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Caracterização molecular de isolados de Giardia spp. provinientes de amostras fecais de origem humana do Hospital Universitário - USP - São Paulo, pela análise de fragmentos do gene codificador da beta-giardina (bg). / Molecullar charaterization of Giardia spp. from human faecal samples of Hospital Universitário USP São Paulo, by analisys of fragments from code gene da beta-giardina (bg).Valdir Azevedo dos Santos 13 December 2011 (has links)
A giardíase é uma doença entérica de alta prevalência particularmente nos países em desenvolvimento. Diferentes espécies foram descritas em função de seus hospedeiros. A G. duodenalis é a espécie que parasito não só o homem, mas também animais domésticos e silvestres. Recentemente, com a aplicação de técnicas moleculares, foi possível identificar sete diferentes agrupamentos sendo que cada um deles tem predileção por determinadas espécies de hospedeiro. Essa discriminação não é possível por meio da microscopia. A identificação do(s) agrupamento(s) presente(s) na população de determinada região pode ser de grande importância na elaboração de políticas de saúde pública já que revela o perfil de transmissão desse protozoário. Este estudo teve por objetivos verificar o grau de positividade de enteroparasitos, a contribuição de cada um deles nesse índice e o genótipo dos cistos de G. duodenalis presentes em amostras de fezes de indivíduos atendidos no Hospital Universitário da Universidade de São Paulo. Foram analisadas 6717 amostras com positividade para algum enteroparasito de 12,5%, sendo S.stercoralis e G. duodenais respectivamente o helminto e protozoário patogênico mais frequentes. A maioria dos casos de G. duodenalis genotipada era dos agrupamentos AII e B. / Giardiasis is a very prevalent enteric disease occurring mainly in developing countries. Different species have been described concerning their hosts. G. duodenalis parasites not only men but also domestic and wild animals. Recently molecular techniques have been used to identify seven different assemblages which parasites specific hosts. The microscopic analysis do not allows that discrimination. It can be useful to know the assemblage profile of specific population in order to provide some important information to built public health politicies once it reveals the transmition of the protozoan The aim of this study was to verify the enteroparasites infection degree, the individual contribution of each one in this picture and to genotyping G. duodenalis cysts from human faecal samples of individuals from University Hospital from Universty of São Paulo. So, 6717 faecal samples were analysed and 12,5% were positive for some enteroparasite and S.stercoralis and G. duodenais were the helminth e pathogenic protozoan more frequently found. Most of the cases of G. duodenalis were from the assemblages AII and B.
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Efeito da desnutrição protéica sobre a matriz extracelular da medula óssea de camundongos / Effect protein malnutrition on the extracellular matrix of the bone marrow of miceVituri, Cidônia de Lourdes 15 February 2001 (has links)
As células sangüíneas originam-se da medula óssea através da célula tronco que sofre processo de proliferação, diferenciação e maturação no microambiente hematopoiético. O microambiente hematopoiético é uma estrutura altamente organizada composta de células estromais, moléculas da matriz extracelular (MEC) e citocinas. A desnutrição protéico-energética diminui a produção de células sangüíneas e interfere na defesa do organismo. Neste trabalho estudamos os efeitos da desnutrição protéica (dieta contendo 4% de caseína) sobre a MEC da medula óssea em camundongos. Avaliamos a composição da MEC através de SDS-PAGE 7,5% e Western blot para Fibronectina (FN), laminina (LN) e trombospondina (TSP). Verificamos a capacidade da MEC aderir e sustentar proliferação da célula mielóide FDC-P1, na ausência e na presença de citocinas (GM-CSF e IL3). Avaliamos também a capacidade de ligação destas citocinas na MEC. O perfil eletroforético mostrou diferenças nas proteínas da MEC do animal desnutrido em relação ao controle. Através da densitometria dos géis observamos nas amostras obtidas do animal desnutrido, maior intensidade nas bandas de peso molecular 220, 182, 108 e 56 KDa em relação ao controle. Em 72 KDa a banda foi mais intensa nas amostras dos animais controles. A banda de 60 KDa foi evidenciada apenas nas amostras obtidas dos animais desnutridos. As bandas de 123 e 49 KDa foram evidenciadas apenas nas amostras dos animais controles. A expressão de FN, LN e TSP foi maior nas amostras obtidas dos animais desnutridos. Os ensaios de adesão e proliferação na presença e ausência de citocinas não apresentaram diferenças significativas entre as amostras. Quando avaliamos a capacidade da MEC ligar-se ao GM-CSF, houve maior interação com a MEC proveniente do animal desnutrido do que a MEC do animal controle. O teste de ligação para