Made available in DSpace on 2015-12-06T23:47:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução: A terapia a laser de baixa intensidade tem sido utilizada com o objetivo de aumentar a perfusão vascular de retalhos cutâneos e musculofasciocutâneos. Objetivo: Avaliar o efeito da terapia a laser de baixa intensidade na viabilidade do retalho musculofasciocutâneo transverso do reto do abdome em ratos. Método: Foram utilizados 84 ratos Wistar-EPM1 que foram randomicamente distribuídos em 7 grupos com 12 animais cada. O Grupo 1 (simulação), grupo 2 (3J/cm2 com 1 ponto), grupo 3 (3J/cm2 24 pontos), grupo 4 (72J/cm2 1 ponto), grupo 5 (6J/cm2 1 ponto), grupo 6 (6J/cm2 24 pontos) e grupo 7 (144J/cm2 1 ponto). Todos os grupos experimentais foram submetidos a terapia a laser imediatamente após a realização do TRAM e nos outros dois dias subseqüentes. A porcentagem da área de necrose foi calculada no quarto dia pós-operatório por meio do gabarito de papel. Duas amostras foram coletadas por um punch para realizar as avaliações de mastócitos, vasos sanguíneos (1A4) e VEGF. Resultados: Foram encontradas diferenças significantes entre as porcentagens de necrose de todos os grupos, com os valores mais elevados para o grupo 1 comparado aos grupos experimentais. Entre os grupos 3 à 7 não foram encontradas diferenças significantes com p<0,292. Para as avaliações de mastócitos e VEGF os grupos 5 e 7 mostraram um aumento significante quando comparado aos outros grupos. Para avaliação de vasos sanguíneos (1A4) houve um aumento significante para os grupos 3 e 5 quando comparado aos outros grupos. Conclusão: A terapia a laser de baixa intensidade nas fluências de 6 e 144J/cm2 foi eficaz no aumento da viabilidade do retalho musculofasciocutâneo transverso do reto do abdome em ratos. / Introduction: The LLLT has been used with the aim to improve the perfusion vascular of the skin and musculocutaneous flaps. Objective: To assess the effect of low intensity laser therapy on the transverse rectus abdominis musculocutaneous flap (TRAM) viability. Methods: Were used 84 Wistar rats that random divided in 7 groups with 12 rats in each one. The Group 1 (sham laser), group 2 received 3J/cm2 with 1 point, group 3 (3J/cm2 24 points), group 4 (72J/cm2 1point), group 5 (6J/cm2 1point), group 6 (6J/cm2 24 points) and group 7 (144J/cm2 1 point). All experimental groups were undergoing to LLLT immediately after the TRAM operation, and at the next two subsequent days, and so, animals underwent 3 days with applications. The percentage of skin flap necrosis area was calculated on the fourth postoperative day through the paper template method and 2 samples of skin were collected by a 1 cm2 punch in order to perform mat cells evaluation, blood vessels with 1A4 and VEGF evaluations. Results: Were found statistically significant differences among necrosis percentage, and higher values were seen in Group 1, over all other values. Among Groups 3 to 7 statistically significant differences were not found, with p<0.292. To mast cells and VEGF evaluation the group 5 and 7 showed a significant increase when compared to another groups. The 1A4 evaluations showed that the groups 3 and 5 had a increase when compared to another groups. Conclusion: Low level laser therapy on the fluences 6 and 144J/cm2 was efficient to increase transverse rectus abdominis musculocutaneous flap (TRAM) viability in rats. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:47:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / FAPESP: 2004/00325-8 / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:48:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Na ausência de estímulo antigênico, células B-1 são importantes produtoras de anticorpos naturais em camundongos e humanos e são consideradas como a primeira linha de defesa contra patógenos. Por causa disso, o papel dessas células em respostas imunes mediadas por células T é comumente negligenciado. No entanto recentemente foram descritas participações de células B-1 nas hipersensibilidades tardia e imediata. O presente trabalho verificou o papel de células B-1 na rejeição aguda de aloenxertos no camundongo, um processo orquestrado por células T. Para tal, foram transplantados coração e pele alogênicos para camundongos selvagens e camundongos deficientes em células B-1. A cinética de rejeição, as células infiltrantes no enxerto e a migração de células B-1 foram analisadas. Foi observado um atraso na cinética de rejeição do camundongo deficiente em células B-1, quando comparado com o camundongo selvagem. A transferência adotiva de células B-1 eliminou tal atraso. A sobrevida estendida do enxerto foi concomitante com menos células T CD8+ e mais mastócitos infiltrantes no enxerto. Células B-1 foram encontradas infiltrando o enxerto poucos dias após os transplantes. Os resultados deste trabalho mostram que há uma participação de células B-1 na rejeição aguda de aloenxertos e colaboram para o entendimento da biologia dessas células. / B-1 B cells are important producers of natural antibodies in mice and humans and, therefore, are considered as the first line of defense against pathogens. Because of that, their role in T-cell mediated immune responses is commonly underrated. However, recent studies have described the participation of B-1 cells in immediate and delayed-type hypersensitivity. The present work assessed the role of B-1 cells in the rejection of allografts in mice, an immune reaction mainly orchestrated by T cells. We have transplanted allogeneic skin and heart to wild-type and B-1 cell-deficient mice, and followed rejection kinetics. Skin graft-infiltrating cells were analyzed by flow cytometry. We observed a delay in rejection kinetics of B-1 cell-deficient mice when compared to wild-type mice. Adoptive transfer of B-1 cells into B-1 cell-deficient mice abrogated this delay. The longer survival observed in the absence of B-1 cells correlated with less CD8+ T cells infiltrating the grafts, as well as with more mast cells. Collectively, our results show the participation of B-1 cells in the allograft rejection process in mice, thus collaborating to the understanding of B- 1 cell biology. