Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-04-28T19:17:20Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO Waleska de Figueirêdo Leão.pdf: 1257913 bytes, checksum: da9e1a3c26bb1d94f1f4eede19afb33c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-28T19:17:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO Waleska de Figueirêdo Leão.pdf: 1257913 bytes, checksum: da9e1a3c26bb1d94f1f4eede19afb33c (MD5) Previous issue date: 2015-02-25 / FACEPE / Para que as plantas medicinais e os fitoterápicos apresentem parâmetros que conduzam a resultados confiáveis e adequados à qualidade exigida para os medicamentos, é imprescindível a validação dos métodos de análise desses produtos, conforme estabelecido pelos órgãos sanitários. Baseando-se neste fato, o presente estudo visou avaliar metodologias analíticas para quantificação de Derivados Hidroxiantracênicos (DH) nos frutos de Senna angustifolia Vahl, por espectrofotometria de absorção no visível (UV-VIS) e por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Adicionalmente, objetivou-se estabelecer especificações de qualidade para os frutos desta espécie através da sua caracterização físico-química (granulometria, perda por dessecação, teor de cinzas totais e insolúveis em ácido). A droga vegetal seca e triturada, após caracterização farmacognóstica, foi empregada no desenvolvimento e avaliação de método espectrofotométrico mais simples e de mais fácil execução para quantificação de DH totais baseado na reação de Bornträeger. Para o método cromatográfico adotou-se como ponto de partida procedimento descrito na Farmacopeia Brasileira 5ª Ed. para separação e quantificação simultânea dos senosídeos A e B. Ambos os métodos foram validados quanto aos parâmetros preconizados pela RE nº899/2003 da ANVISA. Os métodos analíticos propostos apresentaram especificidade, seletividade e linearidade adequadas, baixos valores de Limites de Detecção (LD) e Limites de Quantificação (LQ), precisão nos dois níveis analisados (repetibilidade e precisão intermediária), exatidão e robustez. Por fim, os procedimentos analíticos estudados mostraram-se apropriados à quantificação dos derivados hidroxiantracênicos totais e dos senosídeos A e B nos frutos de S. angustifolia Vahl. / For medicinal plants and phytopharmaceutical present parameters that lead to reliable results and the appropriate quality required for medicines, validation of analytical methods such products is essential, as established by the health authorities. Based on this fact, the present study aimed at evaluating analytical methodologies for the quantification of hydroxyanthracene derivatives (HD) in the fruits of Senna angustifolia Vahl, by the visible absorption spectrophotometry and by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Additionally, It aimed to establish quality specifications for the fruits this species through the physicochemical characterization (particle size, loss on drying, content of total ash and acid-insoluble). The dried and crushed plant drug, after characterization Pharmacognostic, It was used in the development and evaluation of simpler and easiest spectrophotometric method to apply for quantification of total hydroxyanthracene derivatives based on the Bornträger reaction. For the chromatographic method was adopted as a starting point procedure described in the Brazilian Pharmacopoeia 5th Ed. for simultaneous separation and quantification of sennosides A and B. Both methods were validated as to the parameters recommended by the RE nº899/2003 from ANVISA. The proposed analytical methods have specificity, selectivity and adequate linearity, low values of Detection Limits (DL) and Quantification Limits (QL), precision in the two analyzed levels (repeatability and intermediate precision), accuracy and robustness. Finally, the analytical procedures studied showed to be appropriate for the quantification of total hydroxyanthracene derivatives and sennosides A and B in the fruits of S. angustifolia Vahl.

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-06-30T19:00:28Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Tiago_Ribeiro_PPGBV_2012_final.pdf: 3752129 bytes, checksum: d31c37fe0117744549c86ef96e758fc6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-30T19:00:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Tiago_Ribeiro_PPGBV_2012_final.pdf: 3752129 bytes, checksum: d31c37fe0117744549c86ef96e758fc6 (MD5) Previous issue date: 2012-02-27 / CNPQ / No gênero Phaseolus (Fabaceae) os estudos abordando a fração repetitiva de DNA do genoma ainda são poucos. A caracterização do DNA satélite khipu, inicialmente realizada no feijão comum (P. vulgaris), demonstrou que o mesmo poderia estar presente em outras espécies do gênero, provavelmente com bastante variação entre elas. Nesse trabalho, uma análise mais detalhada deste DNA satélite foi realizada, envolvendo o isolamento da sequência presente em diferentes espécies (P. leptostachyus, P. lunatus e P. microcarpus), mapeamento por hibridização in situ fluorescente (FISH) e Southern blot. Um coquetel de clones de khipu do feijão comum (khipu mix) hibridizados in situ sob 40% de estringência demonstrou a presença de sequências relacionadas a khipu na região subterminal dos cromossomos das outras espécies, com variação na quantidade e intensidade de terminais hibridizados. Fragmentos da sequência foram amplificados dos DNAs genômicos das três espécies utilizando primers específicos de regiões mais conservadas e ligados a vetores de clonagem. Quando mapeados por FISH, os clones obtidos demonstraram diferenças na marcação dependendo da espécie utilizada. O clone de P. lunatus (Plukhipu1), por exemplo, foi localizado em um par cromossômico em P. lunatus e P. leptostachyus, enquanto que em P. vulgaris o mesmo hibridizou em diversos pares. Análise baseada em máxima verossimilhança incluindo 68 clones de P. vulgaris, 30 de P. leptostachyus, nove de P. lunatus e 21 de P. microcarpus revelou um grande clado contendo a maioria dos clones de P. vulgaris e todos de P. lunatus. Enquanto as unidades de P. microcarpus e P. leptostachyus foram mais divergentes e ficaram separadas em diversos outros ramos. A hibridização Southern blot revelou uma unidade de repetição de 500 pb, com multímeros presentes em todas espécies. Em conjunto, os dados confirmam khipu como uma família diversa de DNA satélite subtelomérico presente em diversas espécies de Phaseolus. As diferenças observadas nos padrões de hibridização e tamanhos das unidades de repetição sugerem a presença de diferenças significativas desta sequência entre diferentes espécies do gênero. / In the genus Phaseolus (Fabaceae), studies about the repetitive fraction of its genome are still scarce. The characterization of the satellite DNA khipu, performed for the common bean (P. vulgaris), showed that it might be present