Orientador: Márcia Aparecida Silva Graminha / Banca: Alexandra Ivo Medeiros / Banca: Flávio Henrique da Silva / Banca: Mara Cristina Pinto / Banca: Pio Colepicolo Neto / Resumo: A leishmaniose visceral, forma clínica mais severa das leishmanioses, pode ser fatal se não tratada. Cães infectados são reservatórios potenciais da doença, sendo um diagnóstico específico e cuidadoso requerido para a identificação dos animais infectados, com o objetivo de promover um melhor controle epidemiológico e, consequentemente, controlar a transmissão da doença para o homem. Diversos trabalhos na literatura descrevem vários testes utilizados atualmente para diagnóstico da leishmaniose visceral canina (LVC), porém, apresentam variada especificidade e sensibilidade. Dessa forma, o desenvolvimento de um teste diagnóstico com maior sensibilidade e especificidade se torna importante para correta identificação de cães infectados. O presente trabalho teve como objetivo caracterizar a proteína rLc36, codificada por um gene exclusivo de Leishmania infantum, quanto ao potencial antigênico para desenvolvimento de um teste diagnóstico mais sensível e específico para LVC baseado no ensaio ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay). Diferentes concentrações desta proteína foram testadas por ELISA usando soros de cães infectados com LV e soros de cães não infectados. A concentração de 1,0μg/mL de rLc36 foi capaz de diferenciar os soros positivos dos soros negativos e apresentou sensibilidade de 85% e especificidade de 71%, em um teste com 95% de confiança, mostrando que a proteína rLc36 é antigênica e apresenta potencial para ser aplicada no desenvolvimento de um kit diagnóstico. A proteína rLc36 foi testada em associação com a proteína A2, o qual já foi previamente avaliado como antígeno no diagnóstico sorológico da leishmaniose, e foi possível observar aumento na sensibilidade do teste (77%), mas não na especificidade (79%). Soros de outras parasitoses foram testados frente à proteína rLc36. Foi possível observar reatividade com os soros positivos para babesiose... / Abstract: Visceral leishmaniasis, the most severe clinical form of the leishmaniasis, can be fatal if untreated. Infected dogs are potential reservoirs of the disease, being a specific and careful diagnosis required for identification of the infected animals, with the aim of promoting a better epidemiological control and consequently control the transmission of the disease to humans. Several works in the literature describe various tests used for diagnosis of canine visceral leishmaniasis (CVL), however, they show varied specificity and sensitivity. In this way, the development of a diagnosis test with greater sensitivity and specificity becomes important for the correct identification of infected dogs. Thus, the development of a more sensitive and specific diagnosis test based on recombinant antigens may contribute in the correct identification of dogs truly infected and thus contribute to the more effective control of the transmission of the disease. The present work had as objective to characterize the protein rLc36, encoded by a gene unique to Leishmania infantum, for the antigenic potential for development of a more sensitive and specific test for CVL based on the ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay). Different protein concentrations were tested by ELISA using sera from dogs infected with LV and sera from non-infected dogs. The concentration of 1.0μg/mL of rLc36 protein was able to differentiate positive from negative sera and showed sensitivity of 85% and specificity of 71% on a test with 95% of confidence, showing that the protein rLc36 is antigenic and has potential for be applied in a new diagnosis test. The rLc36 protein was tested in association with the A2 protein, which was previously assessed as antigen in serological diagnosis of leishmaniasis, and it was possible to observe an increase in the sensitivity of the test (77%), but no increase was observed in the specificity (79%). Sera from... / Doutor

