Since late 2019 a new coronavirus, SARS-CoV2, has spread through the world and caused a pandemic. The virus causes the heterogenous disease Covid-19, causing flu- like symptoms for most people but can cause Acute Respiratory Distress Syndrome and fatal outcome in some patients. The mechanism is not clearly understood, but depletion of the immunological response has been seen in patients with severe Covid-19. This study will focus on T- lymphocyte, T- cell subtypes, B- lymphocyte, NK- cell and intracytoplasmic interleukin subsets in hospitalized Covid-19 patients to examine immune phenotypes that could be related to, or cause, more severe disease. The method used is multicolour flow cytometry on whole blood and frozen PBMC. Comparison of fraction of each cell type from total cell count, with regard of underlying diseases, age, sex and other factors were done using multivariate regression analysis to evaluate mechanisms correlated to severe disease. The results showed overall lower lymphocyte counts in Covid- patients versus healthy controls. Lower lymphocyte counts were also observed in men versus women. Lower levels of NK-cells and B-cells were found in people in ages over 60 years.  Higher glucose levels were associated with lower B-cell and T-regulatory cell counts, while diabetes patients showed higher T-regulatory cell counts. No differences in proinflammatory cytokines were found between patient groups but were slightly higher in patients versus healthy controls. The conclusion of this study is that dysfunction of the immune system caused by infection of SARS-CoV2 gives lymphocytopenia and more severe outcome.

För att förhindra transfusionsreaktioner utförs antikroppsidentifieringar vid misstanke om att en patient bildat förvärvade antikroppar. Förvärvade antikroppar bildas efter att en individ blivit immuniserad, genom en tidigare transfusion eller vid graviditet.Rh-systemet är ett av de kliniskt viktigaste blodgruppssystemen man tar hänsyn till vid transfusion. De viktigaste blodgrupperna inom detta system är D, c, C, e och E. Den metod som främst används vid antikroppsidentifieringar är indirekt antiglobulintest (IAT), men ibland behöver denna kompletteras med ytterligare metoder, såsom papain-gelteknik eller polyetylenglykol-IAT (PEG-IAT). Papain verkar genom att spjälka bort sialinsyrainnehållande grupper på erytrocytens yta medan PEG är en vattenlöslig polymer som konkurrerar bort vattenmolekyler. Detta gör att Z-potentialen minskar och chansen för antigen-antikroppsreaktion ökar. Syftet med studien var att studera detektionen av erytrocytantikroppar inom Rh-systemet med PEG-IAT. För att undersöka metodens prestanda jämfördes PEG-IAT med resultat från antikroppsidentifieringar som utfördes med IAT och papain-gelteknik.  Under studien genomfördes antikroppsidentifieringar på 34 avidentifierade plasmaprover med metoderna IAT, papain-gelteknik och PEG-IAT. Detta resulterade i att antikropparna D, c, C, e, E detekterades som förväntat för de flesta proverna.  PEG-IAT hittade även ytterligare antikroppar i två av proverna. Vid en jämförelse mellan de olika metoderna detekterade PEG-IAT flest antikroppar följt av IAT och papain-gelteknik. Det finns även en signifikant skillnad i reaktionsstyrka mellan de olika metoderna för en testerytrocyt som är heterozygot för samtliga testade antigen i Rh-systemet.  Slutsatsen med studien är att PEG-IAT visar lovande resultat men behöver testas mot fler kliniskt viktiga antikroppar innan det kan implementeras i verksamheten.