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-05-26 / A via de sinalização Janus Kinase/Transdutores de Sinal e Ativadores de Transcrição (JAK/STAT) é uma das mais importantes vias de sinalização para transdução do sinal usadas pelas citocinas. Entretanto, o papel da via JAK/STAT na lesão de isquemia reperfusão (IR) hepática ainda não foi explorado. Este estudo foca no papel da proteína-quinase JAK2, que está acima de STAT-1 na cascata de sinalização JAK/STAT, e o seu papel no mecanismo da lesão de IR hepática. Isquemia quente parcial (lobos esquerdo e médio) foi induzida no fígado de camundongos C57BL/6 por 90 minutos, seguidos por 6 horas de reperfusão. Os animais foram tratados com o inibidor específico de JAK-2 (Tyrphostin AG490; 40 mg/kg, i.p) ou veículo (DMSO), 60 minutos antes do início da isquemia. O bloqueio de JAK2 resultou em significante redução da lesão hepática e da apoptose de hepatócitos. A análise imunohistoquímica revelou uma importante redução no infiltrado de macrófagos e de polimorfonucleares neutrófilos no tecido hepático dos animais que receberam AG490 anteriormente ao insulto isquêmico, comparado aos animais controle (DMSO). A expressão de citocinas pro-inflamatórias (TNF-α, IL-6, IL-1β) e das quimiocinas (CXCL-10 and CXCL-2) também estava reduzida no grupo tratado com AG490, comparado ao grupo controle. A análise da presença de células apoptóticas, através da técnica de TUNEL no tecido hepático dos camundongos, revelou menor número de hepatócitos em processo de apoptose no grupo tratado com AG490 consistente com o achado de western-blot que revelou menor expressão da proteína caspase-3 clivada em paralelo com o aumento da expressão da proteína anti-apoptótica Bcl-XL, no grupo que recebeu AG490. Para confirmar nossos achados in vivo nós testamos AG490 (75 mM) em culturas de macrófagos derivados da medula óssea (BMM) e em cultura de células da linhagem de hepatoma- CRL1830, ambas estimuladas com LPS (10 ng/ml). Em culturas de macrófagos derivados da medula óssea, AG490 reduziu a expressão gênica das citocinas e quimiocinas pró-inflamatórias (IL-6, IL-12p40, IL-1β, CXCL-10 e iNOS) que encontravam-se elevadas apos estimulação com LPS. Em cultura de células da linhagem de hepatoma- CRL1830, AG490 reduziu a expressão de caspase-3 clivada. Além do que, o bloqueio de JAK2 inibiu a fosforilação de STAT1 e STAT3. Pela primeira vez demonstramos que a sinalização por JAK2 é essencial na fisiopatologia da lesão de IR hepática, já que seu bloqueio seletivo protegue o fígado contra inflamação e apoptose. / The Janus kinase/signal transducers and activators of transcription (JAK/STAT) signaling is one of the major pathways for cytokine signal transduction. However, the role of the JAK/STAT pathway in liver I/R is not clear. This study focuses on JAK2, which functions upstream of STAT-1 in JAK/STAT, and its role in the mechanism of liver IRI. Partial warm ischemia was produced in the hepatic lobes of C57BL/6 mice for 90min, followed by 6h of reperfusion. Mice were treated with JAK-2 inhibitor (Tyrphostin AG490; 40 mg/kg, i.p) or veicle, 60min prior to ischemic insult. JAK2 blockade resulted in significant reduction of hepatocyte apoptosis and liver injury. Macrophage and neutrophil infiltration, as assessed by immunohistochemistry, was markedly decreased in AG490-treated livers, compared with controls. The expression of proinflammatory cytokines (TNF-α, IL-6, IL-1β) and chemokines (CXCL-10 and CXCL-2) was also significantly reduced in AG490-treated group, compared with controls. AG490-treated livers showed less TUNEL positive cells and reduced cleaved caspase-3 protein expression in parallel with increased Bcl-XL expression. We employed AG490 (75 mM) in primary bone marrow-derived macrophage (BMM) and hepatoma cell (CRL1830) cultures, both stimulated with LPS (10 ng/ml). In BMM cultures, AG490 depressed otherwise LPSinduced pro-inflammatory gene expression programs (IL-6, IL-12b, IL-1β, CXCL-10 and iNOS). In hepatoma cells, AG490 reduced cleaved-caspase-3 expression. Moreover, JAK2 blockade inhibited STAT1 and STAT3 phosphorylation. This is the first report, which documents that JAK2 signaling is essential in the pathophysiology of liver IRI, as its selective blockage ameliorated the disease process and protected livers from inflammation and apoptosis. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações / 103 p.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-04-29 / O processo de cicatrização é um fenômeno complexo cujos mecanismos não são totalmente entendidos. Não existem trabalhos que mostram a participação de linfócitos B no reparo tecidual. Entretanto, Almeida et al. (Inter Immunol, 2001) demonstraram que células B-1 proliferam em cultura de células peritoneais aderentes e migram para foco inflamatório não específico diferenciando-se em células semelhantes a fagócitos. Células B-1 diferem de células B convencionais quanto sua localização anatômica, ontogenia, expressão de marcadores de superfície, produção de anticorpos e propriedades de crescimento. Células B-1 estão presentes nas cavidades peritoneais e pleurais, são raras no baço e ausentes nos linfonodos de camundongos adultos. Trabalhos mostraram que células B-1 secretam grandes quantidades de IL-10 e esta