in other species of the genus, probably with large variation among them. In the present work, a more detailed analysis of this satellite DNA was performed, including the isolation of this sequence from different species (P. leptostachyus, P. lunatus and P. microcarpus), localization by fluorescent in situ hybridization (FISH) and Southern blot hybridization. A mix of khipu clones from common bean hybridized in situ at low stringency (40%) showed the presence of khipu-like sequences on the subterminal region of the chromosomes from the three species, with variation in intensity and number of signals. Fragments of the sequence were amplified and cloned from P. leptostachyus, P. lunatus and P. microcarpus genomic DNAs using specific primers for more conserved regions. The obtained clones demonstrated differences in respect to their FISH patterns depending on the species. The clone from P. lunatus (khipuPlu1), for example, was only located on a chromosome pair in P. lunatus and P. leptostachyus, while in P. vulgaris the same clone hybridized to several chromosome pairs. Maximum likelihood unrooted dendogram including 68 clones from P. vulgaris, 30 from P. leptostachyus, nine from P. lunatus and 21 from P. microcarpus showed most of the clones from P. vulgaris and all from P. lunatus grouping in one larger clade. While those unit from P. microcarpus and P. leptostachyus were more divergent and split in several other branches. Southern blot pattern showed a khipu unit of ~ 500 bp, with presence of multimers in all species. Taken together, the present data confirm khipu as a diverse subtelomeric satellite DNA family present in several Phaseolus species. Differences in hybridization patterns and repeat unit sizes suggest the presence of relevant differences in this sequence among different species of the genus.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-07-25T20:22:50Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Priscilla Barbosa Sales de Albuquerque.pdf: 13218533 bytes, checksum: 43992e138765cd76cde7b95b6cbb44e8 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-07-27T22:24:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Priscilla Barbosa Sales de Albuquerque.pdf: 13218533 bytes, checksum: 43992e138765cd76cde7b95b6cbb44e8 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-27T22:24:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Priscilla Barbosa Sales de Albuquerque.pdf: 13218533 bytes, checksum: 43992e138765cd76cde7b95b6cbb44e8 (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 / FACEPE / A galactomanana extraída das sementes de C. grandis representa uma fonte alternativa para galactomananas principalmente devido à sua capacidade de atuar como líquido ou como gel. O presente trabalho teve por objetivo a caracterização de géis e membranas obtidas a partir da galactomanana extraída das sementes de C. grandis, com ou sem biomoléculas imobilizadas (lectina extraída das sementes de Cratylia mollis – Cramoll, lactoferrina, peptídeos bioativos, fitoesteróis e nanopartículas de lecitina com quercetina incorporada), através de análises reológicas, físico-químicas e mecânicas, além da avaliação das ações citotóxica e cicatrizante destes produtos. A galactomanana foi extraída por precipitação com etanol, enquanto a Cramoll foi obtida por precipitação salina seguida por cromatografia de afinidade em Sephadex G-75. As nanopartículas de lecitina contendo quercetina foram caracterizadas através da medição de diâmetro das partículas, grau de polidispersão, estabilidade e potencial zeta. Os géis de galactomanana (1,7 % p/v), sem e com Cramoll imobilizada por enclausuramento, tiveram sua estabilidade avaliada ao longo do tempo por reometria, pH, cor, avaliação microbiana e atividade hemaglutinante. O efeito da concentração de diferentes biomoléculas imobilizadas nas propriedades físico-químicas das membranas de galactomanana (0,8 % p/v) foi avaliado através de MEV, FTIR, propriedades mecânicas e térmicas, cor, conteúdo de água, solubilidade, permeabilidade ao vapor de água e ângulo de contato. As atividades citotóxica e cicatrizante das membranas com Cramoll imobilizada foram avaliadas em cultura de fibroblastos e em ratos machos, respectivamente. Os resultados revelaram que ambos os géis, sem e com Cramoll imobilizada, demonstraram transparência, estabilidade até 30 dias, não apresentaram contaminação microbiana e mantiveram o pH próximo da neutralidade, no entanto, as análises reológicas mostraram que o gel com Cramoll imobilizada perdeu substancialmente o seu módulo elástico após 60 dias. Todas as nanopartículas de lecitina contendo quercetina (25-150 μg/mL) apresentaram potencial zeta semelhante (-47,14). Nanopartículas de lecitina contendo até 50 μg/mL de quercetina apresentaram estabilidade e tamanho de partícula menores quando comparadas àquelas com 75 a 150 μg/mL de quercetina incorporada; estas apresentaram sinais de precipitação após 48 horas. Lactoferrina, peptídeos bioativos, fitoesteróis e nanopartículas de lecitina contendo quercetina, quando imobilizadas em membranas de galactomanana, levaram à produção de membranas com alta luminosidade e tendência ao amarelo, além de apresentarem maior rigidez, rugosidade e características físicas mais hidrofílicas que as membranas sem biomoléculas. A avaliação in vivo da atividade cicatrizante das membranas de galactomanana sem e com Cramoll imobilizada revelou uma efetiva regeneração tecidual em feridas tópicas produzidas em ratos machos, no entanto, as membranas com Cramoll imobilizada foram significativamente mais eficientes, promovendo a completa contração das feridas em apenas 11 dias. Em conclusão, os resultados obtidos sugerem que a galactomanana extraída das sementes de C. grandis é uma promissora matriz para a imobilização de biomoléculas, principalmente no que se refere à utilização de suas suspensões em membranas e géis úteis para as indústrias farmacêutica, cosmética e alimentícia. / The galactomannan extracted from the seeds of C. grandis represents an alternative source for galactomannans mainly due to its ability to act as a liquid or as a gel, suggesting that, due to its rheological properties, it can be used in different biotechnological applications, such as an effective support for immobilization of biomolecules. The present study aimed the characterization of gels and membranes prepared from the galactomannan extracted from C. grandis seeds with and without immobilized biomolecules (lectin extracted from the seeds of Cratylia mollis - Cramoll, lactoferrin, bioactive peptides, phytosterols and nanoparticles of lecithin with incorporated quercetin) through rheological, physicochemical and mechanical analysis, as well as the evaluation of cytotoxic and healing activities of the above mentioned matrices. The galactomannan was extracted by ethanol precipitation, while