Enligt svenska provtagningsanvisningar bör patienter vila i sittande ställning i minst 15 minuter innan provtagningen sker för att optimera resultatet av analysen. Referensintervallen som existerar idag i Sverige för olika analyser är framtagna och baserade på prover som tagits efter att deltagarna vilat 15 minuter i sittande position innan provtagningen. I denna studie samlades venösa blodprover in från patienter och personal i Karlskoga lasarett. Statistiska beräkningar utfördes för att jämföra kalium- och natriumanalyser i plasma efter att deltagaren vilat 15 minuter gentemot att deltagaren tagit en promenad på cirka 50 meter, signifikansnivån bestämdes som 0,05. Analyserna mättes genom en indirekt potentiometrisk metod, ISE, på instrumentet Advia 1800 Chemistry. Resultatet visade att det finns en signifikant skillnad av att vila 15 minuter innan provtagningen äger rum för kalium- och natriumanalyser i plasma gentemot att inte vila. Trots att studien visar att det finns en signifikant skillnad av att patienter vilar 15 minuter innan provtagningen sker är skillnaden inte tillräckligt stor för att påverka resultatet på ett sätt som förändrar läkarbedömningen. Personal bör ändå följa provtagningsanvisningarna för att optimera trovärdigheten och resultatet av analysen. / Swedish sampling guidelines encourage patients to rest for 15 minutes in a sitting position before drawing blood in order to optimize the results of the analysis. The reference ranges that is used for different blood tests in Sweden are originally based on samples taken from participants that has been resting 15 minutes in a sitting position. In this study, venous blood samples were collected from patients and staff in Karlskoga hospital. Statistical calculations was performed in order to compare potassium- and sodiumanalyzes in plasma after resting 15 minutes and after a stroll of 50 meters. The significance level was set to 0,05. The analyzes were measured using an indirectly potentiometric method, ISE, on the instrument Advia 1800 Chemistry. The study found that there is a significant difference by resting 15 minutes in a sitting position before drawing blood in order to analyze potassium and sodium compared to not resting. The difference between resting for 15 minutes in a sitting position before sampling, and not resting, is not large enough to affect the medical assessment of the analysis. However, hospital staff should still follow the Swedish sampling guidelines in order to optimize the credibility of the analysis.

Prostatacancer utgör idag den vanligaste cancerformen bland män i västvärlden och enbart i Sverige diagnostiseras cirka 10 000 män årligen med sjukdomen. Immunförsvaret och mer specifikt CD8+ T-cellerna spelar en viktig roll i förmågan att eliminera tumöromvandlade celler innan en klinisk relevant cancer uppstår. T-cell immunoreceptor with immunoglobulin and tyrosine-based inhibitory motif domain (TIGIT) är ett inhibitoriskt checkpoint protein som har visat sig ha en dämpande effekt på CD8+ T-celler vilket tumörceller utnyttjar för att öka sin tillväxt. Detta protein har identifierats i hög grad i flera olika cancertyper samt kan användas som prognostisk markör för ett antal olika cancersjukdomar. Ett immunohistokemiskt protokoll optimerades och användes för att detektera TIGIT-uttryck i formalinfixerad och paraffininbäddad prostatatumörer från män med eller utan lymfkörtelmetastas vid diagnostillfället. Resultatet var att av patienter med lymfkörtelmetastas hade 17 (77,3 %) TIGIT-uttryck i sin primärtumör och för män utan lymfkörtelmetastas hade 27 (79,4 %) TIGIT-uttryck. Fisher’s exact test användes för att studera associationen mellan TIGIT-uttryck i primärtumören hos prostatacancerpatienter och lymfkörtelmetastas. Testet visade ingen signifikant skillnad mellan dessa grupper, p = 1,00. Vår slutsats är att TIGIT inte kan användas som prognostisk markör för prostatacancermetastasering, men ytterligare studier krävs för att definitivt kunna dra några slutsatser. / Prostate cancer constitutes the most common form of cancer among men in the western world today and, in Sweden alone, about 10,000 men are diagnosed with the disease annually. The immune system and specifically CD8+ T cells play an important role in the ability to eliminate tumour cells before a clinically significant cancer occurs. T-cell immunoreceptor with immunoglobulin and tyrosine-based inhibitory motif domain (TIGIT) is an inhibitory checkpoint protein that has been shown to have a suppressing effect on CD8+ T cells in which tumour cells exploit to increase in size. This protein has been identified in several types of cancer and can be used as a prognostic biomarker in a range of different cancer diseases.  A protocol for immunohistochemistry was optimized and used for detecting TIGIT expression in formalin-fixed and paraffin-embedded tissues of prostate tumour from men either with lymph node metastases or not by the time of diagnosis.  The results from patients with lymph node metastases was that 17 (77,3 %) had TIGIT expression in their primary tumour while for men without lymph node metastases 27 (79,4 %) had TIGIT expression. Fisher’s exact test was used to study the association between TIGIT expression in the primary tumour of prostate cancer patients and lymph node metastases. The test showed no significant difference between these groups, p = 1,00. Our conclusion is that TIGIT can not be used as a prognostic biomarker for prostate cancer metastases, but further study is needed to definitely draw any conclusions.