Submitted by KEREN BASTOS VALEZI null (keren.valezi@hotmail.com) on 2017-12-18T18:47:58Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de Mestrado Keren Valezi.pdf: 1447594 bytes, checksum: 988c2b1fc1fbd371daf1230457df1fa9 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Pizzani null (luciana@btu.unesp.br) on 2017-12-19T14:03:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 valezi_kb_me-int.pdf: 1447594 bytes, checksum: 988c2b1fc1fbd371daf1230457df1fa9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-19T14:03:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 valezi_kb_me-int.pdf: 1447594 bytes, checksum: 988c2b1fc1fbd371daf1230457df1fa9 (MD5) Previous issue date: 2017-11-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A leishmaniose é uma doença antropozoonótica causada pelo protozoário do gênero Leishmania. Ele apresenta três formas clínicas, conhecidas como leishmaniose visceral, leishmaniose cutânea e leishmaniose mucocutânea. A leishmaniose visceral afeta dois milhões de indivíduos anualmente no mundo. Os fato res genéticos envolvidos na interação hospedeiro - parasita foram associados ao desfecho clínico da doença. Este estudo investigou pela primeira vez a associação de polimorfismos nos genes candidatos IL10, NOD2 e TLR1 com leishmaniose visceral na população b rasileira. Para isso, escolhemos três marcadores anteriormente associados a infecções causadas por parasitas intracelulares na população brasileira. Nós genotipificamos 135 pacientes e 380 controles saudáveis. A presença do alelo G do rs4833095 no gene TLR 1 foi fortemente associada à susceptibilidade a esta doença: análise do alelo G (OR 2.04; IC 1.22 - 3.39; p - value 0.0061); Análise do genótipo GG (OR 3,87; 95 %IC 1,85 - 8,08, p - valor 0,0003); Análise de portadores de G (OR 2,5; 95 %IC 1,33 - 5,00; valor p 0,0047) . Para o gene NOD2, também encontramos uma associação para o genótipo AA (OR 2.07 95 %IC 1.05 - 4.05, p - value 0.0335) do polimorfismo rs8057341. Finalmente, poderíamos confirmar a associação do marcador rs1800871 na região promotora do gene IL10 com susceptib ilidade à leishmaniose visceral, para o genótipo TT (OR 2,34; CI 95 %IC 1,11 - 4,94 p - value 0,0245). Conclusão. Nossos dados demonstram pela primeira vez a associação desses genes candidatos com leishmaniose visceral na população brasileira, colocando esses ma rcadores como candidatos fortes na composição de futuros painéis genéticos para prever o risco de infecções na população brasileira e para estudos de meta - análise em visceral leishmaniose / 193614-1

Orientador: Valéria Marçal Felix de Lima / Banca: Flávia Lombardi Lopes / Banca: Alexandra Ivo Medeiros / Resumo: A Leishmaniose Visceral (LV) no homem é uma doença crônica e frequentemente fatal se não tratada. A doença possui alta taxa de mortalidade e a região de Araçatuba concentra grande número de casos no estado de São Paulo. A Leishmaniose Visceral Canina (LVC) constitui um grave problema de Saúde Pública, pois os animais infectados são potentes transmissores do parasita para humanos pelo vetor flebotomínio. O cão é, portanto, um alvo importante nas medidas de controle. A progressão da infecção canina é acompanhada por falha na imunidade celular com redução de linfócitos circulantes e citocinas que suprimem a função dos macrófagos. A função da célula T na indução da resposta celular é determinante para a eliminação do parasita no interior dos macrófagos. Embora a supressão imunológica já esteja caracterizada, os fatores determinantes são pouco conhecidos. Recentes estudos mostraram que a regulação da função efetora dos macrófagos e células T parece depender de microRNAs (miRNAs). Existem muitas evidências da função dos miRNAs na regulação da expressão de proteínas que são fundamentais para o desenvolvimento, função e diferenciação de vários tipos celulares do sistema imunológico. Uma desregulação da atividade dos miRNAs está envolvida em diversas doenças, incluindo a LV. Na LVC, devido a supressão imunológica celular ser determinante para a progressão da doença, o conhecimento de miRNAs associados a regulação imunológica pode ser importante para a mudança do padrão de resposta. / Abstract: Visceral Leishmaniasis (VL) in humans is a chronic and often fatal disease if left untreated. The disease has high mortality rate, and the region of Araçatuba concentrates a large number of cases in São Paulo state. Canine VL (CVL) is a serious public health problem, because