Cramoll was obtained by salt precipitation followed by affinity chromatography on Sephadex G-75. Lecithin nanoparticles containing quercetin were characterized by measurement the diameter of the particles, degree of polydispersity, stability and zeta potential. Galactomannan gels (1.7 %, w/v), with and without immobilized Cramoll, were evaluated along time by rheometry, pH, colour, microbial contamination and lectin hemagglutinating activity. MEV, FTIR, mechanical and thermal properties, colour, water content, solubility, water vapour permeability and contact angle were performed to evaluate the effect of the concentration of different on the physicochemical properties of galactomannan membranes (0.8 %, w/v). In addition, the cytotoxic and healing activities of membranes with immobilized Cramoll were evaluated in culture of fibroblasts and in male rats, respectively. The results showed that both gels, with and without immobilized lectin, demonstrated transparency, were stable up to 30 days, presented no microbial contamination as well as a pH close to neutral, however, rheological data showed that the gel with immobilized lectin loses its elastic modulus substantially after 60 days. All of the lecithin nanoparticles containing quercetin (25-150 μg/mL) showed similar zeta potential (-47.14). Lecithin nanoparticles containing up to 50 μg/mL of quercetin showed stability and particles size smaller when compared to those with 75 to 150 μg/mL of incorporated quercetin; the last one concentrations showed signs of precipitation after 48 hours of analysis. Lactoferrin, bioactive peptides, phytosterols and lecithin nanoparticles with incorporated quercetin, when immobilized on galactomannan membranes, lead to membranes with a strong whiteness tendency as well as a yellowish appearance, roughness on their surface and physical characteristics more hydrophilic than membranes without biomolecules (control). In vivo healing activity evaluation of the galactomannan membranes with and without immobilized Cramoll improved tissue regeneration on topical wounds of male rats; however, membranes with immobilized lectin were significantly better, promoting complete wounds´ contraction only in 11 days. In conclusion, the obtained results suggest the galactomannan extracted from C. grandis as a promising matrix for immobilization of biomolecules, mainly due to the use of their suspensions in membranes and gels useful for pharmaceutical, cosmetic and food industries.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-06T22:14:52Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Vanessa Andrade de Barros.pdf: 1178848 bytes, checksum: 821f5df43fdc9b93f20d7e87394269ba (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-15T17:55:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Vanessa Andrade de Barros.pdf: 1178848 bytes, checksum: 821f5df43fdc9b93f20d7e87394269ba (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-15T17:55:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Vanessa Andrade de Barros.pdf: 1178848 bytes, checksum: 821f5df43fdc9b93f20d7e87394269ba (MD5) Previous issue date: 2017-02-15 / CNPq / A seca é o principal estresse abiótico que limita o aumento de biomassa no mundo. Em ambientes semiáridos espécies lenhosas sempre verdes podem apresentar diversos mecanismos de tolerância à baixa disponibilidade hídrica. O objetivo do estudo foi avaliar aspectos do metabolismo foliar na espécie Cynophalla flexuosa L., nativa da caatinga, em associação com FMA sob dois ciclos de deficiência hídrica em casa de vegetação. O experimento foi conduzido em delineamento experimental com arranjo fatorial de 2 × 2 (FMA e déficit hídrico), totalizando 4 tratamentos com 5 repetições cada. Os tratamentos de deficiência hídrica (Seca e FMA+Seca) tiveram a suspensão da água durante 7 dias (máximo estresse), e posteriormente foram reidratados por 3 dias consecutivos (ciclo 1). Em seguida, a rega foi novamente suspensa durante 10 dias (máximo estresse) e a reidratação após 3 dias seguidos (ciclo 2). Foram avaliados variáveis relacionadas ao status hídrico e o metabolismo do carbono foliar, além disso, biomassa seca e o custo de construção foliar. No máximo estresse, os maiores valores de conteúdo hídrico relativo nos dois ciclos foram encontrados nas plantas de FMA. No ciclo 1, a área foliar específica foi maior nas plantas não micorrizadas, com maior custo de construção nas plantas de FMA e maior concentração de Fósforo na parte subterrânea nas plantas de FMA+Seca. No ciclo 2, plantas de FMA+Seca apresentaram o menor custo de construção e uma maior área foliar específica. Durante esse período, os valores de biomassa e nutrientes foram superiores nas plantas micorrizadas, onde as de FMA+Seca apresentaram as maiores concentrações de N e K. Em conclusão, os FMAs foram eficientes para aumentar a tolerância de C. flexuosa ao déficit hídrico recorrente, com respostas mais proeminentes no ciclo 2, indicando a importância de estudos que visam a recorrência do estresse hídrico, condição comum em ambiente semiárido. / Drought is the main abiotic stress limiting the increase of biomass in the world. In semi-arid environments, evergreen woody species may present several mechanisms of tolerance to low water availability. The objective of the study was to evaluate aspects of foliar metabolism in Cynophalla flexuosa L., native to the caatinga, in association with AMF under two cycles of water deficit in greenhouse. The experiment was conducted in a 2 × 2 factorial arrangement (AMF and water deficit), totaling 4 treatments with 5 replicates each. The treatments of water deficiency (Drought and AMF + Drought) were suspended for 7 days (maximum stress), and then rehydrated for 3 consecutive days (cycle 1). The irrigation was then suspended again for 10 days (maximum stress) and rehydration after 3 consecutive days (cycle 2). Variables related to water status and leaf carbon metabolism were evaluated, in addition, dry biomass and the cost of leaf construction. At maximum stress, the highest values of relative water content in the two cycles were found in the AMF plants. In cycle 1, the specific leaf area was higher in non-mycorrhizal plants, with higher construction costs in AMF plants and higher concentration of Phosphorus in the underground part of AMF + Drought plants. In cycle 2, AMF + Drought plants had the lowest cost of construction and a larger specific leaf area. During this period, biomass and nutrient values were higher in mycorrhizal plants, where AMF + Drought presented the highest concentrations of N and K. In conclusion, the AMFs were efficient to increase tolerance of C. flexuosa to recurrent water deficit, With more prominent responses in cycle 2, indicating the importance of studies aimed at the recurrence of water stress, a common condition in a semi-arid environment.