citocina tem importante função no processo de cicatrização. Objetivo: Investigar a participação de células B-1 no processo cicatricial do camundongo. Métodos: A migração de células B-1 para o foco da lesão foi avaliada utilizando a técnica de imunofluorescência. A análise por citometria de fluxo foi utilizada para a quantificação de células B-1a e B-1b nas cavidades peritoneais de camundongos BALB/c, BALB/Xid e BALB/Xid transferidos com células B-1. Incisão dorsal foi realizada nos mesmos grupos de animais para comparar o tempo de cicatrização entre os diferentes grupos. A influência de células B-1 na infiltração de neutrófilos e processo de angiogênese foram avaliados pela técnica de imunoistoquímica. Além disso, foi realizada a cinética de inflamação na pata dos camundongos para avaliar o papel de células B-1 na fase inflamatória do reparo tecidual. As mesmas técnicas de incisão dorsal e cinética da inflamação foram realizadas em camundongos Knock-out para IL-10 e Knock-out para IL-10 transferidos com células B-1 para analisar a participação de IL-10 secretada por células B-1 nestes processos. Finalmente, por citometria de fluxo foi avaliada a secreção de fatores de crescimento por células B-1. Resultados: Células B-1 migram para o foco inflamatório do processo de cicatrização, participam deste processo e influenciam a fase inflamatória do reparo tecidual. Além disso, células B- 1 influenciam a infiltração neutrofílica e processo de angiogênese. Ainda, foi mostrado que células B-1 modulam a fase inflamatória do reparo tecidual via IL-10, além de serem células secretoras de FGF, TGF-β e MCP-1. Conclusão: Estes dados comprovam que células B-1 participam da resposta inflamatória e do processo de cicatrização, provavelmente por influenciar na cinética da fase inflamatória via IL-10. / Wound healing is a complex phenomenon whose mechanisms are not fully understood. There are no reports concerning the participation of B lymphocytes in tissue repair. However, Almeida et al (Inter Immunol, 2001) demonstrated that B-1 cells proliferate in stationary culture of adherent peritoneal cells. Further, that B-1 cells migrate to non-specific inflammatory focus and differentiate into a mononuclear phagocyte. B-1 cells differ from conventional B cell by its anatomical location, ontogeny, surface markers expression, production of antibodies and growth properties. B-1 cells are present in the peritoneal and pleural cavities and rare in the spleen and absent in the lymph nodes of adult mice. It has been reported that these cells secret large amounts of IL-10 and this cytokine play a role in the wound healing process. Aim: Investigate the participation of B-1 cells in the wound healing process in mice. Methods: That B-1 cells migrate to the wound was evaluated using immunofluorescence technique. The fluorescence activated cell sorter was used to detect B-1b cells in pleural and peritoneal cavities from BALB/c, BALB/Xid and BALB/Xid adoptively transferred with B-1 cells. The dorsal lesions were made to compare the time of the wound healing process in differs groups. The influence of B-1 cells in the neutrophilic infiltration and the angiogenic process was evaluated by imunohistochemical techniques. Moreover, the kinetics of the inflammation in mice footpads was made to evaluate the role of B-1 cells in the inflammatory phase of tissue repair. The same technique of the dorsal lesion and dorsal lesion footpad were made in IL-10 Knock-out and IL-10 Knock-out adoptively transferred with B-1 cells in order to investigate the participation of IL-10 secreted by B-1 cells in this process. Finally, using fluorescence activated cell sorter secretion of growth factors by B-1 cells was analyzed. Results: B-1 cells migrate to the inflammatory site of the wound healing process. B-1b cells participate in wound healing process and influence the inflammatory phase of this process. Moreover, B-1b cells influence neutrophilic infiltration and the angiogenic process. In addition, B-1 cells modulate the inflammatory phase of tissue repair secreting IL-10, FGF, TGF-β and MCP-1. Conclusion: These data indicate that B-1 cells participate of the inflammatory phase of the wound healing process. Besides, IL-10 secreted by B-1 cells participates of the inflammatory response and confirm that B-1 cells play a role in the wound healing process. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-07. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:13Z : No. of bitstreams: 1 000870494.pdf: 357411 bytes, checksum: 81c0f3a5e7fdf7f51bc9273bb80f7b8d (MD5) / The D-dimers are the smallest fragments of fibrin degradation products and are produced by plasmin after lysis of fibrin cross-connection. Thus, the objectives of this study were to determine plasma concentrations of D-dimer and fibrinogen in newborn calves and postpartum cows and to compare plasma concentrations of this hemostatic marker between these two groups. Significant increases in plasma concentrations of D-dimers occur during inflammatory processes (such as peritonitis, sepsis), disseminated intravascular coagulation and vena cava thrombosis for example. Plasma concentrations of D-dimer and fibrinogen were not different between groups. There was a significant positive correlation between plasma fibrinogen concentrations between groups. There was no correlation between plasma D-dimer between groups. Therefore, it was possible to establish reference intervals for plasma concentrations of D-dimer in postpartum cows and their newborn calves.