o IL3 não mostrou diferenças entre as amostras. Esses achados sugerem que a desnutrição protéica induz modificações na MEC, alterando o microambiente hematopoiético. / Blood cells have their origin at the bone marrow through the stem cell which undergoes a proliferation, differentiation and maturation process in the hematopoietic microenvironment. The hematopoietic environment is a highly organized structure formed by stromal cells, extracellular matrix (ECM) molecules, and cytokines. Protein-energy malnutrition reduces the production of blood cells, interfering with the defense of the organism. In the present work we have studied the effects protein malnutrition has on the ECM of bone marrow in mice. We have evaluated ECM composition by means of SDS PAGE 7,5% and Western blot for fibronectin (FN), laminin (LN) and thrombospondin (TSP). We assessed the capacity ECM has in adhesion and support of proliferation of the FDC-P1 myeloid cell both in the absence and in the presence of GM-CSF and IL3 cytokines. We have also measured the binding capacity of these cytokines in the ECM. The electrophoresis profile showed the existence of differences between the ECM proteins in the undernourished animal and the control. Using gel densitometry, we observed in samples from the undernourished animal a greater intensity of bands of 220, 182, 108, 60 and 56 KDa molecular weight as compared to control. At 72 KDa the band was more intense on samples from control animals. The 60 KDa band was evident only on samples taken from undernourished animals. The 123 and 49 KDa bands were evident on control animals only. Expression of FN, LN, and TSP was greater on samples from undernourished animals. Adhesion and proliferation assays, both in the presence and in the absence of cytokines, did not show significant differences among samples. When we evaluated the capacity ECM has to bind to GM-CSF, a greater interaction was seen with the ECM from the undernourished animal than the ECM from the control. Binding test for IL3 showed no differences existed among samples. Such findings suggest protein malnutrition causes alterations of the ECM, modifying the hematopoietic microenvironment.
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A aplicação da técnica de referenciação (benchmarking) em serviços de medicina laboratorial / Benchmarking applicability in laboratory medicine servicesCésar Alex de Oliveira Galoro 15 September 2008 (has links)
A prática da Medicina Laboratorial vem mudando em conseqüência do desenvolvimento tecnológico e regulamentações dos Sistemas de Saúde levando à implantação de Sistemas de Qualidade e monitoramento de indicadores. A aplicabilidade e os potenciais benefícios do Benchmarking como instrumento de análise da qualidade foram testados em um grupo de oito laboratórios hospitalares através do recebimento, análise e devolução aos participantes de Relatórios de Acompanhamento relativos a indicadores diversos dos anos de 2005 e 2006. O método 6 foi utilizado, quando aplicável, para avaliar a qualidade dos processos. Foram colhidos dados de indicadores de produção, produtividade, absenteísmo segurança no trabalho, recoletas e tempo para liberação de laudos. O Benchmarking é uma ferramenta útil e aplicável para a gestão de qualidade nos laboratórios clínicos, principalmente quando associado a instrumento independente de avaliação de qualidade de processos, porém é necessária a definição de mecanismos que garantam a confiabilidade dos dados primários utilizados nos programas / Laboratory Medicine practice is changing as a result of technological development and regulations pressures, letting to the implementation of quality systems and monitoring indicators. This study tested Benchmarking applicability and benefits as a tool for quality analysis in brazilian laboratory medicine services. The study was performed with eight hospital laboratories through the receipt, analysis and return to the participants of Monitoring Reports, relating to several quality indicators for the years 2005 and 2006. 6 Sigma criteria was applied as independent assessment of process quality. Data obtained shows indicators of total production, productivity, absenteeism, safety at work, redraws and turn-around-times. Benchmarking showed to be a useful and feasible tool for quality management in Brazilian clinical laboratories, particularly when associated to independent tools for evaluating the quality of laboratorial processes
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A aplicação da técnica de referenciação (benchmarking) em serviços de medicina laboratorial / Benchmarking applicability in laboratory medicine servicesGaloro, César Alex de Oliveira 15 September 2008 (has links)