infected animals are potent transmitters of the parasite to humans by the vector phlebotomine. Therefore, dogs are important targets in the control measures. The progression of canine infection is accompanied by a failure of cellular immunity with reducing of circulating lymphocytes and cytokines that suppress the macrophage function. The role of T cells in the induction of cellular response is crucial to the elimination of the parasite in macrophages. Although immunosuppression is already characterized, the determining factors are not well known. In the last decade studies have shown that regulation of effector function of macrophages and T cells appears to depend on microRNAs (miRNAs). There are many evidences of function of miRNA in regulating of the expression of proteins that are primordial for the development, function and differentiation of various cell types of the immune system. A deregulation of miRNA expression is involved in a variety of disorders including VL. In CVL, due to cell immune suppression be determinant of disease progression, knowledge of miRNAs associated with immune regulation may be important for change the response pattern. / Mestre

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2016-07-14T15:03:39Z No. of bitstreams: 1 Tese_ICS_ Stella Maria Barrouin Melo.pdf: 6932001 bytes, checksum: 1c1b31148e3f9f81603b9c379d57ccdc (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2016-08-31T12:14:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_ICS_ Stella Maria Barrouin Melo.pdf: 6932001 bytes, checksum: 1c1b31148e3f9f81603b9c379d57ccdc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-31T12:14:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ICS_ Stella Maria Barrouin Melo.pdf: 6932001 bytes, checksum: 1c1b31148e3f9f81603b9c379d57ccdc (MD5) / Introdução: Este estudo centrou-se no desenvolvimento de um método para análise do baço do cão como órgão-alvo de avaliação diagnóstica, objetivando caracterizar componentes celulares da resposta imune in situ na infecção por Leishmania chagasi, dado o papel desse animal como reservatório em áreas endêmicas da doença. Metodologia: O estudo foi desenvolvido em uma seqüência de experimentos, envolvendo cães sadios e portadores de leishmaniose visceral canina (LVC) para: (i) determinar a sensibilidade de testes parasitológicos realizados com amostras de aspirados esplênicos e do linfonodo poplíteo no diagnóstico confirmatório da infecção em 64 cães soropositivos para anticorpos anti-Leishmania; (ii) avaliar a segurança da biópsia aspirativa com agulha fina em cães, como procedimento para obtenção de amostras para análise em laboratório, sendo a técnica utilizada em 209 animais que apresentavam condições clínicas variando de ausência de sinais a quadros terminais de LVC; e (iii) padronizar técnicas para a análise de amostras de baço, por meio de coloração citoquímica com corante de Wright e hematoxilina-eosina, e marcação imunocitoquímica com anticorpos monoclonais, e aplicá-las na avaliação da composição celular esplênica de 14 cães saudáveis e 15 portadores de LVC. Resultados: Na primeira abordagem, foi obtida uma taxa de detecção de parasitos de 74% em aspirados esplênicos, em comparação com 18% em aspirados de linfonodo, indicando o uso de aspirados de baço como amostras de escolha para o diagnóstico parasitológico da doença. Em seguida, a avaliação do risco potencial da punção aspirativa de baço, objetivando a obtenção de amostras para análise das células do sistema imune do cão nesse órgão, mostrou que o procedimento não causou efeitos adversos e pôde ser considerado eficaz e seguro. Na etapa subseqüente, o método desenvolvido permitiu a identificação de diferenças significativas entre as populações de leucócitos esplênicos e do sangue periférico nos diferentes grupos, incluindo alterações associadas à doença. Todos os resultados são discutidos. Conclusão: A avaliação de aspirados de baço com o método proposto constitui uma contribuição potencial ao estudo do sistema imune do cão, com a perspectiva de ser aplicado como uma ferramenta analítica no monitoramento da resposta imune esplênica in situ em pesquisas com imunoterápicos e preparações candidatas a vacina contra a LVC