GONÇALVES, Davi da Cunha. Efeito antiinflamatório e antirreabsortivo ósseo do infliximabe na periodontite induzida em ratos Wistar. 2012. 110 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-07-15T12:41:09Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_dcgonçalves.pdf: 6750713 bytes, checksum: 44382a08e1050b36411a775adb2824e7 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-07-16T14:19:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_dcgonçalves.pdf: 6750713 bytes, checksum: 44382a08e1050b36411a775adb2824e7 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-07-16T14:19:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_dcgonçalves.pdf: 6750713 bytes, checksum: 44382a08e1050b36411a775adb2824e7 (MD5) Previous issue date: 2012 / Periodontitis is a chronic inflammatory disease characterized by different levels of collagen, cementum, and alveolar bone destruction. Peridontitis is considered an important cause of tooth loss in adults. Infliximab (Remicade®) is a quimeric monoclonal antibody against the tumoral necrosis factor-alpha (TNF-α) and is currently prescribed in the treatment of the rheumatoid arthritis, Crohn’s disease, psoriasis arthritis, ankylosing spondylitis, and ulcerative colitis. The aim of the current study was to investigate the bone protective effect of infliximab on the experimental periodontal disease (EPD). EPD was induced by passing a 3.0 nylon thread around the upper left second molar in Wistar male rats. Animals were either treated with infliximab (1, 5 e 10mg/kg) or saline solution by endovenous route 30 minutes before the periodontitis induction and were followed until they were sacrificed in the tenth first day. A subset of rats was euthanized in the third day for gingival myeloperoxidase (MPO) and for the neutrophilic MPO index from peripheral blood analyses. We analyzed the following parameters: bone reabsorption markers, including the bone loss index (BLI) by morphometry and periodontal collagen autofluorescence using confocal microscopy, and immunohistochemistry for metalloproteinase-1/-8 (MMP-1/-8) in the maxillary tissue; inflammatory markers, gingival MPO and pro-inflammatory cytokines (IL-1β e TNF-α) detected by western blot and ELISA, leukometry (and complete blood count) and the MPO leukocyte index in the peripheral blood; immune-inflammatory signaling, including immunohistochemistry for RANK, RANK-L and osteoprotegerin (OPG) in the maxillary bone tissue. Experimental periodontitis caused leukocytosis, significant increases in BLI and in pro-inflammatory cytokines with inflammatory cell infiltrate in the gingival tissue and periodontal collagen disarrangement. In the challenged group we also identify various figures of the epithelial cell rests of Malassez (ERM) in the proximity of the cementum and alveolar bone. Infliximab in the dose of 5mg/kg was able to reduce granulocyte numbers in the peripheral blood, improve the BLI and the periodontal tissue collagen integrity and to reduce the inflammatory infiltrate in comparison with the challenged group receiving saline. The compound could lead to reductions in the gingival levels of IL-1β, TNF-α, and MPO (the latter only in the third day) as opposed to the saline control. Furthermore, infliximab treatment reduced the MMP-1/-8, RANK, and RANK-L immunolabeling. Interestingly, a strong RANK-L immunolabeling was found in the ERM during the experimental periodontitis, finding that was diminished by infliximab treatment. Altogether our findings confirm the involvement of the OPG-RANK-RANK-L signaling during the inflammatory osteolytis and the ERM involvement in the experimental periodontitis pathophysiology. In addition, these findings suggest that a local and systemic inflammatory response precedes the activation of that signaling pathway and the bone reabsorption. We conclude that infliximab in the dose of 5.0 mg/Kg had anti-inflammatory and bone protective effect in our experimental periodontal disease in Wistar rats. / A periodontite é uma doença inflamatória crônica caracterizada pela destruição em vários níveis do osso alveolar, fibras colágenas e do cemento, é considerada importante causa de perda dentária em adultos. O infliximabe (Remicade®) é um medicamento composto de anticorpo quimérico monoclonal do fator de necrose tumoral-alfa (TNF-α), sendo utilizada atualmente no tratamento da artrite reumatóide, doença de Crohn, artrite psoriásica, espondilite anquilosante e colite ulcerativa. O objetivo do presente estudo foi investigar o efeito osteoprotetor do infliximabe na doença periodontal experimental (DPE). A DPE foi induzida passando-se um fio de náilon 3.0 em torno do segundo molar superior esquerdo de ratos Wistar machos. Os animais foram tratados com infliximabe (1, 5 e 10mg/kg), ou solução salina por via endovenosa 30 minutos antes da indução da periodontite e acompanhados até o dia do sacrifício no décimo primeiro dia. Alguns animais foram sacrificados no terceiro dia para análise de mieloperoxidase (MPO) gengival e índice de MPO neutrofílica no sangue periférico. Foram analisados os seguintes parâmetros: marcadores de reabsorção óssea, incluindo índice de perda óssea (IPO) por morfometria e autofluorescência do colágeno no tecido periodontal a partir de microscopia confocal e imunohistoquímica para metaloproteinase-1/-8 (MMP-1/-8) no tecido maxilar; marcadores inflamatórios, MPO e citocinas pró-inflamatórias (IL-1β e TNF-α) do tecido gengival detectados por western blot e ELISA, leucometria (e hemograma completo) e índice de MPO leucocitário no sangue periférico; sinalização imunoinflamatória, a partir de imunohistoquímica para RANK, RANK-L e osteoprotegerina (OPG) no tecido ósseo maxilar. A periodontite experimental causou leucocitose, aumento significativo de IPO, aumento dos níveis de citocinas inflamatórias e aumento do infiltrado inflamatório no tecido gengival e alteração da disposição do colágeno no