Medfödda hjärtfel drabbar ca 1% av alla barn. Vid vissa typer av hjärtfel saknas adekvat förbindelse mellan höger kammare och lungartären, antingen pga stenosering, obstruktion eller total avsaknad. Dessa hjärtfel krävs operation i form av rekonstruktion av förbindelsen (RVOT). För rekonstruktionen används vanligen mänskliga hjärtklaffar, så kallade homograft. Homograft används fördelaktigt pga dess goda hemodynamiska prestanda samt att mottagaren besparas behandling med blodförtunnande mediciner. Syftet med projektet var att genomföra en hållbarhetsstudie av homograft som bevarats i antibiotikalösning över tid, tidsintervall upp till två månader. Vilket besvaras utifrån hur homograftet cell- och vävnadsstruktur påverkas av antibiotikalösningen, och om det skiljer sig mellan aorta- och pulmonaliskärl samt om och hur homograftets mottaglighet för histologisk infärgning påverkas av antibiotikalösningen över tid? Studien omfattade kärlmaterial från både aorta- och pulmonaliskärl från 20 donerade homograft, där samtliga donatorer är upp till 65 år och har samtyckt till att homograften används till studien. Kärlmaterialet processas morfologiskt och färgas in med histofärgerna Azan, Erytrosin-Saffran samt Van Gieson Elastin för att visualisera kärlväggens cell- och vävnadsstrukturer. Resultat av studien påvisar att homograften påverkas negativt av antibiotikalösningen över tid med avseende på cell- och vävnadsstruktur. Det går även att påvisa adekvata skillnader i hur aorta- och pulmonaliskärlen påverkas. Däremot påvisades ingen signifikant antbiotikapåverkan med avseende på homograftets mottaglighet för histofärgningarna.

Vid utförande av immunokemiska analyser används serum och plasma. Advia Centaur XPT är det instrument som används på Centrallaboratoriet Universitetssjukhuset Örebro inom immunokemi. Metoden baseras på kemiluminescens med mono- och/eller polyklonala antikroppar och akridiumester som utgör basen för detektion med direkt kemiluminescens. Instrumentet använder två typer av metoder: sandwichmetod och kompetitiv metod. Studien gick ut på att utföra analys av thyroideastimulerande hormon, fritt tyroxin, fritt trijodtyronin, thyroid peroxidas antikroppar, ferritin, pro B-typ natriuretisk peptid och högkänslig Troponin I på serum och plasma från 25 individer, vid 0-tidpunkt och efter 24, 48 och 72 timmar. Analysresultaten och skillnaderna mellan de två matriserna och tidpunkterna utreddes för statistiskt signifikanta och medicinskt betydelsefulla skillnader. De flesta analyterna visade stabilt resultat över tid och att de kan sparas och analyseras fram till 72 timmar, förutom TPO-antikroppar som verkar vara en instabil och känslig analys. Resultatet av jämförelsen mellan serum och plasma visade inte signifikant skillnad varför det går att övergå till alternativ matris serum/plasma i fall originalmatrisen (serum/plasma beroende på analys) saknas. / Serum and plasma are used in performing immunochemical analyzes. Advia Centaur XPT instruments are used in immunochemistry at the Central Laboratory at Örebro University Hospital. The method is based on chemiluminescence with the use of mono- and/or polyclonal antibodies, and acridium ester for direct chemiluminescence detection. The instrument uses two types of methods: sandwich method and competitive method. The study focused on performing analysis for thyroid stimulating hormone, free thyroxine, free triiodothyronine, thyroid peroxidase antibodies, ferritin, pro B-type natriuretic peptide and highly sensitive Troponin I on serum and plasma from 25 individuals, at time 0 and after 24, 48 and 72 hours. The results between the different time points and the two matrices, were examined to determine whether there was any statistically significant or medically unacceptable bias. Most analytes showed stable results over time and that they can be used and analyzed up to 72 hours, except for TPO antibodies which appear to be an unstable and sensitive analysis. Results in comparison between serum and plasma did not show a significant difference and therefore it is possible to switch to an alternative matrix    serum/ plasma in cases where the original matrix (serum / plasma depending on analysis) is missing.