A prática da Medicina Laboratorial vem mudando em conseqüência do desenvolvimento tecnológico e regulamentações dos Sistemas de Saúde levando à implantação de Sistemas de Qualidade e monitoramento de indicadores. A aplicabilidade e os potenciais benefícios do Benchmarking como instrumento de análise da qualidade foram testados em um grupo de oito laboratórios hospitalares através do recebimento, análise e devolução aos participantes de Relatórios de Acompanhamento relativos a indicadores diversos dos anos de 2005 e 2006. O método 6 foi utilizado, quando aplicável, para avaliar a qualidade dos processos. Foram colhidos dados de indicadores de produção, produtividade, absenteísmo segurança no trabalho, recoletas e tempo para liberação de laudos. O Benchmarking é uma ferramenta útil e aplicável para a gestão de qualidade nos laboratórios clínicos, principalmente quando associado a instrumento independente de avaliação de qualidade de processos, porém é necessária a definição de mecanismos que garantam a confiabilidade dos dados primários utilizados nos programas / Laboratory Medicine practice is changing as a result of technological development and regulations pressures, letting to the implementation of quality systems and monitoring indicators. This study tested Benchmarking applicability and benefits as a tool for quality analysis in brazilian laboratory medicine services. The study was performed with eight hospital laboratories through the receipt, analysis and return to the participants of Monitoring Reports, relating to several quality indicators for the years 2005 and 2006. 6 Sigma criteria was applied as independent assessment of process quality. Data obtained shows indicators of total production, productivity, absenteeism, safety at work, redraws and turn-around-times. Benchmarking showed to be a useful and feasible tool for quality management in Brazilian clinical laboratories, particularly when associated to independent tools for evaluating the quality of laboratorial processes
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Evaluation and implementation of a molecular-based protocol for the identification of enteroviruses at the Florida Department of Health - Tampa Laboratory [electronic resource] / by Matthew Adams Smith.Smith, Matthew Adams. January 2003 (has links)
Title from PDF of title page. / Document formatted into pages; contains 86 pages. / Thesis (M.S.P.H.)--University of South Florida, 2003. / Includes bibliographical references. / Text (Electronic thesis) in PDF format. / ABSTRACT: The Enterovirus genus within the family Picornaviridae contains over 100 serotypes, of which sixty-four are known to be human pathogens. Infection with this group of RNA viruses produces a myriad of clinical conditions including poliomyelitis, meningitis, encephalitis, respiratory illnesses, and hand-foot-and-mouth disease. Outbreaks have been documented worldwide; significant morbidity and mortality exist to warrant laboratory surveillance. Traditionally, enteroviruses have been identified to the level of serotype by the serum neutralization assay. However, numerous problems are associated with this assay. The serum neutralization assay is labor intensive, results are often ambiguous, and reagents are becoming difficult to obtain. Recently, molecular-based typing protocols have been described that are cost effective and produce results that are more reliable. / ABSTRACT: The overall objective of this thesis was to implement a molecular-based typing protocol to replace the serum neutralization method currently used. Three specific aims were identified to reach this objective. First, a database cataloging all enteroviruses isolated at the Florida Department of Health - Tampa Branch Laboratory from 1981 through 2002 was created. Serotype prevalence, specimen submission rates, and temporal trends were analyzed to demonstrate the public health importance of enterovirus surveillance. Next, five oligonucleotide primer sets were compared with respect to sensitivity, specificity, and overall utility in molecular typing protocols developed to accurately determine enterovirus type. Finally, the most effective molecular assay was used to conduct two basic molecular epidemiological analyses of intratypic variation of Coxsackievirus B5 isolates, and of intratypic variation of successive Echovirus 9 passages. / ABSTRACT: The results from this study show that implementation of a molecular-based typing system for enteroviruses would be an improvement over current enterovirus serotyping methods. Results are obtained more rapidly and are more reliable. The implementation of such a system would improve the surveillance capabilities of the State of Florida Department of Health. / System requirements: World Wide Web browser and PDF reader. / Mode of access: World Wide Web.
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Bayesian generalized linear models for meta-analysis of diagnostic tests.Xing, Yan. Cormier, Janice N., Swint, John Michael, January 2008 (has links)
Thesis (Ph. D.)--University of Texas Health Science Center at Houston, School of Public Health, 2008. / Source: Dissertation Abstracts International, Volume: 69-02, Section: B, page: 0769. Advisers: Claudia Pedroza; Asha S. Kapadia. Includes bibliographical references.