aparelho periodontal. Ainda nos grupos desafiados, identificamos a presença de várias figuras do resto epitelial de Malassez (REM) na proximidade do cemento e osso alveolar. O infliximabe na dose de 5mg/kg foi capaz de reduzir a quantidade de granulócitos no sangue periférico, melhorar o IPO e a integridade do colágeno no complexo do tecido periodontal e reduzir o infiltrado inflamatório em relação ao grupo desafiado recebendo salina. O fármaco proporcionou ainda uma redução dos níveis de IL-1β, TNF-α e MPO gengivais (apenas no terceiro dia para MPO) em comparação ao grupo salina. Além disso, o tratamento com infliximabe diminuiu a imunomarcação para MMP-1/-8, RANK e RANK-L quando comparado ao grupo salina. Interessantemente, uma forte imunomarcação para RANK-L foi identificada no REM no processo de periodontite experimental, achado esse que foi reduzido pelo tratamento com inflimixabe. Estes resultados confirmam a participação da via OPG-RANK-RANK-L na osteólise inflamatória e o envolvimento do REM na fisiopatologia da periodontite experimental e ainda sugerem que uma resposta inflamatória local e sistêmica precede a ativação dessa via e o processo de reabsorção óssea. Concluímos que o infliximabe na dose de 5,0 mg/Kg possui efeito antinflamatório e osteoprotetor na doença periodontal experimental em ratos Wistar.

MONTEIRO, Larice Kércia Braz. "Efeitos anti-inflamatório e antirreabsortivo ósseo da Punica granatum l. combinada ou não com laser de baixa intensidade na perda óssea induzida por ligadura em ratos”. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-11-26T13:18:46Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_lkbmonteiro.pdf: 1114026 bytes, checksum: 7b06786507f846031cbbc0b35bc12780 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2013-11-26T13:19:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_lkbmonteiro.pdf: 1114026 bytes, checksum: 7b06786507f846031cbbc0b35bc12780 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-11-26T13:19:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_lkbmonteiro.pdf: 1114026 bytes, checksum: 7b06786507f846031cbbc0b35bc12780 (MD5) Previous issue date: 2013 / Periodontitis is a chronic infectious inflammatory disease. P. granatum (PNG) and low level laser irradiation (LLLI) have demonstrated anti-inflammatory properties and antioxidants. The aim of this study was to evaluate the anti-inflammatory and bone antiresorptive activities of PNG combined or not with LLLI in ligature-induced periodontitis in rats. Periodontitis was induced in 72 rats by inserting a nylon-3.0 around the left upper second molar. The contralateral hemimaxila was used as control. Groups of 6 animals received saline 0.9% (SAL), SAL+LLLI 4 J/cm2, PNG [60, 180, 540 (mg/kg)] or PNG 540 mg/kg+LLLI 4 J/cm2. The low intensity laser GaAlAs was applied immediately after surgery, while PNG was administered by gavage daily until day 11, when the animals were killed. The jaws were removed and processed for macroscopic, histometric, histological and immunohistochemical staining for TRAP. Gingival tissue samples were obtained to evaluate the activity of myeloperoxidase (MPO). Blood samples were collected for measurement of serum bone alkaline phosphatase (BALP), leukograms and analysis of liver and kidney function. Additionally, indexes of liver and kidney were performed. Rats were weighted daily. Periodontitis induction caused intense alveolar bone loss (ABL), reduction of BALP, cementum and periodontal ligament destructions, and intense leukocyte infiltration. Systemically, periodontitis induced leukocytosis and and did not alter hepatic transaminases, urea or creatinine serum levels, or liver and kidney indexes. The ABL was prevented by PNG (60= 34%, 180= 34%, 540= 42%), SAL+LLLI= 31% e PNG 540+LLLI= 48% (p<0.05). PNG 540 combined or not with LLLI decreased the alveolar bone resorption, the leukocyte infiltration and preserved the periodontium in the jaws in which the periodontitis was induced. Animals treated with PNG 540+LLLI showed an important decreasing of TRAP positive immunostaining (Periodontium Unchallenged = 0.0 ± 0.0, SAL= 0.016 ± 0.004; SAL+LLLI= 0.01 ± 0.003; PNG 540= 0.011 ± 0.003; PNG 540+LLLI = 0.002 ± 0.0003). The raise of MPO activity was prevented by PNG (60= 46%, 180= 49%, 540= 76%), SAL+LLLI= 54% e PNG 540+LLLI= 80% (p<0.05). In spite the reduction of BALP, seen in SAL group was not prevented by SAL+LLLI or PNG (p>0.05), the combined treatment with PNG 540+LLLI caused an increase on BALP serum levels (74.2 ± 5.4 U/l), when compared to SAL (44.9 ± 3.0 U/l) (p<0.05). No change was seen for hepatic transaminases, urea or creatinine serum levels, or in liver and kidney indexes, in all groups (p>0.05) and all groups prevented (p<0.05) the leukocytosis observed in SAL group. In short, PNG combined or not with LLLI reduced leukocyte infiltration and the number of neutrophils and reduced alveolar bone loss, at the expense of inhibiting osteoclast activation, without causing systemic changes / A periodontite é uma doença infecto-inflamatória crônica caracterizada por intensa perda óssea. P. granatum (PNG) e Irradiação com Laser de Baixa Intensidade (ILBI) têm demonstrado propriedades anti-inflamatórias e antioxidantes. O objetivo deste estudo foi avaliar as atividades anti-inflamatória e antirreabsortiva óssea da PNG combinada ou não com ILBI na periodontite induzida por ligadura em ratos. A periodontite foi induzida em 72 ratos Wistar através da inserção de um fio de nylon-3.0 em torno do segundo molar superior esquerdo. A hemimaxila contralateral foi utilizada como controle. Grupos de 6 animais receberam solução salina 0,9% (SAL), SAL+ILBI 4 J/cm2, PNG (60, 180, 540) mg/kg ou combinação de PNG 540 