Submitted by Maria Creuza Silva (mariakreuza@yahoo.com.br) on 2017-03-13T14:30:25Z No. of bitstreams: 1 DISS MARIA DEUZINA LEMOS. MP 2016.pdf: 392236 bytes, checksum: bd64c0393869628da0d0e1418628710d (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Creuza Silva (mariakreuza@yahoo.com.br) on 2017-03-13T14:54:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISS MARIA DEUZINA LEMOS. MP 2016.pdf: 392236 bytes, checksum: bd64c0393869628da0d0e1418628710d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-13T14:54:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISS MARIA DEUZINA LEMOS. MP 2016.pdf: 392236 bytes, checksum: bd64c0393869628da0d0e1418628710d (MD5) / No Brasil, a incidência de leishmaniose visceral, conhecida como calazar, é alta, com uma média de dois casos por 100.000 habitantes por ano. A pesquisa analisa os fatores relacionados à necessidade de internação por leishmaniose visceral em crianças de zero a cinco anos internadas no Hospital de Doenças Tropicais de Araguaína no período de 2011 a 2013. Descrevendo as características epidemiológicas da leishmaniose visceral no município de Araguaína – TO. E os aspectos clínicos, laboratorial, opções terapêuticas durante a internação e o processo evolutivo da leishmaniose visceral. É um estudo transversal descritivo que utilizou o sistema de informação (SINAN) e os prontuários de internação das crianças hospitalizadas no período em estudo. Foram analisados 407 prontuários 207/50,8%) do sexo masculino (200/49%) do sexo feminino; Raça parda; com uma distribuição de crianças < de 1 ano a 1 anos como as mais acometidas pela LV. A média do tempo de hospitalização foi de 13 dias; 70% dos casos tiveram outras doenças associadas, Pneumonia, broncopneumonia, septicemia não específica. A medicação mais utilizada como 1ª escolha foi antimonial pentavalente, 2ª Anfotericina B e os casos mais graves Anfotericina B lipossomal. O início dos sintomas foi em médias de 15 dias. Entre as formas clínicas das leishmanioses, a leishmaniose visceral (LV) ou calazar constitui-se na mais grave, pois, quando não tratada adequadamente, determina elevados índices de letalidade.

Submitted by PMBqBM null (pmbqbm@ufba.br) on 2017-05-09T15:56:30Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Adenilma Duranes Sousa_PMBqBM-UFBA.pdf: 2663510 bytes, checksum: fba19cb0e919e73195f00b46394234aa (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-07-28T14:01:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Adenilma Duranes Sousa_PMBqBM-UFBA.pdf: 2663510 bytes, checksum: fba19cb0e919e73195f00b46394234aa (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-28T14:01:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Adenilma Duranes Sousa_PMBqBM-UFBA.pdf: 2663510 bytes, checksum: fba19cb0e919e73195f00b46394234aa (MD5) / As leishmanioses são infecções causadas pelo tripanosomatídeo Leishmania sp. Estima-se que 350 milhões de pessoas estão sob o risco de contrair leishmaniose, em todo mundo. A Leishmaniose visceral (LV) é a forma clínica mais grave da doença. Os principais sintomas apresentados são febre prolongada, hepatomegalia, esplenomegalia, hipergamaglobulinemia, pancitopenia, perda de peso, e em casos não tratados, óbito. Algumas alterações bioquímicas e metabólicas são observadas na VL, principalmente aumento das concentrações plasmáticas de triglicerídeos, colesterol e LDL. O tecido adiposo e as adipocinas, podem participar da regulação da resposta imune em processos inflamatórios e em diversas infecções. O objetivo geral desse trabalho foi investigar a relação do tecido adiposo e das adipocinas com parâmetros bioquímicos e imunológicos observados na leishmaniose visceral experimental. Foram utilizados 41 hamsters dourados (Mesocricetus auratus) machos adultos, com peso médio de 132 gramas. Os animais foram infectados com 1X105 promastigota de L. infantum na derme da orelha. A eutanásia ocorreu 4 e 8 meses após a infecção. O Tecido adiposo, o baço e o fígado foram coletados, pesados e acondicionados em solução de conservação. A carga parasitária do baço e fígado, foi avaliada por meio da técnica de diluição limitante. A expressão das citocinas no baço foi avaliada por meio da realização do qRT-PRC. Os parâmetros bioquímicos e as adipocinas foram dosadas no soro. Foi