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Avaliação do método de sucção de encéfalo de morcegos (Chiroptera, Mammalia) para diagnóstico da raiva /Gonçales, Juliano Ferreira. January 2008 (has links)
Orientador: Luzia Helena Queiroz da Silva / Banca: Wagner Andre Pedro / Banca: Elenice Maria Sequetin Cunha / Resumo: O diagnóstico laboratorial da raiva em morcegos é realizado utilizando-se, principalmente, o encéfalo do animal suspeito. O objetivo do presente trabalho foi testar a hipótese de que o método de aspiração com pipeta plástica (tipo Pasteur) é eficaz na obtenção de encéfalo de morcegos para a realização do diagnóstico comparado com o método tradicional de abertura de crânio. Para tanto, estudaram-se quatro espécies diferentes de morcegos, Molossus rufus (E. Geoffroy, 1805), Molossus molossus (Pallas, 1766), Artibeus lituratus (Olfers,1818) e Myotis nigricans (Schinz, 1821), totalizando 200 amostras. A quantidade de massa encefálica obtida pelo método tradicional foi significativamente maior, contudo, o material colhido pela aspiração foi suficiente para a execução do diagnóstico da doença. Ambos os métodos detectaram indivíduos positivos, sendo que o método de aspiração teve a vantagem de preservar o crânio possibilitando melhor identificação das espécies. / Abstract: Rabies diagnosis in bats is usually performed using the brain of suspected animals. The main hypothesis tested by this work was that aspiration method using plastic pipette (Pasteur type) was effective in the collection of bat brain sample for rabies diagnosis when compared to the opening skull method. A total of two hundred bats of four species were studied: Molossus rufus (E. Geoffroy, 1805), Molossus molossus (Pallas, 1766), Artibeus lituratus (Olfers, 1818) and Myotis nigricans (Schinz, 1821). The proportion of brain weight compared to body weight was statistically higher when using the traditional method, although the brain mass collected by aspiration method was enough for rabies diagnosis. Results demonstrate that independently of the collecting method, both gated to detect positive samples and the aspiration method has the advantage of skull preservation, permitting the identification of the species. / Mestre
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Avaliação diagnóstica do exantema máculo-papular e urticária tardia induzidos por antibióticos beta-lactâmicos / -Maria Fernanda Malaman 15 December 2006 (has links)
Os antibióticos beta-lactâmicos, principalmente as aminopenicilinas (ampicilina e amoxicilina) são causa freqüente de exantema maculo papular e urticária tardia em pacientes tratados com estes medicamentos. Entretanto, a falta de métodos para diagnóstico destas reações constitui uma lacuna na abordagem destes indivíduos. Objetivos: Os objetivos deste estudo foram determinara a freqüência e significância de testes cutâneos positivos em pacientes com história de exantema maculo-papular e urticária tardias induzidos por antibióticos beta-lactâmicos e determinar a sensibilidade e especificade dos testes diagnósticos in vitro para o diagnóstico de alergia a drogas: proliferação linfocitária e dosagem de citocinas no sobrenadante da cultura linfocitária.. Métodos: Os pacientes foram submetidos à dosagem de IgE específica para os seguintes determinantes: benzilpeniciloil, amoxiciloil e ampiciloil. Testes cutâneos de puntura e intradérmico com benzilpeniciloil polilisina, mistura de determinantes menores da penicilina, benzilpenicilina (10.000 UI/ml), amoxicilina (2 mg/ml) e ampicilina (2mg/ml) foram realizados em todos os pacientes com leituras após 20 minutos, 48 horas e 72 horas. Foi realizado teste de contato com os mesmos medicamentos (amoxicilina 5%, ampicilina 5% e penicilina G 5000UI/g de vaselina sólida). Todos os testes foram feitos em duplicata com controles positivo e negativo. Amostras de sangue foram coletadas para a proliferação linfocitária (incorporação de timidina triciada) e dosagem de citocinas no sobrenadante da cultura (IL-5, IFN-gama e TNF- 17 alfa) através de ELISA. Resultados: Foram estudados 20 pacientes e 15 controles. Nenhum dos pacientes ou controles apresentou teste cutâneo de leitura imediata positivo. Três pacientes reagiram positivamente aos testes cutâneos de leitura tardia nas leituras de 48 e 72 horas. Não houve nenhum resultado positivo dos testes cutâneos no grupo