Orientador: Marlies Sazima / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T10:24:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Franco_AndreaLucieneMonerat_D.pdf: 6959887 bytes, checksum: e0d071b72bb8b96777629a9ffe4bef12 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: A ecologia da polinização e a biologia reprodutiva das espécies Canavalia parviflora, C. picta, Dioclea rufescens, D. violacea, Centrosema sagittatum, Vigna candida e Rhynchosia sp. foram estudadas no período de fevereiro de 1991 a setembro de 1993 na Reserva Municipal da Mata de Santa Genebra, Campinas, SP. Estas espécies são lianas, com padrão de floração do tipo "cornucópia", e com sobreposição de floração, entre os meses de março a junho. Apenas D. rufescens floresceu no período de setembro a dezembro. Suas flores estão dispostas em inflorescências expostas da folhagem, apresentam cores vistosas e são tipicamente flores papilionáceas, com pétalas diferenciadas em estandarte, alas e carenas. Os órgãos reprodutivos estão envolvidos pelas carenas. O androceu é diadelfo, com nove estames fundidos na região do filete, formando a bainha estaminal. O estame vexilar pode estar parcialmente ou totalmente livre da bainha estarninal, sendo que na sua região basal forma-se uma base fenestrada com duas aberturas. O gineceu é envolvido pela bainha estarninal e na sua região basal ocorre um nectário floral discoíde. C. parviflora. C. picta e C. sagittatum possuem flores ressupinadas e estandarte com superfície lisa. D. rufescens, D. violacea, Rhynchosia sp. E V candida, as flores estão em posição normal e suas alas apresentam superficie esculturada. O estandarte nas flores de C. parviflora, D. rufescens, D. violacea, Rhynchosia sp. e V candida é encaixado nas alas e carenas por meio de aurículas infletidas. Nas flores de C. picta e C. sagittatum, a calosidade do estandarte é justaposta às aurículas das alas. Estes dois tipos de disposição das pétalas da coroIa é que determinam o funcionamento do mecanismo de polinização nestas espécies. O mecanismo de polinização é do tipo valvular. Os polinizadores pousam sobre as alas ou estandarte, empurrando-nas para baixo; concomitantemente forçam o estandarte ou as alas para trás, com o auxílio da cabeça. Com isto, o estandarte se desencaixa das alas e carenas ou a justaposição entre a calosidade do estandarte e as aurículas das alas é desfeito; os órgãos reprodutivos são liberados e contatam o corpo do polinizador. A antese é diurna ocorrendo no início da manhã, ocasião em que o estigma se encontra receptivo, os grãos de pólen são viáveis e estão disponíveis, há néctar e odor. O néctar é produzido em quantidade relativamente alta, apenas Rhynchosia sp. produz pouco néctar.. A concentração média de açucares no néctar é de 39%. O estigma libera substância mucilaginosa após contato. O mecanismo de liberação de grãos de pólen é primário, apenas V. candida exibe mecanismo secundário de apresentação de grãos de pólen do tipo "pollen brush". Estas espécies são autógamas, sendo a autogamia limitada pela hercogamia espacial (representada pela localização do estigma à fTente das anteras), presença de pelos na base do estigma de C. sagittatum e V. candida e ausência de autopolinização espontânea. Certo grau de polinização cruzada é mantido devido a ocorrência do mecanismo de polinização. Em Dioc/ea rufescens a ausência de trutos maduros a partir de polinizações manuais e a partir de condições naturais indica que, provavelmente os indivíduos são clones e que apresentam algum tipo de incompatibilidade. As espécies estudadas são melitófilas, sendo polinizadas por abelhas Anthophoridae, Apidae e Megachilidae. Canava/ia parviflora, C. picta, Dioc/ea rufescens, D. vio/acea, e V. candida possuem como polinizadores primários espécies de Centris. Abelhas Euglossini são os polinizadores primários de Centrosema sagittatum e Hypanthidillm sp. é o polinizador primário de Rhynchosia sp.. De modo geral, o comportamento de visita dos polinizadores às flores de Phaseoleae é semelhante entre si, apenas o local da deposição de grãos de pólen no corpo da abelha é diferente. As flores de C. parviflora depositam o pólen na região superior da cabeça das abelhas. C. picta, na região dorsal do tórax das abelhas, em C. sagittatllm, a deposição varia de acordo com o tamanho do polinizador, podendo ser na região dorsal do abdomen de Ellglossa annectans ou na região dorsal do tórax de Xylocopa suspecta. D. nifescens e D. violacea depositam o pólen na tíbia do primeiro par de pernas de Centris mocsaryi, ou na região ventral da cabeça, próximo à mandíbula em X frontalis, ou na região ventral do abdomen de C. bicolor e C. fuscata, ou na região ventral do tórax de C. labrosa. Em Rhynchosia sp. a deposição do pólen ocorre na região ventral do abdomen de Hypanthidillm sp. e em V. candida o pólen é depositado na região lateral do tórax das abelhas. Nestas espécies de Phaseoleae as flores são morfologicamente semelhantes e exibem sobreposição de floração interespecífica, contudo não ocorre competição por polinizadores, uma vez que cada espécie apresenta um polinizador primário diferente e cada espécie de planta deposita o pólen em regiões diferentes do corpo do polinizador. Ainda, estas espécies representam importante fonte de néctar para abelhas Anthophoridae, Apidae e Megachilidae / Abstract: The study of pollination biology and breeding systems of Canavalia parviflora, C. picta, Dioc/ea rufescens, D. violacea, Centrosema sagittatum, Vigna candida e Rhynchosia sp. was carried out ITom February to September 1991 and 1993 at the Santa Genebra Forest Reserve, Campinas, São Paulo. The species are climbers, with comucopia phenology and flowering overlaping between March and June, except D. rufescens whose flowering goes ITom September to December. The flowers of these species are grouped in inflorescences placed outside the foliage, exibit conspicuous colours and they are typically papilionaceous, with petals in the shape of flag, wings and keel. The reproductive organs are hidden in the keel. The androecium showed diadelphous stamen, with nine staminal filaments united, forming a staminal sheath. The vexillary stamen is partially or fully linked to the staminal sheath, with the basal portion bearing two openings. The gynoecium is enclosed by the staminal sheath and presents a nectariferous disc in the basal region. D. rufescens, D. violacea, Rhynchosia sp. and V. candida have flowers with sculptured wings, while C. parviflora, C. picta and C. sagittatum have resupinate flowers and flags with smooth surface. Flags in flowers of C. parviflora, D. rufescens, D. violacea, Rhynchosia sp. and V. candida are attached to the wings and keel by means of auricles. Flowers of C. picta and C. sagittatllm have the flag callosities juxtaposed to the auricles of wings. These two dispositions of petals determine the functioning of the pollination mechanism in these species. The pollination mechanism is valvular. The pollinating vector alights on the wings or flag pressing it downwards while forcing flag or wings backwards with its head. The flag is unsocketed ITom the wings and keel or the juxtaposition between the flag and auricles of the wings is broken. The reproductive organs are released and touch the pollinating vector's body. Flowers open early morning, when the stigma is receptive, pollen grains are viable and available, there is nectar and odour. Nectar is produced in large quantities, only Rhynchosia sp. produces small quantities of nectar. Sugar concentration average is 39%. When touched the stigma releases viscous substances. The mechanism