realizada a análise histopatológica e a morfometria do tecido adiposo corado por HE. As análises estatísticas foram realizadas usando o Software GraphPad Prism 5.0. Os animais infectados apresentaram perda de peso e esplenomegalia no oitavo mês de infecção. Os animais apresentaram carga parasitária moderada, tanto no baço, quanto no fígado. Não houve diferença na expressão das citocinas, nem na concentração sérica dos parâmetros bioquímicos e das adipocinas. A carga parasitária do baço e do fígado apresenta correlação negativa com os níveis de albumina. A carga parasitária do baço apresentou correlação negativa com os níveis de colesterol total. A Análise de correlação das adipocinas, mostrou que a adiponectina está correlacionada negativamente com as concentrações de glicose e albumina dos animais controles. E a leptina apresentou correlação negativa com o peso relativo do baço no grupo dos animais controle e correlação positiva com as concentrações séricas de triglicérides e VLDL, em ambos os grupos. Adicionalmente, a leptina apresentou correlação positiva com a carga parasitária do baço e com o peso relativo do tecido adiposo epididimal e retroperitoneal. Já as concentrações de HDL estão correlacionadas negativamente com os níveis de leptina, em hamster infectados com L. infantum. As análises de correlação mostraram que leptina tem relação com o estabelecimento da LV em hamsters.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2017-05-26T18:31:12Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Adenilma Duranes Sousa.pdf: 2663510 bytes, checksum: fba19cb0e919e73195f00b46394234aa (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-26T18:31:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Adenilma Duranes Sousa.pdf: 2663510 bytes, checksum: fba19cb0e919e73195f00b46394234aa (MD5) / As leishmanioses são infecções causadas pelo tripanosomatídeo Leishmania sp. Estima-se que 350 milhões de pessoas estão sob o risco de contrair leishmaniose, em todo mundo. A Leishmaniose visceral (LV) é a forma clínica mais grave da doença. Os principais sintomas apresentados são febre prolongada, hepatomegalia, esplenomegalia, hipergamaglobulinemia, pancitopenia, perda de peso, e em casos não tratados, óbito. Algumas alterações bioquímicas e metabólicas são observadas na VL, principalmente aumento das concentrações plasmáticas de triglicerídeos, colesterol e LDL. O tecido adiposo e as adipocinas, podem participar da regulação da resposta imune em processos inflamatórios e em diversas infecções. O objetivo geral desse trabalho foi investigar a relação do tecido adiposo e das adipocinas com parâmetros bioquímicos e imunológicos observados na leishmaniose visceral experimental. Foram utilizados 41 hamsters dourados (Mesocricetus auratus) machos adultos, com peso médio de 132 gramas. Os animais foram infectados com 1X105 promastigota de L. infantum na derme da orelha. A eutanásia ocorreu 4 e 8 meses após a infecção. O Tecido adiposo, o baço e o fígado foram coletados, pesados e acondicionados em solução de conservação. A carga parasitária do baço e fígado, foi avaliada por meio da técnica de diluição limitante. A expressão das citocinas no baço foi avaliada por meio da realização do qRT-PRC. Os parâmetros bioquímicos e as adipocinas foram dosadas no soro. Foi realizada a análise histopatológica e a morfometria do tecido adiposo corado por HE. As análises estatísticas foram realizadas usando o Software GraphPad Prism 5.0. Os animais infectados apresentaram perda de peso e esplenomegalia no oitavo mês de infecção. Os animais apresentaram carga parasitária moderada, tanto no baço, quanto no fígado. Não houve diferença na expressão das citocinas, nem na concentração sérica dos parâmetros bioquímicos e das adipocinas. A carga parasitária do baço e do fígado apresenta correlação negativa com os níveis de albumina. A carga parasitária do baço apresentou correlação negativa com os níveis de colesterol total. A Análise de correlação das adipocinas, mostrou que a adiponectina está correlacionada negativamente com as concentrações de glicose e albumina dos animais controles. E a leptina apresentou correlação negativa com o peso relativo do baço no grupo dos animais controle e correlação positiva com as concentrações séricas de triglicérides e VLDL, em ambos os grupos. Adicionalmente, a leptina apresentou correlação positiva com a carga parasitária do baço e com o peso relativo do tecido adiposo epididimal e retroperitoneal. Já as concentrações de HDL estão correlacionadas negativamente com os níveis de leptina, em hamster infectados com L. infantum. As análises de correlação mostraram que leptina tem relação com o estabelecimento da LV em hamsters.