controle. A proliferação linfocitária mostrou-se positiva em somente 2 controles (13%) e 10 pacientes (50%). A sensibilidade dos experimentos de proliferações linfocitária variou entre 25% com penicilina na concentração de 250 ?g/ml até 55% com ampicilina 1000 ?g/ml. Sua especificidade foi de 80% a 100%. Conclusão: os testes cutâneos de leitura tardia não constituíram métodos diagnósticos eficazes para as reações tardias aos antibióticos beta-lactâmicos. A proliferação linfocitária apresentou baixa sensibilidade, porém, alta especificidade para o diagnóstico das mesmas reações. A detecção de IFN-gama e IL-5 evidenciaram alta especificidade e baixa sensibilidade, enquanto a dosagem de TNF-alfa mostrou-se altamente sensível (95%), porém, pouco específica (40%) / The beta-lactam antibiotic, mainly aminopenicillins: ampicillin (AMP) and amoxicillin (AMX), are frequently cited as causes of morbiliforme eruptions and late onset urticaria. A major problem with existing data on beta-lactam reactions of the delayed type includes a lack of standardized testing methods. Objectives: The goal of this study is to establish the frequency and significance of positive skin testing in patients with history of beta-lactam induced maculo-papular exanthema and late onset urticaria and the sensibility/specificity of in vitro tests for drug allergy investigation: lymphocyte proliferation assay and cytokine detection. Methods: Patients were submitted to complete penicillin (PEN) allergy test: specific detection for serum IgE antibody to benzyl penicilloyl polylysine, amoxicilloyl polylysine and ampicilloyl polylysine; puncture and intradermal skin test with benzyl penicilloyl polylysine and minor determinants mixture, benzylpenicillin (10.000 UI/ml), amoxicillin (2mg/ml), ampicillin (2mg/ml) were performed and read at 20 minutes, 48hours and 72 hours. All patients had epicutaneous patch testing done with the same drugs (5% amoxicillin, 5% ampicillin and 5000 IU/g penicillin G all in petrolatum). All tests were performed in duplicate with positive and negative controls. All subjects had blood collected for lymphocyte proliferation assay (H3-thymidine incorporation assay) and IL-5, TNF-alpha and IFN-gamma profile were analyzed in culture supernatant by ELISA. Results: None of the patients or controls had positive immediated skin test. Only three patients reacted positively to the 48 and 72 hours 15 reading of intradermal skin test and patch test with the same reagents. There was no positive skin test result among the control group. The lymphocyte proliferation test (LTT) was positive in only two control subjects, while in the study group, 10 patients had positive proliferation tests (50%). The LTT sensitivity varied from 25% to 55% depending on the drug and concentration tested. The specificity ranged from 80% to 100%. IFN-gamma and IL-5 detection had a high specificity, but low sensitivity, while TNF-alpha showed high sensitivity (95%) and low specificity (40%)
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Efeito da desnutrição protéica sobre a matriz extracelular da medula óssea de camundongos / Effect protein malnutrition on the extracellular matrix of the bone marrow of miceCidônia de Lourdes Vituri 15 February 2001 (has links)
As células sangüíneas originam-se da medula óssea através da célula tronco que sofre processo de proliferação, diferenciação e maturação no microambiente hematopoiético. O microambiente hematopoiético é uma estrutura altamente organizada composta de células estromais, moléculas da matriz extracelular (MEC) e citocinas. A desnutrição protéico-energética diminui a produção de células sangüíneas e interfere na defesa do organismo. Neste trabalho estudamos os efeitos da desnutrição protéica (dieta contendo 4% de caseína) sobre a MEC da medula óssea em camundongos. Avaliamos a composição da MEC através de SDS-PAGE 7,5% e Western blot para Fibronectina (FN), laminina (LN) e trombospondina (TSP). Verificamos a capacidade da MEC aderir e sustentar proliferação da célula mielóide FDC-P1, na ausência e na presença de citocinas (GM-CSF e IL3). Avaliamos também a capacidade de ligação destas citocinas na MEC. O perfil eletroforético mostrou diferenças nas proteínas da MEC do animal desnutrido em relação ao controle. Através da densitometria dos géis observamos nas amostras obtidas do animal desnutrido, maior