mg/kg+ILBI 4 J/cm2. O laser de baixa intensidade GaAlAs foi aplicado imediatamente após a cirurgia, enquanto a PNG foi administrada, por gavagem, diariamente, até o 11º dia, quando, então, os animais foram mortos, suas maxilas removidas e processadas para análises macroscópica, histométrica, histológica e marcação imunohistoquímica para TRAP. Amostras de tecido gengival foram obtidas para avaliação da atividade de mieloperoxidase (MPO). Foram coletadas amostras de sangue para dosagem dos níveis séricos de fosfatase alcalina óssea (FAO), leucograma e análise das funções hepática e renal. Adicionalmente, os índices hepático e renal foram realizados. Os ratos foram pesados diariamente. A indução da periodontite causou intensa perda óssea alveolar (POA), redução sérica da FAO, destruição do ligamento periodontal e do cemento, e intensa infiltração leucocitária. Sistemicamente, a periodontite induziu leucocitose e não causou alterações nos níveis séricos de transaminases hepáticas, ureia ou creatinina, bem como nos índices hepático e renal. A POA foi prevenida significantemente por PNG (60= 34%, 180= 34%, 540= 42%), SAL+ILBI= 31% e PNG 540+ILBI= 48% (p<0.05). PNG 540 combinada ou não com ILBI preveniu a perda óssea alveolar, a infiltração leucocitária e preservou o periodonto de maxilas nas quais a periodontite foi induzida. Animais tratados com PNG 540+ILBI mostraram significante redução na imunomarcação positiva para TRAP (Periodonto Não desafiado=0,0 ± 0,0; SAL= 0,016 ± 0,004; SAL+ILBI= 0,01 ± 0,003; PNG 540= 0,011 ± 0,003; PNG 540+ILBI= 0,002 ± 0,0003). O aumento da atividade de MPO foi prevenido por PNG (60= 46%, 180= 49%, 540= 76%), SAL+ILBI= 54% e PNG 540+ILBI= 80% (p<0.05). Embora a redução da FAO observada no grupo salina não tenha sido prevenida por PNG ou SAL+ILBI (p>0,05), PNG 540+ILBI causou um aumento significante nos níveis séricos de FAO (74,2 ± 5,4 U/l), quando comparado ao SAL (44,9 ± 3,0 U/l) (p<0,05). Nenhum grupo apresentou mudanças significantes nos níveis séricos de transaminases hepáticas, ureia ou creatinina ou nos respectivos índices hepático e renal (p>0,05), e todos os grupos preveniram (p<0,05) a leucocitose quando comparada ao grupo SAL. Em suma, PNG combinada ou não com ILBI reduziu a infiltração leucocitária e o número de neutrófilos além de reduzir a perda óssea alveolar, à custa da inibição da ativação de osteoclastos, sem causar alterações sistêmicas importantes

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:35:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 330195.pdf: 1831812 bytes, checksum: f6a68fbb57eacf59ff3ac3dff0a9e6d9 (MD5) Previous issue date: 2014 / Abstract : Introdução: Nas últimas décadas, descobriu-se que o adipócito era capaz de secretar adipocinas e citocinas com funções autócrinas, parácrinas e sistêmicas, que influenciavam de maneira importante, todo o metabolismo dos organismos vivos. Dentre os fatores associados aos distúrbios da biologia do adipócito, podemos destacar o estresse oxidativo, intimamente relacionado à formação dos produtos finais de glicação avançada (AGEs). Esparsos trabalhos na literatura têm procurado elucidar o papel da via do óxido nítrico (NO.) na fisiologia do tecido adiposo. Essa via, por meio do aumento das concentrações de guanosina 3'5' monofosfato cíclico (GMPc), promove efeitos positivos na biologia do adipócito, e consequentemente maior equilíbrio no balanço energético e metabolismo sistêmicos. Outra maneira de incrementar as concentrações de GMPc é por meio da administração de inibidores da fosfodiesterase 5, medicamentos que no futuro talvez sejam úteis nos distúrbios do tecido adiposo, como a obesidade, e suas consequências. Objetivos: Identificar o impacto de uma dieta hipercalórica e hiperlipídica (dieta de cafeteria) sobre a variação do peso corporal, a ingestão alimentar, a resistência à ação da insulina, as concentrações séricas de adiponectina, bem como nas concentrações de fator de necrose tumoral a (TNFa), interleucina 6 (IL-6), NO. e AGEs no tecido adiposo visceral. Analisar o efeito do tadalafil na intensidade da resistência à insulina, nas concentrações séricas de adiponectina, assim como nas concentrações de TNFa, IL-6 e AGEs no tecido adiposo visceral. Métodos: Estudo analítico experimental controlado e com intervenção, envolvendo um total de 72 ratos machos Wistar, distribuídos em 06 subgrupos de 12 animais: subgrupo ração salina ? SGRS, recebeu ração e solução salina; subgrupo ração tadalafil - SGRT, recebeu ração e tadalafil; subgrupo ração magro - SGRM, recebeu ração e solução salina; subgrupo cafeteria salina - SGCS, recebeu dieta de cafeteria e solução salina; subgrupo cafeteria tadalafil - SGCT, recebeu dieta de cafeteria e tadalafil e subgrupo cafeteria magro - SGCM, recebeu dieta de cafeteria e solução salina. O estudo teve a duração de 10 semanas, e o peso dos animais e a ingestão alimentar foram registrados semanalmente. Foram mensuradas as concentrações séricas de insulina e adiponectina, bem como as concentrações de TNFa, IL-6, nitrito (metabólito do NO.) e compostos de Maillard (equivalente aos AGEs) no tecido adiposo, sendo que todo o material foi coletado no momento do sacrifício dos animais. Na análise estatística foram empregados os testes ANOVA one way com correção de Tukey,ANOVA two way e teste t pareado. Resultados: Foi observado um aumento significativo do peso corporal ao longo do estudo em todos os subgrupos. A média de peso final aos 60 dias foi superior nos animais alimentados com dieta de cafeteria. A ingestão alimentar em gramas foi maior nos animais alimentados com ração. Os animais alimentados com dieta de cafeteria apresentavam uma maior expansão do tecido adiposo. As médias do modelo de avaliação