Cells that cover the body’s inner and outer surfaces are called epithelial cells. Endothelial cells are specialised epithelial cells which, among other things, line the inside of blood vessels. The endothelium is anchored to the basement membrane through molecules called laminins. In an acute inflammation laminins can bind to leukocytes so that they can reach the inflamed tissue. Chemokines are molecules that attract leukocytes and can be synthesized by endothelial cells. This report will investigate what impact stimulation with laminin-332 on endothelial cells has on their gene expression for the chemokines CCL7, CCL8, CCL20, CXCL6 and CXCL10. A previously performed analysis for protein expression which had been performed under the same conditions revealed an upregulation of all chemokines except for CCL8, which was downregulated. The analysis for protein expression was executed with Olink’s Proximity Extension Assay and analysis of gene expression was carried out with qRT-PCR. The results revealed that gene expression for CCL8, CXCL6 and CXCL10 was under the detection limit for the chosen method. Gene expression for CCL7 and CCL20 was detectable and revealed an upregulation of gene expression for both genes, which was consistent with the results from the study that analysed protein expression. This led to the conclusion that stimulus with laminin-332 upregulates mRNA expression, protein production and protein secretion in human umbilical vein endothelial cells for chemokines CCL7 and CCL20. Lastly, the involvement of the chemokines CCL7 and CCL20 in inflammation and cancer diseases is explored as well as their potential role as a biomarker for clinical treatment. / Celler som täcker kroppens inre och yttre ytor kallas för epitelceller. Endotelceller är specialiserade epitelceller som bland annat bekläder insidan av blodkärlen. Endotelet är förankrat till basalmembranet via molekyler kallade lamininer. Vid en akut inflammation kan lamininer binda till leukocyter för att de ska kunna ta sig ut till den inflammerade vävnaden. Kemokiner är molekyler som attraherar leukocyter och som kan produceras av endotelcellerna. I denna rapport utforskas vilken påverkan som laminin-332 har på endotelcellers genuttryck för kemokinerna CCL7, CCL8, CCL20, CXCL6 och CXCL10. En tidigare utförd analys för proteinuttryck som gjorts under samma förhållanden visade en uppreglering av samtliga kemokiner, med undantag för CCL8 som blev nedreglerad. Analysen för proteinuttryck var utförd med Olinks Proximity Extension Assay och analys för genuttryck utfördes med qRT-PCR. Resultaten visade att genuttrycket för CCL8, CXCL6 och CXCL10 var för lågt för att detekteras med den valda metoden. Genuttryck för CCL7 och CCL20 var detekterbart och visade båda en uppreglering av genuttryck vilket överensstämde med resultatet från studien som analyserat proteinuttrycket. Detta ledde till slutsatsen att stimulans med laminin-332 uppreglerar uttryck av mRNA, proteinproduktion och proteinsekretion i humana venösa endotelceller från navelsträng för kemokinerna CCL7 och CCL20. Slutligen, utforskas involveringen av kemokinerna CCL7 och CCL20 vid inflammation och cancerassocierade sjukdomar samt vilken roll de kan spela som biomarkörer vid behandling.

No description available.

No description available.

No description available.