão a fim de melhorar os resultados de isolamento. / Leishmania parasites have variability of species in the Amazon region and its correct identification is necessary to isolate them. Currently for the isolation of the parasite and subsequent diagnosis of the disease have used the technique of in vitro microculture. Hence, the aim of our study was to optimize the in vitro microculture technique for isolation of Leishmania sp. to contribute to the identification of Leishmania (Leishmania) amazonensis and Leishmania (Viannia) braziliensis circulating in the state of Pará For isolation beyond the microculture was analysed the technique of vacuum aspiration adapted, and parasite viability at temperatures under 25°C. Was used 18 hamsters infected with samples from clinical cases of CL, 3 L. (L). amazonensis 2 and L. (V). braziliensis which held 56 culture by vacuumaspiration in NNN media, 12 in microtubes and 23 in microcapillaries with RPMI media supplemented with 10% fetal bovine serum and 1% Penicillin-Gentamicin maintained between 25°C and 31°C. For the second stage, participated in seven patients, a total of 6 cultures by vacuum aspiration and 42 by microcapillary. It was remained at low temperature 7 tubes with NNN which were kept at 5°C. It was observed that the isolates by vacuumaspiration samples of L. (L.) amazonensis and L. (V.) braziliensis in hamsters were susceptible to adaptation of the technique, differently of samples of patients. The positivity ranged between 2-8 days and 4 and 5 days respectively. The microtubes were positive for the same samples of hamsters in the period 5-8 days. For samples of patients, 2/12 tubes by vacuum-aspiration were positive for isolation and in microcapillaries 6/42 less than the values found in literature. The samples stored at 5°C showed viability until 30º day. Thus, we find that the microculture is viable for use within our region.