da homeostase para resistência à insulina (HOMA-IR) entre os subgrupos no final do acompanhamento não foram diferentes. A proporção da adiponectina sérica em relação ao tecido adiposo total foi maior nos animais que receberam dieta balanceada, e as concentrações de IL-6 foram maiores nos animais que receberam dieta de cafeteria. A concentração de nitrito foi maior nos animais submetidos à dieta balanceada. As concentrações médias de compostos de Maillard foram maiores nos animais submetidos à dieta de cafeteria e nos animais de maior peso. Nos animais submetidos à dieta de cafeteria e tadalafil a concentração de compostos de Maillard foi menor. Conclusão: A dieta de cafeteria por 60 dias, apesar de mais sacietógena, levou a uma média de peso ponderal e tecido adiposo visceral superiores nos animais a ela submetidos sem, no entanto, induzir a um aumento expressivo da resistência à ação da insulina. Apesar da expansão do tecido adiposo total, a dieta de cafeteria não foi capaz de aumentar proporcionalmente as concentrações de adiponectina, sugerindo a interferência de outros fatores na fisiologia desta adipocina. O aumento das concentrações de IL-6, no tecido adiposo visceral dos animais alimentados com dieta de cafeteria, indica um provável incremento no processo inflamatório local. A diminuição dos níveis de nitrito no tecido adiposo dos animais submetidos à dieta de cafeteria sugere um prejuízo à via do óxido nítrico, enquanto o aumento das concentrações de compostos de Maillard, e, por consequência de AGEs, uma intensificação do processo oxidativo. Outro fator relacionado aos compostos de Maillard foi o peso, já que os animais de menor peso apresentavam também uma concentração menor destes compostos. O uso do tadalafil não foi eficaz na redução da resistência à insulina, no aumento das concentrações séricas de adiponectina e na diminuição das concentrações de citocinas inflamatórias no tecido adiposo. No entanto, o tadalafil mostrou-se capaz de reduzir a concentração de AGEs no tecido adiposo de animais submetidos à dieta de cafeteria, sugerindo um possível efeito favorável sobre o estresse oxidativo.<br> / Abstract : Introduction: In recent decades, new discoveries demonstrated that the adipocytes were capable of secreting adipokines and cytokines with autocrine, paracrine and systemic functions, which influenced in important ways throughout the metabolism of living organisms. Among the factors associated with adipocyte biology disorders we can highlight oxidative stress, closely related to the advanced glycation end products (AGEs) formation. Few studies have sought to elucidate the role of nitric oxide (NO.) in the adipose tissue physiology. This pathway increases the titles of guanosine 3'5' cyclic monophosphate (cGMP), ultimately bringing positive effects on adipocyte biology, and consequently greater balance in energy control and systemic metabolism. Another way to increase cGMP levels is through the administration of phosphodiesterase-5 (PDE5) inhibitors, drugs that may be useful in the future in adipose tissue disorders, such as obesity and its consequences. Objectives: To identify the impact of a hypercaloric and hyperlipidic diet (cafeteria diet) on body weight variation, food intake, insulin resistance, serum adiponectin levels and visceral adipose tissue levels of tumor necrosis factor a (TNFa), interleukin 6 (IL-6), NO., and AGEs. To analyze the consequences of the administration of tadalafil in the intensity of insulin resistance, serum adiponectin levels, as well as visceral adipose tissue levels of TNFa, IL-6, and AGEs. Methods: Analytical controlled experimental intervention study involving a total of 72 male Wistar rats, divided into 06 subgroups of 12 animals: chow-saline subgroup (CSG) received chow and saline; chow-tadalafil subgroup (CTG) received chow and tadalafil; chow lean subgroup (CLG) received chow and saline; cafeteria diet-saline subgroup (CafSG) received cafeteria diet and saline; cafeteria diet-tadalafil subgroup (CafTG) received cafeteria diet and tadalafil; and cafeteria diet-saline lean subgroup (CafLG) received cafeteria diet and saline. The study lasted 10 weeks and weight gain and food intake were recorded weekly. Insulin and adiponectin levels were detected in serum. The concentrations of TNFa, IL-6, nitrite (NO. metabolite) and Maillard compounds (AGEs equivalent) were detected in adipose tissue. All the samples for testing were collected at the time of animals' sacrifice. In statistical analysis, one-way ANOVA test with Tukey correction, two-way ANOVA, and paired t test were applied. Results: A significant increase of body weight throughout the study was observed in all subgroups. The mean final weight at 60 days was higher in animals fedcafeteria diet. Food intake in grams was higher in animals fed with chow at many times of the study. Animals fed the cafeteria diet had greater expansion of epididymal and retroperitoneal adipose tissue. The mean homeostasis model assessment for insulin resistance (HOMA -IR) between subgroups at the end of follow-up was not different. The serum adiponectin levels in relation to total adipose tissue were higher in animals fed a balanced diet, and the IL-6 levels were higher in animals fed cafeteria diet. The nitrite concentration was higher in animals subjected to balanced diet. Mean levels of Maillard compounds were higher in animals subjected to the cafeteria diet, and in the animals with the highest weight. In animals submitted to the cafeteria diet and tadalafil, concentration of Maillard compounds was lower. Conclusion: Cafeteria diet for 60 days, although more satiating, led to a higher mean total weight and visceral adipose tissue in animals that were