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2017-05-17T18:39:48Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ISC_ Maria Deuzina Alves Lemos.pdf: 397753 bytes, checksum: 8096fddfd818820a9ee0a42d85d6c7d2 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-07-03T14:46:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_ISC_ Maria Deuzina Alves Lemos.pdf: 397753 bytes, checksum: 8096fddfd818820a9ee0a42d85d6c7d2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-03T14:46:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ISC_ Maria Deuzina Alves Lemos.pdf: 397753 bytes, checksum: 8096fddfd818820a9ee0a42d85d6c7d2 (MD5) / No Brasil, a incidência de leishmaniose visceral, conhecida como calazar, é alta, com uma média de dois casos por 100.000 habitantes por ano. A pesquisa analisa os fatores relacionados à necessidade de internação por leishmaniose visceral em crianças de zero a cinco anos internadas no Hospital de Doenças Tropicais de Araguaína no período de 2011 a 2013. Descrevendo as características epidemiológicas da leishmaniose visceral no município de Araguaína – TO. E os aspectos clínicos, laboratorial, opções terapêuticas durante a internação e o processo evolutivo da leishmaniose visceral. É um estudo transversal descritivo que utilizou o sistema de informação (SINAN) e os prontuários de internação das crianças hospitalizadas no período em estudo. Foram analisados 407 prontuários 207/ 50,8%) do sexo masculino (200/49%) do sexo feminino; Raça parda; com uma distribuição de crianças < de 1 ano a 1 anos como as mais acometidas pela LV. A média do tempo de hospitalização foi de 13 dias; 70% dos casos tiveram outras doenças associadas, Pneumonia, broncopneumonia, septicemia não específica. A medicação mais utilizada como 1ª escolha foi antimonial pentavalente, 2ª Anfotericina B e os casos mais graves Anfotericina B lipossomal. O início dos sintomas foi em médias de 15 dias. Entre as formas clínicas das leishmanioses, a leishmaniose visceral (LV) ou calazar constitui-se na mais grave, pois, quando não tratada adequadamente, determina elevados índices de letalidade.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-06-10T19:36:18Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_Gustavo Miranda.pdf: 1853807 bytes, checksum: f9a1c2b796442124414bba8e163ac719 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-10T19:36:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_Gustavo Miranda.pdf: 1853807 bytes, checksum: f9a1c2b796442124414bba8e163ac719 (MD5) / Doenças como a leishmaniose é uma importante causa de morbidade e mortalidade no Brasil e seus diagnósticos devem ser melhoradas. A produção de anticorpos monoclonbais anti-L. infantum e acoplamento ao sensor piezoelétrico, para formar um dispositivo bioeletrônicos capaz de detectar rapidamente antígenos de Leishmania sp, tanto qualitativa como quantitativamente, é uma alternativa promissora para o diagnóstico da leishmaniose, devido à sua alta especificidade e sensibilidade, portabilidade e baixo custo, em comparação aos métodos convencionais. Objetivo: Desenvolver um imunossensor capaz de detectar antígenos de L. infantum em tecidos de animais infectados. Material e Método: Quatro hibridomas produtores de anticorpos monoclonais anti-amastigota de L. infantum teve sua especificidade confirmada por ELISA. Esses anticorpos foram imobilizados sobre um cristal piesoelétrico de quartzo através de uma fina camada de 2-aminoetanotiol (cisteamina) e glutaraldeído, e submetidos a injeções de extratos de baço de hamster infectados e não-infectados com L. infantum. Resultados: Quatro anticorpos (5A9H8, 2B7B8, 4B6F7 e 5AB3A10B4), todos da classe IgG, foram acoplados à superfície do transdutor e foram capazes de reagir contra extrato de baço de hamster infectado com L. infantum. A metodologia desenvolvida foi capaz de detectar 3,5x10 4 amastigotas por grama de tecido infectado com os anticorpos 5A9H8, 4B6F7 e 5AB3A10B4, e 1,75x10 4 com o anticorpo 2B7B8. Conclusões: Os resultados demonstraram que este teste pode ser útil para quantificar amastigotas de L. infantum em órgãos de animais experimentais para estudos sobre a patogênese da leishmaniose visceral americana e é uma ferramenta promissora para desenvolver um diagnóstico de leismanioses humana e canina. / Salvador