of pollen presentation is primary in these species, only V. candida presents secondary pollen presentation on the stylar brush. The species are autogamous. The autogamy is limited by spatial segregation between stigma and anthers, hairs in the basal region of the stigma of C. sagittatum and V. candida, and absence of spontaneous self-pollination. Levels of outcrossing are maintained by retention of a pollination mechanism. Absence of fruits from hand and natural pollination of flowers of D. rufescens probably indicates that individuais are cIones and have some kind of selfincompatibility mechanism. Flowers of these species present melittofiIy syndrome and are poIlinated by Anthophoridae, Apidae and Megachilidae bees. C. parvijlora, C. picta, D. rufescens, D. vio/acea and V. candida have as their primary poIlinators Centris bees. Euglossini bees are the primary poIlinators of C. sagittatum and Hypanthidium sp. are the primary pollinator of Rhynchosia sp. The visiting behaviour of poIlinators in flowers of Phaseoleae is similar, the region of poIlen deposition in the bee's body differs between plant species. Flowers of C. parvijlora deposit poIlen on the top of the bee's head; C. picta deposit poIlen on the dor sal part of the bee's thorax, and in C. sagittatum, the deposition area varies according to the size ofthe pollinator, it may be in the dorsal region of the abdomen of the Euglossa annectans or in the dorsal region of the thorax of the Xylocopa suspecta. D. rufescens and D. vio/acea deposit poIlen in the tibia of the first leg of Centris mocsaryi, or in the ventral part of the head, near the mandible in X frontalis, or in the ventral part of the abdomen of the C. bicolor and C. fusca ta, or in the ventral part ofthe thorax ofthe C. labrosa. Rhynchosia sp. deposits poIlen on ventral part ofthe abdomen of the Hypanthidium sp. and V. candida deposits poIlen on the right-hand side of the bee's abdomen. Although in these species of Phaseoleae have similar floral morphology and flowering periods of the six species overIap, competition for poIlinators among species is unlike, because each species has different primary pollinator and each plant species deposits poIlen on a different part of the pollinator's body. Further, these species represent an important source of nectar for Anthophoridae, Apidae and Megachilidae bees / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas

Orientadores: Gil Eduardo Serra, Marcos Silveira Buckeridge / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-23T11:03:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Panegassi_ValeriaRegina_M.pdf: 4872944 bytes, checksum: 843d64597cb44d77f72603fdf6c6237a (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: As sementes de faveiro (Dimorphandra mollis) utilizadas neste trabalho foram obtidas na caatinga do Estado do Piauí. Estas sementes foram imersas em solução de NaOH 5% a 100ÜC durante 20mín, seguida de lavagem do material em água corrente, a fim de separar casca do endosperma mais embrião, O material seco sem casca foi triturado e posteriormente peneirado e separado em diferentes frações. As amostras de sementes trituradas com e sem casca e as amostras de suas frações retidas na peneira com 420µm de abertura foram submetidos à análises de composição incluindo teor de galactomanano, proteínas, cinzas, fibra bruta e lipídios. A partir de análises do extrato aquoso de galactomanano hidrolisado foi determinada a composição monossacarídica das frações separadas por peneiramento a fim de avaliar a razão manose;gafactose do poiissacarideo, que apresentou ser em torno de 2,4:1. A fração que apresentou maior rendimento foi aquela separada em peneira com 420^m de abertura. Com esta fração foram feitos ensaios iniciais de toxicidade em camundongos, e foi classificado como Praticamente Atóxico. Amostras da mesma fração foram submetidas a análise reométrica em reômetro HAAKE (Modelo Rotovisco RV20), variando a concentração do galactomanano disperso em água, temperatura, pH, concentração de NaCI e de sacarose, mostrando que a amostra tem comportamento não-newtoniano e pseudoplástico. A partir destas análises foi observada a estabilidade da viscosidade aparente com variação da concentração de NaCI e em pH variando entre 4,0 e 7,0. Também foi observado que a adição de sacarose à dispersão pode ocasionar um acréscimo na viscosidade e, o aumento da temperatura da dispersão ocasiona um decréscimo na viscosidade. A amostra também foi misturada com goma xantana (1:1) e foi observada a formação de gel. A mesma mistura apresentou um aumento significativo na viscosidade, quando comparada à viscosidade apresentada peias dispersões dos polissacarídeos separadamente / Abstract: The seeds of faveiro (Dimorphandra mollis) were obtained in the stunted vegetation of the brazilian State of Piauí. These seeds were immersed in a solution of NaOH 5% at 100°C during 20min, followed by washing the materia! in running water, to separate the skin from the endosperm plus embryo. The dry decoated materia! Was ground and later sifted and separated into different fractions. The samples of ground seeds and the fraction left on the 420pm sifter were subjected to composition analyses, including the galactomannan, protein, ash, raw fiber, and lipid contents. From the analyses of the hydrolyzed galactomannan, the monosaccharide composition was obtained by HPLC analysis of the samples obtained in the left fractionating, in order to evaluate the mannose:galactose ratio of the polysaccharide, which proved to be 2.4:1. The fraction with the largest production was obtained in the sifter with 420µm. With this fraction, primary toxicity tests were performed on mice, reaching the classification of Basically Non-toxic. Samples from the same fraction were analysed in a HAAKE RV20 rheometer, with variation of the concentration of galactomannan dispersed in water, temperature, pH, sucrose and NaCI, demonstrating that the sample had a non-newtonian pseudoplastic behavior. From these analyses, the stability of viscosity was observed in the presence of NaCI and pH varying from 4.0 to 7.0. The viscosity decreased in higher temperature and can increase in the presence of sucrose solutions. The sample was also mixed with xantan (1:1) for the observation of gel formation. The same mixture showed a significant increase in viscosity, when compared to the viscosity shown by the dispersions of the polysaccharides separately / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Jorge Vega / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T18:25:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Freitas_DanieleScandiuccide_M.pdf: 13458049 bytes, checksum: 8ce2699f8ad4ca2dc0d5a9d25aceb112 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Foi estudado um vírus, preliminarmente considerado da família Potyviridae, infectando em condições naturais duas espécies de crotalária, nas quais induz sintomas de mosaico. O vírus foi denominado vírus do mosaico da crotalaria (VMCr). Foram analisados os seguintes aspectos: círculo de hospedeiras, propriedades "in vitro", transmissão por afídeos e pela semente, formas de transmissão mecânica, citopatologia, purificação, relações serológicas com outros potyvirus e massa da proteína do capsídeo. O círculo de hospedeiras ficou restrito a espécies da família Legumínosae, sendo uma das hospedeiras características Phaseolus vulgarís. 