submitted to it, without, however, resulting in a significant increase in insulin resistance. Despite the total adipose tissue expansion, cafeteria diet was not able to proportionally increase adiponectin levels, suggesting the influence of other factors in this adipokine production. Increased levels of visceral adipose tissue IL-6 of animals fed cafeteria diet indicate a probable increase in the local inflammatory process. The decreased adipose tissue nitrite levels of animals subjected to the cafeteria diet suggest injury to the nitric oxide pathway, while increased Maillard compounds levels, and consequently of AGEs, an intensification of the oxidative process. Another factor related to Maillard compounds was the weight of the animals, as leaner animals showed lower concentration of these compounds. The use of tadalafil was not effective in reducing insulin resistance, increasing adiponectin levels, and decreasing inflammatory cytokines in adipose tissue. However tadalafil was capable of reducing AGEs levels in the adipose tissue of animals fed cafeteria diet, suggesting a possible favorable effect on oxidative stress.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2011. / Made available in DSpace on 2015-03-18T20:32:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 326329.pdf: 1578139 bytes, checksum: 93b9a1d1eccbb0e9b62d1078f594ab16 (MD5) Previous issue date: 2011 / O trauma cranio-encefálico (TCE) é uma causa mundial de morbidade e mortalidade. A concentração sanguinea de citocinas têm sido associada com TCE. Neste estudo, nós investigamos os níveis séricos de IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, TNF-a e INF-? como biomarcadores de gravidade da lesão cerebral traumática e sua associação com a mortalidade hospitalar. As concentrações séricas de citocinas foram determinadas em média (IQ 25/75) de tempo de 10 (18/05) horas após o TCE, em 93 pacientes consecutivos admitidos no Hospital Governador Celso Ramos. Para as comparações, foram selecionados aleatoriamente pacientes com TCE leve(n = 18) e moderado (n = 16), atendidos em nossa emergência. Em pacientes com TCE grave, 2 amostras adicionais de sangue foram analisadas 30 (22/37) e 68 (55/78) horas após a lesão. Os dados coletados incluíram idade, sexo, achados tomográficos, CSG de admissão e as reações da pupila, presença de trauma e a mortalidade hospitalar associada. Mesmo em casos graves, os soros dos pacientes permaneceram indetectáveis para as citocinas IL-2, IL-4, IL-5 e IFN-? após o TCE, por citometria de fluxo. Os níveis de IL-10, mas não os de TNF-a, correlacionam-se significativamente com a gravidade da GCS (p = coeficiente de 0,42, Sperman <0,0001) e foram associadas com a mortalidade hospitalar de pacientes com TCE grave. A elevação dos níveis séricos de IL-10 permaneceram significativamente associados com a mortalidade (p = 0,01) no subgrupo de pacientes com TCE grave isolado (n = 74). A análise de regressão logística mostrou que a concentração dos níveis séricos de IL-10 (> 0,9 pg/ml), medidos 10 ou 30 horas após a lesão, foram, respectivamente, 6 vezes (OR 6,2, IC 95% 1,2-25,1, p = 0,03) e 5 vezes (OR 5,4, IC 95% 1,2-25,1, p = 0,03) mais associados com a mortalidade do que os níveis mais baixos (<0,05 pg/ml), independentemente da idade, do GCS admissão e ou a presença de traumas associados. Nenhuma associação foi observada entre os níveis séricos de IL-10 medidos 68 horas após o TCE e a mortalidade (p = 0,22). Desta forma, pudemos concluir que os níveis séricos de IL-10 medidos no início do 2 primeiros dias após TCE grave estão independentemente associados com mortalidade hospitalar aumentada e pode ser útil como marcador do TCE e seu prognóstico.<br> / Abstract : Traumatic brain injury (TBI) is a worldwide cause of morbidity and mortality. Blood levels of cytokines have been associated with TBI. Here we investigated the serum levels of IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, TNF-a and INF-? as biomarkers of traumatic brain injury severity and its association with hospital mortality. The serum levels cytokines were determined at a median (IQ 25/75) time of 10 (5/18) hours after TBI in 93 consecutive patients admitted in our hospital. For comparisons, we selected randomly patients with mild (n = 18) and moderate (n = 16) TBI attended in our emergence. In patients with severe TBI 2 additional blood samples were analyzed 30 (22/37) and 68 (55/78) hours after injury. Data collected included age, gender, CT findings, admission GCS and pupillary reactions, presence of associated trauma and hospital mortality. Even in severe cases, the serum IL2, IL4, IL5 and IFN-? levels remain undetectable after TBI by flow cytometry. The serum IL-10 levels, but not TNF-a, correlates significantly with GCS severity (Sperman s coefficient = 0.42, p<0.0001) and were associated with hospital mortality of patients with severe TBI. The elevated serum IL-10 levels remain significantly associated with mortality (p = 0.01) in the subset of patients with isolated severe TBI (n = 74). Multiple logistic regression analysis shows that higher serum IL-10 levels (> 0.09 pg/ml) measured 10 or 30 hours after the injury were respectively 6 times (OR 6.2, CI 95% 1.2  25.1, p = 0.03) and 5 times (OR 5.4, CI 95% 1.2  25.1, p = 0.03) more associated with hospital mortality than lower levels (< 0.05 pg/ml) independently on age, admission GCS and pupils or presence of associated trauma. No association was observed between serum IL-10 measured at 68 hour after TBI and mortality (p = 0.22). Serum IL-10 levels measured earlier in the first 2 days after severe TBI are independently associated with higher hospital mortality and may be a useful marker of TBI and its prognosis.