intensidade nas bandas de peso molecular 220, 182, 108 e 56 KDa em relação ao controle. Em 72 KDa a banda foi mais intensa nas amostras dos animais controles. A banda de 60 KDa foi evidenciada apenas nas amostras obtidas dos animais desnutridos. As bandas de 123 e 49 KDa foram evidenciadas apenas nas amostras dos animais controles. A expressão de FN, LN e TSP foi maior nas amostras obtidas dos animais desnutridos. Os ensaios de adesão e proliferação na presença e ausência de citocinas não apresentaram diferenças significativas entre as amostras. Quando avaliamos a capacidade da MEC ligar-se ao GM-CSF, houve maior interação com a MEC proveniente do animal desnutrido do que a MEC do animal controle. O teste de ligação para o IL3 não mostrou diferenças entre as amostras. Esses achados sugerem que a desnutrição protéica induz modificações na MEC, alterando o microambiente hematopoiético. / Blood cells have their origin at the bone marrow through the stem cell which undergoes a proliferation, differentiation and maturation process in the hematopoietic microenvironment. The hematopoietic environment is a highly organized structure formed by stromal cells, extracellular matrix (ECM) molecules, and cytokines. Protein-energy malnutrition reduces the production of blood cells, interfering with the defense of the organism. In the present work we have studied the effects protein malnutrition has on the ECM of bone marrow in mice. We have evaluated ECM composition by means of SDS PAGE 7,5% and Western blot for fibronectin (FN), laminin (LN) and thrombospondin (TSP). We assessed the capacity ECM has in adhesion and support of proliferation of the FDC-P1 myeloid cell both in the absence and in the presence of GM-CSF and IL3 cytokines. We have also measured the binding capacity of these cytokines in the ECM. The electrophoresis profile showed the existence of differences between the ECM proteins in the undernourished animal and the control. Using gel densitometry, we observed in samples from the undernourished animal a greater intensity of bands of 220, 182, 108, 60 and 56 KDa molecular weight as compared to control. At 72 KDa the band was more intense on samples from control animals. The 60 KDa band was evident only on samples taken from undernourished animals. The 123 and 49 KDa bands were evident on control animals only. Expression of FN, LN, and TSP was greater on samples from undernourished animals. Adhesion and proliferation assays, both in the presence and in the absence of cytokines, did not show significant differences among samples. When we evaluated the capacity ECM has to bind to GM-CSF, a greater interaction was seen with the ECM from the undernourished animal than the ECM from the control. Binding test for IL3 showed no differences existed among samples. Such findings suggest protein malnutrition causes alterations of the ECM, modifying the hematopoietic microenvironment.
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Estudo do teste rÃpido imunoenzimÃtico atravÃs do antÃgeno recombinante rk39 para diagnÃstico de leishmaniose visceral americana. correlaÃÃo clÃnico-terapÃutica / Study of rapid immunoenzymatic test with recombinant antigen rK39 to diagnosis American Visceral Leishmaniasis: clinical therapeutic correlations.Josà Nivon da Silva 16 January 2004 (has links)
FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / RESUMO
A confirmaÃÃo diagnÃstica de leishmaniose visceral ou calazar à realizada atravÃs da detecÃÃo do parasito por mÃtodos diretos, atravÃs do encontro de formas amastigotas no interior de macrÃfagos ou monÃcitos, em aspirado esplÃnico, hepÃtico, medula Ãssea, histopatolÃgico de linfonodo e esfregaÃo do sangue perifÃrico, com ampla variaÃÃo de sensibilidade de acordo com o sÃtio pesquisado, constituindo-se o padrÃo-ouro a visualizaÃÃo de Leishmania sp. A pesquisa de anticorpos especÃficos para triagem diagnÃstica da leismaniose visceral atravÃs do ELISA, reaÃÃo de imunofluorescÃncia indireta e os testes de aglutinaÃÃo direta possuem sensibilidade alta e especificidade limitada pelas reaÃÃes cruzadas com tripanosomatÃdeos e micobactÃrias, incluindo-se tuberculose, hansenÃase, doenÃa de Chagas, e ainda, leishmaniose tegumentar e histoplasmose. O teste intradÃrmico de Montenegro à sempre negativo durante a fase ativa da doenÃa, e baseia-se na memÃria imunolÃgica dependente de linfÃcitos Th1.