'Preto G-2', espécie na qual induz necrose local seguida de necrose sistêmica. As propriedades in vitro apresentaram valores dentro da faixa dos potyvirus. Foi demonstrada a transmissão pelos afídeos Aphis gossypíi, Myzus persicae e M. nicotíanae e com menor eficiência por lámina cortante. A transmissão mecânica convencional teve eficiência de cerca de 80%. Não foi observada transmissão pela semente. Foram observadas inclusões através de microscopia de luz, e caracterizada por microscopia eletrônica: elas são formadas por estruturas do tipo "cata-vento" e feixes ou rolos características dos potyvirus. O protocolo de purificação empregado apresentou baixo rendimento. Na comparação serológica através do teste de EllSA foi verificada relação com o vírus do endurecimento dos frutos do maracujá isolado no Brasil (VEFM). Utilizando anti-soro para esse vírus foi detectado o VMCr pela técnica PTA-ELlSA e western-blot. Através deste último método foi estimada a massa molecular relativa da proteína capsidial em 37 kDa. Considera-se que o VMCr seja um isolado do VEFM que tem evoluído no sentido de infectar principalmente leguminosas. Dados recentes da literatura indicam que o VEFM isolado no Brasil seria mais próximo ao vírus do maracujá isolado em África do Sul, diferente do VEFM. Isto provavelmente explicaria a divergência dos resultados aquI apresentados, no referente à morfologia das inclusões citoplasmáticas, dos relatados para o VEFM em outros países / Abstract: A virus isolated from Grata/aria species showing the mosaic symptom, preliminarily identified as a potyvirus, was studied. The virus was named Crotalaria mosaic virus. The characteristics studied were: host range, "in vitro" properties, transmission by aphids, seed transmission and different meehanieal transmission methods, eytopathology, serologieal relation with other potyviruses and molecular mass of the capsid protein. The host range is limited to speeies of the Leguminosae family and one eharacteristie host is Phaseo/us vulgaris 'Preto G-2', whieh shows local neerosis followed by systemie neerosis. The "in vitra" properties parameters were similar to the values reported for most potyviruses. Transmission of the virus by Aphis gossypíi, Myzus persicae e M. nicotíanae was demonstrated. Mechanieal transmission was effieient (80% transmission), and transmission by knife blade also was possible but with lowefficieney. Seed transmission was not observed. intracellular inelusions observed by light and electron microscopy were pinwheel and seroll type. The purifieation of the virus was possible with the proeedure used but virus yield was poor. Comparisons by PT A-ELlSA tests showed serologieal relation with the Brazilian isolate of passion-fruit woodiness virus (PWV). Using antiserum against PWV was possible to deteet erotalaria mosaie virus by PT A-ELlSA and western-blot. The relative molecular mass of the capsid pratein was estimated to be 37 kDa. Probably erotalaria mosaie virus is a strain of PWV that evolved toward a narrow host range of speeies mainly belonging to the Leguminosae family. Reeent reports indicate that most Brazilian isolates of PV'N are more related to the South African Passion-fruit virus, differing from standard type PWV. This fact may explain the differences observed in the morphology of cytoplasmic inclusions from data reported for PV / Mestrado / Mestre em Biologia Vegetal

Orientador: Ana Maria Goulart de Azevedo Tozzi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-27T11:22:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vaz_AngelaMariaStudartdaFonseca_D.pdf: 22353871 bytes, checksum: 859fcc449febc3d196c530c143246b81 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Esta tese teve como objetivo o estudo taxonômico de Bauhinia sect. Pauletia (Cav.) DC. no Brasil. O tratamento taxonômico foi baseado em mais de 1700 coleções e, também, em várias duplicatas destas coleções depositadas em mais de 65 herbários. Os caracteres taxonômicos macroscópicos foram também observados em indivíduos arbóreos de 6 espécies, cultivados no Instituto de Pesquisas Jardim Botânico do Rio de Janeiro, por um período de dois anos (1995/ 1996). As observações de campo foram feitas nos estados do Rio de Janeiro, Bahia, Goiás e no Distrito Federal. Foram realizados experimentos de germinação de 11 espécies visando-se caracterizar a morfologia da plântula. Os grãos de pólen de 7 espécies foram analisados, com base em microscopia ótica. A tese apresentou como resultado chaves para identificação, sinonimia, distribuição geográfica e habitat, comentários sobre taxonomia, relação de coleções representativas para 58 táxons (53 espécies, 1 subespécie e 4 variedades) de Bauhinia sect. Pauletia (Cav.) DC., nativas e cultivadas no Brasil. As espécies estudadas foram incluídas em seis séries, uma delas inédita, Bauhinia ser. Aculeatae Vaz &Tozzi, além de Bauhinia ser. Acuminatae Wunderlin, B. ser. Ariaria (Cuerv. Marq.) Wunderlin, B. ser. Cansenia (Raf.) Wunderlin, B. ser. Pentandrae Wunderlin, B. ser. Perlebia (Mart.) Wunderlin. As decrições de trinta e cinco espécies da série Cansenia foram atualizadas. Três novas ocorrências - B. cinnamomea De., B. conwayi Rusby e B. tarapotensis Benth. foram relatadas para o Brasil. Um novo nome - B. quartzitica Vaz, além de 3 novas combinações para as variedades de B. ungulata, ainda inéditos, foram propostos. Quarenta e oito sinônimos taxonômicos (heterotípicos) foram aceitos, entre eles cerca de 25 novos propostos aqui. A distribuição dos 56 táxons de Bauhinia sect. Pauletia nativos no Brasil foi assinalada em 13 mapas. Quarenta e três pranchas ilustrativas foram apresentadas. A relação das coleções examinadas, por ordem alfabética de coletor com as respectivas identificações, foi apresentada no índice geral, sob a forma de uma lista de exsicatas / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal

Orientador : Neusa Taroda Ranga / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T02:16:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Teixeira_SimonedePadua_D.pdf: 32778598 bytes, checksum: dfb60d8ef1ab2bac08e67d0c348f2d42 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Estudos reprodutivos em Leguminosae são escassos e restritos principalmente a espécies de importância agrícola e às encontradas em regiões temperadas. As informações disponíveis mostram uma alta incidência de aborto de flores e frutos na família, fenômeno também observado nas duas espécies brasileiras de Dahlstedtia Malme. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a ocorrência de aborto nos representantes de D. pínnata e D. pentaphy/la e, para tal, procurou-se: 1. investigar o desenvolvimento da flor, do grão de pólen, do óvulo e dos primeiros estádios da semente, compará-Io ao de outros representantes de Papilionoideae e, então, verificar a ocorrência de anomalias no decorrer do processo; 2. verificar o comportamento e a contagem dos cromossomos meióticos, e a normalidade das tétrades para avaliar se o grão de pólen pode ser considerado um fator limitante nos eventos de fertilização; 3. verificar a relação entre o aborto e a posição das flores/frutos na inflorescência/planta e dos óvulos/sementes no ovário/fruto e, 4. levantar a distribuição geográfica, os períodos de floração e frutificação e verificar a possibilidade de fertilização interespecífica, a fim de relacionar seus efeitos no processo reprodutivo das espécies e, juntamente aos resultados de morfologia externa e interna, esclarecer melhor a delimitação entre elas. Botões, flores fertilizadas e não fertilizadas, frutos e sementes em vários estádios de desenvolvimento foram utilizados em análises cito-histológicas e em testes da estratégia reprodutiva adotada pelas plantas. As características encontradas no desenvolvimento floral são comuns à subfamília Papilionoideae. Anomalias