Made available in DSpace on 2014-05-29T12:01:39Z (GMT). No. of bitstreams: 4 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 0000038.pdf: 2738587 bytes, checksum: 7dd6564c63323c9353ec15e4c463c4a5 (MD5) 0000038.pdf.txt: 326814 bytes, checksum: 1acd256ee177408fef6eab95a8608842 (MD5) 0000038.pdf.jpg: 1316 bytes, checksum: 9be572866ac5936e7312385f6a8bde28 (MD5) Previous issue date: 2013 / A Leishmaniose Visceral Americana (LVA) no Brasil é um importante problema de Saúde Pública, cuja expansão geográfica tem possibilitado o seu eselecimento em áreas urbanas das médias e grandes cidades. Desta forma, ressalta-se a importância da produção de conhecimentos sobre os fatores determinantes associados ao novo perfil epidemiológico. Este estudo procurou identificar fatores da expansão e urbanização dovetor, Lutzomyia (L.) longipalpis, numa abordagem ampla no contexto epidemiológico da LVA, considerando múltiplas interações: ambiente, parasita e reservatórios. Os objetivos foram: discutir os estudos sobre hábitos alimentares de insetos vetores de patógenos humanos, com ênfase na subfamília Phlebotominae; analisar os fatores associados ao processo de expansão e urbanização da LVA; discutir a expansão da LVA no Estado do Tocantins correlacionando incremento de desflorestamento, estratificação da doença, classes do uso do solo e presença do vetor L. (L.) longipalpis; diagnosticar a infecção natural por Leishmania (L.) infantumchagasi em associação com a fonte alimentar, através de métodos moleculares, em exemplares de L. (L.) longipalpis procedentes dos municípios de Araguaína (TO), Fortaleza (CE), Sobral (CE), e Rio de Janeiro (RJ). No atual cenário das mudanças ambientais, é fundamental a condução de estudos voltados para as doenças relacionadas ao ambiente, como a LVA. Nesta perspectiva, pesquisas sobre o vetor L. (L.) longipalpis devem produzir conhecimentos que permitam entender a epidemiologia da doença, além de subsidiar o planejamento de estratégias de controle. A análise ecoepidemiológica da LVA em Tocantins revelou que, dos 139 municípios, 120 apresentaram registros de casos humanos. / As áreas de incremento do desmatamento se mantiveram frequentes, principalmente na região norte,onde se observa elevado número de casos humanos. Em relação ao perfil de estratificação, 40% dos municípios apresentaram expansão da LVA. Lutzomyia (L.) longipalpis se mostrou presente em todas as classes do uso do solo, com correlação negativa apenas para pastagem cultivada. Em relação ao registro anual de casos humanos de LVA, dentre as áreas que apresentaram correlação positiva com maior frequência destacam-se áreas de influência urbana e ambiente urbanizado. A avaliaçãodos hábitos alimentares em flebotomíneos é capaz de responder questões importantes sobre o comportamento, ecologia e adaptação dos vetores. Dentre as técnicas já descritas, as mais utilizadas ainda são as técnicas imunológicas, embora as técnicas moleculares vem sendo empregadas com maior frequência, pois permitem de forma mais sensível a identificação da fonte alimentar e da infecção natural. Tais informações são importantes, não apenas para um melhor conhecimento acerca dos vetores, mas também sobre potenciais reservatórios de Leishmania. Em relação à preferência alimentar, L. (L.) longipalpis apresentou índice de positividade de 29,3% relacionado com fonte alimentar humana, seguido de cão e ave, não sendo encontradas fêmeas alimentadas em gambá. O índice geral de infecção natural por L. (L.) infantum chagasi foi de 4,51%, sendo 4,9% em Araguaína e 9,75% em Sobral. Das fêmeas infectadas de Araguaína, uma estava alimentada com sangue de cão e outra em sangue humano. Em Sobral, das quatro fêmeas infectadas, três estavam alimentadas em sangue humano.