O ojetivo deste trabalho foi evidenciar a relevÃncia do teste rÃpido para detecÃÃo de anticorpo anti-leishmania chagasi utilizando o antÃgeno recombinante rK39 que apresentou sensibilidade de 99,2%. Foram realizados testes sorolÃgicos pelo ELISA que apresentou sensibilidade de 80%, e a reaÃÃo de imunofluorescÃncia indireta para calazar com sensibilidade de 82%. O gold-standard diagnÃstico empregado para todos exames foi a pesquisa microscÃpica direta do parasito no aspirado de medula Ãssea e a positividade foi de 71%, em uma pesquisa realizada em hospitais terciÃrios de Fortaleza-CE.
A reaÃÃo imunoenzimÃtica para teste rÃpido em fita contendo antÃgeno rK39 apresentou elevada sensibilidade e especificidade permitindo diagnÃstico imediato e inÃcio precoce do tratamento, alÃm de confirmar alta densidade de epÃtopos exclusivamente para o gÃnero Leishmania, pois nÃo houve reaÃÃes cruzadas dentre vÃrias doenÃas testadas.
Detectamos tÃtulos de anticorpos IgG anti-leishmania chagasi persistentemente positivos em pacientes tratados adequadamente para calazar, corroborando com evidÃncias de que o rK39 nÃo define doenÃa em atividade e nem estabelece critÃrios de cura, fortalecendo que outras possibilidades diagnÃsticas sejam investigadas mediante um resultado positivo em indivÃduo procedente de zona endÃmica para calazar, em paciente portador de hepatoesplenomegalia febril e pancitopenia.
O teste rÃpido rk39 deverà ter sua leitura imediatamente relizada e interpretada em atà no mÃximo 10 minutos, objetivando tomada de decisÃes clÃnicas, e que sua implantaÃÃo como mÃtodo auxiliar de diagnÃstico deveria fazer parte da rotina laboratorial, particularmente de serviÃos secundÃrios e terciÃrios de saÃde em regiÃes endÃmicas para leshmaniose visceral. / ABSTRACT
The visceral leishmaniasis diagnostic confirmation or Kala-azar is performed by detection of the parasite through direct methods of amastigotes within macrophages or monocytes, spleen aspirated, hepatic, bone marrow, lymph node histopathological and peripheral blood smear, with wide variation in sensitivity in accordance with the site searched, being the gold standard of Leishmaniasis sp . The specific antibodies for diagnostic of visceral leishmaniasis by ELISA, indirect immunofluorescence reaction and direct agglutination tests have high sensitivity and specificity cross reactions with limited by trypanosomatids and mycobacterium, including tuberculosis, leprosy, Chagas disease , leishmaniasis cutaneous and histoplasmosis. The Montenegro intradermal test is always negative during the active phase of the disease, and is based on immune memory bound on lymphocyte Th1. The purpose of this work was to highlight the importance of quick test for the detection of antibody anti-leishmania chagasi using recombinant rK39 antigen that presented sensitivity of 99.2%. There were serological by ELISA tests that presented sensitivity of 80%, and the indirect immunofluorescence reaction to Kala-azar with sensitivity of 82%. The gold-standard diagnosis made for all examinations was the direct microscopic search on parasite bone marrow aspirated and positivity was 71%, in a survey in tertiary hospitals in Fortaleza-CE. The immunoenzymatic reaction to quick test in tape containing rK39 Antigen has high sensitivity and specificity allowing immediate diagnosis and in the early beginning of treatment, in addition to confirm high-density epitopes exclusively for the Leishmaniasis genus, because there was no cross reactions among several diseases tested. We found evidence of IgG anti-leishmaniasis chagasi antibodies persistently -positive in patients treated appropriately for kala-azar, supporting with evidence that rK39 does not define disease activity and establishes criteria for cure, strengthening that other homogenizing are investigated by a positive result in individual from endemic area of Kala-azar, in disease carrier of febrile hepatosplenomegaly and pancytopenia . The quick test Rk39 must be read and interpreted immediately up to a maximum of 10 minutes driving clinical decision-making, and that its deployment as diagnostic helper method should be part of the laboratorial routine services, particularly in secondary and tertiary health endemic regions of visceral leshmaniasis .
Keywords: American visceral leishmaniasis. Kala-azar. Recombinant K39 Antigen. Kala-azar through rK39 antigen diagnostic.
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