e supressão de órgãos florais não foram encontrados. Diferenças em níveis taxonômicos infragenéricos são raras nos primeiros estádios da ontogênese; entretanto as espécies diferiram na distribuição de cavidades secretoras nos órgãos florais. O número cromossômico encontrado foi n = 11, contagem inédita para as espécies. Como o estudo citológico abrangeu todas as espécies do gênero, conclui-se que o número básico é igual a 11. D. pentaphy/la é uma espécie meioticamente estável e os grãos de pólen não são limitantes da fertilização. Já D. pínnata apresenta regularidade meiótica menor, resultando num maior número de grãos de pólen estéreis e, tal dado, juntamente com observações de grande número de rebrotas nas plantas, pode indicar que a propagação vegetativa tem maior importância no processo reprodutivo desta espécie. O desenvolvimento do óvulo é do tipo «Polygonum» e o do endosperma Nuclear. Não foram encontradas diferenças entre a autopolinização e a polinização cruzada quanto à germinação do pólen, ao crescimento do tubo polínico, à megagametogênese, à dupla fertilização e à embriogênese. Em todos os tratamentos foram observados a retração e o espessamento prematuros das paredes celulares dos tegumentos e da placenta, seguidos de colapsos do saco embrionário (óvulo) ou do zigoto e do endosperma (semente). As espécies são autocompatíveis, não tendo sido observados mecanismos pré- ou pós-zigóticos atuando como barreiras à autofertilização. Em D. pentaphyfla não há diferenças na polinização de flores e na formação de frutos em determinada região da inflorescência. Não se encontrou também relação entre o acúmulo de calose no óvulo e sua posição no ovário, bem como entre semente em desenvolvimento e sua posição no fruto. O aborto nas espécies está mais relacionado à limitação de recursos maternos ao nível do fruto e ao nível do embrião, devido aos altos custos da frutificação e maturação das sementes, o que pode ser confirmado pela presença de características abortivas ocorrendo primeiro nos tecidos maternos dos óvulos e sementes e depois nos embriogênicos. As duas espécies apresentam distribuição restrita às áreas de Floresta Atlântica, mas não se observou sobreposição geográfica. Plantas de D. pinnata podem ser encontradas nos Estados do Rio de Janeiro e de São Paulo e de D. pentaphy/la nos Estados de São Paulo, Paraná e Santa Catarina. Não se observou a formação de embriões após os cruzamentos interespecíficos. A fertilização em D. pinnata foi evitada pela presença de uma secreção micropilar densa e em grande quantidade, impedindo a penetração do tubo polínico. As espécies não estão isoladas sazonalmente, mas estão geograficamente separadas. Provavelmente, não trocam pólen na natureza e, se trocassem, não haveria formação de sementes / Abstract: Flowers, fruits and seed abortion was studied in two Brazilian species: Dahlstedtia pinnata e D. pentaphy/la (Leguminosae, Papilionoideae). Such a study was developed through investigations of: 1. floral development, microsporogenesis, ovule and early seed development following open, self- and cross-pollination, in order to compare the results to other papilionoids and to verify the occurrence of abnormalities in the process; 2. chromosome number, meiotic behavior and meiotic index, in order to verify if pollen grains can limit the fertilization events; 3. fruiting pattern related with position within the inflorescence and ovule degeneration and seed development related with position within ovaries and fruits; 4. geographical distribution, flowering and fruiting, gene flow possibility and their eftects in the reproductive process and delimitation of the species. Buds, fertilized and unfertilized flowers, fruits and seeds in several developmental stages were utilized in histological studies and in tests of the reproductive strategies adopted by plants. D. pinnata and D. pentaphylla shared common developmental pathways in flower formation of other papilionoids. Anomalies and suppression of floral organs were not found. Differences in characters expressed in early stages of ontogeny in infrageneric taxa are scarce; however, species differed in the distribution of secretory cavities on floral organs. Both species have n = 11 and such a chromosome number has not been reported before. The basic number is also 11, because cytological observations included ali species in Dahlstedtia. Plants of D. pentaphy/la are meiotically stable and pollen grains do not limit fertilization. D. pinnata showed lower meiotic index, and a high number of adventitious shoots, which can indicate that vegetative propagation has a great importance in that species. Embryo sac development is of the «polygonum» type and endosperm development follows the «Nuclear» type. No differences were observed between cross- and self-pollination in pollen germination, pollen tube growth, megagametogenesis, double fertilization and embryogenesis. In ali treatments premature thickening and retraction of cell walls were observed in the integuments and placenta, followed by embryo sac collapse (ovule) or endosperm and zygote failures (seed). Species are self-compatible, with no occurrence of pre- or post-zygotic mechanisms as barriers to selfing. In D. pentaphylla no differences were found in flower pollination and in fruit production according to the region in the inflorescence; or in degenerating ovule and developing seed according to their position within ovary and fruit. Seed abortion is mostly related to the limited maternal resource at fruit and embryo levels rather than the high degree of self-pollination, which can be confirmed by the occurrence of abortive characteristics first in maternal tissues and later in the offspring. 80th species present distribution restrict to Atlantic Forest, but are geographically isolated in State of São Paulo. There are reports for D. pinnata plants in State of Rio de Janeiro and São Paulo, and for D. pentaphy//a in State of São Paulo, Paraná and Santa Catarina. No embryos were observed after interspecific crossing. Fertilization in D. pinnata was avoided by a dense secretion occupying ali micropilar cavity, obstructing the pollen tube enter. Species are not sazonally isolated, but geographically, and it seems that there is not gene flow between species / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal

Orientador: Sergio Marangoni / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T11:16:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pando_LuziaAparecida_D.pdf: 10632318 bytes, checksum: 45612dfee93908b50ef1254a32637591 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: As leguminosas contêm quantidades relativamente grandes de proteínas e dentre essas proteínas destacam-se os inibidores de proteinases e lectinas. O objetivo do presente trabalho foi estudar o efeito de inibidores de proteinases sobre o desenvolvimento da Diatraea saccharalis e sobre microrganismos fitopatogênicos, assim como caracterizar físico-quimicamente uma lectina de Crota/aria paulina e estudar suas propriedades biológicas. A lectina das sementes de Crota/aria paulina foi purificada por cromatografia de troca iônica em coluna de DEAE Sepharose Fast Flow e em cromatografia de fase reversa-HPLC. A massa molecular determinada por eletroforese em gel de poliacrilamida em condições redutoras e não redutoras foi calculada em aproximadamente 30 kDa. A hemaglutinação induzida por CrpL sobre eritrócitos humanos e bovinos é inibida por N-acetil-D-galactosamina, D-galactose e pela glicoproteína asialofetuína. A lectina não requer íons divalentes para sua atividade, pois não é inibida por EDT A. A análise do conteúdo de carboidrato para CrpL indicou que esta lectina contém aproximadamente 6,2% de carboidratos, utilizando galactose e manose como padrões, o que comprova que esta lectina é uma glicoproteína. A composição global de aminoácido mostrou que a lectina é rica em resíduos de aminoácidos prolina, glicina, serina e alanina, e não apresenta resíduos de histidina, arginina, metionina e fenilalanina. A seqüência N-terminal apresentou-se bloqueada e os poucos resíduos obtidos não mostraram qualquer homologia com outras lectinas da família leguminosa. Estudos de agregação plaquetária induzida por ADP com plasma humano até a concentração de 100ug/ml de CrpL, demonstraram não haver modulação significativa sobre plaquetas. O estudo envolvendo CrpL sobre bactérias Xanthomonas campestris pv. phaseoli e Xanthomonas campestris pv. passiflorae, demonstrou que esta lectina afetou o crescimento dessas bactérias. As propriedades antimetabólicas dos inibidores de proteinases (IPs) de soja e feijão, foram determinadas "in vivo" após a incorporação em dieta artificial, com avaliação do potencial de crescimento de populações da broca-da-cana Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Pyralidae). Os inibidores foram incorporados em dieta artificial à base de farelo de soja e levedura de canade-açúcar. O efeito dos inibidores sobre o desenvolvimento das lagartas de D. saccharalis foi avaliado aos 16 dias de idade para os diferentes tratamentos (T1, T2 e T3), através da viabilidade larval; % de eficiência de lagartas aptas; peso das lagartas e peso de pupas com 24 horas. Os inibidores de tripsina de soja e de feijão atrasaram o desenvolvimento das lagartas, além de interferir no peso. Foram analisados também, os inibidores de CpTI, CjTI, CsTI, SBTI e PvTI sobre o crescimento micelial de fungos do gênero Fusarium e Colletotrichum. Os experimentos foram conduzidos sobre placas de Petri, usando meio de BDA para Fusarium sp e meio de aveia para o Coletotrichum, com 10 repetições. Como controle foi usada água esterilizada. As placas foram deixadas á 28°C no escuro. Quando o controle alcançou o diâmetro total da placa, o experimento foi interrompido. Os inibidores mostraram diferentes efeitos sobre o crescimento de Fusarium s p "in vitro". O CpTI não mostrou qualquer efeito em relação ao controle, e o PvTI não teve efeito fungicida mas reduziu a concentração de hifas. Inibidor de CjTI foi capaz de ocasionar mudanças na morfologia do fungo. CjTI and PvTI mostrou efeito fungistático sobre o crescimento de Colletotrichum graminicola, sendo que o inibidor PvTI mostrou-se mais eficaz no controle do crescimento micelial. O SBTI não foi efetivo contra quaisquer espécies de fungos estudados. Estudos envolvendo CpTI e PvTI sobre a germinação de esporos de fungos da espécie Ustilago scitaminia, demonstrou que esses inibidores não têm efeitos sobre esses fungos. Inibidores de CpTI foram capazes de inibir o crescimento de duas espécies de bactérias, assim como BvcTI foi capaz de inibir o crescimento de Xanthomonas sp da cana de açúcar. PvTI não mostrou efeito sobre essas bactérias. Os resultados obtidos sugerem que CrpL, assim como os inibidores de proteinases estudados de várias sementes de leguminosas, podem estar envolvidos no mecanismo de defesa contra microrganismos fitopatogênicos. Os resultados com inibidores de serinoproteinases, de feijão e soja, sugerem, também, a possibilidade desses inibidores serem utilizados como ferramentas no estudo de plantas transgênicas de cana-de-açúcar no controle da broca (Diatraea saccharalis) / Abstract: A naturaly occuring lectin activity was detected in the extract of Crota/aria paulina seeds. The crude lectin extract was prepared by grounding the seeds followed by acid extraction with glycine 0.1 M I NaCI 0.15 buffer, pH 2.6. The lectin from C. paulina was purified by ion-exchange and reverse fase chromatography. The lectin purified was assayed with human (A, S, AS, O) and animal (Cow) erythrocytes and it was nonspecific for any human blood group. This lectin agglutinated native and trypsintreated erythrocytes and it requires no Ca++ or Mg++ for hemagglutination activity. Hemagglutinating inhibitory assay was performed with mono and disaccharides solution (100mM) and it was inhibited by N-acetyl-D-galactosamine, D-galactose and byasialofetuin. Studies performed in SDS-PAGE (12,5%) of purified lectin under non-reducing and reducing conditions showed a single band of 30 kDa. The data obtained for the lectin of Crota/aria paulina, when compared to the one obtained from Crota/aria juncea and Crota/aria striata showed that in spite of belonging to the same genus they possess different agglutination properties and specificity for carbohydrate. On ADPinduced platelet aggregation assay with human plasma up to 100ug/ml of the lectin showed no significant modulation on platelets. Studies of CrpL on Xanthomonas campestris pv. phaseoli and Xanthomonas campestris pv. passiflorae, showed that the lectin was able to inhibit the growth and development these bacteria. The evaluation of proteinaceous inhibitors of proteolytic enzymes as candidates to provide resistance to economically important crops against insect pests is currently attracting much research interest. The antimetabolic properties of the SPI after incorporation into artificial diet, in vivo, and its interference on population increase potential of the pest have been evaluated. The incorporation of SPI into an artificial diet of larvae significantly reduced the growth and development of the insect, reflecting an increase of the instar number and duration, and a significantly lower average weight. It was also observed that the diet nutrition value affects the insect susceptibility to the inhibitor. The effect on growth rates observed in this study resulted in significant differences in mean weights of larvae at the conclusion of the experiment (day 16). Here, the mean weight of larvae fed on control diet was significantly greater than the mean weight of larvae fed diet containing proteinase inhibitors CpTI and SSTI. The study of the effects from CpTI, CsTI, CjTI, SBTI and PVTI on the mycelial growth of the genus Fusarium and Colletotrichum were carried out on Petri slabs, using medium of BOA for Fusarium sp and medium of oat for Colletotrichum graminicola, with 10 repetitions. Sterilized water was used as control. Plates were kept at 28°C in the dark. When the control reached the whole diameter of plate, the experiment was interrupted. Inhibitors showed different effects on the growth of Fusarium sp in vitro. CpTI did not show any effects in relation to the control, and PvTI did not have effects but reduced the concentration of hyphas. CpTI had effect and occasioned a change in the colony morphology. CjTi and PvTI showed antifungal effect on the growth of Colletotrichum graminicola, being that PvTI showed itself quite efficient in the growth control of the colony. CpTI were able to inhibit the bacterial development and growth of the two pathogenic bacteria species of Xanthomonas, Xanthomonas campestris pv. Phaseoli and Xanthomonas campestris pv. passiflorae. BvcTI was also able to inhibit the bacterial growth of Xanthomonas sp. On the other hand, PvTI it was not effective against these bacteria. The results presented here suggest that CrpL and proteinase inhibitors may be involved in the defense mechanism against pathogenic microorganisms. These results suggest also a potential value of SPI for protecting sugarcane plants against damage by Diatraea saccharalis / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular